13
41 Review Article O TUMOR VENÉREO TRANSMISSÍVEL CANINO ASPECTOS GERAIS E ABORDAGENS MOLECULARES (REVISÃO DE LITERATURA) THE CANINE TRANSMISSIBLE VENEREAL TUMOR - GENERAL ASPECTS AND MOLECULAR APPROACH (REVIEW) Francisco Glauco de Araújo SANTOS 1 ; Anilton Cesar VASCONCELOS 2 ; Jairo Eduardo dos Santos NUNES 3 ; Geovanni Dantas CASSALI 4 ; Tatiane A. PAIXÃO 5 ; Luciana MORO 6 RESUMO: O tumor venéreo transmissível canino (TVTC) é uma neoplasia indiferenciada de células redondas cujo crescimento é rápido. Em animais adultos e saudáveis o tumor tende a regredir espontaneamente. Em animais jovens ou imunossuprimidos essa neoplasia pode metastatizar para outros órgãos. Uma característica marcante desse tumor é o fato dele ser de fácil transplantação e rápido crescimento propiciando a oportunidade de utilização de marcadores de proliferação celular e estudo da cinética tumoral. Sua regressão espontânea abre uma perspectiva para o estudo da morte celular por apoptose. Além disso, o TVTC, é um excelente modelo para o estudo da interação entre a imunidade do hospedeiro e o crescimento tumoral. UNITERMOS: Tumor venéreo transmissível canino; Marcadores de proliferação celular; Apoptose. 1 Doutor, Professor Adjunto da UFAC. 2 PHD, Professor Adjunto ICB/UFMG. 3 Doutorando na Texas Agricultural and Mechanical University College Station, Texas, EUA. 4 Doutor, Professor Adjunto ICB/UFMG. 5 Mestranda na Escola de Veterinária da UFMG. 6 Doutora, Professora Adjunta ICB/UFMG. Received: 06/04/05 Accept: 20/06/05 LITERATURA O tumor venéreo transmissível canino (TVTC) O TVTC é uma neoplasia indiferenciada de células redondas e de ocorrência natural que afeta primariamente a mucosa genital de cães de ambos os sexos (BABO; BERNARDO, 1999; CHU et al., 2001; DAS; DAS, 2000). O TVTC apresenta distribuição mundial sendo mais comum em regiões tropicais e subtropicais (DAS; DAS, 2000; KENNEDY; MILLER, 1993). No Brasil, tem sido relatado nos Estados de São Paulo (DALECK et al., 1987), Minas Gerais (MUNDIM; FERREIRA; SANTOS, 1987; SANTOS et al. 1998; ZEZZA NETO; FELIX; ALVES JÚNIOR, 1995) e Mato Grosso do Sul (BABO; BERNARDO, 1999). A histogênese do TVTC é controversa. Acredita- se que o primeiro clone de células tenha se originado de mutações induzidas por vírus, substâncias químicas ou radiação em células linfohistiocíticas. Este clone de células tumorais teria então se disseminado pelos cães através de transplantação alogênica (NIELSEN; KENNEDY, 1990). As células do TVTC apresentam imunorreatividade à lisozima, à antitripsina alfa 1 e ao antígeno ACM1 (anticorpo monoclonal murino contra macrófagos de cão) corroborando a hipótese de que esta neoplasia tenha um imunofenótipo histiocítico (GONZALEZ et al., 2000; MARCHAL et al., 1997; MOZOS et al., 1996). Recentemente, detectaram-se amastigotas de Leishmania no citoplasma de células do TVTC primário extra-genital de ocorrência natural (ALBANESE et al., 2002). Esse achado reforça ainda mais a possível origem histiocítica do TVTC. Transmissão O TVTC é uma neoplasia alogênica transmitida através de células vivas, não requerendo a transformação das células do hospedeiro (DAS; DAS, 2000; NIELSEN; KENNEDY, 1990). O tumor pode ser transmitido pelo Biosci. J., Uberlândia, v. 21, n. 3, p. 41-53, Sept./Dec. 2005

O tumor venereo transmissivel canino –aspectos gerais e abordagens moleculares ( Revisão de literatura)

Embed Size (px)

Citation preview

��

<�*���� �����

������������������� ��"������� ��� #�������������� ������������������������ ���� �������� �������

��� ������ ������������� �������� ����� � ������� ������� ������������ �������� �������&

,������� ����������45��#�/��#�!���� ����&����+�#&�/&)%�#�!�1�����)����������#�����/(/)#�!���������������&�##�% �!����������2�3� 67��!�%��������$��

>�2�%9�������*� /����� �����L*����� � ���5A5(%�/����� ��6������� ����� ����������/��������� �����)��������� ���/�J6�����!��� ��������������������J*������������� �������������6� �� ���� ����!��� �����)�*� �������� ����6������������ ��6������6�������������:��6���������N�E����"���������L���������� �������������/���������������������J������ �6�� ��2E����J6����������� ���6�6���� ������6��� ��������������:�2E����������������6������2E����������������������� /�������������#��������E����6� �4 �����������6��6����*�6���������������������������6���6�6������ �/�������1���5A5(1�/�����B���� ����������6���������������� ���2E�� �������� ���������+��6����������������� ����������

2*0�>�%�9�5����*� /����� �����L*����� � �K�-�����������6������2E��������K� 6�6�����

� ��!���������������% !������(%#�� �@�������������% !��� "#.��(*3�� ��!��������>�<���%&���!��!������*��,�������� �����A�#����&����������>�<����+�%�� ��!����� ����������% !��� "#.��(*3�� *���������+��������B�����'�������(*3�� ��!�����������������% !���"#.��(*3�

0���� �1��=��2��� %�����1�����=���

/0�>1�2>1

%� ������!������� ���������-!��� ������� '�F��)

�5A5(� /� ���� ��6������ � ����� ������ ���/������ ��� ���� �� ��� ���I ���� ������ ?��� �����6������� ��� ��������� �� ����� ��� �E��� ��� ������ ����B����8 8K�8!<� <>1�����K�(="�������1��''�K> #K�> #1� �'''%���5A5(� �6��� ��� ��������2E��� ����� �� �������� ������ ��� ���3��� ��6������ ������6�������> #K�> #1��'''K�^!��!>@K�-���!<1���&%�����8����1������������������ ���!����������#E�,������> �!(^�������1���$�%1�-� ���.������-"�>�-K0!<<!�< K� # �5#1� ��$�K� # �5#� ��� ���� ���$K]!]] ��!5K�0!��oK� �A!#�9`��<1�����%���-���.��������#����8 8K�8!<� <>1�����%�

�+�����I �������5A5(�/��� ��*����� ������;���?�����6��������� ������/�������� +��������� ����������23���� ��:�����6��*L��1������4 �����?�L������������2E������/�������� ��+������L�������!������� ������/�����

�������������� �E������������ ����6������E������*/���� �� �6�� ��2E�� ����I ���� ���!�#!�K�^!��!>@1���'%�� ���/���������5A5(��6��� ������� �����*�����T� ����:���1� T� � ����6�� �� ����� �� �� ��� � �L�� �� (-��� ����6���� ���� ������ ���� ������N����������E�%������ �����+�6N��������?�������� ��6�������� +������� ��� N��6�� +������L����� �.�] �!]���� ���1� �'''K- <(= �� ��� ���1� ����K� -]#� ��� ���1� ����%�<��� ���� ��1����������;����������������������+�� �� ������6����������/���������5A5(�6��J����B��;�� ����������I ���� ������� �8 �!#!�������1��''�%��!�����+�������2���� ����������6���L*���������+������L�������5A5(�

��������� �

�5A5(�/����� ��6����������I ������ ����������*/������/������*�*��1� E���?��� ������� �����2E������/���������+��6�������> #K�> #1��'''K���!�#!�K^!��!>@1����'%��������6��������� ��������6���

���������������������� ��������������2���������������������

��!(����" -���� !�� �����."�� �� � ���� ,�*��,��/��+�����������

��

���������������������� ��������������2���������������������

������ ��� ��� �� �6�� ��������� ����� ��� ���*/�� ����������1������������� +3����,���?���������������� *��*�� /� �����J��� ?��� �� 6���� �� �� �������6��� ����������23����������2E������� �� �������� ��6���2E�� ��� �/������ �������� ����� �� 6���� ��������L ������ E��6��������������� ������5A5(��(=!�1���$K�> #K�> #1��'''%�

���������-�����

���� ������L ������ �����D���������*��� �����6�6������� ������ ������6������ ��1�������2E���� ����1��������� �B�����*�� �� J��� �� ����1� ���� ���6������ ������������� ��6�J������*��L*����� �������������� ��� ��� ������+���J�����6��������� �� ����� ������� �����������1�������1������������6��������������� �6��� ��� �����2E�� �� ��;��� :� ����� ��*����+���� ��*���� T� � �� ��� *�������:�2E��=��������� �E�� ���� �� �������I ���� ��� ����:���J*��� ��� ������ ������� �<�(= <>#�1� ��$�K<.!<#1�����K� �5=!��!�K�- >!_!��1�����%��5A5(�������I ���� ������6�������C ��������C���6������ ��1�?��������6�1�������:���� ���� ��J�����B�� ��� 5A5(� 6���� ��� �� ����� ��� ���*�;���� ��� ��6��� ������1� �������1�6�6����������������������#��

���� +��*����� �����������'���1�6��� �������� �������� � ��6��L���� 6���� ��� �6��� ��� �������� �� �������1�� �����*������� ���2E��������� ���( �A!<51��$&K�( �A!<51���$�K�^!��!>@K�-���!<1����&K��!�#!�K� ^!��!>@1� ���'K� <.!<#1� ����KA!<-5!�1���$�%�

/�����<�� �� �������

������+�1���5A5(�/�� �� �����6� ��6���� �� �����E��6����������6I ����Q�� ���������:���� ����� ��16��������B�����:��6�����������6�6�������������6����������� �� 6�2E�� 6������� ��� 6�6C���� �0����%1���L����� ��� ����*������:�2E�� �<�(= <>#�1���$�%�0������ �� 6��������� 6��������6����� ����� ��6������5=!��!�K�- >!_!��1�����%�

����I���1������E��� �����������;�����?a� ���� �� ��������������� ���E������;6����������*��� �1� �)� 2E��������*���L����1������������6�6�������6�6����� �����6����� *��*�������L�����������#����5A5(����*���� ������*��� ��6��������B�����:�� ��*��*��"��� ��?a���� ��� ���5A5(� ������:���� �� *��� �� /� ����C��� �^!��!>@K�-���!<1� ���&K� ��!�#!�K^!��!>@1� ���'K�<.!<#1� ����K�A!<-5!�1��$�%�

7������3( �6�����������N6������������*� /����� �����L*����� � �� ������� �����?�����1�����������:�2E��� ����1�������� ���6� ��6���� �����6�2E��6����������6�6C����

��!(����" -���� !�� �����."�� �� � ���� ,�*��,��/��+�����������

�&

���������������������� ��������������2���������������������

/�����<�� �� �=����������

�5A5(��B���� �����6����� *��*�������*�������������� ���������6��������������������4 ����������2�16����2�1� ������� �� �� ���� 5A5(�� �B���� ��������4 �����E���������� ���������������� ����������������4������5A5(�� ����J������E�����������T?���������6���+�� �� ����� �8 8K�8!<� <>1� ����K�> #K> #1��'''%�������*���������������� �����1��������+��;��������� �����1�6�/���� �������������������������� ��6��� ����������������������5=!��!�K�- >!_!��1����%��5A5(�������*�������������������������������4 ������ �����������<.!<#1�����%�� �������:�2E�� �������J� ������� ��� ���������� ���� ��6���� �� �6����B��( �A!<51���$�%���������� ������������������6�����*��T����������> #K�> #1��'''%��!���� ��?aI ������ 5A5(�� �B���� ������ 6����� ��� ����*������ ����� �6��������� ����������� ��1�������2E�����4 �����������4 ��1�����������������������2E����������2E���������<.!<#1�����%��5�������B���� ������6������������������ ����������� �����4 ��������5A5(�� ������> #K�> #1��'''K�<�(= <>#�1���$�%�

����������

�����J������� �E�� ���� �c� �O%� �� ��������������� �������� �� ������ ��� ������6������������������ ������+���������L����� �� �� ����I������#E������/�� �� ������ ���� �1���2�1���+��1��/���1�+�6N����1�6���1�������������4 ��1��� �� ��������� �/�������6���M ���( �A!<51� ��$�K� > ##� ��� ���$� ��$�K�-"�>�-K0!<<!�< K�# �5#$���$�K�<�(= <>#�1���$�%��� *��*��� �������4����������� ��������� ������L����������6�������������6�����J������*���+����N�� ��> #K�> #1��'''K���!�#!�K�̂ !��!>@1����'K�@ �.1��$�%�

0������

�5A5(��� �6�� ������B6���� ����� ����B������6��E��������� *��*��� �������:�6�*��L*���?���� ����D������� ���6������*���������������*����������J������ �����E�� �(= �>�!<K�@ �.1� ��$�%�� !����� �5A5(���)����� �������/�������� �6�� �����1�� ������� ��������������� �����+��6������/�� ��6�:�������������� �N�����1�6����� ������������ �������������� ������1��''&%�������������������� ������5A5(1����E��������� ���������6���E�������6�������� ���=!##�������1�����%������ ��� ���� ��''&%� ���� ������?��� �� � �����2E�� ���/������ ���5A5(� � ��:� �� ���2E�� ��� �� �N������8� �

6�6���2E�� ��� ����N������ ������ ����� #��� ��� �����������1� ��� �/������ ���5A5(� ������������ ��������%6���L ���NB����?���� ��:���6��������� ������6�6��������� �N������8�� �����2E�������������4 ����6�����B6����1���6���1��������5A5(�6�)����������� ������+����� �� ����� ��� ������� ��� 6������*��� �/�� �����1� ��� �N������ ��� �� �����6�:��� ��� ����6�� ��� *����4 ������ ��N����� ��� � ��� ���1� �''&%�� (E��� ����5A5(�B6���� �����,_!<#1�����K�A!<-5!�1���$�%��� ��� ���I ���� ������ �( �A!<51� ��$&K= <-!���K� ]"(^!<- �K� �@#^ $� ����K=�..��#1� ����K�@ �.K� (= �>�!<K� >"��!; �_ @$���$�%���������E������ *��*������ ��������*�1� �� � ��;��� ����J���� T�� �� �6�� ��23�������?�� ����?�� �����*����4 ������� ��N�����/������� ���]!]] ��!5K� 0!��oK� �A!#� 9`��<$� ����%�� �����E�������*��T�����2E�������.� �����������E��1�6N�����6�L��������'�����1�?������ ������������/�� ����������� ����������� ��� �� ��2E�������.����� ����� ������������� ��6��������� �N������6���/��������E��������������������E���6��� ����������B�������6�������/���������5A5(���� �N������6���/���������E�� �����������?������ ���?���������������J������������������ ��� E�� �6��� ��������� �2E�� �(= �>�!<K@ �.1���$�K�(=!�1���$'%�

9J��������*���?������B6���E��������/��������-=(�������������������/�������� ������B�� ��5A5(�������� ��� ������� ��1� ���� �� ��������� ��� ��� ������E�� ������� �=#� � ��� ���1� �''�%��=����� ��� �����''�%�����*����?�������� �N������?���� �������������6���:��� �����4 ����� ?��� 6���*��� �� �B6���E�� �����/���������-=(�6������ �N������

!���E�����������������J*���1����5A5(����������6� �� ���� ��� ��� ��� ����� �I�� �� ����� ������=�..��#1�����%��������4�� ���*��� ���� ����������I���� �L�������( �A!<51���$�%�� ������E�����������J������������D������1�+�������1� �������(=!�1���$K���!�#!�K�^!��!>@1� ���'%� �� �6�6����� ��� �N�������# �5#1��''�K�# �5#�������1��''�%���T6��� 2��������� ���������� ��6��������J����((^<���K8! #�!@1� ����K�(55!<� ��� ���1� ���'K���!�#!�K^!��!>@1� ���'K� ,q<!]K� > @K�-]#1� ���$K# �5#1� �''�%��� C���� �� �� ��6�� ���� �/������ �� ��������� ������N�������������� ����������������������� ������������ �J������������� ������N����������������������� �������������E������/��*��������������������������������E�1���J������� �������� ������N���/���� �������*��� �����������?��� ���������������� ����# �5#1��''�%�

��!(����" -���� !�� �����."�� �� � ���� ,�*��,��/��+�����������

��

���������������������� ��������������2���������������������

����8�����

����� N���������5A5(�/��������� ��� �� ����� ����B������������������N6����������E���8<_�K( �A!<51� ��$�%��=������������ ��� E�� ��� ����*������ 2�� ?��������*�� � ��� ��� ������� ��� ������:�2E��� ��������B��;�� ������( �A!<51���$�K�> �!(^������1� ��$�K� > ##� ��� ���1� ��$�K� = <-!���K]"(^!<- �K� �@#^ 1� ����K� -"�>�-K

0!<<!�< K� # �5#1� ��$�K�>"@!� ��� ���1� ���&K# �5#1����$K�# �5#�������1����$K�A!<-5!�1��$�K�@ �.K�(= �>�!<K�>"��!; �_ @1���$�%�,�/�1�������������������J��������*���2E������*��;��� �����23��� +����6����N������ ?��������*��� �# �5#1�''�%��>�� ��������J�������������� ����0�����%1���5A5(���63�;���������+���������/����������������������������*�������:���1�������� ����������1��������� ������ �� ��������+���������������� ����������

7������G( -�����������������*� /����� �����L*����� � �������������������� ������������=!�X�������/���������������%��� ������� ����������� C�����C ���1��� �����*���������� ���/����C �������B�I ����K�/�������6�6�N������������%�����6����6�6�N��������%��=!1�����[��'�µ�%

�� �/������ �������� �E�� �� ���1� 6���/�����1��� ��������*������������� �3���� ��������� C�����/C ���� �� �� ��1� *�������� ������� ���� ��� �� ��� ���:��%K� �� ���/���� /� C ���� �� �B�I �����-����������� ��1� )J� ��� ����*��� ?��� ��� 5A5(��B���� �������6��� ����J���� ���������� ����������������?����������5A5(���� ������ �# �5#1����$K# �5#�������1����$%����������������������������������������6�����6�%��E����?a� ���� ����������������� ��������6������/��������� �������������6������� ����0����%�� 0����� ���������� 6����� ���� ���*�� 6�?�� ��

��6��� ��� �/������ ��� �������� J���1� ���� E�� +J�*��I ����� ��� ?��� ��� �/������ �������� ��� 6���:�����!�#!�K�^!��!>@1����'K�A!<-5!�1���$�%�5������������ �����1�����������������E�1��6��� ������� ��2E�� �� C��������/����������������/������*� ��������6������ ����!�������������E����������������� �I��������������������� �������������������/����� ����6�� ���� �J6����� ��� ������� �� )� ��*�� ���!�#!�K^!��!>@1����'K�# �5#1��''�%�

� �� ����2E��������N6���� ��� ��:� ���*/�� ���B���������N��������������2���������������� ������7��

��!(����" -���� !�� �����."�� �� � ���� ,�*��,��/��+�����������

��

���������������������� ��������������2���������������������

F��6� ��G��������� �������������( �A!<51���$�%�!��F��6� ��G� �0���� &%� ��� ��� ������2��� �������� 6���6��2E�� ���� ����+�� �� �� ��� ����� ���� ��� ����1�������6����.�����1�����*��;����/�������� ���1������/�������6���/����������*���1�������� +��� ����������� C�����C ������ C������6��� ������6��E������������������� �K��� ���/����/��� ��1�6���� � ��1��� �������B�I �����������6������/���� �� ��1���������2E��:������������ ����1��� �� ���*��C������������C���6���16�?�� ���������� ���1���?a� ���� ������6����������������( �A!<51� ��$�K� > #K� > #1� �'''K� >"�( �K,< ##!1� ����K� <�(= <>#�1� ��$�K� <.!<#1����%��,���>����� ��''�%1� ��� F��6� ��G� �6��� ������� ����� ��� J6���1� ������ ��1� ��� ���B�� ������ ������*��� ������6����6��������� N���������5A5(������

6�?��� ����� �/� ���� /� �� ������� ��� 6��� �������� ��*��C������������ ��;����6����J������������L������������ ��6������ �>"�( �K� ,< ##!1� ����%�� !���6������� ���6������?��������� N��������)���������������������/���������� L*��������L ��������� ����N����>" <5!1��''�%��#�63�;���?����� ����:������� ��C���������*��C�������)��J���1�����*�:�?������������������+����?�L��������5A5(� E���*��� ���������������� ����:���6L����1�����L��������6��L����� ������� ������>" <5!1�''�%������ F��6� ��G1� �� ��� 6����� ��� *������:���� �������� � �N������ ���������1� �/������ � ������N������ �N�����1� 6����N�����1����N������ �� ���N�����%�( �A!<51� ��$�K� > #K� > #1� �'''K� >"�( �K,< ##!1�����K�<�(= <>#�1���$�K�<.!<#1�����%1�/�������6�6�N����������6����6�6�N�������0����&%�

7������H( -������������F��6� �G����5A5(�������6����.�������(/�������� C���������� ����������*������1�� �� ��� ���/�����C ��������B�I ��������%��(���6��������������� ��������1��� ��� ����� ���1��� �� ��*��C��������������������� ����������%��(�6���6�6�N�������%������������6��� �N�������� ���������������%�8���[��'�µ�%�

����8������ �"��������

�5A5(1�?�� ������������:�2E���B���� ����1���*��������� ��������D���%;�=�����������1��� ��6�������������������6��������E���)�*� �1���)����/�������6��� ����� )�� ������� �5=!��!�K�- >!_!��1� ����%� �� � C���� ������������������� ��������6����K���%;�� ���������� �� ����J������ ���4 ��1� ��)��� �/������ �����63������ N���������E���� �������?���������5A5(1���� ������ ��� ������ �� �� �������������� �����1

���/������*��� ���1�6�?�� ������C���6�����-"�5�K= <A!@1����'%��r���� �+����?�L����1��������������6��L���� �� � ������6����J�����6��� �� �N������ 6��������� ��J;��� ��� 5A5(K� �&%;�-����������� 6��������� �����1���������?���������6��������� ��J�����B�� ������ ������ ��� 6�����2E�1����� ?��� ��� �6��� ��� ����� ���23����������J�������*��� ��J*����6������/� �������.�����1��:������������� �����J�����6��N��������#�+���;�, #����!�#!�K�^!��!>@1����'%�� ��� �6�� ��2E��B6���� ���� �� ��� � J������ �����N����� �*��C����� �����

��!(����" -���� !�� �����."�� �� � ���� ,�*��,��/��+�����������

��

���������������������� ��������������2���������������������

�L6����%���������M�����6�������B����� ���������������L������� N�������<�(= <>#�1���$�%��!��� ����������*��+�����*�������B���L���� ��6������������B������ J����������5=!��!�K�- >!_!��1�����%�

����������������;����� ����������� �

�������L�������������������/������+� ���T����������� �� ������������� �� C������ �E�� �� ���1���� ����������*���1���������� �� �������������1� �������� *�:��1� ���� � *��� �2E�� �((^<���K8! #�!@1� ����%�� � �����6������ /� ������� ��+����I ��1��B������ ����������� ��������������� �� ��� ��� �� ���������� � ���/���� /� �� ��1������ ���C ���1��L6������6���� � ���������6������/��� �� ��� ����������� ���������1� ���� �� ����� ��6�����������������������1����������������E��6�?�� ��1����L������ ��6����J���������������M ������E���� ���1�� ��� ������ C������� ���� ������ ��� �*���1� �� �� ��6������ �������� � �6���+�� ��� .����� /� 6�?�� �16�� ������ �� ���������� ���� �� �L���������*��;���� ��� �4 ����� ��/�� ;�� ���� �� *��C�����<�(= <>#�1���$�%�� ������ ��6����J����������6�)�23���?������� ������������������/��������)��� ����((^<���K� 8! #�!@1� ����K� ��!�#!�K^!��!>@1� ���'K�<�(= <>#�1� ��$�K� # �5#1�''�%�

����8����

Q�� ���������N��6�1��� C������6�N���� ���E� ������� ����������$�����������1��� ��������������������I �����������6����B�����o1@%������I ��������5A5(1���������N��6�����J��������1��6��� �� ������������������������ ���������(=!�1����$K�,��=!�<������$���$�%��>�����1�����������E�������I ��������������&��E������I �������!������� C����������������� ��� �/������ ��� 5A5(� ��)���� �� ?��� �� ���� �/����� �����1���?�� ����������������>� ����� C���������2������ ����������� ��� �/����� ������� �6�B����;����?������ *������ � �� ������ ��� �/������ ������8<_�K�( �A!<51���$�K�(=!�1����$%�

������������+����"���� ���������

�5A5(�/�����B���� ����������6�����6��?������� � ���2E�� � ��� �� ��� ������ ��� +��6������ �� �������� ������������� �������1��''&%��(� ����� ���� ����� ������ ����� ��� ��� �J���� �� �6�� ��2E�� �������� ��1���5A5(�6��������� ������������ ������6�����6��?���������������������/����� ��6�J������!����

��6���� ��� �������L��� �� �������1� 6����� ��� ����� ���6�����������6��������������������5A5(��>���������1�������6��� �������:�������*����2E����������������� 6������2E�� �� ��� ����� ������� ?��� 6�������6��� �������� +����� �������������5A5(1���/�������� 6��6����*��� �� ���� �����:�2E�� ������������B6���� ����6��������������� ��6�������

! ������������������6������2E����������������:����1�6������������������D�s�t�L ��������N����K�s��t�/� ������� ��<���s���t�� ����6��^�;���

(��������� ��1������:�;������� ������������������ ������� �� �� �J������ ��� L ����� ���N����� 6��� ���� ������2E������/���������6������2E���^<!�,!�������1����%��(�������� �������������������������� ������6�������� ���� ���� � ����2E�� ��� 6������2E�� �������!�#5�K�!���#1�����%1����� ���/���������� ���*���I�������6�6������6����� ��� ������2E������/������ ��6������2E���>� ��� �������/������ �����;��� �� �/� ������ ��<������ ����6��^�;����-�8��%�� ��������������:�����6��#� ������''�%�6����*�������6������2E�����������5A5(��� �6�� ������B6���� ����� ���

�����3������ �:��������� ���/�����������6���� 6���� � ��<�%1� ��� �/������ �����N�����1� �E����� ����������6���L ���J������ E�;+���� ���������:����6NB������������ ����������M������ ���?�������J������� ���/���� �����M����� �<� %� /� �����������(<(^!<K� � <1� ��$�K� >!<A �� ��� ���1� ��$�K=!<� �>!];A!<>"�K� <"##!�1� ����K<u#(=00�������1���$�K�"�>!<_>K�.�<�1���$$%�

��� �E�1� ��� ��<�� ���E�� �B�����*��� ��������:����� ������3��������/���������������������1$1� ��� �� �������� *�:��� �� &$� �^,,K� - @<K#(=�!.!<1� ��$�%�� �� ���3��� � J������ �� C����� ���J�����6��������������� ������� ���������� ����������6���������������2E��6����6�����<u#(=00������1���$�%�

r��������6���N6����1���� ��<���6��� ���;��������6� ������������������� ����1����� ������'1����1'�µ����� ��4����1� ��� C���� �� ������ *��J*���16������� ��� �� ���/���1�������/�������F���/�����G �� C���������� �/������ ��� � ������� ��� 6� ���� ���E��������L�����B�����*��� ������*/����� ���/���������� "8!�!�������1�����K�>!�A�(K�, ,, <!�� K�>�." <>1� ����K� 5<!<v1� ���&%�� (���� �4 ���� �� ��<� 6���� ��� �� �������� ����� ���� � ������� ������ ���� ������*���,�5�1�����%�

��*����2E������ ��<��6����������������*/������ �����1��� ���2E���������J������ J�������������������2E�� �� C����� �<u#(=00� ��� ���1� ����%�� �������������6������:������ ���������������� �������� C���� �� �*����2E�� ���� ��<�� �� 5A5(

��!(����" -���� !�� �����."�� �� � ���� ,�*��,��/��+�����������

��

���������������������� ��������������2���������������������

�# �5#1����$K�# �5#�������1����$%����5A5(�������I ���� �� ����� �� �B���� ����� �# �5#1� ���$K# �5#�������1����$%������ �� �6�� ������ �# �5#1�''�%� �6��� ���� 6��E�� ?��������*�� ������ ?�� ��� T��������2E�1���� �:�2E������������������ ��<�1��� �� �� C����1�?�� ��� �� ���/�����0������%�

,�/�1� )J� ��� ����*��� ?��� �� J��� ������ �� ��<�� �� C������� �� ���/���������� ������ ��������� ��<�� �� C������E����� �������*��� ���������6��� ��� 5A5(�� ��� ������:�2E�� �B���� ����� ?�� ��

���6���������������� ������:�2E���� ����� �# �5#1���$K�# �5#�������1����$%��9J�������� ���������/�?����� C��������J������������ ��<�� �� C���������������� ���5A5(���� �6�� ���������������� �����?��� �?����������������������E���# �5#1��''�%�

� %�� ��<����������������������8%�� ��<���6�� �+� ���������� ���/�����(%�� ��<�����6�����������3����>%�� ��<�����6������������/������!%�� ��<�����6���������������

7������I( !�?����������������2E������ ��<�� �� C������� ���/������������*� /����� �����L*����� � �������I ������ ��������B���� �����

(A). AgNORs isoladas e difusas.

(B). AgNORs preenchendo todo o nucléolo.

(C). AgNORs agrupadas em cordões.

(D). AgNORs dispostas em satélite.

(E). AgNORs agrupadas em colares.

� � �L�� �� ������ ^�;��� /� ��� ���6��B�����������1� 6������ ��� ���� ��?aI ���� �I ���� ?����������� ���� 6���L �� E�;+���� �� ��� &��;&��� Z>��Q"���K�_<�.=51����'%��,�����?�����̂ �;�����:�6����������:����>� 1��� �����6� �J*���6������ �� ��2E����������������������� ��2E������ *���6�� �������� �������*��E�����������p=<�������1�����%�

��� ��?��������������^�;���/��B6�������� ���������������������1��B����� ��� L�������.

����.

��� ����

�B6���E�� ���� ��� �� ���� ���������� ��� ����� #1���� 2� ������JB�������.

����-��Q"���K�_<�.=51

���'%�

� � �L�� ��^�;��� ��������;*���� ����1� �� ���������������+�������� ����6N�������������������� ��?�������/������?���)J��� +�����L������������������� E��6��� ���� �� � �L�� ��� �����2E�� ���^�;��� /� �����������*������� ����6�B�����������2E������������ ����� ���� 6�6���2E�� ������� � �A!#K� 8 ((=�KA ## �1�����%�

���� �����2E������-�8����^�;��%����5A5(����������� ����������E��������?�����6��� ���������/������������������������� �������*��� ���?�� ���������� *������# �5#1��''�%�

��!(����" -���� !�� �����."�� �� � ���� ,�*��,��/��+�����������

�$

���������������������� ��������������2���������������������

1�������� ������������ ���������������

��6�6����� /� ��� ��6�� ���*�� �������� ������1�� ������� ��������� ���1��?��� ����L �����6��/����_@���!K�̂ !<<K�("<<�!$���$'%�� ��6�6����1�?�� ������ ������������6������2E��������1��� �����������+����������� �� �����2E�� ��� ���� +�� ���� ��������^!<<1����&K�^!<<K�_@���!K�("<<�!1�����%��!�����6������������������� ��*���� ���*���2E��6������������ �2E������/������� ����)J*��������6�)�L:��6������� �������������� ����������F� �*�*�G���6� ������*��E���������� ������+������J����������� �����?���6���� *��� � ��2E�� �������� ������� 6�� �6�6�����_<�.=5K�]=�.K�� <<�(^1�����%��#��� � ��2E�1��)�����*/��������� ��������� ��N�����1���)��6����������� ������ +������J������ ��6��L�����1� 6����� ��� ���B�������6��4 ���� ��6��������������� �2E������/��������� ����� �����2E������� ���>� �����6�J*������>� ��6������2E������ ���23���*����%��6�� ���� ��� ������ �� 6������� ��� �6�6����� �A #(�(!�#K

A #(�(!�#1� ����%�� �/�� ��� 6�*� 2E�� ��� ���I ���1������I ��������6�6����� ��� ��6�������)J�������������1� 6���� ��� �� �������� ����� ����6�� N�����1� ����*�:� ?��� ����� �� ������ 2�� �� L �������N��������� ������������� ���������3���� �� �� ����������6�6������������� �;�������������������F��?�����G�����*���������1���������6�������� ��N������������������������2E����������� ���6����� ��������� ������N�� �� ����� �8"<#(=���� ���1� ���'%�� � �6�6����� ������6� �� ���� ������ ��6������������ ��� E�����������6�����6��������� ����6�����������E���������� ��:������6�������� ��� �^!<<1� ���&K�_<�.=5K�]=�.K� <<�(^1�����%�

(� ����� ������� �����6������������ *���2E���6� �4 ��� ���5A5(1� �� �;��� ��6��� ��� ������� �6�����6�2E������6�6����� �������E�������������

q�� ������ �������� ���?������6�6������� ��� E�����������������?������ ��� ��?��������������5A5(�0�����%�

7������5( �5A5(�6�����*����������6���;�������� ���������� �����Q���������������?������E��� *��*����� ��*���2E�����5A5(�w�Q������6� ��6���*����6�6�N������ *��*���� ��6���������������E�w

.� :���:�������� ��'''%���������?������ ���������E�� ���5A5(� � ��:���� 6���� *� ����� �� ����6��������6������2E��������������� �������6�6�����

#� �������������''�%����� �����������I ��������� ��6�� �������� ������� �� 5A5(� �0���� �� �� &%� ����� ���� ��1�#� ���� ��''�%�����*���?����� L �����6�6�N����� �� %� �� �� C���� ��� �/������ ��� �6�6����6�������� ����� ���� ��� ����� ������ ��� �*���2E�� ��5A5(��B6���� ����� ����� �6�� �������� ��������� ������������������E����������������������?����

�B6���E�����,�&����������������������������E�� ����1����?��������� ����1������� �������B6���E����,�&� ���J� � *��*���� �� �6�6����� � ��:���� �� ����� �������E�����5A5(��0� ���� ��1�#� ������''�%�������?������ ��������� ������N��������J������������������������� ��� ������� ��� �����E��� � 6��� 2�� ��� �����2E�1� ������� �� ����6���L*��� +�6NB��� 6����� ��������� ?��� ���������� �� �6�6����� ����� ����� ������ *��*��� ����������

��!(����" -���� !�� �����."�� �� � ���� ,�*��,��/��+�����������

��

���������������������� ��������������2���������������������

�%*�/2�@%

� ���6����� ��� ���� ����:�� 6��� ������ ������� �1� �� 5A5(� ��?a� ���� ��� �6��� ��� �����6����� ��� �� �� �1� �+��� ��������� �� �������6� �� ���� ���

������E�����5A5(����J�����������T� �����

���6�6��������� �N������ ��6�6�����/���������6��� ���6����������E�

���5A5(��������� �����?�����*�����)����6� �� ������6�&� �J������� ��������� ������N���/������ ���5A5(�

��� ����� ��� �����E�� ?��� ��� ��� �� ������� ���� ����� �����?������ ��2E������6�6�����6�*�*���� ���� *��*����2E������/������� ������N���������2E�����5A5(�

1A��>1��9�5+���� � ���� ����������*� �������������� �� ������ ��������� ������� ��6��������+���������+1��+��+��� ����������:�������+����� ��� ����� ���66������������ �� ���� �6�66���1���� ������6� �� ����������� �� ��������������������� ��������� �6�� ����� �� �����������+�6�6��������� ��66��� ��Y�����+�������:���� ��������6��������� ���Z���� ��+������Y�����+��6��������*������*��Y�� �����������+�������6� �� ������������ ���*���� ���6��6����*������+������Y��+�����������+��Y��6�6������� ������ ���Y1��� � ���� ����������*� �������������� �B����� ���������������Y��+��� ������� ������� �+�������� ��Y�� �����������+�

2*0�>��9�(� � ���� ����������*� ���������K�(����6��������� ���Z��K� 6�6������

>7>M*�01��A0A/0%�>N70�1�

�8 �!#!1�0�K�,��1� �K�-��� �5 1�0�K� 8< -1�0��,���Y����� ����� �B���� ����� �� � �� �� ���������*� ��������������+�'���������;���� � ��6������������D������+����������� ����+������Y�������� w�F��(� �������21B���1�*���&1� ���1�6����&;���1������''��

�A!#1�A�� ��0�K�8 ((=�1�(��!�K�A ## �1�9����������������Q�����:�-������#E��,����D�#���������8����������,��������1�����������6�

"8!�!1�-�K�8�!#5!<0!�>1�#�K�>!<!�]���1�-�K�="0� .�1�,�K�- <5�-1�=�K�0�!<1�>�K�,�5�1�>�K<u#=001�9��.������ ������ ��<�?�� ������� ��(���������� � ��<�?�� ������� ����+� ��+��!��6�� �#�����Y���,��+����Y��B������&�(�+������1�9� �1�*����'1�6���'�;�'$1�-��������

8 81�A�K�8!<� <>1�^��(��5����*� /����� �����L*����� � �D������������D����F���1�,���� ����1�*����1� ���'1�6����;��1�)���7����������

8<_�1�����K�( �A!<51�(��5� ����������*� ����������� ��+�����������"������F��(1�-����1�*��&�1� ��&1�6���;�'1�-�����$��

8"<#(=1�_�K�, 00!1�#�K�,"5]1�8�K�8 <5=!�1�.�K�#(="�5!=!<- ��1�<��>����� ���� �����+���� ��+�����+�+�����������������������6�6������� � �������*��� ��� ��������+�6��������������������������������1�B���1�*����1� ���16��$��;$�&1�-�Y�����'�

( �A!<51�(�� ��(� � ��*����� ���� ���������� ��6��������� D�.<!!�!1�(��!���!��%����������������&�����P�����"�����������������"��������������(�,+������6+��D�_�8��#�� ���1���$���6�����;����

( �A!<51�(�� ��5� ����������*� ����������� ��+�������� D�^�<^1�<��_���!��%����������!��������P�������P��$�+����,+������6+��D�_�8��#�� ���1���$&��6����&;����

(= �>�!<1�9��,�K�@ �.1�5��9��(� � ���� ����������*� �����������D����������� ����5�� ��8��Y�6+��Y����� ������1��� � ���Y�6+� ������ ����������������� ����������������+��A�(�S(�������1�!�� ���+1�*����1� ���1�6�����;���1������$��

��!(����" -���� !�� �����."�� �� � ���� ,�*��,��/��+�����������

�'

���������������������� ��������������2���������������������

(="1�<��-�K�#"�1�5��9�K�@ �.1�=��@�K�_ �.1�>��.�K��� 1�^��_�K�(=" �.1�5��0�K����1�(��=�K��!!1�_��(��=����+��Z�6���� ��� ��� � ���� ����������*� �����������F��(�0������(�0�����������(1� �������1�*��$�1� ���;�1�6��;��1�#�6����''��

((^<���1�9��-�K�8! #�!@1�9�����"�������������+����������������� � ���� ����������*� �������������*�������������������+�� ��������� ��1�(�S(�F��(�>��(1�#�+������1�*��&�1� ���1�6�����;�$�1�-�Y�������

(=!�1�>��#� ����������;����������Y��B����Y�� ��� �����Y;��6� �� �����������Y��B����Y�����+���� ����������*� �������������+�������S(�*���(��������0���(1�8��+����1�*����1� ���1�6��&��;&��1���$'�

(=!�1�>��5+���� ����������*� ��������������+�����;��� ������Y������ ����������w� �<�*������ D�_!�##1�>�_���!��%��0�������������������������"�����Q�������������������������@�ZD� �������1����$��*���1�6����;���

(55!<1�5��.�K��!���1�#��A�K�.�@��1�9��.�K�- <5��1�#��9��(��������+�*����6�6������� ������������ �+�6�������+1���*���6�� ��� �������� ������ �������+�������� �� ������������1����������>��21� ���Z�1�*���'1� ��� 1�6����&;���'1�#�6��7�������'�

(<(^!<1�9�K�� <1�,�������������� �:������ ��� ��Y�6+����� S(�+������1�(+��+����1�*�����1� ���1�6�����;��$10������$��

> �!(^1�(�����-�K�> �!(^1�(��<�K�,��=!�<1����!����K�8!(= < 1�.��=�K�0!<<!�< 1�=����� *����2E��������� �����/���������� N���������������*� /����� �����L*�����*�%�����E����1���F��21�9����������1�*��&1� ���1�6���$�;���1���:����$��

> #1�"�K�> #1� ��^��<�*��������� � ���� ����������*� �������������F��(�>��(���������(1�>����+�1�*����1� �$1�6�����;���1�>�����'''�

> ##1������K�# = @1�,����K�^= �1� �� �K�9= 1�.��9��-���� � ���� ����������*� ����� �������������+����(1#� ���8����1�*���&1� ��&1�6����;�$1�-�Y79� �����$��

>!<A �1�,�� �K�.��- <5��1����.�K��05"#1�8��-�K�( <�!@1�>����� �Y�6+����� ����������� �:������ ��� ��������������+�^�;����������1�(�S(�����(�+�����(1�(+�����1�*����1� ���1�6���'�;�'�1�������$��

>!�A�(1�.�K�, ,, <!�� 1�#�K�>��." <>1�.��������� ����:��������*�;���� ��� ��������� ��<��������%�� �� � ������ ����D��������� ����+�+��������������������� ����������+�*�����S(�����(�+�����21��� �� 1�*����'1� �&1�6�����;��&1� 6�������

>" <5!1�������1&����������"��8������������:�-�������������!����������������-!������������''��������-� ������� �8��+����������(�I �����8���N�����%� ;�(�������.����2E�����(�I �����8���N�����1�" �*�������0���������-� ���.����1�8����=��:� ��1��''��

>"�( �1�9��<�K�,< ##!1�^��_��(Y�����Y������ � ������ ������� ������������1�����������������1�+������Y����1�Y�6+��������� ���� ����������*� �������������F��(�+�����21�_��+� ��� 1�*����1� ���1�6����&;���1���*�������

!�#5�1�(��_�K�!���#1������,��+���������6�� �������������� ��������� �������5+��*��������+������������������ �������� ��D��B6��� ������������������Y����+��� �;����������;�6��D������������P1�B���1�*����1� ���1�6���'&;��'1���*�������

.�] �!]1�(��-�K�.<�00!@1�#��-�K�� @> �1�>��̂ �K�0�<!#1�!�K�(!,!> 1�<�K�( 55 �!1�.�K�- >!_!��18��<��(� � ���� ����������*� ����������D�����6+���������� ������ �+�����+�����������Y��������������� �����+6+����� ����� ��������� �������+����+��6Y��S(�����(�+�����(1��� �� 1�*�����1� ���1�6�����;��$1�-�Y���'''�

��!(����" -���� !�� �����."�� �� � ���� ,�*��,��/��+�����������

��

���������������������� ��������������2���������������������

= <-!���1� �K�]"(^!<- �1� �K��@#^ 1� ��(������� ���� ��<�6���� ��������� ������+�6�� ������ �� � ���� ����������*� ������������S(�����(�+�����2$��� �� 1�*�����1� ���1�6�����;�&&1�-�Y�������

=!<� �>!];A!<>"�1�>�K�<"##!�1�,��(������������������������ ��<����� � ���F�����R��1���21�8��� 1�*����1� ��&1�6��&��;&��1���*�������

=!##1� �K�("����.= -1�8�K�5 @�<1�8��8�K�!,#5!��1�<�� #� ������ ������������ �+�� �� ����� ��������� �+��� � ���� ����������*� �������������������Y���B����Y�6+��Y��;�������������������������+���(1�����@�Z1�*�&�1� ���1�6�����;$�1�>���������

=�..��#1�>�� �����*���� ��� � �+���� � �� �� ����������*� ����� ��������� ��� � � � �+��8�+����� F��(�>��21�� �� 1�*����1� ��&1�6����;��1�9��Y�������

=#� 1�@��_�K��� 1�^��_�K�="�.1�#��_�K�(="1�<��-��!��������������� ������� ���Y�6+��Y����� ��B6����� ���-=(�� ��� � ���� ����������*� �����������������F��(�0������(�0�����������21� �������1�*��$�1� ���;�1�6����;��1� �����''��

^!��!>@1�,��(�K�-���!<1�<��8��5+����������� ������Y������� D�9"881�^��A��0�K�^!��!>@1�,��(�K�, �-!<1����!��%��+�������P��"��������������������+���������@�ZD� �������1����&��*��&1�6�����;��&�

^!<<1�9��0��<��>��� ���� �����6�6������� ���*�*������������ ���� ���� D�� A��1�-�K�_ 55!<#1�>���!��%��+�����������������D��+����������� �����������������Y�����6�6�������#���:��� �D�=������ �������1����&��6���;���

^!<<1�9��0��<�K�_@���!1� ��=�K�("<<�!1� ��<�� 6�6�����D��������������������6+� ��� � ����+�����;� �� ���6������� ��� ��������Z� �������A�(�S(�������1�!�� ���+1�*����1� ���1�6���&�;���1������

^,,1�!�K�- @<1�8�K�#(=�!.!<1�_�������������� �:������ ��� ��+�������������+��������������� S(�D���(1(�Y1�*���&1� ���1�6���&1���$��

^<!�,!1�=�K�]!�>�!<1�<�K�0�#(=!<1���1�0!�#51�=������ ��Y���+��������������� ����������6��������� ��F�����R�1���21�8��� 1�*�����1� ��&1�6��&��;&��1���*�������

�� 1�^��_�K�="�.1�#��_�K�=# 1�@��_�K�8!��!51�-�K�(="1�<��-��(� � ���� ����������*� ����������������6����� ����8��Y�6+��Y���D������������%��6���������Y���B������8��������F��(�0������(�0�����������21� �������1*����1� ��&7�1�6�����;���1�-�Y���''&�

�p=<1�(��A�K�5!�0^!1�9��,�K�0 ����.1�̂ �K�_!�##1�!��(+������:���� �����+��6��������� �������� ��� � �������Y�������Y��+����� ����:��� ��<����+������+�6�����B���� �� ������ �+������������������ ����^�;���� ��,(� �F��(�+�����(1�_��+� ��� 1�*��&�1� ��&1�6�����;���1�-�Y�������

- <(= �1�5�K�(= 8 ��!1���K�^ ,� �#^�1�(�K�<�. �1�>�K�- .��1� 9�� ,�� ���� �6+� ��Y6�� ��� �+��� � ���� ����������*� ������������F��(�0������(�0�����������21� �������1�*����1� ���;�1�6���;��1�9� ��������

-"�5�1�9��!�K�= <A!@1�9��_��5���������+���Y�6+����� ��+�����6����������������� D�-"�5�1�9��!���!��%����������������������������&���������� �����D�" �*����Y����(����� ��1����'��6���&�;����

-]#1� !�K�-q�>!]1� �K�.g-!];A��� - �>#1� 9�� (�K�- <5�-�>!�� #�-"� #1� 9�K� ,!<!]1� 9����� �+�����+��������+������:���� ������ � ���� ����������*� �����������F��(�+�����21�_��+� ��� 1�*��&&1� ��&16�����;��&1�-�Y�������

��!(����" -���� !�� �����."�� �� � ���� ,�*��,��/��+�����������

��

���������������������� ��������������2���������������������

-"�>�-1� ��A�K�0!<<!�< 1�,�� ��#�K�# �5#1�-��9��5����� ������ ��������#���Z�����4 �������E���6���*� ����� ���>(�����(���(�A����(�2��!(�7�(�2&�������1�"���4 ���1�*��&1� ���1�6���&;��1���:����$��

��!�#!�1�#��_�K�^!��!>@1�,��(��5���������+���� ������Y������� D�-"�5�1�9��!���!��%����������������������������&������8�Z���YD�" �*����Y����(����� ��1����'��6����$;�'��

>"@!1����K��^!>!1�8���K�!#"<"#1�.���K� ^,^>91�9��"��-������������ ����������*� ����������� ������ S(�������1���(�+����21��� �� 1�*����1� ���'1�6�����;�&�1����&�

,q<!]1�9�K�> @1�-��9�K�-]#1�!������ �+�����+�����������Y�����+��������� ��������Y�� ��������� ��6� �� ������ � ���� ����������*� �������������������� ����������������+��F��(�0������(�0�����������21� �������1�*���1� ���1�6���&&;���1�9��Y�����$�

,��=!�<1� ��� !�� ��K� � "#1� 9�� ��K� �-!�> � 9`��<1� ��� ��K�> �!(^1�(�� <��>��� ���2E�� ������ ����������������������*� /����� � �������:� �����*� ����� ���1���F��21�9����������1�*���1� ���1�6����;��1�)� ����$��

,�5�1�>��#�������� �������������� �:���� �����+�� ����������B������&�(�+�����2$�9� �1�*����'1� ���1�6��&;�1-��������

,_!<#1�<��>��#�������������������������+��+��������� �����+���� � ���� ����������*� �������������1�(�S(+�����21�8��+����1�*���$1� ���1�6�� �1������

Q"���1�(��-�K�_<�.=51����5+����� ������������� �����6��������� �� ������+�� �+��� �������D��*������� ������+����� ���66������� �����6�� ������*�������� S(�+�����2$�(+��+����1�*����'1� ���1�6���&;�'�1�0�������'�

<�(= <>#�1�<��(��(� � ���� ����������*� �����������������(�����(���(�+����(�F��21�@����Y1�*��&1� ���1�6�����;���1���*����$��

<.!<#1�^��#��5� ����������*� �����������������(�����(���(�+����(�F��21�@����Y1�*����1� ���1�6���'&�;�'��1�#�6��������

<�#(=001�9�K�0 "#!<1�.�K�^��(=!�1�<�K�=0#5x>5!<1�0�� ��<�?�� ��������� ����+��6���������� ��������� � ��6���� ���B������&�(�+�����2$�9� �1�*����'1� ���1�6���&;&'1�-��������

<u#(=001�9�K�,� 5!1�^�K�8�55��.!<1� �K�5=- #1�(�������������� �:������ ����<�%D��������� ��6��� ��6���������66������� �� ������6��+����Y��+�����(�>��(�+����21�9� �1�*���$�1� ���1�6��$�$1�>������$��

# �5#1� 0��.�� �����"������$����"�������� �� �����Q�����:�-�������� "����� �� ������������ �� ������� �������������� ������ !������� ���������-!��� ������� �''��� $�� ���5���� �>�������� ���,��������� ��(�I ����(�L ����%�;�(�������,N�;.����2E�����(�I ���� ����1�" �*��������0���������-� ���.����1�8����=��:� ��1�''��

# �5#1�0��.�� ��>������� ������<������������������ ������������������ '1�*%>�)� ��� ������ !���������������-!���������������������=���Q�������9��������:�2E����?�� ������2E�� ���$��������>������2E���-���������,��������%� ;�(�������,N�;.����2E�����-����� ��A���� J��1�" �*��������0���������-� ���.����1�8���=��:� ��1����$�

# �5#1�0��.�� �K�."!>!#1�<��-��(�K�( ## ��1�.��>�K�-!9S 1�.��!��.�K�A #(�(!�#1� ��(��(������:�2E���?�� ������2E��������3������ �:��������� ���/������������6����6����� ��<�%���������*� /����� �����L*���� � �1��� ��������B���� ������1�:(�A���(���(�F��(�B�����21�8����=��:� ��1�*���'1� ���1�6�����;���1���:�����$�

��!(����" -���� !�� �����."�� �� � ���� ,�*��,��/��+�����������

�&

���������������������� ��������������2���������������������

# �5#1�0��.�� �K�A #(�(!�#1� ��(�K�-<1���K��"�!#1�9��!��#�K�, �of1�5�� �� 6�6����� �� ����*� /����� �����L*����� � �D�������L������������N���������*��� ���2E�����?�L������1�:(�A���(���(�F��(�B�����218����=��:� ��1�*���&1� ���1�6�����;���1�������''��

5=!��!�1�.��=�K�- >!_!��1�8��<��5���������+���Z� �� ��������� ��������������� Dyyyy��F��������P����������������� ������,+������6+��D�����\�0�����1�����������6�

5<!<v1�>�� ��<�?�� ��������� �� �������6��+����YD��+�������������Y��*���������S(�����(�+������1��� �� 1�*����1� ��1�6���$�1�0�������&�

"�>!<_>1�9��(��!�K�.�<�1�>��>�������������� �:������ ��������� ������������� � ����������� � �Y��S(+�����21�(+��+����1�*�����1� ���1�6����;��1�9� �����$$�

A #(�(!�#1� ��(�K�A #(�(!�#1�-��-�� �� 6�6��������������������6��������;���� �*���� ��������6��������w�>(���(�������������1�8����=��:� ��1�*���1� ���1�6���'&;�'$1����7)� ������

A!<-5!�1�-�����(� � ���� ����������*� �����������5A5%D����*�����S(��(�1"�(�F��(�1����21�,�����1�*���$1 ��&1�6�����;��'1�#�6�����$��

_<�.=51�#��(�K�]=�.1�9�K�� <<�(^1�9��_��� +������ �����6�6��������������+� ������������6������ ��71�AS21�8��+����1�*��$1� ���1�6�����;��'1�9� ��������

_@���!1� ��=�K�^!<<1�9��0��<�K�("<<�!1� ��<��(��������+D��+����� ����� �������6�6�������0��(�>�!(��P����1�#� >����1�*���$1�6�����;&'�1���$'�

@ �.1�5��9��-������������ ����������*� ������������� ��������S(�1�(�F��(���(�1����21�#�+������1�*����'1� ��1�6�����;���1�-�����$��

@ �.1�5��9�K�(= �>�!<1�9��,�K�>"��!; �_ @1�#��.���+���������6� �� ���B6����� ����-=(�� ���� ��� ��+��� � ���� ����������*� �������������A�(�S(�������1�!�� ���+1�*����1� ���1�6���&�;�&�1�0������$��

]!]] ��!51���K�0!��o1�-�K� �A!#�9`��<1�-��5A5��5� ����������A� �����5���%� �� � ;�66�6������� ���������#���Z�V�� ��� ��������2��������#�����1�-�L���1�*���1� ���1�6�����;��'1������