10
TECHNICAL ADVANCE Identi®cation of transposon-tagged genes by the random sequencing of Mutator-tagged DNA fragments from Zea mays Steven Hanley 1 , David Edwards 1 , David Stevenson 1 , Stephen Haines 1 , Matthew Hegarty 1 , Wolfgang Schuch 2 and Keith J. Edwards 1,* 1 IACR-Long Ashton Research Station, Department of Agricultural Sciences, University of Bristol, Long Ashton, Bristol BS41 9AF, UK, and 2 Zeneca Wheat Improvement Centre, John Innes Centre, Norwich NR4 7UH, UK Received 27 March 2000; revised 25 May 2000; accepted 8 June 2000. *For correspondence (fax +44 1275 394 281; e-mail [email protected]). Summary We have used a universal adaptor ampli®cation procedure to isolate random Mutator-tagged fragments from Mutator-active maize plants. Direct sequence characterization of 761 Mutator-tagged fragments indicated that a signi®cant number were homologous to sequences within the public databases. The ability of Mutator-tagged fragments to detect homology was not related to the length of the sequence within the range 100±400 bp. However, fragments above this size did show an increased chance of detecting homology to either expressed sequence tags or genes. Characterization of the insertion sites of the Mutator elements suggested that while it does target transcribed regions, Mutator does not appear to have any site preference within the transcription unit. Hybridization of previously unidenti®ed Mutator-tagged fragments to arrayed cDNA libraries con®rmed that many of these also showed homology to transcribed regions of the genome. Examination of back-crossed progeny con®rmed that all the insertions examined were germinal; however, in all but one case, sel®ng ®ve individual Mutator- tagged lines failed to reveal an obvious phenotype. This study suggests that the random sequencing of Mutator-tagged fragments is capable of producing both a signi®cant number of interesting transposon tagged genes and mutant plant lines, all of which could be extremely valuable in future gene discovery and functional genomics programmes. Keywords: Mutator, transposon tagging, Zea mays, sequencing. Introduction The maize genome is relatively complex, presumably due to its ancient allotetraploid origins (Gaut and Doebley, 1997) and the presence of large numbers of both retro- elements and transposons (Edwards et al., 1996; San Miguel et al., 1996). The number and variety of trans- posable elements within the maize genome have greatly facilitated its use in insertional mutagenesis programmes, whilst its allotetraploid-based gene redundancy has allowed the characterization of mutants which may be lethal in a diploid species. These features, which limit the use of maize as a model for cereal genome structure, make it an eminently suitable model for the study of cereal gene function (O'Sullivan et al., 2000). Transposons were ®rst identi®ed in maize in the late 1940s by Barbara McClintock, as mobile pieces of genetic material acting as mutable elements (McClintock, 1950). Since then a variety of different elements have been characterized and used as molecular tools. Early studies primarily worked with Ac and Spm transposable element systems (Wessler, 1988). The Plant Journal (2000) 22(4), 557±566 ã 2000 Blackwell Science Ltd 557

Identification of transposon-tagged genes by the random sequencing of Mutator-tagged DNA fragments from Zea mays

Embed Size (px)

Citation preview

��������� �����

����������� � ��� � ������� ���� �� ��� ���� ��������� � ������������� ��� ������� ��� �����

������ ������� ���� �!�� �� ���� ������ ��� ������� ���� �� "����! �������� #����� ������$ ��

%���� &' �!�� ��(

�������� ��� � �������� � � ��� ����� �� �� ������ ���� �������� ������� � �� ���� ��� �� ��� �� ���� ��

���� �!� �"� �#$%���� &��� ��������� �� ��� '�� ��� �� ��� (��)��� (�� *�+� �"

�� ����� �� ��� � ����� ������� �� ��� ����� � ����� � � !� ����"#$%� %�����%!��! � &'�( )** +��� ,-* ��+� �./��0 1����"��2����344�� "� " 15"

������

#� ��� � �� ������ � ���� ��������� �������� � � ��� ���� ������������� �������

��� ������������� ��)� ���� ' ������ ������� ��������)��� � *+� ������������� �������

�������� ��� �������� ������ !��� ����� � ������� !����� ��� ������ ��� � ' ,��

������ � ������������� ������� � ������ ����� ! �� ������ � ��� ������ � ��� �������

!����� ��� ���� �--./-- ��' �!����� ������� ��� ��� �)� ��� �! � ����� �� ����� �

��������� ����� � ������ �0��� �� ������� �� � ���� ' 1�������)��� � ��� �� ����� ���

� ��� ������� ������� ���� ��� ��� !���� �� �� ����� ��� ������ ����� � ������� �� ��

���� � ��� �� ��� ���������� !����� ��� ��� ������� ����' �������)��� � ������ �� �����������

������������� ������� � ����� ���� ������� ������� ��� ��� � ��� � � �!��

����� � ��� ������ ����� � ��� �����' 0������ � ��2��� �� ������ ������� ��� ��

��� �� ����� �0����� !��� �������3 �!����� �� �� ��� �� � �� ����� ��� ��������� ��������

����� ���� ����� � ����� � ���� ��������' ,�� ���� ���� � ��� ��� ���� ��������� �

������������� ������� � ����� � �������� ��� �������� ������ � ������ ���� ��� � �

����� ���� �� ����� ���� ���� � �� � !���� ���� �� �0������� ������ �� ������ ���� �� �����

�� �������� ������ ������� '

%��!�� 4 �������� ��� � � ������� ��� ��� ���������'

����������

��� /��6� 7�!%/� �� ��0�����0� %/�0�(8 ���� /�40� � �

�% ��� �! ��!� �00%������0%�� %��7�!� &9� � �!� %�40��8

+--�5 �!� ��� �����! � %' 0��7� ! /4��� %' 4%�� ����%.

�0�/�!�� �!� ���!��%�%!� &��2���� � ��"8 +--:� ;�!

��7 �0 � ��"8 +--:5" ��� ! /4�� �!� ������� %' ���!�.

�%��40� �0�/�!�� 2����! ��� /��6� 7�!%/� ���� 7����0�

'� �0������ ��� �� �! �!�����%!�0 / ��7�!���� ��%7��//��8

2��0�� ��� �00%������0%��.4���� 7�!� ��� !��! � ���

�00%2�� ��� ���� ����6���%! %' / ��!�� 2�� � /�� 4�

0����0 �! � ���0%�� ��� ���" ����� '��� ���8 2�� � 0�/�� ���

�� %' /��6� �� � /%��0 '%� ����0 7�!%/� ��� � ��8 /�1�

�� �! �/�!�!�0� � ���40� /%��0 '%� ��� �� �� %' ����0 7�!�

' ! ��%! &<=; 00���! � ��"8 ����5"

���!��%�%!� 2��� >��� ���!��>�� �! /��6� �! ��� 0���

+-*�� 4� ?��4��� � �0�!�% 18 �� /%4�0� ��� �� %' 7�!���

/������0 � ��!7 �� / ��40� �0�/�!�� &� �0�!�% 18 +-��5"

;�! � ���! � ������� %' ��''���!� �0�/�!�� ���� 4��!

���� ����6�� �!� ��� �� /%0� 0�� �%%0�" ���0� �� ����

���/���0� 2%�1�� 2��� �� �!� ��� ���!��%��40� �0�/�!�

�����/� &@���0��8 +-��5"

,�� -�� '����� &����5 $$&*58 ���A�::

����� ?0� 12�00 ; ��! � ��� ���

�%2����8 ��� .� � �� &.�5 '�/�0� %' �0�/�!�� ����

��! � 4� %/� ��� ���!��%�%!� %' �%� � '%� /��6� 7�!�

/ ��7�!����8 '%� ������0 ����%!�B ���� ��� �����!� �! ��7�

%�� ! /4�� &+�A+��5� ���� ���!��%�� ��� ���0� ���%!� �!�

���� ������ �% �!���� ���'���!���00� 2����! �!� ��% !�

7�!��8 0����!7 �% � '%�2��� / ����%! '��C �! � �% �!

!0�!1�� 7�!� 4� � �% +�� ��/�� 7������ ���! ����

%4������ 2��� ��D��� �0�/�!�� &@�04%�8 +--�5".�.4����

� ���!� �% ���!��'� ���!��%�%!.��77�� 7�!�� ���� !��0

�� �!�0� 4��! ���!%����.4����8 2��� 0��7� ! /4��� %'

���!��%�%!.� ���� �0�!�� 4��!7 �(�/�!�� '%� �! �0�����

/%���%0%7� �0 %� 4�% ��/� �0 '��� �� &� �� 7�0�! �!�

@�04%�8 +-��5" E��!%����.4���� � ���!� ��C ��� ���

��%� ��%! %' �0�!�� ���� ��� �%/%6�7% � '%� ��� �>

.�.�!�����%!�" ���!��%�%!� 0�!1�� 7�!��� �00� �% ���

���!%���� ��� ���! ���!��>�� ���% 7� � ������ 7�!���.

��%!�8 ��!7 /%0� 0�� /���%�� � � �� ��4����6���%!.

4���� 0%!�!7 �!� E��" �0��% 7� ����!���00� ��!�%/ �! ���

����%� �8 �!� �����'%�� ��C ���!7 0��7� ! /4��� %' �0�!��8

���� ��% �� �� ��� 0�� �% ��� 0%!�!7 �!� ���� ����6���%!

%' ������0 7�!�� %' �7�%!%/� �/�%���! � &?�!!��6�!

� ��"8 +-��� @��� � ��"8 +--:5 �!� �� ���00 � �%2��' 0 �%%0

2��� 2�� � �% ���!��'� 7�!�� 2��� !%��0 ���!%�����"

�%�� �� �!�0�8 ����.��0� ��� ���!��%�%! / ��7�!����

&��� �%. �00�� F7�!� /� ��!�=� ���0�� �!� ?��77�8 +--�5

��� �00%2�� ��� ���!��> ���%! %' �0�!�� %!���!�!7 �!���.

��%!� 2����! ��� �> 7�!�� &?�!��! � ��"8 +--�� �� �!�

������!���!8 +--�5" ?� � �� ����.��0� ��� ���!��%�%!

/ ��7�!���� �� 4���� �%! 7�!%���� ������ ���! ���!%.

����8 �����%6�7% � .� �!�����%!� �! 4� ���� ���8 ��/%�.

�!7 ��� !��� �% 7�!����� �%/%6�7% � �0�!��" �� �!

�(��!��%! �% ��� ����.��0� ��� ���!��%�%! / ��7�!����

��% �� ��8 $��� � ��" &+--�5 ���%���� ���� .�.��77��

'��7/�!�� % 0� 4� ��%0���� '�%/ �!����� �0 �0�!�� ��!7

E�� �! %!G ! ��%! 2��� � /%��>�� �����%�.�/�0�> ���%!

��%�% %0" ���� ��% �� �� ��� ��� ����!��7� ���� � 0��7�

! /4�� %' .�.��� �> '��7/�!�� �! 4� 7�!������ 2���.

% � �!� ���%� 1!%20��7� %' ��� ��C �! � ���� H�!1� ���

�0�/�!�" < � �!������ �! 7�!�����!7 � � 40� ' ! ��%!�0

7�!%/� � ���% � � '%� /��6� 0�� � �% �!�����7��� 2������

��� ��% �� �� ����0%��� 4� $��� � ��" &+--�5 % 0� 4�

��� �% 7�!����� � 0��7� ! /4�� %' .�.��77�� '��7/�!��

'%� ���� � ��C �! �!7" ;�C �! � ���� ����6���%! %' � 0��7�

! /4�� %'.�.��77�� '��7/�!�� 2% 0� !%� %!0� ��%���� �

������%�� %' .�.��77�� 7�!�� '%� �� �! ' � �� ' ! ��%!�0

7�!%/� � �� ����8 4 � 2% 0� �0�% ��0� %!>�/ %� ��G� �

��� ���%������ ���� .� ���7��� 0%2. %��8 7�!�.�� �

��7�%!�" �! ���� ���%�� 2� ��� ��4� 4%�� �! �/��%���

/���%� '%� 7�!�����!7 0��7� ! /4��� %' .�.��77��

'��7/�!��8 �!� ��� ��� 0�� %4���!�� '�%/ ��C �! �

���� ����6���%! %' ������0 � !���� .�.��77�� '��7/�!��"

< � ��� 0�� � 77��� ���� ��� /�G%���� %' .� �0�/�!�� �%

�!���� �!�% 0%2 %��.! /4��8 7�!�.�� � ��7�%!� %' ���

/��6� 7�!%/�8 �!� � 0��7� ! /4�� %' ����� .�.H�!1�!7

��7�%!� ��%2 ��7!�> �!� �%/%0%7� �% 1!%2! �(�������

��C �! � ��7� &�;��5 %� 7�!��"

5� ��� �� �� �� ��

�����%� �/�0�> ���%! ��!7 � /%��>�� ��%�% %0 %' $���

� ��" &+--�5 ��%� �� '�%/ ,� �% �� .�.��77�� '��7/�!��

���.�.� ���� �0�!�" ��� '��7/�!�� ��!7�� �! ��6� '�%/ +��

�% I���4� &$�7 �� +5" J��!7 7�!%/� �� �������� '�%/

�� �0�!��8 ��C �! � �!'%�/���%! 2�� 7�!������ '%� �:+

.�.��77�� '��7/�!��" �% 7�!����� ����� '��7/�!�� 2�

'% !� �� !� ������ �% /%��'� ��� ��%�% %0 %' $��� � ��"

&+--�5" $����0� 2� ��� �� ��� ! /4�� %' �/�0�> ���%!�

4�'%�� �0� ��%��%����� '�%/ �2% �% %!�8 �!� �� %!�0� 2�

6����� �' �!�0���� %' �/�0�>�� .�.��77�� 4%���� '��7/�!�� %! �K��!�� ��!7 �%0�� ��0�/��� 7�0�".�.��77�� �� '��7/�!�� 2��� �������� '�%/ '% � �!����!��!� .�.� ���� /��6� 0�!�� 4� ��7����%! 2��� .��� �!� .���8 '%00%2�� 4� 0�7���%!�% 4%�� � .���.4�%��!�0���� �����%� �!� � !%!.4�%��!�0���� .��� �����%�".�.��77�� '��7/�!�� 2��� ��0� ��� 4� �/�0�> ���%! 2��� ��� ,,E.0�4�00�� .� � ��.��� �> ���/�� � ?8 �!� �! .��� �����%�.��� �> ���/��" $��7/�!�� �� ��� 4%��%/ %' ��� 7�0 ���� � ��6� %' ����%(�/���0�+�� 4���� �!� ��%�� �� ��� �%� ����%(�/���0� ��� 4����" ;%/�'��7/�!�� �� ��� 0%2�� �!� %' ��� 7�0 ��� �����!� �� / 0���0� 4�!��& � �00� �2%5" ���� �� � � �% ��� �! %/�0��� ������%! %' � � ! 0�%���� �%��� ,� �!� %' ��� �/�0�>�� '��7/�!� 4� ��� ��C �� �%0�/�����"

��� � ��� +���� �� �0"

� ?0� 12�00 ; ��! � ���8 ,�� -�� '������ &����58 $$� ���A�::

��0�6�� ��� .��� ������ ��%! ���� �����!� �! ��� �!������

������� %' ��� .���8 .��� .�$ �!� .�/ �0�/�!��8 �%

�����0� � 7�!%/� �� �!�� ��� '%�.�.��77�� '��7/�!��

4�'%�� �/�0�> ���%!" �! % � ��!��8 ����� /%��> ���%!�

��� 0��� �! 7������ ����%� �4�0��� %' ��� .�.��77��

'��7/�!� ��%>0�" �%2����8 4� � �� ��� /%��>�� ��%�% %0

��0��� %! ��� �����! � %' � .��� ���� �! ��� �!������ ������8

%!0� .�.��77�� �0�/�!�� 4�0%!7�!7 �% ��� .���8 .��8

.�$8 .�/ 0����� ��� �/�0�>��" ������%!�00�8 .��� ��

��!������ �% ��9 /����0���%! �!� %���� %'.� 2�� � ����

!���7%!� /����0���%!8 �!� /�� �����'%�� 4� �!� ���� �!�

2�00 !%� ��%� � .�.��77�� '��7/�!�� 4� ���� ��% �� ��"

�! ��� 2%�1 ��� ��4�� ���� 2� �%�� �% �� .��� �� ���

'% �.4��� �� %7!���%! ������ ��%! �!6�/�� �%2����8 ��!7 �

/%��>�� �����%�8 �!� '% �. %� ��(.4��� ������ ��%! �!6�/�

2�� � �%�� !%� �� %7!�6� � ��C �! � 2����! ��� .�.

�0�/�!� ���/�!�0 ������ % 0� 4� ���"

����� ����6���%! %' ��� �:+ ��C �! �� ��!7 ���

�J�<�;;��?��� ��%7��/ �����0�� ���� ,�- &�*K5 2���

�������!��� / 0���0� ��/��8 2��� �%/� ��C �! �� 4��!7

�������!��� �+ ��/�� &$�7 �� �5" ����� ��� �2% ����%!� 2��

��� �> ��C �! �� ��� �������!��� / 0���0� ��/��" $����8

��� !�� �� %' ���.� ���!��%����%! ���!� &���0� ���%! ������

���! �( ���%!5 0���� �% ����!��0 �!�����%!� 4��!7 %���.

�������!��� �! ��� ��%7�!� 2��! %/����� �% !�2

�!�����%! ���!�� &�00�/�! �!� $���0�!78 +-�:5" ;� %!�0�8

'��7/�!�� 2����! ��� ��6� ��!7� �/�!�40� '%� 4%��

�/�0�> ���%! �!� ��������%! %! ��!�� ��!7 �%0�� ��0�/���

7�0� &��A:��4�5 2�00 4� ���'���!���00� �� %�����" ��/%��0

%' ��� � �0� ��� ��C �! �� 0�'� *�� '��7/�!��8 %!�����!7 %'

,�� !�C � ��C �! �� �!� +�� ��C �! �� �%��! �%

�������!� ��%�� 2�� � % ���� / 0���0� ��/��" � %/���.

��%! 4��2��! ��� ��6� ������4 ��%! %' ��� !�C � �!�

/ 0���0� ��C �! �� �!�� ���� ���� ����� 2�� !% ��7!�> �!�

��''���! � 4��2��! ��� �2%" ��� *�� ��C �! �� 2��� ���

�% � ���! ��� �� �!� ��%���! ����4���� ��!7 4%�� ���

?��;�� �!� ?��;�L ��%7��/� &�0�� � 0 � ��"8 +--�5" J��!7 �

�.%'' � ��0 � %' ��.�*8 � �%��0 %' :* &+*"�K5 �!� *� &+�":K5

��C �! �� ���� ��� � ������ �%/%0%7% � ��C �! �� �! ���

?��;�� �!� ?��;�L ���� ���8 ����� ����0�" �* &�",K5 %' ���

��C �! �� ���� ��� ��7!�> �!� �%/%0%7��� 2��� 4%��

?��;�� �!� ?��;�L ���� ���8 /��!�!7 ���� �� ��C �! ��

&+-"�K5 %' ��� *�� !�C � ��C �! �� % 0� 4� ��!������0�

���!��>��" ��40� + %!���!� � 0��� %' ��� .�.��77�� '��7.

/�!�� 2�� � ��� ��7!�> �!� �%/%0%7� �% �!����� 2����! ���

� 40� ��C �! � ����4����" <' ��%�� ��C �! �� 2�� �

��%2�� �%/%0%7� �% �!����� 2����! ��� � 40� ����4��� ���

��� ?��;�� ��%7��/8 �:"�K &,: % � %' :*5 2��� ������ /��6�

�;�� &��%� �� 4� ��� /��6� 7�!� ��� %���� ��%7��//�5

%� �� � �;�� &��%� �� 4� ����% � ��C �! �!7 ��%.

7��//��� ;���1�8 +--�� ����BDD222"6/�4"�������"�� D

6/�4D�;�M��%G� �"��/05" �! ������%! �% /��6� �!� �� �

�;��8 ��� ?��;����%7��/ ���� ��� �%/%0%7� �% ��( �!�����

��0���� �% ������ ��� .�0 ���!��%�%! &��C �! � �*�5 %�

6����� $' �������!����%! %' ��� ! /4�� %' .�.��77�� ��C �! �� �����!� / 0���0� ��/�� 2����! ��� ��C �! � %00� ��%!"��� �:+ .�.��77�� ��C �! �� 7�!������ �� ���� %' ���� ��%7��/ 2��� %/����� 2��� �� � %���� ��!7 ��� �J�<�;;��?��� &E��1�! �0/��5 �%'�2����� 1�7�" ��� ! /4�� %' ��/�� � ��C �! � �� ���0� ���� �! ��� %00� ��%! �� �����!��� �� � ����%7��/ �! 2�� � ��� ! /4�� %' ��/�� � ��C �! � 2�� '% !��% 4� �����!� 2��� 7�% ��� 2��� ��� ! /4��� %' ��C �! ��8 �� � ��� �!��7�8 2����! ���� ���7%��"

.�� ��# ����� ��1���� ��-

� ?0� 12�00 ; ��! � ���8 ,�� -�� '������ &����58 $$� ���A�::

,��� �' � ���%� '��7/�!�� 2��� �%/%0%7� �% �!����� 2����! ��� � 40� ����4�����

;�C �! � � E0�!� ?��;�� ���� � ��0 � ;�6� E�%4�40�&4�5 �!�����%! ����

�* � , %�� ���� ����+? +�.�� �*+ �� !���!�0�����+� +�++�� ��**�� �� � ��!� 0� I, / 2��3� �� ��� �� -�.�, ,+� �!��%!�*- 1G�.+ %4 ���� /��� 7�+.* '%� 70 ��/�!� ��!������� +�.:� �*+ �!��%!�+, ;�: %4 ���� 70%4 0�!.+ 7�!�8 ��%/%��� ��7�%! :�.�� ,+� E�%/%����+- +�+��: ���+�, �� � �00 � �� 24 �� ��� �� *�.�� �-* �!��%!�,� +�+�+� %4 ���� %�/�� �"+�+ �� 1� 6��! ��%���! �+ ��.�� ,�* �%!. %��!7�*� +�+�+� ������ 5������ /��% �%!����0 7�!� +�.+�� ��: �%��!7�*� +�+�+* ��:��,�� %4 ���� 0��' ���/%���� �� -�.*� *,- �%��!7��� +�+�+* �����,�� %4 ���� �!�%����/ �� *�.*, ,,: �%��!7��+ +�+�+* �@�::�+� %4 ���� ���0� �/4��% �� ��.-� �-� �%��!7$�� +����- ���+*��� %4 ���� ��� ���� � �� +�.+�� ,,+ �!��%!9+� +��,+� ��-*���:"+ %4 ���� �������� �%%� �� +�.+*: ��- �%��!79$.� 1G�.+ ��-**�:� %4 ���� �%%� �� 0�4���� +�.+,� ��- �� !���!�0����9$.� 1G�.+ �@����+, %4 ���� �%%� �� 0�4���� +�.�: ,�* �%��!7�,� +��+�� +��#��� ������ �" &�0�(��5 ����!� ��4%(���������� ��.�* �,: �%��!7�*� +��,�+ %4 ���� ����%���!��%�%! ��!' 0.� :�.++ ��* �%��!7�*- +��,�� ��::���* %4 ���� �!�%����/ �� +�.++: *�� �%��!7�++ +��,�: ���5�#����� ������ ��%/%�%/� � *�.�- :�+ !1!%2!�*� +��,�- %4 ���� %���.0�1� ����%���!��%�%! ;�%!%� ,�.,: :�* �!��%! &�/�����5�*� +��,�- ���,�,�� %4 ���� ��� ���� � �� +�.�� ,-* �!��%!�*: +��,�- %4 ���� !������.�!� �� �<� ��%���! 7�!� ,�.-� +�� E�%/%����*� +��,+� %4 ���� � � ���!��%��40� �0�/�!� *�.:- �+� ���!��%�%!��� +��,+� %4 ���� ������DD�!��%! %!���!�!7 %0%!��� + �!� � +�.+- �:* ���% � ����%.�0�/�!���:, +��,+� E ������ �:; ��%����%/� � 4 !�� ����<,* ��.�- ��� �� !���!�0������� +��,+, ��:-+�*+ %4 ���� ��� ���� � �� 0�4���� �"� *+� �%��!7��� +��,+* ���%/%�%/� �8 E+ 0%!�N���5�#�����O *�.+� :+� �%!. %��!7��, +���+: ��:��:�� %4 ���� �!�%����/ �� ,�.�� ��� < ����� �(����!7 �;��,+ +���+� ����,��* %4 ���� �%%� �� 0�4���� +�.*- ��� �!��%!P�.: 1G�.+ �����+ �� � ��8 ������0 ��C �! � ,�.++ ,:, �� !���!�0�����,� +����* �����-:: %4 ���� ��� ���� � �� +�.�� -, �%��!7�:, +��+�, %4 ���� �+ 7�!� '%� *�"+ 1� �+ ��%���! +�.+, +:� �!��%!��� +��+�* �� � /��� '%� �E.��4%��0���%! '� �%� ��.** +-� �%��!7�� +��+�: �J�:���+ 24 �� ��� �� ��.�� �+� �%��!7��: +��++� %4 ���� 6���. ��%��!� ����� ���� ��� ��%� :�.�� +*� �%��!7�� �*+ �������+ %4 ���� ��� ���� � �� +�.+: +,� �!��%!��� �*� ���,�*�: %4 ���� ��� ���� � �� ��.,: +�+ �%��!7E�: +��,�* �,,++� ;�C �! � , '�%/ ����!� J; ���-:+� ,�.�� +*- E�%/%���E:� +�,++� ��::��-+ %4 ���� �!�%����/ �� +�.*: ��� < ����� �(����!7 �;�Q** +�,+�, %4 ���� EP+ 7�!�DD�� ���%�.0�1� ��%���! 1�!��� +�.+� ��: �!��%!Q-� +��,�- ��:��: �� � �00 � �� 24 �� ��� �� ��.�� �,� �!��%!�- ;�, ��*-�� �� � 7���! ��%%� 24 �� ��� �� *�.�� +�* �%��!7��� +�++�+ %4 ���� ���%����%������ ��%/����� + 7�!� ��.�� ��* �� !���!�0�����*� +�++�� %4 ���� 0%!� R/.��4�.� 9�E 4�!��!7 ��%���! ,�.,, +-� �%��!7��* +�++�, ��:+��,, %4 ���� 0��' ���/%���� �� ,�.+* +:: �!��%!��- +�++�* ��:*-�-� %4 ���� 0��' ���/%���� �� ��.,� �,, �%��!7��� +�++�� %4 ���� ����%���!��%�%! ��!' 0.+ ��.�+ +:+ �%��!7;� ��� �J�:,�:- 24 �� ��� �� +�.�: ,�� < ����� �(����!7 �;�;+- +�*,�, %4 ���� ���%�� ��%������D��%������ ���!�0% ��%� ��.,� *�: �� !���!�0����;,- +�*,+- ���+��*� %4 ���� �!�%����/ �� +�.+- ,+� �!��%!;*� +�*,+- �@+�-��* %4 ���� /�(�� �� 0� ���� � �� *�.+� �+, < ����� �(����!7 �;�;�� +�*,+� J!1!%2! ��%���! N�4 ������O *�.*+ ,++ �%��!7��+ +�++�� ���;+��+�� �� � 7���! ��%%� 24 �� ��� �� -�.�� �,� �!��%!;-� +�,+�* %4 ���� ��$.� 7�!�8 �(%!� +A� ��.+- ��+ �%��!7��� +�,*�� ��:����+ %4 ���� �!�%����/ �� ��.,- *,, < ����� �(����!7 �;��** +�,*�� ���,�� �� � ��!� 0� �� ����!�!7 ���7� �� ��.,� ,�� < ����� �(����!7 �;��*: +�,*�� �����*�� %4 ���� ��� ���� � �� -�.�� ��* < ����� �(����!7 �;���, +�,*�� ��::��+- %4 ���� �!�%����/ �� ��.,� ++- �� !���!�0������� +�,*+� ��*-+�*, %4 ���� 0��' ���/%���� �� +�.+�� ,�� ,� !���!�0�����-� +�,*+� �@�-++,* %4 ���� �%%� �� 0�4���� +�.++� ��* �%��!7

�:� � ��� +���� �� �0"

� ?0� 12�00 ; ��! � ���8 ,�� -�� '������ &����58 $$� ���A�::

��C �! �� ���% ����� 2��� ����%.�0�/�!��8 �! 0 ��!7

;�%!�� &��C �! � �*�5� ��!' 0 + &��C �! � ���5� ��!' 0 �

&��C �! � �*�5� %���.���� �%0 �%0���%���! &J*,5� �!�

������� ���!� ������� &P�+�5" �! �00 ��( ���� ��� .�

���!��%�%! ��� �!������ �!�% � %��!7 ��7�%!8 ������ ���� �0�

2����! %� 0%��0� ���% ����� 2��� ��� ����%.�0�/�!�" $%�

;�C �! � � E0�!� ?��;�� ���� � ��0 � ;�6� E�%4�40�&4�5 �!�����%! ����

J+ +��,+, %4 ���� �� '%� $� �8 %/�0��� �� ��.,� +�* �%��!7J+* +��,+, ��� ����� ��� ��� ����� �1�� 7�!� '%� ���!�1��%0��� +�.�: +�� �%��!7J:� +��,�� %4 ���� �/� 7�!�8 ��� �%0�/����� ,�.�: �+- �!��%!J�� +��,�� �J����:� 24 �� ��� �� :�.+� �*, < ����� �(����!7 �;���:�.,* ��:� ������-: %4 ���� ��� ���� � �� ��.+* ��, �!��%!�*# � , %4 ���� ����+ ��.�� �*+ �� !���!�0�����*-# 1G�.+ %4 ���� 70 ��/�!� ��!������� �%%� ��%6�/� * ��.�� �*+ �!��%!�� ;�* E ������ ��%���! N�4 ������O +�.+� ��� �!��%!�+-# +�+��: E ������ ��%���! N�4 ������O :�.+� �-* �!��%!�*�# +�+�+� ���%����� �0 �:� 1� ��%���! *�.+� ��: �%��!7$��# +����- E ������ ��%���! N�4 ������O *�.�� ,,+ �!��%!9$.�# 1G�.+ <./����0���!�'����� N-���� #�����O +�.+� ��- �� !���!�0�����,�# +��+�� ;���!� ��4%(���������� ��., ��� ��%� -�.�� �,: �%��!7�*�# +��,�+ E��%0 N%4 ����O :�.�: ��* �%��!7�� +��,�� J!1!%2! ��%���! N�4 ������O -�.,� �,� �%��!7�+� +��,�: E��%(����� N�4 ������O +�.�� :�, �!��%!�+� +��,�: ;�/�0����� �% ��P ������ ��7�%! %' $%20�%( ��� � ,�.+: �:� �!��%!�+, +��,�: ���%����� �0 ��%���! N�4 ������O +�.,� �+: �%��!7��, +��,�� ���%�%/�0 E�%.L ��4%(����������.0�1� ��%���! ��.+: *-� �� !���!�0�����*� +��,�- E ������ �/����� N�4 ������O -�.�� :�* �!��%!�:,# +��,+� E ������ �:; ��%����%/� � 4 !�� ����<,* ,�.�� ��� �� !���!�0�������# +��,+, ;��� �%����!� ��!����� N�4 ������O :�.�� *+� �%��!7P�+* ;�, � /�! �0���./�!!%������ �� +�.++ ,�: �!��%!P�+� 1G�.+ ������� ���!� ������� N6�7� 5���5�O ��.+* ��� �%��!7�:,# +��+�, �!��7��0 /�/4��!� ��%���! N�� � �������O ��.�* +:� �!��%!���# +��+�* �E.��4%��0���%! '� �%� �%/%0%7 � 9�E.4� *�.+� +-� �%��!7��# +��+�: E�%��������0�!%���%0.*.��%������.�.1�!��� *�.�� �+� �%��!7��� +��+�- ���, N+��� ������O ��.�- ,:� �� !���!�0������:# +��++� R���. ��%��!� ����� ���� N�4 ������O ��.�� +*� �%��!7���# �*+ �/ N����������� ������ ��O ,�.�- +�� �%��!7E,� +��,�: �,�-�,.+ N+4 ������O :�.�: +-- �%��!7Q�� �*� �� ���%�.0�1� ��%���! 1�!��� � ��� ��%� ��.�� ,*� �%��!7Q-�# �*� E ������ �/����� N�4 ������O +�.+- �,� �!��%!�-# ;�, �%!���!� ��/�0����� �% ��%���! ��%�������� �� +�.�+ +�* �%��!7�++ ;�, +.�/�!% � 0%��%��!�.+. ��4%(�0� � �� %(����� -�.�� +,� �%��!7�*�# +�++�� %4 ���� ��;.��0���� ��%���! ��?.�.� ��.�- +-� �%��!7��: +�++�* E ������ /%!%�� ������ ���!��%���� + N-� ���O +�.�� �,- �!��%!��, +�++�� E ������ ��%���! N�4 ������O +�.�- +�* �!��%!���# +�++�� E��%0 N%4 ����O ��.�� +:+ �%��!7;+� +�*,�, J!1!%2! ��%���! N�4 ������O ��.++ *,+ �!��%!;+-# +�*,�, %4 ���� �0%�%�0��� ���%�� ��%�.���!�0% ��%� -�.+� *�: �� !���!�0����;,+ +�*,�+ ��!!�/�0 �%.� ��� ���� N�4 ������O ��.�� �*, �%��!7;:: +�*,+� E ������ ��%���! N�4 ������O +�.�� +�� �%��!7;�- +�*,+� �����P+� �4 ������ �� :�.+� ,*� �%��!7;��# +�*,+� �4 ������ ��%/%�%/� �� ?�� �++�� ��.�* ,++ �%��!7;-+ +�,+�* J!1!%2! ��%���! N�4 ������O +�.*+ ,+� �%��!7�� +�*,�* ����-�+� �4 ������ �� +�.,* *:� �%��!7��� +�,*�+ ���-"�� N�4 ������O +�.+� ��� �!��%!�-�# +�,*+� ���%����� �0 ��%���! N����� ���� ���O +�.�- ��* �%��!7J+*# +��,+, ���!�1��%0��� + N�������� ����O ��.+� +�� �%��!7J*, +��,++ �%���.���� �%0 �%0���%���! N%4 ����O +�.** +�: �%��!7J�� +��,�� E ������ ��4%!�0 ��� ���� N�4 ������O *�.�� ,�* �!��%!��:�.,*# ��:� ���%����� �0 ��%���! N�4 ������O ��.�� ��, �!��%!

���� 0����� �����%! %' ���� ��40� �! 4� '% !� �� ����BDD222"/��6�"44�� "� " 1D/ ���%�D��!�%/M��C �! �!7"��/0"#;�C �! �� 2�� � �0�% ���� ��7!�> �!� ?��;�� ����"

.�� ��# ����� ��1���� �:+

� ?0� 12�00 ; ��! � ���8 ,�� -�� '������ &����58 $$� ���A�::

�!���! �8 �! ��� ��� %' 4%�� ��!' 0 ����%.�0�/�!�� ��� .�

���!��%�%! ��� �!������ �!�% ��� %��!7 ��7�%! %' ��� -����

7�!� &;�! ��7 �0 � ��"8 +--:5" �� ��� �/�!%.� �� 0���08

��C �! � �*� ��%2�� �%/%0%7� �% � � ������ ���5�#�����

�/����� &� ����%! ! /4�� ����,���� !� 40����� ��.

� 0��5" $ ����� �(�/�!���%! %' ��� �*� ��C �! � ��%2�� ����

��� .� �0�/�!� ��� �!������ �!�% ��� � ������ �/�����

7�!�8 ,� %' ��� �!�����%! ���� %' � ;�%!�� ����%.�0�/�!�

&� ����%! ! /4�� �$���+,*5" $ ����� ��C �! �!7 �0�%

���!��>�� ��� �� %!� H�!1�!7 ��7�%! %' ���� �!�����%!

&��C �! � Q-�5" ���� �� %!� ��C �! � %!>�/�� ���� �!

���� �(�/�0�8 ��� .� � �� �0�/�!� ��� �!������ �!�% �!

�!��%!8 0%�� �% ��� �!��%!A�(%! 4% !���� ���� &$�7 �� ,5"

9���! ���� ����%.�0�/�!�� /�1� � /%�� %' ��� ��7� %��.

! /4�� ���������� �� %' ��� /��6� 7�!%/� &;�! ��7 �0

� ��"8 +--:58 �� 2�� � ������!7 ���� S�K &��( % � %' ��5 %' ���

.�.��77�� '��7/�!�� ��%2�� �%/%0%7� �% ����������

��C �! �� � � �� ����%.�0�/�!��" ����� ��� �2% �%���40�

����%!� '%� ���� %4�������%!B >���0�8 �! % � ��%�% %0 ���

�%� � %' ������ ��%! �!6�/�� 2% 0� ��� 0 �� ��� �� %����

%' /����0���� ��C �! �� � � �� ��%�� 1!%2! �% �(��� �!

��7�0� ���������� ��7�%!�� �!� �� %!�0�8 �� ��� 4��!

� 77����� ���� .� ���7��� 0%2 %�� ��C �! �� �! 7�!�.

�� � ��7�%!� &������ � ��"8 +--�5" ������ %!�8 %� � %/4�!�.

��%! %'8 ����� �2% �%���4�0����� 2% 0� 0��� �% ��� ��� 0��

��� ��4�� ����" �%2����8 % � %4�������%! ���� �! �00 ��(

���� �(�/�!�� ��� .� �0�/�!� ��� �!������ �!�% �

���!� ��4�� ��7�%! ���% ����� 2��� ��� ����%.�0�/�!� �%��

� 77��� ����8 ������� ���� %' ��� %�� ! /4�� ���� ���.

���� � %' ��� ���7�� ����8 .� ���'���!���00� �!����� �!�%

���!� �����%!�00� � ���� ��"

�! � �����% � �� �� %' +:.�.�!�����%! �����8 ������ � ��"

&+--�5 ���!��>�� � %!��!� � ��C �! � �����!� �� ��� .�.

�!�����%! ����" @� �������� ���� �� �� ��!7 �00 *�� !�C �

��C �! ��" < � ��� 0�� 2��� �! 0%�� �7���/�!� 2��� ���

�����% � �� �� &�����% � %!��!� �B ��.9.�.�.9.9D�.�.9.�D9.9.,�5� �%2����8 % � 2%�1 � 77���� ���� ��� %!��!� ���C �! � �� /%�� H�(�40� ���! �����% �0� � 77����� &% �

%!��!� �B ��.9.�D�.�D�.�D9.9D�.� I�.9.�I9.6I�.,�5"�% �!�����7��� �' ��� ��6� %' ��� .�.��77�� '��7/�!� ���

�! �''� � %! ��� �4�0��� �% ���!��'� �%/%0%7% � ��C �! ��8

��� ��6� %' ��� .�.��77�� '��7/�!�� 2�� �0%���� �7��!��

����� �4�0��� �% ���� � �%/%0%7% � ��C �! �� 2����! ���

� 40� ����4���� &$�7 �� *5" ���� �!�0���� � 77����� ����

'%� 4%�� ?��;�� �!� ?��;�L ���� ���8 '��7/�!�� �! ��� ��6�

��!7� ��A*��4� ��� �! ����%(�/���0� �C �0 ��! � %'

���� ��!7 �%/%0%7% � ��C �! ��" �%2����8 '%� '��7/�!��

I*��4� ��� ���� � 77����� ���� ����� 2�� �! �! ������

��%4�4�0��� %' ���� ��!7 �%/%0%7% � ��C �! �� ��!7

4%�� ?��;�� �!� ?��;�L ��%7��/�" �% �!�����7��� ����

���!%/�!%! ' �����8 ��� �!�����%! ����� '%� �� � %' ��� ��

��C �! �� ���!��>�� �! ��� ?��;�� �!� ?��;�L ���� ���

2��� �(�/�!��" 9���! ��� 0�/���� ����0�4�0��� %' ' 00.0�!7��

/��6� 7�!� ��C �! ��8 �� 2�� %!0� �%���40� �% �����/�!�

��� �(� � 0% ���%! %' ��� .� �!�����%! '%� �� %' ��� ��

?��;�� D?��;�L ���� & %0 /! : �! ��40� +5" ��� ����% � .�

�!�����%!� 2��� ���! ������� �!�% ��%�� ���� 2��� ���%.

����� 2��� 7�!�� 4 � !%� ���!�0���� &��%/%����8 ,�8 ��8���!� ��4�� ��7�%!� �!� �!��%!�5� �!� ��%�� ���% �����

2��� ���!�0���� ��7�%!� & %��!7 ��7�%!�5" ���� �� ��

��%2�� ���� ** &��K5 %' ��� �!�����%!� 2��� 2����! !%!.

���!�0���� ��7�%!�8 �!� ,: &*�K5 2��� �! ���!�0����

6����� 7' ����� ����6���%! %' ��� �*� �!� Q-� .�.��77�� ��C �! ��"��� �%����%! %' ��� .� �0�/�!� 2����! ��� � ������ �/����� 7�!� �!� �����0���%!���� �% ��� ;�%!�� �0�/�!� ��� �!�� ����" ;�C �! �� ����!7 ����%!7 ?��;�� �%/%0%7� &� ��0 �T ��.,:5 �% ��� ;�%!�� �0�/�!� ��� !���0�!�� &4� +A�:5" P!%2! %� � ��� ��� �!��%!� 2����! ��� �/�����7�!� ��� �! 0%2�� ��� &4� +��A�*-8 ,��A�+�8 �:*A-,-5" P!%2! %�� ��� ��� �(%!� ��� �������!��� �! ���� ���8 �%7����� 2��� ��� �/�!%.� �� ��C �! �" �*� ��C �! �� &4� +A�+�5 ��� �� �% ��� �!�� ���� .� � ���!�����%!8 2������ Q-� ��C �! �� &4� �+:A-,-5 ��� ,�" �! ���� �(�/�0���� !%!. %��!7 ����!� �� �����!���"

�:� � ��� +���� �� �0"

� ?0� 12�00 ; ��! � ���8 ,�� -�� '������ &����58 $$� ���A�::

��7�%!�" ���� %4�������%! � 77���� ���� 2��0�� .� /��

���7�� 7�!��8 2����! 7�!�� �� �%�� !%� ������ ���� �!� ����

���'���! �" �%2����8 �' ��� %4�������%! ���� .� � ��

���'���!���00� ���7��� 7�!�� �� %��� �8 ���! ��� /�G%����

%' % � .�.��77�� '��7/�!�� ��% 0� 4� �%/%0%7% � �%

7�!��" U�� ���� �� %!����� �% % � %4�������%! ���� %!0�

+-"�K %' ��� .�.��77�� ��C �! �� ��%2 �%/%0%7� �%

1!%2! �;�� %� 7�!��" �% %!>�/ ���� � ��7!�> �!�

! /4�� %' % � !���!��>�� .�.��77�� '��7/�!�� 2���

�0�% ������� '�%/ 7�!��8 ,��� ������� /��6� 0��' ��

0%!�� 2��� ��4����6�� 2��� �� ��!�%/0� �%��!8 !�.

��!��>�� .�.��77�� '��7/�!��8 �!� 2��� �2% .�.��77��

'��7/�!�� �����% �0� ��%2! �% ����� �%/%0%7� 2���

������ ��� /��6� �E.��4%��0���%! '� �%� &���5 %� ���

� /�! ���, ��%���! &���5" $%00%2�!7 � �%����%7�����8

+� ��4����6�!7 0%!�� 2��� ���!��>��" ;�C �! � �!�0���� %'

����� 0%!�� �����0�� !�!� !�C � ��C �! ��" ;�C �! �

�0�7!/�!� %' ��� ��� �!� ��� %�����%!��!7.�.��77��

'��7/�!�� ��%2�� ����8 2��0� ����� 2�� ��7!�> �!�

�%/%0%7� &��!7�!7 '�%/ �� �% -�K �� ��� ! 0�%���� 0���05

4��2��! ��� �2%8 �! !%!� %' ��� !�!� ���� �(�/�!�� 2��

����� +��K �%/%0%7�" ���� � 77���� ����8 2��0� ��� ��

6����� /' �%/�����%! %' ��� ��6� %' .�.��77�� '��7/�!�� 2��� ����� �4�0��� �% ���� � �%/%0%7% � ��C �! �� �! ��� � 40� ����4����"��� *�� !�C � ��C �! �� 7�!������ �! ���� ��%7��/ 2��� %/����� �% ��C �! �� 2����! ��� 9�!4�!1 �!� ��?� ����4���� &�� %' � �/4�� +---5 ���4%�� ?��;�� �!� ?��;�L ��%7��/�8 ��!7 ��� ��'� 0� ��0 ��" ��� ��� 0�� ��� �����!��� �� � ����%7��/ �! 2�� � ��� ��6�� %' '��7/�!�� 2��� %/����� �%����� �4�0��� �% ���� � ��7!�> �!� �%/%0%7���"

,��� $' ���6� 0��' ��� 2��� �%/%0%7� �% ��!�%/ .� � ��.��77�� '��7/�!��

�;���C �! �� ?��;�L ���� � ��0 �

+ ���.0�1� ��%���! N���5�#����� ������O +�.��, ���!�0%� �!��� 0���� N8���������� ����O ,�.,�* ��00 ������%! ��%���! N+��� ������O# *�.**� �E.��4%��0���%! '� �%� N%�� ����O# ��.,�: E�%�%�����/ � ��� ��%! �!��� � 4 !�� N%4 ����O *�.+:� �� %���!�/�!� ��!����� N+4 �������O ��.�,� ) - 90� �!�.�� � ���.4�!��!7 ��%���! N%4 ����O *�.,�+� ���%����� �0 +�"- 1� ��%���! U���M;��E< ��.�:

#�%!��%0 ��C �! �� 2��� 1!%2! �%/%0%7�"

.�� ��# ����� ��1���� �:,

� ?0� 12�00 ; ��! � ���8 ,�� -�� '������ &����58 $$� ���A�::

�!����� �!� �!�0%7% � .�.��77�� '��7/�!�� ��%4�40�

�������!� /�/4��� %' ��� ��/� 7�!� '�/�0�8 ���� �% !%�

�������!� ��� ��/� 7�!��" @��! ��� �% � ���! ��� � 40�

����4��� ��� ��� ?��;�L ��%7��/8 �00 ��� �� 0%!��

��%2�� ��7!�> �!� �%/%0%7� &� ��0 � I+�.��5 �% �!�����

2����! ��� � 40� ����4���� &��40� �5" <!� �� 0%!�8

0%!� �8 ��%2�� �%/%0%7� �% � /�/4�� %' ��� /��6� �E.

��4%��0���%! '� �%� 7�!� '�/�0�8 �!� �!%����8 0%!� *8

��%2�� �%/%0%7� �% ��� � /�! �00.������%! ��%���!8

2�� � ����0' ��� ��7!�> �!� �%/%0%7� �% ���," @��0� 2�

��� !% �����% � �!'%�/���%! %! ��� �(������%! ��%>0� %'

��� /��6� ���, ��%���! �%/%0%7 �8 �����% � 2%�1 4�

��7�� � ��" &+--,5 ��%2�� ���� �0�!� �E.��4%��0���%!

'� �%� �� �(������� �! 0��' ���� �" �! �00 ����8 �( ��� '%� ���

�E.��4%��0���%! '� �%� �!� ��� ���, ��C �! ��8 ���

��7�%! %' �%/%0%7� 4��2��! ��� ��0�����0� 0��7� ��

�!����� &+A+"� 145 �!� ��� ��C �! �� ! %����� �! ���

%�����%!��!7 ?��;�L � ���! ��� !%� %���0�� 2��� ���

%��7�!�0 .�.��77�� '��7/�!�" �� 2�� �����'%�� !%� � �����.

�!7 ���� ��� %��7�!�0 .�.��77�� '��7/�!� '��0�� �% ���!��'�

��� ��/� ��C �! �� �� ��� %�����%!��!7 ��A?��;�L

���� �" �� 2�� ��/��1�40� ���� ��� �� ��!�%/ .�.��77��

'��7/�!�� ���!��>�� �� /�!� �� ����! &!�!� ��4����6�!7

0%!�� /�! � �2% �����% �0� 1!%2! 0%!��5 �� 0%!��

'�%/ ��� ,��� 0%!�� � ���!��" @� 4�0���� ���� ���� ��� 0�

�� �%���40� � � �% ��� �4�0��� %' ���.�.��77�� '��7/�!�� �%

���!��'� &��� ��4����6���%!5 �00 ��� /�/4��� %' �����

����� ���� 7�!� '�/�0��� 2�� � ���� I��K ! 0�%����

��C �! � �%/%0%7�" �%2����8 �� �� �0�% �%���40� ����8

%!������!7 ��� ��0�����0� �/�00 ! /4�� %' '��7/�!��

���8 � ���!�!7 ��� ����� 2��� � 0��7�� �!� /%�� �������

�%� 0���%! %' .�.��77�� ��C �! �� /�7�� ��%� � '�2��

���� ��� '��7/�!�" @������� ��� ����%! '%� ��� ��0�����0�

0��7� ! /4�� %' ��4����6�!7 0%!��8 % � ��� 0�� � 77���

���� � ���!�!7 ' ����� �� 0%!�� 2��� .�.��77��

'��7/�!�� % 0� ���!��'� ���! /%�� �%/%0%7���" ��1�!

�%7����� 2��� ��� ��� 0�� '�%/ ��� ���� � ��C �! �!78 �����

%4�������%!� � 77��� ���� ���!� �00� /%�� %' ��� .�.

��77�� '��7/�!�� ���!��>�� �! ���� �� �� 2�00 4� %!>�/��

�� 4��!7 ������� '�%/8 %� 0%�� �%8 ���!� ��4�� ��C �! ��"

� ' !��/�!��0 ���! ��0� %' ���!��%�%! ��77�!7 �� ����

�!�����%! %' ��� �0�/�!� �!�% � 7�!� ��� 0�� �! �!

�!������40� ���!%����" ;%/��� �!�����%!� ���� 4��!

���!��>�� �� � ��7!�> �!� ��%40�/ 2��� ���!��%�%!

��77�!7 4���� %! ��� .� � �� �����/ &Q�! � ��"8 +--+5"

�% %!>�/ ��� ���� � %' ��� .� �!�����%! ��� ��4�� ����8

� ������ �����%6�7%��� '%� �!�����%!� �*- &70 ��/�!�

��!������� +A*5� P�+* &�0��� /�!!%������ ��5� ��: &6���.

��%��!� ����� ���� ��� ��%�5� Q�� &�� ���%�.0�1� ��%���!

1�!��� � ��� ��%�5� �!� J+* &���!�1��%0���5 2��� 4� 1.

�%���� 2��� ��� �!4��� 0�!� ?�, '%� '% � 7�!�����%!�" �! �00

����8 ?�, 2�� ��� �� ��� �%00�! �% � �" �� �� �

7�!�����%!8 ��� ���!�/����%! %' ��� ��� �> .� �!�����%!

2�� /%!��%��� ��� E�� ��!7 �! �!�����%!.��� �> ���/��

�!� ��� � ? ���/��" �! �00 ����8 .�.��77�� '��7/�!��

2��� ���!�/����� �� %� !��� ��� �(�� ��� '��C �! � &�� B ���

���� !%� ��%2!5" ����� %4�������%!� %!>�/�� ���� ���

%��7�!�0 .� �!�����%!� 2��� 7��/�!�0 �! %��7�!" @� 4�0����

���� ��� ����%! 0��� �! % � ������7� %' ��%0���!7 �!����� �0

.� 4�!�� '�%/ ��!�� ��!7 �%0�� ��0�/��� 7�0�" @�

4�0���� ���� �����! � .� 4�!�� ��%0���� '�%/ ��� 7�0 2���

/%�� 0�1�0� �% 4� 7��/�!�0 �!�����%!�8 2������ �%/���

�!�����%!� 2��� /%�� 0�1�0� �% 4� �������!��� 4� ��� '��!�

4� 17�% !� �/��� �����!� %! ��� �%0�� ��0�/��� 7�0"

$%00%2�!7 '% � 7�!�����%!� %' 4� 1. �%���!7 �% ?�,8

�/�0�> ���%!.�%������ �0�!�� 2��� ��0'�� �!� ��� ��%7�!�

�(�/�!�� '%� �!� %4��% � ���!%����" $�%/ ��� >��

�������� �!�����%!� �(�/�!��8 %!0� ��: &6���. ��%��!�

����� ���� ��� ��%�5 ��� �! %4��% � ���!%����" ��

�����% �0� ��� ��4��8 ���� 6���. ��%��!� ����� ���� .�.

��77�� 0�!� ��%� �� 2��10� �������% � 1��!�0�" $ �����

���� ����6���%! %' ���� 0�!� ��� %!>�/�� ���� �� �����.

��!�� � !�2 �00�0� %' ��� ��0 ���!%���� &@ ��6�08 +--�5"

��� /���%� '%� 7�!�����!7 .�.��77�� �� '��7/�!��

��� ��4�� ���� �� ��0�����0� ��/�0� �% ���'%�/" < � ��� 0��

� 77��� ���� �� �� �/�!�40� �% 4��!7 � �0�� � �% �! 0 ��

������0 ��% ��!� .�.� ���� /��6� �0�!��" ;�7!�> �!�0�8

% � ��� 0�� �0�% � 77��� ���� ��� /�G%���� %' �����

��C �! �� 2�00 �������!� 7��/�!�0 �!�����%! ���!��"

;�C �! � �!�0���� %' � � � 0��7� ! /4�� %' 7��/�!�00�

������� .�.��77�� '��7/�!��8 ������� '�%/ �!����!��!�

�0�!��8 ��� ��� �%��!���0 �% ��� � ��� 4%��0�!� 1 �! ���

�0 �����%! %' 7�!� ' ! ��%!"

0��������� ��������

6��) � �# ��� ���� �� ���3� ��� �

� ���%� � ���� /��6� ���� �! � @�� 4� 17�% !� 2�� � 1�!� 7�'� %'� ������!���! %' ��� �%0� ;���!7 ���4%� ��4%���%��" E0�!�� 2���7�%2! �� ��� ��4�� 4� �� ''�� &+--,5" .�.� ���� �0�!�� 2���/��!���!�� �� �����%6�7%�� '�/�0��� 4� ��!�%//���!7 2����! ���.�.� ���� �%%0" ;% ����! 40%� ��4����6���%! &;% ����!8 +-��5 %'�� �������� '�%/ ���� /������0 �!�� ���� ���� �!����� �0 �0�!�� %!���!�� 4��2��! ,� �!� ��.� �0�/�!�� 2��! ��%4�� 2��� �,�E.0�4�00�� .�.�!������ ������ &��!����� � ��"8 +-��5"

����� �� �# ������ ���3� �� �� � � ��# �(�

����� �

.�.��77�� '��7/�!�� 2��� ��%0���� 4� � /%��> ���%! %' ���/���%� %' $��� � ��" &+--�5" ?���H�8 +��!7 %' �%��0 7�!%/� ��2�� ��7����� 2��� � !��� %' .��� &� ������ ��%! �!6�/� 2��� �����(.4��� �� %7!���%! ��C �! � �M�9�9�5 �!� * !��� %' .��� &������� ��%! �!6�/� 2��� ��� '% �.4��� �� %7!���%! ��C �! ��M���5 �! � �%0 /� %' �� �0 '%� + � �� ,���" $%00%2�!7 ��������� ��%! ��7����%!8 �� !7 %' � 4�%��!�0���� .��� ������� & %!.�����!7 %' � 4�%��!�0���� +�/��B 4�%��!.��.���9��9���9�9�.���.,� �!� � %/�0�/�!���� +�/��B ��.�9�99����9��9��.,�5�!� ��!7 %' � !%!.4�%��!�0���� .��� �����%� & %!�����!7 %' �+:/��B ��.9��9��9�9����9�9.,� �!� � %/�0�/�!����

�:* � ��� +���� �� �0"

� ?0� 12�00 ; ��! � ���8 ,�� -�� '������ &����58 $$� ���A�::

+*/��B ��.������99������.,�58 �%7����� 2��� ��0 +�/� ��E�!� + !�� �* �� 0�7���8 2��� ����� �% ��� ��7����%! /�( �% /�1�� �%��0 �%0 /� %' :� �0" ��� 0�7���%! 2�� �00%2�� �% ��% ��� '%� ���� ,���" 9�!%/� '��7/�!�� 0�!1�� �% ��� .��� �����%�� 2�����%0���� �!� � ��>�� ��!7 +��0 �!�0 &�U8 J;�5 /�7!��� �����������! 4���� &�%!7 �!� ;/���8 +--�"5" $%00%2�!7 � ��> �.��%! &������ � ��"8 +--��58 � +�0 �0�C %� %' ��� ��A4��� %/�0�(2�� � 4G� ��� �% �/�0�> ���%! ��!7 � N,,EO��.0�4�00�� ���/����� �> '%� � %!������ ��7�%! %' ��� .� � �� �!������ ������ &��.��9�����������99����������.,�5 �!� � ���/�� ��� �> '%���� .��� �����%� &��.9��9��9�9����9�9���.,�5 �! �� �0 2���+ !�� %' ��C �� �%0�/�����8 ��!7 ��� � 0�!7 %!����%!������% �0� ��� ��4�� 4� ������ � ��" &+--�5" $%00%2�!7 �/�0�> �.��%! ��� �!���� ��� ��%! 2�� �0� ��%��%����� �! � �K ��!�� ��!7�%0�� ��0�/��� 7�0" �!����� �0 4�!�� 2��� ��� �0���� ��� � �%.����%7����� �!� ��%�� I��4� �( ���� �!� �0 ��� �� ��� ��4�� 4���!����� � ��" &+-��5" �!����� �0 4�!�� 2��� ���! ��.�/�0�>�� ��!7 ��� %��7�!�0 .��� �!� .��� ���/���8 �!� � 4G� ��� �% ���� ���C �! �!7 ��!7 ��� E��1�! �0/�� &��������8 JP5 ���0���?�%�����/� ?�9 U� ���/�!��%� 1�� �!� ��� %��7�!�0 .��0.��� �> ���/��"

������ ������# ��(� ��5������ )� � � � ��#

����� �

��!7 �� � %' �� ��!�%/0� �%��! .�.��77�� '��7/�!�� 2�� ���� !%� ���� �%/%0%7� �% ��C �! �� 2����! ��� ����4����8 %!�.�.��77�� '��7/�!� 2��� �%/%0%7� �% ��� /��6� �E.��4%��0�.��%! '� �%�8 �!� %!� .�.��77�� '��7/�!� 2��� �%/%0%7� �% ���� /�! �00.������%! ��%���! ���,8 2��� �%%0�� �!� 0�4�00�� 2����N,�EO���E � %���!7 �% ��� /���%� %' $��!4��7 �!� %7�0����!&+-�,5" ��� 0�4�00�� '��7/�!�� 2��� ��� �% ��%4� ,��� ������� %0%!��� %!���!�!7 �0��/�� 2��� ��� ������� '�%/ /��6� 0��'/���" $%00%2�!7 ��4����6���%! �� :��� �! :�;;�8 ���!�����=��!� �K ;; '%� +: �8 ��� >0���� 2��� 2����� ����� ��/�� �� :����! �"��;;�8 +K ;;" ��� 2����� >0���� 2��� � 4G� ��� �%� �%����%7����� 2��� � ��!70� �!��!��'��!7 � ���! '%� , ���� �� A����" ��4����6�!7 0%!�� 2��� � ��>�� �% ��!70� %0%!��� �!� ����% ������� �0��/�� ��" E ��>�� �0��/��� 2��� ��C �! �� ��!7��� E��1�! �0/�� ���0��� ?�%�����/� ?�9 U� ���/�!��%� 1�� �!���� !������0 '%�2��� �+, ���/��"

�� �5��� ������

E��/�� �!� �� �%� ��C �! �� 2��� ��/%��� ��!7�J�<�;;��?��� &E��1�! �0/��5" �%��� ��� ��C �! �� 2���� ���!�� �7��!�� �00 %' ��� 9�!?�!1 �!� ��?� ����4���� ��!74%�� ?��;�� �!� ?��;�L ��%7��/� &�0�� � 0 � ��"8 +--�5" ?%��?��;�� �!� ?��;�L ��%7��/� 2��� ��� 2��� ��� ��'� 0� �����!7�"<!0� �%/%0%7��� 2��� �! � ��0 � I��.�* 2��� �� %���� �� 4��!7��7!�> �!�"

��2�!���������

����.�%!7 ����%! �� ����� 7��!�.����� � ��%�� '�%/ ��� ?�%.�� �!%0%7� �!� ?�%0%7� �0 ; ��! �� ������ � �% ! �0 %' ���J!���� P�!7�%/" ;" ��!0�� 2�� ' !��� 4� � R�!� � E0�!� ; ��! ��2��� �% P"�"�"� ;" ���!�� 2�� ' !��� 4� � '� �� �!� ������ ��!����� �! %00�4%����%! 2��� ����!��� �" ��7���� 2��' !��� 4� �! �!� �����0 ��;� �� ��!����� 2��� R�!� � E0�!�; ��! ��� " ;����!�%! 2�� ' !��� 4� � ??;�� �7��.$%%���2���� �!� " ��2���� 2�� ' !��� 4� ��� $��/�2%�1 ���%7��//� R��<E�" ;��� '%� ��� ����% � .� �!�����%!�

��� ��4�� ���� ��� ����0�40� '%� ������ � ���0� ���%!� 4� 2����!7�% P���� �" ��2����"

5��������

�������"' �� 6��������"' &+-�:5 ���.� ���!��%��40� �0�/�!��%' /��6�B �����! � '%� ���!��%����%! �!� %�� ! /4����7 0���%! � ��!7 ����0%�/�!�" 6�� ���8 ��$8 +��A++-"

��� ����� �'6'� "����� ,'8'� �������� �'�'� 9���� &'� 9���� 9'�"������ '#' �� 8����� �'8' &+--�5 9����� ?��;� �!� E;�.

?��;�B � !�2 7�!�����%! %' ��%���! ����4��� ���� � ��%7��/�"(���4 ���#� ���4 $:8 ,,�-A,*��"

;�����)��� &'8'� 1�� �� �'� ;�!�� #' ' �� 8��� 8' &+-��5�%0� 0�� 0%!�!7 %' /��6� 7�!�� 4� ���!��%�%! ��77�!7 2���.� � ��" �! -�� 6�� ��� ��� �# ���� ������� ������������ � .�������� �# �������� ������ (�) ������8 %0":� &P��8 �"�" �!� � �!�%��8 �"8 ���5" ��2 U%�1B �0�! �" ����8 ��"+�,A��*"

;�� ��� 5'&'� &��� <'�'� 1���� ='1'� , ����� &','� ��������>'�'� "������ 5';' �� ;���� � �'>' &+--�5 �0%!�!7 �!� ���� ����6���%! %' ��� /��6� �� 7�!�" -�� ����8 *8 ��A�*"

1�� �� �'�'� �������� �'�'� ;�!�� #' '� 8�� � &'5' ��;�����)��� &'8' &+--�5 .��.��0���� ���!��%��40� �0�/�!�� %'/��6� ���'���!���00� �!���� �!�% 0%2 %�� ! /4�� ��"6�� ���8 �/-8 ,+�A,�*"

� � 8' �� "����� ��� 5'�' &+--�5 ;���.��0� ��� / ��7�!���� ����� � '+�: 0% � �! /��6�" -�� ����8 *8 ���A�-*"

�!�� � %'&'� =�� 2�� � &'� 5!�� � �'� ���� �' �� ;�����)���&'8' &+--:5 ����� ����6���%! %' '% � ��������� ���������� ����C �! �� '�%/ %�� ���� �!� ����� �� �! %!��� ��!7 %!��7 % � �� '��7/�!�� ��!7 U�� 0%!��" 6����8 7?8�++A�+�"

6�������� �'>' �� =��� ����� ;' &+-�,5 � �� �!�C � '%�����%0�4�0�!7 �� ������ ��%! �!�%! 0���� '��7/�!�� �% ��7���� �> � ������" ���4 �������4 �7$8 :A+,"

6���� "'� ��������� 1' �� <����� �' &+--�5 � 7�!���0 /���%� '%�7�!� ��%0���%! �! ��77�!7 ����%� ��� �/�0�> ���%! %' �!�����%!/ ��7�!���� ����� &���;5" -�� '4 �78 �+�A��+"

<��� ;'�' �� ������� &'6' &+--�5 �� ��C �! � �����! � '%���� ��7/�!��0 �00%������0%�� %��7�! %' /��6�" -���4 (� � ���#4���4 ���8 ?/8 :��-A:�+*"

"���� � ,'� 6��� ��� '6' �� ����2� &' &+-��5 .������������9 � ��5��� ��� .����4 ��2 U%�1B �%0� ;���!7 ���4%���4%���%��"

"��� � "'� ���� �' �� �!�� � %'&' &+--�5 �/�0�>�� '��7/�!�0�!7�� �%0�/%�����/�" �! .�������� ,���� ��� ���������#������ �9 -�� � �# ������ &P���8 �"8 ���� 8 E"9" �!��!7��/8 ";"8 ���5" �%!�%!B ����/�! V ��008 ��" +�+A+-�"

"�1�����2� ;' &+-��5 ��� %��7�! �!� 4�����% � %' / ��40� 0% � �!/��6�" -���4 (� � ���#4 ���4 ���8 7+8 ,**A,��"

"�8������� "' �� #���� =' &+-��5 �0%!�!7 %' ��� ���3�$0% � %' /��6� 4� ���!��%�%! ��77�!7 �!� ��''���!���0��4��������%!" 6�� ���8 ��*8 ��+A��:"

"������ 5';' �� ;���� � �'>' &+--�5 ������� 7�!��� � '%� /��6�".��3� 6�� 4 (�)��4 +?8 :�A��"

�������� "'<' &+--,5 9�%2�!7 /��6� '%� 7�!��� �� ����" �! ,��.��3� +�#5��7 &$���0�!78 �" �!� @�04%�8 "8 ���5" ��2 U%�1B;���!7�� ��0�78 ��" +-�A���"

@A�������� �'� �!�� � �' �� �!�� � %'&' &����5 ���6�9�!%/� �" �5�� ���� 8 $8 +A:"

B��� "'� 5���� �� �'�' �� ������� �'�' &+--+5 �0%!�!7 %' ���.� � �� ���!��%��40� �0�/�!� .��$B � � ������ ��7 0��%� %'�%/��� / ��4�0��� %' ��� ���.��$ �00�0� �! /��6�" 6�� ���8�$?8 �*�A��*"

.�� ��# ����� ��1���� �:�

� ?0� 12�00 ; ��! � ���8 ,�� -�� '������ &����58 $$� ���A�::

5���� 6'� ;����� 1'� ,���� ����� �'� "� �� �'� 8� ����� ;'�� �0�� � "' &+--,5 �� 0%!�!7 �!� �(������%! %' �!���4��%���� 9�E.4�!��!7 ��%���! %' ��� ��$ '�/�0�" !8�� �� 47�+8 +,,A+,:"

�� "������ >'� ,�2���� �'� &��� C'%' �� �� &+--:5 ����������%���!��%�%!� �! ��� �!���7�!� ��7�%!� %' ��� /��6�7�!%/�" ������8 $*/8 �:�A�:�"

� 2�� ,' &+--�5 ��� �� � 7�!%/� ��%G� � �! ����!" -���4 (� ����#4 ���4 ���8 ?:8 ����A����"

�������� '"' &+-��5 ��� ��%! %' ��� �> ��C �! �� �/%!7�� '��7/�!�� ��������� 4� 7�0 �0� ��%��%�����" '4 .��4 ����4?D8 ��,A�+�"

,��� E' �� ������ 8'"' &+--�5 ;%0�� ����� /���%� '%� ���

� ��> ���%! %' �� ��C �! �!7 ��� ��%!�" ���4 ����4 +/8�:��A�:��"

#���� =' &+--�5 ;�����7��� '%� / ��7�!���� �!� 7�!� 0%!�!7 ��!7 ���!��%�%! ��77�!7 �!� �.�� �!�����%!�0 / ��7�!����"��4 ���4 -�� -���4 -�� .��4 ����4 /78 *-A��"

#� ���� �'5' &+-��5 E��!%���� ��������� /������� 4� ��� /��6����!��%��40� �0�/�!�� � �!� ;�/" ������8 $/$8 ,--A*��"

#� �� 5'>'� ����� 1'8' �� �������� >'�' &+--:5 .� � ��.�!� ��/ ����%!� %' ��� ��� ! 0��� '����0��� ����%��� %' �. ��%�0��//��6� �0��� ��� � / 0���%! %' ,�����: /��% �%!����0���!� �����" 6�� ���8 �/78 +,�,A+,-*"

#���)��� ',' &+--�5 J�� %' � � ��%/%�%/�.4���1�!7 �0�/�!� �%�(�/�!� /��6� ��0 �(������%!" '4 +���#4 D78 +�-A++,"

�:: � ��� +���� �� �0"

� ?0� 12�00 ; ��! � ���8 ,�� -�� '������ &����58 $$� ���A�::