12
( جمدئي الملما اع استزر اقية لجمة العر الم41 ( العدد) 4 ) 7147 : 4 - 47 4 بات بربينكثار ن الماء اL. Bacopa monnieri الجسم الحي خارج حيم حم ادي اق العرر عبد الرز ة جبا مهدي صالحنسامي محسن *خيون عم مجيد الزوار جهاد مكيج العربي، غرب الخميائي في شمالحي قسم التطور البحاروم اركز عم م- البصرة جامعة- اق بصرة، العرنخيلث البحا *مركز ا- البصرة جامعة- اق بصرة، العرEmail: [email protected] صة الخ اسة أجريت الدر ال حالية بيدؼ الجسـ الحيلماء خارجت بربيف اكثار نبا ا ا ست عمؿ في ىذا البحث2,4-D وNAA اث ستحثلكالس, الكالس عندث استحثا أعمى نسبة في ا معطيا بتركيز ميما معا استخدا1.5 مغـ.لتر م- 1 يما مسج لكمي93 % نو متماسؾ ممتازة لكو وبنوعية عمى عقد كثيرة ومحتويتو المع تم امت 3 مغـ.لتر م- 1 2,4-D و3 مغـ.لتر م- 1 NAA سجمة م85 و% 53 عمى التوالي% , لكالس ف حيف لـ يستحث ا فيلخالية مفرنة المقا ي اليرمونات, السايتوك تأثير ا كما بحثفرع الخضرية تكويف انات في اينيمةلمعامفوقت ا , اذ ت0.5) مغـ.لتر م- 1 مفBA البنزؿ أدنيف و0.5 مغـ.لتر م- 1 Kin لكاينتيف مف ا) عمى معنويات في عدد المعامقي ا با سجمة فرع الخضرية م40 لمعام ا تتبعيا خضريا فرعا مة0.5 مغـ.لتر م- 1 BA بنزؿ أدنيف فمة المعام( 0.5 مغـ.لتر م- 1 BA بنزؿ أدنيف و0.5 مغـ.لتر م- 1 كاينتيفKin و0.5 NAA ثاليف أستيؾ أسد نف) مةلمعام ا ا وأخير0.5 مغـ.لتر م- 1 Kin كاينتيف مكونة14.7 و10.3 و10.0 لمقارنة سجمت ا بينما عمى التوالي2.5 , خضريا فرعا حيف في سجمةفرع الخضرية م في طوؿ ا لمقارنة معنويافوقت ا ت15.33 مةلمعام ا سـ تمتيا0.5 مغـ.لتر م- 1 مف البنزؿ أد نيفBA و0.5 مغـ.لتر م- 1 لكاينتيف مف اKin سجمة م13.00 سـمة فالمعام0.5 مغـ.لتر م- 1 بنزؿ أدنيفBA 8.33 سـمةلمعام ثـ ا0.5 مغـ.لتر م- 1 بن ػ زؿ أدنيفBA و0.5 مغػـ.لتػ ر م- 1 كاينتيفKin و0.5 مغـ.لتر م- 1 ثاليف نف أستيؾ أسدNAA 6.67 سـمةلمعام ا سجمت ا وأخير0.5 مغـ.لتر م- 1 كاينتيفKin 4.67 سـ كمعدؿ لطوؿ الفرعبر ثـ نقمت داخؿ المختمتفرع وأقم جذرت ا كما الى المزرعةلمائية ا. مفتاحية:مات كمكثار دقيؽ, منظماتء, الما بربيف ا ال نمولنباتية ا. المقدمةلماءت بربيف ا يعود نباL. Bacopa monnieri لعائمة الى اScorphulariaceae ويطمؽ عو في مي اؽ بربيف الجداوؿ العرنياروه عمى حواؼ الجداوؿ وا لنم, ف داوود أولزوفا أو أشنات اند فيطمؽ عميو نبا الي أما فيBrahmi ت في اللنبا وينمو ىذا ا الرطبة أو الدافئةلحارةطؽ ا منا, اذ تواجدليا وأمريكا ا قارة آسيا وأستركثر أنتشاره في ي

يحا مسج ا جراخ Bacopa monnieri L. ءاما نيبرب تابن راثا · 3 يح ا مسج ا جراخ Bacopa monnieri L. ءام ا نيبرب تابن راثا ةرارػػػح

  • Upload
    others

  • View
    5

  • Download
    0

Embed Size (px)

Citation preview

Page 1: يحا مسج ا جراخ Bacopa monnieri L. ءاما نيبرب تابن راثا · 3 يح ا مسج ا جراخ Bacopa monnieri L. ءام ا نيبرب تابن راثا ةرارػػػح

4 47-4: 7147–(4( العدد )41المجمة العراقية لألستزراع المائي المجمد )

خارج الجسم الحي L. Bacopa monnieri الماء اكثار نبات بربين ح

جهاد مكي مجيد الزوار *خيون عمي محسن *انسام مهدي صالح ة جبار عبد الرزاق العرادي حميم

بصرة، العراق-جامعة البصرة -مركز عموم البحارقسم التطور االحيائي في شمال غرب الخميج العربي،

بصرة، العراق-جامعة البصرة-*مركز ابحاث النخيلEmail: [email protected]

الخالصة

في عمؿستا اكثار نبات بربيف الماء خارج الجسـ الحي بيدؼ حاليةال أجريت الدراسة معطيا أعمى نسبة في استحثاث الكالس عند الكالس, ستحثاثال NAAو D-2,4ىذا البحث

وبنوعية ممتازة لكونو متماسؾ %93لكمييما مسجال 1-ممغـ.لتر 1.5 استخداميما معا بتركيز 1NAA-ممغـ.لتر 3 و D-2,4 1-ممغـ.لتر 3 التامتمتو المع ومحتوي عمى عقد كثيرة

ي المقارنة الخالية مف في حيف لـ يستحث الكالس ف ,% عمى التوالي 53 % و 85 مسجمة , اذ تفوقت المعاممة اينينات في تكويف األفرع الخضريةكما بحث تأثير السايتوكاليرمونات,

معنويا عمى (مف الكاينتيف Kin 1-ممغـ.لتر 0.5و البنزؿ أدنيف BAمف 1-ممغـ.لتر (0.5 0.5 مة فرعا خضريا تتبعيا المعام 40فرع الخضرية مسجمة باقي المعامالت في عدد األ

1-ممغـ.لتر 0.5و بنزؿ أدنيف 1BA-ممغـ.لتر 0.5)المعاممة ف بنزؿ أدنيف BA 1-ممغـ.لتر Kin 1-ممغـ.لتر 0.5 وأخيرا المعاممة (نفثاليف أستيؾ أسد NAA 0.5 وKin كاينتيف

فرعا خضريا, 2.5عمى التوالي بينما سجمت المقارنة 10.0و 10.3و 14.7كاينتيف مكونة سـ تمتيا المعاممة 15.33تفوقت المقارنة معنويا في طوؿ األفرع الخضرية مسجمة في حيف

مسجمة Kinمف الكاينتيف 1-ممغـ.لتر 0.5 و BA نيفمف البنزؿ أد1-ممغـ.لتر 0.5 0.5ثـ المعاممة سـ BA 8.33بنزؿ أدنيف 1-ممغـ.لتر 0.5 فالمعاممةسـ 13.00نفثاليف 1-ممغـ.لتر 0.5و Kinكاينتيف 1-ممغػػـ.لتػػػر 0.5و BAزؿ أدنيفػػػبن 1-ممغـ.لتر

Kin 4.67 كاينتيف 1-ممغـ.لتر 0.5 وأخيرا سجمت المعاممة سـ NAA 6.67 أستيؾ أسدالى المزرعة كما جذرت األفرع وأقممت داخؿ المختبر ثـ نقمت الفرع كمعدؿ لطوؿ سـ

. المائية .النباتية نموالبربيف الماء, اكثار دقيؽ, منظمات كممات مفتاحية:

المقدمةميو في ويطمؽ ع Scorphulariaceae الى العائمة L. Bacopa monnieriيعود نبات بربيف الماء

أما في اليند فيطمؽ عميو نبات الزوفا أو أشناف داوود أو ,لنموه عمى حواؼ الجداوؿ واألنيار العراؽ بربيف الجداوؿBrahmi يكثر أنتشاره في قارة آسيا وأستراليا وأمريكا اذ تواجد , مناطؽ الحارة الرطبة أو الدافئةوينمو ىذا النبات في ال

Page 2: يحا مسج ا جراخ Bacopa monnieri L. ءاما نيبرب تابن راثا · 3 يح ا مسج ا جراخ Bacopa monnieri L. ءام ا نيبرب تابن راثا ةرارػػػح

حميمة جبار عبد الرزاق العرادي 7

ونظرا لمظروؼ البيئية القاسية التي يمر بيا العراؽ ,.Bharti et al). (2013في المناطؽ الرطبة وفي األىوار ة مف األحياء والنباتات المائي انقراضياوأىميا تجفيؼ األىوار الذي أنعكس سمبا عمى معظـ األحياء المائية مما أدى الى

ارتفاع خفاض مستوى المياه في شط العرب و ومف جية أخرى ان راألىوااألكثر أىمية والتي تعد أساسا لمحياة في بيئة اذ كاف يغطي سواحؿ شط العرب والكثير ألماءنسبة المموحة سبب ىالؾ العديد مف النباتات المائية ومف ضمنيا بربيف

اية سواحؿ األنيار مف االنجراؼ اذ ينمو عمى حافة السواحؿ ويكوف طبقة واقية ولو أىمية كبيرة في حم أألنيارمف ويحمي السواحؿ مف االنجراؼ اثناء عممية المد والجزر كبيرهلمتربة المتالكو جذورا متشابكة و يمتد في التربة لمسافات

(Khaliel et al.,2005) ,رات وبعض االسماؾ تمجأ اليو فضال عف أىميتو في التنوع االحيائي الف معظـ الحش, فيو مف النباتات الحاوية عمى العديد مف المواد الفعالة التي الى أىميتو الطبية إضافة, ويرقاتيا بيضوىابغية وضع

كما ي معالجة مرض فقداف الذاكرة الميـ ف B&Bacoside Aو الصابونييف, و كعقاقير خاـ أىميا القمويدات دـتستخ( ويزيد مف مقاومة الجسـ لألمراض ويدعـ مستويات السكر (Naik et al., 2013ونمو العقؿ اإلدراؾيحسف مف و

, باإلضافة الى أىميتيا مف الناحية الجمالية.(Kapoor, 1990)في الدـ اف ارتفاع نسبة المموحة في مياه األىوار وكذلؾ ترب السواحؿ النيرية أدى الى تثبيط نموىا واقتصار تواجدىا عمى

يجادوكمحاولة لمكافحة ىذا التناقص أجريت ىذه الدراسة بيدؼ اكثار نبات بربيف الماء نسيجيا, ,قميمومساحات وا تحت الظروؼ المختبرية نبات بربيف الماءقممة او ألغذائيةطريقة سريعة لمتضاعؼ بأجراء بعض التحويرات لألوساط

.رومف ثـ اعادة زراعتيا عمى ضفاؼ االنيا

وطرق العمل المواد

مصدر الجزء النباتي , جمبت الى المختبر عرب المتواجدة في قضاء شط العربنير شط ال ضفاؼنبات بربيف الماء مف جمعت نماذج

وضعت في محموؿ مضاد الفصؿوبعد , ممـ 2-4 التي تراوح طوليا بيف Shoot tipوفصمت البراعـ القمية 100و 150مف حامض الستريؾ وحامض االسكوربؾ بتركيز المتكوف ( Antioxidant solutionلألكسدة )أجريت عممية التعقيـ ذلؾ بعد(, Tisserat & Zaid,1983دقيقة ) 30لكؿ منيما عمى التوالي ولمدة 1-ممغـ.لتر

/% )حجـ20( باستعماؿ القاصر التجاري Laminar air flow cabinetداخؿ منضدة انسياب اليواء الطبقي )مف 3سـ111( لكؿ Tween 20قطرة واحدة مف المادة الناشرة )% مع اضافة 6-5ونسبة المادة الفعالة فيو حجـ(

إلزالة آثار , بالماء المقطر المعقـ عدة مرات ياغسمجرى دقيقة مع الرج والتحريؾ ومف ثـ 15محموؿ التعقيـ ولمدة اعة في الوسط الغذائي.المادة المعقمة وبذلؾ أصبحت األجزاء النباتية جاىزة لمزر

الـوســطـ الغــذائي

( ويطمؽ عميو اختصارا Murashige and Skoog, 1962استخدـ وسط غذائي مكوف مف مجموعة أمالح ) مع اضافة 1-ممغـ.لتر 4330 بمغتZist Arman Sabz (ZAS )اذ تـ الحصوؿ عمييا مف شركة MS أمالح 111أرثروفوسفات الصوديـو الحامضية و 121 سكروز و 01111)وىي , 1-ممغـ.لتر اخرى حسب المقياسمواد

وبعد , (أكار 0111ايد و لكؿ مف الكاليسيف, البيرودوكسيف, الثياميف, البايوتيف والنيكوتيف ام 1مايواينوسيتوؿ و

Page 3: يحا مسج ا جراخ Bacopa monnieri L. ءاما نيبرب تابن راثا · 3 يح ا مسج ا جراخ Bacopa monnieri L. ءام ا نيبرب تابن راثا ةرارػػػح

3 خارج الجسم الحي L. Bacopa monnieri اكثار نبات بربين الماء

رارة ػػػة حػػػػػي عمى درجػػػػػط الغذائػػػػػالوسجرى تسخيف يؼ األكار و ػػػػاري, أضػػػػػػعي5.8 يني عمى ػػػػػػػػػػػػػػػاالس الييدروج تـ ضبطألنبوبة الواحدة ومف ثـ مؿ ل 00سـ بواقع 0.0×01ا وزع الوسط الغذائي في أنابيب اختبار قياس ػػػػػعدىػػػػػػػػوب ,oـ 41

عمى (, في جياز التعقيـ البخاري )المعقاـ ثـ اجريت عممية التعقيـوورؽ األلمنيـو المعقـ فوىة االنابيب بالقطف اغمقتجيدا ثـ تركت لتبرد جرى رج االنابيب دقيقة وبعد انتياء التعقيـ 01بار لمدة 1.5وضغط بخار oـ 101درجة حرارة

قبؿ التعقيـ الى الوسط الغذائي أضيفت وقد , اصبح جاىزا لزراعتو باألنسجة النباتيةو ط الغذائي الى اف تصمب الوس :ميكما يو األوكسينات والسايتوكاينينات حسب المعامالت المدروسة في التجربة كؿ مف منظمات النمو النباتية

استحثاث الكالس -4

α-Nephthaline acetic acid (NAA) و 2,4-dichloro phenoxy acetic acid (D-2,4)ؿ اأستعم وحسب التراكيز التالية:

D-2,4 1-ممغـ.لتر 1- 3

NAA 1-ممغـ.لتر3 2 -

NAA 1-ممغـ.لتر 1.5وD-2,4 1-ممغـ.لتر3 - 1.5

المقارنة )خالية مف منظمات النمو( 4-

مكررات لكؿ معاممة ودرست الصفات اآلتية كمؤشر لمنمو: 11استعممت النسبة المئوية لمكالس المتكوف -أ

وتـ حسابيا حسب المعادلة التالية: عدد أنابيب االختبار التي أستحث فييا الكالس 111×ػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػ ػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػ% لمكالس المتكوف = ػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػػ

العدد الكمي لألنابيب المزروعة

لوف الكالس -ب صفات الكالس -ج

Somatic Embryosالجسمية ج االجنةاانت -7

تكوف مف البراعـ الطرفية المزروعة في اوساط غذائية مزودة بمنظمات المبعمر اربعة اشير الذي ليالكالس االو نقؿ عمميات , إفبيدؼ انتاج األجنة الخضرية وانباتيا ألنموالى أوساط غذائية خالية مف منظمات نقؿ ,النمو النباتية مرة كؿ شيريف. اجريت اعادة الزرع

من الكالس Adventious Budsانتاج البراعم العرضية -3اوساط غذائية مزودة بمنظمات النمو النباتية الى وسط غذائي المتكوف عمى بعمر شيريف وىو الكالس االولي نقؿ

MS كؿ شيريف.في اجريت عمميات اعادة الزراعة مرة , خالي مف منضمات النمو

Page 4: يحا مسج ا جراخ Bacopa monnieri L. ءاما نيبرب تابن راثا · 3 يح ا مسج ا جراخ Bacopa monnieri L. ءام ا نيبرب تابن راثا ةرارػػػح

العرادي حميمة جبار عبد الرزاق 1 من االفرع الطرفية Direct regeneration توالد األفرع الخضرية المباشر -1

kinetin (Kin) ( والكاينتيفBA) Benzyl Adenineأستعمؿ نوعاف مف السايتوكاينينات ىما البنزؿ أدنيف

أثناء التحضير وحسب المعامالت التالية MSوأضيفت الى وسط ألمباشرةىما عمى انتاج األفرع الخضرية لمعرفة تأثير مكررات لكؿ معاممة كما يأتي: 11واستخدمت

BA 1-ممغـ.لتر 0.5 - 1 Kin 1-ممغـ.لتر 0.5 -2 1Kin-ممغـ.لتر 0.5و BA 1-ممغـ.لتر 0.5 -3 NAA 1-ممغـ.لتر 0.5 و 1Kin-ممغـ.لتر 0.5و BA 1-ممغـ.لتر 4-0.5 المقارنة الخالية مف اليرمونات -5

:ودرست الصفات اآلتية كمؤشر لمنمو عدد األفرع المتكونة - أ

طوؿ األفرع - ب

عدد األفرع الجانبية المتكونة عمى العقدة -ج

التجذير -0 .ات النموخالي مف منظم MSالنبيتات بعد مرور شير مف زراعتيا في وسط جذرت

األقممة -6أجريت عممية أقممة النبيتات داخؿ المختبر حيث استخرجت النبيتات بعد تجذيرىا مف االنابيب الزرعية وبعد وصوليا

غسمت بالماء الجاري عدة مرات لغرض ازالة المواد العالقة بالجذور ومف ثـ وضعت في كمعدؿ لمطوؿ سـ 11الى دقيقة بعدىا زرعت في وسط االقممة 31لمدة (Elsa) مف المبيد الفطري السا1-لترغـ.1محموؿ التعقيـ المتكوف مف

عمى ةظفامحتغطيتيا بأغطية بالستيكية شفافة لمدة اسبوعيف لم وتـ 150المتكوف مف الرمؿ والبيت موس المعقـ بنسبة اياـ بسماد 11النبيتات كؿ تسقيو بعد ذلؾ تـ رفع االغطية بصورة تدريجية المحيطة بالنباتات الرطوبة العالية

NPK 0.5 محسف 1-غـ.لتر( ( استعممت شمعات فمورسنت)0113 , وحسبLED بالمونيف األحمر ) واألزرؽ مف ساعات ظالـ, وامتدت عممية األقممة أربعة أشير وبعدىا نقمت النباتات الى الحقؿ. 3ساعة و11الطيؼ الشمسي لمدة

:ل االحصائيالتصميم التجريبي و التحمي

Completely Randomized (C.R.D)ؿ التصميـ العشوائي الكام باستخداـالتجربة جرى تحميؿ نتائج

Design أستخدـ برنامجGen Stat 2007 في تحميؿ النتائج واختبرت معنوية المتوسطات باستخداـ اختبار أقؿ (.1431 ,)الراوي وخمؼ اهلل RLSDفرؽ معنوي معدؿ

Page 5: يحا مسج ا جراخ Bacopa monnieri L. ءاما نيبرب تابن راثا · 3 يح ا مسج ا جراخ Bacopa monnieri L. ءام ا نيبرب تابن راثا ةرارػػػح

5خارج الجسم الحي L. Bacopa monnieri اكثار نبات بربين الماء

النتائج والمناقشة تأثير األوكسينات في استحثاث الكالس:-4

ة بمعاممة المقارنة اف الكالس تكوف في المعامالت الحاوية عمى منظمات النمو مقارن(, 1) مف الجدوؿ يتضح أستحث الكالس بعد خمسة اسابيع عند , و ألدراسةتنتج الكالس مطمقا خالؿ فترة حيث لـ الخالية مف منظمات النمو

وبعد وقوامو المتماسؾأألصفر بمونوامتاز الكالس كما % 30في الوسط الغذائي بنسبة D-12,4-ممغـ.لتر 3استخداـ امتاز الكالس بمونو األصفر أيضا حيث , %03بنسبة NAA 1-ممغـ.لتر 3استخداـ ستة اسابيع تكوف الكالس عند

1.5بينما أستحث الكالس بعد اربعة اسابيع عند استخداميما معا في المعاممة الحاوية عمى ذا قواما ىشا, لكنو كاف بب ومتماسؾ وبذلؾ تكوف مح الموف, % منتجة كالس أبيض43وبنسبة 1NAA-ممغـ.لتر 1.5 و D-2,4 1-ممغـ.لتر

, واف السبب في ذلؾ زمنيوأعمى نسبة مئوية لتكوف الكالس و بأقؿ فترة قد تفوقت معنويا عمى جميع المعامالت مسجمة تكويف الحامض حفزاذ ,ساعد الخاليا النباتية عمى االنقساـ والنمووالذي الى وجود االوكسيف في الوسط الغذائي يعود

أكسدة المواد الغذائية وتكويف في خالؿ نشاطو بتوفير الطاقة مف mRNAحيث يعمؿ ,RNAالنووي الرايبوزي ي يتـ استغاللو مف قبؿ ذوال ATPاالنزيمات المتعمقة بالنمو ومنيا انزيمات التنفس التي ينتج عنيا مركب الطاقة

.(1)لوحة كما في (1440 ,األنسجة لغرض االنقساـ والنمو )المعريفي استحثاث انسجة الكالس NAAعمى االوكسيف D-2,4لالوكسيف تفوؽ المعنوي التائج الدراسة الى أشارت ن

اما، وتأثيره في استحثاث الكالس D-2,4 الى فعالية االوكسيفذلؾ قد يعود و , مف البراعـ الطرفية لنبات بربيف الماءى الى زيادة انقساـ وتوسع خاليا الجزء النباتي قد يعز NAAو D-2,4زيادة استحثاث الكالس عند تداخؿ اوكسيني

. (El-Hammady, 1999)االولي سػػػويف الكالػػػالمزروع لتك

D 7- NAA-2,4-4األوكسين في انتاج الكالس تأثير :(4)لوحة

1 2

Page 6: يحا مسج ا جراخ Bacopa monnieri L. ءاما نيبرب تابن راثا · 3 يح ا مسج ا جراخ Bacopa monnieri L. ءام ا نيبرب تابن راثا ةرارػػػح

العرادي حميمة جبار عبد الرزاق 6

: تأثير نوع األوكسيف وتركيزه في صفات كالس نبات بربيف الماء(1) وؿجد المعامالت 1-ممغـ.لتر

النسبة المئوية لمكالس المتكوف

الفترة الزمنية صفات الكالس لوف الكالس لظيور الكالس

)اسبوع(32,4-D 30% 1 متماسؾ أصفر 3 NAA 03% 0 ىش أصفر

2,4- D -1.5 NAA 1.5و

تماسؾ حاوي م أبيض 43% عمى عقد كثيرة

0

- %1 المقارنة - - - 1.0 أ . ؼ . ـ

من الكالس Adventious Budsانتاج البراعم العرضية-أ

ة وعند االستمرار بتجزئ , الكالس االولي وبعمر شيريف الى وسط غذائي خالي مف منظمات النمو النباتيةنقؿ والتي استطالت (1-0لوحة )بعد مرور ستة اشير وخضراء عمى اسطح ظيرت عقد ونقمو عمى ذلؾ الوسطالكالس

.(0-0لوحة ) لألقممةجاىزة وأصبحتوجذرت عمى نفس الوسط

استطالة البراعم العرضية وتجذيرها-7 بداية ظهور العقد الخضراء -4 :7 لوحة

لذي يؤديو التوازف بيف االوكسيف والسايتوكاينيف في تحديد قد يعزى تطور البراعـ العرضية مف الكالس الى الدور ا مف او قد يعود تطور البراعـ العرضية (Jasim, 2000)نمط التمايز الخموي وتكويف االعضاء خارج الجسـ الحي

السايتوكاينيف الطبيعي بنسبة عالية في خاليا نبات بربيف الماء مما شجع مف استحثاث البراعـ الى وجود الكالسالنباتية السايتوكاينيف مف اليرمونات , اذ يعدخالي مف منظمات النمو النباتية وسط العرضية مف الكالس عند نقميا الى

(.1441 ,التضاعؼ )محمد وعمر عمى المشجعة

Page 7: يحا مسج ا جراخ Bacopa monnieri L. ءاما نيبرب تابن راثا · 3 يح ا مسج ا جراخ Bacopa monnieri L. ءام ا نيبرب تابن راثا ةرارػػػح

7خارج الجسم الحي L. Bacopa monnieri اكثار نبات بربين الماء

انتاج االجنة الخضرية-ببمنظمات النمو النباتية الى اوساط غذائية النامي عمى اوساط مزودةو لكالس االولي بعمر اربعة اشير انقؿ

تطور الكالس االولي الى كالس عقدي , وبعد مرور اربعة اشير مف النقؿ , ت النمومشابيو وخالية مف منظماوبعد مرور شير مف انتاج العقد , (1431 بادئات لألجنة الخضرية )مطر, إالىي وىذه العقد ما (, 1-3لوحة )

.(3-3)حة لو كما موضح في والتي انبتت عمى ذلؾ الوسط (0-3لوحة )الجنينية تطورت الى اجنة خضرية اف تطور العقد الجنينية الى اجنة خضرية يحدث نتيجة الستيالؾ االوكسيف مف قبؿ خاليا النسيج النامي وبعد نفاذ االوكسيف مف الوسط الغذائي يحدث توقؼ لمعقد الجنينية عف االنقساـ ومف ثـ استطالة الفمقة وظيور الشكؿ

.(Brackpool et al., 1986)او االسطواني لمجنيف الخضري الكروي

انبات الجنين الخضري-3 بداية ظهور االجنة الخضرية -7 الكالس العقدي -4 :(3)لوحة

تأثير السايتوكاينينات في تكون األفرع الخضرية المباشر-7

وبفارؽ معنوي Kin 1-ممغـ.لتر 0.5و BA 1-ممغـ.لتر 0.5الى تفوؽ المعاممة ( 1) تشير النتائج في الشكؿ 1-ممغـ.لتر 0.5تمتيا في التأثير المعاممة . فرعا 40مسجمة ,عمى باقي المعامالت في عدد األفرع الخضرية المتكونة

BA فرعا خضريا 10.3فرعا خضريا مع فارؽ معنوي مع المعامالت االخرى في حيف بمغ عدد االفرع 14.7مسجمة 10وبمغ معدؿ عدد االفرع NAA 1-ممغـ.لتر 0.5و Kin 1-ممغـ.لتر 0.5و BA 1-ممغـ.لتر 0.5 في معاممة

فرعا, وقد يعزى السبب 2.5 بمغ حيث نما سجمت المقارنة أدنى معدال بي ,1Kin-ممغـ.لتر 0.5في المعاممة فرعا انقساـ الخاليا والقضاء الى اف تأثير السايتوكاينينات المختمفة في احداث التضاعؼ الخضري يأتي مف خالؿ دورىا في

بالقرب مف و t-RNAاذ يعتقد باف وجود السايتوكاينيف كجزء مف الحامض النووي الناقؿ ,ةميالقعمى ظاىرة السيادة -tاثناء تكويف البروتينات اذ اف m-RNAمع t-RNA لو دور ميـ في ربط Anti-codonالشفرة المضادة

RNA الخالي مف سمسمة الػIsopenteny l الجانبية التابعة لمػAdenine يكوف غير فعاؿ واف اضافة الػBA و Kin تؤدي الى تنشيطRNA ( 1441 ,ويونسمحمد) ضاعؼ السريع لألفرع الخضرية لوحةادى الى الت, وىذا بدوره الجيني عمى مستوى االستنساخ كما توصمت الدراسات الحديثة الى اف السايتوكاينينات تنظـ التعبير .0

Transcription level (Schmulling et al., 1997). وآخروفاتفقت نتائج الدراسة مع ما توصؿ اليو عمر, في اىمية احتواء الوسط الغذائي عمي السايتوكاينينات Bekheet, 2013 و Liljana et al., 2012 و 1440

والخاص بنشوء وتضاعؼ االفرع الخضرية.

3 1 2

Page 8: يحا مسج ا جراخ Bacopa monnieri L. ءاما نيبرب تابن راثا · 3 يح ا مسج ا جراخ Bacopa monnieri L. ءام ا نيبرب تابن راثا ةرارػػػح

العرادي حميمة جبار عبد الرزاق 8

لنبات بربين الماء األفرع الخضريةعدد متوسط تأثير السايتوكاينينات في : 4 شكل

ةر الخضرية المباش االفرع :(1)لوحة

Kin 1-ممغـ.لتر 0.5 مع BA 1-ممغـ.لتر 0.5رنة وتداخؿ المقامعاممتي الى تفوؽ (0)نتائج الشكؿ تشير

ألتواليسـ عمى 13.00و 15.33 معنويا عمى باقي المعامالت في طوؿ األفرع الخضرية التي بمغ طوؿ االفرع فييما NAA 1-ممغـ.لتر 0.5مع BA 1-ممغـ.لتر 0.5وتداخؿ و BA 1-ممغـ.لتر 0.5 وتمتيا في التأثير المعامالت

وقد ألتواليسـ عمى 4.67 و 6.67 و8.33 اذ بمغ طوؿ االفرع الخضرية فييما ,Kin 1-ممغـ.لتر 0.5معاممة و سبب نبات بربيف الجداوؿ عمى اليرمونات الطبيعية ومف ضمنيا االوكسينات التي ت احتواء الى في ذلؾ يعزى السبب

زيادة النمو. وبالتاليزيادة انقساـ الخاليا

Page 9: يحا مسج ا جراخ Bacopa monnieri L. ءاما نيبرب تابن راثا · 3 يح ا مسج ا جراخ Bacopa monnieri L. ءام ا نيبرب تابن راثا ةرارػػػح

9خارج الجسم الحي L. Bacopa monnieri اكثار نبات بربين الماء 1-ممغـ.لتر 0.5و BA 1-ممغـ.لتر 0.5 سجمت جميع المعامالت فرعا جانبيا واحدا مف كؿ عقدة عدا معاممة

NAA ذلؾ الى اف تداخؿ األوكسيف في سبب الربما يعود , (0 لوحة)كؿ عقدة التي أنتجت فرعيف مفNAA معاستحثاث البراعـ مف العقد عمىشجع بدوره احدث توازنا لمنظمي النمو داخؿ انسجة النبات والذي BA السايتوكاينيف

.الساقية

الماء لنبات بربين الخضرية لفرعطول ا متوسط تأثير السايتوكاينينات في :7 شكل

لنبات بربين الماء ظهور فرعين من كل عقدة :(5)لوحة

واألقممة التجذير -3سـ تقريبا تـ نقؿ تمؾ األفرع الخضرية الى وسط غذائي خالي 0بعد وصوؿ االفرع الخضرية الى طوؿ اكثر مف

الوسط تـ الحصوؿ عمى نبيتات مف زراعتيا عمى ذلؾبعد مرور شير مف منظمات النمو النباتية لغرض التجذير, و % وقد يعود السبب في ذلؾ الى احتواء النبيتات عمى منظمات النمو وبصورة طبيعية ومف ضمنيا 111مجذرة

االوكسينات التي شجعت مف ظيور الجذور مف قواعد البراعـ العرضية او ربما يعزى سبب ذلؾ الى اف نبات بربيف ولما كانت األخيرة ألمغذياتالعالية مف التركيزتات المائية التي تنمو في األىوار والمستنقعات حيث الجداوؿ مف النبا

منخفضة في األوساط الغذائية فأف النبات يقـو بمد الجذور وتفرعاتيا بدرجة كبيرة سعيا وراء العناصر المغذية المفقودة

Page 10: يحا مسج ا جراخ Bacopa monnieri L. ءاما نيبرب تابن راثا · 3 يح ا مسج ا جراخ Bacopa monnieri L. ءام ا نيبرب تابن راثا ةرارػػػح

العرادي حميمة جبار عبد الرزاق 41

وليذه الميزة أىمية في استخداـ النبات في تجارب معالجة المياه والتربة مف التموث ,عند زراعتو خارج الجسـ الحي بالعناصر الثقيمة.

ف الطيؼ بالمونيف األحمر واألزرؽ م (LED) فمورسنت األقممة داخؿ المختبر بنجاح باستعماؿ شمعات تمت عممية حتى نقمت وامتدت عممية األقممة أربعة أشير, في عممية االقممة واثبتت نجاحيا والتي استخدمت ألوؿ مرة ألشمسي

.(1 لوحة )المزرعة المائية النباتات الى

داخل المختبرأقممة نباتات بربين الماء : (6)لوحة

نبات بربيف الماء نسيجيا عف طريؽ استحثاث الكالس وتكويف باإلمكاف اكثار افالحالية, مف الدراسةنستنتج

وكذلؾ التكويف المباشر لمبراعـ الخضرية ,مف الكالس غير المباشراالجنة الخضرية منو او استحثاث البراعـ العرضية مة النبيتات عمى تركيز منظمات النمو المستخدمة في االوساط الغذائية واقم باالعتمادمف البراعـ القمية المزروعة

جراء المزيد مف الدراسات لجعؿ نباتات بربيف الماء تتحمؿ الظروؼ الممحية العالية بإ لذا توصي الدراسة , الناتجة المتزايدة في البيئة المائية لجنوب العراؽ وكذلؾ جعميا متحممة لظروؼ الجفاؼ.

المصادرتصميـ وتحميؿ التجارب الزراعية, وزارة التعميـ العالي (. 1431)محمد عبدالعزيز ,خمؼ اهلل خاشع محمود و الراوي,

صفحة. 033والبحث العممي, مؤسسة دار الكتب لمطباعة والنشر, جامعة الموصؿ انتاج -1(. انتاج تقاوي البطاطا محميا 1440)عادؿ رفيؽ ,ميسر مجيد و الراوي ,جرجيس عمر, مبشر صالح و

.1, العدد 0المجمد –لمرستيـ القمي. مجمة اباء لالبحاث الزراعية تقاوي البطاطا االساس باستخداـ زراعة ا(. المفاىيـ الرئيسية في زراعة الخاليا واالعضاء لمنبات, وزارة 1441محمد, عبدالمطمب سيد وعمر, مبشر صالح )

التعميـ العالي والبحث العممي , مطبعة الموصؿ العراؽ.مر بوساطة تقنية زراعة االنسجة النباتية, جامعة دمشؽ, كمية الزراعة, (. اكثار نخيؿ الت1440المعري, خميؿ وجيو )

.1440سوريا

Page 11: يحا مسج ا جراخ Bacopa monnieri L. ءاما نيبرب تابن راثا · 3 يح ا مسج ا جراخ Bacopa monnieri L. ءام ا نيبرب تابن راثا ةرارػػػح

11خارج الجسم الحي L. Bacopa monnieri اكثار نبات بربين الماء

سراع مف بموغ االجنة الخضرية وانباتيا واقممة في اال ABAو PEG(. تاثير السكروز و0113محسف, خيوف عمي )قسـ البستنة وىندسة الحدائؽ كمية ,البرحي والنيرسي. اطروحة دكتوراهالنبيتات الناتجة منيا لصنفي النخيؿ

العراؽ. ,الزراعة جامعة البصرةلثالث دار الحكمة لمطباعة (. اساسيات فسيولوجيا النبات, الجزء ا1441)مؤيد احمد ,و يونسمحمد, عبد العظيـ كاظـ

والنشر.Bharti N, Yadav D, Barnawal D, Maji D, Kalra A (2013)

Exiguo bacterium oxido tolerans, a halotolerant plant growth promoting rhizobacteria, improves yield and content of secondary metabolites in Bacopa monnieri (L.) Pennell under primary and secondary salt stress. World J Micro bioliotechnol 29: 379-388.

Brackpool, A.; Branton, R. and Black, J. (1986). Regeneration in palms (chapter 10) culture and somatic cell genetic of plants, academic press, inc., 3: 207-222.

Bekheet,S. (2013). Direct Organogenesis of Date Palm (Phoenix dactylifera L.) for propagation of tru to type plant. Sci. Agri. 4(3): 85-92.

Binita, B.; Ashok, D. and Yogesh, J. (2005). Bacopa monnieri (L) Pennell: A rapid, efficient and cost effective micro propagation. Plant Tissue Cult Biotech 15(2): 167-175.

El-Hammady, A. M.; Wanas, W. H.; Abo-rawash, M. and Awad, A. A. (1999). Regeneration of date palm sewy cv. Plantlets by somatic embryogenesis through callus with refrence to the genetic stability. In: Pro. The int. Conf. Date palm, Nov. 1999. Assiut Univ. Egypt.pp:117-131.

Jasim, A. M. (2000). Production of somatic embryos of date palms (phoenix dactylifera L.) in in vitro by liquid media culture. J. Basra researchs, Vol.24, part 1, 1-6.

Khaliel, A.; Shine, K. and Vijayakumar, K. (2005) Salt tolerance a mycorrhization of Bacopa monneiri grown under sodium chloride saline conditions.

Afri. J. Micro. Res., 5(15): 2034-2040. Liligana, K. G.; Sasa, M. ; Trajkova, F. and Llivski, M. (2012). Micropropagation of

potato Solanum tuberosum L. Electronic Journal of Biology 8(3): 45-49. Murashige ,T. and Skoog , F. (1962). Arevised medium for rapid growth and

bioassays with tobacco tissue cultures. Physi. Plantarum 15: 473-497. Schmulling, T.; Schafers, S. and Romonov, G. (1997). Cytokinins as regulators of

gene expression. Physio. Plant 100(3): 505. Naik, P.; Patil, B.; Jaggal, L. and Jangid, V. (2013).The Effect of

Subculture on the Bacoside A Content in Adventitious Shoot Cultures of Bacopa monnieri(L) Research Journal of Pharmaceutical, Biological and Chemical, 4(4): pp 111.

Tisserat, B. and Zaid, A. (1983). In vitro shoot-tip differentiation in phoenix dactylifera L. Date Palm J. 2(2): 163-182.

Tiwari, V.; Tiwari, K. and Singh, B. (2001). Comparative studies of cytokinins on in vitro propagation of Bacopamonniera. Plant Cell, Tissue Organ Cult 66: 9–16

Page 12: يحا مسج ا جراخ Bacopa monnieri L. ءاما نيبرب تابن راثا · 3 يح ا مسج ا جراخ Bacopa monnieri L. ءام ا نيبرب تابن راثا ةرارػػػح

Iraqi J. Aquacult. Vol. (41) No.(1)-7147: 4-12 12

Propagation of water hyssop ( Bacopa monnieri L.) in vitro

Haleemah J. Al-Aradi, *Ansam M. S. *Khaun A. M. Jihad M. Al-Zewar

Biological Development of Shatt Al-Arab & N. Arabian Gulf Departmen – Marine Science

Center –University of Basra, Basra,Iraq

*Date Palm Research Center – University of Basra, Basra, Iraq

Abstract The study aimed to examine the ability of propagation of water hyssop Bacopa monnieri L. in vitro. To induce callus, two auxin , NAA and 2,4-D are used. They showed the highest percentage of 93% callus induction when 1.5 mg .l -1 was used for both. The induced callus was distinguished by its white compact color containing a lot of nodes. After that another treatment with 3 mg . l -1 2,4-D was conducted to score 85% , the callus was compact yellow. The treatment by 3 mg/l -1 NAA scored 53%. The callus was yellow and soft, where as the callus was not induced by hormones free treatment. The effect of cytokines on the formation of vegetative buds was also examined in this study. The results showed that the interaction between treatment by (0.5 mg .l -1) of BA and (0.5 mg.l -1) KN was significantly increased in the number of the vegetative buds; the number was 40 vegetative buds. Then another treatment followed (0.5 mg . l -1) BA, the interaction of (0.5 mg.l -1) BA, KN and NAA and (0.5 mg. l -1) of KN to form (14.7, 10.3, 10.0) vegetative buds respectively. The control treatment scored 2.5 vegetative buds to show a significant increase in the length of the vegetative buds (15.33 cm) followed by the treatment of the interaction between (0.5 mg .l -1) BA and KN to score (13.00 cm) and the treatment of (0.5 mg.l -1) BA , (8.33 cm). The interaction between (0.5 mg. l-1) of BA, KN and NAA, (6.67 cm). The length of the vegetative buds was (4.67 cm) in the treatment by (0.5 mg.l -1) KN. The plants were acclimatized then transformed into the water field successfully.

Key words: Bacopa monnieri, micro propagation, plant growth regulators