¿Qué es la cromatografía? - INTI · Aplicaciones -Industria Farmacéutica; -Industria...

¿Qué es la cromatografía?

(<1900) Mikhail S. Tswett

chroma = color

graph = escribir

cromatografía = “escribir el color”

¿Qué es un cromatógrafo líquido?

El primer cromatógrafo líquido

1963 – James Logan Waters

Columnas

Detectores

PDA

UV/Vis

Ind. Ref.

ELSD evapor.

FLR

Conductividad

Electroquímico

Aplicaciones

-Industria Farmacéutica;

-Industria Agropecuaria;

-Industria Alimenticia;

-Industria Química en general.

Determinaciones

-Principios Activos

-Conservantes

-Productos de degradación

-Aditivos

-Sustancias no permitidas

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Preguntas?

Cromatografía Líquida

Determinación de Azúcares

* Lactosa

Azúcares en leche mediante LC/IR

* Maltosa

* Sucrosa

* Glucosa

* Fructosa

QC Ref !

* Galactosa

1 mL leche + 500 µL IPA - - 1:10 H2O

Análisis y cuantificación por HPLC

Col Waters Sugar-PakTM @ 90 ºC (WAT085188 – 4-6-300)

0,5 mL/min H2O 50 ppm Ca-EDTA

Det IR @ 50ºC – Vol 5 µL

Leche 1:10 (50:50 - H2O:ACN) - 30 min.

Análisis y cuantificación por UPLC

Col Waters AcQuity BEH Amide @ 85 ºC (1,7-2,1-50)

0,15 mL/min H2O:Acetona (23:77)

Det IR @ 50ºC – Vol 1 µL

Tratamiento de muestras

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Preguntas?

Espectrometría de masas

* Los analitos son convertidos a iones

en fase gaseosa.

* Los iones son separados por su energía

cinética, la cual está relacionada a la

relación masa-carga (m/z), y son detectados.

* La corriente total de iones (señal) es

graficada versus m/z para producir un

espectro de masas.

* Los analitos son convertidos a iones.

* Los analitos son convertidos a iones.

* Los analitos son convertidos a iones.

* Los iones son separados por su energía.

* Los iones son separados por su energía.

* Los iones son separados por su energía.

* Los iones son separados por su energía.

* Los iones son separados por su energía.

* Los iones son separados por su energía.

* Los iones son separados por su energía.

* Finalmente los iones son detectados.

Puntos críticos de la técnica:

Fuentes

Puntos críticos de la técnica:

Dwell time o tiempo de permanencia

Puntos críticos de la técnica:

Dwell time o tiempo de permanencia

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Preguntas?

Espectrometría de masas

Determinación de Antibióticos y Hormonas en Leche

Espectrometría de masas

Determinación de Antibióticos y Hormonas en Leche

Antibióticos AG en leche mediante LC/MSMS

Spectinomycin

Streptomycin

Amikacin

Gentamicin C

Neomycin

Antibióticos AG en leche mediante LC/MSMS

Antibióticos AG en leche mediante LC/MSMS

UPLC/MSMS – Col AcQuity HSS PFP

Par Iónico:

ácido heptafluorobutírico (HFBA)

Muestra: se extrae con ácido tricloroacético (TCA)

SPE (Oasis) se rec 20 mMHFBA

Antibióticos AG en leche mediante LC/MSMS

Spike 10 µg/kg (ppb)

10 x + sens leg !

r2: 0,999 (de 1 a 100 ppb)

Antibióticos AG en leche mediante LC/MSMS

Hormonas en leche mediante LC/MSMS

Cumplimiento de los requisitos exigidos para la

cuantificación de factores de crecimiento regulados.

Dexametasona y Betametasona en leche.

CE 0,3 µg/L (ppb) para leche bovina.

ScanWave PICS

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