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wwwprofbiocombr
ProfaAlessandra Barone
Prof Archangelo P Fernandes
Taxonomia
bull Reino Protozoa
bull Filo Sarcomastigophora
bull Classe Zoomastigophorea
bull Ordem Kinetoplastida
bull Famiacutelia Trypanosomatidae
bull Gecircneros Trypanosoma
bull Espeacutecie T cruzi
Trypanosoma cruzi
bull Distribuiccedilatildeo geograacutefica sul dos Estados Unidos ao sul da Argentina
bull Ciclo bioloacutegico em hospedeiro vertebrado e invertebrado
bull Hospedeiro vertebrado
ndash Homem e mamiacuteferos de vaacuterias ordens (silvestres e domiciliares) marsupiais (gambaacutes e cuiacutecas) edentados (tatus tamanduaacutes e preguiccedila) roedores catildees gatos entre outros
bull Hospedeiro invertebrado - Vetores
ndash Insetos hematoacutefagos (machos e fecircmeas) da subfamiacutelia Triatominae
Triatoma infestans
Triatoma infestans
Panstrongylus megistus
Panstrongylus megistus
Rhodnius prolixus
Rhodnius prolixus
Trypanosoma cruzi
bull Formas evolutivas
bull H invertebrado
ndash Epimastigota
ndash Tripomastigota metaciacuteclica
bull H vertebrado
ndash Amastigota ndash intracelulares (ceacutelulas musculares ceacutelulas de Schwann fibroblastos etc)
ndash Tripomastigota sanguiacutenea
Trypanosoma cruzi
bull Ciclo evolutivo ndash O triatomiacuteneo pica o homem e durante o repasto
sanguiacuteneo defeca e urina na pele
ndash Enquanto se alimenta libera no local substacircncias anesteacutesicas que o permitem promover um repasto demorado
ndash Prurido local e entrada das formas tripomastigotas metaciacuteclicas
ndash Fagocitose pelos macroacutefagos teciduais
ndash Transformaccedilatildeo das formas tripomastigotas em amastigotas intracelulares
Trypanosoma cruzi
ndash Divisatildeo das formas amastigotas diferenciaccedilatildeo em tripomastigotas rompimento do macroacutefago e liberaccedilatildeo de novas formas no interstiacutecio
ndash As formas tripomastigotas caem na corrente sanguiacutenea atingindo outras ceacutelulas
ndash Os triatomiacuteneos se infectam ao ingerir formas tripomastigotas sanguiacuteneas do hospedeiro vertebrado
Trypanosoma cruzi
ndash Estocircmago do vetor tripomastigotas se diferenciam em epimastigotas
ndash Intestino do vetor divisatildeo de epimastigotas por fissatildeo binaacuteria simples
ndash Porccedilatildeo final do tubo digestivo epimastigotas se diferenciam em tripomastigota metaciacuteclica forma infectante para o homem e entatildeo satildeo liberados nas fezes e urina do vetor
Tripomastigota
Cinetoplasto posterior ao nuacutecleo
cinetoplasto
Tripomastigota
Epimastigota
Cinetoplasto anterior ao nuacutecleo
Amastigota
Amastigotas Amastigotas e tripomastigotas
Monoacutecito parasitado com as formas amastigotas
Doenccedila de Chagas
bull Trypanosoma cruzi (Chagas 1909)
Diagnoacutestico laboratorial Fase aguda
bull Alta parasitemia
bull Pesquisa do parasito
ndash Exame de sangue a fresco
ndash Exame de sangue em gota espessa
ndash Esfregaccedilo sanguiacuteneo corado pelo Giemsa
ndash Microhematoacutecrito
ndash Meacutetodos de concentraccedilatildeo
ndash Inoculaccedilatildeo em aninais
Exame direto a fresco
bull Parasitas abundantes nos primeiros dias e semanas de incubaccedilatildeo
bull Colocar uma gota de sangue entre lacircmina e lamiacutenula e examinar imediatamente apoacutes a coleta para evitar a coagulaccedilatildeo
bull Para retardar a coagulaccedilatildeo adicionar uma gota de soluccedilatildeo salina
bull Analisar em microscoacutepio oacuteptico a presenccedila das formas tripomastigotas
Exame de sangue em gota espessa
bull Analisa uma maior quantidade de material bioloacutegico
bull Verifica a presenccedila de formas tripomastigotas sanguiacuteneas ndash Colocar 3 gotas de sangue na lacircmina ndash Com o canto de outra espalhar o material em uma
aacuterea de aproximadamente 1 cm da lacircmina ndash Deixar secar ao ar durante 6 horas Natildeo ultrapassar 36
horas ndash Corar pelo Giemsa Deixar em repouso por 30 min ndash Lavar e examinar
Esfregaccedilo sanguiacuteneo
bull Colocar uma gota de sangue na extremidade direita da lacircmina
bull Pegar outra lacircmina segurar por cima com a matildeo direita e com uma inclinaccedilatildeo de 45deg encostar adiante da gota
bull Deixar mesma se espalhar pela superfiacutecie de contato das duas lacircminas
bull Puxar a gota espalhada ateacute o final de lacircmina
bull Secar e corar pelo Giemsa ou Leishman
Esfregaccedilo sanguiacuteneo
Microhematoacutecrito Creme leucocitaacuterio
Microhematoacutecrito
bull Colher sangue em tubo capilar
bull Centrifugar em microcentriacutefuga por 5 minutos agrave 10000 rpm
bull Avaliar o microhematocrito em microscopia oacuteptica
bull Verificar a presenccedila das formas tripomastigotas presentes no creme leucocitaacuterio
bull Se positivo realizar esfregaccedilo do creme leucocitaacuterio
bull Fixar com aacutelcool metiacutelico e corar com Gienza Analisar em microscoacutepio oacuteptico
Meacutetodo de concentraccedilatildeo
bull Meacutetodo de Strout
ndash Realizar a coleta de sangue em tubo sem anticoagulante
ndash Aguardar a retraccedilatildeo do coaacutegulo Os parasitas concentrar-se-atildeo no soro a medida que ocorrer a retraccedilatildeo do coaacutegulo
ndash O soro eacute centrifugado para anaacutelise do sedimento
Inoculaccedilatildeo em animais
bull Inoculaccedilatildeo de sangue ou creme leucocitaacuterio em camundongos jovens
bull Inoculaccedilatildeo intra-peritoneal intra-conjuntival e a via oral
bull Avaliaccedilatildeo das formas de Tcruzi
bull Teacutecnica utilizada em pesquisa
Diagnoacutestico laboratorial Fase crocircnica
bull Xenodiagnoacutestico bull Hemocultura bull Reaccedilatildeo de hemaglutinaccedilatildeo indireta bull RIFI bull ELISA bull PCR bull PaGIA bull LMCo bull Pesquisa de anticorpos antitripomastigotas vivos
Hemocultura
bull Meio LIT ndash Liver Infusion Triptose
bull Meio NNN ndash McNeal Novy e Nicolle
bull Utilizaccedilatildeo de 30ml de sangue heparinizado
bull Centrifugaccedilatildeo por 30 minutos em 3000 rpm
bull Despreza-se o plasma e o sedimento celular eacute lavado com meio LIT ( Liver Infusion Triptose) para eliminaccedilatildeo de possiacuteveis anticorpos
Hemocultura
bull Sedimento distribuiacutedo em 6 tubos com 5 ml de LIT
bull Os tubos satildeo mantidos a 28degC homogeneizados 3x semana e avaliados quinzenalmente ateacute 90 dias
bull Centrifugaccedilatildeo e avaliaccedilatildeo do sedimento de hemaacutecias
bull Leitura realizada pela observaccedilatildeo microscoacutepica de gotas do meio
bull Aumento da positividade para sangue processado imediatamente apoacutes a coleta cultivado em prazo de tempo maior (120 dias) e repeticcedilatildeo da teacutecnica por 3 vezes
Wuchereria bancrofti
Taxonomia
bull Reino Animalia
bull Filo Nematoda
bull Classe Secernentea
bull Ordem Filariidea
bull Superfamiacutelia Filarioidea
bull FamiacuteliaOnchocercidae
bull GecircnerosWuchereria
bull Espeacutecie Wbancrofti
Formas evolutivas
bull Heteroxecircnico
bull Hospedeiro vertebrado homem
bull Hospedeiro intermediaacuterio Culex quinquefasciatus
bull Formas evolutivas ndash HV verme adulto (fecircmea e macho) localizados nos
vasos e gacircnglios linfaacuteticos da regiatildeo abdominal peacutelvica (perna e escroto) mamas e braccedilo
ndash microfilaacuterias eliminadas pelas fecircmeas graacutevidas Saem dos ductos linfaacuteticos e atingem circulaccedilatildeo sanguiacutenea
ndash HI larva L1 L2 e L3 (infectante)
Culex quinquefasciatus
Morfologia
bull Macho 35 a 4 cm x 01mm com extremidade posterior enrrolada ventralmente
bull Fecircmea 7 a 10cm x 03 mm com vagina exteriorizada em uma vulva localizada proacutexima agrave extremidade anterior
bull Microfilaacuteria Presenccedila de bainha e estilete bucal na parte anterior que as diferencia de outros filariacutedeos sanguiacuteneos Possuem 250 a 300 microm e uma grande qtde de nuacutecleos
bull Larva L3 possui aproximadamente 15 a 20 mm de comprimento
Microfilaacuteria
Ciclo evolutivo
bull Fecircmea do inseto realiza o hematofagismo noturno e ingere as microfilaacuterias
bull Estocircmago do vetor microfilaacuterias perdem a bainha atravessam a parede do estocircmago e migram para os muacutesculos toraacutecicos ndash L1
bull Apoacutes 20 dias a larva estaacute na forma infectante L3 medindo aproximadamente 2mm
bull Migraccedilatildeo da larva para a proboacutescida concentrando-se no laacutebio do moquito
Microfilaacuteria Presenccedila de bainha Cauda pontuda com nuacutecleos grandes largos e bem separados Nuacutecleos caudais em fila uacutenica
Ciclo evolutivo
bull Repasto sanguiacuteneo do inseto infectado
ndash As larvas L3 migram do laacutebio do vetor para a pele do HV
ndash Migram para os vasos linfaacuteticos e tornam-se vermes adultos
ndash Apoacutes 8 meses as fecircmeas graacutevidas produzem as primeiras microfilaacuterias
Periodicidade
bull Periodicidade noturna das microfilaacuterias
ndash Durante o dia localizam-se nos capilares profundos
ndash Durante a noite vasos sanguiacuteneos perifeacutericos
ndash Pico da microfilaremia meia-noite coincidindo com o horaacuterio de hematofagismo do inseto transmissor
Patologia
bull Periacuteodo assintomaacutetico bull Fase aguda bull Processos inflamatoacuterios produzidos por larvas L4 e adultos jovens
que colonizam as vias linfaacuteticas ndash Linfadenites linfonodos inguinais epitrocleanos e axilares com
desenvolvimento de granulomas com calcificaccedilatildeo apoacutes a morte dos vermes
ndash Linfangite inflamaccedilatildeo e dilataccedilatildeo dos vasos linfaacuteticos ndash Febre mal estar ndash Funiculite filariana linfangite do cordatildeo espermaacutetico e varicocele
bull Fase crocircnica ndash Hidrocele ndash Linfedema ndash Quiluacuteria ndash Elefantiacutease
Quiluacuteria
Patologia
bull Processos obstrutivos ndash Formaccedilatildeo de novelos envolvidos por reaccedilatildeo
inflamatoacuteria e pela formaccedilatildeo de fibrose
ndash Estase e congestatildeo da linfa produzindo linfoedema tecidual
ndash Extravasamento produzindo derrame linfaacutetico ascite linfaacutetica linfuacuteria linforreacuteia linfotoacuterax linfocele etc
ndash A ruptura de vasos linfaacuteticos para o interior do sistema excretor urinaacuterio daacute origem agrave quiluacuteria
Patologia
bull Complicaccedilotildees associadas agrave filariose
ndash Elefantiacutease
bull Caracterizada por processo inflamatoacuterio e fibrose crocircnica do oacutergatildeo atingido
bull Hipertrofia da derme do tecido conjuntivo aumento exagerado do volume do oacutergatildeo com queratinizaccedilatildeo e rugosidade
bull A pele perde a elasticidade resseca e se torna sujeita a infecccedilotildees bacterianas
Patologia
bull Permanecimento na aacuterea endecircmica
bull Nuacutemero de larvas inoculadas
bull Frequecircncia das re-infecccedilotildees
bull O nuacutemero de acasalamento dos vermes e suas localizaccedilotildees anatocircmicas
bull A sensibilizaccedilatildeo do organismo e a intensidade das reaccedilotildees inflamatoacuterias do paciente
bull As infecccedilotildees bacterianas associadas
Diagnoacutestico
bull Pesquisa de microfilaacuterias no sangue perifeacuterico ndash 20 40 ou 60 microL- de preferecircncia entre as 10 h da noite e 4h da manhatilde
ndash Gota espessa Coloraccedilatildeo de Giemsa
ndash Meacutetodos de concentraccedilatildeo Filtraccedilatildeo em membrana de policarbonato milipore ou nucleopore
ndash Meacutetodo de Knott
bull Na fase crocircnica as microfilaacuterias raramente satildeo detectadas no sangue perifeacuterico
Gota espessa
bull Possibilita a visualizaccedilatildeo da bainha fato que difere a microfilaria de W bancrofti de outro filariacutedeos sanguiacuteneos
bull Apresenta um baixo custo em comparaccedilatildeo com outras mais avanccediladas como a filtraccedilatildeo de sangue em membrana de policarbonato
bull Possui baixa sensibilidade natildeo indicada em situaccedilotildees em que os parasitados se mostram com baixa microfilaremia ou amicrofilarecircmicos
Concentraccedilatildeo
bull Baseia-se na passagem de sangue venoso atraveacutes de uma membrana (Milipore ou Nuclepore) de diacircmetro de 13 a 25 mm e poros de 5 ou 3 μm
bull O material retido na membrana sendo fixado corado e observado ao microscoacutepio
bull Essa teacutecnica assim como a de Knott permite a identificaccedilatildeo de indiviacuteduos com baixiacutessimas parasitemias (quantidade de microfilarias natildeo detectaacuteveis pela teacutecnica de gota espessa)
Teacutecnica de Knott
bull Retirar 2 ml de sangue total por punccedilatildeo venosa e colocar imediatamente em um tubo contendo 10 ml de formol a 2
bull Fechar o tubo e misture completamente invertendo-o e agitando-o O formol hemolisa as hemaacutecias mata fixa e distende as microfilaacuterias
bull Centrifugar o sangue a 1500 rpm por 5 minutos
bull Decantar o sobrenadante
Teacutecnica de Knott
bull Retirar o sedimento com uma pipeta Pasteur e espalhar a gota espessa sobre uma lacircmina
bull Deixar secar bem e corar com Giemsa
bull Examinar com objetiva de imersatildeo
bull Esta teacutecnica possibilita que o exame microscoacutepico laboratorial seja realizado vaacuterios dias apoacutes a coleta de material realizada no campo
Exames de imagem
bull Ultranossografia
ndash Possibilidade de visualizar os movimentos de vermes adultos vivos de W bancrofti em vaso linfaacutetico especificamente em vasos intraescrotais do cordatildeo espermaacutetico
ndash O movimento ativo e ininterrupto dos vermes adultos durante as 24 horas do dia eacute denominado sinal da ldquodanccedila das filaacuteriasrdquo
Diagnoacutestico soroloacutegico
bull Teste imunocromatograacutefico desenvolvido pelo ICT Diagnostic - ICT card
ndash Teste qualilativo
ndash Cartatildeo possui ac de antifilaacuteria e o controle eacute formado por ac anti Ig G humano
Plasmodium spp
Taxonomia
bull Reino Protozoa
bull FiloApicomplexa
bull Classe Sporozoea
bull Ordem Hemosporidiida
bull Famiacutelia Plasmodiidae
bull Gecircneros Plasmodium
bull Espeacutecie Pfalciparum Pvivax Povale e Pmalariae
Plasmodium
bull Ciclo bioloacutegico Hospedeiro vertebrado e invertebrado
bull Hospedeiro invertebrado ndash Vetor
ndash Fecircmeas hematoacutefagas do gecircnero Anopheles
ndash Brasil Anopheles (N)darlingi A (N) aquasalis A (N) albitarsis A (K) cruzii e A (K) bellator
ndash Possuem haacutebito noturno penetrando nas casas no crespuacutesculo saindo ao amanhecer
Plasmodium
bull Hospedeiro vertebrado homem
bull Transmissatildeo
ndash Vetor
ndash Transfusatildeo de sangue
ndash Compartilhamento de seringas
ndash Acidente com agulhas
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
bull Ciclo preacute-eritrociacutetico
ndash Forma inoculada esporozoiacutetos
ndash A fecircmea do anofelino infectado inocula no homem as formas infectantes localizadas na saliva
ndash Os esporozoiacutetas permancem na circulaccedilatildeo por aproximadamente uma hora
ndash Invadem os hepatoacutecitos e se diferenciam em trofozoiacutetas (criptozoiacuteto)
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
ndash Esquizogonia e formaccedilatildeo de esquizontes
ndash Divisatildeo nuclear e liberaccedilatildeo de merozoiacutetos
ndash Aproximadamente 10000 merozoiacutetos por hepatoacutecito
ndash Rompimento do hepatoacutecito e liberaccedilatildeo de merozoiacutetos na circulaccedilatildeo
ndash Duraccedilatildeo do ciclo aprox 1 a 2 semanas
Ciclo evolutivo
bull PVivax e Povale
ndash Alguns esporozoiacutetos geneticamente diferentes ficam na forma latente nos hepatoacutecitos permanecendo muitos meses Satildeo classificados como hipnozoiacuteto
ndash Satildeo responsaacuteveis pelas recaiacutedas tardias e formas de malaacuteria com periacuteodo de encubaccedilatildeo longo ndash 6 a 9 meses
FASE HEPAacuteTICA OU EXOERITROCIacuteTICA
Hepatoacutecito
FIacuteGADO
Invasatildeo do hepatoacutecito
Reproduccedilatildeo Assexuada
Esporozoiacutetos Lise dos hepatoacutecitos
Liberaccedilatildeo dos protozoaacuterios na corrente sanguumliacutenea
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
bull Ciclo eritrociacutetico
ndash Os merozoiacutetos invadem as hemaacutecias
ndash Diferenciaccedilatildeo em trofozoiacutetos
ndash Esquizogonia esquizonte
ndash Produccedilatildeo de merozoiacutetos e rompimento da hemaacutecia
ndash Merozoiacutetos invasatildeo de novas hemaacutecias
ndash Apoacutes algumas geraccedilotildees os merozoiacutetos natildeo mais se dividem e se diferenciam em gametoacutecitos ndash micro e macrogametoacutecito
FASE ERITROCIacuteTICA
Hepatoacutecito destruiacutedo pelos protozoaacuterios
Penetraccedilatildeo dos protozoaacuterios
Reproduccedilatildeo assexuada
Protozoaacuterios destroem as hemaacutecias
Diferenciaccedilatildeo em gametoacutecitos
Fecircmeas de Anopheles sugam hemaacutecias com gametoacutecitos
Ciclo no hospedeiro invertebrado
Ocorre nas hemaacutecias ou Eritroacutecitos
nas hemaacutecias
Protozoaacuterio no interior da hemaacutecia
Hemaacutecia com gametoacutecito
T trofozoiacuteto Em esquizonte com merozoiacuteto
Fase eritrociacutetica
bull Ciclo sanguiacuteneo ndash Pfalciparum P vivax e Povale 48 horas
ndash Pmalariae 72 horas
ndash Fonte de nutriccedilatildeo do Plasmodium no ciclo sanguiacuteneo hemoglobina
ndash Produccedilatildeo do pigmento malaacuterico hemozoiacutena bull Granulaccedilotildees de Schuffner Plasmodium vivax
bull Granulaccedilotildees de Maurer P falciparum
bull Granulaccedilotildees de Ziemann P malariae
ndash Fagocitose pelas ceacutelulas de Kuppffer e macroacutefagos do baccedilo
Trofozoiacutetos Pfalciparum
Trofozoiacutetos Pfalciparum
Esquizonte ndash P falciparum
Raros no sangue perifeacuterico Possuem 2 a 24 merozoiacutetos
Ocupam 23 do gloacutebulo vermelho
Gametoacutecitos Pfalciparum
Ciclo evolutivo Pvivax
Esquizonte ndash P vivax
Satildeo grandes e ameboacuteides Cromatina organizada em duas ou mais massas
Possuem 2 a 24 merozoiacutetos com pontos de cromatina
Gametoacutecito ndash Pvivax
Macrogametoacutecitos satildeo redondos ou ovais e ocupam toda ceacutelula hospedeira O citoplasma eacute geralmente corado de azul mais escuro e conteacutem pigmento marrom Microgametoacutecitos satildeo geralmente do tamanho de um RBC natildeo infectados com citoplasma corados de azul paacutelido rosa ou cinza
Trofozoiacutetos - P malariae
Esquizontes ndash P malariae
Aproximadamente 6 a 12 merozoiacutetos com arranjo de rosetas
Gametoacutecitos ndash P malariae
Ciclo evolutivo ndash HI
bull Ingestatildeo de hemaacutecias contendo gametoacutecitos durante o repasto sanguiacuteneo da fecircmea do anofelino
bull No intestino meacutedio do vetor gametogecircnese ndash Macrogametoacutecito ndash macrogameta feminino ndash Microgametoacutecito o processo de exflagelaccedilatildeo daacute
origem a 8 microgametas masculinos ndash Produccedilatildeo de ovo ou zigoto ndash O ovo encista na camada epitelial do intestino meacutedio
oocisto ndash Esporogonia liberaccedilatildeo de esporozoiacutetos
Ciclo evolutivo ndash HInvertebrado
ndash Os esporozoiacutetos satildeo transportados pelo hemolinfa ateacute as glacircndulas salivares do vetor ateacute atingirem o ducto salivar
bull Inoculaccedilatildeo no hospedeiro vertebrado atraveacutes da picada do inseto
Hemaacutecia com gametoacutecito
Fecircmeas de Anopheles sugam hemaacutecias com gametoacutecitos
CICLO NO INVERTEBRADO
No tubo digestivo
Zigoto
Penetraccedilatildeo na parede do tubo
digestivo
Migraccedilatildeo para as glacircndulas salivares
Desenvolvimento
Mosquito infectado
Diagnoacutestico
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado e espesso corado pelo Giemsa
bull Sangue colhido sem anticoagulante para melhor fixaccedilatildeo em lacircmina
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo espesso eacute mais eficiente para detecccedilatildeo da infecccedilatildeo
bull Esfregaccedilo delgado eacute mais eficiente para diferenciaccedilatildeo morfoloacutegica das espeacutecies
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo semiquantitativo
ndash Exame de 100 campos microscoacutepicos com resultado expresso pelo sistema de cruzes
Parasitos contados Nuacutemero de campos
microscoacutepicos cruzes
40 a 60 100 +2
1 1 +
2-20 1 ++
21-200 1 +++
+ 200 1 ++++
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo quantitativo derivado de anaacutelise semiquantitativa
Contagem de parasitos por campo
Cruzes Parasitos por mm3
40 a 60100 +2 200-300
1 + 301-500
2-20 ++ 501 - 10000
21-200 +++ 10001 ndash 100000
+ 200 ++++ 100000 ou mais
Diagnoacutestico
bull P falciparum
ndash Parte do ciclo celular aderido ao endoteacutelio capilar Encontro somente de trofozoitos e gametoacutecitos no sangue perifeacuterico
ndash Raramente os esquizontes satildeo encontrados no sangue perifeacuterico
Diagnoacutestico ndash Pvivax ndash Encontro de todas as formas de desenvolvimento ndash
trofozoiacuteto jovem maduro esquizontes e gametoacutecitos
ndash Os trofozoiacutetos maduros tecircm geralmente um aspecto irregular com extensotildees ameboacuteides em seu citoplasma
Diagnoacutestico ndash Pvivax
ndash Os gametoacutecitos femininos coram-se mais intensamente que os masculinos e apresentam nuacutecleo mais compacto geralmente em localizaccedilatildeo perifeacuterica
ndash O pigmento malaacuterico geralmente eacute abundante
Diagnoacutestico - Pmalariae
bull Realizado por meio de caracteriacutesticas morfoloacutegicas do parasito
ndash Verificaccedilatildeo em esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado
ndash Posiccedilatildeo equatorial do parasito
ndash Desenvolvimento sem deformaccedilatildeo do eritroacutecito
Diagnoacutestico
bull QBC ndash Teacutecnica que combina concentraccedilatildeo dos parasitos
pela centrifugaccedilatildeo do sangue em em microhematoacutecrito e a coloraccedilatildeo dos aacutecidos nucleacuteicos do parasito pelo fluorcromo laranja de acridina
ndash Utilizaccedilatildeo de tubos especiais e microscopia epifluorescente
ndash Teste raacutepido
ndash Alta sensibilidade
Diagnoacutestico
bull ParaSight-F ( Becton amp Dickinson)
ndash Teste raacutepido para captura da proteiacutena rica em histidina 2 de Pfalciparum( PfHRP2) e enzimas conservadas de 4 espeacutecies de plasmoacutedio (DHL e aldolase
ndash Utilizaccedilatildeo de fita de nitrocelulose contendo ac monoclonal
ndash Lise de uma gota de sangue
ndash A reaccedilatildeo eacute revelada com adiccedilatildeo de ac policlonal anti-HRP2 conjugado com lipossomas contendo corante
Diagnoacutestico
bull PCR
ndash Sensibilidade e especificidade maior do que o esfregaccedilo sanguiacuteneo
Taxonomia
bull Reino Protozoa
bull Filo Sarcomastigophora
bull Classe Zoomastigophorea
bull Ordem Kinetoplastida
bull Famiacutelia Trypanosomatidae
bull Gecircneros Trypanosoma
bull Espeacutecie T cruzi
Trypanosoma cruzi
bull Distribuiccedilatildeo geograacutefica sul dos Estados Unidos ao sul da Argentina
bull Ciclo bioloacutegico em hospedeiro vertebrado e invertebrado
bull Hospedeiro vertebrado
ndash Homem e mamiacuteferos de vaacuterias ordens (silvestres e domiciliares) marsupiais (gambaacutes e cuiacutecas) edentados (tatus tamanduaacutes e preguiccedila) roedores catildees gatos entre outros
bull Hospedeiro invertebrado - Vetores
ndash Insetos hematoacutefagos (machos e fecircmeas) da subfamiacutelia Triatominae
Triatoma infestans
Triatoma infestans
Panstrongylus megistus
Panstrongylus megistus
Rhodnius prolixus
Rhodnius prolixus
Trypanosoma cruzi
bull Formas evolutivas
bull H invertebrado
ndash Epimastigota
ndash Tripomastigota metaciacuteclica
bull H vertebrado
ndash Amastigota ndash intracelulares (ceacutelulas musculares ceacutelulas de Schwann fibroblastos etc)
ndash Tripomastigota sanguiacutenea
Trypanosoma cruzi
bull Ciclo evolutivo ndash O triatomiacuteneo pica o homem e durante o repasto
sanguiacuteneo defeca e urina na pele
ndash Enquanto se alimenta libera no local substacircncias anesteacutesicas que o permitem promover um repasto demorado
ndash Prurido local e entrada das formas tripomastigotas metaciacuteclicas
ndash Fagocitose pelos macroacutefagos teciduais
ndash Transformaccedilatildeo das formas tripomastigotas em amastigotas intracelulares
Trypanosoma cruzi
ndash Divisatildeo das formas amastigotas diferenciaccedilatildeo em tripomastigotas rompimento do macroacutefago e liberaccedilatildeo de novas formas no interstiacutecio
ndash As formas tripomastigotas caem na corrente sanguiacutenea atingindo outras ceacutelulas
ndash Os triatomiacuteneos se infectam ao ingerir formas tripomastigotas sanguiacuteneas do hospedeiro vertebrado
Trypanosoma cruzi
ndash Estocircmago do vetor tripomastigotas se diferenciam em epimastigotas
ndash Intestino do vetor divisatildeo de epimastigotas por fissatildeo binaacuteria simples
ndash Porccedilatildeo final do tubo digestivo epimastigotas se diferenciam em tripomastigota metaciacuteclica forma infectante para o homem e entatildeo satildeo liberados nas fezes e urina do vetor
Tripomastigota
Cinetoplasto posterior ao nuacutecleo
cinetoplasto
Tripomastigota
Epimastigota
Cinetoplasto anterior ao nuacutecleo
Amastigota
Amastigotas Amastigotas e tripomastigotas
Monoacutecito parasitado com as formas amastigotas
Doenccedila de Chagas
bull Trypanosoma cruzi (Chagas 1909)
Diagnoacutestico laboratorial Fase aguda
bull Alta parasitemia
bull Pesquisa do parasito
ndash Exame de sangue a fresco
ndash Exame de sangue em gota espessa
ndash Esfregaccedilo sanguiacuteneo corado pelo Giemsa
ndash Microhematoacutecrito
ndash Meacutetodos de concentraccedilatildeo
ndash Inoculaccedilatildeo em aninais
Exame direto a fresco
bull Parasitas abundantes nos primeiros dias e semanas de incubaccedilatildeo
bull Colocar uma gota de sangue entre lacircmina e lamiacutenula e examinar imediatamente apoacutes a coleta para evitar a coagulaccedilatildeo
bull Para retardar a coagulaccedilatildeo adicionar uma gota de soluccedilatildeo salina
bull Analisar em microscoacutepio oacuteptico a presenccedila das formas tripomastigotas
Exame de sangue em gota espessa
bull Analisa uma maior quantidade de material bioloacutegico
bull Verifica a presenccedila de formas tripomastigotas sanguiacuteneas ndash Colocar 3 gotas de sangue na lacircmina ndash Com o canto de outra espalhar o material em uma
aacuterea de aproximadamente 1 cm da lacircmina ndash Deixar secar ao ar durante 6 horas Natildeo ultrapassar 36
horas ndash Corar pelo Giemsa Deixar em repouso por 30 min ndash Lavar e examinar
Esfregaccedilo sanguiacuteneo
bull Colocar uma gota de sangue na extremidade direita da lacircmina
bull Pegar outra lacircmina segurar por cima com a matildeo direita e com uma inclinaccedilatildeo de 45deg encostar adiante da gota
bull Deixar mesma se espalhar pela superfiacutecie de contato das duas lacircminas
bull Puxar a gota espalhada ateacute o final de lacircmina
bull Secar e corar pelo Giemsa ou Leishman
Esfregaccedilo sanguiacuteneo
Microhematoacutecrito Creme leucocitaacuterio
Microhematoacutecrito
bull Colher sangue em tubo capilar
bull Centrifugar em microcentriacutefuga por 5 minutos agrave 10000 rpm
bull Avaliar o microhematocrito em microscopia oacuteptica
bull Verificar a presenccedila das formas tripomastigotas presentes no creme leucocitaacuterio
bull Se positivo realizar esfregaccedilo do creme leucocitaacuterio
bull Fixar com aacutelcool metiacutelico e corar com Gienza Analisar em microscoacutepio oacuteptico
Meacutetodo de concentraccedilatildeo
bull Meacutetodo de Strout
ndash Realizar a coleta de sangue em tubo sem anticoagulante
ndash Aguardar a retraccedilatildeo do coaacutegulo Os parasitas concentrar-se-atildeo no soro a medida que ocorrer a retraccedilatildeo do coaacutegulo
ndash O soro eacute centrifugado para anaacutelise do sedimento
Inoculaccedilatildeo em animais
bull Inoculaccedilatildeo de sangue ou creme leucocitaacuterio em camundongos jovens
bull Inoculaccedilatildeo intra-peritoneal intra-conjuntival e a via oral
bull Avaliaccedilatildeo das formas de Tcruzi
bull Teacutecnica utilizada em pesquisa
Diagnoacutestico laboratorial Fase crocircnica
bull Xenodiagnoacutestico bull Hemocultura bull Reaccedilatildeo de hemaglutinaccedilatildeo indireta bull RIFI bull ELISA bull PCR bull PaGIA bull LMCo bull Pesquisa de anticorpos antitripomastigotas vivos
Hemocultura
bull Meio LIT ndash Liver Infusion Triptose
bull Meio NNN ndash McNeal Novy e Nicolle
bull Utilizaccedilatildeo de 30ml de sangue heparinizado
bull Centrifugaccedilatildeo por 30 minutos em 3000 rpm
bull Despreza-se o plasma e o sedimento celular eacute lavado com meio LIT ( Liver Infusion Triptose) para eliminaccedilatildeo de possiacuteveis anticorpos
Hemocultura
bull Sedimento distribuiacutedo em 6 tubos com 5 ml de LIT
bull Os tubos satildeo mantidos a 28degC homogeneizados 3x semana e avaliados quinzenalmente ateacute 90 dias
bull Centrifugaccedilatildeo e avaliaccedilatildeo do sedimento de hemaacutecias
bull Leitura realizada pela observaccedilatildeo microscoacutepica de gotas do meio
bull Aumento da positividade para sangue processado imediatamente apoacutes a coleta cultivado em prazo de tempo maior (120 dias) e repeticcedilatildeo da teacutecnica por 3 vezes
Wuchereria bancrofti
Taxonomia
bull Reino Animalia
bull Filo Nematoda
bull Classe Secernentea
bull Ordem Filariidea
bull Superfamiacutelia Filarioidea
bull FamiacuteliaOnchocercidae
bull GecircnerosWuchereria
bull Espeacutecie Wbancrofti
Formas evolutivas
bull Heteroxecircnico
bull Hospedeiro vertebrado homem
bull Hospedeiro intermediaacuterio Culex quinquefasciatus
bull Formas evolutivas ndash HV verme adulto (fecircmea e macho) localizados nos
vasos e gacircnglios linfaacuteticos da regiatildeo abdominal peacutelvica (perna e escroto) mamas e braccedilo
ndash microfilaacuterias eliminadas pelas fecircmeas graacutevidas Saem dos ductos linfaacuteticos e atingem circulaccedilatildeo sanguiacutenea
ndash HI larva L1 L2 e L3 (infectante)
Culex quinquefasciatus
Morfologia
bull Macho 35 a 4 cm x 01mm com extremidade posterior enrrolada ventralmente
bull Fecircmea 7 a 10cm x 03 mm com vagina exteriorizada em uma vulva localizada proacutexima agrave extremidade anterior
bull Microfilaacuteria Presenccedila de bainha e estilete bucal na parte anterior que as diferencia de outros filariacutedeos sanguiacuteneos Possuem 250 a 300 microm e uma grande qtde de nuacutecleos
bull Larva L3 possui aproximadamente 15 a 20 mm de comprimento
Microfilaacuteria
Ciclo evolutivo
bull Fecircmea do inseto realiza o hematofagismo noturno e ingere as microfilaacuterias
bull Estocircmago do vetor microfilaacuterias perdem a bainha atravessam a parede do estocircmago e migram para os muacutesculos toraacutecicos ndash L1
bull Apoacutes 20 dias a larva estaacute na forma infectante L3 medindo aproximadamente 2mm
bull Migraccedilatildeo da larva para a proboacutescida concentrando-se no laacutebio do moquito
Microfilaacuteria Presenccedila de bainha Cauda pontuda com nuacutecleos grandes largos e bem separados Nuacutecleos caudais em fila uacutenica
Ciclo evolutivo
bull Repasto sanguiacuteneo do inseto infectado
ndash As larvas L3 migram do laacutebio do vetor para a pele do HV
ndash Migram para os vasos linfaacuteticos e tornam-se vermes adultos
ndash Apoacutes 8 meses as fecircmeas graacutevidas produzem as primeiras microfilaacuterias
Periodicidade
bull Periodicidade noturna das microfilaacuterias
ndash Durante o dia localizam-se nos capilares profundos
ndash Durante a noite vasos sanguiacuteneos perifeacutericos
ndash Pico da microfilaremia meia-noite coincidindo com o horaacuterio de hematofagismo do inseto transmissor
Patologia
bull Periacuteodo assintomaacutetico bull Fase aguda bull Processos inflamatoacuterios produzidos por larvas L4 e adultos jovens
que colonizam as vias linfaacuteticas ndash Linfadenites linfonodos inguinais epitrocleanos e axilares com
desenvolvimento de granulomas com calcificaccedilatildeo apoacutes a morte dos vermes
ndash Linfangite inflamaccedilatildeo e dilataccedilatildeo dos vasos linfaacuteticos ndash Febre mal estar ndash Funiculite filariana linfangite do cordatildeo espermaacutetico e varicocele
bull Fase crocircnica ndash Hidrocele ndash Linfedema ndash Quiluacuteria ndash Elefantiacutease
Quiluacuteria
Patologia
bull Processos obstrutivos ndash Formaccedilatildeo de novelos envolvidos por reaccedilatildeo
inflamatoacuteria e pela formaccedilatildeo de fibrose
ndash Estase e congestatildeo da linfa produzindo linfoedema tecidual
ndash Extravasamento produzindo derrame linfaacutetico ascite linfaacutetica linfuacuteria linforreacuteia linfotoacuterax linfocele etc
ndash A ruptura de vasos linfaacuteticos para o interior do sistema excretor urinaacuterio daacute origem agrave quiluacuteria
Patologia
bull Complicaccedilotildees associadas agrave filariose
ndash Elefantiacutease
bull Caracterizada por processo inflamatoacuterio e fibrose crocircnica do oacutergatildeo atingido
bull Hipertrofia da derme do tecido conjuntivo aumento exagerado do volume do oacutergatildeo com queratinizaccedilatildeo e rugosidade
bull A pele perde a elasticidade resseca e se torna sujeita a infecccedilotildees bacterianas
Patologia
bull Permanecimento na aacuterea endecircmica
bull Nuacutemero de larvas inoculadas
bull Frequecircncia das re-infecccedilotildees
bull O nuacutemero de acasalamento dos vermes e suas localizaccedilotildees anatocircmicas
bull A sensibilizaccedilatildeo do organismo e a intensidade das reaccedilotildees inflamatoacuterias do paciente
bull As infecccedilotildees bacterianas associadas
Diagnoacutestico
bull Pesquisa de microfilaacuterias no sangue perifeacuterico ndash 20 40 ou 60 microL- de preferecircncia entre as 10 h da noite e 4h da manhatilde
ndash Gota espessa Coloraccedilatildeo de Giemsa
ndash Meacutetodos de concentraccedilatildeo Filtraccedilatildeo em membrana de policarbonato milipore ou nucleopore
ndash Meacutetodo de Knott
bull Na fase crocircnica as microfilaacuterias raramente satildeo detectadas no sangue perifeacuterico
Gota espessa
bull Possibilita a visualizaccedilatildeo da bainha fato que difere a microfilaria de W bancrofti de outro filariacutedeos sanguiacuteneos
bull Apresenta um baixo custo em comparaccedilatildeo com outras mais avanccediladas como a filtraccedilatildeo de sangue em membrana de policarbonato
bull Possui baixa sensibilidade natildeo indicada em situaccedilotildees em que os parasitados se mostram com baixa microfilaremia ou amicrofilarecircmicos
Concentraccedilatildeo
bull Baseia-se na passagem de sangue venoso atraveacutes de uma membrana (Milipore ou Nuclepore) de diacircmetro de 13 a 25 mm e poros de 5 ou 3 μm
bull O material retido na membrana sendo fixado corado e observado ao microscoacutepio
bull Essa teacutecnica assim como a de Knott permite a identificaccedilatildeo de indiviacuteduos com baixiacutessimas parasitemias (quantidade de microfilarias natildeo detectaacuteveis pela teacutecnica de gota espessa)
Teacutecnica de Knott
bull Retirar 2 ml de sangue total por punccedilatildeo venosa e colocar imediatamente em um tubo contendo 10 ml de formol a 2
bull Fechar o tubo e misture completamente invertendo-o e agitando-o O formol hemolisa as hemaacutecias mata fixa e distende as microfilaacuterias
bull Centrifugar o sangue a 1500 rpm por 5 minutos
bull Decantar o sobrenadante
Teacutecnica de Knott
bull Retirar o sedimento com uma pipeta Pasteur e espalhar a gota espessa sobre uma lacircmina
bull Deixar secar bem e corar com Giemsa
bull Examinar com objetiva de imersatildeo
bull Esta teacutecnica possibilita que o exame microscoacutepico laboratorial seja realizado vaacuterios dias apoacutes a coleta de material realizada no campo
Exames de imagem
bull Ultranossografia
ndash Possibilidade de visualizar os movimentos de vermes adultos vivos de W bancrofti em vaso linfaacutetico especificamente em vasos intraescrotais do cordatildeo espermaacutetico
ndash O movimento ativo e ininterrupto dos vermes adultos durante as 24 horas do dia eacute denominado sinal da ldquodanccedila das filaacuteriasrdquo
Diagnoacutestico soroloacutegico
bull Teste imunocromatograacutefico desenvolvido pelo ICT Diagnostic - ICT card
ndash Teste qualilativo
ndash Cartatildeo possui ac de antifilaacuteria e o controle eacute formado por ac anti Ig G humano
Plasmodium spp
Taxonomia
bull Reino Protozoa
bull FiloApicomplexa
bull Classe Sporozoea
bull Ordem Hemosporidiida
bull Famiacutelia Plasmodiidae
bull Gecircneros Plasmodium
bull Espeacutecie Pfalciparum Pvivax Povale e Pmalariae
Plasmodium
bull Ciclo bioloacutegico Hospedeiro vertebrado e invertebrado
bull Hospedeiro invertebrado ndash Vetor
ndash Fecircmeas hematoacutefagas do gecircnero Anopheles
ndash Brasil Anopheles (N)darlingi A (N) aquasalis A (N) albitarsis A (K) cruzii e A (K) bellator
ndash Possuem haacutebito noturno penetrando nas casas no crespuacutesculo saindo ao amanhecer
Plasmodium
bull Hospedeiro vertebrado homem
bull Transmissatildeo
ndash Vetor
ndash Transfusatildeo de sangue
ndash Compartilhamento de seringas
ndash Acidente com agulhas
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
bull Ciclo preacute-eritrociacutetico
ndash Forma inoculada esporozoiacutetos
ndash A fecircmea do anofelino infectado inocula no homem as formas infectantes localizadas na saliva
ndash Os esporozoiacutetas permancem na circulaccedilatildeo por aproximadamente uma hora
ndash Invadem os hepatoacutecitos e se diferenciam em trofozoiacutetas (criptozoiacuteto)
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
ndash Esquizogonia e formaccedilatildeo de esquizontes
ndash Divisatildeo nuclear e liberaccedilatildeo de merozoiacutetos
ndash Aproximadamente 10000 merozoiacutetos por hepatoacutecito
ndash Rompimento do hepatoacutecito e liberaccedilatildeo de merozoiacutetos na circulaccedilatildeo
ndash Duraccedilatildeo do ciclo aprox 1 a 2 semanas
Ciclo evolutivo
bull PVivax e Povale
ndash Alguns esporozoiacutetos geneticamente diferentes ficam na forma latente nos hepatoacutecitos permanecendo muitos meses Satildeo classificados como hipnozoiacuteto
ndash Satildeo responsaacuteveis pelas recaiacutedas tardias e formas de malaacuteria com periacuteodo de encubaccedilatildeo longo ndash 6 a 9 meses
FASE HEPAacuteTICA OU EXOERITROCIacuteTICA
Hepatoacutecito
FIacuteGADO
Invasatildeo do hepatoacutecito
Reproduccedilatildeo Assexuada
Esporozoiacutetos Lise dos hepatoacutecitos
Liberaccedilatildeo dos protozoaacuterios na corrente sanguumliacutenea
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
bull Ciclo eritrociacutetico
ndash Os merozoiacutetos invadem as hemaacutecias
ndash Diferenciaccedilatildeo em trofozoiacutetos
ndash Esquizogonia esquizonte
ndash Produccedilatildeo de merozoiacutetos e rompimento da hemaacutecia
ndash Merozoiacutetos invasatildeo de novas hemaacutecias
ndash Apoacutes algumas geraccedilotildees os merozoiacutetos natildeo mais se dividem e se diferenciam em gametoacutecitos ndash micro e macrogametoacutecito
FASE ERITROCIacuteTICA
Hepatoacutecito destruiacutedo pelos protozoaacuterios
Penetraccedilatildeo dos protozoaacuterios
Reproduccedilatildeo assexuada
Protozoaacuterios destroem as hemaacutecias
Diferenciaccedilatildeo em gametoacutecitos
Fecircmeas de Anopheles sugam hemaacutecias com gametoacutecitos
Ciclo no hospedeiro invertebrado
Ocorre nas hemaacutecias ou Eritroacutecitos
nas hemaacutecias
Protozoaacuterio no interior da hemaacutecia
Hemaacutecia com gametoacutecito
T trofozoiacuteto Em esquizonte com merozoiacuteto
Fase eritrociacutetica
bull Ciclo sanguiacuteneo ndash Pfalciparum P vivax e Povale 48 horas
ndash Pmalariae 72 horas
ndash Fonte de nutriccedilatildeo do Plasmodium no ciclo sanguiacuteneo hemoglobina
ndash Produccedilatildeo do pigmento malaacuterico hemozoiacutena bull Granulaccedilotildees de Schuffner Plasmodium vivax
bull Granulaccedilotildees de Maurer P falciparum
bull Granulaccedilotildees de Ziemann P malariae
ndash Fagocitose pelas ceacutelulas de Kuppffer e macroacutefagos do baccedilo
Trofozoiacutetos Pfalciparum
Trofozoiacutetos Pfalciparum
Esquizonte ndash P falciparum
Raros no sangue perifeacuterico Possuem 2 a 24 merozoiacutetos
Ocupam 23 do gloacutebulo vermelho
Gametoacutecitos Pfalciparum
Ciclo evolutivo Pvivax
Esquizonte ndash P vivax
Satildeo grandes e ameboacuteides Cromatina organizada em duas ou mais massas
Possuem 2 a 24 merozoiacutetos com pontos de cromatina
Gametoacutecito ndash Pvivax
Macrogametoacutecitos satildeo redondos ou ovais e ocupam toda ceacutelula hospedeira O citoplasma eacute geralmente corado de azul mais escuro e conteacutem pigmento marrom Microgametoacutecitos satildeo geralmente do tamanho de um RBC natildeo infectados com citoplasma corados de azul paacutelido rosa ou cinza
Trofozoiacutetos - P malariae
Esquizontes ndash P malariae
Aproximadamente 6 a 12 merozoiacutetos com arranjo de rosetas
Gametoacutecitos ndash P malariae
Ciclo evolutivo ndash HI
bull Ingestatildeo de hemaacutecias contendo gametoacutecitos durante o repasto sanguiacuteneo da fecircmea do anofelino
bull No intestino meacutedio do vetor gametogecircnese ndash Macrogametoacutecito ndash macrogameta feminino ndash Microgametoacutecito o processo de exflagelaccedilatildeo daacute
origem a 8 microgametas masculinos ndash Produccedilatildeo de ovo ou zigoto ndash O ovo encista na camada epitelial do intestino meacutedio
oocisto ndash Esporogonia liberaccedilatildeo de esporozoiacutetos
Ciclo evolutivo ndash HInvertebrado
ndash Os esporozoiacutetos satildeo transportados pelo hemolinfa ateacute as glacircndulas salivares do vetor ateacute atingirem o ducto salivar
bull Inoculaccedilatildeo no hospedeiro vertebrado atraveacutes da picada do inseto
Hemaacutecia com gametoacutecito
Fecircmeas de Anopheles sugam hemaacutecias com gametoacutecitos
CICLO NO INVERTEBRADO
No tubo digestivo
Zigoto
Penetraccedilatildeo na parede do tubo
digestivo
Migraccedilatildeo para as glacircndulas salivares
Desenvolvimento
Mosquito infectado
Diagnoacutestico
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado e espesso corado pelo Giemsa
bull Sangue colhido sem anticoagulante para melhor fixaccedilatildeo em lacircmina
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo espesso eacute mais eficiente para detecccedilatildeo da infecccedilatildeo
bull Esfregaccedilo delgado eacute mais eficiente para diferenciaccedilatildeo morfoloacutegica das espeacutecies
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo semiquantitativo
ndash Exame de 100 campos microscoacutepicos com resultado expresso pelo sistema de cruzes
Parasitos contados Nuacutemero de campos
microscoacutepicos cruzes
40 a 60 100 +2
1 1 +
2-20 1 ++
21-200 1 +++
+ 200 1 ++++
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo quantitativo derivado de anaacutelise semiquantitativa
Contagem de parasitos por campo
Cruzes Parasitos por mm3
40 a 60100 +2 200-300
1 + 301-500
2-20 ++ 501 - 10000
21-200 +++ 10001 ndash 100000
+ 200 ++++ 100000 ou mais
Diagnoacutestico
bull P falciparum
ndash Parte do ciclo celular aderido ao endoteacutelio capilar Encontro somente de trofozoitos e gametoacutecitos no sangue perifeacuterico
ndash Raramente os esquizontes satildeo encontrados no sangue perifeacuterico
Diagnoacutestico ndash Pvivax ndash Encontro de todas as formas de desenvolvimento ndash
trofozoiacuteto jovem maduro esquizontes e gametoacutecitos
ndash Os trofozoiacutetos maduros tecircm geralmente um aspecto irregular com extensotildees ameboacuteides em seu citoplasma
Diagnoacutestico ndash Pvivax
ndash Os gametoacutecitos femininos coram-se mais intensamente que os masculinos e apresentam nuacutecleo mais compacto geralmente em localizaccedilatildeo perifeacuterica
ndash O pigmento malaacuterico geralmente eacute abundante
Diagnoacutestico - Pmalariae
bull Realizado por meio de caracteriacutesticas morfoloacutegicas do parasito
ndash Verificaccedilatildeo em esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado
ndash Posiccedilatildeo equatorial do parasito
ndash Desenvolvimento sem deformaccedilatildeo do eritroacutecito
Diagnoacutestico
bull QBC ndash Teacutecnica que combina concentraccedilatildeo dos parasitos
pela centrifugaccedilatildeo do sangue em em microhematoacutecrito e a coloraccedilatildeo dos aacutecidos nucleacuteicos do parasito pelo fluorcromo laranja de acridina
ndash Utilizaccedilatildeo de tubos especiais e microscopia epifluorescente
ndash Teste raacutepido
ndash Alta sensibilidade
Diagnoacutestico
bull ParaSight-F ( Becton amp Dickinson)
ndash Teste raacutepido para captura da proteiacutena rica em histidina 2 de Pfalciparum( PfHRP2) e enzimas conservadas de 4 espeacutecies de plasmoacutedio (DHL e aldolase
ndash Utilizaccedilatildeo de fita de nitrocelulose contendo ac monoclonal
ndash Lise de uma gota de sangue
ndash A reaccedilatildeo eacute revelada com adiccedilatildeo de ac policlonal anti-HRP2 conjugado com lipossomas contendo corante
Diagnoacutestico
bull PCR
ndash Sensibilidade e especificidade maior do que o esfregaccedilo sanguiacuteneo
Trypanosoma cruzi
bull Distribuiccedilatildeo geograacutefica sul dos Estados Unidos ao sul da Argentina
bull Ciclo bioloacutegico em hospedeiro vertebrado e invertebrado
bull Hospedeiro vertebrado
ndash Homem e mamiacuteferos de vaacuterias ordens (silvestres e domiciliares) marsupiais (gambaacutes e cuiacutecas) edentados (tatus tamanduaacutes e preguiccedila) roedores catildees gatos entre outros
bull Hospedeiro invertebrado - Vetores
ndash Insetos hematoacutefagos (machos e fecircmeas) da subfamiacutelia Triatominae
Triatoma infestans
Triatoma infestans
Panstrongylus megistus
Panstrongylus megistus
Rhodnius prolixus
Rhodnius prolixus
Trypanosoma cruzi
bull Formas evolutivas
bull H invertebrado
ndash Epimastigota
ndash Tripomastigota metaciacuteclica
bull H vertebrado
ndash Amastigota ndash intracelulares (ceacutelulas musculares ceacutelulas de Schwann fibroblastos etc)
ndash Tripomastigota sanguiacutenea
Trypanosoma cruzi
bull Ciclo evolutivo ndash O triatomiacuteneo pica o homem e durante o repasto
sanguiacuteneo defeca e urina na pele
ndash Enquanto se alimenta libera no local substacircncias anesteacutesicas que o permitem promover um repasto demorado
ndash Prurido local e entrada das formas tripomastigotas metaciacuteclicas
ndash Fagocitose pelos macroacutefagos teciduais
ndash Transformaccedilatildeo das formas tripomastigotas em amastigotas intracelulares
Trypanosoma cruzi
ndash Divisatildeo das formas amastigotas diferenciaccedilatildeo em tripomastigotas rompimento do macroacutefago e liberaccedilatildeo de novas formas no interstiacutecio
ndash As formas tripomastigotas caem na corrente sanguiacutenea atingindo outras ceacutelulas
ndash Os triatomiacuteneos se infectam ao ingerir formas tripomastigotas sanguiacuteneas do hospedeiro vertebrado
Trypanosoma cruzi
ndash Estocircmago do vetor tripomastigotas se diferenciam em epimastigotas
ndash Intestino do vetor divisatildeo de epimastigotas por fissatildeo binaacuteria simples
ndash Porccedilatildeo final do tubo digestivo epimastigotas se diferenciam em tripomastigota metaciacuteclica forma infectante para o homem e entatildeo satildeo liberados nas fezes e urina do vetor
Tripomastigota
Cinetoplasto posterior ao nuacutecleo
cinetoplasto
Tripomastigota
Epimastigota
Cinetoplasto anterior ao nuacutecleo
Amastigota
Amastigotas Amastigotas e tripomastigotas
Monoacutecito parasitado com as formas amastigotas
Doenccedila de Chagas
bull Trypanosoma cruzi (Chagas 1909)
Diagnoacutestico laboratorial Fase aguda
bull Alta parasitemia
bull Pesquisa do parasito
ndash Exame de sangue a fresco
ndash Exame de sangue em gota espessa
ndash Esfregaccedilo sanguiacuteneo corado pelo Giemsa
ndash Microhematoacutecrito
ndash Meacutetodos de concentraccedilatildeo
ndash Inoculaccedilatildeo em aninais
Exame direto a fresco
bull Parasitas abundantes nos primeiros dias e semanas de incubaccedilatildeo
bull Colocar uma gota de sangue entre lacircmina e lamiacutenula e examinar imediatamente apoacutes a coleta para evitar a coagulaccedilatildeo
bull Para retardar a coagulaccedilatildeo adicionar uma gota de soluccedilatildeo salina
bull Analisar em microscoacutepio oacuteptico a presenccedila das formas tripomastigotas
Exame de sangue em gota espessa
bull Analisa uma maior quantidade de material bioloacutegico
bull Verifica a presenccedila de formas tripomastigotas sanguiacuteneas ndash Colocar 3 gotas de sangue na lacircmina ndash Com o canto de outra espalhar o material em uma
aacuterea de aproximadamente 1 cm da lacircmina ndash Deixar secar ao ar durante 6 horas Natildeo ultrapassar 36
horas ndash Corar pelo Giemsa Deixar em repouso por 30 min ndash Lavar e examinar
Esfregaccedilo sanguiacuteneo
bull Colocar uma gota de sangue na extremidade direita da lacircmina
bull Pegar outra lacircmina segurar por cima com a matildeo direita e com uma inclinaccedilatildeo de 45deg encostar adiante da gota
bull Deixar mesma se espalhar pela superfiacutecie de contato das duas lacircminas
bull Puxar a gota espalhada ateacute o final de lacircmina
bull Secar e corar pelo Giemsa ou Leishman
Esfregaccedilo sanguiacuteneo
Microhematoacutecrito Creme leucocitaacuterio
Microhematoacutecrito
bull Colher sangue em tubo capilar
bull Centrifugar em microcentriacutefuga por 5 minutos agrave 10000 rpm
bull Avaliar o microhematocrito em microscopia oacuteptica
bull Verificar a presenccedila das formas tripomastigotas presentes no creme leucocitaacuterio
bull Se positivo realizar esfregaccedilo do creme leucocitaacuterio
bull Fixar com aacutelcool metiacutelico e corar com Gienza Analisar em microscoacutepio oacuteptico
Meacutetodo de concentraccedilatildeo
bull Meacutetodo de Strout
ndash Realizar a coleta de sangue em tubo sem anticoagulante
ndash Aguardar a retraccedilatildeo do coaacutegulo Os parasitas concentrar-se-atildeo no soro a medida que ocorrer a retraccedilatildeo do coaacutegulo
ndash O soro eacute centrifugado para anaacutelise do sedimento
Inoculaccedilatildeo em animais
bull Inoculaccedilatildeo de sangue ou creme leucocitaacuterio em camundongos jovens
bull Inoculaccedilatildeo intra-peritoneal intra-conjuntival e a via oral
bull Avaliaccedilatildeo das formas de Tcruzi
bull Teacutecnica utilizada em pesquisa
Diagnoacutestico laboratorial Fase crocircnica
bull Xenodiagnoacutestico bull Hemocultura bull Reaccedilatildeo de hemaglutinaccedilatildeo indireta bull RIFI bull ELISA bull PCR bull PaGIA bull LMCo bull Pesquisa de anticorpos antitripomastigotas vivos
Hemocultura
bull Meio LIT ndash Liver Infusion Triptose
bull Meio NNN ndash McNeal Novy e Nicolle
bull Utilizaccedilatildeo de 30ml de sangue heparinizado
bull Centrifugaccedilatildeo por 30 minutos em 3000 rpm
bull Despreza-se o plasma e o sedimento celular eacute lavado com meio LIT ( Liver Infusion Triptose) para eliminaccedilatildeo de possiacuteveis anticorpos
Hemocultura
bull Sedimento distribuiacutedo em 6 tubos com 5 ml de LIT
bull Os tubos satildeo mantidos a 28degC homogeneizados 3x semana e avaliados quinzenalmente ateacute 90 dias
bull Centrifugaccedilatildeo e avaliaccedilatildeo do sedimento de hemaacutecias
bull Leitura realizada pela observaccedilatildeo microscoacutepica de gotas do meio
bull Aumento da positividade para sangue processado imediatamente apoacutes a coleta cultivado em prazo de tempo maior (120 dias) e repeticcedilatildeo da teacutecnica por 3 vezes
Wuchereria bancrofti
Taxonomia
bull Reino Animalia
bull Filo Nematoda
bull Classe Secernentea
bull Ordem Filariidea
bull Superfamiacutelia Filarioidea
bull FamiacuteliaOnchocercidae
bull GecircnerosWuchereria
bull Espeacutecie Wbancrofti
Formas evolutivas
bull Heteroxecircnico
bull Hospedeiro vertebrado homem
bull Hospedeiro intermediaacuterio Culex quinquefasciatus
bull Formas evolutivas ndash HV verme adulto (fecircmea e macho) localizados nos
vasos e gacircnglios linfaacuteticos da regiatildeo abdominal peacutelvica (perna e escroto) mamas e braccedilo
ndash microfilaacuterias eliminadas pelas fecircmeas graacutevidas Saem dos ductos linfaacuteticos e atingem circulaccedilatildeo sanguiacutenea
ndash HI larva L1 L2 e L3 (infectante)
Culex quinquefasciatus
Morfologia
bull Macho 35 a 4 cm x 01mm com extremidade posterior enrrolada ventralmente
bull Fecircmea 7 a 10cm x 03 mm com vagina exteriorizada em uma vulva localizada proacutexima agrave extremidade anterior
bull Microfilaacuteria Presenccedila de bainha e estilete bucal na parte anterior que as diferencia de outros filariacutedeos sanguiacuteneos Possuem 250 a 300 microm e uma grande qtde de nuacutecleos
bull Larva L3 possui aproximadamente 15 a 20 mm de comprimento
Microfilaacuteria
Ciclo evolutivo
bull Fecircmea do inseto realiza o hematofagismo noturno e ingere as microfilaacuterias
bull Estocircmago do vetor microfilaacuterias perdem a bainha atravessam a parede do estocircmago e migram para os muacutesculos toraacutecicos ndash L1
bull Apoacutes 20 dias a larva estaacute na forma infectante L3 medindo aproximadamente 2mm
bull Migraccedilatildeo da larva para a proboacutescida concentrando-se no laacutebio do moquito
Microfilaacuteria Presenccedila de bainha Cauda pontuda com nuacutecleos grandes largos e bem separados Nuacutecleos caudais em fila uacutenica
Ciclo evolutivo
bull Repasto sanguiacuteneo do inseto infectado
ndash As larvas L3 migram do laacutebio do vetor para a pele do HV
ndash Migram para os vasos linfaacuteticos e tornam-se vermes adultos
ndash Apoacutes 8 meses as fecircmeas graacutevidas produzem as primeiras microfilaacuterias
Periodicidade
bull Periodicidade noturna das microfilaacuterias
ndash Durante o dia localizam-se nos capilares profundos
ndash Durante a noite vasos sanguiacuteneos perifeacutericos
ndash Pico da microfilaremia meia-noite coincidindo com o horaacuterio de hematofagismo do inseto transmissor
Patologia
bull Periacuteodo assintomaacutetico bull Fase aguda bull Processos inflamatoacuterios produzidos por larvas L4 e adultos jovens
que colonizam as vias linfaacuteticas ndash Linfadenites linfonodos inguinais epitrocleanos e axilares com
desenvolvimento de granulomas com calcificaccedilatildeo apoacutes a morte dos vermes
ndash Linfangite inflamaccedilatildeo e dilataccedilatildeo dos vasos linfaacuteticos ndash Febre mal estar ndash Funiculite filariana linfangite do cordatildeo espermaacutetico e varicocele
bull Fase crocircnica ndash Hidrocele ndash Linfedema ndash Quiluacuteria ndash Elefantiacutease
Quiluacuteria
Patologia
bull Processos obstrutivos ndash Formaccedilatildeo de novelos envolvidos por reaccedilatildeo
inflamatoacuteria e pela formaccedilatildeo de fibrose
ndash Estase e congestatildeo da linfa produzindo linfoedema tecidual
ndash Extravasamento produzindo derrame linfaacutetico ascite linfaacutetica linfuacuteria linforreacuteia linfotoacuterax linfocele etc
ndash A ruptura de vasos linfaacuteticos para o interior do sistema excretor urinaacuterio daacute origem agrave quiluacuteria
Patologia
bull Complicaccedilotildees associadas agrave filariose
ndash Elefantiacutease
bull Caracterizada por processo inflamatoacuterio e fibrose crocircnica do oacutergatildeo atingido
bull Hipertrofia da derme do tecido conjuntivo aumento exagerado do volume do oacutergatildeo com queratinizaccedilatildeo e rugosidade
bull A pele perde a elasticidade resseca e se torna sujeita a infecccedilotildees bacterianas
Patologia
bull Permanecimento na aacuterea endecircmica
bull Nuacutemero de larvas inoculadas
bull Frequecircncia das re-infecccedilotildees
bull O nuacutemero de acasalamento dos vermes e suas localizaccedilotildees anatocircmicas
bull A sensibilizaccedilatildeo do organismo e a intensidade das reaccedilotildees inflamatoacuterias do paciente
bull As infecccedilotildees bacterianas associadas
Diagnoacutestico
bull Pesquisa de microfilaacuterias no sangue perifeacuterico ndash 20 40 ou 60 microL- de preferecircncia entre as 10 h da noite e 4h da manhatilde
ndash Gota espessa Coloraccedilatildeo de Giemsa
ndash Meacutetodos de concentraccedilatildeo Filtraccedilatildeo em membrana de policarbonato milipore ou nucleopore
ndash Meacutetodo de Knott
bull Na fase crocircnica as microfilaacuterias raramente satildeo detectadas no sangue perifeacuterico
Gota espessa
bull Possibilita a visualizaccedilatildeo da bainha fato que difere a microfilaria de W bancrofti de outro filariacutedeos sanguiacuteneos
bull Apresenta um baixo custo em comparaccedilatildeo com outras mais avanccediladas como a filtraccedilatildeo de sangue em membrana de policarbonato
bull Possui baixa sensibilidade natildeo indicada em situaccedilotildees em que os parasitados se mostram com baixa microfilaremia ou amicrofilarecircmicos
Concentraccedilatildeo
bull Baseia-se na passagem de sangue venoso atraveacutes de uma membrana (Milipore ou Nuclepore) de diacircmetro de 13 a 25 mm e poros de 5 ou 3 μm
bull O material retido na membrana sendo fixado corado e observado ao microscoacutepio
bull Essa teacutecnica assim como a de Knott permite a identificaccedilatildeo de indiviacuteduos com baixiacutessimas parasitemias (quantidade de microfilarias natildeo detectaacuteveis pela teacutecnica de gota espessa)
Teacutecnica de Knott
bull Retirar 2 ml de sangue total por punccedilatildeo venosa e colocar imediatamente em um tubo contendo 10 ml de formol a 2
bull Fechar o tubo e misture completamente invertendo-o e agitando-o O formol hemolisa as hemaacutecias mata fixa e distende as microfilaacuterias
bull Centrifugar o sangue a 1500 rpm por 5 minutos
bull Decantar o sobrenadante
Teacutecnica de Knott
bull Retirar o sedimento com uma pipeta Pasteur e espalhar a gota espessa sobre uma lacircmina
bull Deixar secar bem e corar com Giemsa
bull Examinar com objetiva de imersatildeo
bull Esta teacutecnica possibilita que o exame microscoacutepico laboratorial seja realizado vaacuterios dias apoacutes a coleta de material realizada no campo
Exames de imagem
bull Ultranossografia
ndash Possibilidade de visualizar os movimentos de vermes adultos vivos de W bancrofti em vaso linfaacutetico especificamente em vasos intraescrotais do cordatildeo espermaacutetico
ndash O movimento ativo e ininterrupto dos vermes adultos durante as 24 horas do dia eacute denominado sinal da ldquodanccedila das filaacuteriasrdquo
Diagnoacutestico soroloacutegico
bull Teste imunocromatograacutefico desenvolvido pelo ICT Diagnostic - ICT card
ndash Teste qualilativo
ndash Cartatildeo possui ac de antifilaacuteria e o controle eacute formado por ac anti Ig G humano
Plasmodium spp
Taxonomia
bull Reino Protozoa
bull FiloApicomplexa
bull Classe Sporozoea
bull Ordem Hemosporidiida
bull Famiacutelia Plasmodiidae
bull Gecircneros Plasmodium
bull Espeacutecie Pfalciparum Pvivax Povale e Pmalariae
Plasmodium
bull Ciclo bioloacutegico Hospedeiro vertebrado e invertebrado
bull Hospedeiro invertebrado ndash Vetor
ndash Fecircmeas hematoacutefagas do gecircnero Anopheles
ndash Brasil Anopheles (N)darlingi A (N) aquasalis A (N) albitarsis A (K) cruzii e A (K) bellator
ndash Possuem haacutebito noturno penetrando nas casas no crespuacutesculo saindo ao amanhecer
Plasmodium
bull Hospedeiro vertebrado homem
bull Transmissatildeo
ndash Vetor
ndash Transfusatildeo de sangue
ndash Compartilhamento de seringas
ndash Acidente com agulhas
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
bull Ciclo preacute-eritrociacutetico
ndash Forma inoculada esporozoiacutetos
ndash A fecircmea do anofelino infectado inocula no homem as formas infectantes localizadas na saliva
ndash Os esporozoiacutetas permancem na circulaccedilatildeo por aproximadamente uma hora
ndash Invadem os hepatoacutecitos e se diferenciam em trofozoiacutetas (criptozoiacuteto)
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
ndash Esquizogonia e formaccedilatildeo de esquizontes
ndash Divisatildeo nuclear e liberaccedilatildeo de merozoiacutetos
ndash Aproximadamente 10000 merozoiacutetos por hepatoacutecito
ndash Rompimento do hepatoacutecito e liberaccedilatildeo de merozoiacutetos na circulaccedilatildeo
ndash Duraccedilatildeo do ciclo aprox 1 a 2 semanas
Ciclo evolutivo
bull PVivax e Povale
ndash Alguns esporozoiacutetos geneticamente diferentes ficam na forma latente nos hepatoacutecitos permanecendo muitos meses Satildeo classificados como hipnozoiacuteto
ndash Satildeo responsaacuteveis pelas recaiacutedas tardias e formas de malaacuteria com periacuteodo de encubaccedilatildeo longo ndash 6 a 9 meses
FASE HEPAacuteTICA OU EXOERITROCIacuteTICA
Hepatoacutecito
FIacuteGADO
Invasatildeo do hepatoacutecito
Reproduccedilatildeo Assexuada
Esporozoiacutetos Lise dos hepatoacutecitos
Liberaccedilatildeo dos protozoaacuterios na corrente sanguumliacutenea
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
bull Ciclo eritrociacutetico
ndash Os merozoiacutetos invadem as hemaacutecias
ndash Diferenciaccedilatildeo em trofozoiacutetos
ndash Esquizogonia esquizonte
ndash Produccedilatildeo de merozoiacutetos e rompimento da hemaacutecia
ndash Merozoiacutetos invasatildeo de novas hemaacutecias
ndash Apoacutes algumas geraccedilotildees os merozoiacutetos natildeo mais se dividem e se diferenciam em gametoacutecitos ndash micro e macrogametoacutecito
FASE ERITROCIacuteTICA
Hepatoacutecito destruiacutedo pelos protozoaacuterios
Penetraccedilatildeo dos protozoaacuterios
Reproduccedilatildeo assexuada
Protozoaacuterios destroem as hemaacutecias
Diferenciaccedilatildeo em gametoacutecitos
Fecircmeas de Anopheles sugam hemaacutecias com gametoacutecitos
Ciclo no hospedeiro invertebrado
Ocorre nas hemaacutecias ou Eritroacutecitos
nas hemaacutecias
Protozoaacuterio no interior da hemaacutecia
Hemaacutecia com gametoacutecito
T trofozoiacuteto Em esquizonte com merozoiacuteto
Fase eritrociacutetica
bull Ciclo sanguiacuteneo ndash Pfalciparum P vivax e Povale 48 horas
ndash Pmalariae 72 horas
ndash Fonte de nutriccedilatildeo do Plasmodium no ciclo sanguiacuteneo hemoglobina
ndash Produccedilatildeo do pigmento malaacuterico hemozoiacutena bull Granulaccedilotildees de Schuffner Plasmodium vivax
bull Granulaccedilotildees de Maurer P falciparum
bull Granulaccedilotildees de Ziemann P malariae
ndash Fagocitose pelas ceacutelulas de Kuppffer e macroacutefagos do baccedilo
Trofozoiacutetos Pfalciparum
Trofozoiacutetos Pfalciparum
Esquizonte ndash P falciparum
Raros no sangue perifeacuterico Possuem 2 a 24 merozoiacutetos
Ocupam 23 do gloacutebulo vermelho
Gametoacutecitos Pfalciparum
Ciclo evolutivo Pvivax
Esquizonte ndash P vivax
Satildeo grandes e ameboacuteides Cromatina organizada em duas ou mais massas
Possuem 2 a 24 merozoiacutetos com pontos de cromatina
Gametoacutecito ndash Pvivax
Macrogametoacutecitos satildeo redondos ou ovais e ocupam toda ceacutelula hospedeira O citoplasma eacute geralmente corado de azul mais escuro e conteacutem pigmento marrom Microgametoacutecitos satildeo geralmente do tamanho de um RBC natildeo infectados com citoplasma corados de azul paacutelido rosa ou cinza
Trofozoiacutetos - P malariae
Esquizontes ndash P malariae
Aproximadamente 6 a 12 merozoiacutetos com arranjo de rosetas
Gametoacutecitos ndash P malariae
Ciclo evolutivo ndash HI
bull Ingestatildeo de hemaacutecias contendo gametoacutecitos durante o repasto sanguiacuteneo da fecircmea do anofelino
bull No intestino meacutedio do vetor gametogecircnese ndash Macrogametoacutecito ndash macrogameta feminino ndash Microgametoacutecito o processo de exflagelaccedilatildeo daacute
origem a 8 microgametas masculinos ndash Produccedilatildeo de ovo ou zigoto ndash O ovo encista na camada epitelial do intestino meacutedio
oocisto ndash Esporogonia liberaccedilatildeo de esporozoiacutetos
Ciclo evolutivo ndash HInvertebrado
ndash Os esporozoiacutetos satildeo transportados pelo hemolinfa ateacute as glacircndulas salivares do vetor ateacute atingirem o ducto salivar
bull Inoculaccedilatildeo no hospedeiro vertebrado atraveacutes da picada do inseto
Hemaacutecia com gametoacutecito
Fecircmeas de Anopheles sugam hemaacutecias com gametoacutecitos
CICLO NO INVERTEBRADO
No tubo digestivo
Zigoto
Penetraccedilatildeo na parede do tubo
digestivo
Migraccedilatildeo para as glacircndulas salivares
Desenvolvimento
Mosquito infectado
Diagnoacutestico
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado e espesso corado pelo Giemsa
bull Sangue colhido sem anticoagulante para melhor fixaccedilatildeo em lacircmina
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo espesso eacute mais eficiente para detecccedilatildeo da infecccedilatildeo
bull Esfregaccedilo delgado eacute mais eficiente para diferenciaccedilatildeo morfoloacutegica das espeacutecies
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo semiquantitativo
ndash Exame de 100 campos microscoacutepicos com resultado expresso pelo sistema de cruzes
Parasitos contados Nuacutemero de campos
microscoacutepicos cruzes
40 a 60 100 +2
1 1 +
2-20 1 ++
21-200 1 +++
+ 200 1 ++++
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo quantitativo derivado de anaacutelise semiquantitativa
Contagem de parasitos por campo
Cruzes Parasitos por mm3
40 a 60100 +2 200-300
1 + 301-500
2-20 ++ 501 - 10000
21-200 +++ 10001 ndash 100000
+ 200 ++++ 100000 ou mais
Diagnoacutestico
bull P falciparum
ndash Parte do ciclo celular aderido ao endoteacutelio capilar Encontro somente de trofozoitos e gametoacutecitos no sangue perifeacuterico
ndash Raramente os esquizontes satildeo encontrados no sangue perifeacuterico
Diagnoacutestico ndash Pvivax ndash Encontro de todas as formas de desenvolvimento ndash
trofozoiacuteto jovem maduro esquizontes e gametoacutecitos
ndash Os trofozoiacutetos maduros tecircm geralmente um aspecto irregular com extensotildees ameboacuteides em seu citoplasma
Diagnoacutestico ndash Pvivax
ndash Os gametoacutecitos femininos coram-se mais intensamente que os masculinos e apresentam nuacutecleo mais compacto geralmente em localizaccedilatildeo perifeacuterica
ndash O pigmento malaacuterico geralmente eacute abundante
Diagnoacutestico - Pmalariae
bull Realizado por meio de caracteriacutesticas morfoloacutegicas do parasito
ndash Verificaccedilatildeo em esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado
ndash Posiccedilatildeo equatorial do parasito
ndash Desenvolvimento sem deformaccedilatildeo do eritroacutecito
Diagnoacutestico
bull QBC ndash Teacutecnica que combina concentraccedilatildeo dos parasitos
pela centrifugaccedilatildeo do sangue em em microhematoacutecrito e a coloraccedilatildeo dos aacutecidos nucleacuteicos do parasito pelo fluorcromo laranja de acridina
ndash Utilizaccedilatildeo de tubos especiais e microscopia epifluorescente
ndash Teste raacutepido
ndash Alta sensibilidade
Diagnoacutestico
bull ParaSight-F ( Becton amp Dickinson)
ndash Teste raacutepido para captura da proteiacutena rica em histidina 2 de Pfalciparum( PfHRP2) e enzimas conservadas de 4 espeacutecies de plasmoacutedio (DHL e aldolase
ndash Utilizaccedilatildeo de fita de nitrocelulose contendo ac monoclonal
ndash Lise de uma gota de sangue
ndash A reaccedilatildeo eacute revelada com adiccedilatildeo de ac policlonal anti-HRP2 conjugado com lipossomas contendo corante
Diagnoacutestico
bull PCR
ndash Sensibilidade e especificidade maior do que o esfregaccedilo sanguiacuteneo
Triatoma infestans
Triatoma infestans
Panstrongylus megistus
Panstrongylus megistus
Rhodnius prolixus
Rhodnius prolixus
Trypanosoma cruzi
bull Formas evolutivas
bull H invertebrado
ndash Epimastigota
ndash Tripomastigota metaciacuteclica
bull H vertebrado
ndash Amastigota ndash intracelulares (ceacutelulas musculares ceacutelulas de Schwann fibroblastos etc)
ndash Tripomastigota sanguiacutenea
Trypanosoma cruzi
bull Ciclo evolutivo ndash O triatomiacuteneo pica o homem e durante o repasto
sanguiacuteneo defeca e urina na pele
ndash Enquanto se alimenta libera no local substacircncias anesteacutesicas que o permitem promover um repasto demorado
ndash Prurido local e entrada das formas tripomastigotas metaciacuteclicas
ndash Fagocitose pelos macroacutefagos teciduais
ndash Transformaccedilatildeo das formas tripomastigotas em amastigotas intracelulares
Trypanosoma cruzi
ndash Divisatildeo das formas amastigotas diferenciaccedilatildeo em tripomastigotas rompimento do macroacutefago e liberaccedilatildeo de novas formas no interstiacutecio
ndash As formas tripomastigotas caem na corrente sanguiacutenea atingindo outras ceacutelulas
ndash Os triatomiacuteneos se infectam ao ingerir formas tripomastigotas sanguiacuteneas do hospedeiro vertebrado
Trypanosoma cruzi
ndash Estocircmago do vetor tripomastigotas se diferenciam em epimastigotas
ndash Intestino do vetor divisatildeo de epimastigotas por fissatildeo binaacuteria simples
ndash Porccedilatildeo final do tubo digestivo epimastigotas se diferenciam em tripomastigota metaciacuteclica forma infectante para o homem e entatildeo satildeo liberados nas fezes e urina do vetor
Tripomastigota
Cinetoplasto posterior ao nuacutecleo
cinetoplasto
Tripomastigota
Epimastigota
Cinetoplasto anterior ao nuacutecleo
Amastigota
Amastigotas Amastigotas e tripomastigotas
Monoacutecito parasitado com as formas amastigotas
Doenccedila de Chagas
bull Trypanosoma cruzi (Chagas 1909)
Diagnoacutestico laboratorial Fase aguda
bull Alta parasitemia
bull Pesquisa do parasito
ndash Exame de sangue a fresco
ndash Exame de sangue em gota espessa
ndash Esfregaccedilo sanguiacuteneo corado pelo Giemsa
ndash Microhematoacutecrito
ndash Meacutetodos de concentraccedilatildeo
ndash Inoculaccedilatildeo em aninais
Exame direto a fresco
bull Parasitas abundantes nos primeiros dias e semanas de incubaccedilatildeo
bull Colocar uma gota de sangue entre lacircmina e lamiacutenula e examinar imediatamente apoacutes a coleta para evitar a coagulaccedilatildeo
bull Para retardar a coagulaccedilatildeo adicionar uma gota de soluccedilatildeo salina
bull Analisar em microscoacutepio oacuteptico a presenccedila das formas tripomastigotas
Exame de sangue em gota espessa
bull Analisa uma maior quantidade de material bioloacutegico
bull Verifica a presenccedila de formas tripomastigotas sanguiacuteneas ndash Colocar 3 gotas de sangue na lacircmina ndash Com o canto de outra espalhar o material em uma
aacuterea de aproximadamente 1 cm da lacircmina ndash Deixar secar ao ar durante 6 horas Natildeo ultrapassar 36
horas ndash Corar pelo Giemsa Deixar em repouso por 30 min ndash Lavar e examinar
Esfregaccedilo sanguiacuteneo
bull Colocar uma gota de sangue na extremidade direita da lacircmina
bull Pegar outra lacircmina segurar por cima com a matildeo direita e com uma inclinaccedilatildeo de 45deg encostar adiante da gota
bull Deixar mesma se espalhar pela superfiacutecie de contato das duas lacircminas
bull Puxar a gota espalhada ateacute o final de lacircmina
bull Secar e corar pelo Giemsa ou Leishman
Esfregaccedilo sanguiacuteneo
Microhematoacutecrito Creme leucocitaacuterio
Microhematoacutecrito
bull Colher sangue em tubo capilar
bull Centrifugar em microcentriacutefuga por 5 minutos agrave 10000 rpm
bull Avaliar o microhematocrito em microscopia oacuteptica
bull Verificar a presenccedila das formas tripomastigotas presentes no creme leucocitaacuterio
bull Se positivo realizar esfregaccedilo do creme leucocitaacuterio
bull Fixar com aacutelcool metiacutelico e corar com Gienza Analisar em microscoacutepio oacuteptico
Meacutetodo de concentraccedilatildeo
bull Meacutetodo de Strout
ndash Realizar a coleta de sangue em tubo sem anticoagulante
ndash Aguardar a retraccedilatildeo do coaacutegulo Os parasitas concentrar-se-atildeo no soro a medida que ocorrer a retraccedilatildeo do coaacutegulo
ndash O soro eacute centrifugado para anaacutelise do sedimento
Inoculaccedilatildeo em animais
bull Inoculaccedilatildeo de sangue ou creme leucocitaacuterio em camundongos jovens
bull Inoculaccedilatildeo intra-peritoneal intra-conjuntival e a via oral
bull Avaliaccedilatildeo das formas de Tcruzi
bull Teacutecnica utilizada em pesquisa
Diagnoacutestico laboratorial Fase crocircnica
bull Xenodiagnoacutestico bull Hemocultura bull Reaccedilatildeo de hemaglutinaccedilatildeo indireta bull RIFI bull ELISA bull PCR bull PaGIA bull LMCo bull Pesquisa de anticorpos antitripomastigotas vivos
Hemocultura
bull Meio LIT ndash Liver Infusion Triptose
bull Meio NNN ndash McNeal Novy e Nicolle
bull Utilizaccedilatildeo de 30ml de sangue heparinizado
bull Centrifugaccedilatildeo por 30 minutos em 3000 rpm
bull Despreza-se o plasma e o sedimento celular eacute lavado com meio LIT ( Liver Infusion Triptose) para eliminaccedilatildeo de possiacuteveis anticorpos
Hemocultura
bull Sedimento distribuiacutedo em 6 tubos com 5 ml de LIT
bull Os tubos satildeo mantidos a 28degC homogeneizados 3x semana e avaliados quinzenalmente ateacute 90 dias
bull Centrifugaccedilatildeo e avaliaccedilatildeo do sedimento de hemaacutecias
bull Leitura realizada pela observaccedilatildeo microscoacutepica de gotas do meio
bull Aumento da positividade para sangue processado imediatamente apoacutes a coleta cultivado em prazo de tempo maior (120 dias) e repeticcedilatildeo da teacutecnica por 3 vezes
Wuchereria bancrofti
Taxonomia
bull Reino Animalia
bull Filo Nematoda
bull Classe Secernentea
bull Ordem Filariidea
bull Superfamiacutelia Filarioidea
bull FamiacuteliaOnchocercidae
bull GecircnerosWuchereria
bull Espeacutecie Wbancrofti
Formas evolutivas
bull Heteroxecircnico
bull Hospedeiro vertebrado homem
bull Hospedeiro intermediaacuterio Culex quinquefasciatus
bull Formas evolutivas ndash HV verme adulto (fecircmea e macho) localizados nos
vasos e gacircnglios linfaacuteticos da regiatildeo abdominal peacutelvica (perna e escroto) mamas e braccedilo
ndash microfilaacuterias eliminadas pelas fecircmeas graacutevidas Saem dos ductos linfaacuteticos e atingem circulaccedilatildeo sanguiacutenea
ndash HI larva L1 L2 e L3 (infectante)
Culex quinquefasciatus
Morfologia
bull Macho 35 a 4 cm x 01mm com extremidade posterior enrrolada ventralmente
bull Fecircmea 7 a 10cm x 03 mm com vagina exteriorizada em uma vulva localizada proacutexima agrave extremidade anterior
bull Microfilaacuteria Presenccedila de bainha e estilete bucal na parte anterior que as diferencia de outros filariacutedeos sanguiacuteneos Possuem 250 a 300 microm e uma grande qtde de nuacutecleos
bull Larva L3 possui aproximadamente 15 a 20 mm de comprimento
Microfilaacuteria
Ciclo evolutivo
bull Fecircmea do inseto realiza o hematofagismo noturno e ingere as microfilaacuterias
bull Estocircmago do vetor microfilaacuterias perdem a bainha atravessam a parede do estocircmago e migram para os muacutesculos toraacutecicos ndash L1
bull Apoacutes 20 dias a larva estaacute na forma infectante L3 medindo aproximadamente 2mm
bull Migraccedilatildeo da larva para a proboacutescida concentrando-se no laacutebio do moquito
Microfilaacuteria Presenccedila de bainha Cauda pontuda com nuacutecleos grandes largos e bem separados Nuacutecleos caudais em fila uacutenica
Ciclo evolutivo
bull Repasto sanguiacuteneo do inseto infectado
ndash As larvas L3 migram do laacutebio do vetor para a pele do HV
ndash Migram para os vasos linfaacuteticos e tornam-se vermes adultos
ndash Apoacutes 8 meses as fecircmeas graacutevidas produzem as primeiras microfilaacuterias
Periodicidade
bull Periodicidade noturna das microfilaacuterias
ndash Durante o dia localizam-se nos capilares profundos
ndash Durante a noite vasos sanguiacuteneos perifeacutericos
ndash Pico da microfilaremia meia-noite coincidindo com o horaacuterio de hematofagismo do inseto transmissor
Patologia
bull Periacuteodo assintomaacutetico bull Fase aguda bull Processos inflamatoacuterios produzidos por larvas L4 e adultos jovens
que colonizam as vias linfaacuteticas ndash Linfadenites linfonodos inguinais epitrocleanos e axilares com
desenvolvimento de granulomas com calcificaccedilatildeo apoacutes a morte dos vermes
ndash Linfangite inflamaccedilatildeo e dilataccedilatildeo dos vasos linfaacuteticos ndash Febre mal estar ndash Funiculite filariana linfangite do cordatildeo espermaacutetico e varicocele
bull Fase crocircnica ndash Hidrocele ndash Linfedema ndash Quiluacuteria ndash Elefantiacutease
Quiluacuteria
Patologia
bull Processos obstrutivos ndash Formaccedilatildeo de novelos envolvidos por reaccedilatildeo
inflamatoacuteria e pela formaccedilatildeo de fibrose
ndash Estase e congestatildeo da linfa produzindo linfoedema tecidual
ndash Extravasamento produzindo derrame linfaacutetico ascite linfaacutetica linfuacuteria linforreacuteia linfotoacuterax linfocele etc
ndash A ruptura de vasos linfaacuteticos para o interior do sistema excretor urinaacuterio daacute origem agrave quiluacuteria
Patologia
bull Complicaccedilotildees associadas agrave filariose
ndash Elefantiacutease
bull Caracterizada por processo inflamatoacuterio e fibrose crocircnica do oacutergatildeo atingido
bull Hipertrofia da derme do tecido conjuntivo aumento exagerado do volume do oacutergatildeo com queratinizaccedilatildeo e rugosidade
bull A pele perde a elasticidade resseca e se torna sujeita a infecccedilotildees bacterianas
Patologia
bull Permanecimento na aacuterea endecircmica
bull Nuacutemero de larvas inoculadas
bull Frequecircncia das re-infecccedilotildees
bull O nuacutemero de acasalamento dos vermes e suas localizaccedilotildees anatocircmicas
bull A sensibilizaccedilatildeo do organismo e a intensidade das reaccedilotildees inflamatoacuterias do paciente
bull As infecccedilotildees bacterianas associadas
Diagnoacutestico
bull Pesquisa de microfilaacuterias no sangue perifeacuterico ndash 20 40 ou 60 microL- de preferecircncia entre as 10 h da noite e 4h da manhatilde
ndash Gota espessa Coloraccedilatildeo de Giemsa
ndash Meacutetodos de concentraccedilatildeo Filtraccedilatildeo em membrana de policarbonato milipore ou nucleopore
ndash Meacutetodo de Knott
bull Na fase crocircnica as microfilaacuterias raramente satildeo detectadas no sangue perifeacuterico
Gota espessa
bull Possibilita a visualizaccedilatildeo da bainha fato que difere a microfilaria de W bancrofti de outro filariacutedeos sanguiacuteneos
bull Apresenta um baixo custo em comparaccedilatildeo com outras mais avanccediladas como a filtraccedilatildeo de sangue em membrana de policarbonato
bull Possui baixa sensibilidade natildeo indicada em situaccedilotildees em que os parasitados se mostram com baixa microfilaremia ou amicrofilarecircmicos
Concentraccedilatildeo
bull Baseia-se na passagem de sangue venoso atraveacutes de uma membrana (Milipore ou Nuclepore) de diacircmetro de 13 a 25 mm e poros de 5 ou 3 μm
bull O material retido na membrana sendo fixado corado e observado ao microscoacutepio
bull Essa teacutecnica assim como a de Knott permite a identificaccedilatildeo de indiviacuteduos com baixiacutessimas parasitemias (quantidade de microfilarias natildeo detectaacuteveis pela teacutecnica de gota espessa)
Teacutecnica de Knott
bull Retirar 2 ml de sangue total por punccedilatildeo venosa e colocar imediatamente em um tubo contendo 10 ml de formol a 2
bull Fechar o tubo e misture completamente invertendo-o e agitando-o O formol hemolisa as hemaacutecias mata fixa e distende as microfilaacuterias
bull Centrifugar o sangue a 1500 rpm por 5 minutos
bull Decantar o sobrenadante
Teacutecnica de Knott
bull Retirar o sedimento com uma pipeta Pasteur e espalhar a gota espessa sobre uma lacircmina
bull Deixar secar bem e corar com Giemsa
bull Examinar com objetiva de imersatildeo
bull Esta teacutecnica possibilita que o exame microscoacutepico laboratorial seja realizado vaacuterios dias apoacutes a coleta de material realizada no campo
Exames de imagem
bull Ultranossografia
ndash Possibilidade de visualizar os movimentos de vermes adultos vivos de W bancrofti em vaso linfaacutetico especificamente em vasos intraescrotais do cordatildeo espermaacutetico
ndash O movimento ativo e ininterrupto dos vermes adultos durante as 24 horas do dia eacute denominado sinal da ldquodanccedila das filaacuteriasrdquo
Diagnoacutestico soroloacutegico
bull Teste imunocromatograacutefico desenvolvido pelo ICT Diagnostic - ICT card
ndash Teste qualilativo
ndash Cartatildeo possui ac de antifilaacuteria e o controle eacute formado por ac anti Ig G humano
Plasmodium spp
Taxonomia
bull Reino Protozoa
bull FiloApicomplexa
bull Classe Sporozoea
bull Ordem Hemosporidiida
bull Famiacutelia Plasmodiidae
bull Gecircneros Plasmodium
bull Espeacutecie Pfalciparum Pvivax Povale e Pmalariae
Plasmodium
bull Ciclo bioloacutegico Hospedeiro vertebrado e invertebrado
bull Hospedeiro invertebrado ndash Vetor
ndash Fecircmeas hematoacutefagas do gecircnero Anopheles
ndash Brasil Anopheles (N)darlingi A (N) aquasalis A (N) albitarsis A (K) cruzii e A (K) bellator
ndash Possuem haacutebito noturno penetrando nas casas no crespuacutesculo saindo ao amanhecer
Plasmodium
bull Hospedeiro vertebrado homem
bull Transmissatildeo
ndash Vetor
ndash Transfusatildeo de sangue
ndash Compartilhamento de seringas
ndash Acidente com agulhas
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
bull Ciclo preacute-eritrociacutetico
ndash Forma inoculada esporozoiacutetos
ndash A fecircmea do anofelino infectado inocula no homem as formas infectantes localizadas na saliva
ndash Os esporozoiacutetas permancem na circulaccedilatildeo por aproximadamente uma hora
ndash Invadem os hepatoacutecitos e se diferenciam em trofozoiacutetas (criptozoiacuteto)
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
ndash Esquizogonia e formaccedilatildeo de esquizontes
ndash Divisatildeo nuclear e liberaccedilatildeo de merozoiacutetos
ndash Aproximadamente 10000 merozoiacutetos por hepatoacutecito
ndash Rompimento do hepatoacutecito e liberaccedilatildeo de merozoiacutetos na circulaccedilatildeo
ndash Duraccedilatildeo do ciclo aprox 1 a 2 semanas
Ciclo evolutivo
bull PVivax e Povale
ndash Alguns esporozoiacutetos geneticamente diferentes ficam na forma latente nos hepatoacutecitos permanecendo muitos meses Satildeo classificados como hipnozoiacuteto
ndash Satildeo responsaacuteveis pelas recaiacutedas tardias e formas de malaacuteria com periacuteodo de encubaccedilatildeo longo ndash 6 a 9 meses
FASE HEPAacuteTICA OU EXOERITROCIacuteTICA
Hepatoacutecito
FIacuteGADO
Invasatildeo do hepatoacutecito
Reproduccedilatildeo Assexuada
Esporozoiacutetos Lise dos hepatoacutecitos
Liberaccedilatildeo dos protozoaacuterios na corrente sanguumliacutenea
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
bull Ciclo eritrociacutetico
ndash Os merozoiacutetos invadem as hemaacutecias
ndash Diferenciaccedilatildeo em trofozoiacutetos
ndash Esquizogonia esquizonte
ndash Produccedilatildeo de merozoiacutetos e rompimento da hemaacutecia
ndash Merozoiacutetos invasatildeo de novas hemaacutecias
ndash Apoacutes algumas geraccedilotildees os merozoiacutetos natildeo mais se dividem e se diferenciam em gametoacutecitos ndash micro e macrogametoacutecito
FASE ERITROCIacuteTICA
Hepatoacutecito destruiacutedo pelos protozoaacuterios
Penetraccedilatildeo dos protozoaacuterios
Reproduccedilatildeo assexuada
Protozoaacuterios destroem as hemaacutecias
Diferenciaccedilatildeo em gametoacutecitos
Fecircmeas de Anopheles sugam hemaacutecias com gametoacutecitos
Ciclo no hospedeiro invertebrado
Ocorre nas hemaacutecias ou Eritroacutecitos
nas hemaacutecias
Protozoaacuterio no interior da hemaacutecia
Hemaacutecia com gametoacutecito
T trofozoiacuteto Em esquizonte com merozoiacuteto
Fase eritrociacutetica
bull Ciclo sanguiacuteneo ndash Pfalciparum P vivax e Povale 48 horas
ndash Pmalariae 72 horas
ndash Fonte de nutriccedilatildeo do Plasmodium no ciclo sanguiacuteneo hemoglobina
ndash Produccedilatildeo do pigmento malaacuterico hemozoiacutena bull Granulaccedilotildees de Schuffner Plasmodium vivax
bull Granulaccedilotildees de Maurer P falciparum
bull Granulaccedilotildees de Ziemann P malariae
ndash Fagocitose pelas ceacutelulas de Kuppffer e macroacutefagos do baccedilo
Trofozoiacutetos Pfalciparum
Trofozoiacutetos Pfalciparum
Esquizonte ndash P falciparum
Raros no sangue perifeacuterico Possuem 2 a 24 merozoiacutetos
Ocupam 23 do gloacutebulo vermelho
Gametoacutecitos Pfalciparum
Ciclo evolutivo Pvivax
Esquizonte ndash P vivax
Satildeo grandes e ameboacuteides Cromatina organizada em duas ou mais massas
Possuem 2 a 24 merozoiacutetos com pontos de cromatina
Gametoacutecito ndash Pvivax
Macrogametoacutecitos satildeo redondos ou ovais e ocupam toda ceacutelula hospedeira O citoplasma eacute geralmente corado de azul mais escuro e conteacutem pigmento marrom Microgametoacutecitos satildeo geralmente do tamanho de um RBC natildeo infectados com citoplasma corados de azul paacutelido rosa ou cinza
Trofozoiacutetos - P malariae
Esquizontes ndash P malariae
Aproximadamente 6 a 12 merozoiacutetos com arranjo de rosetas
Gametoacutecitos ndash P malariae
Ciclo evolutivo ndash HI
bull Ingestatildeo de hemaacutecias contendo gametoacutecitos durante o repasto sanguiacuteneo da fecircmea do anofelino
bull No intestino meacutedio do vetor gametogecircnese ndash Macrogametoacutecito ndash macrogameta feminino ndash Microgametoacutecito o processo de exflagelaccedilatildeo daacute
origem a 8 microgametas masculinos ndash Produccedilatildeo de ovo ou zigoto ndash O ovo encista na camada epitelial do intestino meacutedio
oocisto ndash Esporogonia liberaccedilatildeo de esporozoiacutetos
Ciclo evolutivo ndash HInvertebrado
ndash Os esporozoiacutetos satildeo transportados pelo hemolinfa ateacute as glacircndulas salivares do vetor ateacute atingirem o ducto salivar
bull Inoculaccedilatildeo no hospedeiro vertebrado atraveacutes da picada do inseto
Hemaacutecia com gametoacutecito
Fecircmeas de Anopheles sugam hemaacutecias com gametoacutecitos
CICLO NO INVERTEBRADO
No tubo digestivo
Zigoto
Penetraccedilatildeo na parede do tubo
digestivo
Migraccedilatildeo para as glacircndulas salivares
Desenvolvimento
Mosquito infectado
Diagnoacutestico
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado e espesso corado pelo Giemsa
bull Sangue colhido sem anticoagulante para melhor fixaccedilatildeo em lacircmina
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo espesso eacute mais eficiente para detecccedilatildeo da infecccedilatildeo
bull Esfregaccedilo delgado eacute mais eficiente para diferenciaccedilatildeo morfoloacutegica das espeacutecies
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo semiquantitativo
ndash Exame de 100 campos microscoacutepicos com resultado expresso pelo sistema de cruzes
Parasitos contados Nuacutemero de campos
microscoacutepicos cruzes
40 a 60 100 +2
1 1 +
2-20 1 ++
21-200 1 +++
+ 200 1 ++++
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo quantitativo derivado de anaacutelise semiquantitativa
Contagem de parasitos por campo
Cruzes Parasitos por mm3
40 a 60100 +2 200-300
1 + 301-500
2-20 ++ 501 - 10000
21-200 +++ 10001 ndash 100000
+ 200 ++++ 100000 ou mais
Diagnoacutestico
bull P falciparum
ndash Parte do ciclo celular aderido ao endoteacutelio capilar Encontro somente de trofozoitos e gametoacutecitos no sangue perifeacuterico
ndash Raramente os esquizontes satildeo encontrados no sangue perifeacuterico
Diagnoacutestico ndash Pvivax ndash Encontro de todas as formas de desenvolvimento ndash
trofozoiacuteto jovem maduro esquizontes e gametoacutecitos
ndash Os trofozoiacutetos maduros tecircm geralmente um aspecto irregular com extensotildees ameboacuteides em seu citoplasma
Diagnoacutestico ndash Pvivax
ndash Os gametoacutecitos femininos coram-se mais intensamente que os masculinos e apresentam nuacutecleo mais compacto geralmente em localizaccedilatildeo perifeacuterica
ndash O pigmento malaacuterico geralmente eacute abundante
Diagnoacutestico - Pmalariae
bull Realizado por meio de caracteriacutesticas morfoloacutegicas do parasito
ndash Verificaccedilatildeo em esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado
ndash Posiccedilatildeo equatorial do parasito
ndash Desenvolvimento sem deformaccedilatildeo do eritroacutecito
Diagnoacutestico
bull QBC ndash Teacutecnica que combina concentraccedilatildeo dos parasitos
pela centrifugaccedilatildeo do sangue em em microhematoacutecrito e a coloraccedilatildeo dos aacutecidos nucleacuteicos do parasito pelo fluorcromo laranja de acridina
ndash Utilizaccedilatildeo de tubos especiais e microscopia epifluorescente
ndash Teste raacutepido
ndash Alta sensibilidade
Diagnoacutestico
bull ParaSight-F ( Becton amp Dickinson)
ndash Teste raacutepido para captura da proteiacutena rica em histidina 2 de Pfalciparum( PfHRP2) e enzimas conservadas de 4 espeacutecies de plasmoacutedio (DHL e aldolase
ndash Utilizaccedilatildeo de fita de nitrocelulose contendo ac monoclonal
ndash Lise de uma gota de sangue
ndash A reaccedilatildeo eacute revelada com adiccedilatildeo de ac policlonal anti-HRP2 conjugado com lipossomas contendo corante
Diagnoacutestico
bull PCR
ndash Sensibilidade e especificidade maior do que o esfregaccedilo sanguiacuteneo
Triatoma infestans
Panstrongylus megistus
Panstrongylus megistus
Rhodnius prolixus
Rhodnius prolixus
Trypanosoma cruzi
bull Formas evolutivas
bull H invertebrado
ndash Epimastigota
ndash Tripomastigota metaciacuteclica
bull H vertebrado
ndash Amastigota ndash intracelulares (ceacutelulas musculares ceacutelulas de Schwann fibroblastos etc)
ndash Tripomastigota sanguiacutenea
Trypanosoma cruzi
bull Ciclo evolutivo ndash O triatomiacuteneo pica o homem e durante o repasto
sanguiacuteneo defeca e urina na pele
ndash Enquanto se alimenta libera no local substacircncias anesteacutesicas que o permitem promover um repasto demorado
ndash Prurido local e entrada das formas tripomastigotas metaciacuteclicas
ndash Fagocitose pelos macroacutefagos teciduais
ndash Transformaccedilatildeo das formas tripomastigotas em amastigotas intracelulares
Trypanosoma cruzi
ndash Divisatildeo das formas amastigotas diferenciaccedilatildeo em tripomastigotas rompimento do macroacutefago e liberaccedilatildeo de novas formas no interstiacutecio
ndash As formas tripomastigotas caem na corrente sanguiacutenea atingindo outras ceacutelulas
ndash Os triatomiacuteneos se infectam ao ingerir formas tripomastigotas sanguiacuteneas do hospedeiro vertebrado
Trypanosoma cruzi
ndash Estocircmago do vetor tripomastigotas se diferenciam em epimastigotas
ndash Intestino do vetor divisatildeo de epimastigotas por fissatildeo binaacuteria simples
ndash Porccedilatildeo final do tubo digestivo epimastigotas se diferenciam em tripomastigota metaciacuteclica forma infectante para o homem e entatildeo satildeo liberados nas fezes e urina do vetor
Tripomastigota
Cinetoplasto posterior ao nuacutecleo
cinetoplasto
Tripomastigota
Epimastigota
Cinetoplasto anterior ao nuacutecleo
Amastigota
Amastigotas Amastigotas e tripomastigotas
Monoacutecito parasitado com as formas amastigotas
Doenccedila de Chagas
bull Trypanosoma cruzi (Chagas 1909)
Diagnoacutestico laboratorial Fase aguda
bull Alta parasitemia
bull Pesquisa do parasito
ndash Exame de sangue a fresco
ndash Exame de sangue em gota espessa
ndash Esfregaccedilo sanguiacuteneo corado pelo Giemsa
ndash Microhematoacutecrito
ndash Meacutetodos de concentraccedilatildeo
ndash Inoculaccedilatildeo em aninais
Exame direto a fresco
bull Parasitas abundantes nos primeiros dias e semanas de incubaccedilatildeo
bull Colocar uma gota de sangue entre lacircmina e lamiacutenula e examinar imediatamente apoacutes a coleta para evitar a coagulaccedilatildeo
bull Para retardar a coagulaccedilatildeo adicionar uma gota de soluccedilatildeo salina
bull Analisar em microscoacutepio oacuteptico a presenccedila das formas tripomastigotas
Exame de sangue em gota espessa
bull Analisa uma maior quantidade de material bioloacutegico
bull Verifica a presenccedila de formas tripomastigotas sanguiacuteneas ndash Colocar 3 gotas de sangue na lacircmina ndash Com o canto de outra espalhar o material em uma
aacuterea de aproximadamente 1 cm da lacircmina ndash Deixar secar ao ar durante 6 horas Natildeo ultrapassar 36
horas ndash Corar pelo Giemsa Deixar em repouso por 30 min ndash Lavar e examinar
Esfregaccedilo sanguiacuteneo
bull Colocar uma gota de sangue na extremidade direita da lacircmina
bull Pegar outra lacircmina segurar por cima com a matildeo direita e com uma inclinaccedilatildeo de 45deg encostar adiante da gota
bull Deixar mesma se espalhar pela superfiacutecie de contato das duas lacircminas
bull Puxar a gota espalhada ateacute o final de lacircmina
bull Secar e corar pelo Giemsa ou Leishman
Esfregaccedilo sanguiacuteneo
Microhematoacutecrito Creme leucocitaacuterio
Microhematoacutecrito
bull Colher sangue em tubo capilar
bull Centrifugar em microcentriacutefuga por 5 minutos agrave 10000 rpm
bull Avaliar o microhematocrito em microscopia oacuteptica
bull Verificar a presenccedila das formas tripomastigotas presentes no creme leucocitaacuterio
bull Se positivo realizar esfregaccedilo do creme leucocitaacuterio
bull Fixar com aacutelcool metiacutelico e corar com Gienza Analisar em microscoacutepio oacuteptico
Meacutetodo de concentraccedilatildeo
bull Meacutetodo de Strout
ndash Realizar a coleta de sangue em tubo sem anticoagulante
ndash Aguardar a retraccedilatildeo do coaacutegulo Os parasitas concentrar-se-atildeo no soro a medida que ocorrer a retraccedilatildeo do coaacutegulo
ndash O soro eacute centrifugado para anaacutelise do sedimento
Inoculaccedilatildeo em animais
bull Inoculaccedilatildeo de sangue ou creme leucocitaacuterio em camundongos jovens
bull Inoculaccedilatildeo intra-peritoneal intra-conjuntival e a via oral
bull Avaliaccedilatildeo das formas de Tcruzi
bull Teacutecnica utilizada em pesquisa
Diagnoacutestico laboratorial Fase crocircnica
bull Xenodiagnoacutestico bull Hemocultura bull Reaccedilatildeo de hemaglutinaccedilatildeo indireta bull RIFI bull ELISA bull PCR bull PaGIA bull LMCo bull Pesquisa de anticorpos antitripomastigotas vivos
Hemocultura
bull Meio LIT ndash Liver Infusion Triptose
bull Meio NNN ndash McNeal Novy e Nicolle
bull Utilizaccedilatildeo de 30ml de sangue heparinizado
bull Centrifugaccedilatildeo por 30 minutos em 3000 rpm
bull Despreza-se o plasma e o sedimento celular eacute lavado com meio LIT ( Liver Infusion Triptose) para eliminaccedilatildeo de possiacuteveis anticorpos
Hemocultura
bull Sedimento distribuiacutedo em 6 tubos com 5 ml de LIT
bull Os tubos satildeo mantidos a 28degC homogeneizados 3x semana e avaliados quinzenalmente ateacute 90 dias
bull Centrifugaccedilatildeo e avaliaccedilatildeo do sedimento de hemaacutecias
bull Leitura realizada pela observaccedilatildeo microscoacutepica de gotas do meio
bull Aumento da positividade para sangue processado imediatamente apoacutes a coleta cultivado em prazo de tempo maior (120 dias) e repeticcedilatildeo da teacutecnica por 3 vezes
Wuchereria bancrofti
Taxonomia
bull Reino Animalia
bull Filo Nematoda
bull Classe Secernentea
bull Ordem Filariidea
bull Superfamiacutelia Filarioidea
bull FamiacuteliaOnchocercidae
bull GecircnerosWuchereria
bull Espeacutecie Wbancrofti
Formas evolutivas
bull Heteroxecircnico
bull Hospedeiro vertebrado homem
bull Hospedeiro intermediaacuterio Culex quinquefasciatus
bull Formas evolutivas ndash HV verme adulto (fecircmea e macho) localizados nos
vasos e gacircnglios linfaacuteticos da regiatildeo abdominal peacutelvica (perna e escroto) mamas e braccedilo
ndash microfilaacuterias eliminadas pelas fecircmeas graacutevidas Saem dos ductos linfaacuteticos e atingem circulaccedilatildeo sanguiacutenea
ndash HI larva L1 L2 e L3 (infectante)
Culex quinquefasciatus
Morfologia
bull Macho 35 a 4 cm x 01mm com extremidade posterior enrrolada ventralmente
bull Fecircmea 7 a 10cm x 03 mm com vagina exteriorizada em uma vulva localizada proacutexima agrave extremidade anterior
bull Microfilaacuteria Presenccedila de bainha e estilete bucal na parte anterior que as diferencia de outros filariacutedeos sanguiacuteneos Possuem 250 a 300 microm e uma grande qtde de nuacutecleos
bull Larva L3 possui aproximadamente 15 a 20 mm de comprimento
Microfilaacuteria
Ciclo evolutivo
bull Fecircmea do inseto realiza o hematofagismo noturno e ingere as microfilaacuterias
bull Estocircmago do vetor microfilaacuterias perdem a bainha atravessam a parede do estocircmago e migram para os muacutesculos toraacutecicos ndash L1
bull Apoacutes 20 dias a larva estaacute na forma infectante L3 medindo aproximadamente 2mm
bull Migraccedilatildeo da larva para a proboacutescida concentrando-se no laacutebio do moquito
Microfilaacuteria Presenccedila de bainha Cauda pontuda com nuacutecleos grandes largos e bem separados Nuacutecleos caudais em fila uacutenica
Ciclo evolutivo
bull Repasto sanguiacuteneo do inseto infectado
ndash As larvas L3 migram do laacutebio do vetor para a pele do HV
ndash Migram para os vasos linfaacuteticos e tornam-se vermes adultos
ndash Apoacutes 8 meses as fecircmeas graacutevidas produzem as primeiras microfilaacuterias
Periodicidade
bull Periodicidade noturna das microfilaacuterias
ndash Durante o dia localizam-se nos capilares profundos
ndash Durante a noite vasos sanguiacuteneos perifeacutericos
ndash Pico da microfilaremia meia-noite coincidindo com o horaacuterio de hematofagismo do inseto transmissor
Patologia
bull Periacuteodo assintomaacutetico bull Fase aguda bull Processos inflamatoacuterios produzidos por larvas L4 e adultos jovens
que colonizam as vias linfaacuteticas ndash Linfadenites linfonodos inguinais epitrocleanos e axilares com
desenvolvimento de granulomas com calcificaccedilatildeo apoacutes a morte dos vermes
ndash Linfangite inflamaccedilatildeo e dilataccedilatildeo dos vasos linfaacuteticos ndash Febre mal estar ndash Funiculite filariana linfangite do cordatildeo espermaacutetico e varicocele
bull Fase crocircnica ndash Hidrocele ndash Linfedema ndash Quiluacuteria ndash Elefantiacutease
Quiluacuteria
Patologia
bull Processos obstrutivos ndash Formaccedilatildeo de novelos envolvidos por reaccedilatildeo
inflamatoacuteria e pela formaccedilatildeo de fibrose
ndash Estase e congestatildeo da linfa produzindo linfoedema tecidual
ndash Extravasamento produzindo derrame linfaacutetico ascite linfaacutetica linfuacuteria linforreacuteia linfotoacuterax linfocele etc
ndash A ruptura de vasos linfaacuteticos para o interior do sistema excretor urinaacuterio daacute origem agrave quiluacuteria
Patologia
bull Complicaccedilotildees associadas agrave filariose
ndash Elefantiacutease
bull Caracterizada por processo inflamatoacuterio e fibrose crocircnica do oacutergatildeo atingido
bull Hipertrofia da derme do tecido conjuntivo aumento exagerado do volume do oacutergatildeo com queratinizaccedilatildeo e rugosidade
bull A pele perde a elasticidade resseca e se torna sujeita a infecccedilotildees bacterianas
Patologia
bull Permanecimento na aacuterea endecircmica
bull Nuacutemero de larvas inoculadas
bull Frequecircncia das re-infecccedilotildees
bull O nuacutemero de acasalamento dos vermes e suas localizaccedilotildees anatocircmicas
bull A sensibilizaccedilatildeo do organismo e a intensidade das reaccedilotildees inflamatoacuterias do paciente
bull As infecccedilotildees bacterianas associadas
Diagnoacutestico
bull Pesquisa de microfilaacuterias no sangue perifeacuterico ndash 20 40 ou 60 microL- de preferecircncia entre as 10 h da noite e 4h da manhatilde
ndash Gota espessa Coloraccedilatildeo de Giemsa
ndash Meacutetodos de concentraccedilatildeo Filtraccedilatildeo em membrana de policarbonato milipore ou nucleopore
ndash Meacutetodo de Knott
bull Na fase crocircnica as microfilaacuterias raramente satildeo detectadas no sangue perifeacuterico
Gota espessa
bull Possibilita a visualizaccedilatildeo da bainha fato que difere a microfilaria de W bancrofti de outro filariacutedeos sanguiacuteneos
bull Apresenta um baixo custo em comparaccedilatildeo com outras mais avanccediladas como a filtraccedilatildeo de sangue em membrana de policarbonato
bull Possui baixa sensibilidade natildeo indicada em situaccedilotildees em que os parasitados se mostram com baixa microfilaremia ou amicrofilarecircmicos
Concentraccedilatildeo
bull Baseia-se na passagem de sangue venoso atraveacutes de uma membrana (Milipore ou Nuclepore) de diacircmetro de 13 a 25 mm e poros de 5 ou 3 μm
bull O material retido na membrana sendo fixado corado e observado ao microscoacutepio
bull Essa teacutecnica assim como a de Knott permite a identificaccedilatildeo de indiviacuteduos com baixiacutessimas parasitemias (quantidade de microfilarias natildeo detectaacuteveis pela teacutecnica de gota espessa)
Teacutecnica de Knott
bull Retirar 2 ml de sangue total por punccedilatildeo venosa e colocar imediatamente em um tubo contendo 10 ml de formol a 2
bull Fechar o tubo e misture completamente invertendo-o e agitando-o O formol hemolisa as hemaacutecias mata fixa e distende as microfilaacuterias
bull Centrifugar o sangue a 1500 rpm por 5 minutos
bull Decantar o sobrenadante
Teacutecnica de Knott
bull Retirar o sedimento com uma pipeta Pasteur e espalhar a gota espessa sobre uma lacircmina
bull Deixar secar bem e corar com Giemsa
bull Examinar com objetiva de imersatildeo
bull Esta teacutecnica possibilita que o exame microscoacutepico laboratorial seja realizado vaacuterios dias apoacutes a coleta de material realizada no campo
Exames de imagem
bull Ultranossografia
ndash Possibilidade de visualizar os movimentos de vermes adultos vivos de W bancrofti em vaso linfaacutetico especificamente em vasos intraescrotais do cordatildeo espermaacutetico
ndash O movimento ativo e ininterrupto dos vermes adultos durante as 24 horas do dia eacute denominado sinal da ldquodanccedila das filaacuteriasrdquo
Diagnoacutestico soroloacutegico
bull Teste imunocromatograacutefico desenvolvido pelo ICT Diagnostic - ICT card
ndash Teste qualilativo
ndash Cartatildeo possui ac de antifilaacuteria e o controle eacute formado por ac anti Ig G humano
Plasmodium spp
Taxonomia
bull Reino Protozoa
bull FiloApicomplexa
bull Classe Sporozoea
bull Ordem Hemosporidiida
bull Famiacutelia Plasmodiidae
bull Gecircneros Plasmodium
bull Espeacutecie Pfalciparum Pvivax Povale e Pmalariae
Plasmodium
bull Ciclo bioloacutegico Hospedeiro vertebrado e invertebrado
bull Hospedeiro invertebrado ndash Vetor
ndash Fecircmeas hematoacutefagas do gecircnero Anopheles
ndash Brasil Anopheles (N)darlingi A (N) aquasalis A (N) albitarsis A (K) cruzii e A (K) bellator
ndash Possuem haacutebito noturno penetrando nas casas no crespuacutesculo saindo ao amanhecer
Plasmodium
bull Hospedeiro vertebrado homem
bull Transmissatildeo
ndash Vetor
ndash Transfusatildeo de sangue
ndash Compartilhamento de seringas
ndash Acidente com agulhas
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
bull Ciclo preacute-eritrociacutetico
ndash Forma inoculada esporozoiacutetos
ndash A fecircmea do anofelino infectado inocula no homem as formas infectantes localizadas na saliva
ndash Os esporozoiacutetas permancem na circulaccedilatildeo por aproximadamente uma hora
ndash Invadem os hepatoacutecitos e se diferenciam em trofozoiacutetas (criptozoiacuteto)
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
ndash Esquizogonia e formaccedilatildeo de esquizontes
ndash Divisatildeo nuclear e liberaccedilatildeo de merozoiacutetos
ndash Aproximadamente 10000 merozoiacutetos por hepatoacutecito
ndash Rompimento do hepatoacutecito e liberaccedilatildeo de merozoiacutetos na circulaccedilatildeo
ndash Duraccedilatildeo do ciclo aprox 1 a 2 semanas
Ciclo evolutivo
bull PVivax e Povale
ndash Alguns esporozoiacutetos geneticamente diferentes ficam na forma latente nos hepatoacutecitos permanecendo muitos meses Satildeo classificados como hipnozoiacuteto
ndash Satildeo responsaacuteveis pelas recaiacutedas tardias e formas de malaacuteria com periacuteodo de encubaccedilatildeo longo ndash 6 a 9 meses
FASE HEPAacuteTICA OU EXOERITROCIacuteTICA
Hepatoacutecito
FIacuteGADO
Invasatildeo do hepatoacutecito
Reproduccedilatildeo Assexuada
Esporozoiacutetos Lise dos hepatoacutecitos
Liberaccedilatildeo dos protozoaacuterios na corrente sanguumliacutenea
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
bull Ciclo eritrociacutetico
ndash Os merozoiacutetos invadem as hemaacutecias
ndash Diferenciaccedilatildeo em trofozoiacutetos
ndash Esquizogonia esquizonte
ndash Produccedilatildeo de merozoiacutetos e rompimento da hemaacutecia
ndash Merozoiacutetos invasatildeo de novas hemaacutecias
ndash Apoacutes algumas geraccedilotildees os merozoiacutetos natildeo mais se dividem e se diferenciam em gametoacutecitos ndash micro e macrogametoacutecito
FASE ERITROCIacuteTICA
Hepatoacutecito destruiacutedo pelos protozoaacuterios
Penetraccedilatildeo dos protozoaacuterios
Reproduccedilatildeo assexuada
Protozoaacuterios destroem as hemaacutecias
Diferenciaccedilatildeo em gametoacutecitos
Fecircmeas de Anopheles sugam hemaacutecias com gametoacutecitos
Ciclo no hospedeiro invertebrado
Ocorre nas hemaacutecias ou Eritroacutecitos
nas hemaacutecias
Protozoaacuterio no interior da hemaacutecia
Hemaacutecia com gametoacutecito
T trofozoiacuteto Em esquizonte com merozoiacuteto
Fase eritrociacutetica
bull Ciclo sanguiacuteneo ndash Pfalciparum P vivax e Povale 48 horas
ndash Pmalariae 72 horas
ndash Fonte de nutriccedilatildeo do Plasmodium no ciclo sanguiacuteneo hemoglobina
ndash Produccedilatildeo do pigmento malaacuterico hemozoiacutena bull Granulaccedilotildees de Schuffner Plasmodium vivax
bull Granulaccedilotildees de Maurer P falciparum
bull Granulaccedilotildees de Ziemann P malariae
ndash Fagocitose pelas ceacutelulas de Kuppffer e macroacutefagos do baccedilo
Trofozoiacutetos Pfalciparum
Trofozoiacutetos Pfalciparum
Esquizonte ndash P falciparum
Raros no sangue perifeacuterico Possuem 2 a 24 merozoiacutetos
Ocupam 23 do gloacutebulo vermelho
Gametoacutecitos Pfalciparum
Ciclo evolutivo Pvivax
Esquizonte ndash P vivax
Satildeo grandes e ameboacuteides Cromatina organizada em duas ou mais massas
Possuem 2 a 24 merozoiacutetos com pontos de cromatina
Gametoacutecito ndash Pvivax
Macrogametoacutecitos satildeo redondos ou ovais e ocupam toda ceacutelula hospedeira O citoplasma eacute geralmente corado de azul mais escuro e conteacutem pigmento marrom Microgametoacutecitos satildeo geralmente do tamanho de um RBC natildeo infectados com citoplasma corados de azul paacutelido rosa ou cinza
Trofozoiacutetos - P malariae
Esquizontes ndash P malariae
Aproximadamente 6 a 12 merozoiacutetos com arranjo de rosetas
Gametoacutecitos ndash P malariae
Ciclo evolutivo ndash HI
bull Ingestatildeo de hemaacutecias contendo gametoacutecitos durante o repasto sanguiacuteneo da fecircmea do anofelino
bull No intestino meacutedio do vetor gametogecircnese ndash Macrogametoacutecito ndash macrogameta feminino ndash Microgametoacutecito o processo de exflagelaccedilatildeo daacute
origem a 8 microgametas masculinos ndash Produccedilatildeo de ovo ou zigoto ndash O ovo encista na camada epitelial do intestino meacutedio
oocisto ndash Esporogonia liberaccedilatildeo de esporozoiacutetos
Ciclo evolutivo ndash HInvertebrado
ndash Os esporozoiacutetos satildeo transportados pelo hemolinfa ateacute as glacircndulas salivares do vetor ateacute atingirem o ducto salivar
bull Inoculaccedilatildeo no hospedeiro vertebrado atraveacutes da picada do inseto
Hemaacutecia com gametoacutecito
Fecircmeas de Anopheles sugam hemaacutecias com gametoacutecitos
CICLO NO INVERTEBRADO
No tubo digestivo
Zigoto
Penetraccedilatildeo na parede do tubo
digestivo
Migraccedilatildeo para as glacircndulas salivares
Desenvolvimento
Mosquito infectado
Diagnoacutestico
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado e espesso corado pelo Giemsa
bull Sangue colhido sem anticoagulante para melhor fixaccedilatildeo em lacircmina
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo espesso eacute mais eficiente para detecccedilatildeo da infecccedilatildeo
bull Esfregaccedilo delgado eacute mais eficiente para diferenciaccedilatildeo morfoloacutegica das espeacutecies
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo semiquantitativo
ndash Exame de 100 campos microscoacutepicos com resultado expresso pelo sistema de cruzes
Parasitos contados Nuacutemero de campos
microscoacutepicos cruzes
40 a 60 100 +2
1 1 +
2-20 1 ++
21-200 1 +++
+ 200 1 ++++
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo quantitativo derivado de anaacutelise semiquantitativa
Contagem de parasitos por campo
Cruzes Parasitos por mm3
40 a 60100 +2 200-300
1 + 301-500
2-20 ++ 501 - 10000
21-200 +++ 10001 ndash 100000
+ 200 ++++ 100000 ou mais
Diagnoacutestico
bull P falciparum
ndash Parte do ciclo celular aderido ao endoteacutelio capilar Encontro somente de trofozoitos e gametoacutecitos no sangue perifeacuterico
ndash Raramente os esquizontes satildeo encontrados no sangue perifeacuterico
Diagnoacutestico ndash Pvivax ndash Encontro de todas as formas de desenvolvimento ndash
trofozoiacuteto jovem maduro esquizontes e gametoacutecitos
ndash Os trofozoiacutetos maduros tecircm geralmente um aspecto irregular com extensotildees ameboacuteides em seu citoplasma
Diagnoacutestico ndash Pvivax
ndash Os gametoacutecitos femininos coram-se mais intensamente que os masculinos e apresentam nuacutecleo mais compacto geralmente em localizaccedilatildeo perifeacuterica
ndash O pigmento malaacuterico geralmente eacute abundante
Diagnoacutestico - Pmalariae
bull Realizado por meio de caracteriacutesticas morfoloacutegicas do parasito
ndash Verificaccedilatildeo em esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado
ndash Posiccedilatildeo equatorial do parasito
ndash Desenvolvimento sem deformaccedilatildeo do eritroacutecito
Diagnoacutestico
bull QBC ndash Teacutecnica que combina concentraccedilatildeo dos parasitos
pela centrifugaccedilatildeo do sangue em em microhematoacutecrito e a coloraccedilatildeo dos aacutecidos nucleacuteicos do parasito pelo fluorcromo laranja de acridina
ndash Utilizaccedilatildeo de tubos especiais e microscopia epifluorescente
ndash Teste raacutepido
ndash Alta sensibilidade
Diagnoacutestico
bull ParaSight-F ( Becton amp Dickinson)
ndash Teste raacutepido para captura da proteiacutena rica em histidina 2 de Pfalciparum( PfHRP2) e enzimas conservadas de 4 espeacutecies de plasmoacutedio (DHL e aldolase
ndash Utilizaccedilatildeo de fita de nitrocelulose contendo ac monoclonal
ndash Lise de uma gota de sangue
ndash A reaccedilatildeo eacute revelada com adiccedilatildeo de ac policlonal anti-HRP2 conjugado com lipossomas contendo corante
Diagnoacutestico
bull PCR
ndash Sensibilidade e especificidade maior do que o esfregaccedilo sanguiacuteneo
Panstrongylus megistus
Panstrongylus megistus
Rhodnius prolixus
Rhodnius prolixus
Trypanosoma cruzi
bull Formas evolutivas
bull H invertebrado
ndash Epimastigota
ndash Tripomastigota metaciacuteclica
bull H vertebrado
ndash Amastigota ndash intracelulares (ceacutelulas musculares ceacutelulas de Schwann fibroblastos etc)
ndash Tripomastigota sanguiacutenea
Trypanosoma cruzi
bull Ciclo evolutivo ndash O triatomiacuteneo pica o homem e durante o repasto
sanguiacuteneo defeca e urina na pele
ndash Enquanto se alimenta libera no local substacircncias anesteacutesicas que o permitem promover um repasto demorado
ndash Prurido local e entrada das formas tripomastigotas metaciacuteclicas
ndash Fagocitose pelos macroacutefagos teciduais
ndash Transformaccedilatildeo das formas tripomastigotas em amastigotas intracelulares
Trypanosoma cruzi
ndash Divisatildeo das formas amastigotas diferenciaccedilatildeo em tripomastigotas rompimento do macroacutefago e liberaccedilatildeo de novas formas no interstiacutecio
ndash As formas tripomastigotas caem na corrente sanguiacutenea atingindo outras ceacutelulas
ndash Os triatomiacuteneos se infectam ao ingerir formas tripomastigotas sanguiacuteneas do hospedeiro vertebrado
Trypanosoma cruzi
ndash Estocircmago do vetor tripomastigotas se diferenciam em epimastigotas
ndash Intestino do vetor divisatildeo de epimastigotas por fissatildeo binaacuteria simples
ndash Porccedilatildeo final do tubo digestivo epimastigotas se diferenciam em tripomastigota metaciacuteclica forma infectante para o homem e entatildeo satildeo liberados nas fezes e urina do vetor
Tripomastigota
Cinetoplasto posterior ao nuacutecleo
cinetoplasto
Tripomastigota
Epimastigota
Cinetoplasto anterior ao nuacutecleo
Amastigota
Amastigotas Amastigotas e tripomastigotas
Monoacutecito parasitado com as formas amastigotas
Doenccedila de Chagas
bull Trypanosoma cruzi (Chagas 1909)
Diagnoacutestico laboratorial Fase aguda
bull Alta parasitemia
bull Pesquisa do parasito
ndash Exame de sangue a fresco
ndash Exame de sangue em gota espessa
ndash Esfregaccedilo sanguiacuteneo corado pelo Giemsa
ndash Microhematoacutecrito
ndash Meacutetodos de concentraccedilatildeo
ndash Inoculaccedilatildeo em aninais
Exame direto a fresco
bull Parasitas abundantes nos primeiros dias e semanas de incubaccedilatildeo
bull Colocar uma gota de sangue entre lacircmina e lamiacutenula e examinar imediatamente apoacutes a coleta para evitar a coagulaccedilatildeo
bull Para retardar a coagulaccedilatildeo adicionar uma gota de soluccedilatildeo salina
bull Analisar em microscoacutepio oacuteptico a presenccedila das formas tripomastigotas
Exame de sangue em gota espessa
bull Analisa uma maior quantidade de material bioloacutegico
bull Verifica a presenccedila de formas tripomastigotas sanguiacuteneas ndash Colocar 3 gotas de sangue na lacircmina ndash Com o canto de outra espalhar o material em uma
aacuterea de aproximadamente 1 cm da lacircmina ndash Deixar secar ao ar durante 6 horas Natildeo ultrapassar 36
horas ndash Corar pelo Giemsa Deixar em repouso por 30 min ndash Lavar e examinar
Esfregaccedilo sanguiacuteneo
bull Colocar uma gota de sangue na extremidade direita da lacircmina
bull Pegar outra lacircmina segurar por cima com a matildeo direita e com uma inclinaccedilatildeo de 45deg encostar adiante da gota
bull Deixar mesma se espalhar pela superfiacutecie de contato das duas lacircminas
bull Puxar a gota espalhada ateacute o final de lacircmina
bull Secar e corar pelo Giemsa ou Leishman
Esfregaccedilo sanguiacuteneo
Microhematoacutecrito Creme leucocitaacuterio
Microhematoacutecrito
bull Colher sangue em tubo capilar
bull Centrifugar em microcentriacutefuga por 5 minutos agrave 10000 rpm
bull Avaliar o microhematocrito em microscopia oacuteptica
bull Verificar a presenccedila das formas tripomastigotas presentes no creme leucocitaacuterio
bull Se positivo realizar esfregaccedilo do creme leucocitaacuterio
bull Fixar com aacutelcool metiacutelico e corar com Gienza Analisar em microscoacutepio oacuteptico
Meacutetodo de concentraccedilatildeo
bull Meacutetodo de Strout
ndash Realizar a coleta de sangue em tubo sem anticoagulante
ndash Aguardar a retraccedilatildeo do coaacutegulo Os parasitas concentrar-se-atildeo no soro a medida que ocorrer a retraccedilatildeo do coaacutegulo
ndash O soro eacute centrifugado para anaacutelise do sedimento
Inoculaccedilatildeo em animais
bull Inoculaccedilatildeo de sangue ou creme leucocitaacuterio em camundongos jovens
bull Inoculaccedilatildeo intra-peritoneal intra-conjuntival e a via oral
bull Avaliaccedilatildeo das formas de Tcruzi
bull Teacutecnica utilizada em pesquisa
Diagnoacutestico laboratorial Fase crocircnica
bull Xenodiagnoacutestico bull Hemocultura bull Reaccedilatildeo de hemaglutinaccedilatildeo indireta bull RIFI bull ELISA bull PCR bull PaGIA bull LMCo bull Pesquisa de anticorpos antitripomastigotas vivos
Hemocultura
bull Meio LIT ndash Liver Infusion Triptose
bull Meio NNN ndash McNeal Novy e Nicolle
bull Utilizaccedilatildeo de 30ml de sangue heparinizado
bull Centrifugaccedilatildeo por 30 minutos em 3000 rpm
bull Despreza-se o plasma e o sedimento celular eacute lavado com meio LIT ( Liver Infusion Triptose) para eliminaccedilatildeo de possiacuteveis anticorpos
Hemocultura
bull Sedimento distribuiacutedo em 6 tubos com 5 ml de LIT
bull Os tubos satildeo mantidos a 28degC homogeneizados 3x semana e avaliados quinzenalmente ateacute 90 dias
bull Centrifugaccedilatildeo e avaliaccedilatildeo do sedimento de hemaacutecias
bull Leitura realizada pela observaccedilatildeo microscoacutepica de gotas do meio
bull Aumento da positividade para sangue processado imediatamente apoacutes a coleta cultivado em prazo de tempo maior (120 dias) e repeticcedilatildeo da teacutecnica por 3 vezes
Wuchereria bancrofti
Taxonomia
bull Reino Animalia
bull Filo Nematoda
bull Classe Secernentea
bull Ordem Filariidea
bull Superfamiacutelia Filarioidea
bull FamiacuteliaOnchocercidae
bull GecircnerosWuchereria
bull Espeacutecie Wbancrofti
Formas evolutivas
bull Heteroxecircnico
bull Hospedeiro vertebrado homem
bull Hospedeiro intermediaacuterio Culex quinquefasciatus
bull Formas evolutivas ndash HV verme adulto (fecircmea e macho) localizados nos
vasos e gacircnglios linfaacuteticos da regiatildeo abdominal peacutelvica (perna e escroto) mamas e braccedilo
ndash microfilaacuterias eliminadas pelas fecircmeas graacutevidas Saem dos ductos linfaacuteticos e atingem circulaccedilatildeo sanguiacutenea
ndash HI larva L1 L2 e L3 (infectante)
Culex quinquefasciatus
Morfologia
bull Macho 35 a 4 cm x 01mm com extremidade posterior enrrolada ventralmente
bull Fecircmea 7 a 10cm x 03 mm com vagina exteriorizada em uma vulva localizada proacutexima agrave extremidade anterior
bull Microfilaacuteria Presenccedila de bainha e estilete bucal na parte anterior que as diferencia de outros filariacutedeos sanguiacuteneos Possuem 250 a 300 microm e uma grande qtde de nuacutecleos
bull Larva L3 possui aproximadamente 15 a 20 mm de comprimento
Microfilaacuteria
Ciclo evolutivo
bull Fecircmea do inseto realiza o hematofagismo noturno e ingere as microfilaacuterias
bull Estocircmago do vetor microfilaacuterias perdem a bainha atravessam a parede do estocircmago e migram para os muacutesculos toraacutecicos ndash L1
bull Apoacutes 20 dias a larva estaacute na forma infectante L3 medindo aproximadamente 2mm
bull Migraccedilatildeo da larva para a proboacutescida concentrando-se no laacutebio do moquito
Microfilaacuteria Presenccedila de bainha Cauda pontuda com nuacutecleos grandes largos e bem separados Nuacutecleos caudais em fila uacutenica
Ciclo evolutivo
bull Repasto sanguiacuteneo do inseto infectado
ndash As larvas L3 migram do laacutebio do vetor para a pele do HV
ndash Migram para os vasos linfaacuteticos e tornam-se vermes adultos
ndash Apoacutes 8 meses as fecircmeas graacutevidas produzem as primeiras microfilaacuterias
Periodicidade
bull Periodicidade noturna das microfilaacuterias
ndash Durante o dia localizam-se nos capilares profundos
ndash Durante a noite vasos sanguiacuteneos perifeacutericos
ndash Pico da microfilaremia meia-noite coincidindo com o horaacuterio de hematofagismo do inseto transmissor
Patologia
bull Periacuteodo assintomaacutetico bull Fase aguda bull Processos inflamatoacuterios produzidos por larvas L4 e adultos jovens
que colonizam as vias linfaacuteticas ndash Linfadenites linfonodos inguinais epitrocleanos e axilares com
desenvolvimento de granulomas com calcificaccedilatildeo apoacutes a morte dos vermes
ndash Linfangite inflamaccedilatildeo e dilataccedilatildeo dos vasos linfaacuteticos ndash Febre mal estar ndash Funiculite filariana linfangite do cordatildeo espermaacutetico e varicocele
bull Fase crocircnica ndash Hidrocele ndash Linfedema ndash Quiluacuteria ndash Elefantiacutease
Quiluacuteria
Patologia
bull Processos obstrutivos ndash Formaccedilatildeo de novelos envolvidos por reaccedilatildeo
inflamatoacuteria e pela formaccedilatildeo de fibrose
ndash Estase e congestatildeo da linfa produzindo linfoedema tecidual
ndash Extravasamento produzindo derrame linfaacutetico ascite linfaacutetica linfuacuteria linforreacuteia linfotoacuterax linfocele etc
ndash A ruptura de vasos linfaacuteticos para o interior do sistema excretor urinaacuterio daacute origem agrave quiluacuteria
Patologia
bull Complicaccedilotildees associadas agrave filariose
ndash Elefantiacutease
bull Caracterizada por processo inflamatoacuterio e fibrose crocircnica do oacutergatildeo atingido
bull Hipertrofia da derme do tecido conjuntivo aumento exagerado do volume do oacutergatildeo com queratinizaccedilatildeo e rugosidade
bull A pele perde a elasticidade resseca e se torna sujeita a infecccedilotildees bacterianas
Patologia
bull Permanecimento na aacuterea endecircmica
bull Nuacutemero de larvas inoculadas
bull Frequecircncia das re-infecccedilotildees
bull O nuacutemero de acasalamento dos vermes e suas localizaccedilotildees anatocircmicas
bull A sensibilizaccedilatildeo do organismo e a intensidade das reaccedilotildees inflamatoacuterias do paciente
bull As infecccedilotildees bacterianas associadas
Diagnoacutestico
bull Pesquisa de microfilaacuterias no sangue perifeacuterico ndash 20 40 ou 60 microL- de preferecircncia entre as 10 h da noite e 4h da manhatilde
ndash Gota espessa Coloraccedilatildeo de Giemsa
ndash Meacutetodos de concentraccedilatildeo Filtraccedilatildeo em membrana de policarbonato milipore ou nucleopore
ndash Meacutetodo de Knott
bull Na fase crocircnica as microfilaacuterias raramente satildeo detectadas no sangue perifeacuterico
Gota espessa
bull Possibilita a visualizaccedilatildeo da bainha fato que difere a microfilaria de W bancrofti de outro filariacutedeos sanguiacuteneos
bull Apresenta um baixo custo em comparaccedilatildeo com outras mais avanccediladas como a filtraccedilatildeo de sangue em membrana de policarbonato
bull Possui baixa sensibilidade natildeo indicada em situaccedilotildees em que os parasitados se mostram com baixa microfilaremia ou amicrofilarecircmicos
Concentraccedilatildeo
bull Baseia-se na passagem de sangue venoso atraveacutes de uma membrana (Milipore ou Nuclepore) de diacircmetro de 13 a 25 mm e poros de 5 ou 3 μm
bull O material retido na membrana sendo fixado corado e observado ao microscoacutepio
bull Essa teacutecnica assim como a de Knott permite a identificaccedilatildeo de indiviacuteduos com baixiacutessimas parasitemias (quantidade de microfilarias natildeo detectaacuteveis pela teacutecnica de gota espessa)
Teacutecnica de Knott
bull Retirar 2 ml de sangue total por punccedilatildeo venosa e colocar imediatamente em um tubo contendo 10 ml de formol a 2
bull Fechar o tubo e misture completamente invertendo-o e agitando-o O formol hemolisa as hemaacutecias mata fixa e distende as microfilaacuterias
bull Centrifugar o sangue a 1500 rpm por 5 minutos
bull Decantar o sobrenadante
Teacutecnica de Knott
bull Retirar o sedimento com uma pipeta Pasteur e espalhar a gota espessa sobre uma lacircmina
bull Deixar secar bem e corar com Giemsa
bull Examinar com objetiva de imersatildeo
bull Esta teacutecnica possibilita que o exame microscoacutepico laboratorial seja realizado vaacuterios dias apoacutes a coleta de material realizada no campo
Exames de imagem
bull Ultranossografia
ndash Possibilidade de visualizar os movimentos de vermes adultos vivos de W bancrofti em vaso linfaacutetico especificamente em vasos intraescrotais do cordatildeo espermaacutetico
ndash O movimento ativo e ininterrupto dos vermes adultos durante as 24 horas do dia eacute denominado sinal da ldquodanccedila das filaacuteriasrdquo
Diagnoacutestico soroloacutegico
bull Teste imunocromatograacutefico desenvolvido pelo ICT Diagnostic - ICT card
ndash Teste qualilativo
ndash Cartatildeo possui ac de antifilaacuteria e o controle eacute formado por ac anti Ig G humano
Plasmodium spp
Taxonomia
bull Reino Protozoa
bull FiloApicomplexa
bull Classe Sporozoea
bull Ordem Hemosporidiida
bull Famiacutelia Plasmodiidae
bull Gecircneros Plasmodium
bull Espeacutecie Pfalciparum Pvivax Povale e Pmalariae
Plasmodium
bull Ciclo bioloacutegico Hospedeiro vertebrado e invertebrado
bull Hospedeiro invertebrado ndash Vetor
ndash Fecircmeas hematoacutefagas do gecircnero Anopheles
ndash Brasil Anopheles (N)darlingi A (N) aquasalis A (N) albitarsis A (K) cruzii e A (K) bellator
ndash Possuem haacutebito noturno penetrando nas casas no crespuacutesculo saindo ao amanhecer
Plasmodium
bull Hospedeiro vertebrado homem
bull Transmissatildeo
ndash Vetor
ndash Transfusatildeo de sangue
ndash Compartilhamento de seringas
ndash Acidente com agulhas
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
bull Ciclo preacute-eritrociacutetico
ndash Forma inoculada esporozoiacutetos
ndash A fecircmea do anofelino infectado inocula no homem as formas infectantes localizadas na saliva
ndash Os esporozoiacutetas permancem na circulaccedilatildeo por aproximadamente uma hora
ndash Invadem os hepatoacutecitos e se diferenciam em trofozoiacutetas (criptozoiacuteto)
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
ndash Esquizogonia e formaccedilatildeo de esquizontes
ndash Divisatildeo nuclear e liberaccedilatildeo de merozoiacutetos
ndash Aproximadamente 10000 merozoiacutetos por hepatoacutecito
ndash Rompimento do hepatoacutecito e liberaccedilatildeo de merozoiacutetos na circulaccedilatildeo
ndash Duraccedilatildeo do ciclo aprox 1 a 2 semanas
Ciclo evolutivo
bull PVivax e Povale
ndash Alguns esporozoiacutetos geneticamente diferentes ficam na forma latente nos hepatoacutecitos permanecendo muitos meses Satildeo classificados como hipnozoiacuteto
ndash Satildeo responsaacuteveis pelas recaiacutedas tardias e formas de malaacuteria com periacuteodo de encubaccedilatildeo longo ndash 6 a 9 meses
FASE HEPAacuteTICA OU EXOERITROCIacuteTICA
Hepatoacutecito
FIacuteGADO
Invasatildeo do hepatoacutecito
Reproduccedilatildeo Assexuada
Esporozoiacutetos Lise dos hepatoacutecitos
Liberaccedilatildeo dos protozoaacuterios na corrente sanguumliacutenea
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
bull Ciclo eritrociacutetico
ndash Os merozoiacutetos invadem as hemaacutecias
ndash Diferenciaccedilatildeo em trofozoiacutetos
ndash Esquizogonia esquizonte
ndash Produccedilatildeo de merozoiacutetos e rompimento da hemaacutecia
ndash Merozoiacutetos invasatildeo de novas hemaacutecias
ndash Apoacutes algumas geraccedilotildees os merozoiacutetos natildeo mais se dividem e se diferenciam em gametoacutecitos ndash micro e macrogametoacutecito
FASE ERITROCIacuteTICA
Hepatoacutecito destruiacutedo pelos protozoaacuterios
Penetraccedilatildeo dos protozoaacuterios
Reproduccedilatildeo assexuada
Protozoaacuterios destroem as hemaacutecias
Diferenciaccedilatildeo em gametoacutecitos
Fecircmeas de Anopheles sugam hemaacutecias com gametoacutecitos
Ciclo no hospedeiro invertebrado
Ocorre nas hemaacutecias ou Eritroacutecitos
nas hemaacutecias
Protozoaacuterio no interior da hemaacutecia
Hemaacutecia com gametoacutecito
T trofozoiacuteto Em esquizonte com merozoiacuteto
Fase eritrociacutetica
bull Ciclo sanguiacuteneo ndash Pfalciparum P vivax e Povale 48 horas
ndash Pmalariae 72 horas
ndash Fonte de nutriccedilatildeo do Plasmodium no ciclo sanguiacuteneo hemoglobina
ndash Produccedilatildeo do pigmento malaacuterico hemozoiacutena bull Granulaccedilotildees de Schuffner Plasmodium vivax
bull Granulaccedilotildees de Maurer P falciparum
bull Granulaccedilotildees de Ziemann P malariae
ndash Fagocitose pelas ceacutelulas de Kuppffer e macroacutefagos do baccedilo
Trofozoiacutetos Pfalciparum
Trofozoiacutetos Pfalciparum
Esquizonte ndash P falciparum
Raros no sangue perifeacuterico Possuem 2 a 24 merozoiacutetos
Ocupam 23 do gloacutebulo vermelho
Gametoacutecitos Pfalciparum
Ciclo evolutivo Pvivax
Esquizonte ndash P vivax
Satildeo grandes e ameboacuteides Cromatina organizada em duas ou mais massas
Possuem 2 a 24 merozoiacutetos com pontos de cromatina
Gametoacutecito ndash Pvivax
Macrogametoacutecitos satildeo redondos ou ovais e ocupam toda ceacutelula hospedeira O citoplasma eacute geralmente corado de azul mais escuro e conteacutem pigmento marrom Microgametoacutecitos satildeo geralmente do tamanho de um RBC natildeo infectados com citoplasma corados de azul paacutelido rosa ou cinza
Trofozoiacutetos - P malariae
Esquizontes ndash P malariae
Aproximadamente 6 a 12 merozoiacutetos com arranjo de rosetas
Gametoacutecitos ndash P malariae
Ciclo evolutivo ndash HI
bull Ingestatildeo de hemaacutecias contendo gametoacutecitos durante o repasto sanguiacuteneo da fecircmea do anofelino
bull No intestino meacutedio do vetor gametogecircnese ndash Macrogametoacutecito ndash macrogameta feminino ndash Microgametoacutecito o processo de exflagelaccedilatildeo daacute
origem a 8 microgametas masculinos ndash Produccedilatildeo de ovo ou zigoto ndash O ovo encista na camada epitelial do intestino meacutedio
oocisto ndash Esporogonia liberaccedilatildeo de esporozoiacutetos
Ciclo evolutivo ndash HInvertebrado
ndash Os esporozoiacutetos satildeo transportados pelo hemolinfa ateacute as glacircndulas salivares do vetor ateacute atingirem o ducto salivar
bull Inoculaccedilatildeo no hospedeiro vertebrado atraveacutes da picada do inseto
Hemaacutecia com gametoacutecito
Fecircmeas de Anopheles sugam hemaacutecias com gametoacutecitos
CICLO NO INVERTEBRADO
No tubo digestivo
Zigoto
Penetraccedilatildeo na parede do tubo
digestivo
Migraccedilatildeo para as glacircndulas salivares
Desenvolvimento
Mosquito infectado
Diagnoacutestico
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado e espesso corado pelo Giemsa
bull Sangue colhido sem anticoagulante para melhor fixaccedilatildeo em lacircmina
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo espesso eacute mais eficiente para detecccedilatildeo da infecccedilatildeo
bull Esfregaccedilo delgado eacute mais eficiente para diferenciaccedilatildeo morfoloacutegica das espeacutecies
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo semiquantitativo
ndash Exame de 100 campos microscoacutepicos com resultado expresso pelo sistema de cruzes
Parasitos contados Nuacutemero de campos
microscoacutepicos cruzes
40 a 60 100 +2
1 1 +
2-20 1 ++
21-200 1 +++
+ 200 1 ++++
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo quantitativo derivado de anaacutelise semiquantitativa
Contagem de parasitos por campo
Cruzes Parasitos por mm3
40 a 60100 +2 200-300
1 + 301-500
2-20 ++ 501 - 10000
21-200 +++ 10001 ndash 100000
+ 200 ++++ 100000 ou mais
Diagnoacutestico
bull P falciparum
ndash Parte do ciclo celular aderido ao endoteacutelio capilar Encontro somente de trofozoitos e gametoacutecitos no sangue perifeacuterico
ndash Raramente os esquizontes satildeo encontrados no sangue perifeacuterico
Diagnoacutestico ndash Pvivax ndash Encontro de todas as formas de desenvolvimento ndash
trofozoiacuteto jovem maduro esquizontes e gametoacutecitos
ndash Os trofozoiacutetos maduros tecircm geralmente um aspecto irregular com extensotildees ameboacuteides em seu citoplasma
Diagnoacutestico ndash Pvivax
ndash Os gametoacutecitos femininos coram-se mais intensamente que os masculinos e apresentam nuacutecleo mais compacto geralmente em localizaccedilatildeo perifeacuterica
ndash O pigmento malaacuterico geralmente eacute abundante
Diagnoacutestico - Pmalariae
bull Realizado por meio de caracteriacutesticas morfoloacutegicas do parasito
ndash Verificaccedilatildeo em esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado
ndash Posiccedilatildeo equatorial do parasito
ndash Desenvolvimento sem deformaccedilatildeo do eritroacutecito
Diagnoacutestico
bull QBC ndash Teacutecnica que combina concentraccedilatildeo dos parasitos
pela centrifugaccedilatildeo do sangue em em microhematoacutecrito e a coloraccedilatildeo dos aacutecidos nucleacuteicos do parasito pelo fluorcromo laranja de acridina
ndash Utilizaccedilatildeo de tubos especiais e microscopia epifluorescente
ndash Teste raacutepido
ndash Alta sensibilidade
Diagnoacutestico
bull ParaSight-F ( Becton amp Dickinson)
ndash Teste raacutepido para captura da proteiacutena rica em histidina 2 de Pfalciparum( PfHRP2) e enzimas conservadas de 4 espeacutecies de plasmoacutedio (DHL e aldolase
ndash Utilizaccedilatildeo de fita de nitrocelulose contendo ac monoclonal
ndash Lise de uma gota de sangue
ndash A reaccedilatildeo eacute revelada com adiccedilatildeo de ac policlonal anti-HRP2 conjugado com lipossomas contendo corante
Diagnoacutestico
bull PCR
ndash Sensibilidade e especificidade maior do que o esfregaccedilo sanguiacuteneo
Panstrongylus megistus
Rhodnius prolixus
Rhodnius prolixus
Trypanosoma cruzi
bull Formas evolutivas
bull H invertebrado
ndash Epimastigota
ndash Tripomastigota metaciacuteclica
bull H vertebrado
ndash Amastigota ndash intracelulares (ceacutelulas musculares ceacutelulas de Schwann fibroblastos etc)
ndash Tripomastigota sanguiacutenea
Trypanosoma cruzi
bull Ciclo evolutivo ndash O triatomiacuteneo pica o homem e durante o repasto
sanguiacuteneo defeca e urina na pele
ndash Enquanto se alimenta libera no local substacircncias anesteacutesicas que o permitem promover um repasto demorado
ndash Prurido local e entrada das formas tripomastigotas metaciacuteclicas
ndash Fagocitose pelos macroacutefagos teciduais
ndash Transformaccedilatildeo das formas tripomastigotas em amastigotas intracelulares
Trypanosoma cruzi
ndash Divisatildeo das formas amastigotas diferenciaccedilatildeo em tripomastigotas rompimento do macroacutefago e liberaccedilatildeo de novas formas no interstiacutecio
ndash As formas tripomastigotas caem na corrente sanguiacutenea atingindo outras ceacutelulas
ndash Os triatomiacuteneos se infectam ao ingerir formas tripomastigotas sanguiacuteneas do hospedeiro vertebrado
Trypanosoma cruzi
ndash Estocircmago do vetor tripomastigotas se diferenciam em epimastigotas
ndash Intestino do vetor divisatildeo de epimastigotas por fissatildeo binaacuteria simples
ndash Porccedilatildeo final do tubo digestivo epimastigotas se diferenciam em tripomastigota metaciacuteclica forma infectante para o homem e entatildeo satildeo liberados nas fezes e urina do vetor
Tripomastigota
Cinetoplasto posterior ao nuacutecleo
cinetoplasto
Tripomastigota
Epimastigota
Cinetoplasto anterior ao nuacutecleo
Amastigota
Amastigotas Amastigotas e tripomastigotas
Monoacutecito parasitado com as formas amastigotas
Doenccedila de Chagas
bull Trypanosoma cruzi (Chagas 1909)
Diagnoacutestico laboratorial Fase aguda
bull Alta parasitemia
bull Pesquisa do parasito
ndash Exame de sangue a fresco
ndash Exame de sangue em gota espessa
ndash Esfregaccedilo sanguiacuteneo corado pelo Giemsa
ndash Microhematoacutecrito
ndash Meacutetodos de concentraccedilatildeo
ndash Inoculaccedilatildeo em aninais
Exame direto a fresco
bull Parasitas abundantes nos primeiros dias e semanas de incubaccedilatildeo
bull Colocar uma gota de sangue entre lacircmina e lamiacutenula e examinar imediatamente apoacutes a coleta para evitar a coagulaccedilatildeo
bull Para retardar a coagulaccedilatildeo adicionar uma gota de soluccedilatildeo salina
bull Analisar em microscoacutepio oacuteptico a presenccedila das formas tripomastigotas
Exame de sangue em gota espessa
bull Analisa uma maior quantidade de material bioloacutegico
bull Verifica a presenccedila de formas tripomastigotas sanguiacuteneas ndash Colocar 3 gotas de sangue na lacircmina ndash Com o canto de outra espalhar o material em uma
aacuterea de aproximadamente 1 cm da lacircmina ndash Deixar secar ao ar durante 6 horas Natildeo ultrapassar 36
horas ndash Corar pelo Giemsa Deixar em repouso por 30 min ndash Lavar e examinar
Esfregaccedilo sanguiacuteneo
bull Colocar uma gota de sangue na extremidade direita da lacircmina
bull Pegar outra lacircmina segurar por cima com a matildeo direita e com uma inclinaccedilatildeo de 45deg encostar adiante da gota
bull Deixar mesma se espalhar pela superfiacutecie de contato das duas lacircminas
bull Puxar a gota espalhada ateacute o final de lacircmina
bull Secar e corar pelo Giemsa ou Leishman
Esfregaccedilo sanguiacuteneo
Microhematoacutecrito Creme leucocitaacuterio
Microhematoacutecrito
bull Colher sangue em tubo capilar
bull Centrifugar em microcentriacutefuga por 5 minutos agrave 10000 rpm
bull Avaliar o microhematocrito em microscopia oacuteptica
bull Verificar a presenccedila das formas tripomastigotas presentes no creme leucocitaacuterio
bull Se positivo realizar esfregaccedilo do creme leucocitaacuterio
bull Fixar com aacutelcool metiacutelico e corar com Gienza Analisar em microscoacutepio oacuteptico
Meacutetodo de concentraccedilatildeo
bull Meacutetodo de Strout
ndash Realizar a coleta de sangue em tubo sem anticoagulante
ndash Aguardar a retraccedilatildeo do coaacutegulo Os parasitas concentrar-se-atildeo no soro a medida que ocorrer a retraccedilatildeo do coaacutegulo
ndash O soro eacute centrifugado para anaacutelise do sedimento
Inoculaccedilatildeo em animais
bull Inoculaccedilatildeo de sangue ou creme leucocitaacuterio em camundongos jovens
bull Inoculaccedilatildeo intra-peritoneal intra-conjuntival e a via oral
bull Avaliaccedilatildeo das formas de Tcruzi
bull Teacutecnica utilizada em pesquisa
Diagnoacutestico laboratorial Fase crocircnica
bull Xenodiagnoacutestico bull Hemocultura bull Reaccedilatildeo de hemaglutinaccedilatildeo indireta bull RIFI bull ELISA bull PCR bull PaGIA bull LMCo bull Pesquisa de anticorpos antitripomastigotas vivos
Hemocultura
bull Meio LIT ndash Liver Infusion Triptose
bull Meio NNN ndash McNeal Novy e Nicolle
bull Utilizaccedilatildeo de 30ml de sangue heparinizado
bull Centrifugaccedilatildeo por 30 minutos em 3000 rpm
bull Despreza-se o plasma e o sedimento celular eacute lavado com meio LIT ( Liver Infusion Triptose) para eliminaccedilatildeo de possiacuteveis anticorpos
Hemocultura
bull Sedimento distribuiacutedo em 6 tubos com 5 ml de LIT
bull Os tubos satildeo mantidos a 28degC homogeneizados 3x semana e avaliados quinzenalmente ateacute 90 dias
bull Centrifugaccedilatildeo e avaliaccedilatildeo do sedimento de hemaacutecias
bull Leitura realizada pela observaccedilatildeo microscoacutepica de gotas do meio
bull Aumento da positividade para sangue processado imediatamente apoacutes a coleta cultivado em prazo de tempo maior (120 dias) e repeticcedilatildeo da teacutecnica por 3 vezes
Wuchereria bancrofti
Taxonomia
bull Reino Animalia
bull Filo Nematoda
bull Classe Secernentea
bull Ordem Filariidea
bull Superfamiacutelia Filarioidea
bull FamiacuteliaOnchocercidae
bull GecircnerosWuchereria
bull Espeacutecie Wbancrofti
Formas evolutivas
bull Heteroxecircnico
bull Hospedeiro vertebrado homem
bull Hospedeiro intermediaacuterio Culex quinquefasciatus
bull Formas evolutivas ndash HV verme adulto (fecircmea e macho) localizados nos
vasos e gacircnglios linfaacuteticos da regiatildeo abdominal peacutelvica (perna e escroto) mamas e braccedilo
ndash microfilaacuterias eliminadas pelas fecircmeas graacutevidas Saem dos ductos linfaacuteticos e atingem circulaccedilatildeo sanguiacutenea
ndash HI larva L1 L2 e L3 (infectante)
Culex quinquefasciatus
Morfologia
bull Macho 35 a 4 cm x 01mm com extremidade posterior enrrolada ventralmente
bull Fecircmea 7 a 10cm x 03 mm com vagina exteriorizada em uma vulva localizada proacutexima agrave extremidade anterior
bull Microfilaacuteria Presenccedila de bainha e estilete bucal na parte anterior que as diferencia de outros filariacutedeos sanguiacuteneos Possuem 250 a 300 microm e uma grande qtde de nuacutecleos
bull Larva L3 possui aproximadamente 15 a 20 mm de comprimento
Microfilaacuteria
Ciclo evolutivo
bull Fecircmea do inseto realiza o hematofagismo noturno e ingere as microfilaacuterias
bull Estocircmago do vetor microfilaacuterias perdem a bainha atravessam a parede do estocircmago e migram para os muacutesculos toraacutecicos ndash L1
bull Apoacutes 20 dias a larva estaacute na forma infectante L3 medindo aproximadamente 2mm
bull Migraccedilatildeo da larva para a proboacutescida concentrando-se no laacutebio do moquito
Microfilaacuteria Presenccedila de bainha Cauda pontuda com nuacutecleos grandes largos e bem separados Nuacutecleos caudais em fila uacutenica
Ciclo evolutivo
bull Repasto sanguiacuteneo do inseto infectado
ndash As larvas L3 migram do laacutebio do vetor para a pele do HV
ndash Migram para os vasos linfaacuteticos e tornam-se vermes adultos
ndash Apoacutes 8 meses as fecircmeas graacutevidas produzem as primeiras microfilaacuterias
Periodicidade
bull Periodicidade noturna das microfilaacuterias
ndash Durante o dia localizam-se nos capilares profundos
ndash Durante a noite vasos sanguiacuteneos perifeacutericos
ndash Pico da microfilaremia meia-noite coincidindo com o horaacuterio de hematofagismo do inseto transmissor
Patologia
bull Periacuteodo assintomaacutetico bull Fase aguda bull Processos inflamatoacuterios produzidos por larvas L4 e adultos jovens
que colonizam as vias linfaacuteticas ndash Linfadenites linfonodos inguinais epitrocleanos e axilares com
desenvolvimento de granulomas com calcificaccedilatildeo apoacutes a morte dos vermes
ndash Linfangite inflamaccedilatildeo e dilataccedilatildeo dos vasos linfaacuteticos ndash Febre mal estar ndash Funiculite filariana linfangite do cordatildeo espermaacutetico e varicocele
bull Fase crocircnica ndash Hidrocele ndash Linfedema ndash Quiluacuteria ndash Elefantiacutease
Quiluacuteria
Patologia
bull Processos obstrutivos ndash Formaccedilatildeo de novelos envolvidos por reaccedilatildeo
inflamatoacuteria e pela formaccedilatildeo de fibrose
ndash Estase e congestatildeo da linfa produzindo linfoedema tecidual
ndash Extravasamento produzindo derrame linfaacutetico ascite linfaacutetica linfuacuteria linforreacuteia linfotoacuterax linfocele etc
ndash A ruptura de vasos linfaacuteticos para o interior do sistema excretor urinaacuterio daacute origem agrave quiluacuteria
Patologia
bull Complicaccedilotildees associadas agrave filariose
ndash Elefantiacutease
bull Caracterizada por processo inflamatoacuterio e fibrose crocircnica do oacutergatildeo atingido
bull Hipertrofia da derme do tecido conjuntivo aumento exagerado do volume do oacutergatildeo com queratinizaccedilatildeo e rugosidade
bull A pele perde a elasticidade resseca e se torna sujeita a infecccedilotildees bacterianas
Patologia
bull Permanecimento na aacuterea endecircmica
bull Nuacutemero de larvas inoculadas
bull Frequecircncia das re-infecccedilotildees
bull O nuacutemero de acasalamento dos vermes e suas localizaccedilotildees anatocircmicas
bull A sensibilizaccedilatildeo do organismo e a intensidade das reaccedilotildees inflamatoacuterias do paciente
bull As infecccedilotildees bacterianas associadas
Diagnoacutestico
bull Pesquisa de microfilaacuterias no sangue perifeacuterico ndash 20 40 ou 60 microL- de preferecircncia entre as 10 h da noite e 4h da manhatilde
ndash Gota espessa Coloraccedilatildeo de Giemsa
ndash Meacutetodos de concentraccedilatildeo Filtraccedilatildeo em membrana de policarbonato milipore ou nucleopore
ndash Meacutetodo de Knott
bull Na fase crocircnica as microfilaacuterias raramente satildeo detectadas no sangue perifeacuterico
Gota espessa
bull Possibilita a visualizaccedilatildeo da bainha fato que difere a microfilaria de W bancrofti de outro filariacutedeos sanguiacuteneos
bull Apresenta um baixo custo em comparaccedilatildeo com outras mais avanccediladas como a filtraccedilatildeo de sangue em membrana de policarbonato
bull Possui baixa sensibilidade natildeo indicada em situaccedilotildees em que os parasitados se mostram com baixa microfilaremia ou amicrofilarecircmicos
Concentraccedilatildeo
bull Baseia-se na passagem de sangue venoso atraveacutes de uma membrana (Milipore ou Nuclepore) de diacircmetro de 13 a 25 mm e poros de 5 ou 3 μm
bull O material retido na membrana sendo fixado corado e observado ao microscoacutepio
bull Essa teacutecnica assim como a de Knott permite a identificaccedilatildeo de indiviacuteduos com baixiacutessimas parasitemias (quantidade de microfilarias natildeo detectaacuteveis pela teacutecnica de gota espessa)
Teacutecnica de Knott
bull Retirar 2 ml de sangue total por punccedilatildeo venosa e colocar imediatamente em um tubo contendo 10 ml de formol a 2
bull Fechar o tubo e misture completamente invertendo-o e agitando-o O formol hemolisa as hemaacutecias mata fixa e distende as microfilaacuterias
bull Centrifugar o sangue a 1500 rpm por 5 minutos
bull Decantar o sobrenadante
Teacutecnica de Knott
bull Retirar o sedimento com uma pipeta Pasteur e espalhar a gota espessa sobre uma lacircmina
bull Deixar secar bem e corar com Giemsa
bull Examinar com objetiva de imersatildeo
bull Esta teacutecnica possibilita que o exame microscoacutepico laboratorial seja realizado vaacuterios dias apoacutes a coleta de material realizada no campo
Exames de imagem
bull Ultranossografia
ndash Possibilidade de visualizar os movimentos de vermes adultos vivos de W bancrofti em vaso linfaacutetico especificamente em vasos intraescrotais do cordatildeo espermaacutetico
ndash O movimento ativo e ininterrupto dos vermes adultos durante as 24 horas do dia eacute denominado sinal da ldquodanccedila das filaacuteriasrdquo
Diagnoacutestico soroloacutegico
bull Teste imunocromatograacutefico desenvolvido pelo ICT Diagnostic - ICT card
ndash Teste qualilativo
ndash Cartatildeo possui ac de antifilaacuteria e o controle eacute formado por ac anti Ig G humano
Plasmodium spp
Taxonomia
bull Reino Protozoa
bull FiloApicomplexa
bull Classe Sporozoea
bull Ordem Hemosporidiida
bull Famiacutelia Plasmodiidae
bull Gecircneros Plasmodium
bull Espeacutecie Pfalciparum Pvivax Povale e Pmalariae
Plasmodium
bull Ciclo bioloacutegico Hospedeiro vertebrado e invertebrado
bull Hospedeiro invertebrado ndash Vetor
ndash Fecircmeas hematoacutefagas do gecircnero Anopheles
ndash Brasil Anopheles (N)darlingi A (N) aquasalis A (N) albitarsis A (K) cruzii e A (K) bellator
ndash Possuem haacutebito noturno penetrando nas casas no crespuacutesculo saindo ao amanhecer
Plasmodium
bull Hospedeiro vertebrado homem
bull Transmissatildeo
ndash Vetor
ndash Transfusatildeo de sangue
ndash Compartilhamento de seringas
ndash Acidente com agulhas
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
bull Ciclo preacute-eritrociacutetico
ndash Forma inoculada esporozoiacutetos
ndash A fecircmea do anofelino infectado inocula no homem as formas infectantes localizadas na saliva
ndash Os esporozoiacutetas permancem na circulaccedilatildeo por aproximadamente uma hora
ndash Invadem os hepatoacutecitos e se diferenciam em trofozoiacutetas (criptozoiacuteto)
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
ndash Esquizogonia e formaccedilatildeo de esquizontes
ndash Divisatildeo nuclear e liberaccedilatildeo de merozoiacutetos
ndash Aproximadamente 10000 merozoiacutetos por hepatoacutecito
ndash Rompimento do hepatoacutecito e liberaccedilatildeo de merozoiacutetos na circulaccedilatildeo
ndash Duraccedilatildeo do ciclo aprox 1 a 2 semanas
Ciclo evolutivo
bull PVivax e Povale
ndash Alguns esporozoiacutetos geneticamente diferentes ficam na forma latente nos hepatoacutecitos permanecendo muitos meses Satildeo classificados como hipnozoiacuteto
ndash Satildeo responsaacuteveis pelas recaiacutedas tardias e formas de malaacuteria com periacuteodo de encubaccedilatildeo longo ndash 6 a 9 meses
FASE HEPAacuteTICA OU EXOERITROCIacuteTICA
Hepatoacutecito
FIacuteGADO
Invasatildeo do hepatoacutecito
Reproduccedilatildeo Assexuada
Esporozoiacutetos Lise dos hepatoacutecitos
Liberaccedilatildeo dos protozoaacuterios na corrente sanguumliacutenea
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
bull Ciclo eritrociacutetico
ndash Os merozoiacutetos invadem as hemaacutecias
ndash Diferenciaccedilatildeo em trofozoiacutetos
ndash Esquizogonia esquizonte
ndash Produccedilatildeo de merozoiacutetos e rompimento da hemaacutecia
ndash Merozoiacutetos invasatildeo de novas hemaacutecias
ndash Apoacutes algumas geraccedilotildees os merozoiacutetos natildeo mais se dividem e se diferenciam em gametoacutecitos ndash micro e macrogametoacutecito
FASE ERITROCIacuteTICA
Hepatoacutecito destruiacutedo pelos protozoaacuterios
Penetraccedilatildeo dos protozoaacuterios
Reproduccedilatildeo assexuada
Protozoaacuterios destroem as hemaacutecias
Diferenciaccedilatildeo em gametoacutecitos
Fecircmeas de Anopheles sugam hemaacutecias com gametoacutecitos
Ciclo no hospedeiro invertebrado
Ocorre nas hemaacutecias ou Eritroacutecitos
nas hemaacutecias
Protozoaacuterio no interior da hemaacutecia
Hemaacutecia com gametoacutecito
T trofozoiacuteto Em esquizonte com merozoiacuteto
Fase eritrociacutetica
bull Ciclo sanguiacuteneo ndash Pfalciparum P vivax e Povale 48 horas
ndash Pmalariae 72 horas
ndash Fonte de nutriccedilatildeo do Plasmodium no ciclo sanguiacuteneo hemoglobina
ndash Produccedilatildeo do pigmento malaacuterico hemozoiacutena bull Granulaccedilotildees de Schuffner Plasmodium vivax
bull Granulaccedilotildees de Maurer P falciparum
bull Granulaccedilotildees de Ziemann P malariae
ndash Fagocitose pelas ceacutelulas de Kuppffer e macroacutefagos do baccedilo
Trofozoiacutetos Pfalciparum
Trofozoiacutetos Pfalciparum
Esquizonte ndash P falciparum
Raros no sangue perifeacuterico Possuem 2 a 24 merozoiacutetos
Ocupam 23 do gloacutebulo vermelho
Gametoacutecitos Pfalciparum
Ciclo evolutivo Pvivax
Esquizonte ndash P vivax
Satildeo grandes e ameboacuteides Cromatina organizada em duas ou mais massas
Possuem 2 a 24 merozoiacutetos com pontos de cromatina
Gametoacutecito ndash Pvivax
Macrogametoacutecitos satildeo redondos ou ovais e ocupam toda ceacutelula hospedeira O citoplasma eacute geralmente corado de azul mais escuro e conteacutem pigmento marrom Microgametoacutecitos satildeo geralmente do tamanho de um RBC natildeo infectados com citoplasma corados de azul paacutelido rosa ou cinza
Trofozoiacutetos - P malariae
Esquizontes ndash P malariae
Aproximadamente 6 a 12 merozoiacutetos com arranjo de rosetas
Gametoacutecitos ndash P malariae
Ciclo evolutivo ndash HI
bull Ingestatildeo de hemaacutecias contendo gametoacutecitos durante o repasto sanguiacuteneo da fecircmea do anofelino
bull No intestino meacutedio do vetor gametogecircnese ndash Macrogametoacutecito ndash macrogameta feminino ndash Microgametoacutecito o processo de exflagelaccedilatildeo daacute
origem a 8 microgametas masculinos ndash Produccedilatildeo de ovo ou zigoto ndash O ovo encista na camada epitelial do intestino meacutedio
oocisto ndash Esporogonia liberaccedilatildeo de esporozoiacutetos
Ciclo evolutivo ndash HInvertebrado
ndash Os esporozoiacutetos satildeo transportados pelo hemolinfa ateacute as glacircndulas salivares do vetor ateacute atingirem o ducto salivar
bull Inoculaccedilatildeo no hospedeiro vertebrado atraveacutes da picada do inseto
Hemaacutecia com gametoacutecito
Fecircmeas de Anopheles sugam hemaacutecias com gametoacutecitos
CICLO NO INVERTEBRADO
No tubo digestivo
Zigoto
Penetraccedilatildeo na parede do tubo
digestivo
Migraccedilatildeo para as glacircndulas salivares
Desenvolvimento
Mosquito infectado
Diagnoacutestico
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado e espesso corado pelo Giemsa
bull Sangue colhido sem anticoagulante para melhor fixaccedilatildeo em lacircmina
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo espesso eacute mais eficiente para detecccedilatildeo da infecccedilatildeo
bull Esfregaccedilo delgado eacute mais eficiente para diferenciaccedilatildeo morfoloacutegica das espeacutecies
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo semiquantitativo
ndash Exame de 100 campos microscoacutepicos com resultado expresso pelo sistema de cruzes
Parasitos contados Nuacutemero de campos
microscoacutepicos cruzes
40 a 60 100 +2
1 1 +
2-20 1 ++
21-200 1 +++
+ 200 1 ++++
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo quantitativo derivado de anaacutelise semiquantitativa
Contagem de parasitos por campo
Cruzes Parasitos por mm3
40 a 60100 +2 200-300
1 + 301-500
2-20 ++ 501 - 10000
21-200 +++ 10001 ndash 100000
+ 200 ++++ 100000 ou mais
Diagnoacutestico
bull P falciparum
ndash Parte do ciclo celular aderido ao endoteacutelio capilar Encontro somente de trofozoitos e gametoacutecitos no sangue perifeacuterico
ndash Raramente os esquizontes satildeo encontrados no sangue perifeacuterico
Diagnoacutestico ndash Pvivax ndash Encontro de todas as formas de desenvolvimento ndash
trofozoiacuteto jovem maduro esquizontes e gametoacutecitos
ndash Os trofozoiacutetos maduros tecircm geralmente um aspecto irregular com extensotildees ameboacuteides em seu citoplasma
Diagnoacutestico ndash Pvivax
ndash Os gametoacutecitos femininos coram-se mais intensamente que os masculinos e apresentam nuacutecleo mais compacto geralmente em localizaccedilatildeo perifeacuterica
ndash O pigmento malaacuterico geralmente eacute abundante
Diagnoacutestico - Pmalariae
bull Realizado por meio de caracteriacutesticas morfoloacutegicas do parasito
ndash Verificaccedilatildeo em esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado
ndash Posiccedilatildeo equatorial do parasito
ndash Desenvolvimento sem deformaccedilatildeo do eritroacutecito
Diagnoacutestico
bull QBC ndash Teacutecnica que combina concentraccedilatildeo dos parasitos
pela centrifugaccedilatildeo do sangue em em microhematoacutecrito e a coloraccedilatildeo dos aacutecidos nucleacuteicos do parasito pelo fluorcromo laranja de acridina
ndash Utilizaccedilatildeo de tubos especiais e microscopia epifluorescente
ndash Teste raacutepido
ndash Alta sensibilidade
Diagnoacutestico
bull ParaSight-F ( Becton amp Dickinson)
ndash Teste raacutepido para captura da proteiacutena rica em histidina 2 de Pfalciparum( PfHRP2) e enzimas conservadas de 4 espeacutecies de plasmoacutedio (DHL e aldolase
ndash Utilizaccedilatildeo de fita de nitrocelulose contendo ac monoclonal
ndash Lise de uma gota de sangue
ndash A reaccedilatildeo eacute revelada com adiccedilatildeo de ac policlonal anti-HRP2 conjugado com lipossomas contendo corante
Diagnoacutestico
bull PCR
ndash Sensibilidade e especificidade maior do que o esfregaccedilo sanguiacuteneo
Rhodnius prolixus
Rhodnius prolixus
Trypanosoma cruzi
bull Formas evolutivas
bull H invertebrado
ndash Epimastigota
ndash Tripomastigota metaciacuteclica
bull H vertebrado
ndash Amastigota ndash intracelulares (ceacutelulas musculares ceacutelulas de Schwann fibroblastos etc)
ndash Tripomastigota sanguiacutenea
Trypanosoma cruzi
bull Ciclo evolutivo ndash O triatomiacuteneo pica o homem e durante o repasto
sanguiacuteneo defeca e urina na pele
ndash Enquanto se alimenta libera no local substacircncias anesteacutesicas que o permitem promover um repasto demorado
ndash Prurido local e entrada das formas tripomastigotas metaciacuteclicas
ndash Fagocitose pelos macroacutefagos teciduais
ndash Transformaccedilatildeo das formas tripomastigotas em amastigotas intracelulares
Trypanosoma cruzi
ndash Divisatildeo das formas amastigotas diferenciaccedilatildeo em tripomastigotas rompimento do macroacutefago e liberaccedilatildeo de novas formas no interstiacutecio
ndash As formas tripomastigotas caem na corrente sanguiacutenea atingindo outras ceacutelulas
ndash Os triatomiacuteneos se infectam ao ingerir formas tripomastigotas sanguiacuteneas do hospedeiro vertebrado
Trypanosoma cruzi
ndash Estocircmago do vetor tripomastigotas se diferenciam em epimastigotas
ndash Intestino do vetor divisatildeo de epimastigotas por fissatildeo binaacuteria simples
ndash Porccedilatildeo final do tubo digestivo epimastigotas se diferenciam em tripomastigota metaciacuteclica forma infectante para o homem e entatildeo satildeo liberados nas fezes e urina do vetor
Tripomastigota
Cinetoplasto posterior ao nuacutecleo
cinetoplasto
Tripomastigota
Epimastigota
Cinetoplasto anterior ao nuacutecleo
Amastigota
Amastigotas Amastigotas e tripomastigotas
Monoacutecito parasitado com as formas amastigotas
Doenccedila de Chagas
bull Trypanosoma cruzi (Chagas 1909)
Diagnoacutestico laboratorial Fase aguda
bull Alta parasitemia
bull Pesquisa do parasito
ndash Exame de sangue a fresco
ndash Exame de sangue em gota espessa
ndash Esfregaccedilo sanguiacuteneo corado pelo Giemsa
ndash Microhematoacutecrito
ndash Meacutetodos de concentraccedilatildeo
ndash Inoculaccedilatildeo em aninais
Exame direto a fresco
bull Parasitas abundantes nos primeiros dias e semanas de incubaccedilatildeo
bull Colocar uma gota de sangue entre lacircmina e lamiacutenula e examinar imediatamente apoacutes a coleta para evitar a coagulaccedilatildeo
bull Para retardar a coagulaccedilatildeo adicionar uma gota de soluccedilatildeo salina
bull Analisar em microscoacutepio oacuteptico a presenccedila das formas tripomastigotas
Exame de sangue em gota espessa
bull Analisa uma maior quantidade de material bioloacutegico
bull Verifica a presenccedila de formas tripomastigotas sanguiacuteneas ndash Colocar 3 gotas de sangue na lacircmina ndash Com o canto de outra espalhar o material em uma
aacuterea de aproximadamente 1 cm da lacircmina ndash Deixar secar ao ar durante 6 horas Natildeo ultrapassar 36
horas ndash Corar pelo Giemsa Deixar em repouso por 30 min ndash Lavar e examinar
Esfregaccedilo sanguiacuteneo
bull Colocar uma gota de sangue na extremidade direita da lacircmina
bull Pegar outra lacircmina segurar por cima com a matildeo direita e com uma inclinaccedilatildeo de 45deg encostar adiante da gota
bull Deixar mesma se espalhar pela superfiacutecie de contato das duas lacircminas
bull Puxar a gota espalhada ateacute o final de lacircmina
bull Secar e corar pelo Giemsa ou Leishman
Esfregaccedilo sanguiacuteneo
Microhematoacutecrito Creme leucocitaacuterio
Microhematoacutecrito
bull Colher sangue em tubo capilar
bull Centrifugar em microcentriacutefuga por 5 minutos agrave 10000 rpm
bull Avaliar o microhematocrito em microscopia oacuteptica
bull Verificar a presenccedila das formas tripomastigotas presentes no creme leucocitaacuterio
bull Se positivo realizar esfregaccedilo do creme leucocitaacuterio
bull Fixar com aacutelcool metiacutelico e corar com Gienza Analisar em microscoacutepio oacuteptico
Meacutetodo de concentraccedilatildeo
bull Meacutetodo de Strout
ndash Realizar a coleta de sangue em tubo sem anticoagulante
ndash Aguardar a retraccedilatildeo do coaacutegulo Os parasitas concentrar-se-atildeo no soro a medida que ocorrer a retraccedilatildeo do coaacutegulo
ndash O soro eacute centrifugado para anaacutelise do sedimento
Inoculaccedilatildeo em animais
bull Inoculaccedilatildeo de sangue ou creme leucocitaacuterio em camundongos jovens
bull Inoculaccedilatildeo intra-peritoneal intra-conjuntival e a via oral
bull Avaliaccedilatildeo das formas de Tcruzi
bull Teacutecnica utilizada em pesquisa
Diagnoacutestico laboratorial Fase crocircnica
bull Xenodiagnoacutestico bull Hemocultura bull Reaccedilatildeo de hemaglutinaccedilatildeo indireta bull RIFI bull ELISA bull PCR bull PaGIA bull LMCo bull Pesquisa de anticorpos antitripomastigotas vivos
Hemocultura
bull Meio LIT ndash Liver Infusion Triptose
bull Meio NNN ndash McNeal Novy e Nicolle
bull Utilizaccedilatildeo de 30ml de sangue heparinizado
bull Centrifugaccedilatildeo por 30 minutos em 3000 rpm
bull Despreza-se o plasma e o sedimento celular eacute lavado com meio LIT ( Liver Infusion Triptose) para eliminaccedilatildeo de possiacuteveis anticorpos
Hemocultura
bull Sedimento distribuiacutedo em 6 tubos com 5 ml de LIT
bull Os tubos satildeo mantidos a 28degC homogeneizados 3x semana e avaliados quinzenalmente ateacute 90 dias
bull Centrifugaccedilatildeo e avaliaccedilatildeo do sedimento de hemaacutecias
bull Leitura realizada pela observaccedilatildeo microscoacutepica de gotas do meio
bull Aumento da positividade para sangue processado imediatamente apoacutes a coleta cultivado em prazo de tempo maior (120 dias) e repeticcedilatildeo da teacutecnica por 3 vezes
Wuchereria bancrofti
Taxonomia
bull Reino Animalia
bull Filo Nematoda
bull Classe Secernentea
bull Ordem Filariidea
bull Superfamiacutelia Filarioidea
bull FamiacuteliaOnchocercidae
bull GecircnerosWuchereria
bull Espeacutecie Wbancrofti
Formas evolutivas
bull Heteroxecircnico
bull Hospedeiro vertebrado homem
bull Hospedeiro intermediaacuterio Culex quinquefasciatus
bull Formas evolutivas ndash HV verme adulto (fecircmea e macho) localizados nos
vasos e gacircnglios linfaacuteticos da regiatildeo abdominal peacutelvica (perna e escroto) mamas e braccedilo
ndash microfilaacuterias eliminadas pelas fecircmeas graacutevidas Saem dos ductos linfaacuteticos e atingem circulaccedilatildeo sanguiacutenea
ndash HI larva L1 L2 e L3 (infectante)
Culex quinquefasciatus
Morfologia
bull Macho 35 a 4 cm x 01mm com extremidade posterior enrrolada ventralmente
bull Fecircmea 7 a 10cm x 03 mm com vagina exteriorizada em uma vulva localizada proacutexima agrave extremidade anterior
bull Microfilaacuteria Presenccedila de bainha e estilete bucal na parte anterior que as diferencia de outros filariacutedeos sanguiacuteneos Possuem 250 a 300 microm e uma grande qtde de nuacutecleos
bull Larva L3 possui aproximadamente 15 a 20 mm de comprimento
Microfilaacuteria
Ciclo evolutivo
bull Fecircmea do inseto realiza o hematofagismo noturno e ingere as microfilaacuterias
bull Estocircmago do vetor microfilaacuterias perdem a bainha atravessam a parede do estocircmago e migram para os muacutesculos toraacutecicos ndash L1
bull Apoacutes 20 dias a larva estaacute na forma infectante L3 medindo aproximadamente 2mm
bull Migraccedilatildeo da larva para a proboacutescida concentrando-se no laacutebio do moquito
Microfilaacuteria Presenccedila de bainha Cauda pontuda com nuacutecleos grandes largos e bem separados Nuacutecleos caudais em fila uacutenica
Ciclo evolutivo
bull Repasto sanguiacuteneo do inseto infectado
ndash As larvas L3 migram do laacutebio do vetor para a pele do HV
ndash Migram para os vasos linfaacuteticos e tornam-se vermes adultos
ndash Apoacutes 8 meses as fecircmeas graacutevidas produzem as primeiras microfilaacuterias
Periodicidade
bull Periodicidade noturna das microfilaacuterias
ndash Durante o dia localizam-se nos capilares profundos
ndash Durante a noite vasos sanguiacuteneos perifeacutericos
ndash Pico da microfilaremia meia-noite coincidindo com o horaacuterio de hematofagismo do inseto transmissor
Patologia
bull Periacuteodo assintomaacutetico bull Fase aguda bull Processos inflamatoacuterios produzidos por larvas L4 e adultos jovens
que colonizam as vias linfaacuteticas ndash Linfadenites linfonodos inguinais epitrocleanos e axilares com
desenvolvimento de granulomas com calcificaccedilatildeo apoacutes a morte dos vermes
ndash Linfangite inflamaccedilatildeo e dilataccedilatildeo dos vasos linfaacuteticos ndash Febre mal estar ndash Funiculite filariana linfangite do cordatildeo espermaacutetico e varicocele
bull Fase crocircnica ndash Hidrocele ndash Linfedema ndash Quiluacuteria ndash Elefantiacutease
Quiluacuteria
Patologia
bull Processos obstrutivos ndash Formaccedilatildeo de novelos envolvidos por reaccedilatildeo
inflamatoacuteria e pela formaccedilatildeo de fibrose
ndash Estase e congestatildeo da linfa produzindo linfoedema tecidual
ndash Extravasamento produzindo derrame linfaacutetico ascite linfaacutetica linfuacuteria linforreacuteia linfotoacuterax linfocele etc
ndash A ruptura de vasos linfaacuteticos para o interior do sistema excretor urinaacuterio daacute origem agrave quiluacuteria
Patologia
bull Complicaccedilotildees associadas agrave filariose
ndash Elefantiacutease
bull Caracterizada por processo inflamatoacuterio e fibrose crocircnica do oacutergatildeo atingido
bull Hipertrofia da derme do tecido conjuntivo aumento exagerado do volume do oacutergatildeo com queratinizaccedilatildeo e rugosidade
bull A pele perde a elasticidade resseca e se torna sujeita a infecccedilotildees bacterianas
Patologia
bull Permanecimento na aacuterea endecircmica
bull Nuacutemero de larvas inoculadas
bull Frequecircncia das re-infecccedilotildees
bull O nuacutemero de acasalamento dos vermes e suas localizaccedilotildees anatocircmicas
bull A sensibilizaccedilatildeo do organismo e a intensidade das reaccedilotildees inflamatoacuterias do paciente
bull As infecccedilotildees bacterianas associadas
Diagnoacutestico
bull Pesquisa de microfilaacuterias no sangue perifeacuterico ndash 20 40 ou 60 microL- de preferecircncia entre as 10 h da noite e 4h da manhatilde
ndash Gota espessa Coloraccedilatildeo de Giemsa
ndash Meacutetodos de concentraccedilatildeo Filtraccedilatildeo em membrana de policarbonato milipore ou nucleopore
ndash Meacutetodo de Knott
bull Na fase crocircnica as microfilaacuterias raramente satildeo detectadas no sangue perifeacuterico
Gota espessa
bull Possibilita a visualizaccedilatildeo da bainha fato que difere a microfilaria de W bancrofti de outro filariacutedeos sanguiacuteneos
bull Apresenta um baixo custo em comparaccedilatildeo com outras mais avanccediladas como a filtraccedilatildeo de sangue em membrana de policarbonato
bull Possui baixa sensibilidade natildeo indicada em situaccedilotildees em que os parasitados se mostram com baixa microfilaremia ou amicrofilarecircmicos
Concentraccedilatildeo
bull Baseia-se na passagem de sangue venoso atraveacutes de uma membrana (Milipore ou Nuclepore) de diacircmetro de 13 a 25 mm e poros de 5 ou 3 μm
bull O material retido na membrana sendo fixado corado e observado ao microscoacutepio
bull Essa teacutecnica assim como a de Knott permite a identificaccedilatildeo de indiviacuteduos com baixiacutessimas parasitemias (quantidade de microfilarias natildeo detectaacuteveis pela teacutecnica de gota espessa)
Teacutecnica de Knott
bull Retirar 2 ml de sangue total por punccedilatildeo venosa e colocar imediatamente em um tubo contendo 10 ml de formol a 2
bull Fechar o tubo e misture completamente invertendo-o e agitando-o O formol hemolisa as hemaacutecias mata fixa e distende as microfilaacuterias
bull Centrifugar o sangue a 1500 rpm por 5 minutos
bull Decantar o sobrenadante
Teacutecnica de Knott
bull Retirar o sedimento com uma pipeta Pasteur e espalhar a gota espessa sobre uma lacircmina
bull Deixar secar bem e corar com Giemsa
bull Examinar com objetiva de imersatildeo
bull Esta teacutecnica possibilita que o exame microscoacutepico laboratorial seja realizado vaacuterios dias apoacutes a coleta de material realizada no campo
Exames de imagem
bull Ultranossografia
ndash Possibilidade de visualizar os movimentos de vermes adultos vivos de W bancrofti em vaso linfaacutetico especificamente em vasos intraescrotais do cordatildeo espermaacutetico
ndash O movimento ativo e ininterrupto dos vermes adultos durante as 24 horas do dia eacute denominado sinal da ldquodanccedila das filaacuteriasrdquo
Diagnoacutestico soroloacutegico
bull Teste imunocromatograacutefico desenvolvido pelo ICT Diagnostic - ICT card
ndash Teste qualilativo
ndash Cartatildeo possui ac de antifilaacuteria e o controle eacute formado por ac anti Ig G humano
Plasmodium spp
Taxonomia
bull Reino Protozoa
bull FiloApicomplexa
bull Classe Sporozoea
bull Ordem Hemosporidiida
bull Famiacutelia Plasmodiidae
bull Gecircneros Plasmodium
bull Espeacutecie Pfalciparum Pvivax Povale e Pmalariae
Plasmodium
bull Ciclo bioloacutegico Hospedeiro vertebrado e invertebrado
bull Hospedeiro invertebrado ndash Vetor
ndash Fecircmeas hematoacutefagas do gecircnero Anopheles
ndash Brasil Anopheles (N)darlingi A (N) aquasalis A (N) albitarsis A (K) cruzii e A (K) bellator
ndash Possuem haacutebito noturno penetrando nas casas no crespuacutesculo saindo ao amanhecer
Plasmodium
bull Hospedeiro vertebrado homem
bull Transmissatildeo
ndash Vetor
ndash Transfusatildeo de sangue
ndash Compartilhamento de seringas
ndash Acidente com agulhas
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
bull Ciclo preacute-eritrociacutetico
ndash Forma inoculada esporozoiacutetos
ndash A fecircmea do anofelino infectado inocula no homem as formas infectantes localizadas na saliva
ndash Os esporozoiacutetas permancem na circulaccedilatildeo por aproximadamente uma hora
ndash Invadem os hepatoacutecitos e se diferenciam em trofozoiacutetas (criptozoiacuteto)
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
ndash Esquizogonia e formaccedilatildeo de esquizontes
ndash Divisatildeo nuclear e liberaccedilatildeo de merozoiacutetos
ndash Aproximadamente 10000 merozoiacutetos por hepatoacutecito
ndash Rompimento do hepatoacutecito e liberaccedilatildeo de merozoiacutetos na circulaccedilatildeo
ndash Duraccedilatildeo do ciclo aprox 1 a 2 semanas
Ciclo evolutivo
bull PVivax e Povale
ndash Alguns esporozoiacutetos geneticamente diferentes ficam na forma latente nos hepatoacutecitos permanecendo muitos meses Satildeo classificados como hipnozoiacuteto
ndash Satildeo responsaacuteveis pelas recaiacutedas tardias e formas de malaacuteria com periacuteodo de encubaccedilatildeo longo ndash 6 a 9 meses
FASE HEPAacuteTICA OU EXOERITROCIacuteTICA
Hepatoacutecito
FIacuteGADO
Invasatildeo do hepatoacutecito
Reproduccedilatildeo Assexuada
Esporozoiacutetos Lise dos hepatoacutecitos
Liberaccedilatildeo dos protozoaacuterios na corrente sanguumliacutenea
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
bull Ciclo eritrociacutetico
ndash Os merozoiacutetos invadem as hemaacutecias
ndash Diferenciaccedilatildeo em trofozoiacutetos
ndash Esquizogonia esquizonte
ndash Produccedilatildeo de merozoiacutetos e rompimento da hemaacutecia
ndash Merozoiacutetos invasatildeo de novas hemaacutecias
ndash Apoacutes algumas geraccedilotildees os merozoiacutetos natildeo mais se dividem e se diferenciam em gametoacutecitos ndash micro e macrogametoacutecito
FASE ERITROCIacuteTICA
Hepatoacutecito destruiacutedo pelos protozoaacuterios
Penetraccedilatildeo dos protozoaacuterios
Reproduccedilatildeo assexuada
Protozoaacuterios destroem as hemaacutecias
Diferenciaccedilatildeo em gametoacutecitos
Fecircmeas de Anopheles sugam hemaacutecias com gametoacutecitos
Ciclo no hospedeiro invertebrado
Ocorre nas hemaacutecias ou Eritroacutecitos
nas hemaacutecias
Protozoaacuterio no interior da hemaacutecia
Hemaacutecia com gametoacutecito
T trofozoiacuteto Em esquizonte com merozoiacuteto
Fase eritrociacutetica
bull Ciclo sanguiacuteneo ndash Pfalciparum P vivax e Povale 48 horas
ndash Pmalariae 72 horas
ndash Fonte de nutriccedilatildeo do Plasmodium no ciclo sanguiacuteneo hemoglobina
ndash Produccedilatildeo do pigmento malaacuterico hemozoiacutena bull Granulaccedilotildees de Schuffner Plasmodium vivax
bull Granulaccedilotildees de Maurer P falciparum
bull Granulaccedilotildees de Ziemann P malariae
ndash Fagocitose pelas ceacutelulas de Kuppffer e macroacutefagos do baccedilo
Trofozoiacutetos Pfalciparum
Trofozoiacutetos Pfalciparum
Esquizonte ndash P falciparum
Raros no sangue perifeacuterico Possuem 2 a 24 merozoiacutetos
Ocupam 23 do gloacutebulo vermelho
Gametoacutecitos Pfalciparum
Ciclo evolutivo Pvivax
Esquizonte ndash P vivax
Satildeo grandes e ameboacuteides Cromatina organizada em duas ou mais massas
Possuem 2 a 24 merozoiacutetos com pontos de cromatina
Gametoacutecito ndash Pvivax
Macrogametoacutecitos satildeo redondos ou ovais e ocupam toda ceacutelula hospedeira O citoplasma eacute geralmente corado de azul mais escuro e conteacutem pigmento marrom Microgametoacutecitos satildeo geralmente do tamanho de um RBC natildeo infectados com citoplasma corados de azul paacutelido rosa ou cinza
Trofozoiacutetos - P malariae
Esquizontes ndash P malariae
Aproximadamente 6 a 12 merozoiacutetos com arranjo de rosetas
Gametoacutecitos ndash P malariae
Ciclo evolutivo ndash HI
bull Ingestatildeo de hemaacutecias contendo gametoacutecitos durante o repasto sanguiacuteneo da fecircmea do anofelino
bull No intestino meacutedio do vetor gametogecircnese ndash Macrogametoacutecito ndash macrogameta feminino ndash Microgametoacutecito o processo de exflagelaccedilatildeo daacute
origem a 8 microgametas masculinos ndash Produccedilatildeo de ovo ou zigoto ndash O ovo encista na camada epitelial do intestino meacutedio
oocisto ndash Esporogonia liberaccedilatildeo de esporozoiacutetos
Ciclo evolutivo ndash HInvertebrado
ndash Os esporozoiacutetos satildeo transportados pelo hemolinfa ateacute as glacircndulas salivares do vetor ateacute atingirem o ducto salivar
bull Inoculaccedilatildeo no hospedeiro vertebrado atraveacutes da picada do inseto
Hemaacutecia com gametoacutecito
Fecircmeas de Anopheles sugam hemaacutecias com gametoacutecitos
CICLO NO INVERTEBRADO
No tubo digestivo
Zigoto
Penetraccedilatildeo na parede do tubo
digestivo
Migraccedilatildeo para as glacircndulas salivares
Desenvolvimento
Mosquito infectado
Diagnoacutestico
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado e espesso corado pelo Giemsa
bull Sangue colhido sem anticoagulante para melhor fixaccedilatildeo em lacircmina
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo espesso eacute mais eficiente para detecccedilatildeo da infecccedilatildeo
bull Esfregaccedilo delgado eacute mais eficiente para diferenciaccedilatildeo morfoloacutegica das espeacutecies
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo semiquantitativo
ndash Exame de 100 campos microscoacutepicos com resultado expresso pelo sistema de cruzes
Parasitos contados Nuacutemero de campos
microscoacutepicos cruzes
40 a 60 100 +2
1 1 +
2-20 1 ++
21-200 1 +++
+ 200 1 ++++
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo quantitativo derivado de anaacutelise semiquantitativa
Contagem de parasitos por campo
Cruzes Parasitos por mm3
40 a 60100 +2 200-300
1 + 301-500
2-20 ++ 501 - 10000
21-200 +++ 10001 ndash 100000
+ 200 ++++ 100000 ou mais
Diagnoacutestico
bull P falciparum
ndash Parte do ciclo celular aderido ao endoteacutelio capilar Encontro somente de trofozoitos e gametoacutecitos no sangue perifeacuterico
ndash Raramente os esquizontes satildeo encontrados no sangue perifeacuterico
Diagnoacutestico ndash Pvivax ndash Encontro de todas as formas de desenvolvimento ndash
trofozoiacuteto jovem maduro esquizontes e gametoacutecitos
ndash Os trofozoiacutetos maduros tecircm geralmente um aspecto irregular com extensotildees ameboacuteides em seu citoplasma
Diagnoacutestico ndash Pvivax
ndash Os gametoacutecitos femininos coram-se mais intensamente que os masculinos e apresentam nuacutecleo mais compacto geralmente em localizaccedilatildeo perifeacuterica
ndash O pigmento malaacuterico geralmente eacute abundante
Diagnoacutestico - Pmalariae
bull Realizado por meio de caracteriacutesticas morfoloacutegicas do parasito
ndash Verificaccedilatildeo em esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado
ndash Posiccedilatildeo equatorial do parasito
ndash Desenvolvimento sem deformaccedilatildeo do eritroacutecito
Diagnoacutestico
bull QBC ndash Teacutecnica que combina concentraccedilatildeo dos parasitos
pela centrifugaccedilatildeo do sangue em em microhematoacutecrito e a coloraccedilatildeo dos aacutecidos nucleacuteicos do parasito pelo fluorcromo laranja de acridina
ndash Utilizaccedilatildeo de tubos especiais e microscopia epifluorescente
ndash Teste raacutepido
ndash Alta sensibilidade
Diagnoacutestico
bull ParaSight-F ( Becton amp Dickinson)
ndash Teste raacutepido para captura da proteiacutena rica em histidina 2 de Pfalciparum( PfHRP2) e enzimas conservadas de 4 espeacutecies de plasmoacutedio (DHL e aldolase
ndash Utilizaccedilatildeo de fita de nitrocelulose contendo ac monoclonal
ndash Lise de uma gota de sangue
ndash A reaccedilatildeo eacute revelada com adiccedilatildeo de ac policlonal anti-HRP2 conjugado com lipossomas contendo corante
Diagnoacutestico
bull PCR
ndash Sensibilidade e especificidade maior do que o esfregaccedilo sanguiacuteneo
Rhodnius prolixus
Trypanosoma cruzi
bull Formas evolutivas
bull H invertebrado
ndash Epimastigota
ndash Tripomastigota metaciacuteclica
bull H vertebrado
ndash Amastigota ndash intracelulares (ceacutelulas musculares ceacutelulas de Schwann fibroblastos etc)
ndash Tripomastigota sanguiacutenea
Trypanosoma cruzi
bull Ciclo evolutivo ndash O triatomiacuteneo pica o homem e durante o repasto
sanguiacuteneo defeca e urina na pele
ndash Enquanto se alimenta libera no local substacircncias anesteacutesicas que o permitem promover um repasto demorado
ndash Prurido local e entrada das formas tripomastigotas metaciacuteclicas
ndash Fagocitose pelos macroacutefagos teciduais
ndash Transformaccedilatildeo das formas tripomastigotas em amastigotas intracelulares
Trypanosoma cruzi
ndash Divisatildeo das formas amastigotas diferenciaccedilatildeo em tripomastigotas rompimento do macroacutefago e liberaccedilatildeo de novas formas no interstiacutecio
ndash As formas tripomastigotas caem na corrente sanguiacutenea atingindo outras ceacutelulas
ndash Os triatomiacuteneos se infectam ao ingerir formas tripomastigotas sanguiacuteneas do hospedeiro vertebrado
Trypanosoma cruzi
ndash Estocircmago do vetor tripomastigotas se diferenciam em epimastigotas
ndash Intestino do vetor divisatildeo de epimastigotas por fissatildeo binaacuteria simples
ndash Porccedilatildeo final do tubo digestivo epimastigotas se diferenciam em tripomastigota metaciacuteclica forma infectante para o homem e entatildeo satildeo liberados nas fezes e urina do vetor
Tripomastigota
Cinetoplasto posterior ao nuacutecleo
cinetoplasto
Tripomastigota
Epimastigota
Cinetoplasto anterior ao nuacutecleo
Amastigota
Amastigotas Amastigotas e tripomastigotas
Monoacutecito parasitado com as formas amastigotas
Doenccedila de Chagas
bull Trypanosoma cruzi (Chagas 1909)
Diagnoacutestico laboratorial Fase aguda
bull Alta parasitemia
bull Pesquisa do parasito
ndash Exame de sangue a fresco
ndash Exame de sangue em gota espessa
ndash Esfregaccedilo sanguiacuteneo corado pelo Giemsa
ndash Microhematoacutecrito
ndash Meacutetodos de concentraccedilatildeo
ndash Inoculaccedilatildeo em aninais
Exame direto a fresco
bull Parasitas abundantes nos primeiros dias e semanas de incubaccedilatildeo
bull Colocar uma gota de sangue entre lacircmina e lamiacutenula e examinar imediatamente apoacutes a coleta para evitar a coagulaccedilatildeo
bull Para retardar a coagulaccedilatildeo adicionar uma gota de soluccedilatildeo salina
bull Analisar em microscoacutepio oacuteptico a presenccedila das formas tripomastigotas
Exame de sangue em gota espessa
bull Analisa uma maior quantidade de material bioloacutegico
bull Verifica a presenccedila de formas tripomastigotas sanguiacuteneas ndash Colocar 3 gotas de sangue na lacircmina ndash Com o canto de outra espalhar o material em uma
aacuterea de aproximadamente 1 cm da lacircmina ndash Deixar secar ao ar durante 6 horas Natildeo ultrapassar 36
horas ndash Corar pelo Giemsa Deixar em repouso por 30 min ndash Lavar e examinar
Esfregaccedilo sanguiacuteneo
bull Colocar uma gota de sangue na extremidade direita da lacircmina
bull Pegar outra lacircmina segurar por cima com a matildeo direita e com uma inclinaccedilatildeo de 45deg encostar adiante da gota
bull Deixar mesma se espalhar pela superfiacutecie de contato das duas lacircminas
bull Puxar a gota espalhada ateacute o final de lacircmina
bull Secar e corar pelo Giemsa ou Leishman
Esfregaccedilo sanguiacuteneo
Microhematoacutecrito Creme leucocitaacuterio
Microhematoacutecrito
bull Colher sangue em tubo capilar
bull Centrifugar em microcentriacutefuga por 5 minutos agrave 10000 rpm
bull Avaliar o microhematocrito em microscopia oacuteptica
bull Verificar a presenccedila das formas tripomastigotas presentes no creme leucocitaacuterio
bull Se positivo realizar esfregaccedilo do creme leucocitaacuterio
bull Fixar com aacutelcool metiacutelico e corar com Gienza Analisar em microscoacutepio oacuteptico
Meacutetodo de concentraccedilatildeo
bull Meacutetodo de Strout
ndash Realizar a coleta de sangue em tubo sem anticoagulante
ndash Aguardar a retraccedilatildeo do coaacutegulo Os parasitas concentrar-se-atildeo no soro a medida que ocorrer a retraccedilatildeo do coaacutegulo
ndash O soro eacute centrifugado para anaacutelise do sedimento
Inoculaccedilatildeo em animais
bull Inoculaccedilatildeo de sangue ou creme leucocitaacuterio em camundongos jovens
bull Inoculaccedilatildeo intra-peritoneal intra-conjuntival e a via oral
bull Avaliaccedilatildeo das formas de Tcruzi
bull Teacutecnica utilizada em pesquisa
Diagnoacutestico laboratorial Fase crocircnica
bull Xenodiagnoacutestico bull Hemocultura bull Reaccedilatildeo de hemaglutinaccedilatildeo indireta bull RIFI bull ELISA bull PCR bull PaGIA bull LMCo bull Pesquisa de anticorpos antitripomastigotas vivos
Hemocultura
bull Meio LIT ndash Liver Infusion Triptose
bull Meio NNN ndash McNeal Novy e Nicolle
bull Utilizaccedilatildeo de 30ml de sangue heparinizado
bull Centrifugaccedilatildeo por 30 minutos em 3000 rpm
bull Despreza-se o plasma e o sedimento celular eacute lavado com meio LIT ( Liver Infusion Triptose) para eliminaccedilatildeo de possiacuteveis anticorpos
Hemocultura
bull Sedimento distribuiacutedo em 6 tubos com 5 ml de LIT
bull Os tubos satildeo mantidos a 28degC homogeneizados 3x semana e avaliados quinzenalmente ateacute 90 dias
bull Centrifugaccedilatildeo e avaliaccedilatildeo do sedimento de hemaacutecias
bull Leitura realizada pela observaccedilatildeo microscoacutepica de gotas do meio
bull Aumento da positividade para sangue processado imediatamente apoacutes a coleta cultivado em prazo de tempo maior (120 dias) e repeticcedilatildeo da teacutecnica por 3 vezes
Wuchereria bancrofti
Taxonomia
bull Reino Animalia
bull Filo Nematoda
bull Classe Secernentea
bull Ordem Filariidea
bull Superfamiacutelia Filarioidea
bull FamiacuteliaOnchocercidae
bull GecircnerosWuchereria
bull Espeacutecie Wbancrofti
Formas evolutivas
bull Heteroxecircnico
bull Hospedeiro vertebrado homem
bull Hospedeiro intermediaacuterio Culex quinquefasciatus
bull Formas evolutivas ndash HV verme adulto (fecircmea e macho) localizados nos
vasos e gacircnglios linfaacuteticos da regiatildeo abdominal peacutelvica (perna e escroto) mamas e braccedilo
ndash microfilaacuterias eliminadas pelas fecircmeas graacutevidas Saem dos ductos linfaacuteticos e atingem circulaccedilatildeo sanguiacutenea
ndash HI larva L1 L2 e L3 (infectante)
Culex quinquefasciatus
Morfologia
bull Macho 35 a 4 cm x 01mm com extremidade posterior enrrolada ventralmente
bull Fecircmea 7 a 10cm x 03 mm com vagina exteriorizada em uma vulva localizada proacutexima agrave extremidade anterior
bull Microfilaacuteria Presenccedila de bainha e estilete bucal na parte anterior que as diferencia de outros filariacutedeos sanguiacuteneos Possuem 250 a 300 microm e uma grande qtde de nuacutecleos
bull Larva L3 possui aproximadamente 15 a 20 mm de comprimento
Microfilaacuteria
Ciclo evolutivo
bull Fecircmea do inseto realiza o hematofagismo noturno e ingere as microfilaacuterias
bull Estocircmago do vetor microfilaacuterias perdem a bainha atravessam a parede do estocircmago e migram para os muacutesculos toraacutecicos ndash L1
bull Apoacutes 20 dias a larva estaacute na forma infectante L3 medindo aproximadamente 2mm
bull Migraccedilatildeo da larva para a proboacutescida concentrando-se no laacutebio do moquito
Microfilaacuteria Presenccedila de bainha Cauda pontuda com nuacutecleos grandes largos e bem separados Nuacutecleos caudais em fila uacutenica
Ciclo evolutivo
bull Repasto sanguiacuteneo do inseto infectado
ndash As larvas L3 migram do laacutebio do vetor para a pele do HV
ndash Migram para os vasos linfaacuteticos e tornam-se vermes adultos
ndash Apoacutes 8 meses as fecircmeas graacutevidas produzem as primeiras microfilaacuterias
Periodicidade
bull Periodicidade noturna das microfilaacuterias
ndash Durante o dia localizam-se nos capilares profundos
ndash Durante a noite vasos sanguiacuteneos perifeacutericos
ndash Pico da microfilaremia meia-noite coincidindo com o horaacuterio de hematofagismo do inseto transmissor
Patologia
bull Periacuteodo assintomaacutetico bull Fase aguda bull Processos inflamatoacuterios produzidos por larvas L4 e adultos jovens
que colonizam as vias linfaacuteticas ndash Linfadenites linfonodos inguinais epitrocleanos e axilares com
desenvolvimento de granulomas com calcificaccedilatildeo apoacutes a morte dos vermes
ndash Linfangite inflamaccedilatildeo e dilataccedilatildeo dos vasos linfaacuteticos ndash Febre mal estar ndash Funiculite filariana linfangite do cordatildeo espermaacutetico e varicocele
bull Fase crocircnica ndash Hidrocele ndash Linfedema ndash Quiluacuteria ndash Elefantiacutease
Quiluacuteria
Patologia
bull Processos obstrutivos ndash Formaccedilatildeo de novelos envolvidos por reaccedilatildeo
inflamatoacuteria e pela formaccedilatildeo de fibrose
ndash Estase e congestatildeo da linfa produzindo linfoedema tecidual
ndash Extravasamento produzindo derrame linfaacutetico ascite linfaacutetica linfuacuteria linforreacuteia linfotoacuterax linfocele etc
ndash A ruptura de vasos linfaacuteticos para o interior do sistema excretor urinaacuterio daacute origem agrave quiluacuteria
Patologia
bull Complicaccedilotildees associadas agrave filariose
ndash Elefantiacutease
bull Caracterizada por processo inflamatoacuterio e fibrose crocircnica do oacutergatildeo atingido
bull Hipertrofia da derme do tecido conjuntivo aumento exagerado do volume do oacutergatildeo com queratinizaccedilatildeo e rugosidade
bull A pele perde a elasticidade resseca e se torna sujeita a infecccedilotildees bacterianas
Patologia
bull Permanecimento na aacuterea endecircmica
bull Nuacutemero de larvas inoculadas
bull Frequecircncia das re-infecccedilotildees
bull O nuacutemero de acasalamento dos vermes e suas localizaccedilotildees anatocircmicas
bull A sensibilizaccedilatildeo do organismo e a intensidade das reaccedilotildees inflamatoacuterias do paciente
bull As infecccedilotildees bacterianas associadas
Diagnoacutestico
bull Pesquisa de microfilaacuterias no sangue perifeacuterico ndash 20 40 ou 60 microL- de preferecircncia entre as 10 h da noite e 4h da manhatilde
ndash Gota espessa Coloraccedilatildeo de Giemsa
ndash Meacutetodos de concentraccedilatildeo Filtraccedilatildeo em membrana de policarbonato milipore ou nucleopore
ndash Meacutetodo de Knott
bull Na fase crocircnica as microfilaacuterias raramente satildeo detectadas no sangue perifeacuterico
Gota espessa
bull Possibilita a visualizaccedilatildeo da bainha fato que difere a microfilaria de W bancrofti de outro filariacutedeos sanguiacuteneos
bull Apresenta um baixo custo em comparaccedilatildeo com outras mais avanccediladas como a filtraccedilatildeo de sangue em membrana de policarbonato
bull Possui baixa sensibilidade natildeo indicada em situaccedilotildees em que os parasitados se mostram com baixa microfilaremia ou amicrofilarecircmicos
Concentraccedilatildeo
bull Baseia-se na passagem de sangue venoso atraveacutes de uma membrana (Milipore ou Nuclepore) de diacircmetro de 13 a 25 mm e poros de 5 ou 3 μm
bull O material retido na membrana sendo fixado corado e observado ao microscoacutepio
bull Essa teacutecnica assim como a de Knott permite a identificaccedilatildeo de indiviacuteduos com baixiacutessimas parasitemias (quantidade de microfilarias natildeo detectaacuteveis pela teacutecnica de gota espessa)
Teacutecnica de Knott
bull Retirar 2 ml de sangue total por punccedilatildeo venosa e colocar imediatamente em um tubo contendo 10 ml de formol a 2
bull Fechar o tubo e misture completamente invertendo-o e agitando-o O formol hemolisa as hemaacutecias mata fixa e distende as microfilaacuterias
bull Centrifugar o sangue a 1500 rpm por 5 minutos
bull Decantar o sobrenadante
Teacutecnica de Knott
bull Retirar o sedimento com uma pipeta Pasteur e espalhar a gota espessa sobre uma lacircmina
bull Deixar secar bem e corar com Giemsa
bull Examinar com objetiva de imersatildeo
bull Esta teacutecnica possibilita que o exame microscoacutepico laboratorial seja realizado vaacuterios dias apoacutes a coleta de material realizada no campo
Exames de imagem
bull Ultranossografia
ndash Possibilidade de visualizar os movimentos de vermes adultos vivos de W bancrofti em vaso linfaacutetico especificamente em vasos intraescrotais do cordatildeo espermaacutetico
ndash O movimento ativo e ininterrupto dos vermes adultos durante as 24 horas do dia eacute denominado sinal da ldquodanccedila das filaacuteriasrdquo
Diagnoacutestico soroloacutegico
bull Teste imunocromatograacutefico desenvolvido pelo ICT Diagnostic - ICT card
ndash Teste qualilativo
ndash Cartatildeo possui ac de antifilaacuteria e o controle eacute formado por ac anti Ig G humano
Plasmodium spp
Taxonomia
bull Reino Protozoa
bull FiloApicomplexa
bull Classe Sporozoea
bull Ordem Hemosporidiida
bull Famiacutelia Plasmodiidae
bull Gecircneros Plasmodium
bull Espeacutecie Pfalciparum Pvivax Povale e Pmalariae
Plasmodium
bull Ciclo bioloacutegico Hospedeiro vertebrado e invertebrado
bull Hospedeiro invertebrado ndash Vetor
ndash Fecircmeas hematoacutefagas do gecircnero Anopheles
ndash Brasil Anopheles (N)darlingi A (N) aquasalis A (N) albitarsis A (K) cruzii e A (K) bellator
ndash Possuem haacutebito noturno penetrando nas casas no crespuacutesculo saindo ao amanhecer
Plasmodium
bull Hospedeiro vertebrado homem
bull Transmissatildeo
ndash Vetor
ndash Transfusatildeo de sangue
ndash Compartilhamento de seringas
ndash Acidente com agulhas
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
bull Ciclo preacute-eritrociacutetico
ndash Forma inoculada esporozoiacutetos
ndash A fecircmea do anofelino infectado inocula no homem as formas infectantes localizadas na saliva
ndash Os esporozoiacutetas permancem na circulaccedilatildeo por aproximadamente uma hora
ndash Invadem os hepatoacutecitos e se diferenciam em trofozoiacutetas (criptozoiacuteto)
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
ndash Esquizogonia e formaccedilatildeo de esquizontes
ndash Divisatildeo nuclear e liberaccedilatildeo de merozoiacutetos
ndash Aproximadamente 10000 merozoiacutetos por hepatoacutecito
ndash Rompimento do hepatoacutecito e liberaccedilatildeo de merozoiacutetos na circulaccedilatildeo
ndash Duraccedilatildeo do ciclo aprox 1 a 2 semanas
Ciclo evolutivo
bull PVivax e Povale
ndash Alguns esporozoiacutetos geneticamente diferentes ficam na forma latente nos hepatoacutecitos permanecendo muitos meses Satildeo classificados como hipnozoiacuteto
ndash Satildeo responsaacuteveis pelas recaiacutedas tardias e formas de malaacuteria com periacuteodo de encubaccedilatildeo longo ndash 6 a 9 meses
FASE HEPAacuteTICA OU EXOERITROCIacuteTICA
Hepatoacutecito
FIacuteGADO
Invasatildeo do hepatoacutecito
Reproduccedilatildeo Assexuada
Esporozoiacutetos Lise dos hepatoacutecitos
Liberaccedilatildeo dos protozoaacuterios na corrente sanguumliacutenea
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
bull Ciclo eritrociacutetico
ndash Os merozoiacutetos invadem as hemaacutecias
ndash Diferenciaccedilatildeo em trofozoiacutetos
ndash Esquizogonia esquizonte
ndash Produccedilatildeo de merozoiacutetos e rompimento da hemaacutecia
ndash Merozoiacutetos invasatildeo de novas hemaacutecias
ndash Apoacutes algumas geraccedilotildees os merozoiacutetos natildeo mais se dividem e se diferenciam em gametoacutecitos ndash micro e macrogametoacutecito
FASE ERITROCIacuteTICA
Hepatoacutecito destruiacutedo pelos protozoaacuterios
Penetraccedilatildeo dos protozoaacuterios
Reproduccedilatildeo assexuada
Protozoaacuterios destroem as hemaacutecias
Diferenciaccedilatildeo em gametoacutecitos
Fecircmeas de Anopheles sugam hemaacutecias com gametoacutecitos
Ciclo no hospedeiro invertebrado
Ocorre nas hemaacutecias ou Eritroacutecitos
nas hemaacutecias
Protozoaacuterio no interior da hemaacutecia
Hemaacutecia com gametoacutecito
T trofozoiacuteto Em esquizonte com merozoiacuteto
Fase eritrociacutetica
bull Ciclo sanguiacuteneo ndash Pfalciparum P vivax e Povale 48 horas
ndash Pmalariae 72 horas
ndash Fonte de nutriccedilatildeo do Plasmodium no ciclo sanguiacuteneo hemoglobina
ndash Produccedilatildeo do pigmento malaacuterico hemozoiacutena bull Granulaccedilotildees de Schuffner Plasmodium vivax
bull Granulaccedilotildees de Maurer P falciparum
bull Granulaccedilotildees de Ziemann P malariae
ndash Fagocitose pelas ceacutelulas de Kuppffer e macroacutefagos do baccedilo
Trofozoiacutetos Pfalciparum
Trofozoiacutetos Pfalciparum
Esquizonte ndash P falciparum
Raros no sangue perifeacuterico Possuem 2 a 24 merozoiacutetos
Ocupam 23 do gloacutebulo vermelho
Gametoacutecitos Pfalciparum
Ciclo evolutivo Pvivax
Esquizonte ndash P vivax
Satildeo grandes e ameboacuteides Cromatina organizada em duas ou mais massas
Possuem 2 a 24 merozoiacutetos com pontos de cromatina
Gametoacutecito ndash Pvivax
Macrogametoacutecitos satildeo redondos ou ovais e ocupam toda ceacutelula hospedeira O citoplasma eacute geralmente corado de azul mais escuro e conteacutem pigmento marrom Microgametoacutecitos satildeo geralmente do tamanho de um RBC natildeo infectados com citoplasma corados de azul paacutelido rosa ou cinza
Trofozoiacutetos - P malariae
Esquizontes ndash P malariae
Aproximadamente 6 a 12 merozoiacutetos com arranjo de rosetas
Gametoacutecitos ndash P malariae
Ciclo evolutivo ndash HI
bull Ingestatildeo de hemaacutecias contendo gametoacutecitos durante o repasto sanguiacuteneo da fecircmea do anofelino
bull No intestino meacutedio do vetor gametogecircnese ndash Macrogametoacutecito ndash macrogameta feminino ndash Microgametoacutecito o processo de exflagelaccedilatildeo daacute
origem a 8 microgametas masculinos ndash Produccedilatildeo de ovo ou zigoto ndash O ovo encista na camada epitelial do intestino meacutedio
oocisto ndash Esporogonia liberaccedilatildeo de esporozoiacutetos
Ciclo evolutivo ndash HInvertebrado
ndash Os esporozoiacutetos satildeo transportados pelo hemolinfa ateacute as glacircndulas salivares do vetor ateacute atingirem o ducto salivar
bull Inoculaccedilatildeo no hospedeiro vertebrado atraveacutes da picada do inseto
Hemaacutecia com gametoacutecito
Fecircmeas de Anopheles sugam hemaacutecias com gametoacutecitos
CICLO NO INVERTEBRADO
No tubo digestivo
Zigoto
Penetraccedilatildeo na parede do tubo
digestivo
Migraccedilatildeo para as glacircndulas salivares
Desenvolvimento
Mosquito infectado
Diagnoacutestico
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado e espesso corado pelo Giemsa
bull Sangue colhido sem anticoagulante para melhor fixaccedilatildeo em lacircmina
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo espesso eacute mais eficiente para detecccedilatildeo da infecccedilatildeo
bull Esfregaccedilo delgado eacute mais eficiente para diferenciaccedilatildeo morfoloacutegica das espeacutecies
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo semiquantitativo
ndash Exame de 100 campos microscoacutepicos com resultado expresso pelo sistema de cruzes
Parasitos contados Nuacutemero de campos
microscoacutepicos cruzes
40 a 60 100 +2
1 1 +
2-20 1 ++
21-200 1 +++
+ 200 1 ++++
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo quantitativo derivado de anaacutelise semiquantitativa
Contagem de parasitos por campo
Cruzes Parasitos por mm3
40 a 60100 +2 200-300
1 + 301-500
2-20 ++ 501 - 10000
21-200 +++ 10001 ndash 100000
+ 200 ++++ 100000 ou mais
Diagnoacutestico
bull P falciparum
ndash Parte do ciclo celular aderido ao endoteacutelio capilar Encontro somente de trofozoitos e gametoacutecitos no sangue perifeacuterico
ndash Raramente os esquizontes satildeo encontrados no sangue perifeacuterico
Diagnoacutestico ndash Pvivax ndash Encontro de todas as formas de desenvolvimento ndash
trofozoiacuteto jovem maduro esquizontes e gametoacutecitos
ndash Os trofozoiacutetos maduros tecircm geralmente um aspecto irregular com extensotildees ameboacuteides em seu citoplasma
Diagnoacutestico ndash Pvivax
ndash Os gametoacutecitos femininos coram-se mais intensamente que os masculinos e apresentam nuacutecleo mais compacto geralmente em localizaccedilatildeo perifeacuterica
ndash O pigmento malaacuterico geralmente eacute abundante
Diagnoacutestico - Pmalariae
bull Realizado por meio de caracteriacutesticas morfoloacutegicas do parasito
ndash Verificaccedilatildeo em esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado
ndash Posiccedilatildeo equatorial do parasito
ndash Desenvolvimento sem deformaccedilatildeo do eritroacutecito
Diagnoacutestico
bull QBC ndash Teacutecnica que combina concentraccedilatildeo dos parasitos
pela centrifugaccedilatildeo do sangue em em microhematoacutecrito e a coloraccedilatildeo dos aacutecidos nucleacuteicos do parasito pelo fluorcromo laranja de acridina
ndash Utilizaccedilatildeo de tubos especiais e microscopia epifluorescente
ndash Teste raacutepido
ndash Alta sensibilidade
Diagnoacutestico
bull ParaSight-F ( Becton amp Dickinson)
ndash Teste raacutepido para captura da proteiacutena rica em histidina 2 de Pfalciparum( PfHRP2) e enzimas conservadas de 4 espeacutecies de plasmoacutedio (DHL e aldolase
ndash Utilizaccedilatildeo de fita de nitrocelulose contendo ac monoclonal
ndash Lise de uma gota de sangue
ndash A reaccedilatildeo eacute revelada com adiccedilatildeo de ac policlonal anti-HRP2 conjugado com lipossomas contendo corante
Diagnoacutestico
bull PCR
ndash Sensibilidade e especificidade maior do que o esfregaccedilo sanguiacuteneo
Trypanosoma cruzi
bull Formas evolutivas
bull H invertebrado
ndash Epimastigota
ndash Tripomastigota metaciacuteclica
bull H vertebrado
ndash Amastigota ndash intracelulares (ceacutelulas musculares ceacutelulas de Schwann fibroblastos etc)
ndash Tripomastigota sanguiacutenea
Trypanosoma cruzi
bull Ciclo evolutivo ndash O triatomiacuteneo pica o homem e durante o repasto
sanguiacuteneo defeca e urina na pele
ndash Enquanto se alimenta libera no local substacircncias anesteacutesicas que o permitem promover um repasto demorado
ndash Prurido local e entrada das formas tripomastigotas metaciacuteclicas
ndash Fagocitose pelos macroacutefagos teciduais
ndash Transformaccedilatildeo das formas tripomastigotas em amastigotas intracelulares
Trypanosoma cruzi
ndash Divisatildeo das formas amastigotas diferenciaccedilatildeo em tripomastigotas rompimento do macroacutefago e liberaccedilatildeo de novas formas no interstiacutecio
ndash As formas tripomastigotas caem na corrente sanguiacutenea atingindo outras ceacutelulas
ndash Os triatomiacuteneos se infectam ao ingerir formas tripomastigotas sanguiacuteneas do hospedeiro vertebrado
Trypanosoma cruzi
ndash Estocircmago do vetor tripomastigotas se diferenciam em epimastigotas
ndash Intestino do vetor divisatildeo de epimastigotas por fissatildeo binaacuteria simples
ndash Porccedilatildeo final do tubo digestivo epimastigotas se diferenciam em tripomastigota metaciacuteclica forma infectante para o homem e entatildeo satildeo liberados nas fezes e urina do vetor
Tripomastigota
Cinetoplasto posterior ao nuacutecleo
cinetoplasto
Tripomastigota
Epimastigota
Cinetoplasto anterior ao nuacutecleo
Amastigota
Amastigotas Amastigotas e tripomastigotas
Monoacutecito parasitado com as formas amastigotas
Doenccedila de Chagas
bull Trypanosoma cruzi (Chagas 1909)
Diagnoacutestico laboratorial Fase aguda
bull Alta parasitemia
bull Pesquisa do parasito
ndash Exame de sangue a fresco
ndash Exame de sangue em gota espessa
ndash Esfregaccedilo sanguiacuteneo corado pelo Giemsa
ndash Microhematoacutecrito
ndash Meacutetodos de concentraccedilatildeo
ndash Inoculaccedilatildeo em aninais
Exame direto a fresco
bull Parasitas abundantes nos primeiros dias e semanas de incubaccedilatildeo
bull Colocar uma gota de sangue entre lacircmina e lamiacutenula e examinar imediatamente apoacutes a coleta para evitar a coagulaccedilatildeo
bull Para retardar a coagulaccedilatildeo adicionar uma gota de soluccedilatildeo salina
bull Analisar em microscoacutepio oacuteptico a presenccedila das formas tripomastigotas
Exame de sangue em gota espessa
bull Analisa uma maior quantidade de material bioloacutegico
bull Verifica a presenccedila de formas tripomastigotas sanguiacuteneas ndash Colocar 3 gotas de sangue na lacircmina ndash Com o canto de outra espalhar o material em uma
aacuterea de aproximadamente 1 cm da lacircmina ndash Deixar secar ao ar durante 6 horas Natildeo ultrapassar 36
horas ndash Corar pelo Giemsa Deixar em repouso por 30 min ndash Lavar e examinar
Esfregaccedilo sanguiacuteneo
bull Colocar uma gota de sangue na extremidade direita da lacircmina
bull Pegar outra lacircmina segurar por cima com a matildeo direita e com uma inclinaccedilatildeo de 45deg encostar adiante da gota
bull Deixar mesma se espalhar pela superfiacutecie de contato das duas lacircminas
bull Puxar a gota espalhada ateacute o final de lacircmina
bull Secar e corar pelo Giemsa ou Leishman
Esfregaccedilo sanguiacuteneo
Microhematoacutecrito Creme leucocitaacuterio
Microhematoacutecrito
bull Colher sangue em tubo capilar
bull Centrifugar em microcentriacutefuga por 5 minutos agrave 10000 rpm
bull Avaliar o microhematocrito em microscopia oacuteptica
bull Verificar a presenccedila das formas tripomastigotas presentes no creme leucocitaacuterio
bull Se positivo realizar esfregaccedilo do creme leucocitaacuterio
bull Fixar com aacutelcool metiacutelico e corar com Gienza Analisar em microscoacutepio oacuteptico
Meacutetodo de concentraccedilatildeo
bull Meacutetodo de Strout
ndash Realizar a coleta de sangue em tubo sem anticoagulante
ndash Aguardar a retraccedilatildeo do coaacutegulo Os parasitas concentrar-se-atildeo no soro a medida que ocorrer a retraccedilatildeo do coaacutegulo
ndash O soro eacute centrifugado para anaacutelise do sedimento
Inoculaccedilatildeo em animais
bull Inoculaccedilatildeo de sangue ou creme leucocitaacuterio em camundongos jovens
bull Inoculaccedilatildeo intra-peritoneal intra-conjuntival e a via oral
bull Avaliaccedilatildeo das formas de Tcruzi
bull Teacutecnica utilizada em pesquisa
Diagnoacutestico laboratorial Fase crocircnica
bull Xenodiagnoacutestico bull Hemocultura bull Reaccedilatildeo de hemaglutinaccedilatildeo indireta bull RIFI bull ELISA bull PCR bull PaGIA bull LMCo bull Pesquisa de anticorpos antitripomastigotas vivos
Hemocultura
bull Meio LIT ndash Liver Infusion Triptose
bull Meio NNN ndash McNeal Novy e Nicolle
bull Utilizaccedilatildeo de 30ml de sangue heparinizado
bull Centrifugaccedilatildeo por 30 minutos em 3000 rpm
bull Despreza-se o plasma e o sedimento celular eacute lavado com meio LIT ( Liver Infusion Triptose) para eliminaccedilatildeo de possiacuteveis anticorpos
Hemocultura
bull Sedimento distribuiacutedo em 6 tubos com 5 ml de LIT
bull Os tubos satildeo mantidos a 28degC homogeneizados 3x semana e avaliados quinzenalmente ateacute 90 dias
bull Centrifugaccedilatildeo e avaliaccedilatildeo do sedimento de hemaacutecias
bull Leitura realizada pela observaccedilatildeo microscoacutepica de gotas do meio
bull Aumento da positividade para sangue processado imediatamente apoacutes a coleta cultivado em prazo de tempo maior (120 dias) e repeticcedilatildeo da teacutecnica por 3 vezes
Wuchereria bancrofti
Taxonomia
bull Reino Animalia
bull Filo Nematoda
bull Classe Secernentea
bull Ordem Filariidea
bull Superfamiacutelia Filarioidea
bull FamiacuteliaOnchocercidae
bull GecircnerosWuchereria
bull Espeacutecie Wbancrofti
Formas evolutivas
bull Heteroxecircnico
bull Hospedeiro vertebrado homem
bull Hospedeiro intermediaacuterio Culex quinquefasciatus
bull Formas evolutivas ndash HV verme adulto (fecircmea e macho) localizados nos
vasos e gacircnglios linfaacuteticos da regiatildeo abdominal peacutelvica (perna e escroto) mamas e braccedilo
ndash microfilaacuterias eliminadas pelas fecircmeas graacutevidas Saem dos ductos linfaacuteticos e atingem circulaccedilatildeo sanguiacutenea
ndash HI larva L1 L2 e L3 (infectante)
Culex quinquefasciatus
Morfologia
bull Macho 35 a 4 cm x 01mm com extremidade posterior enrrolada ventralmente
bull Fecircmea 7 a 10cm x 03 mm com vagina exteriorizada em uma vulva localizada proacutexima agrave extremidade anterior
bull Microfilaacuteria Presenccedila de bainha e estilete bucal na parte anterior que as diferencia de outros filariacutedeos sanguiacuteneos Possuem 250 a 300 microm e uma grande qtde de nuacutecleos
bull Larva L3 possui aproximadamente 15 a 20 mm de comprimento
Microfilaacuteria
Ciclo evolutivo
bull Fecircmea do inseto realiza o hematofagismo noturno e ingere as microfilaacuterias
bull Estocircmago do vetor microfilaacuterias perdem a bainha atravessam a parede do estocircmago e migram para os muacutesculos toraacutecicos ndash L1
bull Apoacutes 20 dias a larva estaacute na forma infectante L3 medindo aproximadamente 2mm
bull Migraccedilatildeo da larva para a proboacutescida concentrando-se no laacutebio do moquito
Microfilaacuteria Presenccedila de bainha Cauda pontuda com nuacutecleos grandes largos e bem separados Nuacutecleos caudais em fila uacutenica
Ciclo evolutivo
bull Repasto sanguiacuteneo do inseto infectado
ndash As larvas L3 migram do laacutebio do vetor para a pele do HV
ndash Migram para os vasos linfaacuteticos e tornam-se vermes adultos
ndash Apoacutes 8 meses as fecircmeas graacutevidas produzem as primeiras microfilaacuterias
Periodicidade
bull Periodicidade noturna das microfilaacuterias
ndash Durante o dia localizam-se nos capilares profundos
ndash Durante a noite vasos sanguiacuteneos perifeacutericos
ndash Pico da microfilaremia meia-noite coincidindo com o horaacuterio de hematofagismo do inseto transmissor
Patologia
bull Periacuteodo assintomaacutetico bull Fase aguda bull Processos inflamatoacuterios produzidos por larvas L4 e adultos jovens
que colonizam as vias linfaacuteticas ndash Linfadenites linfonodos inguinais epitrocleanos e axilares com
desenvolvimento de granulomas com calcificaccedilatildeo apoacutes a morte dos vermes
ndash Linfangite inflamaccedilatildeo e dilataccedilatildeo dos vasos linfaacuteticos ndash Febre mal estar ndash Funiculite filariana linfangite do cordatildeo espermaacutetico e varicocele
bull Fase crocircnica ndash Hidrocele ndash Linfedema ndash Quiluacuteria ndash Elefantiacutease
Quiluacuteria
Patologia
bull Processos obstrutivos ndash Formaccedilatildeo de novelos envolvidos por reaccedilatildeo
inflamatoacuteria e pela formaccedilatildeo de fibrose
ndash Estase e congestatildeo da linfa produzindo linfoedema tecidual
ndash Extravasamento produzindo derrame linfaacutetico ascite linfaacutetica linfuacuteria linforreacuteia linfotoacuterax linfocele etc
ndash A ruptura de vasos linfaacuteticos para o interior do sistema excretor urinaacuterio daacute origem agrave quiluacuteria
Patologia
bull Complicaccedilotildees associadas agrave filariose
ndash Elefantiacutease
bull Caracterizada por processo inflamatoacuterio e fibrose crocircnica do oacutergatildeo atingido
bull Hipertrofia da derme do tecido conjuntivo aumento exagerado do volume do oacutergatildeo com queratinizaccedilatildeo e rugosidade
bull A pele perde a elasticidade resseca e se torna sujeita a infecccedilotildees bacterianas
Patologia
bull Permanecimento na aacuterea endecircmica
bull Nuacutemero de larvas inoculadas
bull Frequecircncia das re-infecccedilotildees
bull O nuacutemero de acasalamento dos vermes e suas localizaccedilotildees anatocircmicas
bull A sensibilizaccedilatildeo do organismo e a intensidade das reaccedilotildees inflamatoacuterias do paciente
bull As infecccedilotildees bacterianas associadas
Diagnoacutestico
bull Pesquisa de microfilaacuterias no sangue perifeacuterico ndash 20 40 ou 60 microL- de preferecircncia entre as 10 h da noite e 4h da manhatilde
ndash Gota espessa Coloraccedilatildeo de Giemsa
ndash Meacutetodos de concentraccedilatildeo Filtraccedilatildeo em membrana de policarbonato milipore ou nucleopore
ndash Meacutetodo de Knott
bull Na fase crocircnica as microfilaacuterias raramente satildeo detectadas no sangue perifeacuterico
Gota espessa
bull Possibilita a visualizaccedilatildeo da bainha fato que difere a microfilaria de W bancrofti de outro filariacutedeos sanguiacuteneos
bull Apresenta um baixo custo em comparaccedilatildeo com outras mais avanccediladas como a filtraccedilatildeo de sangue em membrana de policarbonato
bull Possui baixa sensibilidade natildeo indicada em situaccedilotildees em que os parasitados se mostram com baixa microfilaremia ou amicrofilarecircmicos
Concentraccedilatildeo
bull Baseia-se na passagem de sangue venoso atraveacutes de uma membrana (Milipore ou Nuclepore) de diacircmetro de 13 a 25 mm e poros de 5 ou 3 μm
bull O material retido na membrana sendo fixado corado e observado ao microscoacutepio
bull Essa teacutecnica assim como a de Knott permite a identificaccedilatildeo de indiviacuteduos com baixiacutessimas parasitemias (quantidade de microfilarias natildeo detectaacuteveis pela teacutecnica de gota espessa)
Teacutecnica de Knott
bull Retirar 2 ml de sangue total por punccedilatildeo venosa e colocar imediatamente em um tubo contendo 10 ml de formol a 2
bull Fechar o tubo e misture completamente invertendo-o e agitando-o O formol hemolisa as hemaacutecias mata fixa e distende as microfilaacuterias
bull Centrifugar o sangue a 1500 rpm por 5 minutos
bull Decantar o sobrenadante
Teacutecnica de Knott
bull Retirar o sedimento com uma pipeta Pasteur e espalhar a gota espessa sobre uma lacircmina
bull Deixar secar bem e corar com Giemsa
bull Examinar com objetiva de imersatildeo
bull Esta teacutecnica possibilita que o exame microscoacutepico laboratorial seja realizado vaacuterios dias apoacutes a coleta de material realizada no campo
Exames de imagem
bull Ultranossografia
ndash Possibilidade de visualizar os movimentos de vermes adultos vivos de W bancrofti em vaso linfaacutetico especificamente em vasos intraescrotais do cordatildeo espermaacutetico
ndash O movimento ativo e ininterrupto dos vermes adultos durante as 24 horas do dia eacute denominado sinal da ldquodanccedila das filaacuteriasrdquo
Diagnoacutestico soroloacutegico
bull Teste imunocromatograacutefico desenvolvido pelo ICT Diagnostic - ICT card
ndash Teste qualilativo
ndash Cartatildeo possui ac de antifilaacuteria e o controle eacute formado por ac anti Ig G humano
Plasmodium spp
Taxonomia
bull Reino Protozoa
bull FiloApicomplexa
bull Classe Sporozoea
bull Ordem Hemosporidiida
bull Famiacutelia Plasmodiidae
bull Gecircneros Plasmodium
bull Espeacutecie Pfalciparum Pvivax Povale e Pmalariae
Plasmodium
bull Ciclo bioloacutegico Hospedeiro vertebrado e invertebrado
bull Hospedeiro invertebrado ndash Vetor
ndash Fecircmeas hematoacutefagas do gecircnero Anopheles
ndash Brasil Anopheles (N)darlingi A (N) aquasalis A (N) albitarsis A (K) cruzii e A (K) bellator
ndash Possuem haacutebito noturno penetrando nas casas no crespuacutesculo saindo ao amanhecer
Plasmodium
bull Hospedeiro vertebrado homem
bull Transmissatildeo
ndash Vetor
ndash Transfusatildeo de sangue
ndash Compartilhamento de seringas
ndash Acidente com agulhas
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
bull Ciclo preacute-eritrociacutetico
ndash Forma inoculada esporozoiacutetos
ndash A fecircmea do anofelino infectado inocula no homem as formas infectantes localizadas na saliva
ndash Os esporozoiacutetas permancem na circulaccedilatildeo por aproximadamente uma hora
ndash Invadem os hepatoacutecitos e se diferenciam em trofozoiacutetas (criptozoiacuteto)
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
ndash Esquizogonia e formaccedilatildeo de esquizontes
ndash Divisatildeo nuclear e liberaccedilatildeo de merozoiacutetos
ndash Aproximadamente 10000 merozoiacutetos por hepatoacutecito
ndash Rompimento do hepatoacutecito e liberaccedilatildeo de merozoiacutetos na circulaccedilatildeo
ndash Duraccedilatildeo do ciclo aprox 1 a 2 semanas
Ciclo evolutivo
bull PVivax e Povale
ndash Alguns esporozoiacutetos geneticamente diferentes ficam na forma latente nos hepatoacutecitos permanecendo muitos meses Satildeo classificados como hipnozoiacuteto
ndash Satildeo responsaacuteveis pelas recaiacutedas tardias e formas de malaacuteria com periacuteodo de encubaccedilatildeo longo ndash 6 a 9 meses
FASE HEPAacuteTICA OU EXOERITROCIacuteTICA
Hepatoacutecito
FIacuteGADO
Invasatildeo do hepatoacutecito
Reproduccedilatildeo Assexuada
Esporozoiacutetos Lise dos hepatoacutecitos
Liberaccedilatildeo dos protozoaacuterios na corrente sanguumliacutenea
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
bull Ciclo eritrociacutetico
ndash Os merozoiacutetos invadem as hemaacutecias
ndash Diferenciaccedilatildeo em trofozoiacutetos
ndash Esquizogonia esquizonte
ndash Produccedilatildeo de merozoiacutetos e rompimento da hemaacutecia
ndash Merozoiacutetos invasatildeo de novas hemaacutecias
ndash Apoacutes algumas geraccedilotildees os merozoiacutetos natildeo mais se dividem e se diferenciam em gametoacutecitos ndash micro e macrogametoacutecito
FASE ERITROCIacuteTICA
Hepatoacutecito destruiacutedo pelos protozoaacuterios
Penetraccedilatildeo dos protozoaacuterios
Reproduccedilatildeo assexuada
Protozoaacuterios destroem as hemaacutecias
Diferenciaccedilatildeo em gametoacutecitos
Fecircmeas de Anopheles sugam hemaacutecias com gametoacutecitos
Ciclo no hospedeiro invertebrado
Ocorre nas hemaacutecias ou Eritroacutecitos
nas hemaacutecias
Protozoaacuterio no interior da hemaacutecia
Hemaacutecia com gametoacutecito
T trofozoiacuteto Em esquizonte com merozoiacuteto
Fase eritrociacutetica
bull Ciclo sanguiacuteneo ndash Pfalciparum P vivax e Povale 48 horas
ndash Pmalariae 72 horas
ndash Fonte de nutriccedilatildeo do Plasmodium no ciclo sanguiacuteneo hemoglobina
ndash Produccedilatildeo do pigmento malaacuterico hemozoiacutena bull Granulaccedilotildees de Schuffner Plasmodium vivax
bull Granulaccedilotildees de Maurer P falciparum
bull Granulaccedilotildees de Ziemann P malariae
ndash Fagocitose pelas ceacutelulas de Kuppffer e macroacutefagos do baccedilo
Trofozoiacutetos Pfalciparum
Trofozoiacutetos Pfalciparum
Esquizonte ndash P falciparum
Raros no sangue perifeacuterico Possuem 2 a 24 merozoiacutetos
Ocupam 23 do gloacutebulo vermelho
Gametoacutecitos Pfalciparum
Ciclo evolutivo Pvivax
Esquizonte ndash P vivax
Satildeo grandes e ameboacuteides Cromatina organizada em duas ou mais massas
Possuem 2 a 24 merozoiacutetos com pontos de cromatina
Gametoacutecito ndash Pvivax
Macrogametoacutecitos satildeo redondos ou ovais e ocupam toda ceacutelula hospedeira O citoplasma eacute geralmente corado de azul mais escuro e conteacutem pigmento marrom Microgametoacutecitos satildeo geralmente do tamanho de um RBC natildeo infectados com citoplasma corados de azul paacutelido rosa ou cinza
Trofozoiacutetos - P malariae
Esquizontes ndash P malariae
Aproximadamente 6 a 12 merozoiacutetos com arranjo de rosetas
Gametoacutecitos ndash P malariae
Ciclo evolutivo ndash HI
bull Ingestatildeo de hemaacutecias contendo gametoacutecitos durante o repasto sanguiacuteneo da fecircmea do anofelino
bull No intestino meacutedio do vetor gametogecircnese ndash Macrogametoacutecito ndash macrogameta feminino ndash Microgametoacutecito o processo de exflagelaccedilatildeo daacute
origem a 8 microgametas masculinos ndash Produccedilatildeo de ovo ou zigoto ndash O ovo encista na camada epitelial do intestino meacutedio
oocisto ndash Esporogonia liberaccedilatildeo de esporozoiacutetos
Ciclo evolutivo ndash HInvertebrado
ndash Os esporozoiacutetos satildeo transportados pelo hemolinfa ateacute as glacircndulas salivares do vetor ateacute atingirem o ducto salivar
bull Inoculaccedilatildeo no hospedeiro vertebrado atraveacutes da picada do inseto
Hemaacutecia com gametoacutecito
Fecircmeas de Anopheles sugam hemaacutecias com gametoacutecitos
CICLO NO INVERTEBRADO
No tubo digestivo
Zigoto
Penetraccedilatildeo na parede do tubo
digestivo
Migraccedilatildeo para as glacircndulas salivares
Desenvolvimento
Mosquito infectado
Diagnoacutestico
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado e espesso corado pelo Giemsa
bull Sangue colhido sem anticoagulante para melhor fixaccedilatildeo em lacircmina
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo espesso eacute mais eficiente para detecccedilatildeo da infecccedilatildeo
bull Esfregaccedilo delgado eacute mais eficiente para diferenciaccedilatildeo morfoloacutegica das espeacutecies
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo semiquantitativo
ndash Exame de 100 campos microscoacutepicos com resultado expresso pelo sistema de cruzes
Parasitos contados Nuacutemero de campos
microscoacutepicos cruzes
40 a 60 100 +2
1 1 +
2-20 1 ++
21-200 1 +++
+ 200 1 ++++
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo quantitativo derivado de anaacutelise semiquantitativa
Contagem de parasitos por campo
Cruzes Parasitos por mm3
40 a 60100 +2 200-300
1 + 301-500
2-20 ++ 501 - 10000
21-200 +++ 10001 ndash 100000
+ 200 ++++ 100000 ou mais
Diagnoacutestico
bull P falciparum
ndash Parte do ciclo celular aderido ao endoteacutelio capilar Encontro somente de trofozoitos e gametoacutecitos no sangue perifeacuterico
ndash Raramente os esquizontes satildeo encontrados no sangue perifeacuterico
Diagnoacutestico ndash Pvivax ndash Encontro de todas as formas de desenvolvimento ndash
trofozoiacuteto jovem maduro esquizontes e gametoacutecitos
ndash Os trofozoiacutetos maduros tecircm geralmente um aspecto irregular com extensotildees ameboacuteides em seu citoplasma
Diagnoacutestico ndash Pvivax
ndash Os gametoacutecitos femininos coram-se mais intensamente que os masculinos e apresentam nuacutecleo mais compacto geralmente em localizaccedilatildeo perifeacuterica
ndash O pigmento malaacuterico geralmente eacute abundante
Diagnoacutestico - Pmalariae
bull Realizado por meio de caracteriacutesticas morfoloacutegicas do parasito
ndash Verificaccedilatildeo em esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado
ndash Posiccedilatildeo equatorial do parasito
ndash Desenvolvimento sem deformaccedilatildeo do eritroacutecito
Diagnoacutestico
bull QBC ndash Teacutecnica que combina concentraccedilatildeo dos parasitos
pela centrifugaccedilatildeo do sangue em em microhematoacutecrito e a coloraccedilatildeo dos aacutecidos nucleacuteicos do parasito pelo fluorcromo laranja de acridina
ndash Utilizaccedilatildeo de tubos especiais e microscopia epifluorescente
ndash Teste raacutepido
ndash Alta sensibilidade
Diagnoacutestico
bull ParaSight-F ( Becton amp Dickinson)
ndash Teste raacutepido para captura da proteiacutena rica em histidina 2 de Pfalciparum( PfHRP2) e enzimas conservadas de 4 espeacutecies de plasmoacutedio (DHL e aldolase
ndash Utilizaccedilatildeo de fita de nitrocelulose contendo ac monoclonal
ndash Lise de uma gota de sangue
ndash A reaccedilatildeo eacute revelada com adiccedilatildeo de ac policlonal anti-HRP2 conjugado com lipossomas contendo corante
Diagnoacutestico
bull PCR
ndash Sensibilidade e especificidade maior do que o esfregaccedilo sanguiacuteneo
Trypanosoma cruzi
bull Ciclo evolutivo ndash O triatomiacuteneo pica o homem e durante o repasto
sanguiacuteneo defeca e urina na pele
ndash Enquanto se alimenta libera no local substacircncias anesteacutesicas que o permitem promover um repasto demorado
ndash Prurido local e entrada das formas tripomastigotas metaciacuteclicas
ndash Fagocitose pelos macroacutefagos teciduais
ndash Transformaccedilatildeo das formas tripomastigotas em amastigotas intracelulares
Trypanosoma cruzi
ndash Divisatildeo das formas amastigotas diferenciaccedilatildeo em tripomastigotas rompimento do macroacutefago e liberaccedilatildeo de novas formas no interstiacutecio
ndash As formas tripomastigotas caem na corrente sanguiacutenea atingindo outras ceacutelulas
ndash Os triatomiacuteneos se infectam ao ingerir formas tripomastigotas sanguiacuteneas do hospedeiro vertebrado
Trypanosoma cruzi
ndash Estocircmago do vetor tripomastigotas se diferenciam em epimastigotas
ndash Intestino do vetor divisatildeo de epimastigotas por fissatildeo binaacuteria simples
ndash Porccedilatildeo final do tubo digestivo epimastigotas se diferenciam em tripomastigota metaciacuteclica forma infectante para o homem e entatildeo satildeo liberados nas fezes e urina do vetor
Tripomastigota
Cinetoplasto posterior ao nuacutecleo
cinetoplasto
Tripomastigota
Epimastigota
Cinetoplasto anterior ao nuacutecleo
Amastigota
Amastigotas Amastigotas e tripomastigotas
Monoacutecito parasitado com as formas amastigotas
Doenccedila de Chagas
bull Trypanosoma cruzi (Chagas 1909)
Diagnoacutestico laboratorial Fase aguda
bull Alta parasitemia
bull Pesquisa do parasito
ndash Exame de sangue a fresco
ndash Exame de sangue em gota espessa
ndash Esfregaccedilo sanguiacuteneo corado pelo Giemsa
ndash Microhematoacutecrito
ndash Meacutetodos de concentraccedilatildeo
ndash Inoculaccedilatildeo em aninais
Exame direto a fresco
bull Parasitas abundantes nos primeiros dias e semanas de incubaccedilatildeo
bull Colocar uma gota de sangue entre lacircmina e lamiacutenula e examinar imediatamente apoacutes a coleta para evitar a coagulaccedilatildeo
bull Para retardar a coagulaccedilatildeo adicionar uma gota de soluccedilatildeo salina
bull Analisar em microscoacutepio oacuteptico a presenccedila das formas tripomastigotas
Exame de sangue em gota espessa
bull Analisa uma maior quantidade de material bioloacutegico
bull Verifica a presenccedila de formas tripomastigotas sanguiacuteneas ndash Colocar 3 gotas de sangue na lacircmina ndash Com o canto de outra espalhar o material em uma
aacuterea de aproximadamente 1 cm da lacircmina ndash Deixar secar ao ar durante 6 horas Natildeo ultrapassar 36
horas ndash Corar pelo Giemsa Deixar em repouso por 30 min ndash Lavar e examinar
Esfregaccedilo sanguiacuteneo
bull Colocar uma gota de sangue na extremidade direita da lacircmina
bull Pegar outra lacircmina segurar por cima com a matildeo direita e com uma inclinaccedilatildeo de 45deg encostar adiante da gota
bull Deixar mesma se espalhar pela superfiacutecie de contato das duas lacircminas
bull Puxar a gota espalhada ateacute o final de lacircmina
bull Secar e corar pelo Giemsa ou Leishman
Esfregaccedilo sanguiacuteneo
Microhematoacutecrito Creme leucocitaacuterio
Microhematoacutecrito
bull Colher sangue em tubo capilar
bull Centrifugar em microcentriacutefuga por 5 minutos agrave 10000 rpm
bull Avaliar o microhematocrito em microscopia oacuteptica
bull Verificar a presenccedila das formas tripomastigotas presentes no creme leucocitaacuterio
bull Se positivo realizar esfregaccedilo do creme leucocitaacuterio
bull Fixar com aacutelcool metiacutelico e corar com Gienza Analisar em microscoacutepio oacuteptico
Meacutetodo de concentraccedilatildeo
bull Meacutetodo de Strout
ndash Realizar a coleta de sangue em tubo sem anticoagulante
ndash Aguardar a retraccedilatildeo do coaacutegulo Os parasitas concentrar-se-atildeo no soro a medida que ocorrer a retraccedilatildeo do coaacutegulo
ndash O soro eacute centrifugado para anaacutelise do sedimento
Inoculaccedilatildeo em animais
bull Inoculaccedilatildeo de sangue ou creme leucocitaacuterio em camundongos jovens
bull Inoculaccedilatildeo intra-peritoneal intra-conjuntival e a via oral
bull Avaliaccedilatildeo das formas de Tcruzi
bull Teacutecnica utilizada em pesquisa
Diagnoacutestico laboratorial Fase crocircnica
bull Xenodiagnoacutestico bull Hemocultura bull Reaccedilatildeo de hemaglutinaccedilatildeo indireta bull RIFI bull ELISA bull PCR bull PaGIA bull LMCo bull Pesquisa de anticorpos antitripomastigotas vivos
Hemocultura
bull Meio LIT ndash Liver Infusion Triptose
bull Meio NNN ndash McNeal Novy e Nicolle
bull Utilizaccedilatildeo de 30ml de sangue heparinizado
bull Centrifugaccedilatildeo por 30 minutos em 3000 rpm
bull Despreza-se o plasma e o sedimento celular eacute lavado com meio LIT ( Liver Infusion Triptose) para eliminaccedilatildeo de possiacuteveis anticorpos
Hemocultura
bull Sedimento distribuiacutedo em 6 tubos com 5 ml de LIT
bull Os tubos satildeo mantidos a 28degC homogeneizados 3x semana e avaliados quinzenalmente ateacute 90 dias
bull Centrifugaccedilatildeo e avaliaccedilatildeo do sedimento de hemaacutecias
bull Leitura realizada pela observaccedilatildeo microscoacutepica de gotas do meio
bull Aumento da positividade para sangue processado imediatamente apoacutes a coleta cultivado em prazo de tempo maior (120 dias) e repeticcedilatildeo da teacutecnica por 3 vezes
Wuchereria bancrofti
Taxonomia
bull Reino Animalia
bull Filo Nematoda
bull Classe Secernentea
bull Ordem Filariidea
bull Superfamiacutelia Filarioidea
bull FamiacuteliaOnchocercidae
bull GecircnerosWuchereria
bull Espeacutecie Wbancrofti
Formas evolutivas
bull Heteroxecircnico
bull Hospedeiro vertebrado homem
bull Hospedeiro intermediaacuterio Culex quinquefasciatus
bull Formas evolutivas ndash HV verme adulto (fecircmea e macho) localizados nos
vasos e gacircnglios linfaacuteticos da regiatildeo abdominal peacutelvica (perna e escroto) mamas e braccedilo
ndash microfilaacuterias eliminadas pelas fecircmeas graacutevidas Saem dos ductos linfaacuteticos e atingem circulaccedilatildeo sanguiacutenea
ndash HI larva L1 L2 e L3 (infectante)
Culex quinquefasciatus
Morfologia
bull Macho 35 a 4 cm x 01mm com extremidade posterior enrrolada ventralmente
bull Fecircmea 7 a 10cm x 03 mm com vagina exteriorizada em uma vulva localizada proacutexima agrave extremidade anterior
bull Microfilaacuteria Presenccedila de bainha e estilete bucal na parte anterior que as diferencia de outros filariacutedeos sanguiacuteneos Possuem 250 a 300 microm e uma grande qtde de nuacutecleos
bull Larva L3 possui aproximadamente 15 a 20 mm de comprimento
Microfilaacuteria
Ciclo evolutivo
bull Fecircmea do inseto realiza o hematofagismo noturno e ingere as microfilaacuterias
bull Estocircmago do vetor microfilaacuterias perdem a bainha atravessam a parede do estocircmago e migram para os muacutesculos toraacutecicos ndash L1
bull Apoacutes 20 dias a larva estaacute na forma infectante L3 medindo aproximadamente 2mm
bull Migraccedilatildeo da larva para a proboacutescida concentrando-se no laacutebio do moquito
Microfilaacuteria Presenccedila de bainha Cauda pontuda com nuacutecleos grandes largos e bem separados Nuacutecleos caudais em fila uacutenica
Ciclo evolutivo
bull Repasto sanguiacuteneo do inseto infectado
ndash As larvas L3 migram do laacutebio do vetor para a pele do HV
ndash Migram para os vasos linfaacuteticos e tornam-se vermes adultos
ndash Apoacutes 8 meses as fecircmeas graacutevidas produzem as primeiras microfilaacuterias
Periodicidade
bull Periodicidade noturna das microfilaacuterias
ndash Durante o dia localizam-se nos capilares profundos
ndash Durante a noite vasos sanguiacuteneos perifeacutericos
ndash Pico da microfilaremia meia-noite coincidindo com o horaacuterio de hematofagismo do inseto transmissor
Patologia
bull Periacuteodo assintomaacutetico bull Fase aguda bull Processos inflamatoacuterios produzidos por larvas L4 e adultos jovens
que colonizam as vias linfaacuteticas ndash Linfadenites linfonodos inguinais epitrocleanos e axilares com
desenvolvimento de granulomas com calcificaccedilatildeo apoacutes a morte dos vermes
ndash Linfangite inflamaccedilatildeo e dilataccedilatildeo dos vasos linfaacuteticos ndash Febre mal estar ndash Funiculite filariana linfangite do cordatildeo espermaacutetico e varicocele
bull Fase crocircnica ndash Hidrocele ndash Linfedema ndash Quiluacuteria ndash Elefantiacutease
Quiluacuteria
Patologia
bull Processos obstrutivos ndash Formaccedilatildeo de novelos envolvidos por reaccedilatildeo
inflamatoacuteria e pela formaccedilatildeo de fibrose
ndash Estase e congestatildeo da linfa produzindo linfoedema tecidual
ndash Extravasamento produzindo derrame linfaacutetico ascite linfaacutetica linfuacuteria linforreacuteia linfotoacuterax linfocele etc
ndash A ruptura de vasos linfaacuteticos para o interior do sistema excretor urinaacuterio daacute origem agrave quiluacuteria
Patologia
bull Complicaccedilotildees associadas agrave filariose
ndash Elefantiacutease
bull Caracterizada por processo inflamatoacuterio e fibrose crocircnica do oacutergatildeo atingido
bull Hipertrofia da derme do tecido conjuntivo aumento exagerado do volume do oacutergatildeo com queratinizaccedilatildeo e rugosidade
bull A pele perde a elasticidade resseca e se torna sujeita a infecccedilotildees bacterianas
Patologia
bull Permanecimento na aacuterea endecircmica
bull Nuacutemero de larvas inoculadas
bull Frequecircncia das re-infecccedilotildees
bull O nuacutemero de acasalamento dos vermes e suas localizaccedilotildees anatocircmicas
bull A sensibilizaccedilatildeo do organismo e a intensidade das reaccedilotildees inflamatoacuterias do paciente
bull As infecccedilotildees bacterianas associadas
Diagnoacutestico
bull Pesquisa de microfilaacuterias no sangue perifeacuterico ndash 20 40 ou 60 microL- de preferecircncia entre as 10 h da noite e 4h da manhatilde
ndash Gota espessa Coloraccedilatildeo de Giemsa
ndash Meacutetodos de concentraccedilatildeo Filtraccedilatildeo em membrana de policarbonato milipore ou nucleopore
ndash Meacutetodo de Knott
bull Na fase crocircnica as microfilaacuterias raramente satildeo detectadas no sangue perifeacuterico
Gota espessa
bull Possibilita a visualizaccedilatildeo da bainha fato que difere a microfilaria de W bancrofti de outro filariacutedeos sanguiacuteneos
bull Apresenta um baixo custo em comparaccedilatildeo com outras mais avanccediladas como a filtraccedilatildeo de sangue em membrana de policarbonato
bull Possui baixa sensibilidade natildeo indicada em situaccedilotildees em que os parasitados se mostram com baixa microfilaremia ou amicrofilarecircmicos
Concentraccedilatildeo
bull Baseia-se na passagem de sangue venoso atraveacutes de uma membrana (Milipore ou Nuclepore) de diacircmetro de 13 a 25 mm e poros de 5 ou 3 μm
bull O material retido na membrana sendo fixado corado e observado ao microscoacutepio
bull Essa teacutecnica assim como a de Knott permite a identificaccedilatildeo de indiviacuteduos com baixiacutessimas parasitemias (quantidade de microfilarias natildeo detectaacuteveis pela teacutecnica de gota espessa)
Teacutecnica de Knott
bull Retirar 2 ml de sangue total por punccedilatildeo venosa e colocar imediatamente em um tubo contendo 10 ml de formol a 2
bull Fechar o tubo e misture completamente invertendo-o e agitando-o O formol hemolisa as hemaacutecias mata fixa e distende as microfilaacuterias
bull Centrifugar o sangue a 1500 rpm por 5 minutos
bull Decantar o sobrenadante
Teacutecnica de Knott
bull Retirar o sedimento com uma pipeta Pasteur e espalhar a gota espessa sobre uma lacircmina
bull Deixar secar bem e corar com Giemsa
bull Examinar com objetiva de imersatildeo
bull Esta teacutecnica possibilita que o exame microscoacutepico laboratorial seja realizado vaacuterios dias apoacutes a coleta de material realizada no campo
Exames de imagem
bull Ultranossografia
ndash Possibilidade de visualizar os movimentos de vermes adultos vivos de W bancrofti em vaso linfaacutetico especificamente em vasos intraescrotais do cordatildeo espermaacutetico
ndash O movimento ativo e ininterrupto dos vermes adultos durante as 24 horas do dia eacute denominado sinal da ldquodanccedila das filaacuteriasrdquo
Diagnoacutestico soroloacutegico
bull Teste imunocromatograacutefico desenvolvido pelo ICT Diagnostic - ICT card
ndash Teste qualilativo
ndash Cartatildeo possui ac de antifilaacuteria e o controle eacute formado por ac anti Ig G humano
Plasmodium spp
Taxonomia
bull Reino Protozoa
bull FiloApicomplexa
bull Classe Sporozoea
bull Ordem Hemosporidiida
bull Famiacutelia Plasmodiidae
bull Gecircneros Plasmodium
bull Espeacutecie Pfalciparum Pvivax Povale e Pmalariae
Plasmodium
bull Ciclo bioloacutegico Hospedeiro vertebrado e invertebrado
bull Hospedeiro invertebrado ndash Vetor
ndash Fecircmeas hematoacutefagas do gecircnero Anopheles
ndash Brasil Anopheles (N)darlingi A (N) aquasalis A (N) albitarsis A (K) cruzii e A (K) bellator
ndash Possuem haacutebito noturno penetrando nas casas no crespuacutesculo saindo ao amanhecer
Plasmodium
bull Hospedeiro vertebrado homem
bull Transmissatildeo
ndash Vetor
ndash Transfusatildeo de sangue
ndash Compartilhamento de seringas
ndash Acidente com agulhas
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
bull Ciclo preacute-eritrociacutetico
ndash Forma inoculada esporozoiacutetos
ndash A fecircmea do anofelino infectado inocula no homem as formas infectantes localizadas na saliva
ndash Os esporozoiacutetas permancem na circulaccedilatildeo por aproximadamente uma hora
ndash Invadem os hepatoacutecitos e se diferenciam em trofozoiacutetas (criptozoiacuteto)
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
ndash Esquizogonia e formaccedilatildeo de esquizontes
ndash Divisatildeo nuclear e liberaccedilatildeo de merozoiacutetos
ndash Aproximadamente 10000 merozoiacutetos por hepatoacutecito
ndash Rompimento do hepatoacutecito e liberaccedilatildeo de merozoiacutetos na circulaccedilatildeo
ndash Duraccedilatildeo do ciclo aprox 1 a 2 semanas
Ciclo evolutivo
bull PVivax e Povale
ndash Alguns esporozoiacutetos geneticamente diferentes ficam na forma latente nos hepatoacutecitos permanecendo muitos meses Satildeo classificados como hipnozoiacuteto
ndash Satildeo responsaacuteveis pelas recaiacutedas tardias e formas de malaacuteria com periacuteodo de encubaccedilatildeo longo ndash 6 a 9 meses
FASE HEPAacuteTICA OU EXOERITROCIacuteTICA
Hepatoacutecito
FIacuteGADO
Invasatildeo do hepatoacutecito
Reproduccedilatildeo Assexuada
Esporozoiacutetos Lise dos hepatoacutecitos
Liberaccedilatildeo dos protozoaacuterios na corrente sanguumliacutenea
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
bull Ciclo eritrociacutetico
ndash Os merozoiacutetos invadem as hemaacutecias
ndash Diferenciaccedilatildeo em trofozoiacutetos
ndash Esquizogonia esquizonte
ndash Produccedilatildeo de merozoiacutetos e rompimento da hemaacutecia
ndash Merozoiacutetos invasatildeo de novas hemaacutecias
ndash Apoacutes algumas geraccedilotildees os merozoiacutetos natildeo mais se dividem e se diferenciam em gametoacutecitos ndash micro e macrogametoacutecito
FASE ERITROCIacuteTICA
Hepatoacutecito destruiacutedo pelos protozoaacuterios
Penetraccedilatildeo dos protozoaacuterios
Reproduccedilatildeo assexuada
Protozoaacuterios destroem as hemaacutecias
Diferenciaccedilatildeo em gametoacutecitos
Fecircmeas de Anopheles sugam hemaacutecias com gametoacutecitos
Ciclo no hospedeiro invertebrado
Ocorre nas hemaacutecias ou Eritroacutecitos
nas hemaacutecias
Protozoaacuterio no interior da hemaacutecia
Hemaacutecia com gametoacutecito
T trofozoiacuteto Em esquizonte com merozoiacuteto
Fase eritrociacutetica
bull Ciclo sanguiacuteneo ndash Pfalciparum P vivax e Povale 48 horas
ndash Pmalariae 72 horas
ndash Fonte de nutriccedilatildeo do Plasmodium no ciclo sanguiacuteneo hemoglobina
ndash Produccedilatildeo do pigmento malaacuterico hemozoiacutena bull Granulaccedilotildees de Schuffner Plasmodium vivax
bull Granulaccedilotildees de Maurer P falciparum
bull Granulaccedilotildees de Ziemann P malariae
ndash Fagocitose pelas ceacutelulas de Kuppffer e macroacutefagos do baccedilo
Trofozoiacutetos Pfalciparum
Trofozoiacutetos Pfalciparum
Esquizonte ndash P falciparum
Raros no sangue perifeacuterico Possuem 2 a 24 merozoiacutetos
Ocupam 23 do gloacutebulo vermelho
Gametoacutecitos Pfalciparum
Ciclo evolutivo Pvivax
Esquizonte ndash P vivax
Satildeo grandes e ameboacuteides Cromatina organizada em duas ou mais massas
Possuem 2 a 24 merozoiacutetos com pontos de cromatina
Gametoacutecito ndash Pvivax
Macrogametoacutecitos satildeo redondos ou ovais e ocupam toda ceacutelula hospedeira O citoplasma eacute geralmente corado de azul mais escuro e conteacutem pigmento marrom Microgametoacutecitos satildeo geralmente do tamanho de um RBC natildeo infectados com citoplasma corados de azul paacutelido rosa ou cinza
Trofozoiacutetos - P malariae
Esquizontes ndash P malariae
Aproximadamente 6 a 12 merozoiacutetos com arranjo de rosetas
Gametoacutecitos ndash P malariae
Ciclo evolutivo ndash HI
bull Ingestatildeo de hemaacutecias contendo gametoacutecitos durante o repasto sanguiacuteneo da fecircmea do anofelino
bull No intestino meacutedio do vetor gametogecircnese ndash Macrogametoacutecito ndash macrogameta feminino ndash Microgametoacutecito o processo de exflagelaccedilatildeo daacute
origem a 8 microgametas masculinos ndash Produccedilatildeo de ovo ou zigoto ndash O ovo encista na camada epitelial do intestino meacutedio
oocisto ndash Esporogonia liberaccedilatildeo de esporozoiacutetos
Ciclo evolutivo ndash HInvertebrado
ndash Os esporozoiacutetos satildeo transportados pelo hemolinfa ateacute as glacircndulas salivares do vetor ateacute atingirem o ducto salivar
bull Inoculaccedilatildeo no hospedeiro vertebrado atraveacutes da picada do inseto
Hemaacutecia com gametoacutecito
Fecircmeas de Anopheles sugam hemaacutecias com gametoacutecitos
CICLO NO INVERTEBRADO
No tubo digestivo
Zigoto
Penetraccedilatildeo na parede do tubo
digestivo
Migraccedilatildeo para as glacircndulas salivares
Desenvolvimento
Mosquito infectado
Diagnoacutestico
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado e espesso corado pelo Giemsa
bull Sangue colhido sem anticoagulante para melhor fixaccedilatildeo em lacircmina
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo espesso eacute mais eficiente para detecccedilatildeo da infecccedilatildeo
bull Esfregaccedilo delgado eacute mais eficiente para diferenciaccedilatildeo morfoloacutegica das espeacutecies
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo semiquantitativo
ndash Exame de 100 campos microscoacutepicos com resultado expresso pelo sistema de cruzes
Parasitos contados Nuacutemero de campos
microscoacutepicos cruzes
40 a 60 100 +2
1 1 +
2-20 1 ++
21-200 1 +++
+ 200 1 ++++
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo quantitativo derivado de anaacutelise semiquantitativa
Contagem de parasitos por campo
Cruzes Parasitos por mm3
40 a 60100 +2 200-300
1 + 301-500
2-20 ++ 501 - 10000
21-200 +++ 10001 ndash 100000
+ 200 ++++ 100000 ou mais
Diagnoacutestico
bull P falciparum
ndash Parte do ciclo celular aderido ao endoteacutelio capilar Encontro somente de trofozoitos e gametoacutecitos no sangue perifeacuterico
ndash Raramente os esquizontes satildeo encontrados no sangue perifeacuterico
Diagnoacutestico ndash Pvivax ndash Encontro de todas as formas de desenvolvimento ndash
trofozoiacuteto jovem maduro esquizontes e gametoacutecitos
ndash Os trofozoiacutetos maduros tecircm geralmente um aspecto irregular com extensotildees ameboacuteides em seu citoplasma
Diagnoacutestico ndash Pvivax
ndash Os gametoacutecitos femininos coram-se mais intensamente que os masculinos e apresentam nuacutecleo mais compacto geralmente em localizaccedilatildeo perifeacuterica
ndash O pigmento malaacuterico geralmente eacute abundante
Diagnoacutestico - Pmalariae
bull Realizado por meio de caracteriacutesticas morfoloacutegicas do parasito
ndash Verificaccedilatildeo em esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado
ndash Posiccedilatildeo equatorial do parasito
ndash Desenvolvimento sem deformaccedilatildeo do eritroacutecito
Diagnoacutestico
bull QBC ndash Teacutecnica que combina concentraccedilatildeo dos parasitos
pela centrifugaccedilatildeo do sangue em em microhematoacutecrito e a coloraccedilatildeo dos aacutecidos nucleacuteicos do parasito pelo fluorcromo laranja de acridina
ndash Utilizaccedilatildeo de tubos especiais e microscopia epifluorescente
ndash Teste raacutepido
ndash Alta sensibilidade
Diagnoacutestico
bull ParaSight-F ( Becton amp Dickinson)
ndash Teste raacutepido para captura da proteiacutena rica em histidina 2 de Pfalciparum( PfHRP2) e enzimas conservadas de 4 espeacutecies de plasmoacutedio (DHL e aldolase
ndash Utilizaccedilatildeo de fita de nitrocelulose contendo ac monoclonal
ndash Lise de uma gota de sangue
ndash A reaccedilatildeo eacute revelada com adiccedilatildeo de ac policlonal anti-HRP2 conjugado com lipossomas contendo corante
Diagnoacutestico
bull PCR
ndash Sensibilidade e especificidade maior do que o esfregaccedilo sanguiacuteneo
Trypanosoma cruzi
ndash Divisatildeo das formas amastigotas diferenciaccedilatildeo em tripomastigotas rompimento do macroacutefago e liberaccedilatildeo de novas formas no interstiacutecio
ndash As formas tripomastigotas caem na corrente sanguiacutenea atingindo outras ceacutelulas
ndash Os triatomiacuteneos se infectam ao ingerir formas tripomastigotas sanguiacuteneas do hospedeiro vertebrado
Trypanosoma cruzi
ndash Estocircmago do vetor tripomastigotas se diferenciam em epimastigotas
ndash Intestino do vetor divisatildeo de epimastigotas por fissatildeo binaacuteria simples
ndash Porccedilatildeo final do tubo digestivo epimastigotas se diferenciam em tripomastigota metaciacuteclica forma infectante para o homem e entatildeo satildeo liberados nas fezes e urina do vetor
Tripomastigota
Cinetoplasto posterior ao nuacutecleo
cinetoplasto
Tripomastigota
Epimastigota
Cinetoplasto anterior ao nuacutecleo
Amastigota
Amastigotas Amastigotas e tripomastigotas
Monoacutecito parasitado com as formas amastigotas
Doenccedila de Chagas
bull Trypanosoma cruzi (Chagas 1909)
Diagnoacutestico laboratorial Fase aguda
bull Alta parasitemia
bull Pesquisa do parasito
ndash Exame de sangue a fresco
ndash Exame de sangue em gota espessa
ndash Esfregaccedilo sanguiacuteneo corado pelo Giemsa
ndash Microhematoacutecrito
ndash Meacutetodos de concentraccedilatildeo
ndash Inoculaccedilatildeo em aninais
Exame direto a fresco
bull Parasitas abundantes nos primeiros dias e semanas de incubaccedilatildeo
bull Colocar uma gota de sangue entre lacircmina e lamiacutenula e examinar imediatamente apoacutes a coleta para evitar a coagulaccedilatildeo
bull Para retardar a coagulaccedilatildeo adicionar uma gota de soluccedilatildeo salina
bull Analisar em microscoacutepio oacuteptico a presenccedila das formas tripomastigotas
Exame de sangue em gota espessa
bull Analisa uma maior quantidade de material bioloacutegico
bull Verifica a presenccedila de formas tripomastigotas sanguiacuteneas ndash Colocar 3 gotas de sangue na lacircmina ndash Com o canto de outra espalhar o material em uma
aacuterea de aproximadamente 1 cm da lacircmina ndash Deixar secar ao ar durante 6 horas Natildeo ultrapassar 36
horas ndash Corar pelo Giemsa Deixar em repouso por 30 min ndash Lavar e examinar
Esfregaccedilo sanguiacuteneo
bull Colocar uma gota de sangue na extremidade direita da lacircmina
bull Pegar outra lacircmina segurar por cima com a matildeo direita e com uma inclinaccedilatildeo de 45deg encostar adiante da gota
bull Deixar mesma se espalhar pela superfiacutecie de contato das duas lacircminas
bull Puxar a gota espalhada ateacute o final de lacircmina
bull Secar e corar pelo Giemsa ou Leishman
Esfregaccedilo sanguiacuteneo
Microhematoacutecrito Creme leucocitaacuterio
Microhematoacutecrito
bull Colher sangue em tubo capilar
bull Centrifugar em microcentriacutefuga por 5 minutos agrave 10000 rpm
bull Avaliar o microhematocrito em microscopia oacuteptica
bull Verificar a presenccedila das formas tripomastigotas presentes no creme leucocitaacuterio
bull Se positivo realizar esfregaccedilo do creme leucocitaacuterio
bull Fixar com aacutelcool metiacutelico e corar com Gienza Analisar em microscoacutepio oacuteptico
Meacutetodo de concentraccedilatildeo
bull Meacutetodo de Strout
ndash Realizar a coleta de sangue em tubo sem anticoagulante
ndash Aguardar a retraccedilatildeo do coaacutegulo Os parasitas concentrar-se-atildeo no soro a medida que ocorrer a retraccedilatildeo do coaacutegulo
ndash O soro eacute centrifugado para anaacutelise do sedimento
Inoculaccedilatildeo em animais
bull Inoculaccedilatildeo de sangue ou creme leucocitaacuterio em camundongos jovens
bull Inoculaccedilatildeo intra-peritoneal intra-conjuntival e a via oral
bull Avaliaccedilatildeo das formas de Tcruzi
bull Teacutecnica utilizada em pesquisa
Diagnoacutestico laboratorial Fase crocircnica
bull Xenodiagnoacutestico bull Hemocultura bull Reaccedilatildeo de hemaglutinaccedilatildeo indireta bull RIFI bull ELISA bull PCR bull PaGIA bull LMCo bull Pesquisa de anticorpos antitripomastigotas vivos
Hemocultura
bull Meio LIT ndash Liver Infusion Triptose
bull Meio NNN ndash McNeal Novy e Nicolle
bull Utilizaccedilatildeo de 30ml de sangue heparinizado
bull Centrifugaccedilatildeo por 30 minutos em 3000 rpm
bull Despreza-se o plasma e o sedimento celular eacute lavado com meio LIT ( Liver Infusion Triptose) para eliminaccedilatildeo de possiacuteveis anticorpos
Hemocultura
bull Sedimento distribuiacutedo em 6 tubos com 5 ml de LIT
bull Os tubos satildeo mantidos a 28degC homogeneizados 3x semana e avaliados quinzenalmente ateacute 90 dias
bull Centrifugaccedilatildeo e avaliaccedilatildeo do sedimento de hemaacutecias
bull Leitura realizada pela observaccedilatildeo microscoacutepica de gotas do meio
bull Aumento da positividade para sangue processado imediatamente apoacutes a coleta cultivado em prazo de tempo maior (120 dias) e repeticcedilatildeo da teacutecnica por 3 vezes
Wuchereria bancrofti
Taxonomia
bull Reino Animalia
bull Filo Nematoda
bull Classe Secernentea
bull Ordem Filariidea
bull Superfamiacutelia Filarioidea
bull FamiacuteliaOnchocercidae
bull GecircnerosWuchereria
bull Espeacutecie Wbancrofti
Formas evolutivas
bull Heteroxecircnico
bull Hospedeiro vertebrado homem
bull Hospedeiro intermediaacuterio Culex quinquefasciatus
bull Formas evolutivas ndash HV verme adulto (fecircmea e macho) localizados nos
vasos e gacircnglios linfaacuteticos da regiatildeo abdominal peacutelvica (perna e escroto) mamas e braccedilo
ndash microfilaacuterias eliminadas pelas fecircmeas graacutevidas Saem dos ductos linfaacuteticos e atingem circulaccedilatildeo sanguiacutenea
ndash HI larva L1 L2 e L3 (infectante)
Culex quinquefasciatus
Morfologia
bull Macho 35 a 4 cm x 01mm com extremidade posterior enrrolada ventralmente
bull Fecircmea 7 a 10cm x 03 mm com vagina exteriorizada em uma vulva localizada proacutexima agrave extremidade anterior
bull Microfilaacuteria Presenccedila de bainha e estilete bucal na parte anterior que as diferencia de outros filariacutedeos sanguiacuteneos Possuem 250 a 300 microm e uma grande qtde de nuacutecleos
bull Larva L3 possui aproximadamente 15 a 20 mm de comprimento
Microfilaacuteria
Ciclo evolutivo
bull Fecircmea do inseto realiza o hematofagismo noturno e ingere as microfilaacuterias
bull Estocircmago do vetor microfilaacuterias perdem a bainha atravessam a parede do estocircmago e migram para os muacutesculos toraacutecicos ndash L1
bull Apoacutes 20 dias a larva estaacute na forma infectante L3 medindo aproximadamente 2mm
bull Migraccedilatildeo da larva para a proboacutescida concentrando-se no laacutebio do moquito
Microfilaacuteria Presenccedila de bainha Cauda pontuda com nuacutecleos grandes largos e bem separados Nuacutecleos caudais em fila uacutenica
Ciclo evolutivo
bull Repasto sanguiacuteneo do inseto infectado
ndash As larvas L3 migram do laacutebio do vetor para a pele do HV
ndash Migram para os vasos linfaacuteticos e tornam-se vermes adultos
ndash Apoacutes 8 meses as fecircmeas graacutevidas produzem as primeiras microfilaacuterias
Periodicidade
bull Periodicidade noturna das microfilaacuterias
ndash Durante o dia localizam-se nos capilares profundos
ndash Durante a noite vasos sanguiacuteneos perifeacutericos
ndash Pico da microfilaremia meia-noite coincidindo com o horaacuterio de hematofagismo do inseto transmissor
Patologia
bull Periacuteodo assintomaacutetico bull Fase aguda bull Processos inflamatoacuterios produzidos por larvas L4 e adultos jovens
que colonizam as vias linfaacuteticas ndash Linfadenites linfonodos inguinais epitrocleanos e axilares com
desenvolvimento de granulomas com calcificaccedilatildeo apoacutes a morte dos vermes
ndash Linfangite inflamaccedilatildeo e dilataccedilatildeo dos vasos linfaacuteticos ndash Febre mal estar ndash Funiculite filariana linfangite do cordatildeo espermaacutetico e varicocele
bull Fase crocircnica ndash Hidrocele ndash Linfedema ndash Quiluacuteria ndash Elefantiacutease
Quiluacuteria
Patologia
bull Processos obstrutivos ndash Formaccedilatildeo de novelos envolvidos por reaccedilatildeo
inflamatoacuteria e pela formaccedilatildeo de fibrose
ndash Estase e congestatildeo da linfa produzindo linfoedema tecidual
ndash Extravasamento produzindo derrame linfaacutetico ascite linfaacutetica linfuacuteria linforreacuteia linfotoacuterax linfocele etc
ndash A ruptura de vasos linfaacuteticos para o interior do sistema excretor urinaacuterio daacute origem agrave quiluacuteria
Patologia
bull Complicaccedilotildees associadas agrave filariose
ndash Elefantiacutease
bull Caracterizada por processo inflamatoacuterio e fibrose crocircnica do oacutergatildeo atingido
bull Hipertrofia da derme do tecido conjuntivo aumento exagerado do volume do oacutergatildeo com queratinizaccedilatildeo e rugosidade
bull A pele perde a elasticidade resseca e se torna sujeita a infecccedilotildees bacterianas
Patologia
bull Permanecimento na aacuterea endecircmica
bull Nuacutemero de larvas inoculadas
bull Frequecircncia das re-infecccedilotildees
bull O nuacutemero de acasalamento dos vermes e suas localizaccedilotildees anatocircmicas
bull A sensibilizaccedilatildeo do organismo e a intensidade das reaccedilotildees inflamatoacuterias do paciente
bull As infecccedilotildees bacterianas associadas
Diagnoacutestico
bull Pesquisa de microfilaacuterias no sangue perifeacuterico ndash 20 40 ou 60 microL- de preferecircncia entre as 10 h da noite e 4h da manhatilde
ndash Gota espessa Coloraccedilatildeo de Giemsa
ndash Meacutetodos de concentraccedilatildeo Filtraccedilatildeo em membrana de policarbonato milipore ou nucleopore
ndash Meacutetodo de Knott
bull Na fase crocircnica as microfilaacuterias raramente satildeo detectadas no sangue perifeacuterico
Gota espessa
bull Possibilita a visualizaccedilatildeo da bainha fato que difere a microfilaria de W bancrofti de outro filariacutedeos sanguiacuteneos
bull Apresenta um baixo custo em comparaccedilatildeo com outras mais avanccediladas como a filtraccedilatildeo de sangue em membrana de policarbonato
bull Possui baixa sensibilidade natildeo indicada em situaccedilotildees em que os parasitados se mostram com baixa microfilaremia ou amicrofilarecircmicos
Concentraccedilatildeo
bull Baseia-se na passagem de sangue venoso atraveacutes de uma membrana (Milipore ou Nuclepore) de diacircmetro de 13 a 25 mm e poros de 5 ou 3 μm
bull O material retido na membrana sendo fixado corado e observado ao microscoacutepio
bull Essa teacutecnica assim como a de Knott permite a identificaccedilatildeo de indiviacuteduos com baixiacutessimas parasitemias (quantidade de microfilarias natildeo detectaacuteveis pela teacutecnica de gota espessa)
Teacutecnica de Knott
bull Retirar 2 ml de sangue total por punccedilatildeo venosa e colocar imediatamente em um tubo contendo 10 ml de formol a 2
bull Fechar o tubo e misture completamente invertendo-o e agitando-o O formol hemolisa as hemaacutecias mata fixa e distende as microfilaacuterias
bull Centrifugar o sangue a 1500 rpm por 5 minutos
bull Decantar o sobrenadante
Teacutecnica de Knott
bull Retirar o sedimento com uma pipeta Pasteur e espalhar a gota espessa sobre uma lacircmina
bull Deixar secar bem e corar com Giemsa
bull Examinar com objetiva de imersatildeo
bull Esta teacutecnica possibilita que o exame microscoacutepico laboratorial seja realizado vaacuterios dias apoacutes a coleta de material realizada no campo
Exames de imagem
bull Ultranossografia
ndash Possibilidade de visualizar os movimentos de vermes adultos vivos de W bancrofti em vaso linfaacutetico especificamente em vasos intraescrotais do cordatildeo espermaacutetico
ndash O movimento ativo e ininterrupto dos vermes adultos durante as 24 horas do dia eacute denominado sinal da ldquodanccedila das filaacuteriasrdquo
Diagnoacutestico soroloacutegico
bull Teste imunocromatograacutefico desenvolvido pelo ICT Diagnostic - ICT card
ndash Teste qualilativo
ndash Cartatildeo possui ac de antifilaacuteria e o controle eacute formado por ac anti Ig G humano
Plasmodium spp
Taxonomia
bull Reino Protozoa
bull FiloApicomplexa
bull Classe Sporozoea
bull Ordem Hemosporidiida
bull Famiacutelia Plasmodiidae
bull Gecircneros Plasmodium
bull Espeacutecie Pfalciparum Pvivax Povale e Pmalariae
Plasmodium
bull Ciclo bioloacutegico Hospedeiro vertebrado e invertebrado
bull Hospedeiro invertebrado ndash Vetor
ndash Fecircmeas hematoacutefagas do gecircnero Anopheles
ndash Brasil Anopheles (N)darlingi A (N) aquasalis A (N) albitarsis A (K) cruzii e A (K) bellator
ndash Possuem haacutebito noturno penetrando nas casas no crespuacutesculo saindo ao amanhecer
Plasmodium
bull Hospedeiro vertebrado homem
bull Transmissatildeo
ndash Vetor
ndash Transfusatildeo de sangue
ndash Compartilhamento de seringas
ndash Acidente com agulhas
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
bull Ciclo preacute-eritrociacutetico
ndash Forma inoculada esporozoiacutetos
ndash A fecircmea do anofelino infectado inocula no homem as formas infectantes localizadas na saliva
ndash Os esporozoiacutetas permancem na circulaccedilatildeo por aproximadamente uma hora
ndash Invadem os hepatoacutecitos e se diferenciam em trofozoiacutetas (criptozoiacuteto)
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
ndash Esquizogonia e formaccedilatildeo de esquizontes
ndash Divisatildeo nuclear e liberaccedilatildeo de merozoiacutetos
ndash Aproximadamente 10000 merozoiacutetos por hepatoacutecito
ndash Rompimento do hepatoacutecito e liberaccedilatildeo de merozoiacutetos na circulaccedilatildeo
ndash Duraccedilatildeo do ciclo aprox 1 a 2 semanas
Ciclo evolutivo
bull PVivax e Povale
ndash Alguns esporozoiacutetos geneticamente diferentes ficam na forma latente nos hepatoacutecitos permanecendo muitos meses Satildeo classificados como hipnozoiacuteto
ndash Satildeo responsaacuteveis pelas recaiacutedas tardias e formas de malaacuteria com periacuteodo de encubaccedilatildeo longo ndash 6 a 9 meses
FASE HEPAacuteTICA OU EXOERITROCIacuteTICA
Hepatoacutecito
FIacuteGADO
Invasatildeo do hepatoacutecito
Reproduccedilatildeo Assexuada
Esporozoiacutetos Lise dos hepatoacutecitos
Liberaccedilatildeo dos protozoaacuterios na corrente sanguumliacutenea
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
bull Ciclo eritrociacutetico
ndash Os merozoiacutetos invadem as hemaacutecias
ndash Diferenciaccedilatildeo em trofozoiacutetos
ndash Esquizogonia esquizonte
ndash Produccedilatildeo de merozoiacutetos e rompimento da hemaacutecia
ndash Merozoiacutetos invasatildeo de novas hemaacutecias
ndash Apoacutes algumas geraccedilotildees os merozoiacutetos natildeo mais se dividem e se diferenciam em gametoacutecitos ndash micro e macrogametoacutecito
FASE ERITROCIacuteTICA
Hepatoacutecito destruiacutedo pelos protozoaacuterios
Penetraccedilatildeo dos protozoaacuterios
Reproduccedilatildeo assexuada
Protozoaacuterios destroem as hemaacutecias
Diferenciaccedilatildeo em gametoacutecitos
Fecircmeas de Anopheles sugam hemaacutecias com gametoacutecitos
Ciclo no hospedeiro invertebrado
Ocorre nas hemaacutecias ou Eritroacutecitos
nas hemaacutecias
Protozoaacuterio no interior da hemaacutecia
Hemaacutecia com gametoacutecito
T trofozoiacuteto Em esquizonte com merozoiacuteto
Fase eritrociacutetica
bull Ciclo sanguiacuteneo ndash Pfalciparum P vivax e Povale 48 horas
ndash Pmalariae 72 horas
ndash Fonte de nutriccedilatildeo do Plasmodium no ciclo sanguiacuteneo hemoglobina
ndash Produccedilatildeo do pigmento malaacuterico hemozoiacutena bull Granulaccedilotildees de Schuffner Plasmodium vivax
bull Granulaccedilotildees de Maurer P falciparum
bull Granulaccedilotildees de Ziemann P malariae
ndash Fagocitose pelas ceacutelulas de Kuppffer e macroacutefagos do baccedilo
Trofozoiacutetos Pfalciparum
Trofozoiacutetos Pfalciparum
Esquizonte ndash P falciparum
Raros no sangue perifeacuterico Possuem 2 a 24 merozoiacutetos
Ocupam 23 do gloacutebulo vermelho
Gametoacutecitos Pfalciparum
Ciclo evolutivo Pvivax
Esquizonte ndash P vivax
Satildeo grandes e ameboacuteides Cromatina organizada em duas ou mais massas
Possuem 2 a 24 merozoiacutetos com pontos de cromatina
Gametoacutecito ndash Pvivax
Macrogametoacutecitos satildeo redondos ou ovais e ocupam toda ceacutelula hospedeira O citoplasma eacute geralmente corado de azul mais escuro e conteacutem pigmento marrom Microgametoacutecitos satildeo geralmente do tamanho de um RBC natildeo infectados com citoplasma corados de azul paacutelido rosa ou cinza
Trofozoiacutetos - P malariae
Esquizontes ndash P malariae
Aproximadamente 6 a 12 merozoiacutetos com arranjo de rosetas
Gametoacutecitos ndash P malariae
Ciclo evolutivo ndash HI
bull Ingestatildeo de hemaacutecias contendo gametoacutecitos durante o repasto sanguiacuteneo da fecircmea do anofelino
bull No intestino meacutedio do vetor gametogecircnese ndash Macrogametoacutecito ndash macrogameta feminino ndash Microgametoacutecito o processo de exflagelaccedilatildeo daacute
origem a 8 microgametas masculinos ndash Produccedilatildeo de ovo ou zigoto ndash O ovo encista na camada epitelial do intestino meacutedio
oocisto ndash Esporogonia liberaccedilatildeo de esporozoiacutetos
Ciclo evolutivo ndash HInvertebrado
ndash Os esporozoiacutetos satildeo transportados pelo hemolinfa ateacute as glacircndulas salivares do vetor ateacute atingirem o ducto salivar
bull Inoculaccedilatildeo no hospedeiro vertebrado atraveacutes da picada do inseto
Hemaacutecia com gametoacutecito
Fecircmeas de Anopheles sugam hemaacutecias com gametoacutecitos
CICLO NO INVERTEBRADO
No tubo digestivo
Zigoto
Penetraccedilatildeo na parede do tubo
digestivo
Migraccedilatildeo para as glacircndulas salivares
Desenvolvimento
Mosquito infectado
Diagnoacutestico
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado e espesso corado pelo Giemsa
bull Sangue colhido sem anticoagulante para melhor fixaccedilatildeo em lacircmina
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo espesso eacute mais eficiente para detecccedilatildeo da infecccedilatildeo
bull Esfregaccedilo delgado eacute mais eficiente para diferenciaccedilatildeo morfoloacutegica das espeacutecies
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo semiquantitativo
ndash Exame de 100 campos microscoacutepicos com resultado expresso pelo sistema de cruzes
Parasitos contados Nuacutemero de campos
microscoacutepicos cruzes
40 a 60 100 +2
1 1 +
2-20 1 ++
21-200 1 +++
+ 200 1 ++++
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo quantitativo derivado de anaacutelise semiquantitativa
Contagem de parasitos por campo
Cruzes Parasitos por mm3
40 a 60100 +2 200-300
1 + 301-500
2-20 ++ 501 - 10000
21-200 +++ 10001 ndash 100000
+ 200 ++++ 100000 ou mais
Diagnoacutestico
bull P falciparum
ndash Parte do ciclo celular aderido ao endoteacutelio capilar Encontro somente de trofozoitos e gametoacutecitos no sangue perifeacuterico
ndash Raramente os esquizontes satildeo encontrados no sangue perifeacuterico
Diagnoacutestico ndash Pvivax ndash Encontro de todas as formas de desenvolvimento ndash
trofozoiacuteto jovem maduro esquizontes e gametoacutecitos
ndash Os trofozoiacutetos maduros tecircm geralmente um aspecto irregular com extensotildees ameboacuteides em seu citoplasma
Diagnoacutestico ndash Pvivax
ndash Os gametoacutecitos femininos coram-se mais intensamente que os masculinos e apresentam nuacutecleo mais compacto geralmente em localizaccedilatildeo perifeacuterica
ndash O pigmento malaacuterico geralmente eacute abundante
Diagnoacutestico - Pmalariae
bull Realizado por meio de caracteriacutesticas morfoloacutegicas do parasito
ndash Verificaccedilatildeo em esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado
ndash Posiccedilatildeo equatorial do parasito
ndash Desenvolvimento sem deformaccedilatildeo do eritroacutecito
Diagnoacutestico
bull QBC ndash Teacutecnica que combina concentraccedilatildeo dos parasitos
pela centrifugaccedilatildeo do sangue em em microhematoacutecrito e a coloraccedilatildeo dos aacutecidos nucleacuteicos do parasito pelo fluorcromo laranja de acridina
ndash Utilizaccedilatildeo de tubos especiais e microscopia epifluorescente
ndash Teste raacutepido
ndash Alta sensibilidade
Diagnoacutestico
bull ParaSight-F ( Becton amp Dickinson)
ndash Teste raacutepido para captura da proteiacutena rica em histidina 2 de Pfalciparum( PfHRP2) e enzimas conservadas de 4 espeacutecies de plasmoacutedio (DHL e aldolase
ndash Utilizaccedilatildeo de fita de nitrocelulose contendo ac monoclonal
ndash Lise de uma gota de sangue
ndash A reaccedilatildeo eacute revelada com adiccedilatildeo de ac policlonal anti-HRP2 conjugado com lipossomas contendo corante
Diagnoacutestico
bull PCR
ndash Sensibilidade e especificidade maior do que o esfregaccedilo sanguiacuteneo
Trypanosoma cruzi
ndash Estocircmago do vetor tripomastigotas se diferenciam em epimastigotas
ndash Intestino do vetor divisatildeo de epimastigotas por fissatildeo binaacuteria simples
ndash Porccedilatildeo final do tubo digestivo epimastigotas se diferenciam em tripomastigota metaciacuteclica forma infectante para o homem e entatildeo satildeo liberados nas fezes e urina do vetor
Tripomastigota
Cinetoplasto posterior ao nuacutecleo
cinetoplasto
Tripomastigota
Epimastigota
Cinetoplasto anterior ao nuacutecleo
Amastigota
Amastigotas Amastigotas e tripomastigotas
Monoacutecito parasitado com as formas amastigotas
Doenccedila de Chagas
bull Trypanosoma cruzi (Chagas 1909)
Diagnoacutestico laboratorial Fase aguda
bull Alta parasitemia
bull Pesquisa do parasito
ndash Exame de sangue a fresco
ndash Exame de sangue em gota espessa
ndash Esfregaccedilo sanguiacuteneo corado pelo Giemsa
ndash Microhematoacutecrito
ndash Meacutetodos de concentraccedilatildeo
ndash Inoculaccedilatildeo em aninais
Exame direto a fresco
bull Parasitas abundantes nos primeiros dias e semanas de incubaccedilatildeo
bull Colocar uma gota de sangue entre lacircmina e lamiacutenula e examinar imediatamente apoacutes a coleta para evitar a coagulaccedilatildeo
bull Para retardar a coagulaccedilatildeo adicionar uma gota de soluccedilatildeo salina
bull Analisar em microscoacutepio oacuteptico a presenccedila das formas tripomastigotas
Exame de sangue em gota espessa
bull Analisa uma maior quantidade de material bioloacutegico
bull Verifica a presenccedila de formas tripomastigotas sanguiacuteneas ndash Colocar 3 gotas de sangue na lacircmina ndash Com o canto de outra espalhar o material em uma
aacuterea de aproximadamente 1 cm da lacircmina ndash Deixar secar ao ar durante 6 horas Natildeo ultrapassar 36
horas ndash Corar pelo Giemsa Deixar em repouso por 30 min ndash Lavar e examinar
Esfregaccedilo sanguiacuteneo
bull Colocar uma gota de sangue na extremidade direita da lacircmina
bull Pegar outra lacircmina segurar por cima com a matildeo direita e com uma inclinaccedilatildeo de 45deg encostar adiante da gota
bull Deixar mesma se espalhar pela superfiacutecie de contato das duas lacircminas
bull Puxar a gota espalhada ateacute o final de lacircmina
bull Secar e corar pelo Giemsa ou Leishman
Esfregaccedilo sanguiacuteneo
Microhematoacutecrito Creme leucocitaacuterio
Microhematoacutecrito
bull Colher sangue em tubo capilar
bull Centrifugar em microcentriacutefuga por 5 minutos agrave 10000 rpm
bull Avaliar o microhematocrito em microscopia oacuteptica
bull Verificar a presenccedila das formas tripomastigotas presentes no creme leucocitaacuterio
bull Se positivo realizar esfregaccedilo do creme leucocitaacuterio
bull Fixar com aacutelcool metiacutelico e corar com Gienza Analisar em microscoacutepio oacuteptico
Meacutetodo de concentraccedilatildeo
bull Meacutetodo de Strout
ndash Realizar a coleta de sangue em tubo sem anticoagulante
ndash Aguardar a retraccedilatildeo do coaacutegulo Os parasitas concentrar-se-atildeo no soro a medida que ocorrer a retraccedilatildeo do coaacutegulo
ndash O soro eacute centrifugado para anaacutelise do sedimento
Inoculaccedilatildeo em animais
bull Inoculaccedilatildeo de sangue ou creme leucocitaacuterio em camundongos jovens
bull Inoculaccedilatildeo intra-peritoneal intra-conjuntival e a via oral
bull Avaliaccedilatildeo das formas de Tcruzi
bull Teacutecnica utilizada em pesquisa
Diagnoacutestico laboratorial Fase crocircnica
bull Xenodiagnoacutestico bull Hemocultura bull Reaccedilatildeo de hemaglutinaccedilatildeo indireta bull RIFI bull ELISA bull PCR bull PaGIA bull LMCo bull Pesquisa de anticorpos antitripomastigotas vivos
Hemocultura
bull Meio LIT ndash Liver Infusion Triptose
bull Meio NNN ndash McNeal Novy e Nicolle
bull Utilizaccedilatildeo de 30ml de sangue heparinizado
bull Centrifugaccedilatildeo por 30 minutos em 3000 rpm
bull Despreza-se o plasma e o sedimento celular eacute lavado com meio LIT ( Liver Infusion Triptose) para eliminaccedilatildeo de possiacuteveis anticorpos
Hemocultura
bull Sedimento distribuiacutedo em 6 tubos com 5 ml de LIT
bull Os tubos satildeo mantidos a 28degC homogeneizados 3x semana e avaliados quinzenalmente ateacute 90 dias
bull Centrifugaccedilatildeo e avaliaccedilatildeo do sedimento de hemaacutecias
bull Leitura realizada pela observaccedilatildeo microscoacutepica de gotas do meio
bull Aumento da positividade para sangue processado imediatamente apoacutes a coleta cultivado em prazo de tempo maior (120 dias) e repeticcedilatildeo da teacutecnica por 3 vezes
Wuchereria bancrofti
Taxonomia
bull Reino Animalia
bull Filo Nematoda
bull Classe Secernentea
bull Ordem Filariidea
bull Superfamiacutelia Filarioidea
bull FamiacuteliaOnchocercidae
bull GecircnerosWuchereria
bull Espeacutecie Wbancrofti
Formas evolutivas
bull Heteroxecircnico
bull Hospedeiro vertebrado homem
bull Hospedeiro intermediaacuterio Culex quinquefasciatus
bull Formas evolutivas ndash HV verme adulto (fecircmea e macho) localizados nos
vasos e gacircnglios linfaacuteticos da regiatildeo abdominal peacutelvica (perna e escroto) mamas e braccedilo
ndash microfilaacuterias eliminadas pelas fecircmeas graacutevidas Saem dos ductos linfaacuteticos e atingem circulaccedilatildeo sanguiacutenea
ndash HI larva L1 L2 e L3 (infectante)
Culex quinquefasciatus
Morfologia
bull Macho 35 a 4 cm x 01mm com extremidade posterior enrrolada ventralmente
bull Fecircmea 7 a 10cm x 03 mm com vagina exteriorizada em uma vulva localizada proacutexima agrave extremidade anterior
bull Microfilaacuteria Presenccedila de bainha e estilete bucal na parte anterior que as diferencia de outros filariacutedeos sanguiacuteneos Possuem 250 a 300 microm e uma grande qtde de nuacutecleos
bull Larva L3 possui aproximadamente 15 a 20 mm de comprimento
Microfilaacuteria
Ciclo evolutivo
bull Fecircmea do inseto realiza o hematofagismo noturno e ingere as microfilaacuterias
bull Estocircmago do vetor microfilaacuterias perdem a bainha atravessam a parede do estocircmago e migram para os muacutesculos toraacutecicos ndash L1
bull Apoacutes 20 dias a larva estaacute na forma infectante L3 medindo aproximadamente 2mm
bull Migraccedilatildeo da larva para a proboacutescida concentrando-se no laacutebio do moquito
Microfilaacuteria Presenccedila de bainha Cauda pontuda com nuacutecleos grandes largos e bem separados Nuacutecleos caudais em fila uacutenica
Ciclo evolutivo
bull Repasto sanguiacuteneo do inseto infectado
ndash As larvas L3 migram do laacutebio do vetor para a pele do HV
ndash Migram para os vasos linfaacuteticos e tornam-se vermes adultos
ndash Apoacutes 8 meses as fecircmeas graacutevidas produzem as primeiras microfilaacuterias
Periodicidade
bull Periodicidade noturna das microfilaacuterias
ndash Durante o dia localizam-se nos capilares profundos
ndash Durante a noite vasos sanguiacuteneos perifeacutericos
ndash Pico da microfilaremia meia-noite coincidindo com o horaacuterio de hematofagismo do inseto transmissor
Patologia
bull Periacuteodo assintomaacutetico bull Fase aguda bull Processos inflamatoacuterios produzidos por larvas L4 e adultos jovens
que colonizam as vias linfaacuteticas ndash Linfadenites linfonodos inguinais epitrocleanos e axilares com
desenvolvimento de granulomas com calcificaccedilatildeo apoacutes a morte dos vermes
ndash Linfangite inflamaccedilatildeo e dilataccedilatildeo dos vasos linfaacuteticos ndash Febre mal estar ndash Funiculite filariana linfangite do cordatildeo espermaacutetico e varicocele
bull Fase crocircnica ndash Hidrocele ndash Linfedema ndash Quiluacuteria ndash Elefantiacutease
Quiluacuteria
Patologia
bull Processos obstrutivos ndash Formaccedilatildeo de novelos envolvidos por reaccedilatildeo
inflamatoacuteria e pela formaccedilatildeo de fibrose
ndash Estase e congestatildeo da linfa produzindo linfoedema tecidual
ndash Extravasamento produzindo derrame linfaacutetico ascite linfaacutetica linfuacuteria linforreacuteia linfotoacuterax linfocele etc
ndash A ruptura de vasos linfaacuteticos para o interior do sistema excretor urinaacuterio daacute origem agrave quiluacuteria
Patologia
bull Complicaccedilotildees associadas agrave filariose
ndash Elefantiacutease
bull Caracterizada por processo inflamatoacuterio e fibrose crocircnica do oacutergatildeo atingido
bull Hipertrofia da derme do tecido conjuntivo aumento exagerado do volume do oacutergatildeo com queratinizaccedilatildeo e rugosidade
bull A pele perde a elasticidade resseca e se torna sujeita a infecccedilotildees bacterianas
Patologia
bull Permanecimento na aacuterea endecircmica
bull Nuacutemero de larvas inoculadas
bull Frequecircncia das re-infecccedilotildees
bull O nuacutemero de acasalamento dos vermes e suas localizaccedilotildees anatocircmicas
bull A sensibilizaccedilatildeo do organismo e a intensidade das reaccedilotildees inflamatoacuterias do paciente
bull As infecccedilotildees bacterianas associadas
Diagnoacutestico
bull Pesquisa de microfilaacuterias no sangue perifeacuterico ndash 20 40 ou 60 microL- de preferecircncia entre as 10 h da noite e 4h da manhatilde
ndash Gota espessa Coloraccedilatildeo de Giemsa
ndash Meacutetodos de concentraccedilatildeo Filtraccedilatildeo em membrana de policarbonato milipore ou nucleopore
ndash Meacutetodo de Knott
bull Na fase crocircnica as microfilaacuterias raramente satildeo detectadas no sangue perifeacuterico
Gota espessa
bull Possibilita a visualizaccedilatildeo da bainha fato que difere a microfilaria de W bancrofti de outro filariacutedeos sanguiacuteneos
bull Apresenta um baixo custo em comparaccedilatildeo com outras mais avanccediladas como a filtraccedilatildeo de sangue em membrana de policarbonato
bull Possui baixa sensibilidade natildeo indicada em situaccedilotildees em que os parasitados se mostram com baixa microfilaremia ou amicrofilarecircmicos
Concentraccedilatildeo
bull Baseia-se na passagem de sangue venoso atraveacutes de uma membrana (Milipore ou Nuclepore) de diacircmetro de 13 a 25 mm e poros de 5 ou 3 μm
bull O material retido na membrana sendo fixado corado e observado ao microscoacutepio
bull Essa teacutecnica assim como a de Knott permite a identificaccedilatildeo de indiviacuteduos com baixiacutessimas parasitemias (quantidade de microfilarias natildeo detectaacuteveis pela teacutecnica de gota espessa)
Teacutecnica de Knott
bull Retirar 2 ml de sangue total por punccedilatildeo venosa e colocar imediatamente em um tubo contendo 10 ml de formol a 2
bull Fechar o tubo e misture completamente invertendo-o e agitando-o O formol hemolisa as hemaacutecias mata fixa e distende as microfilaacuterias
bull Centrifugar o sangue a 1500 rpm por 5 minutos
bull Decantar o sobrenadante
Teacutecnica de Knott
bull Retirar o sedimento com uma pipeta Pasteur e espalhar a gota espessa sobre uma lacircmina
bull Deixar secar bem e corar com Giemsa
bull Examinar com objetiva de imersatildeo
bull Esta teacutecnica possibilita que o exame microscoacutepico laboratorial seja realizado vaacuterios dias apoacutes a coleta de material realizada no campo
Exames de imagem
bull Ultranossografia
ndash Possibilidade de visualizar os movimentos de vermes adultos vivos de W bancrofti em vaso linfaacutetico especificamente em vasos intraescrotais do cordatildeo espermaacutetico
ndash O movimento ativo e ininterrupto dos vermes adultos durante as 24 horas do dia eacute denominado sinal da ldquodanccedila das filaacuteriasrdquo
Diagnoacutestico soroloacutegico
bull Teste imunocromatograacutefico desenvolvido pelo ICT Diagnostic - ICT card
ndash Teste qualilativo
ndash Cartatildeo possui ac de antifilaacuteria e o controle eacute formado por ac anti Ig G humano
Plasmodium spp
Taxonomia
bull Reino Protozoa
bull FiloApicomplexa
bull Classe Sporozoea
bull Ordem Hemosporidiida
bull Famiacutelia Plasmodiidae
bull Gecircneros Plasmodium
bull Espeacutecie Pfalciparum Pvivax Povale e Pmalariae
Plasmodium
bull Ciclo bioloacutegico Hospedeiro vertebrado e invertebrado
bull Hospedeiro invertebrado ndash Vetor
ndash Fecircmeas hematoacutefagas do gecircnero Anopheles
ndash Brasil Anopheles (N)darlingi A (N) aquasalis A (N) albitarsis A (K) cruzii e A (K) bellator
ndash Possuem haacutebito noturno penetrando nas casas no crespuacutesculo saindo ao amanhecer
Plasmodium
bull Hospedeiro vertebrado homem
bull Transmissatildeo
ndash Vetor
ndash Transfusatildeo de sangue
ndash Compartilhamento de seringas
ndash Acidente com agulhas
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
bull Ciclo preacute-eritrociacutetico
ndash Forma inoculada esporozoiacutetos
ndash A fecircmea do anofelino infectado inocula no homem as formas infectantes localizadas na saliva
ndash Os esporozoiacutetas permancem na circulaccedilatildeo por aproximadamente uma hora
ndash Invadem os hepatoacutecitos e se diferenciam em trofozoiacutetas (criptozoiacuteto)
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
ndash Esquizogonia e formaccedilatildeo de esquizontes
ndash Divisatildeo nuclear e liberaccedilatildeo de merozoiacutetos
ndash Aproximadamente 10000 merozoiacutetos por hepatoacutecito
ndash Rompimento do hepatoacutecito e liberaccedilatildeo de merozoiacutetos na circulaccedilatildeo
ndash Duraccedilatildeo do ciclo aprox 1 a 2 semanas
Ciclo evolutivo
bull PVivax e Povale
ndash Alguns esporozoiacutetos geneticamente diferentes ficam na forma latente nos hepatoacutecitos permanecendo muitos meses Satildeo classificados como hipnozoiacuteto
ndash Satildeo responsaacuteveis pelas recaiacutedas tardias e formas de malaacuteria com periacuteodo de encubaccedilatildeo longo ndash 6 a 9 meses
FASE HEPAacuteTICA OU EXOERITROCIacuteTICA
Hepatoacutecito
FIacuteGADO
Invasatildeo do hepatoacutecito
Reproduccedilatildeo Assexuada
Esporozoiacutetos Lise dos hepatoacutecitos
Liberaccedilatildeo dos protozoaacuterios na corrente sanguumliacutenea
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
bull Ciclo eritrociacutetico
ndash Os merozoiacutetos invadem as hemaacutecias
ndash Diferenciaccedilatildeo em trofozoiacutetos
ndash Esquizogonia esquizonte
ndash Produccedilatildeo de merozoiacutetos e rompimento da hemaacutecia
ndash Merozoiacutetos invasatildeo de novas hemaacutecias
ndash Apoacutes algumas geraccedilotildees os merozoiacutetos natildeo mais se dividem e se diferenciam em gametoacutecitos ndash micro e macrogametoacutecito
FASE ERITROCIacuteTICA
Hepatoacutecito destruiacutedo pelos protozoaacuterios
Penetraccedilatildeo dos protozoaacuterios
Reproduccedilatildeo assexuada
Protozoaacuterios destroem as hemaacutecias
Diferenciaccedilatildeo em gametoacutecitos
Fecircmeas de Anopheles sugam hemaacutecias com gametoacutecitos
Ciclo no hospedeiro invertebrado
Ocorre nas hemaacutecias ou Eritroacutecitos
nas hemaacutecias
Protozoaacuterio no interior da hemaacutecia
Hemaacutecia com gametoacutecito
T trofozoiacuteto Em esquizonte com merozoiacuteto
Fase eritrociacutetica
bull Ciclo sanguiacuteneo ndash Pfalciparum P vivax e Povale 48 horas
ndash Pmalariae 72 horas
ndash Fonte de nutriccedilatildeo do Plasmodium no ciclo sanguiacuteneo hemoglobina
ndash Produccedilatildeo do pigmento malaacuterico hemozoiacutena bull Granulaccedilotildees de Schuffner Plasmodium vivax
bull Granulaccedilotildees de Maurer P falciparum
bull Granulaccedilotildees de Ziemann P malariae
ndash Fagocitose pelas ceacutelulas de Kuppffer e macroacutefagos do baccedilo
Trofozoiacutetos Pfalciparum
Trofozoiacutetos Pfalciparum
Esquizonte ndash P falciparum
Raros no sangue perifeacuterico Possuem 2 a 24 merozoiacutetos
Ocupam 23 do gloacutebulo vermelho
Gametoacutecitos Pfalciparum
Ciclo evolutivo Pvivax
Esquizonte ndash P vivax
Satildeo grandes e ameboacuteides Cromatina organizada em duas ou mais massas
Possuem 2 a 24 merozoiacutetos com pontos de cromatina
Gametoacutecito ndash Pvivax
Macrogametoacutecitos satildeo redondos ou ovais e ocupam toda ceacutelula hospedeira O citoplasma eacute geralmente corado de azul mais escuro e conteacutem pigmento marrom Microgametoacutecitos satildeo geralmente do tamanho de um RBC natildeo infectados com citoplasma corados de azul paacutelido rosa ou cinza
Trofozoiacutetos - P malariae
Esquizontes ndash P malariae
Aproximadamente 6 a 12 merozoiacutetos com arranjo de rosetas
Gametoacutecitos ndash P malariae
Ciclo evolutivo ndash HI
bull Ingestatildeo de hemaacutecias contendo gametoacutecitos durante o repasto sanguiacuteneo da fecircmea do anofelino
bull No intestino meacutedio do vetor gametogecircnese ndash Macrogametoacutecito ndash macrogameta feminino ndash Microgametoacutecito o processo de exflagelaccedilatildeo daacute
origem a 8 microgametas masculinos ndash Produccedilatildeo de ovo ou zigoto ndash O ovo encista na camada epitelial do intestino meacutedio
oocisto ndash Esporogonia liberaccedilatildeo de esporozoiacutetos
Ciclo evolutivo ndash HInvertebrado
ndash Os esporozoiacutetos satildeo transportados pelo hemolinfa ateacute as glacircndulas salivares do vetor ateacute atingirem o ducto salivar
bull Inoculaccedilatildeo no hospedeiro vertebrado atraveacutes da picada do inseto
Hemaacutecia com gametoacutecito
Fecircmeas de Anopheles sugam hemaacutecias com gametoacutecitos
CICLO NO INVERTEBRADO
No tubo digestivo
Zigoto
Penetraccedilatildeo na parede do tubo
digestivo
Migraccedilatildeo para as glacircndulas salivares
Desenvolvimento
Mosquito infectado
Diagnoacutestico
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado e espesso corado pelo Giemsa
bull Sangue colhido sem anticoagulante para melhor fixaccedilatildeo em lacircmina
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo espesso eacute mais eficiente para detecccedilatildeo da infecccedilatildeo
bull Esfregaccedilo delgado eacute mais eficiente para diferenciaccedilatildeo morfoloacutegica das espeacutecies
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo semiquantitativo
ndash Exame de 100 campos microscoacutepicos com resultado expresso pelo sistema de cruzes
Parasitos contados Nuacutemero de campos
microscoacutepicos cruzes
40 a 60 100 +2
1 1 +
2-20 1 ++
21-200 1 +++
+ 200 1 ++++
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo quantitativo derivado de anaacutelise semiquantitativa
Contagem de parasitos por campo
Cruzes Parasitos por mm3
40 a 60100 +2 200-300
1 + 301-500
2-20 ++ 501 - 10000
21-200 +++ 10001 ndash 100000
+ 200 ++++ 100000 ou mais
Diagnoacutestico
bull P falciparum
ndash Parte do ciclo celular aderido ao endoteacutelio capilar Encontro somente de trofozoitos e gametoacutecitos no sangue perifeacuterico
ndash Raramente os esquizontes satildeo encontrados no sangue perifeacuterico
Diagnoacutestico ndash Pvivax ndash Encontro de todas as formas de desenvolvimento ndash
trofozoiacuteto jovem maduro esquizontes e gametoacutecitos
ndash Os trofozoiacutetos maduros tecircm geralmente um aspecto irregular com extensotildees ameboacuteides em seu citoplasma
Diagnoacutestico ndash Pvivax
ndash Os gametoacutecitos femininos coram-se mais intensamente que os masculinos e apresentam nuacutecleo mais compacto geralmente em localizaccedilatildeo perifeacuterica
ndash O pigmento malaacuterico geralmente eacute abundante
Diagnoacutestico - Pmalariae
bull Realizado por meio de caracteriacutesticas morfoloacutegicas do parasito
ndash Verificaccedilatildeo em esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado
ndash Posiccedilatildeo equatorial do parasito
ndash Desenvolvimento sem deformaccedilatildeo do eritroacutecito
Diagnoacutestico
bull QBC ndash Teacutecnica que combina concentraccedilatildeo dos parasitos
pela centrifugaccedilatildeo do sangue em em microhematoacutecrito e a coloraccedilatildeo dos aacutecidos nucleacuteicos do parasito pelo fluorcromo laranja de acridina
ndash Utilizaccedilatildeo de tubos especiais e microscopia epifluorescente
ndash Teste raacutepido
ndash Alta sensibilidade
Diagnoacutestico
bull ParaSight-F ( Becton amp Dickinson)
ndash Teste raacutepido para captura da proteiacutena rica em histidina 2 de Pfalciparum( PfHRP2) e enzimas conservadas de 4 espeacutecies de plasmoacutedio (DHL e aldolase
ndash Utilizaccedilatildeo de fita de nitrocelulose contendo ac monoclonal
ndash Lise de uma gota de sangue
ndash A reaccedilatildeo eacute revelada com adiccedilatildeo de ac policlonal anti-HRP2 conjugado com lipossomas contendo corante
Diagnoacutestico
bull PCR
ndash Sensibilidade e especificidade maior do que o esfregaccedilo sanguiacuteneo
Tripomastigota
Cinetoplasto posterior ao nuacutecleo
cinetoplasto
Tripomastigota
Epimastigota
Cinetoplasto anterior ao nuacutecleo
Amastigota
Amastigotas Amastigotas e tripomastigotas
Monoacutecito parasitado com as formas amastigotas
Doenccedila de Chagas
bull Trypanosoma cruzi (Chagas 1909)
Diagnoacutestico laboratorial Fase aguda
bull Alta parasitemia
bull Pesquisa do parasito
ndash Exame de sangue a fresco
ndash Exame de sangue em gota espessa
ndash Esfregaccedilo sanguiacuteneo corado pelo Giemsa
ndash Microhematoacutecrito
ndash Meacutetodos de concentraccedilatildeo
ndash Inoculaccedilatildeo em aninais
Exame direto a fresco
bull Parasitas abundantes nos primeiros dias e semanas de incubaccedilatildeo
bull Colocar uma gota de sangue entre lacircmina e lamiacutenula e examinar imediatamente apoacutes a coleta para evitar a coagulaccedilatildeo
bull Para retardar a coagulaccedilatildeo adicionar uma gota de soluccedilatildeo salina
bull Analisar em microscoacutepio oacuteptico a presenccedila das formas tripomastigotas
Exame de sangue em gota espessa
bull Analisa uma maior quantidade de material bioloacutegico
bull Verifica a presenccedila de formas tripomastigotas sanguiacuteneas ndash Colocar 3 gotas de sangue na lacircmina ndash Com o canto de outra espalhar o material em uma
aacuterea de aproximadamente 1 cm da lacircmina ndash Deixar secar ao ar durante 6 horas Natildeo ultrapassar 36
horas ndash Corar pelo Giemsa Deixar em repouso por 30 min ndash Lavar e examinar
Esfregaccedilo sanguiacuteneo
bull Colocar uma gota de sangue na extremidade direita da lacircmina
bull Pegar outra lacircmina segurar por cima com a matildeo direita e com uma inclinaccedilatildeo de 45deg encostar adiante da gota
bull Deixar mesma se espalhar pela superfiacutecie de contato das duas lacircminas
bull Puxar a gota espalhada ateacute o final de lacircmina
bull Secar e corar pelo Giemsa ou Leishman
Esfregaccedilo sanguiacuteneo
Microhematoacutecrito Creme leucocitaacuterio
Microhematoacutecrito
bull Colher sangue em tubo capilar
bull Centrifugar em microcentriacutefuga por 5 minutos agrave 10000 rpm
bull Avaliar o microhematocrito em microscopia oacuteptica
bull Verificar a presenccedila das formas tripomastigotas presentes no creme leucocitaacuterio
bull Se positivo realizar esfregaccedilo do creme leucocitaacuterio
bull Fixar com aacutelcool metiacutelico e corar com Gienza Analisar em microscoacutepio oacuteptico
Meacutetodo de concentraccedilatildeo
bull Meacutetodo de Strout
ndash Realizar a coleta de sangue em tubo sem anticoagulante
ndash Aguardar a retraccedilatildeo do coaacutegulo Os parasitas concentrar-se-atildeo no soro a medida que ocorrer a retraccedilatildeo do coaacutegulo
ndash O soro eacute centrifugado para anaacutelise do sedimento
Inoculaccedilatildeo em animais
bull Inoculaccedilatildeo de sangue ou creme leucocitaacuterio em camundongos jovens
bull Inoculaccedilatildeo intra-peritoneal intra-conjuntival e a via oral
bull Avaliaccedilatildeo das formas de Tcruzi
bull Teacutecnica utilizada em pesquisa
Diagnoacutestico laboratorial Fase crocircnica
bull Xenodiagnoacutestico bull Hemocultura bull Reaccedilatildeo de hemaglutinaccedilatildeo indireta bull RIFI bull ELISA bull PCR bull PaGIA bull LMCo bull Pesquisa de anticorpos antitripomastigotas vivos
Hemocultura
bull Meio LIT ndash Liver Infusion Triptose
bull Meio NNN ndash McNeal Novy e Nicolle
bull Utilizaccedilatildeo de 30ml de sangue heparinizado
bull Centrifugaccedilatildeo por 30 minutos em 3000 rpm
bull Despreza-se o plasma e o sedimento celular eacute lavado com meio LIT ( Liver Infusion Triptose) para eliminaccedilatildeo de possiacuteveis anticorpos
Hemocultura
bull Sedimento distribuiacutedo em 6 tubos com 5 ml de LIT
bull Os tubos satildeo mantidos a 28degC homogeneizados 3x semana e avaliados quinzenalmente ateacute 90 dias
bull Centrifugaccedilatildeo e avaliaccedilatildeo do sedimento de hemaacutecias
bull Leitura realizada pela observaccedilatildeo microscoacutepica de gotas do meio
bull Aumento da positividade para sangue processado imediatamente apoacutes a coleta cultivado em prazo de tempo maior (120 dias) e repeticcedilatildeo da teacutecnica por 3 vezes
Wuchereria bancrofti
Taxonomia
bull Reino Animalia
bull Filo Nematoda
bull Classe Secernentea
bull Ordem Filariidea
bull Superfamiacutelia Filarioidea
bull FamiacuteliaOnchocercidae
bull GecircnerosWuchereria
bull Espeacutecie Wbancrofti
Formas evolutivas
bull Heteroxecircnico
bull Hospedeiro vertebrado homem
bull Hospedeiro intermediaacuterio Culex quinquefasciatus
bull Formas evolutivas ndash HV verme adulto (fecircmea e macho) localizados nos
vasos e gacircnglios linfaacuteticos da regiatildeo abdominal peacutelvica (perna e escroto) mamas e braccedilo
ndash microfilaacuterias eliminadas pelas fecircmeas graacutevidas Saem dos ductos linfaacuteticos e atingem circulaccedilatildeo sanguiacutenea
ndash HI larva L1 L2 e L3 (infectante)
Culex quinquefasciatus
Morfologia
bull Macho 35 a 4 cm x 01mm com extremidade posterior enrrolada ventralmente
bull Fecircmea 7 a 10cm x 03 mm com vagina exteriorizada em uma vulva localizada proacutexima agrave extremidade anterior
bull Microfilaacuteria Presenccedila de bainha e estilete bucal na parte anterior que as diferencia de outros filariacutedeos sanguiacuteneos Possuem 250 a 300 microm e uma grande qtde de nuacutecleos
bull Larva L3 possui aproximadamente 15 a 20 mm de comprimento
Microfilaacuteria
Ciclo evolutivo
bull Fecircmea do inseto realiza o hematofagismo noturno e ingere as microfilaacuterias
bull Estocircmago do vetor microfilaacuterias perdem a bainha atravessam a parede do estocircmago e migram para os muacutesculos toraacutecicos ndash L1
bull Apoacutes 20 dias a larva estaacute na forma infectante L3 medindo aproximadamente 2mm
bull Migraccedilatildeo da larva para a proboacutescida concentrando-se no laacutebio do moquito
Microfilaacuteria Presenccedila de bainha Cauda pontuda com nuacutecleos grandes largos e bem separados Nuacutecleos caudais em fila uacutenica
Ciclo evolutivo
bull Repasto sanguiacuteneo do inseto infectado
ndash As larvas L3 migram do laacutebio do vetor para a pele do HV
ndash Migram para os vasos linfaacuteticos e tornam-se vermes adultos
ndash Apoacutes 8 meses as fecircmeas graacutevidas produzem as primeiras microfilaacuterias
Periodicidade
bull Periodicidade noturna das microfilaacuterias
ndash Durante o dia localizam-se nos capilares profundos
ndash Durante a noite vasos sanguiacuteneos perifeacutericos
ndash Pico da microfilaremia meia-noite coincidindo com o horaacuterio de hematofagismo do inseto transmissor
Patologia
bull Periacuteodo assintomaacutetico bull Fase aguda bull Processos inflamatoacuterios produzidos por larvas L4 e adultos jovens
que colonizam as vias linfaacuteticas ndash Linfadenites linfonodos inguinais epitrocleanos e axilares com
desenvolvimento de granulomas com calcificaccedilatildeo apoacutes a morte dos vermes
ndash Linfangite inflamaccedilatildeo e dilataccedilatildeo dos vasos linfaacuteticos ndash Febre mal estar ndash Funiculite filariana linfangite do cordatildeo espermaacutetico e varicocele
bull Fase crocircnica ndash Hidrocele ndash Linfedema ndash Quiluacuteria ndash Elefantiacutease
Quiluacuteria
Patologia
bull Processos obstrutivos ndash Formaccedilatildeo de novelos envolvidos por reaccedilatildeo
inflamatoacuteria e pela formaccedilatildeo de fibrose
ndash Estase e congestatildeo da linfa produzindo linfoedema tecidual
ndash Extravasamento produzindo derrame linfaacutetico ascite linfaacutetica linfuacuteria linforreacuteia linfotoacuterax linfocele etc
ndash A ruptura de vasos linfaacuteticos para o interior do sistema excretor urinaacuterio daacute origem agrave quiluacuteria
Patologia
bull Complicaccedilotildees associadas agrave filariose
ndash Elefantiacutease
bull Caracterizada por processo inflamatoacuterio e fibrose crocircnica do oacutergatildeo atingido
bull Hipertrofia da derme do tecido conjuntivo aumento exagerado do volume do oacutergatildeo com queratinizaccedilatildeo e rugosidade
bull A pele perde a elasticidade resseca e se torna sujeita a infecccedilotildees bacterianas
Patologia
bull Permanecimento na aacuterea endecircmica
bull Nuacutemero de larvas inoculadas
bull Frequecircncia das re-infecccedilotildees
bull O nuacutemero de acasalamento dos vermes e suas localizaccedilotildees anatocircmicas
bull A sensibilizaccedilatildeo do organismo e a intensidade das reaccedilotildees inflamatoacuterias do paciente
bull As infecccedilotildees bacterianas associadas
Diagnoacutestico
bull Pesquisa de microfilaacuterias no sangue perifeacuterico ndash 20 40 ou 60 microL- de preferecircncia entre as 10 h da noite e 4h da manhatilde
ndash Gota espessa Coloraccedilatildeo de Giemsa
ndash Meacutetodos de concentraccedilatildeo Filtraccedilatildeo em membrana de policarbonato milipore ou nucleopore
ndash Meacutetodo de Knott
bull Na fase crocircnica as microfilaacuterias raramente satildeo detectadas no sangue perifeacuterico
Gota espessa
bull Possibilita a visualizaccedilatildeo da bainha fato que difere a microfilaria de W bancrofti de outro filariacutedeos sanguiacuteneos
bull Apresenta um baixo custo em comparaccedilatildeo com outras mais avanccediladas como a filtraccedilatildeo de sangue em membrana de policarbonato
bull Possui baixa sensibilidade natildeo indicada em situaccedilotildees em que os parasitados se mostram com baixa microfilaremia ou amicrofilarecircmicos
Concentraccedilatildeo
bull Baseia-se na passagem de sangue venoso atraveacutes de uma membrana (Milipore ou Nuclepore) de diacircmetro de 13 a 25 mm e poros de 5 ou 3 μm
bull O material retido na membrana sendo fixado corado e observado ao microscoacutepio
bull Essa teacutecnica assim como a de Knott permite a identificaccedilatildeo de indiviacuteduos com baixiacutessimas parasitemias (quantidade de microfilarias natildeo detectaacuteveis pela teacutecnica de gota espessa)
Teacutecnica de Knott
bull Retirar 2 ml de sangue total por punccedilatildeo venosa e colocar imediatamente em um tubo contendo 10 ml de formol a 2
bull Fechar o tubo e misture completamente invertendo-o e agitando-o O formol hemolisa as hemaacutecias mata fixa e distende as microfilaacuterias
bull Centrifugar o sangue a 1500 rpm por 5 minutos
bull Decantar o sobrenadante
Teacutecnica de Knott
bull Retirar o sedimento com uma pipeta Pasteur e espalhar a gota espessa sobre uma lacircmina
bull Deixar secar bem e corar com Giemsa
bull Examinar com objetiva de imersatildeo
bull Esta teacutecnica possibilita que o exame microscoacutepico laboratorial seja realizado vaacuterios dias apoacutes a coleta de material realizada no campo
Exames de imagem
bull Ultranossografia
ndash Possibilidade de visualizar os movimentos de vermes adultos vivos de W bancrofti em vaso linfaacutetico especificamente em vasos intraescrotais do cordatildeo espermaacutetico
ndash O movimento ativo e ininterrupto dos vermes adultos durante as 24 horas do dia eacute denominado sinal da ldquodanccedila das filaacuteriasrdquo
Diagnoacutestico soroloacutegico
bull Teste imunocromatograacutefico desenvolvido pelo ICT Diagnostic - ICT card
ndash Teste qualilativo
ndash Cartatildeo possui ac de antifilaacuteria e o controle eacute formado por ac anti Ig G humano
Plasmodium spp
Taxonomia
bull Reino Protozoa
bull FiloApicomplexa
bull Classe Sporozoea
bull Ordem Hemosporidiida
bull Famiacutelia Plasmodiidae
bull Gecircneros Plasmodium
bull Espeacutecie Pfalciparum Pvivax Povale e Pmalariae
Plasmodium
bull Ciclo bioloacutegico Hospedeiro vertebrado e invertebrado
bull Hospedeiro invertebrado ndash Vetor
ndash Fecircmeas hematoacutefagas do gecircnero Anopheles
ndash Brasil Anopheles (N)darlingi A (N) aquasalis A (N) albitarsis A (K) cruzii e A (K) bellator
ndash Possuem haacutebito noturno penetrando nas casas no crespuacutesculo saindo ao amanhecer
Plasmodium
bull Hospedeiro vertebrado homem
bull Transmissatildeo
ndash Vetor
ndash Transfusatildeo de sangue
ndash Compartilhamento de seringas
ndash Acidente com agulhas
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
bull Ciclo preacute-eritrociacutetico
ndash Forma inoculada esporozoiacutetos
ndash A fecircmea do anofelino infectado inocula no homem as formas infectantes localizadas na saliva
ndash Os esporozoiacutetas permancem na circulaccedilatildeo por aproximadamente uma hora
ndash Invadem os hepatoacutecitos e se diferenciam em trofozoiacutetas (criptozoiacuteto)
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
ndash Esquizogonia e formaccedilatildeo de esquizontes
ndash Divisatildeo nuclear e liberaccedilatildeo de merozoiacutetos
ndash Aproximadamente 10000 merozoiacutetos por hepatoacutecito
ndash Rompimento do hepatoacutecito e liberaccedilatildeo de merozoiacutetos na circulaccedilatildeo
ndash Duraccedilatildeo do ciclo aprox 1 a 2 semanas
Ciclo evolutivo
bull PVivax e Povale
ndash Alguns esporozoiacutetos geneticamente diferentes ficam na forma latente nos hepatoacutecitos permanecendo muitos meses Satildeo classificados como hipnozoiacuteto
ndash Satildeo responsaacuteveis pelas recaiacutedas tardias e formas de malaacuteria com periacuteodo de encubaccedilatildeo longo ndash 6 a 9 meses
FASE HEPAacuteTICA OU EXOERITROCIacuteTICA
Hepatoacutecito
FIacuteGADO
Invasatildeo do hepatoacutecito
Reproduccedilatildeo Assexuada
Esporozoiacutetos Lise dos hepatoacutecitos
Liberaccedilatildeo dos protozoaacuterios na corrente sanguumliacutenea
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
bull Ciclo eritrociacutetico
ndash Os merozoiacutetos invadem as hemaacutecias
ndash Diferenciaccedilatildeo em trofozoiacutetos
ndash Esquizogonia esquizonte
ndash Produccedilatildeo de merozoiacutetos e rompimento da hemaacutecia
ndash Merozoiacutetos invasatildeo de novas hemaacutecias
ndash Apoacutes algumas geraccedilotildees os merozoiacutetos natildeo mais se dividem e se diferenciam em gametoacutecitos ndash micro e macrogametoacutecito
FASE ERITROCIacuteTICA
Hepatoacutecito destruiacutedo pelos protozoaacuterios
Penetraccedilatildeo dos protozoaacuterios
Reproduccedilatildeo assexuada
Protozoaacuterios destroem as hemaacutecias
Diferenciaccedilatildeo em gametoacutecitos
Fecircmeas de Anopheles sugam hemaacutecias com gametoacutecitos
Ciclo no hospedeiro invertebrado
Ocorre nas hemaacutecias ou Eritroacutecitos
nas hemaacutecias
Protozoaacuterio no interior da hemaacutecia
Hemaacutecia com gametoacutecito
T trofozoiacuteto Em esquizonte com merozoiacuteto
Fase eritrociacutetica
bull Ciclo sanguiacuteneo ndash Pfalciparum P vivax e Povale 48 horas
ndash Pmalariae 72 horas
ndash Fonte de nutriccedilatildeo do Plasmodium no ciclo sanguiacuteneo hemoglobina
ndash Produccedilatildeo do pigmento malaacuterico hemozoiacutena bull Granulaccedilotildees de Schuffner Plasmodium vivax
bull Granulaccedilotildees de Maurer P falciparum
bull Granulaccedilotildees de Ziemann P malariae
ndash Fagocitose pelas ceacutelulas de Kuppffer e macroacutefagos do baccedilo
Trofozoiacutetos Pfalciparum
Trofozoiacutetos Pfalciparum
Esquizonte ndash P falciparum
Raros no sangue perifeacuterico Possuem 2 a 24 merozoiacutetos
Ocupam 23 do gloacutebulo vermelho
Gametoacutecitos Pfalciparum
Ciclo evolutivo Pvivax
Esquizonte ndash P vivax
Satildeo grandes e ameboacuteides Cromatina organizada em duas ou mais massas
Possuem 2 a 24 merozoiacutetos com pontos de cromatina
Gametoacutecito ndash Pvivax
Macrogametoacutecitos satildeo redondos ou ovais e ocupam toda ceacutelula hospedeira O citoplasma eacute geralmente corado de azul mais escuro e conteacutem pigmento marrom Microgametoacutecitos satildeo geralmente do tamanho de um RBC natildeo infectados com citoplasma corados de azul paacutelido rosa ou cinza
Trofozoiacutetos - P malariae
Esquizontes ndash P malariae
Aproximadamente 6 a 12 merozoiacutetos com arranjo de rosetas
Gametoacutecitos ndash P malariae
Ciclo evolutivo ndash HI
bull Ingestatildeo de hemaacutecias contendo gametoacutecitos durante o repasto sanguiacuteneo da fecircmea do anofelino
bull No intestino meacutedio do vetor gametogecircnese ndash Macrogametoacutecito ndash macrogameta feminino ndash Microgametoacutecito o processo de exflagelaccedilatildeo daacute
origem a 8 microgametas masculinos ndash Produccedilatildeo de ovo ou zigoto ndash O ovo encista na camada epitelial do intestino meacutedio
oocisto ndash Esporogonia liberaccedilatildeo de esporozoiacutetos
Ciclo evolutivo ndash HInvertebrado
ndash Os esporozoiacutetos satildeo transportados pelo hemolinfa ateacute as glacircndulas salivares do vetor ateacute atingirem o ducto salivar
bull Inoculaccedilatildeo no hospedeiro vertebrado atraveacutes da picada do inseto
Hemaacutecia com gametoacutecito
Fecircmeas de Anopheles sugam hemaacutecias com gametoacutecitos
CICLO NO INVERTEBRADO
No tubo digestivo
Zigoto
Penetraccedilatildeo na parede do tubo
digestivo
Migraccedilatildeo para as glacircndulas salivares
Desenvolvimento
Mosquito infectado
Diagnoacutestico
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado e espesso corado pelo Giemsa
bull Sangue colhido sem anticoagulante para melhor fixaccedilatildeo em lacircmina
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo espesso eacute mais eficiente para detecccedilatildeo da infecccedilatildeo
bull Esfregaccedilo delgado eacute mais eficiente para diferenciaccedilatildeo morfoloacutegica das espeacutecies
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo semiquantitativo
ndash Exame de 100 campos microscoacutepicos com resultado expresso pelo sistema de cruzes
Parasitos contados Nuacutemero de campos
microscoacutepicos cruzes
40 a 60 100 +2
1 1 +
2-20 1 ++
21-200 1 +++
+ 200 1 ++++
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo quantitativo derivado de anaacutelise semiquantitativa
Contagem de parasitos por campo
Cruzes Parasitos por mm3
40 a 60100 +2 200-300
1 + 301-500
2-20 ++ 501 - 10000
21-200 +++ 10001 ndash 100000
+ 200 ++++ 100000 ou mais
Diagnoacutestico
bull P falciparum
ndash Parte do ciclo celular aderido ao endoteacutelio capilar Encontro somente de trofozoitos e gametoacutecitos no sangue perifeacuterico
ndash Raramente os esquizontes satildeo encontrados no sangue perifeacuterico
Diagnoacutestico ndash Pvivax ndash Encontro de todas as formas de desenvolvimento ndash
trofozoiacuteto jovem maduro esquizontes e gametoacutecitos
ndash Os trofozoiacutetos maduros tecircm geralmente um aspecto irregular com extensotildees ameboacuteides em seu citoplasma
Diagnoacutestico ndash Pvivax
ndash Os gametoacutecitos femininos coram-se mais intensamente que os masculinos e apresentam nuacutecleo mais compacto geralmente em localizaccedilatildeo perifeacuterica
ndash O pigmento malaacuterico geralmente eacute abundante
Diagnoacutestico - Pmalariae
bull Realizado por meio de caracteriacutesticas morfoloacutegicas do parasito
ndash Verificaccedilatildeo em esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado
ndash Posiccedilatildeo equatorial do parasito
ndash Desenvolvimento sem deformaccedilatildeo do eritroacutecito
Diagnoacutestico
bull QBC ndash Teacutecnica que combina concentraccedilatildeo dos parasitos
pela centrifugaccedilatildeo do sangue em em microhematoacutecrito e a coloraccedilatildeo dos aacutecidos nucleacuteicos do parasito pelo fluorcromo laranja de acridina
ndash Utilizaccedilatildeo de tubos especiais e microscopia epifluorescente
ndash Teste raacutepido
ndash Alta sensibilidade
Diagnoacutestico
bull ParaSight-F ( Becton amp Dickinson)
ndash Teste raacutepido para captura da proteiacutena rica em histidina 2 de Pfalciparum( PfHRP2) e enzimas conservadas de 4 espeacutecies de plasmoacutedio (DHL e aldolase
ndash Utilizaccedilatildeo de fita de nitrocelulose contendo ac monoclonal
ndash Lise de uma gota de sangue
ndash A reaccedilatildeo eacute revelada com adiccedilatildeo de ac policlonal anti-HRP2 conjugado com lipossomas contendo corante
Diagnoacutestico
bull PCR
ndash Sensibilidade e especificidade maior do que o esfregaccedilo sanguiacuteneo
cinetoplasto
Tripomastigota
Epimastigota
Cinetoplasto anterior ao nuacutecleo
Amastigota
Amastigotas Amastigotas e tripomastigotas
Monoacutecito parasitado com as formas amastigotas
Doenccedila de Chagas
bull Trypanosoma cruzi (Chagas 1909)
Diagnoacutestico laboratorial Fase aguda
bull Alta parasitemia
bull Pesquisa do parasito
ndash Exame de sangue a fresco
ndash Exame de sangue em gota espessa
ndash Esfregaccedilo sanguiacuteneo corado pelo Giemsa
ndash Microhematoacutecrito
ndash Meacutetodos de concentraccedilatildeo
ndash Inoculaccedilatildeo em aninais
Exame direto a fresco
bull Parasitas abundantes nos primeiros dias e semanas de incubaccedilatildeo
bull Colocar uma gota de sangue entre lacircmina e lamiacutenula e examinar imediatamente apoacutes a coleta para evitar a coagulaccedilatildeo
bull Para retardar a coagulaccedilatildeo adicionar uma gota de soluccedilatildeo salina
bull Analisar em microscoacutepio oacuteptico a presenccedila das formas tripomastigotas
Exame de sangue em gota espessa
bull Analisa uma maior quantidade de material bioloacutegico
bull Verifica a presenccedila de formas tripomastigotas sanguiacuteneas ndash Colocar 3 gotas de sangue na lacircmina ndash Com o canto de outra espalhar o material em uma
aacuterea de aproximadamente 1 cm da lacircmina ndash Deixar secar ao ar durante 6 horas Natildeo ultrapassar 36
horas ndash Corar pelo Giemsa Deixar em repouso por 30 min ndash Lavar e examinar
Esfregaccedilo sanguiacuteneo
bull Colocar uma gota de sangue na extremidade direita da lacircmina
bull Pegar outra lacircmina segurar por cima com a matildeo direita e com uma inclinaccedilatildeo de 45deg encostar adiante da gota
bull Deixar mesma se espalhar pela superfiacutecie de contato das duas lacircminas
bull Puxar a gota espalhada ateacute o final de lacircmina
bull Secar e corar pelo Giemsa ou Leishman
Esfregaccedilo sanguiacuteneo
Microhematoacutecrito Creme leucocitaacuterio
Microhematoacutecrito
bull Colher sangue em tubo capilar
bull Centrifugar em microcentriacutefuga por 5 minutos agrave 10000 rpm
bull Avaliar o microhematocrito em microscopia oacuteptica
bull Verificar a presenccedila das formas tripomastigotas presentes no creme leucocitaacuterio
bull Se positivo realizar esfregaccedilo do creme leucocitaacuterio
bull Fixar com aacutelcool metiacutelico e corar com Gienza Analisar em microscoacutepio oacuteptico
Meacutetodo de concentraccedilatildeo
bull Meacutetodo de Strout
ndash Realizar a coleta de sangue em tubo sem anticoagulante
ndash Aguardar a retraccedilatildeo do coaacutegulo Os parasitas concentrar-se-atildeo no soro a medida que ocorrer a retraccedilatildeo do coaacutegulo
ndash O soro eacute centrifugado para anaacutelise do sedimento
Inoculaccedilatildeo em animais
bull Inoculaccedilatildeo de sangue ou creme leucocitaacuterio em camundongos jovens
bull Inoculaccedilatildeo intra-peritoneal intra-conjuntival e a via oral
bull Avaliaccedilatildeo das formas de Tcruzi
bull Teacutecnica utilizada em pesquisa
Diagnoacutestico laboratorial Fase crocircnica
bull Xenodiagnoacutestico bull Hemocultura bull Reaccedilatildeo de hemaglutinaccedilatildeo indireta bull RIFI bull ELISA bull PCR bull PaGIA bull LMCo bull Pesquisa de anticorpos antitripomastigotas vivos
Hemocultura
bull Meio LIT ndash Liver Infusion Triptose
bull Meio NNN ndash McNeal Novy e Nicolle
bull Utilizaccedilatildeo de 30ml de sangue heparinizado
bull Centrifugaccedilatildeo por 30 minutos em 3000 rpm
bull Despreza-se o plasma e o sedimento celular eacute lavado com meio LIT ( Liver Infusion Triptose) para eliminaccedilatildeo de possiacuteveis anticorpos
Hemocultura
bull Sedimento distribuiacutedo em 6 tubos com 5 ml de LIT
bull Os tubos satildeo mantidos a 28degC homogeneizados 3x semana e avaliados quinzenalmente ateacute 90 dias
bull Centrifugaccedilatildeo e avaliaccedilatildeo do sedimento de hemaacutecias
bull Leitura realizada pela observaccedilatildeo microscoacutepica de gotas do meio
bull Aumento da positividade para sangue processado imediatamente apoacutes a coleta cultivado em prazo de tempo maior (120 dias) e repeticcedilatildeo da teacutecnica por 3 vezes
Wuchereria bancrofti
Taxonomia
bull Reino Animalia
bull Filo Nematoda
bull Classe Secernentea
bull Ordem Filariidea
bull Superfamiacutelia Filarioidea
bull FamiacuteliaOnchocercidae
bull GecircnerosWuchereria
bull Espeacutecie Wbancrofti
Formas evolutivas
bull Heteroxecircnico
bull Hospedeiro vertebrado homem
bull Hospedeiro intermediaacuterio Culex quinquefasciatus
bull Formas evolutivas ndash HV verme adulto (fecircmea e macho) localizados nos
vasos e gacircnglios linfaacuteticos da regiatildeo abdominal peacutelvica (perna e escroto) mamas e braccedilo
ndash microfilaacuterias eliminadas pelas fecircmeas graacutevidas Saem dos ductos linfaacuteticos e atingem circulaccedilatildeo sanguiacutenea
ndash HI larva L1 L2 e L3 (infectante)
Culex quinquefasciatus
Morfologia
bull Macho 35 a 4 cm x 01mm com extremidade posterior enrrolada ventralmente
bull Fecircmea 7 a 10cm x 03 mm com vagina exteriorizada em uma vulva localizada proacutexima agrave extremidade anterior
bull Microfilaacuteria Presenccedila de bainha e estilete bucal na parte anterior que as diferencia de outros filariacutedeos sanguiacuteneos Possuem 250 a 300 microm e uma grande qtde de nuacutecleos
bull Larva L3 possui aproximadamente 15 a 20 mm de comprimento
Microfilaacuteria
Ciclo evolutivo
bull Fecircmea do inseto realiza o hematofagismo noturno e ingere as microfilaacuterias
bull Estocircmago do vetor microfilaacuterias perdem a bainha atravessam a parede do estocircmago e migram para os muacutesculos toraacutecicos ndash L1
bull Apoacutes 20 dias a larva estaacute na forma infectante L3 medindo aproximadamente 2mm
bull Migraccedilatildeo da larva para a proboacutescida concentrando-se no laacutebio do moquito
Microfilaacuteria Presenccedila de bainha Cauda pontuda com nuacutecleos grandes largos e bem separados Nuacutecleos caudais em fila uacutenica
Ciclo evolutivo
bull Repasto sanguiacuteneo do inseto infectado
ndash As larvas L3 migram do laacutebio do vetor para a pele do HV
ndash Migram para os vasos linfaacuteticos e tornam-se vermes adultos
ndash Apoacutes 8 meses as fecircmeas graacutevidas produzem as primeiras microfilaacuterias
Periodicidade
bull Periodicidade noturna das microfilaacuterias
ndash Durante o dia localizam-se nos capilares profundos
ndash Durante a noite vasos sanguiacuteneos perifeacutericos
ndash Pico da microfilaremia meia-noite coincidindo com o horaacuterio de hematofagismo do inseto transmissor
Patologia
bull Periacuteodo assintomaacutetico bull Fase aguda bull Processos inflamatoacuterios produzidos por larvas L4 e adultos jovens
que colonizam as vias linfaacuteticas ndash Linfadenites linfonodos inguinais epitrocleanos e axilares com
desenvolvimento de granulomas com calcificaccedilatildeo apoacutes a morte dos vermes
ndash Linfangite inflamaccedilatildeo e dilataccedilatildeo dos vasos linfaacuteticos ndash Febre mal estar ndash Funiculite filariana linfangite do cordatildeo espermaacutetico e varicocele
bull Fase crocircnica ndash Hidrocele ndash Linfedema ndash Quiluacuteria ndash Elefantiacutease
Quiluacuteria
Patologia
bull Processos obstrutivos ndash Formaccedilatildeo de novelos envolvidos por reaccedilatildeo
inflamatoacuteria e pela formaccedilatildeo de fibrose
ndash Estase e congestatildeo da linfa produzindo linfoedema tecidual
ndash Extravasamento produzindo derrame linfaacutetico ascite linfaacutetica linfuacuteria linforreacuteia linfotoacuterax linfocele etc
ndash A ruptura de vasos linfaacuteticos para o interior do sistema excretor urinaacuterio daacute origem agrave quiluacuteria
Patologia
bull Complicaccedilotildees associadas agrave filariose
ndash Elefantiacutease
bull Caracterizada por processo inflamatoacuterio e fibrose crocircnica do oacutergatildeo atingido
bull Hipertrofia da derme do tecido conjuntivo aumento exagerado do volume do oacutergatildeo com queratinizaccedilatildeo e rugosidade
bull A pele perde a elasticidade resseca e se torna sujeita a infecccedilotildees bacterianas
Patologia
bull Permanecimento na aacuterea endecircmica
bull Nuacutemero de larvas inoculadas
bull Frequecircncia das re-infecccedilotildees
bull O nuacutemero de acasalamento dos vermes e suas localizaccedilotildees anatocircmicas
bull A sensibilizaccedilatildeo do organismo e a intensidade das reaccedilotildees inflamatoacuterias do paciente
bull As infecccedilotildees bacterianas associadas
Diagnoacutestico
bull Pesquisa de microfilaacuterias no sangue perifeacuterico ndash 20 40 ou 60 microL- de preferecircncia entre as 10 h da noite e 4h da manhatilde
ndash Gota espessa Coloraccedilatildeo de Giemsa
ndash Meacutetodos de concentraccedilatildeo Filtraccedilatildeo em membrana de policarbonato milipore ou nucleopore
ndash Meacutetodo de Knott
bull Na fase crocircnica as microfilaacuterias raramente satildeo detectadas no sangue perifeacuterico
Gota espessa
bull Possibilita a visualizaccedilatildeo da bainha fato que difere a microfilaria de W bancrofti de outro filariacutedeos sanguiacuteneos
bull Apresenta um baixo custo em comparaccedilatildeo com outras mais avanccediladas como a filtraccedilatildeo de sangue em membrana de policarbonato
bull Possui baixa sensibilidade natildeo indicada em situaccedilotildees em que os parasitados se mostram com baixa microfilaremia ou amicrofilarecircmicos
Concentraccedilatildeo
bull Baseia-se na passagem de sangue venoso atraveacutes de uma membrana (Milipore ou Nuclepore) de diacircmetro de 13 a 25 mm e poros de 5 ou 3 μm
bull O material retido na membrana sendo fixado corado e observado ao microscoacutepio
bull Essa teacutecnica assim como a de Knott permite a identificaccedilatildeo de indiviacuteduos com baixiacutessimas parasitemias (quantidade de microfilarias natildeo detectaacuteveis pela teacutecnica de gota espessa)
Teacutecnica de Knott
bull Retirar 2 ml de sangue total por punccedilatildeo venosa e colocar imediatamente em um tubo contendo 10 ml de formol a 2
bull Fechar o tubo e misture completamente invertendo-o e agitando-o O formol hemolisa as hemaacutecias mata fixa e distende as microfilaacuterias
bull Centrifugar o sangue a 1500 rpm por 5 minutos
bull Decantar o sobrenadante
Teacutecnica de Knott
bull Retirar o sedimento com uma pipeta Pasteur e espalhar a gota espessa sobre uma lacircmina
bull Deixar secar bem e corar com Giemsa
bull Examinar com objetiva de imersatildeo
bull Esta teacutecnica possibilita que o exame microscoacutepico laboratorial seja realizado vaacuterios dias apoacutes a coleta de material realizada no campo
Exames de imagem
bull Ultranossografia
ndash Possibilidade de visualizar os movimentos de vermes adultos vivos de W bancrofti em vaso linfaacutetico especificamente em vasos intraescrotais do cordatildeo espermaacutetico
ndash O movimento ativo e ininterrupto dos vermes adultos durante as 24 horas do dia eacute denominado sinal da ldquodanccedila das filaacuteriasrdquo
Diagnoacutestico soroloacutegico
bull Teste imunocromatograacutefico desenvolvido pelo ICT Diagnostic - ICT card
ndash Teste qualilativo
ndash Cartatildeo possui ac de antifilaacuteria e o controle eacute formado por ac anti Ig G humano
Plasmodium spp
Taxonomia
bull Reino Protozoa
bull FiloApicomplexa
bull Classe Sporozoea
bull Ordem Hemosporidiida
bull Famiacutelia Plasmodiidae
bull Gecircneros Plasmodium
bull Espeacutecie Pfalciparum Pvivax Povale e Pmalariae
Plasmodium
bull Ciclo bioloacutegico Hospedeiro vertebrado e invertebrado
bull Hospedeiro invertebrado ndash Vetor
ndash Fecircmeas hematoacutefagas do gecircnero Anopheles
ndash Brasil Anopheles (N)darlingi A (N) aquasalis A (N) albitarsis A (K) cruzii e A (K) bellator
ndash Possuem haacutebito noturno penetrando nas casas no crespuacutesculo saindo ao amanhecer
Plasmodium
bull Hospedeiro vertebrado homem
bull Transmissatildeo
ndash Vetor
ndash Transfusatildeo de sangue
ndash Compartilhamento de seringas
ndash Acidente com agulhas
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
bull Ciclo preacute-eritrociacutetico
ndash Forma inoculada esporozoiacutetos
ndash A fecircmea do anofelino infectado inocula no homem as formas infectantes localizadas na saliva
ndash Os esporozoiacutetas permancem na circulaccedilatildeo por aproximadamente uma hora
ndash Invadem os hepatoacutecitos e se diferenciam em trofozoiacutetas (criptozoiacuteto)
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
ndash Esquizogonia e formaccedilatildeo de esquizontes
ndash Divisatildeo nuclear e liberaccedilatildeo de merozoiacutetos
ndash Aproximadamente 10000 merozoiacutetos por hepatoacutecito
ndash Rompimento do hepatoacutecito e liberaccedilatildeo de merozoiacutetos na circulaccedilatildeo
ndash Duraccedilatildeo do ciclo aprox 1 a 2 semanas
Ciclo evolutivo
bull PVivax e Povale
ndash Alguns esporozoiacutetos geneticamente diferentes ficam na forma latente nos hepatoacutecitos permanecendo muitos meses Satildeo classificados como hipnozoiacuteto
ndash Satildeo responsaacuteveis pelas recaiacutedas tardias e formas de malaacuteria com periacuteodo de encubaccedilatildeo longo ndash 6 a 9 meses
FASE HEPAacuteTICA OU EXOERITROCIacuteTICA
Hepatoacutecito
FIacuteGADO
Invasatildeo do hepatoacutecito
Reproduccedilatildeo Assexuada
Esporozoiacutetos Lise dos hepatoacutecitos
Liberaccedilatildeo dos protozoaacuterios na corrente sanguumliacutenea
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
bull Ciclo eritrociacutetico
ndash Os merozoiacutetos invadem as hemaacutecias
ndash Diferenciaccedilatildeo em trofozoiacutetos
ndash Esquizogonia esquizonte
ndash Produccedilatildeo de merozoiacutetos e rompimento da hemaacutecia
ndash Merozoiacutetos invasatildeo de novas hemaacutecias
ndash Apoacutes algumas geraccedilotildees os merozoiacutetos natildeo mais se dividem e se diferenciam em gametoacutecitos ndash micro e macrogametoacutecito
FASE ERITROCIacuteTICA
Hepatoacutecito destruiacutedo pelos protozoaacuterios
Penetraccedilatildeo dos protozoaacuterios
Reproduccedilatildeo assexuada
Protozoaacuterios destroem as hemaacutecias
Diferenciaccedilatildeo em gametoacutecitos
Fecircmeas de Anopheles sugam hemaacutecias com gametoacutecitos
Ciclo no hospedeiro invertebrado
Ocorre nas hemaacutecias ou Eritroacutecitos
nas hemaacutecias
Protozoaacuterio no interior da hemaacutecia
Hemaacutecia com gametoacutecito
T trofozoiacuteto Em esquizonte com merozoiacuteto
Fase eritrociacutetica
bull Ciclo sanguiacuteneo ndash Pfalciparum P vivax e Povale 48 horas
ndash Pmalariae 72 horas
ndash Fonte de nutriccedilatildeo do Plasmodium no ciclo sanguiacuteneo hemoglobina
ndash Produccedilatildeo do pigmento malaacuterico hemozoiacutena bull Granulaccedilotildees de Schuffner Plasmodium vivax
bull Granulaccedilotildees de Maurer P falciparum
bull Granulaccedilotildees de Ziemann P malariae
ndash Fagocitose pelas ceacutelulas de Kuppffer e macroacutefagos do baccedilo
Trofozoiacutetos Pfalciparum
Trofozoiacutetos Pfalciparum
Esquizonte ndash P falciparum
Raros no sangue perifeacuterico Possuem 2 a 24 merozoiacutetos
Ocupam 23 do gloacutebulo vermelho
Gametoacutecitos Pfalciparum
Ciclo evolutivo Pvivax
Esquizonte ndash P vivax
Satildeo grandes e ameboacuteides Cromatina organizada em duas ou mais massas
Possuem 2 a 24 merozoiacutetos com pontos de cromatina
Gametoacutecito ndash Pvivax
Macrogametoacutecitos satildeo redondos ou ovais e ocupam toda ceacutelula hospedeira O citoplasma eacute geralmente corado de azul mais escuro e conteacutem pigmento marrom Microgametoacutecitos satildeo geralmente do tamanho de um RBC natildeo infectados com citoplasma corados de azul paacutelido rosa ou cinza
Trofozoiacutetos - P malariae
Esquizontes ndash P malariae
Aproximadamente 6 a 12 merozoiacutetos com arranjo de rosetas
Gametoacutecitos ndash P malariae
Ciclo evolutivo ndash HI
bull Ingestatildeo de hemaacutecias contendo gametoacutecitos durante o repasto sanguiacuteneo da fecircmea do anofelino
bull No intestino meacutedio do vetor gametogecircnese ndash Macrogametoacutecito ndash macrogameta feminino ndash Microgametoacutecito o processo de exflagelaccedilatildeo daacute
origem a 8 microgametas masculinos ndash Produccedilatildeo de ovo ou zigoto ndash O ovo encista na camada epitelial do intestino meacutedio
oocisto ndash Esporogonia liberaccedilatildeo de esporozoiacutetos
Ciclo evolutivo ndash HInvertebrado
ndash Os esporozoiacutetos satildeo transportados pelo hemolinfa ateacute as glacircndulas salivares do vetor ateacute atingirem o ducto salivar
bull Inoculaccedilatildeo no hospedeiro vertebrado atraveacutes da picada do inseto
Hemaacutecia com gametoacutecito
Fecircmeas de Anopheles sugam hemaacutecias com gametoacutecitos
CICLO NO INVERTEBRADO
No tubo digestivo
Zigoto
Penetraccedilatildeo na parede do tubo
digestivo
Migraccedilatildeo para as glacircndulas salivares
Desenvolvimento
Mosquito infectado
Diagnoacutestico
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado e espesso corado pelo Giemsa
bull Sangue colhido sem anticoagulante para melhor fixaccedilatildeo em lacircmina
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo espesso eacute mais eficiente para detecccedilatildeo da infecccedilatildeo
bull Esfregaccedilo delgado eacute mais eficiente para diferenciaccedilatildeo morfoloacutegica das espeacutecies
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo semiquantitativo
ndash Exame de 100 campos microscoacutepicos com resultado expresso pelo sistema de cruzes
Parasitos contados Nuacutemero de campos
microscoacutepicos cruzes
40 a 60 100 +2
1 1 +
2-20 1 ++
21-200 1 +++
+ 200 1 ++++
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo quantitativo derivado de anaacutelise semiquantitativa
Contagem de parasitos por campo
Cruzes Parasitos por mm3
40 a 60100 +2 200-300
1 + 301-500
2-20 ++ 501 - 10000
21-200 +++ 10001 ndash 100000
+ 200 ++++ 100000 ou mais
Diagnoacutestico
bull P falciparum
ndash Parte do ciclo celular aderido ao endoteacutelio capilar Encontro somente de trofozoitos e gametoacutecitos no sangue perifeacuterico
ndash Raramente os esquizontes satildeo encontrados no sangue perifeacuterico
Diagnoacutestico ndash Pvivax ndash Encontro de todas as formas de desenvolvimento ndash
trofozoiacuteto jovem maduro esquizontes e gametoacutecitos
ndash Os trofozoiacutetos maduros tecircm geralmente um aspecto irregular com extensotildees ameboacuteides em seu citoplasma
Diagnoacutestico ndash Pvivax
ndash Os gametoacutecitos femininos coram-se mais intensamente que os masculinos e apresentam nuacutecleo mais compacto geralmente em localizaccedilatildeo perifeacuterica
ndash O pigmento malaacuterico geralmente eacute abundante
Diagnoacutestico - Pmalariae
bull Realizado por meio de caracteriacutesticas morfoloacutegicas do parasito
ndash Verificaccedilatildeo em esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado
ndash Posiccedilatildeo equatorial do parasito
ndash Desenvolvimento sem deformaccedilatildeo do eritroacutecito
Diagnoacutestico
bull QBC ndash Teacutecnica que combina concentraccedilatildeo dos parasitos
pela centrifugaccedilatildeo do sangue em em microhematoacutecrito e a coloraccedilatildeo dos aacutecidos nucleacuteicos do parasito pelo fluorcromo laranja de acridina
ndash Utilizaccedilatildeo de tubos especiais e microscopia epifluorescente
ndash Teste raacutepido
ndash Alta sensibilidade
Diagnoacutestico
bull ParaSight-F ( Becton amp Dickinson)
ndash Teste raacutepido para captura da proteiacutena rica em histidina 2 de Pfalciparum( PfHRP2) e enzimas conservadas de 4 espeacutecies de plasmoacutedio (DHL e aldolase
ndash Utilizaccedilatildeo de fita de nitrocelulose contendo ac monoclonal
ndash Lise de uma gota de sangue
ndash A reaccedilatildeo eacute revelada com adiccedilatildeo de ac policlonal anti-HRP2 conjugado com lipossomas contendo corante
Diagnoacutestico
bull PCR
ndash Sensibilidade e especificidade maior do que o esfregaccedilo sanguiacuteneo
Epimastigota
Cinetoplasto anterior ao nuacutecleo
Amastigota
Amastigotas Amastigotas e tripomastigotas
Monoacutecito parasitado com as formas amastigotas
Doenccedila de Chagas
bull Trypanosoma cruzi (Chagas 1909)
Diagnoacutestico laboratorial Fase aguda
bull Alta parasitemia
bull Pesquisa do parasito
ndash Exame de sangue a fresco
ndash Exame de sangue em gota espessa
ndash Esfregaccedilo sanguiacuteneo corado pelo Giemsa
ndash Microhematoacutecrito
ndash Meacutetodos de concentraccedilatildeo
ndash Inoculaccedilatildeo em aninais
Exame direto a fresco
bull Parasitas abundantes nos primeiros dias e semanas de incubaccedilatildeo
bull Colocar uma gota de sangue entre lacircmina e lamiacutenula e examinar imediatamente apoacutes a coleta para evitar a coagulaccedilatildeo
bull Para retardar a coagulaccedilatildeo adicionar uma gota de soluccedilatildeo salina
bull Analisar em microscoacutepio oacuteptico a presenccedila das formas tripomastigotas
Exame de sangue em gota espessa
bull Analisa uma maior quantidade de material bioloacutegico
bull Verifica a presenccedila de formas tripomastigotas sanguiacuteneas ndash Colocar 3 gotas de sangue na lacircmina ndash Com o canto de outra espalhar o material em uma
aacuterea de aproximadamente 1 cm da lacircmina ndash Deixar secar ao ar durante 6 horas Natildeo ultrapassar 36
horas ndash Corar pelo Giemsa Deixar em repouso por 30 min ndash Lavar e examinar
Esfregaccedilo sanguiacuteneo
bull Colocar uma gota de sangue na extremidade direita da lacircmina
bull Pegar outra lacircmina segurar por cima com a matildeo direita e com uma inclinaccedilatildeo de 45deg encostar adiante da gota
bull Deixar mesma se espalhar pela superfiacutecie de contato das duas lacircminas
bull Puxar a gota espalhada ateacute o final de lacircmina
bull Secar e corar pelo Giemsa ou Leishman
Esfregaccedilo sanguiacuteneo
Microhematoacutecrito Creme leucocitaacuterio
Microhematoacutecrito
bull Colher sangue em tubo capilar
bull Centrifugar em microcentriacutefuga por 5 minutos agrave 10000 rpm
bull Avaliar o microhematocrito em microscopia oacuteptica
bull Verificar a presenccedila das formas tripomastigotas presentes no creme leucocitaacuterio
bull Se positivo realizar esfregaccedilo do creme leucocitaacuterio
bull Fixar com aacutelcool metiacutelico e corar com Gienza Analisar em microscoacutepio oacuteptico
Meacutetodo de concentraccedilatildeo
bull Meacutetodo de Strout
ndash Realizar a coleta de sangue em tubo sem anticoagulante
ndash Aguardar a retraccedilatildeo do coaacutegulo Os parasitas concentrar-se-atildeo no soro a medida que ocorrer a retraccedilatildeo do coaacutegulo
ndash O soro eacute centrifugado para anaacutelise do sedimento
Inoculaccedilatildeo em animais
bull Inoculaccedilatildeo de sangue ou creme leucocitaacuterio em camundongos jovens
bull Inoculaccedilatildeo intra-peritoneal intra-conjuntival e a via oral
bull Avaliaccedilatildeo das formas de Tcruzi
bull Teacutecnica utilizada em pesquisa
Diagnoacutestico laboratorial Fase crocircnica
bull Xenodiagnoacutestico bull Hemocultura bull Reaccedilatildeo de hemaglutinaccedilatildeo indireta bull RIFI bull ELISA bull PCR bull PaGIA bull LMCo bull Pesquisa de anticorpos antitripomastigotas vivos
Hemocultura
bull Meio LIT ndash Liver Infusion Triptose
bull Meio NNN ndash McNeal Novy e Nicolle
bull Utilizaccedilatildeo de 30ml de sangue heparinizado
bull Centrifugaccedilatildeo por 30 minutos em 3000 rpm
bull Despreza-se o plasma e o sedimento celular eacute lavado com meio LIT ( Liver Infusion Triptose) para eliminaccedilatildeo de possiacuteveis anticorpos
Hemocultura
bull Sedimento distribuiacutedo em 6 tubos com 5 ml de LIT
bull Os tubos satildeo mantidos a 28degC homogeneizados 3x semana e avaliados quinzenalmente ateacute 90 dias
bull Centrifugaccedilatildeo e avaliaccedilatildeo do sedimento de hemaacutecias
bull Leitura realizada pela observaccedilatildeo microscoacutepica de gotas do meio
bull Aumento da positividade para sangue processado imediatamente apoacutes a coleta cultivado em prazo de tempo maior (120 dias) e repeticcedilatildeo da teacutecnica por 3 vezes
Wuchereria bancrofti
Taxonomia
bull Reino Animalia
bull Filo Nematoda
bull Classe Secernentea
bull Ordem Filariidea
bull Superfamiacutelia Filarioidea
bull FamiacuteliaOnchocercidae
bull GecircnerosWuchereria
bull Espeacutecie Wbancrofti
Formas evolutivas
bull Heteroxecircnico
bull Hospedeiro vertebrado homem
bull Hospedeiro intermediaacuterio Culex quinquefasciatus
bull Formas evolutivas ndash HV verme adulto (fecircmea e macho) localizados nos
vasos e gacircnglios linfaacuteticos da regiatildeo abdominal peacutelvica (perna e escroto) mamas e braccedilo
ndash microfilaacuterias eliminadas pelas fecircmeas graacutevidas Saem dos ductos linfaacuteticos e atingem circulaccedilatildeo sanguiacutenea
ndash HI larva L1 L2 e L3 (infectante)
Culex quinquefasciatus
Morfologia
bull Macho 35 a 4 cm x 01mm com extremidade posterior enrrolada ventralmente
bull Fecircmea 7 a 10cm x 03 mm com vagina exteriorizada em uma vulva localizada proacutexima agrave extremidade anterior
bull Microfilaacuteria Presenccedila de bainha e estilete bucal na parte anterior que as diferencia de outros filariacutedeos sanguiacuteneos Possuem 250 a 300 microm e uma grande qtde de nuacutecleos
bull Larva L3 possui aproximadamente 15 a 20 mm de comprimento
Microfilaacuteria
Ciclo evolutivo
bull Fecircmea do inseto realiza o hematofagismo noturno e ingere as microfilaacuterias
bull Estocircmago do vetor microfilaacuterias perdem a bainha atravessam a parede do estocircmago e migram para os muacutesculos toraacutecicos ndash L1
bull Apoacutes 20 dias a larva estaacute na forma infectante L3 medindo aproximadamente 2mm
bull Migraccedilatildeo da larva para a proboacutescida concentrando-se no laacutebio do moquito
Microfilaacuteria Presenccedila de bainha Cauda pontuda com nuacutecleos grandes largos e bem separados Nuacutecleos caudais em fila uacutenica
Ciclo evolutivo
bull Repasto sanguiacuteneo do inseto infectado
ndash As larvas L3 migram do laacutebio do vetor para a pele do HV
ndash Migram para os vasos linfaacuteticos e tornam-se vermes adultos
ndash Apoacutes 8 meses as fecircmeas graacutevidas produzem as primeiras microfilaacuterias
Periodicidade
bull Periodicidade noturna das microfilaacuterias
ndash Durante o dia localizam-se nos capilares profundos
ndash Durante a noite vasos sanguiacuteneos perifeacutericos
ndash Pico da microfilaremia meia-noite coincidindo com o horaacuterio de hematofagismo do inseto transmissor
Patologia
bull Periacuteodo assintomaacutetico bull Fase aguda bull Processos inflamatoacuterios produzidos por larvas L4 e adultos jovens
que colonizam as vias linfaacuteticas ndash Linfadenites linfonodos inguinais epitrocleanos e axilares com
desenvolvimento de granulomas com calcificaccedilatildeo apoacutes a morte dos vermes
ndash Linfangite inflamaccedilatildeo e dilataccedilatildeo dos vasos linfaacuteticos ndash Febre mal estar ndash Funiculite filariana linfangite do cordatildeo espermaacutetico e varicocele
bull Fase crocircnica ndash Hidrocele ndash Linfedema ndash Quiluacuteria ndash Elefantiacutease
Quiluacuteria
Patologia
bull Processos obstrutivos ndash Formaccedilatildeo de novelos envolvidos por reaccedilatildeo
inflamatoacuteria e pela formaccedilatildeo de fibrose
ndash Estase e congestatildeo da linfa produzindo linfoedema tecidual
ndash Extravasamento produzindo derrame linfaacutetico ascite linfaacutetica linfuacuteria linforreacuteia linfotoacuterax linfocele etc
ndash A ruptura de vasos linfaacuteticos para o interior do sistema excretor urinaacuterio daacute origem agrave quiluacuteria
Patologia
bull Complicaccedilotildees associadas agrave filariose
ndash Elefantiacutease
bull Caracterizada por processo inflamatoacuterio e fibrose crocircnica do oacutergatildeo atingido
bull Hipertrofia da derme do tecido conjuntivo aumento exagerado do volume do oacutergatildeo com queratinizaccedilatildeo e rugosidade
bull A pele perde a elasticidade resseca e se torna sujeita a infecccedilotildees bacterianas
Patologia
bull Permanecimento na aacuterea endecircmica
bull Nuacutemero de larvas inoculadas
bull Frequecircncia das re-infecccedilotildees
bull O nuacutemero de acasalamento dos vermes e suas localizaccedilotildees anatocircmicas
bull A sensibilizaccedilatildeo do organismo e a intensidade das reaccedilotildees inflamatoacuterias do paciente
bull As infecccedilotildees bacterianas associadas
Diagnoacutestico
bull Pesquisa de microfilaacuterias no sangue perifeacuterico ndash 20 40 ou 60 microL- de preferecircncia entre as 10 h da noite e 4h da manhatilde
ndash Gota espessa Coloraccedilatildeo de Giemsa
ndash Meacutetodos de concentraccedilatildeo Filtraccedilatildeo em membrana de policarbonato milipore ou nucleopore
ndash Meacutetodo de Knott
bull Na fase crocircnica as microfilaacuterias raramente satildeo detectadas no sangue perifeacuterico
Gota espessa
bull Possibilita a visualizaccedilatildeo da bainha fato que difere a microfilaria de W bancrofti de outro filariacutedeos sanguiacuteneos
bull Apresenta um baixo custo em comparaccedilatildeo com outras mais avanccediladas como a filtraccedilatildeo de sangue em membrana de policarbonato
bull Possui baixa sensibilidade natildeo indicada em situaccedilotildees em que os parasitados se mostram com baixa microfilaremia ou amicrofilarecircmicos
Concentraccedilatildeo
bull Baseia-se na passagem de sangue venoso atraveacutes de uma membrana (Milipore ou Nuclepore) de diacircmetro de 13 a 25 mm e poros de 5 ou 3 μm
bull O material retido na membrana sendo fixado corado e observado ao microscoacutepio
bull Essa teacutecnica assim como a de Knott permite a identificaccedilatildeo de indiviacuteduos com baixiacutessimas parasitemias (quantidade de microfilarias natildeo detectaacuteveis pela teacutecnica de gota espessa)
Teacutecnica de Knott
bull Retirar 2 ml de sangue total por punccedilatildeo venosa e colocar imediatamente em um tubo contendo 10 ml de formol a 2
bull Fechar o tubo e misture completamente invertendo-o e agitando-o O formol hemolisa as hemaacutecias mata fixa e distende as microfilaacuterias
bull Centrifugar o sangue a 1500 rpm por 5 minutos
bull Decantar o sobrenadante
Teacutecnica de Knott
bull Retirar o sedimento com uma pipeta Pasteur e espalhar a gota espessa sobre uma lacircmina
bull Deixar secar bem e corar com Giemsa
bull Examinar com objetiva de imersatildeo
bull Esta teacutecnica possibilita que o exame microscoacutepico laboratorial seja realizado vaacuterios dias apoacutes a coleta de material realizada no campo
Exames de imagem
bull Ultranossografia
ndash Possibilidade de visualizar os movimentos de vermes adultos vivos de W bancrofti em vaso linfaacutetico especificamente em vasos intraescrotais do cordatildeo espermaacutetico
ndash O movimento ativo e ininterrupto dos vermes adultos durante as 24 horas do dia eacute denominado sinal da ldquodanccedila das filaacuteriasrdquo
Diagnoacutestico soroloacutegico
bull Teste imunocromatograacutefico desenvolvido pelo ICT Diagnostic - ICT card
ndash Teste qualilativo
ndash Cartatildeo possui ac de antifilaacuteria e o controle eacute formado por ac anti Ig G humano
Plasmodium spp
Taxonomia
bull Reino Protozoa
bull FiloApicomplexa
bull Classe Sporozoea
bull Ordem Hemosporidiida
bull Famiacutelia Plasmodiidae
bull Gecircneros Plasmodium
bull Espeacutecie Pfalciparum Pvivax Povale e Pmalariae
Plasmodium
bull Ciclo bioloacutegico Hospedeiro vertebrado e invertebrado
bull Hospedeiro invertebrado ndash Vetor
ndash Fecircmeas hematoacutefagas do gecircnero Anopheles
ndash Brasil Anopheles (N)darlingi A (N) aquasalis A (N) albitarsis A (K) cruzii e A (K) bellator
ndash Possuem haacutebito noturno penetrando nas casas no crespuacutesculo saindo ao amanhecer
Plasmodium
bull Hospedeiro vertebrado homem
bull Transmissatildeo
ndash Vetor
ndash Transfusatildeo de sangue
ndash Compartilhamento de seringas
ndash Acidente com agulhas
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
bull Ciclo preacute-eritrociacutetico
ndash Forma inoculada esporozoiacutetos
ndash A fecircmea do anofelino infectado inocula no homem as formas infectantes localizadas na saliva
ndash Os esporozoiacutetas permancem na circulaccedilatildeo por aproximadamente uma hora
ndash Invadem os hepatoacutecitos e se diferenciam em trofozoiacutetas (criptozoiacuteto)
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
ndash Esquizogonia e formaccedilatildeo de esquizontes
ndash Divisatildeo nuclear e liberaccedilatildeo de merozoiacutetos
ndash Aproximadamente 10000 merozoiacutetos por hepatoacutecito
ndash Rompimento do hepatoacutecito e liberaccedilatildeo de merozoiacutetos na circulaccedilatildeo
ndash Duraccedilatildeo do ciclo aprox 1 a 2 semanas
Ciclo evolutivo
bull PVivax e Povale
ndash Alguns esporozoiacutetos geneticamente diferentes ficam na forma latente nos hepatoacutecitos permanecendo muitos meses Satildeo classificados como hipnozoiacuteto
ndash Satildeo responsaacuteveis pelas recaiacutedas tardias e formas de malaacuteria com periacuteodo de encubaccedilatildeo longo ndash 6 a 9 meses
FASE HEPAacuteTICA OU EXOERITROCIacuteTICA
Hepatoacutecito
FIacuteGADO
Invasatildeo do hepatoacutecito
Reproduccedilatildeo Assexuada
Esporozoiacutetos Lise dos hepatoacutecitos
Liberaccedilatildeo dos protozoaacuterios na corrente sanguumliacutenea
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
bull Ciclo eritrociacutetico
ndash Os merozoiacutetos invadem as hemaacutecias
ndash Diferenciaccedilatildeo em trofozoiacutetos
ndash Esquizogonia esquizonte
ndash Produccedilatildeo de merozoiacutetos e rompimento da hemaacutecia
ndash Merozoiacutetos invasatildeo de novas hemaacutecias
ndash Apoacutes algumas geraccedilotildees os merozoiacutetos natildeo mais se dividem e se diferenciam em gametoacutecitos ndash micro e macrogametoacutecito
FASE ERITROCIacuteTICA
Hepatoacutecito destruiacutedo pelos protozoaacuterios
Penetraccedilatildeo dos protozoaacuterios
Reproduccedilatildeo assexuada
Protozoaacuterios destroem as hemaacutecias
Diferenciaccedilatildeo em gametoacutecitos
Fecircmeas de Anopheles sugam hemaacutecias com gametoacutecitos
Ciclo no hospedeiro invertebrado
Ocorre nas hemaacutecias ou Eritroacutecitos
nas hemaacutecias
Protozoaacuterio no interior da hemaacutecia
Hemaacutecia com gametoacutecito
T trofozoiacuteto Em esquizonte com merozoiacuteto
Fase eritrociacutetica
bull Ciclo sanguiacuteneo ndash Pfalciparum P vivax e Povale 48 horas
ndash Pmalariae 72 horas
ndash Fonte de nutriccedilatildeo do Plasmodium no ciclo sanguiacuteneo hemoglobina
ndash Produccedilatildeo do pigmento malaacuterico hemozoiacutena bull Granulaccedilotildees de Schuffner Plasmodium vivax
bull Granulaccedilotildees de Maurer P falciparum
bull Granulaccedilotildees de Ziemann P malariae
ndash Fagocitose pelas ceacutelulas de Kuppffer e macroacutefagos do baccedilo
Trofozoiacutetos Pfalciparum
Trofozoiacutetos Pfalciparum
Esquizonte ndash P falciparum
Raros no sangue perifeacuterico Possuem 2 a 24 merozoiacutetos
Ocupam 23 do gloacutebulo vermelho
Gametoacutecitos Pfalciparum
Ciclo evolutivo Pvivax
Esquizonte ndash P vivax
Satildeo grandes e ameboacuteides Cromatina organizada em duas ou mais massas
Possuem 2 a 24 merozoiacutetos com pontos de cromatina
Gametoacutecito ndash Pvivax
Macrogametoacutecitos satildeo redondos ou ovais e ocupam toda ceacutelula hospedeira O citoplasma eacute geralmente corado de azul mais escuro e conteacutem pigmento marrom Microgametoacutecitos satildeo geralmente do tamanho de um RBC natildeo infectados com citoplasma corados de azul paacutelido rosa ou cinza
Trofozoiacutetos - P malariae
Esquizontes ndash P malariae
Aproximadamente 6 a 12 merozoiacutetos com arranjo de rosetas
Gametoacutecitos ndash P malariae
Ciclo evolutivo ndash HI
bull Ingestatildeo de hemaacutecias contendo gametoacutecitos durante o repasto sanguiacuteneo da fecircmea do anofelino
bull No intestino meacutedio do vetor gametogecircnese ndash Macrogametoacutecito ndash macrogameta feminino ndash Microgametoacutecito o processo de exflagelaccedilatildeo daacute
origem a 8 microgametas masculinos ndash Produccedilatildeo de ovo ou zigoto ndash O ovo encista na camada epitelial do intestino meacutedio
oocisto ndash Esporogonia liberaccedilatildeo de esporozoiacutetos
Ciclo evolutivo ndash HInvertebrado
ndash Os esporozoiacutetos satildeo transportados pelo hemolinfa ateacute as glacircndulas salivares do vetor ateacute atingirem o ducto salivar
bull Inoculaccedilatildeo no hospedeiro vertebrado atraveacutes da picada do inseto
Hemaacutecia com gametoacutecito
Fecircmeas de Anopheles sugam hemaacutecias com gametoacutecitos
CICLO NO INVERTEBRADO
No tubo digestivo
Zigoto
Penetraccedilatildeo na parede do tubo
digestivo
Migraccedilatildeo para as glacircndulas salivares
Desenvolvimento
Mosquito infectado
Diagnoacutestico
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado e espesso corado pelo Giemsa
bull Sangue colhido sem anticoagulante para melhor fixaccedilatildeo em lacircmina
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo espesso eacute mais eficiente para detecccedilatildeo da infecccedilatildeo
bull Esfregaccedilo delgado eacute mais eficiente para diferenciaccedilatildeo morfoloacutegica das espeacutecies
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo semiquantitativo
ndash Exame de 100 campos microscoacutepicos com resultado expresso pelo sistema de cruzes
Parasitos contados Nuacutemero de campos
microscoacutepicos cruzes
40 a 60 100 +2
1 1 +
2-20 1 ++
21-200 1 +++
+ 200 1 ++++
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo quantitativo derivado de anaacutelise semiquantitativa
Contagem de parasitos por campo
Cruzes Parasitos por mm3
40 a 60100 +2 200-300
1 + 301-500
2-20 ++ 501 - 10000
21-200 +++ 10001 ndash 100000
+ 200 ++++ 100000 ou mais
Diagnoacutestico
bull P falciparum
ndash Parte do ciclo celular aderido ao endoteacutelio capilar Encontro somente de trofozoitos e gametoacutecitos no sangue perifeacuterico
ndash Raramente os esquizontes satildeo encontrados no sangue perifeacuterico
Diagnoacutestico ndash Pvivax ndash Encontro de todas as formas de desenvolvimento ndash
trofozoiacuteto jovem maduro esquizontes e gametoacutecitos
ndash Os trofozoiacutetos maduros tecircm geralmente um aspecto irregular com extensotildees ameboacuteides em seu citoplasma
Diagnoacutestico ndash Pvivax
ndash Os gametoacutecitos femininos coram-se mais intensamente que os masculinos e apresentam nuacutecleo mais compacto geralmente em localizaccedilatildeo perifeacuterica
ndash O pigmento malaacuterico geralmente eacute abundante
Diagnoacutestico - Pmalariae
bull Realizado por meio de caracteriacutesticas morfoloacutegicas do parasito
ndash Verificaccedilatildeo em esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado
ndash Posiccedilatildeo equatorial do parasito
ndash Desenvolvimento sem deformaccedilatildeo do eritroacutecito
Diagnoacutestico
bull QBC ndash Teacutecnica que combina concentraccedilatildeo dos parasitos
pela centrifugaccedilatildeo do sangue em em microhematoacutecrito e a coloraccedilatildeo dos aacutecidos nucleacuteicos do parasito pelo fluorcromo laranja de acridina
ndash Utilizaccedilatildeo de tubos especiais e microscopia epifluorescente
ndash Teste raacutepido
ndash Alta sensibilidade
Diagnoacutestico
bull ParaSight-F ( Becton amp Dickinson)
ndash Teste raacutepido para captura da proteiacutena rica em histidina 2 de Pfalciparum( PfHRP2) e enzimas conservadas de 4 espeacutecies de plasmoacutedio (DHL e aldolase
ndash Utilizaccedilatildeo de fita de nitrocelulose contendo ac monoclonal
ndash Lise de uma gota de sangue
ndash A reaccedilatildeo eacute revelada com adiccedilatildeo de ac policlonal anti-HRP2 conjugado com lipossomas contendo corante
Diagnoacutestico
bull PCR
ndash Sensibilidade e especificidade maior do que o esfregaccedilo sanguiacuteneo
Amastigota
Amastigotas Amastigotas e tripomastigotas
Monoacutecito parasitado com as formas amastigotas
Doenccedila de Chagas
bull Trypanosoma cruzi (Chagas 1909)
Diagnoacutestico laboratorial Fase aguda
bull Alta parasitemia
bull Pesquisa do parasito
ndash Exame de sangue a fresco
ndash Exame de sangue em gota espessa
ndash Esfregaccedilo sanguiacuteneo corado pelo Giemsa
ndash Microhematoacutecrito
ndash Meacutetodos de concentraccedilatildeo
ndash Inoculaccedilatildeo em aninais
Exame direto a fresco
bull Parasitas abundantes nos primeiros dias e semanas de incubaccedilatildeo
bull Colocar uma gota de sangue entre lacircmina e lamiacutenula e examinar imediatamente apoacutes a coleta para evitar a coagulaccedilatildeo
bull Para retardar a coagulaccedilatildeo adicionar uma gota de soluccedilatildeo salina
bull Analisar em microscoacutepio oacuteptico a presenccedila das formas tripomastigotas
Exame de sangue em gota espessa
bull Analisa uma maior quantidade de material bioloacutegico
bull Verifica a presenccedila de formas tripomastigotas sanguiacuteneas ndash Colocar 3 gotas de sangue na lacircmina ndash Com o canto de outra espalhar o material em uma
aacuterea de aproximadamente 1 cm da lacircmina ndash Deixar secar ao ar durante 6 horas Natildeo ultrapassar 36
horas ndash Corar pelo Giemsa Deixar em repouso por 30 min ndash Lavar e examinar
Esfregaccedilo sanguiacuteneo
bull Colocar uma gota de sangue na extremidade direita da lacircmina
bull Pegar outra lacircmina segurar por cima com a matildeo direita e com uma inclinaccedilatildeo de 45deg encostar adiante da gota
bull Deixar mesma se espalhar pela superfiacutecie de contato das duas lacircminas
bull Puxar a gota espalhada ateacute o final de lacircmina
bull Secar e corar pelo Giemsa ou Leishman
Esfregaccedilo sanguiacuteneo
Microhematoacutecrito Creme leucocitaacuterio
Microhematoacutecrito
bull Colher sangue em tubo capilar
bull Centrifugar em microcentriacutefuga por 5 minutos agrave 10000 rpm
bull Avaliar o microhematocrito em microscopia oacuteptica
bull Verificar a presenccedila das formas tripomastigotas presentes no creme leucocitaacuterio
bull Se positivo realizar esfregaccedilo do creme leucocitaacuterio
bull Fixar com aacutelcool metiacutelico e corar com Gienza Analisar em microscoacutepio oacuteptico
Meacutetodo de concentraccedilatildeo
bull Meacutetodo de Strout
ndash Realizar a coleta de sangue em tubo sem anticoagulante
ndash Aguardar a retraccedilatildeo do coaacutegulo Os parasitas concentrar-se-atildeo no soro a medida que ocorrer a retraccedilatildeo do coaacutegulo
ndash O soro eacute centrifugado para anaacutelise do sedimento
Inoculaccedilatildeo em animais
bull Inoculaccedilatildeo de sangue ou creme leucocitaacuterio em camundongos jovens
bull Inoculaccedilatildeo intra-peritoneal intra-conjuntival e a via oral
bull Avaliaccedilatildeo das formas de Tcruzi
bull Teacutecnica utilizada em pesquisa
Diagnoacutestico laboratorial Fase crocircnica
bull Xenodiagnoacutestico bull Hemocultura bull Reaccedilatildeo de hemaglutinaccedilatildeo indireta bull RIFI bull ELISA bull PCR bull PaGIA bull LMCo bull Pesquisa de anticorpos antitripomastigotas vivos
Hemocultura
bull Meio LIT ndash Liver Infusion Triptose
bull Meio NNN ndash McNeal Novy e Nicolle
bull Utilizaccedilatildeo de 30ml de sangue heparinizado
bull Centrifugaccedilatildeo por 30 minutos em 3000 rpm
bull Despreza-se o plasma e o sedimento celular eacute lavado com meio LIT ( Liver Infusion Triptose) para eliminaccedilatildeo de possiacuteveis anticorpos
Hemocultura
bull Sedimento distribuiacutedo em 6 tubos com 5 ml de LIT
bull Os tubos satildeo mantidos a 28degC homogeneizados 3x semana e avaliados quinzenalmente ateacute 90 dias
bull Centrifugaccedilatildeo e avaliaccedilatildeo do sedimento de hemaacutecias
bull Leitura realizada pela observaccedilatildeo microscoacutepica de gotas do meio
bull Aumento da positividade para sangue processado imediatamente apoacutes a coleta cultivado em prazo de tempo maior (120 dias) e repeticcedilatildeo da teacutecnica por 3 vezes
Wuchereria bancrofti
Taxonomia
bull Reino Animalia
bull Filo Nematoda
bull Classe Secernentea
bull Ordem Filariidea
bull Superfamiacutelia Filarioidea
bull FamiacuteliaOnchocercidae
bull GecircnerosWuchereria
bull Espeacutecie Wbancrofti
Formas evolutivas
bull Heteroxecircnico
bull Hospedeiro vertebrado homem
bull Hospedeiro intermediaacuterio Culex quinquefasciatus
bull Formas evolutivas ndash HV verme adulto (fecircmea e macho) localizados nos
vasos e gacircnglios linfaacuteticos da regiatildeo abdominal peacutelvica (perna e escroto) mamas e braccedilo
ndash microfilaacuterias eliminadas pelas fecircmeas graacutevidas Saem dos ductos linfaacuteticos e atingem circulaccedilatildeo sanguiacutenea
ndash HI larva L1 L2 e L3 (infectante)
Culex quinquefasciatus
Morfologia
bull Macho 35 a 4 cm x 01mm com extremidade posterior enrrolada ventralmente
bull Fecircmea 7 a 10cm x 03 mm com vagina exteriorizada em uma vulva localizada proacutexima agrave extremidade anterior
bull Microfilaacuteria Presenccedila de bainha e estilete bucal na parte anterior que as diferencia de outros filariacutedeos sanguiacuteneos Possuem 250 a 300 microm e uma grande qtde de nuacutecleos
bull Larva L3 possui aproximadamente 15 a 20 mm de comprimento
Microfilaacuteria
Ciclo evolutivo
bull Fecircmea do inseto realiza o hematofagismo noturno e ingere as microfilaacuterias
bull Estocircmago do vetor microfilaacuterias perdem a bainha atravessam a parede do estocircmago e migram para os muacutesculos toraacutecicos ndash L1
bull Apoacutes 20 dias a larva estaacute na forma infectante L3 medindo aproximadamente 2mm
bull Migraccedilatildeo da larva para a proboacutescida concentrando-se no laacutebio do moquito
Microfilaacuteria Presenccedila de bainha Cauda pontuda com nuacutecleos grandes largos e bem separados Nuacutecleos caudais em fila uacutenica
Ciclo evolutivo
bull Repasto sanguiacuteneo do inseto infectado
ndash As larvas L3 migram do laacutebio do vetor para a pele do HV
ndash Migram para os vasos linfaacuteticos e tornam-se vermes adultos
ndash Apoacutes 8 meses as fecircmeas graacutevidas produzem as primeiras microfilaacuterias
Periodicidade
bull Periodicidade noturna das microfilaacuterias
ndash Durante o dia localizam-se nos capilares profundos
ndash Durante a noite vasos sanguiacuteneos perifeacutericos
ndash Pico da microfilaremia meia-noite coincidindo com o horaacuterio de hematofagismo do inseto transmissor
Patologia
bull Periacuteodo assintomaacutetico bull Fase aguda bull Processos inflamatoacuterios produzidos por larvas L4 e adultos jovens
que colonizam as vias linfaacuteticas ndash Linfadenites linfonodos inguinais epitrocleanos e axilares com
desenvolvimento de granulomas com calcificaccedilatildeo apoacutes a morte dos vermes
ndash Linfangite inflamaccedilatildeo e dilataccedilatildeo dos vasos linfaacuteticos ndash Febre mal estar ndash Funiculite filariana linfangite do cordatildeo espermaacutetico e varicocele
bull Fase crocircnica ndash Hidrocele ndash Linfedema ndash Quiluacuteria ndash Elefantiacutease
Quiluacuteria
Patologia
bull Processos obstrutivos ndash Formaccedilatildeo de novelos envolvidos por reaccedilatildeo
inflamatoacuteria e pela formaccedilatildeo de fibrose
ndash Estase e congestatildeo da linfa produzindo linfoedema tecidual
ndash Extravasamento produzindo derrame linfaacutetico ascite linfaacutetica linfuacuteria linforreacuteia linfotoacuterax linfocele etc
ndash A ruptura de vasos linfaacuteticos para o interior do sistema excretor urinaacuterio daacute origem agrave quiluacuteria
Patologia
bull Complicaccedilotildees associadas agrave filariose
ndash Elefantiacutease
bull Caracterizada por processo inflamatoacuterio e fibrose crocircnica do oacutergatildeo atingido
bull Hipertrofia da derme do tecido conjuntivo aumento exagerado do volume do oacutergatildeo com queratinizaccedilatildeo e rugosidade
bull A pele perde a elasticidade resseca e se torna sujeita a infecccedilotildees bacterianas
Patologia
bull Permanecimento na aacuterea endecircmica
bull Nuacutemero de larvas inoculadas
bull Frequecircncia das re-infecccedilotildees
bull O nuacutemero de acasalamento dos vermes e suas localizaccedilotildees anatocircmicas
bull A sensibilizaccedilatildeo do organismo e a intensidade das reaccedilotildees inflamatoacuterias do paciente
bull As infecccedilotildees bacterianas associadas
Diagnoacutestico
bull Pesquisa de microfilaacuterias no sangue perifeacuterico ndash 20 40 ou 60 microL- de preferecircncia entre as 10 h da noite e 4h da manhatilde
ndash Gota espessa Coloraccedilatildeo de Giemsa
ndash Meacutetodos de concentraccedilatildeo Filtraccedilatildeo em membrana de policarbonato milipore ou nucleopore
ndash Meacutetodo de Knott
bull Na fase crocircnica as microfilaacuterias raramente satildeo detectadas no sangue perifeacuterico
Gota espessa
bull Possibilita a visualizaccedilatildeo da bainha fato que difere a microfilaria de W bancrofti de outro filariacutedeos sanguiacuteneos
bull Apresenta um baixo custo em comparaccedilatildeo com outras mais avanccediladas como a filtraccedilatildeo de sangue em membrana de policarbonato
bull Possui baixa sensibilidade natildeo indicada em situaccedilotildees em que os parasitados se mostram com baixa microfilaremia ou amicrofilarecircmicos
Concentraccedilatildeo
bull Baseia-se na passagem de sangue venoso atraveacutes de uma membrana (Milipore ou Nuclepore) de diacircmetro de 13 a 25 mm e poros de 5 ou 3 μm
bull O material retido na membrana sendo fixado corado e observado ao microscoacutepio
bull Essa teacutecnica assim como a de Knott permite a identificaccedilatildeo de indiviacuteduos com baixiacutessimas parasitemias (quantidade de microfilarias natildeo detectaacuteveis pela teacutecnica de gota espessa)
Teacutecnica de Knott
bull Retirar 2 ml de sangue total por punccedilatildeo venosa e colocar imediatamente em um tubo contendo 10 ml de formol a 2
bull Fechar o tubo e misture completamente invertendo-o e agitando-o O formol hemolisa as hemaacutecias mata fixa e distende as microfilaacuterias
bull Centrifugar o sangue a 1500 rpm por 5 minutos
bull Decantar o sobrenadante
Teacutecnica de Knott
bull Retirar o sedimento com uma pipeta Pasteur e espalhar a gota espessa sobre uma lacircmina
bull Deixar secar bem e corar com Giemsa
bull Examinar com objetiva de imersatildeo
bull Esta teacutecnica possibilita que o exame microscoacutepico laboratorial seja realizado vaacuterios dias apoacutes a coleta de material realizada no campo
Exames de imagem
bull Ultranossografia
ndash Possibilidade de visualizar os movimentos de vermes adultos vivos de W bancrofti em vaso linfaacutetico especificamente em vasos intraescrotais do cordatildeo espermaacutetico
ndash O movimento ativo e ininterrupto dos vermes adultos durante as 24 horas do dia eacute denominado sinal da ldquodanccedila das filaacuteriasrdquo
Diagnoacutestico soroloacutegico
bull Teste imunocromatograacutefico desenvolvido pelo ICT Diagnostic - ICT card
ndash Teste qualilativo
ndash Cartatildeo possui ac de antifilaacuteria e o controle eacute formado por ac anti Ig G humano
Plasmodium spp
Taxonomia
bull Reino Protozoa
bull FiloApicomplexa
bull Classe Sporozoea
bull Ordem Hemosporidiida
bull Famiacutelia Plasmodiidae
bull Gecircneros Plasmodium
bull Espeacutecie Pfalciparum Pvivax Povale e Pmalariae
Plasmodium
bull Ciclo bioloacutegico Hospedeiro vertebrado e invertebrado
bull Hospedeiro invertebrado ndash Vetor
ndash Fecircmeas hematoacutefagas do gecircnero Anopheles
ndash Brasil Anopheles (N)darlingi A (N) aquasalis A (N) albitarsis A (K) cruzii e A (K) bellator
ndash Possuem haacutebito noturno penetrando nas casas no crespuacutesculo saindo ao amanhecer
Plasmodium
bull Hospedeiro vertebrado homem
bull Transmissatildeo
ndash Vetor
ndash Transfusatildeo de sangue
ndash Compartilhamento de seringas
ndash Acidente com agulhas
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
bull Ciclo preacute-eritrociacutetico
ndash Forma inoculada esporozoiacutetos
ndash A fecircmea do anofelino infectado inocula no homem as formas infectantes localizadas na saliva
ndash Os esporozoiacutetas permancem na circulaccedilatildeo por aproximadamente uma hora
ndash Invadem os hepatoacutecitos e se diferenciam em trofozoiacutetas (criptozoiacuteto)
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
ndash Esquizogonia e formaccedilatildeo de esquizontes
ndash Divisatildeo nuclear e liberaccedilatildeo de merozoiacutetos
ndash Aproximadamente 10000 merozoiacutetos por hepatoacutecito
ndash Rompimento do hepatoacutecito e liberaccedilatildeo de merozoiacutetos na circulaccedilatildeo
ndash Duraccedilatildeo do ciclo aprox 1 a 2 semanas
Ciclo evolutivo
bull PVivax e Povale
ndash Alguns esporozoiacutetos geneticamente diferentes ficam na forma latente nos hepatoacutecitos permanecendo muitos meses Satildeo classificados como hipnozoiacuteto
ndash Satildeo responsaacuteveis pelas recaiacutedas tardias e formas de malaacuteria com periacuteodo de encubaccedilatildeo longo ndash 6 a 9 meses
FASE HEPAacuteTICA OU EXOERITROCIacuteTICA
Hepatoacutecito
FIacuteGADO
Invasatildeo do hepatoacutecito
Reproduccedilatildeo Assexuada
Esporozoiacutetos Lise dos hepatoacutecitos
Liberaccedilatildeo dos protozoaacuterios na corrente sanguumliacutenea
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
bull Ciclo eritrociacutetico
ndash Os merozoiacutetos invadem as hemaacutecias
ndash Diferenciaccedilatildeo em trofozoiacutetos
ndash Esquizogonia esquizonte
ndash Produccedilatildeo de merozoiacutetos e rompimento da hemaacutecia
ndash Merozoiacutetos invasatildeo de novas hemaacutecias
ndash Apoacutes algumas geraccedilotildees os merozoiacutetos natildeo mais se dividem e se diferenciam em gametoacutecitos ndash micro e macrogametoacutecito
FASE ERITROCIacuteTICA
Hepatoacutecito destruiacutedo pelos protozoaacuterios
Penetraccedilatildeo dos protozoaacuterios
Reproduccedilatildeo assexuada
Protozoaacuterios destroem as hemaacutecias
Diferenciaccedilatildeo em gametoacutecitos
Fecircmeas de Anopheles sugam hemaacutecias com gametoacutecitos
Ciclo no hospedeiro invertebrado
Ocorre nas hemaacutecias ou Eritroacutecitos
nas hemaacutecias
Protozoaacuterio no interior da hemaacutecia
Hemaacutecia com gametoacutecito
T trofozoiacuteto Em esquizonte com merozoiacuteto
Fase eritrociacutetica
bull Ciclo sanguiacuteneo ndash Pfalciparum P vivax e Povale 48 horas
ndash Pmalariae 72 horas
ndash Fonte de nutriccedilatildeo do Plasmodium no ciclo sanguiacuteneo hemoglobina
ndash Produccedilatildeo do pigmento malaacuterico hemozoiacutena bull Granulaccedilotildees de Schuffner Plasmodium vivax
bull Granulaccedilotildees de Maurer P falciparum
bull Granulaccedilotildees de Ziemann P malariae
ndash Fagocitose pelas ceacutelulas de Kuppffer e macroacutefagos do baccedilo
Trofozoiacutetos Pfalciparum
Trofozoiacutetos Pfalciparum
Esquizonte ndash P falciparum
Raros no sangue perifeacuterico Possuem 2 a 24 merozoiacutetos
Ocupam 23 do gloacutebulo vermelho
Gametoacutecitos Pfalciparum
Ciclo evolutivo Pvivax
Esquizonte ndash P vivax
Satildeo grandes e ameboacuteides Cromatina organizada em duas ou mais massas
Possuem 2 a 24 merozoiacutetos com pontos de cromatina
Gametoacutecito ndash Pvivax
Macrogametoacutecitos satildeo redondos ou ovais e ocupam toda ceacutelula hospedeira O citoplasma eacute geralmente corado de azul mais escuro e conteacutem pigmento marrom Microgametoacutecitos satildeo geralmente do tamanho de um RBC natildeo infectados com citoplasma corados de azul paacutelido rosa ou cinza
Trofozoiacutetos - P malariae
Esquizontes ndash P malariae
Aproximadamente 6 a 12 merozoiacutetos com arranjo de rosetas
Gametoacutecitos ndash P malariae
Ciclo evolutivo ndash HI
bull Ingestatildeo de hemaacutecias contendo gametoacutecitos durante o repasto sanguiacuteneo da fecircmea do anofelino
bull No intestino meacutedio do vetor gametogecircnese ndash Macrogametoacutecito ndash macrogameta feminino ndash Microgametoacutecito o processo de exflagelaccedilatildeo daacute
origem a 8 microgametas masculinos ndash Produccedilatildeo de ovo ou zigoto ndash O ovo encista na camada epitelial do intestino meacutedio
oocisto ndash Esporogonia liberaccedilatildeo de esporozoiacutetos
Ciclo evolutivo ndash HInvertebrado
ndash Os esporozoiacutetos satildeo transportados pelo hemolinfa ateacute as glacircndulas salivares do vetor ateacute atingirem o ducto salivar
bull Inoculaccedilatildeo no hospedeiro vertebrado atraveacutes da picada do inseto
Hemaacutecia com gametoacutecito
Fecircmeas de Anopheles sugam hemaacutecias com gametoacutecitos
CICLO NO INVERTEBRADO
No tubo digestivo
Zigoto
Penetraccedilatildeo na parede do tubo
digestivo
Migraccedilatildeo para as glacircndulas salivares
Desenvolvimento
Mosquito infectado
Diagnoacutestico
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado e espesso corado pelo Giemsa
bull Sangue colhido sem anticoagulante para melhor fixaccedilatildeo em lacircmina
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo espesso eacute mais eficiente para detecccedilatildeo da infecccedilatildeo
bull Esfregaccedilo delgado eacute mais eficiente para diferenciaccedilatildeo morfoloacutegica das espeacutecies
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo semiquantitativo
ndash Exame de 100 campos microscoacutepicos com resultado expresso pelo sistema de cruzes
Parasitos contados Nuacutemero de campos
microscoacutepicos cruzes
40 a 60 100 +2
1 1 +
2-20 1 ++
21-200 1 +++
+ 200 1 ++++
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo quantitativo derivado de anaacutelise semiquantitativa
Contagem de parasitos por campo
Cruzes Parasitos por mm3
40 a 60100 +2 200-300
1 + 301-500
2-20 ++ 501 - 10000
21-200 +++ 10001 ndash 100000
+ 200 ++++ 100000 ou mais
Diagnoacutestico
bull P falciparum
ndash Parte do ciclo celular aderido ao endoteacutelio capilar Encontro somente de trofozoitos e gametoacutecitos no sangue perifeacuterico
ndash Raramente os esquizontes satildeo encontrados no sangue perifeacuterico
Diagnoacutestico ndash Pvivax ndash Encontro de todas as formas de desenvolvimento ndash
trofozoiacuteto jovem maduro esquizontes e gametoacutecitos
ndash Os trofozoiacutetos maduros tecircm geralmente um aspecto irregular com extensotildees ameboacuteides em seu citoplasma
Diagnoacutestico ndash Pvivax
ndash Os gametoacutecitos femininos coram-se mais intensamente que os masculinos e apresentam nuacutecleo mais compacto geralmente em localizaccedilatildeo perifeacuterica
ndash O pigmento malaacuterico geralmente eacute abundante
Diagnoacutestico - Pmalariae
bull Realizado por meio de caracteriacutesticas morfoloacutegicas do parasito
ndash Verificaccedilatildeo em esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado
ndash Posiccedilatildeo equatorial do parasito
ndash Desenvolvimento sem deformaccedilatildeo do eritroacutecito
Diagnoacutestico
bull QBC ndash Teacutecnica que combina concentraccedilatildeo dos parasitos
pela centrifugaccedilatildeo do sangue em em microhematoacutecrito e a coloraccedilatildeo dos aacutecidos nucleacuteicos do parasito pelo fluorcromo laranja de acridina
ndash Utilizaccedilatildeo de tubos especiais e microscopia epifluorescente
ndash Teste raacutepido
ndash Alta sensibilidade
Diagnoacutestico
bull ParaSight-F ( Becton amp Dickinson)
ndash Teste raacutepido para captura da proteiacutena rica em histidina 2 de Pfalciparum( PfHRP2) e enzimas conservadas de 4 espeacutecies de plasmoacutedio (DHL e aldolase
ndash Utilizaccedilatildeo de fita de nitrocelulose contendo ac monoclonal
ndash Lise de uma gota de sangue
ndash A reaccedilatildeo eacute revelada com adiccedilatildeo de ac policlonal anti-HRP2 conjugado com lipossomas contendo corante
Diagnoacutestico
bull PCR
ndash Sensibilidade e especificidade maior do que o esfregaccedilo sanguiacuteneo
Monoacutecito parasitado com as formas amastigotas
Doenccedila de Chagas
bull Trypanosoma cruzi (Chagas 1909)
Diagnoacutestico laboratorial Fase aguda
bull Alta parasitemia
bull Pesquisa do parasito
ndash Exame de sangue a fresco
ndash Exame de sangue em gota espessa
ndash Esfregaccedilo sanguiacuteneo corado pelo Giemsa
ndash Microhematoacutecrito
ndash Meacutetodos de concentraccedilatildeo
ndash Inoculaccedilatildeo em aninais
Exame direto a fresco
bull Parasitas abundantes nos primeiros dias e semanas de incubaccedilatildeo
bull Colocar uma gota de sangue entre lacircmina e lamiacutenula e examinar imediatamente apoacutes a coleta para evitar a coagulaccedilatildeo
bull Para retardar a coagulaccedilatildeo adicionar uma gota de soluccedilatildeo salina
bull Analisar em microscoacutepio oacuteptico a presenccedila das formas tripomastigotas
Exame de sangue em gota espessa
bull Analisa uma maior quantidade de material bioloacutegico
bull Verifica a presenccedila de formas tripomastigotas sanguiacuteneas ndash Colocar 3 gotas de sangue na lacircmina ndash Com o canto de outra espalhar o material em uma
aacuterea de aproximadamente 1 cm da lacircmina ndash Deixar secar ao ar durante 6 horas Natildeo ultrapassar 36
horas ndash Corar pelo Giemsa Deixar em repouso por 30 min ndash Lavar e examinar
Esfregaccedilo sanguiacuteneo
bull Colocar uma gota de sangue na extremidade direita da lacircmina
bull Pegar outra lacircmina segurar por cima com a matildeo direita e com uma inclinaccedilatildeo de 45deg encostar adiante da gota
bull Deixar mesma se espalhar pela superfiacutecie de contato das duas lacircminas
bull Puxar a gota espalhada ateacute o final de lacircmina
bull Secar e corar pelo Giemsa ou Leishman
Esfregaccedilo sanguiacuteneo
Microhematoacutecrito Creme leucocitaacuterio
Microhematoacutecrito
bull Colher sangue em tubo capilar
bull Centrifugar em microcentriacutefuga por 5 minutos agrave 10000 rpm
bull Avaliar o microhematocrito em microscopia oacuteptica
bull Verificar a presenccedila das formas tripomastigotas presentes no creme leucocitaacuterio
bull Se positivo realizar esfregaccedilo do creme leucocitaacuterio
bull Fixar com aacutelcool metiacutelico e corar com Gienza Analisar em microscoacutepio oacuteptico
Meacutetodo de concentraccedilatildeo
bull Meacutetodo de Strout
ndash Realizar a coleta de sangue em tubo sem anticoagulante
ndash Aguardar a retraccedilatildeo do coaacutegulo Os parasitas concentrar-se-atildeo no soro a medida que ocorrer a retraccedilatildeo do coaacutegulo
ndash O soro eacute centrifugado para anaacutelise do sedimento
Inoculaccedilatildeo em animais
bull Inoculaccedilatildeo de sangue ou creme leucocitaacuterio em camundongos jovens
bull Inoculaccedilatildeo intra-peritoneal intra-conjuntival e a via oral
bull Avaliaccedilatildeo das formas de Tcruzi
bull Teacutecnica utilizada em pesquisa
Diagnoacutestico laboratorial Fase crocircnica
bull Xenodiagnoacutestico bull Hemocultura bull Reaccedilatildeo de hemaglutinaccedilatildeo indireta bull RIFI bull ELISA bull PCR bull PaGIA bull LMCo bull Pesquisa de anticorpos antitripomastigotas vivos
Hemocultura
bull Meio LIT ndash Liver Infusion Triptose
bull Meio NNN ndash McNeal Novy e Nicolle
bull Utilizaccedilatildeo de 30ml de sangue heparinizado
bull Centrifugaccedilatildeo por 30 minutos em 3000 rpm
bull Despreza-se o plasma e o sedimento celular eacute lavado com meio LIT ( Liver Infusion Triptose) para eliminaccedilatildeo de possiacuteveis anticorpos
Hemocultura
bull Sedimento distribuiacutedo em 6 tubos com 5 ml de LIT
bull Os tubos satildeo mantidos a 28degC homogeneizados 3x semana e avaliados quinzenalmente ateacute 90 dias
bull Centrifugaccedilatildeo e avaliaccedilatildeo do sedimento de hemaacutecias
bull Leitura realizada pela observaccedilatildeo microscoacutepica de gotas do meio
bull Aumento da positividade para sangue processado imediatamente apoacutes a coleta cultivado em prazo de tempo maior (120 dias) e repeticcedilatildeo da teacutecnica por 3 vezes
Wuchereria bancrofti
Taxonomia
bull Reino Animalia
bull Filo Nematoda
bull Classe Secernentea
bull Ordem Filariidea
bull Superfamiacutelia Filarioidea
bull FamiacuteliaOnchocercidae
bull GecircnerosWuchereria
bull Espeacutecie Wbancrofti
Formas evolutivas
bull Heteroxecircnico
bull Hospedeiro vertebrado homem
bull Hospedeiro intermediaacuterio Culex quinquefasciatus
bull Formas evolutivas ndash HV verme adulto (fecircmea e macho) localizados nos
vasos e gacircnglios linfaacuteticos da regiatildeo abdominal peacutelvica (perna e escroto) mamas e braccedilo
ndash microfilaacuterias eliminadas pelas fecircmeas graacutevidas Saem dos ductos linfaacuteticos e atingem circulaccedilatildeo sanguiacutenea
ndash HI larva L1 L2 e L3 (infectante)
Culex quinquefasciatus
Morfologia
bull Macho 35 a 4 cm x 01mm com extremidade posterior enrrolada ventralmente
bull Fecircmea 7 a 10cm x 03 mm com vagina exteriorizada em uma vulva localizada proacutexima agrave extremidade anterior
bull Microfilaacuteria Presenccedila de bainha e estilete bucal na parte anterior que as diferencia de outros filariacutedeos sanguiacuteneos Possuem 250 a 300 microm e uma grande qtde de nuacutecleos
bull Larva L3 possui aproximadamente 15 a 20 mm de comprimento
Microfilaacuteria
Ciclo evolutivo
bull Fecircmea do inseto realiza o hematofagismo noturno e ingere as microfilaacuterias
bull Estocircmago do vetor microfilaacuterias perdem a bainha atravessam a parede do estocircmago e migram para os muacutesculos toraacutecicos ndash L1
bull Apoacutes 20 dias a larva estaacute na forma infectante L3 medindo aproximadamente 2mm
bull Migraccedilatildeo da larva para a proboacutescida concentrando-se no laacutebio do moquito
Microfilaacuteria Presenccedila de bainha Cauda pontuda com nuacutecleos grandes largos e bem separados Nuacutecleos caudais em fila uacutenica
Ciclo evolutivo
bull Repasto sanguiacuteneo do inseto infectado
ndash As larvas L3 migram do laacutebio do vetor para a pele do HV
ndash Migram para os vasos linfaacuteticos e tornam-se vermes adultos
ndash Apoacutes 8 meses as fecircmeas graacutevidas produzem as primeiras microfilaacuterias
Periodicidade
bull Periodicidade noturna das microfilaacuterias
ndash Durante o dia localizam-se nos capilares profundos
ndash Durante a noite vasos sanguiacuteneos perifeacutericos
ndash Pico da microfilaremia meia-noite coincidindo com o horaacuterio de hematofagismo do inseto transmissor
Patologia
bull Periacuteodo assintomaacutetico bull Fase aguda bull Processos inflamatoacuterios produzidos por larvas L4 e adultos jovens
que colonizam as vias linfaacuteticas ndash Linfadenites linfonodos inguinais epitrocleanos e axilares com
desenvolvimento de granulomas com calcificaccedilatildeo apoacutes a morte dos vermes
ndash Linfangite inflamaccedilatildeo e dilataccedilatildeo dos vasos linfaacuteticos ndash Febre mal estar ndash Funiculite filariana linfangite do cordatildeo espermaacutetico e varicocele
bull Fase crocircnica ndash Hidrocele ndash Linfedema ndash Quiluacuteria ndash Elefantiacutease
Quiluacuteria
Patologia
bull Processos obstrutivos ndash Formaccedilatildeo de novelos envolvidos por reaccedilatildeo
inflamatoacuteria e pela formaccedilatildeo de fibrose
ndash Estase e congestatildeo da linfa produzindo linfoedema tecidual
ndash Extravasamento produzindo derrame linfaacutetico ascite linfaacutetica linfuacuteria linforreacuteia linfotoacuterax linfocele etc
ndash A ruptura de vasos linfaacuteticos para o interior do sistema excretor urinaacuterio daacute origem agrave quiluacuteria
Patologia
bull Complicaccedilotildees associadas agrave filariose
ndash Elefantiacutease
bull Caracterizada por processo inflamatoacuterio e fibrose crocircnica do oacutergatildeo atingido
bull Hipertrofia da derme do tecido conjuntivo aumento exagerado do volume do oacutergatildeo com queratinizaccedilatildeo e rugosidade
bull A pele perde a elasticidade resseca e se torna sujeita a infecccedilotildees bacterianas
Patologia
bull Permanecimento na aacuterea endecircmica
bull Nuacutemero de larvas inoculadas
bull Frequecircncia das re-infecccedilotildees
bull O nuacutemero de acasalamento dos vermes e suas localizaccedilotildees anatocircmicas
bull A sensibilizaccedilatildeo do organismo e a intensidade das reaccedilotildees inflamatoacuterias do paciente
bull As infecccedilotildees bacterianas associadas
Diagnoacutestico
bull Pesquisa de microfilaacuterias no sangue perifeacuterico ndash 20 40 ou 60 microL- de preferecircncia entre as 10 h da noite e 4h da manhatilde
ndash Gota espessa Coloraccedilatildeo de Giemsa
ndash Meacutetodos de concentraccedilatildeo Filtraccedilatildeo em membrana de policarbonato milipore ou nucleopore
ndash Meacutetodo de Knott
bull Na fase crocircnica as microfilaacuterias raramente satildeo detectadas no sangue perifeacuterico
Gota espessa
bull Possibilita a visualizaccedilatildeo da bainha fato que difere a microfilaria de W bancrofti de outro filariacutedeos sanguiacuteneos
bull Apresenta um baixo custo em comparaccedilatildeo com outras mais avanccediladas como a filtraccedilatildeo de sangue em membrana de policarbonato
bull Possui baixa sensibilidade natildeo indicada em situaccedilotildees em que os parasitados se mostram com baixa microfilaremia ou amicrofilarecircmicos
Concentraccedilatildeo
bull Baseia-se na passagem de sangue venoso atraveacutes de uma membrana (Milipore ou Nuclepore) de diacircmetro de 13 a 25 mm e poros de 5 ou 3 μm
bull O material retido na membrana sendo fixado corado e observado ao microscoacutepio
bull Essa teacutecnica assim como a de Knott permite a identificaccedilatildeo de indiviacuteduos com baixiacutessimas parasitemias (quantidade de microfilarias natildeo detectaacuteveis pela teacutecnica de gota espessa)
Teacutecnica de Knott
bull Retirar 2 ml de sangue total por punccedilatildeo venosa e colocar imediatamente em um tubo contendo 10 ml de formol a 2
bull Fechar o tubo e misture completamente invertendo-o e agitando-o O formol hemolisa as hemaacutecias mata fixa e distende as microfilaacuterias
bull Centrifugar o sangue a 1500 rpm por 5 minutos
bull Decantar o sobrenadante
Teacutecnica de Knott
bull Retirar o sedimento com uma pipeta Pasteur e espalhar a gota espessa sobre uma lacircmina
bull Deixar secar bem e corar com Giemsa
bull Examinar com objetiva de imersatildeo
bull Esta teacutecnica possibilita que o exame microscoacutepico laboratorial seja realizado vaacuterios dias apoacutes a coleta de material realizada no campo
Exames de imagem
bull Ultranossografia
ndash Possibilidade de visualizar os movimentos de vermes adultos vivos de W bancrofti em vaso linfaacutetico especificamente em vasos intraescrotais do cordatildeo espermaacutetico
ndash O movimento ativo e ininterrupto dos vermes adultos durante as 24 horas do dia eacute denominado sinal da ldquodanccedila das filaacuteriasrdquo
Diagnoacutestico soroloacutegico
bull Teste imunocromatograacutefico desenvolvido pelo ICT Diagnostic - ICT card
ndash Teste qualilativo
ndash Cartatildeo possui ac de antifilaacuteria e o controle eacute formado por ac anti Ig G humano
Plasmodium spp
Taxonomia
bull Reino Protozoa
bull FiloApicomplexa
bull Classe Sporozoea
bull Ordem Hemosporidiida
bull Famiacutelia Plasmodiidae
bull Gecircneros Plasmodium
bull Espeacutecie Pfalciparum Pvivax Povale e Pmalariae
Plasmodium
bull Ciclo bioloacutegico Hospedeiro vertebrado e invertebrado
bull Hospedeiro invertebrado ndash Vetor
ndash Fecircmeas hematoacutefagas do gecircnero Anopheles
ndash Brasil Anopheles (N)darlingi A (N) aquasalis A (N) albitarsis A (K) cruzii e A (K) bellator
ndash Possuem haacutebito noturno penetrando nas casas no crespuacutesculo saindo ao amanhecer
Plasmodium
bull Hospedeiro vertebrado homem
bull Transmissatildeo
ndash Vetor
ndash Transfusatildeo de sangue
ndash Compartilhamento de seringas
ndash Acidente com agulhas
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
bull Ciclo preacute-eritrociacutetico
ndash Forma inoculada esporozoiacutetos
ndash A fecircmea do anofelino infectado inocula no homem as formas infectantes localizadas na saliva
ndash Os esporozoiacutetas permancem na circulaccedilatildeo por aproximadamente uma hora
ndash Invadem os hepatoacutecitos e se diferenciam em trofozoiacutetas (criptozoiacuteto)
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
ndash Esquizogonia e formaccedilatildeo de esquizontes
ndash Divisatildeo nuclear e liberaccedilatildeo de merozoiacutetos
ndash Aproximadamente 10000 merozoiacutetos por hepatoacutecito
ndash Rompimento do hepatoacutecito e liberaccedilatildeo de merozoiacutetos na circulaccedilatildeo
ndash Duraccedilatildeo do ciclo aprox 1 a 2 semanas
Ciclo evolutivo
bull PVivax e Povale
ndash Alguns esporozoiacutetos geneticamente diferentes ficam na forma latente nos hepatoacutecitos permanecendo muitos meses Satildeo classificados como hipnozoiacuteto
ndash Satildeo responsaacuteveis pelas recaiacutedas tardias e formas de malaacuteria com periacuteodo de encubaccedilatildeo longo ndash 6 a 9 meses
FASE HEPAacuteTICA OU EXOERITROCIacuteTICA
Hepatoacutecito
FIacuteGADO
Invasatildeo do hepatoacutecito
Reproduccedilatildeo Assexuada
Esporozoiacutetos Lise dos hepatoacutecitos
Liberaccedilatildeo dos protozoaacuterios na corrente sanguumliacutenea
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
bull Ciclo eritrociacutetico
ndash Os merozoiacutetos invadem as hemaacutecias
ndash Diferenciaccedilatildeo em trofozoiacutetos
ndash Esquizogonia esquizonte
ndash Produccedilatildeo de merozoiacutetos e rompimento da hemaacutecia
ndash Merozoiacutetos invasatildeo de novas hemaacutecias
ndash Apoacutes algumas geraccedilotildees os merozoiacutetos natildeo mais se dividem e se diferenciam em gametoacutecitos ndash micro e macrogametoacutecito
FASE ERITROCIacuteTICA
Hepatoacutecito destruiacutedo pelos protozoaacuterios
Penetraccedilatildeo dos protozoaacuterios
Reproduccedilatildeo assexuada
Protozoaacuterios destroem as hemaacutecias
Diferenciaccedilatildeo em gametoacutecitos
Fecircmeas de Anopheles sugam hemaacutecias com gametoacutecitos
Ciclo no hospedeiro invertebrado
Ocorre nas hemaacutecias ou Eritroacutecitos
nas hemaacutecias
Protozoaacuterio no interior da hemaacutecia
Hemaacutecia com gametoacutecito
T trofozoiacuteto Em esquizonte com merozoiacuteto
Fase eritrociacutetica
bull Ciclo sanguiacuteneo ndash Pfalciparum P vivax e Povale 48 horas
ndash Pmalariae 72 horas
ndash Fonte de nutriccedilatildeo do Plasmodium no ciclo sanguiacuteneo hemoglobina
ndash Produccedilatildeo do pigmento malaacuterico hemozoiacutena bull Granulaccedilotildees de Schuffner Plasmodium vivax
bull Granulaccedilotildees de Maurer P falciparum
bull Granulaccedilotildees de Ziemann P malariae
ndash Fagocitose pelas ceacutelulas de Kuppffer e macroacutefagos do baccedilo
Trofozoiacutetos Pfalciparum
Trofozoiacutetos Pfalciparum
Esquizonte ndash P falciparum
Raros no sangue perifeacuterico Possuem 2 a 24 merozoiacutetos
Ocupam 23 do gloacutebulo vermelho
Gametoacutecitos Pfalciparum
Ciclo evolutivo Pvivax
Esquizonte ndash P vivax
Satildeo grandes e ameboacuteides Cromatina organizada em duas ou mais massas
Possuem 2 a 24 merozoiacutetos com pontos de cromatina
Gametoacutecito ndash Pvivax
Macrogametoacutecitos satildeo redondos ou ovais e ocupam toda ceacutelula hospedeira O citoplasma eacute geralmente corado de azul mais escuro e conteacutem pigmento marrom Microgametoacutecitos satildeo geralmente do tamanho de um RBC natildeo infectados com citoplasma corados de azul paacutelido rosa ou cinza
Trofozoiacutetos - P malariae
Esquizontes ndash P malariae
Aproximadamente 6 a 12 merozoiacutetos com arranjo de rosetas
Gametoacutecitos ndash P malariae
Ciclo evolutivo ndash HI
bull Ingestatildeo de hemaacutecias contendo gametoacutecitos durante o repasto sanguiacuteneo da fecircmea do anofelino
bull No intestino meacutedio do vetor gametogecircnese ndash Macrogametoacutecito ndash macrogameta feminino ndash Microgametoacutecito o processo de exflagelaccedilatildeo daacute
origem a 8 microgametas masculinos ndash Produccedilatildeo de ovo ou zigoto ndash O ovo encista na camada epitelial do intestino meacutedio
oocisto ndash Esporogonia liberaccedilatildeo de esporozoiacutetos
Ciclo evolutivo ndash HInvertebrado
ndash Os esporozoiacutetos satildeo transportados pelo hemolinfa ateacute as glacircndulas salivares do vetor ateacute atingirem o ducto salivar
bull Inoculaccedilatildeo no hospedeiro vertebrado atraveacutes da picada do inseto
Hemaacutecia com gametoacutecito
Fecircmeas de Anopheles sugam hemaacutecias com gametoacutecitos
CICLO NO INVERTEBRADO
No tubo digestivo
Zigoto
Penetraccedilatildeo na parede do tubo
digestivo
Migraccedilatildeo para as glacircndulas salivares
Desenvolvimento
Mosquito infectado
Diagnoacutestico
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado e espesso corado pelo Giemsa
bull Sangue colhido sem anticoagulante para melhor fixaccedilatildeo em lacircmina
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo espesso eacute mais eficiente para detecccedilatildeo da infecccedilatildeo
bull Esfregaccedilo delgado eacute mais eficiente para diferenciaccedilatildeo morfoloacutegica das espeacutecies
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo semiquantitativo
ndash Exame de 100 campos microscoacutepicos com resultado expresso pelo sistema de cruzes
Parasitos contados Nuacutemero de campos
microscoacutepicos cruzes
40 a 60 100 +2
1 1 +
2-20 1 ++
21-200 1 +++
+ 200 1 ++++
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo quantitativo derivado de anaacutelise semiquantitativa
Contagem de parasitos por campo
Cruzes Parasitos por mm3
40 a 60100 +2 200-300
1 + 301-500
2-20 ++ 501 - 10000
21-200 +++ 10001 ndash 100000
+ 200 ++++ 100000 ou mais
Diagnoacutestico
bull P falciparum
ndash Parte do ciclo celular aderido ao endoteacutelio capilar Encontro somente de trofozoitos e gametoacutecitos no sangue perifeacuterico
ndash Raramente os esquizontes satildeo encontrados no sangue perifeacuterico
Diagnoacutestico ndash Pvivax ndash Encontro de todas as formas de desenvolvimento ndash
trofozoiacuteto jovem maduro esquizontes e gametoacutecitos
ndash Os trofozoiacutetos maduros tecircm geralmente um aspecto irregular com extensotildees ameboacuteides em seu citoplasma
Diagnoacutestico ndash Pvivax
ndash Os gametoacutecitos femininos coram-se mais intensamente que os masculinos e apresentam nuacutecleo mais compacto geralmente em localizaccedilatildeo perifeacuterica
ndash O pigmento malaacuterico geralmente eacute abundante
Diagnoacutestico - Pmalariae
bull Realizado por meio de caracteriacutesticas morfoloacutegicas do parasito
ndash Verificaccedilatildeo em esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado
ndash Posiccedilatildeo equatorial do parasito
ndash Desenvolvimento sem deformaccedilatildeo do eritroacutecito
Diagnoacutestico
bull QBC ndash Teacutecnica que combina concentraccedilatildeo dos parasitos
pela centrifugaccedilatildeo do sangue em em microhematoacutecrito e a coloraccedilatildeo dos aacutecidos nucleacuteicos do parasito pelo fluorcromo laranja de acridina
ndash Utilizaccedilatildeo de tubos especiais e microscopia epifluorescente
ndash Teste raacutepido
ndash Alta sensibilidade
Diagnoacutestico
bull ParaSight-F ( Becton amp Dickinson)
ndash Teste raacutepido para captura da proteiacutena rica em histidina 2 de Pfalciparum( PfHRP2) e enzimas conservadas de 4 espeacutecies de plasmoacutedio (DHL e aldolase
ndash Utilizaccedilatildeo de fita de nitrocelulose contendo ac monoclonal
ndash Lise de uma gota de sangue
ndash A reaccedilatildeo eacute revelada com adiccedilatildeo de ac policlonal anti-HRP2 conjugado com lipossomas contendo corante
Diagnoacutestico
bull PCR
ndash Sensibilidade e especificidade maior do que o esfregaccedilo sanguiacuteneo
Doenccedila de Chagas
bull Trypanosoma cruzi (Chagas 1909)
Diagnoacutestico laboratorial Fase aguda
bull Alta parasitemia
bull Pesquisa do parasito
ndash Exame de sangue a fresco
ndash Exame de sangue em gota espessa
ndash Esfregaccedilo sanguiacuteneo corado pelo Giemsa
ndash Microhematoacutecrito
ndash Meacutetodos de concentraccedilatildeo
ndash Inoculaccedilatildeo em aninais
Exame direto a fresco
bull Parasitas abundantes nos primeiros dias e semanas de incubaccedilatildeo
bull Colocar uma gota de sangue entre lacircmina e lamiacutenula e examinar imediatamente apoacutes a coleta para evitar a coagulaccedilatildeo
bull Para retardar a coagulaccedilatildeo adicionar uma gota de soluccedilatildeo salina
bull Analisar em microscoacutepio oacuteptico a presenccedila das formas tripomastigotas
Exame de sangue em gota espessa
bull Analisa uma maior quantidade de material bioloacutegico
bull Verifica a presenccedila de formas tripomastigotas sanguiacuteneas ndash Colocar 3 gotas de sangue na lacircmina ndash Com o canto de outra espalhar o material em uma
aacuterea de aproximadamente 1 cm da lacircmina ndash Deixar secar ao ar durante 6 horas Natildeo ultrapassar 36
horas ndash Corar pelo Giemsa Deixar em repouso por 30 min ndash Lavar e examinar
Esfregaccedilo sanguiacuteneo
bull Colocar uma gota de sangue na extremidade direita da lacircmina
bull Pegar outra lacircmina segurar por cima com a matildeo direita e com uma inclinaccedilatildeo de 45deg encostar adiante da gota
bull Deixar mesma se espalhar pela superfiacutecie de contato das duas lacircminas
bull Puxar a gota espalhada ateacute o final de lacircmina
bull Secar e corar pelo Giemsa ou Leishman
Esfregaccedilo sanguiacuteneo
Microhematoacutecrito Creme leucocitaacuterio
Microhematoacutecrito
bull Colher sangue em tubo capilar
bull Centrifugar em microcentriacutefuga por 5 minutos agrave 10000 rpm
bull Avaliar o microhematocrito em microscopia oacuteptica
bull Verificar a presenccedila das formas tripomastigotas presentes no creme leucocitaacuterio
bull Se positivo realizar esfregaccedilo do creme leucocitaacuterio
bull Fixar com aacutelcool metiacutelico e corar com Gienza Analisar em microscoacutepio oacuteptico
Meacutetodo de concentraccedilatildeo
bull Meacutetodo de Strout
ndash Realizar a coleta de sangue em tubo sem anticoagulante
ndash Aguardar a retraccedilatildeo do coaacutegulo Os parasitas concentrar-se-atildeo no soro a medida que ocorrer a retraccedilatildeo do coaacutegulo
ndash O soro eacute centrifugado para anaacutelise do sedimento
Inoculaccedilatildeo em animais
bull Inoculaccedilatildeo de sangue ou creme leucocitaacuterio em camundongos jovens
bull Inoculaccedilatildeo intra-peritoneal intra-conjuntival e a via oral
bull Avaliaccedilatildeo das formas de Tcruzi
bull Teacutecnica utilizada em pesquisa
Diagnoacutestico laboratorial Fase crocircnica
bull Xenodiagnoacutestico bull Hemocultura bull Reaccedilatildeo de hemaglutinaccedilatildeo indireta bull RIFI bull ELISA bull PCR bull PaGIA bull LMCo bull Pesquisa de anticorpos antitripomastigotas vivos
Hemocultura
bull Meio LIT ndash Liver Infusion Triptose
bull Meio NNN ndash McNeal Novy e Nicolle
bull Utilizaccedilatildeo de 30ml de sangue heparinizado
bull Centrifugaccedilatildeo por 30 minutos em 3000 rpm
bull Despreza-se o plasma e o sedimento celular eacute lavado com meio LIT ( Liver Infusion Triptose) para eliminaccedilatildeo de possiacuteveis anticorpos
Hemocultura
bull Sedimento distribuiacutedo em 6 tubos com 5 ml de LIT
bull Os tubos satildeo mantidos a 28degC homogeneizados 3x semana e avaliados quinzenalmente ateacute 90 dias
bull Centrifugaccedilatildeo e avaliaccedilatildeo do sedimento de hemaacutecias
bull Leitura realizada pela observaccedilatildeo microscoacutepica de gotas do meio
bull Aumento da positividade para sangue processado imediatamente apoacutes a coleta cultivado em prazo de tempo maior (120 dias) e repeticcedilatildeo da teacutecnica por 3 vezes
Wuchereria bancrofti
Taxonomia
bull Reino Animalia
bull Filo Nematoda
bull Classe Secernentea
bull Ordem Filariidea
bull Superfamiacutelia Filarioidea
bull FamiacuteliaOnchocercidae
bull GecircnerosWuchereria
bull Espeacutecie Wbancrofti
Formas evolutivas
bull Heteroxecircnico
bull Hospedeiro vertebrado homem
bull Hospedeiro intermediaacuterio Culex quinquefasciatus
bull Formas evolutivas ndash HV verme adulto (fecircmea e macho) localizados nos
vasos e gacircnglios linfaacuteticos da regiatildeo abdominal peacutelvica (perna e escroto) mamas e braccedilo
ndash microfilaacuterias eliminadas pelas fecircmeas graacutevidas Saem dos ductos linfaacuteticos e atingem circulaccedilatildeo sanguiacutenea
ndash HI larva L1 L2 e L3 (infectante)
Culex quinquefasciatus
Morfologia
bull Macho 35 a 4 cm x 01mm com extremidade posterior enrrolada ventralmente
bull Fecircmea 7 a 10cm x 03 mm com vagina exteriorizada em uma vulva localizada proacutexima agrave extremidade anterior
bull Microfilaacuteria Presenccedila de bainha e estilete bucal na parte anterior que as diferencia de outros filariacutedeos sanguiacuteneos Possuem 250 a 300 microm e uma grande qtde de nuacutecleos
bull Larva L3 possui aproximadamente 15 a 20 mm de comprimento
Microfilaacuteria
Ciclo evolutivo
bull Fecircmea do inseto realiza o hematofagismo noturno e ingere as microfilaacuterias
bull Estocircmago do vetor microfilaacuterias perdem a bainha atravessam a parede do estocircmago e migram para os muacutesculos toraacutecicos ndash L1
bull Apoacutes 20 dias a larva estaacute na forma infectante L3 medindo aproximadamente 2mm
bull Migraccedilatildeo da larva para a proboacutescida concentrando-se no laacutebio do moquito
Microfilaacuteria Presenccedila de bainha Cauda pontuda com nuacutecleos grandes largos e bem separados Nuacutecleos caudais em fila uacutenica
Ciclo evolutivo
bull Repasto sanguiacuteneo do inseto infectado
ndash As larvas L3 migram do laacutebio do vetor para a pele do HV
ndash Migram para os vasos linfaacuteticos e tornam-se vermes adultos
ndash Apoacutes 8 meses as fecircmeas graacutevidas produzem as primeiras microfilaacuterias
Periodicidade
bull Periodicidade noturna das microfilaacuterias
ndash Durante o dia localizam-se nos capilares profundos
ndash Durante a noite vasos sanguiacuteneos perifeacutericos
ndash Pico da microfilaremia meia-noite coincidindo com o horaacuterio de hematofagismo do inseto transmissor
Patologia
bull Periacuteodo assintomaacutetico bull Fase aguda bull Processos inflamatoacuterios produzidos por larvas L4 e adultos jovens
que colonizam as vias linfaacuteticas ndash Linfadenites linfonodos inguinais epitrocleanos e axilares com
desenvolvimento de granulomas com calcificaccedilatildeo apoacutes a morte dos vermes
ndash Linfangite inflamaccedilatildeo e dilataccedilatildeo dos vasos linfaacuteticos ndash Febre mal estar ndash Funiculite filariana linfangite do cordatildeo espermaacutetico e varicocele
bull Fase crocircnica ndash Hidrocele ndash Linfedema ndash Quiluacuteria ndash Elefantiacutease
Quiluacuteria
Patologia
bull Processos obstrutivos ndash Formaccedilatildeo de novelos envolvidos por reaccedilatildeo
inflamatoacuteria e pela formaccedilatildeo de fibrose
ndash Estase e congestatildeo da linfa produzindo linfoedema tecidual
ndash Extravasamento produzindo derrame linfaacutetico ascite linfaacutetica linfuacuteria linforreacuteia linfotoacuterax linfocele etc
ndash A ruptura de vasos linfaacuteticos para o interior do sistema excretor urinaacuterio daacute origem agrave quiluacuteria
Patologia
bull Complicaccedilotildees associadas agrave filariose
ndash Elefantiacutease
bull Caracterizada por processo inflamatoacuterio e fibrose crocircnica do oacutergatildeo atingido
bull Hipertrofia da derme do tecido conjuntivo aumento exagerado do volume do oacutergatildeo com queratinizaccedilatildeo e rugosidade
bull A pele perde a elasticidade resseca e se torna sujeita a infecccedilotildees bacterianas
Patologia
bull Permanecimento na aacuterea endecircmica
bull Nuacutemero de larvas inoculadas
bull Frequecircncia das re-infecccedilotildees
bull O nuacutemero de acasalamento dos vermes e suas localizaccedilotildees anatocircmicas
bull A sensibilizaccedilatildeo do organismo e a intensidade das reaccedilotildees inflamatoacuterias do paciente
bull As infecccedilotildees bacterianas associadas
Diagnoacutestico
bull Pesquisa de microfilaacuterias no sangue perifeacuterico ndash 20 40 ou 60 microL- de preferecircncia entre as 10 h da noite e 4h da manhatilde
ndash Gota espessa Coloraccedilatildeo de Giemsa
ndash Meacutetodos de concentraccedilatildeo Filtraccedilatildeo em membrana de policarbonato milipore ou nucleopore
ndash Meacutetodo de Knott
bull Na fase crocircnica as microfilaacuterias raramente satildeo detectadas no sangue perifeacuterico
Gota espessa
bull Possibilita a visualizaccedilatildeo da bainha fato que difere a microfilaria de W bancrofti de outro filariacutedeos sanguiacuteneos
bull Apresenta um baixo custo em comparaccedilatildeo com outras mais avanccediladas como a filtraccedilatildeo de sangue em membrana de policarbonato
bull Possui baixa sensibilidade natildeo indicada em situaccedilotildees em que os parasitados se mostram com baixa microfilaremia ou amicrofilarecircmicos
Concentraccedilatildeo
bull Baseia-se na passagem de sangue venoso atraveacutes de uma membrana (Milipore ou Nuclepore) de diacircmetro de 13 a 25 mm e poros de 5 ou 3 μm
bull O material retido na membrana sendo fixado corado e observado ao microscoacutepio
bull Essa teacutecnica assim como a de Knott permite a identificaccedilatildeo de indiviacuteduos com baixiacutessimas parasitemias (quantidade de microfilarias natildeo detectaacuteveis pela teacutecnica de gota espessa)
Teacutecnica de Knott
bull Retirar 2 ml de sangue total por punccedilatildeo venosa e colocar imediatamente em um tubo contendo 10 ml de formol a 2
bull Fechar o tubo e misture completamente invertendo-o e agitando-o O formol hemolisa as hemaacutecias mata fixa e distende as microfilaacuterias
bull Centrifugar o sangue a 1500 rpm por 5 minutos
bull Decantar o sobrenadante
Teacutecnica de Knott
bull Retirar o sedimento com uma pipeta Pasteur e espalhar a gota espessa sobre uma lacircmina
bull Deixar secar bem e corar com Giemsa
bull Examinar com objetiva de imersatildeo
bull Esta teacutecnica possibilita que o exame microscoacutepico laboratorial seja realizado vaacuterios dias apoacutes a coleta de material realizada no campo
Exames de imagem
bull Ultranossografia
ndash Possibilidade de visualizar os movimentos de vermes adultos vivos de W bancrofti em vaso linfaacutetico especificamente em vasos intraescrotais do cordatildeo espermaacutetico
ndash O movimento ativo e ininterrupto dos vermes adultos durante as 24 horas do dia eacute denominado sinal da ldquodanccedila das filaacuteriasrdquo
Diagnoacutestico soroloacutegico
bull Teste imunocromatograacutefico desenvolvido pelo ICT Diagnostic - ICT card
ndash Teste qualilativo
ndash Cartatildeo possui ac de antifilaacuteria e o controle eacute formado por ac anti Ig G humano
Plasmodium spp
Taxonomia
bull Reino Protozoa
bull FiloApicomplexa
bull Classe Sporozoea
bull Ordem Hemosporidiida
bull Famiacutelia Plasmodiidae
bull Gecircneros Plasmodium
bull Espeacutecie Pfalciparum Pvivax Povale e Pmalariae
Plasmodium
bull Ciclo bioloacutegico Hospedeiro vertebrado e invertebrado
bull Hospedeiro invertebrado ndash Vetor
ndash Fecircmeas hematoacutefagas do gecircnero Anopheles
ndash Brasil Anopheles (N)darlingi A (N) aquasalis A (N) albitarsis A (K) cruzii e A (K) bellator
ndash Possuem haacutebito noturno penetrando nas casas no crespuacutesculo saindo ao amanhecer
Plasmodium
bull Hospedeiro vertebrado homem
bull Transmissatildeo
ndash Vetor
ndash Transfusatildeo de sangue
ndash Compartilhamento de seringas
ndash Acidente com agulhas
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
bull Ciclo preacute-eritrociacutetico
ndash Forma inoculada esporozoiacutetos
ndash A fecircmea do anofelino infectado inocula no homem as formas infectantes localizadas na saliva
ndash Os esporozoiacutetas permancem na circulaccedilatildeo por aproximadamente uma hora
ndash Invadem os hepatoacutecitos e se diferenciam em trofozoiacutetas (criptozoiacuteto)
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
ndash Esquizogonia e formaccedilatildeo de esquizontes
ndash Divisatildeo nuclear e liberaccedilatildeo de merozoiacutetos
ndash Aproximadamente 10000 merozoiacutetos por hepatoacutecito
ndash Rompimento do hepatoacutecito e liberaccedilatildeo de merozoiacutetos na circulaccedilatildeo
ndash Duraccedilatildeo do ciclo aprox 1 a 2 semanas
Ciclo evolutivo
bull PVivax e Povale
ndash Alguns esporozoiacutetos geneticamente diferentes ficam na forma latente nos hepatoacutecitos permanecendo muitos meses Satildeo classificados como hipnozoiacuteto
ndash Satildeo responsaacuteveis pelas recaiacutedas tardias e formas de malaacuteria com periacuteodo de encubaccedilatildeo longo ndash 6 a 9 meses
FASE HEPAacuteTICA OU EXOERITROCIacuteTICA
Hepatoacutecito
FIacuteGADO
Invasatildeo do hepatoacutecito
Reproduccedilatildeo Assexuada
Esporozoiacutetos Lise dos hepatoacutecitos
Liberaccedilatildeo dos protozoaacuterios na corrente sanguumliacutenea
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
bull Ciclo eritrociacutetico
ndash Os merozoiacutetos invadem as hemaacutecias
ndash Diferenciaccedilatildeo em trofozoiacutetos
ndash Esquizogonia esquizonte
ndash Produccedilatildeo de merozoiacutetos e rompimento da hemaacutecia
ndash Merozoiacutetos invasatildeo de novas hemaacutecias
ndash Apoacutes algumas geraccedilotildees os merozoiacutetos natildeo mais se dividem e se diferenciam em gametoacutecitos ndash micro e macrogametoacutecito
FASE ERITROCIacuteTICA
Hepatoacutecito destruiacutedo pelos protozoaacuterios
Penetraccedilatildeo dos protozoaacuterios
Reproduccedilatildeo assexuada
Protozoaacuterios destroem as hemaacutecias
Diferenciaccedilatildeo em gametoacutecitos
Fecircmeas de Anopheles sugam hemaacutecias com gametoacutecitos
Ciclo no hospedeiro invertebrado
Ocorre nas hemaacutecias ou Eritroacutecitos
nas hemaacutecias
Protozoaacuterio no interior da hemaacutecia
Hemaacutecia com gametoacutecito
T trofozoiacuteto Em esquizonte com merozoiacuteto
Fase eritrociacutetica
bull Ciclo sanguiacuteneo ndash Pfalciparum P vivax e Povale 48 horas
ndash Pmalariae 72 horas
ndash Fonte de nutriccedilatildeo do Plasmodium no ciclo sanguiacuteneo hemoglobina
ndash Produccedilatildeo do pigmento malaacuterico hemozoiacutena bull Granulaccedilotildees de Schuffner Plasmodium vivax
bull Granulaccedilotildees de Maurer P falciparum
bull Granulaccedilotildees de Ziemann P malariae
ndash Fagocitose pelas ceacutelulas de Kuppffer e macroacutefagos do baccedilo
Trofozoiacutetos Pfalciparum
Trofozoiacutetos Pfalciparum
Esquizonte ndash P falciparum
Raros no sangue perifeacuterico Possuem 2 a 24 merozoiacutetos
Ocupam 23 do gloacutebulo vermelho
Gametoacutecitos Pfalciparum
Ciclo evolutivo Pvivax
Esquizonte ndash P vivax
Satildeo grandes e ameboacuteides Cromatina organizada em duas ou mais massas
Possuem 2 a 24 merozoiacutetos com pontos de cromatina
Gametoacutecito ndash Pvivax
Macrogametoacutecitos satildeo redondos ou ovais e ocupam toda ceacutelula hospedeira O citoplasma eacute geralmente corado de azul mais escuro e conteacutem pigmento marrom Microgametoacutecitos satildeo geralmente do tamanho de um RBC natildeo infectados com citoplasma corados de azul paacutelido rosa ou cinza
Trofozoiacutetos - P malariae
Esquizontes ndash P malariae
Aproximadamente 6 a 12 merozoiacutetos com arranjo de rosetas
Gametoacutecitos ndash P malariae
Ciclo evolutivo ndash HI
bull Ingestatildeo de hemaacutecias contendo gametoacutecitos durante o repasto sanguiacuteneo da fecircmea do anofelino
bull No intestino meacutedio do vetor gametogecircnese ndash Macrogametoacutecito ndash macrogameta feminino ndash Microgametoacutecito o processo de exflagelaccedilatildeo daacute
origem a 8 microgametas masculinos ndash Produccedilatildeo de ovo ou zigoto ndash O ovo encista na camada epitelial do intestino meacutedio
oocisto ndash Esporogonia liberaccedilatildeo de esporozoiacutetos
Ciclo evolutivo ndash HInvertebrado
ndash Os esporozoiacutetos satildeo transportados pelo hemolinfa ateacute as glacircndulas salivares do vetor ateacute atingirem o ducto salivar
bull Inoculaccedilatildeo no hospedeiro vertebrado atraveacutes da picada do inseto
Hemaacutecia com gametoacutecito
Fecircmeas de Anopheles sugam hemaacutecias com gametoacutecitos
CICLO NO INVERTEBRADO
No tubo digestivo
Zigoto
Penetraccedilatildeo na parede do tubo
digestivo
Migraccedilatildeo para as glacircndulas salivares
Desenvolvimento
Mosquito infectado
Diagnoacutestico
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado e espesso corado pelo Giemsa
bull Sangue colhido sem anticoagulante para melhor fixaccedilatildeo em lacircmina
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo espesso eacute mais eficiente para detecccedilatildeo da infecccedilatildeo
bull Esfregaccedilo delgado eacute mais eficiente para diferenciaccedilatildeo morfoloacutegica das espeacutecies
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo semiquantitativo
ndash Exame de 100 campos microscoacutepicos com resultado expresso pelo sistema de cruzes
Parasitos contados Nuacutemero de campos
microscoacutepicos cruzes
40 a 60 100 +2
1 1 +
2-20 1 ++
21-200 1 +++
+ 200 1 ++++
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo quantitativo derivado de anaacutelise semiquantitativa
Contagem de parasitos por campo
Cruzes Parasitos por mm3
40 a 60100 +2 200-300
1 + 301-500
2-20 ++ 501 - 10000
21-200 +++ 10001 ndash 100000
+ 200 ++++ 100000 ou mais
Diagnoacutestico
bull P falciparum
ndash Parte do ciclo celular aderido ao endoteacutelio capilar Encontro somente de trofozoitos e gametoacutecitos no sangue perifeacuterico
ndash Raramente os esquizontes satildeo encontrados no sangue perifeacuterico
Diagnoacutestico ndash Pvivax ndash Encontro de todas as formas de desenvolvimento ndash
trofozoiacuteto jovem maduro esquizontes e gametoacutecitos
ndash Os trofozoiacutetos maduros tecircm geralmente um aspecto irregular com extensotildees ameboacuteides em seu citoplasma
Diagnoacutestico ndash Pvivax
ndash Os gametoacutecitos femininos coram-se mais intensamente que os masculinos e apresentam nuacutecleo mais compacto geralmente em localizaccedilatildeo perifeacuterica
ndash O pigmento malaacuterico geralmente eacute abundante
Diagnoacutestico - Pmalariae
bull Realizado por meio de caracteriacutesticas morfoloacutegicas do parasito
ndash Verificaccedilatildeo em esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado
ndash Posiccedilatildeo equatorial do parasito
ndash Desenvolvimento sem deformaccedilatildeo do eritroacutecito
Diagnoacutestico
bull QBC ndash Teacutecnica que combina concentraccedilatildeo dos parasitos
pela centrifugaccedilatildeo do sangue em em microhematoacutecrito e a coloraccedilatildeo dos aacutecidos nucleacuteicos do parasito pelo fluorcromo laranja de acridina
ndash Utilizaccedilatildeo de tubos especiais e microscopia epifluorescente
ndash Teste raacutepido
ndash Alta sensibilidade
Diagnoacutestico
bull ParaSight-F ( Becton amp Dickinson)
ndash Teste raacutepido para captura da proteiacutena rica em histidina 2 de Pfalciparum( PfHRP2) e enzimas conservadas de 4 espeacutecies de plasmoacutedio (DHL e aldolase
ndash Utilizaccedilatildeo de fita de nitrocelulose contendo ac monoclonal
ndash Lise de uma gota de sangue
ndash A reaccedilatildeo eacute revelada com adiccedilatildeo de ac policlonal anti-HRP2 conjugado com lipossomas contendo corante
Diagnoacutestico
bull PCR
ndash Sensibilidade e especificidade maior do que o esfregaccedilo sanguiacuteneo
Diagnoacutestico laboratorial Fase aguda
bull Alta parasitemia
bull Pesquisa do parasito
ndash Exame de sangue a fresco
ndash Exame de sangue em gota espessa
ndash Esfregaccedilo sanguiacuteneo corado pelo Giemsa
ndash Microhematoacutecrito
ndash Meacutetodos de concentraccedilatildeo
ndash Inoculaccedilatildeo em aninais
Exame direto a fresco
bull Parasitas abundantes nos primeiros dias e semanas de incubaccedilatildeo
bull Colocar uma gota de sangue entre lacircmina e lamiacutenula e examinar imediatamente apoacutes a coleta para evitar a coagulaccedilatildeo
bull Para retardar a coagulaccedilatildeo adicionar uma gota de soluccedilatildeo salina
bull Analisar em microscoacutepio oacuteptico a presenccedila das formas tripomastigotas
Exame de sangue em gota espessa
bull Analisa uma maior quantidade de material bioloacutegico
bull Verifica a presenccedila de formas tripomastigotas sanguiacuteneas ndash Colocar 3 gotas de sangue na lacircmina ndash Com o canto de outra espalhar o material em uma
aacuterea de aproximadamente 1 cm da lacircmina ndash Deixar secar ao ar durante 6 horas Natildeo ultrapassar 36
horas ndash Corar pelo Giemsa Deixar em repouso por 30 min ndash Lavar e examinar
Esfregaccedilo sanguiacuteneo
bull Colocar uma gota de sangue na extremidade direita da lacircmina
bull Pegar outra lacircmina segurar por cima com a matildeo direita e com uma inclinaccedilatildeo de 45deg encostar adiante da gota
bull Deixar mesma se espalhar pela superfiacutecie de contato das duas lacircminas
bull Puxar a gota espalhada ateacute o final de lacircmina
bull Secar e corar pelo Giemsa ou Leishman
Esfregaccedilo sanguiacuteneo
Microhematoacutecrito Creme leucocitaacuterio
Microhematoacutecrito
bull Colher sangue em tubo capilar
bull Centrifugar em microcentriacutefuga por 5 minutos agrave 10000 rpm
bull Avaliar o microhematocrito em microscopia oacuteptica
bull Verificar a presenccedila das formas tripomastigotas presentes no creme leucocitaacuterio
bull Se positivo realizar esfregaccedilo do creme leucocitaacuterio
bull Fixar com aacutelcool metiacutelico e corar com Gienza Analisar em microscoacutepio oacuteptico
Meacutetodo de concentraccedilatildeo
bull Meacutetodo de Strout
ndash Realizar a coleta de sangue em tubo sem anticoagulante
ndash Aguardar a retraccedilatildeo do coaacutegulo Os parasitas concentrar-se-atildeo no soro a medida que ocorrer a retraccedilatildeo do coaacutegulo
ndash O soro eacute centrifugado para anaacutelise do sedimento
Inoculaccedilatildeo em animais
bull Inoculaccedilatildeo de sangue ou creme leucocitaacuterio em camundongos jovens
bull Inoculaccedilatildeo intra-peritoneal intra-conjuntival e a via oral
bull Avaliaccedilatildeo das formas de Tcruzi
bull Teacutecnica utilizada em pesquisa
Diagnoacutestico laboratorial Fase crocircnica
bull Xenodiagnoacutestico bull Hemocultura bull Reaccedilatildeo de hemaglutinaccedilatildeo indireta bull RIFI bull ELISA bull PCR bull PaGIA bull LMCo bull Pesquisa de anticorpos antitripomastigotas vivos
Hemocultura
bull Meio LIT ndash Liver Infusion Triptose
bull Meio NNN ndash McNeal Novy e Nicolle
bull Utilizaccedilatildeo de 30ml de sangue heparinizado
bull Centrifugaccedilatildeo por 30 minutos em 3000 rpm
bull Despreza-se o plasma e o sedimento celular eacute lavado com meio LIT ( Liver Infusion Triptose) para eliminaccedilatildeo de possiacuteveis anticorpos
Hemocultura
bull Sedimento distribuiacutedo em 6 tubos com 5 ml de LIT
bull Os tubos satildeo mantidos a 28degC homogeneizados 3x semana e avaliados quinzenalmente ateacute 90 dias
bull Centrifugaccedilatildeo e avaliaccedilatildeo do sedimento de hemaacutecias
bull Leitura realizada pela observaccedilatildeo microscoacutepica de gotas do meio
bull Aumento da positividade para sangue processado imediatamente apoacutes a coleta cultivado em prazo de tempo maior (120 dias) e repeticcedilatildeo da teacutecnica por 3 vezes
Wuchereria bancrofti
Taxonomia
bull Reino Animalia
bull Filo Nematoda
bull Classe Secernentea
bull Ordem Filariidea
bull Superfamiacutelia Filarioidea
bull FamiacuteliaOnchocercidae
bull GecircnerosWuchereria
bull Espeacutecie Wbancrofti
Formas evolutivas
bull Heteroxecircnico
bull Hospedeiro vertebrado homem
bull Hospedeiro intermediaacuterio Culex quinquefasciatus
bull Formas evolutivas ndash HV verme adulto (fecircmea e macho) localizados nos
vasos e gacircnglios linfaacuteticos da regiatildeo abdominal peacutelvica (perna e escroto) mamas e braccedilo
ndash microfilaacuterias eliminadas pelas fecircmeas graacutevidas Saem dos ductos linfaacuteticos e atingem circulaccedilatildeo sanguiacutenea
ndash HI larva L1 L2 e L3 (infectante)
Culex quinquefasciatus
Morfologia
bull Macho 35 a 4 cm x 01mm com extremidade posterior enrrolada ventralmente
bull Fecircmea 7 a 10cm x 03 mm com vagina exteriorizada em uma vulva localizada proacutexima agrave extremidade anterior
bull Microfilaacuteria Presenccedila de bainha e estilete bucal na parte anterior que as diferencia de outros filariacutedeos sanguiacuteneos Possuem 250 a 300 microm e uma grande qtde de nuacutecleos
bull Larva L3 possui aproximadamente 15 a 20 mm de comprimento
Microfilaacuteria
Ciclo evolutivo
bull Fecircmea do inseto realiza o hematofagismo noturno e ingere as microfilaacuterias
bull Estocircmago do vetor microfilaacuterias perdem a bainha atravessam a parede do estocircmago e migram para os muacutesculos toraacutecicos ndash L1
bull Apoacutes 20 dias a larva estaacute na forma infectante L3 medindo aproximadamente 2mm
bull Migraccedilatildeo da larva para a proboacutescida concentrando-se no laacutebio do moquito
Microfilaacuteria Presenccedila de bainha Cauda pontuda com nuacutecleos grandes largos e bem separados Nuacutecleos caudais em fila uacutenica
Ciclo evolutivo
bull Repasto sanguiacuteneo do inseto infectado
ndash As larvas L3 migram do laacutebio do vetor para a pele do HV
ndash Migram para os vasos linfaacuteticos e tornam-se vermes adultos
ndash Apoacutes 8 meses as fecircmeas graacutevidas produzem as primeiras microfilaacuterias
Periodicidade
bull Periodicidade noturna das microfilaacuterias
ndash Durante o dia localizam-se nos capilares profundos
ndash Durante a noite vasos sanguiacuteneos perifeacutericos
ndash Pico da microfilaremia meia-noite coincidindo com o horaacuterio de hematofagismo do inseto transmissor
Patologia
bull Periacuteodo assintomaacutetico bull Fase aguda bull Processos inflamatoacuterios produzidos por larvas L4 e adultos jovens
que colonizam as vias linfaacuteticas ndash Linfadenites linfonodos inguinais epitrocleanos e axilares com
desenvolvimento de granulomas com calcificaccedilatildeo apoacutes a morte dos vermes
ndash Linfangite inflamaccedilatildeo e dilataccedilatildeo dos vasos linfaacuteticos ndash Febre mal estar ndash Funiculite filariana linfangite do cordatildeo espermaacutetico e varicocele
bull Fase crocircnica ndash Hidrocele ndash Linfedema ndash Quiluacuteria ndash Elefantiacutease
Quiluacuteria
Patologia
bull Processos obstrutivos ndash Formaccedilatildeo de novelos envolvidos por reaccedilatildeo
inflamatoacuteria e pela formaccedilatildeo de fibrose
ndash Estase e congestatildeo da linfa produzindo linfoedema tecidual
ndash Extravasamento produzindo derrame linfaacutetico ascite linfaacutetica linfuacuteria linforreacuteia linfotoacuterax linfocele etc
ndash A ruptura de vasos linfaacuteticos para o interior do sistema excretor urinaacuterio daacute origem agrave quiluacuteria
Patologia
bull Complicaccedilotildees associadas agrave filariose
ndash Elefantiacutease
bull Caracterizada por processo inflamatoacuterio e fibrose crocircnica do oacutergatildeo atingido
bull Hipertrofia da derme do tecido conjuntivo aumento exagerado do volume do oacutergatildeo com queratinizaccedilatildeo e rugosidade
bull A pele perde a elasticidade resseca e se torna sujeita a infecccedilotildees bacterianas
Patologia
bull Permanecimento na aacuterea endecircmica
bull Nuacutemero de larvas inoculadas
bull Frequecircncia das re-infecccedilotildees
bull O nuacutemero de acasalamento dos vermes e suas localizaccedilotildees anatocircmicas
bull A sensibilizaccedilatildeo do organismo e a intensidade das reaccedilotildees inflamatoacuterias do paciente
bull As infecccedilotildees bacterianas associadas
Diagnoacutestico
bull Pesquisa de microfilaacuterias no sangue perifeacuterico ndash 20 40 ou 60 microL- de preferecircncia entre as 10 h da noite e 4h da manhatilde
ndash Gota espessa Coloraccedilatildeo de Giemsa
ndash Meacutetodos de concentraccedilatildeo Filtraccedilatildeo em membrana de policarbonato milipore ou nucleopore
ndash Meacutetodo de Knott
bull Na fase crocircnica as microfilaacuterias raramente satildeo detectadas no sangue perifeacuterico
Gota espessa
bull Possibilita a visualizaccedilatildeo da bainha fato que difere a microfilaria de W bancrofti de outro filariacutedeos sanguiacuteneos
bull Apresenta um baixo custo em comparaccedilatildeo com outras mais avanccediladas como a filtraccedilatildeo de sangue em membrana de policarbonato
bull Possui baixa sensibilidade natildeo indicada em situaccedilotildees em que os parasitados se mostram com baixa microfilaremia ou amicrofilarecircmicos
Concentraccedilatildeo
bull Baseia-se na passagem de sangue venoso atraveacutes de uma membrana (Milipore ou Nuclepore) de diacircmetro de 13 a 25 mm e poros de 5 ou 3 μm
bull O material retido na membrana sendo fixado corado e observado ao microscoacutepio
bull Essa teacutecnica assim como a de Knott permite a identificaccedilatildeo de indiviacuteduos com baixiacutessimas parasitemias (quantidade de microfilarias natildeo detectaacuteveis pela teacutecnica de gota espessa)
Teacutecnica de Knott
bull Retirar 2 ml de sangue total por punccedilatildeo venosa e colocar imediatamente em um tubo contendo 10 ml de formol a 2
bull Fechar o tubo e misture completamente invertendo-o e agitando-o O formol hemolisa as hemaacutecias mata fixa e distende as microfilaacuterias
bull Centrifugar o sangue a 1500 rpm por 5 minutos
bull Decantar o sobrenadante
Teacutecnica de Knott
bull Retirar o sedimento com uma pipeta Pasteur e espalhar a gota espessa sobre uma lacircmina
bull Deixar secar bem e corar com Giemsa
bull Examinar com objetiva de imersatildeo
bull Esta teacutecnica possibilita que o exame microscoacutepico laboratorial seja realizado vaacuterios dias apoacutes a coleta de material realizada no campo
Exames de imagem
bull Ultranossografia
ndash Possibilidade de visualizar os movimentos de vermes adultos vivos de W bancrofti em vaso linfaacutetico especificamente em vasos intraescrotais do cordatildeo espermaacutetico
ndash O movimento ativo e ininterrupto dos vermes adultos durante as 24 horas do dia eacute denominado sinal da ldquodanccedila das filaacuteriasrdquo
Diagnoacutestico soroloacutegico
bull Teste imunocromatograacutefico desenvolvido pelo ICT Diagnostic - ICT card
ndash Teste qualilativo
ndash Cartatildeo possui ac de antifilaacuteria e o controle eacute formado por ac anti Ig G humano
Plasmodium spp
Taxonomia
bull Reino Protozoa
bull FiloApicomplexa
bull Classe Sporozoea
bull Ordem Hemosporidiida
bull Famiacutelia Plasmodiidae
bull Gecircneros Plasmodium
bull Espeacutecie Pfalciparum Pvivax Povale e Pmalariae
Plasmodium
bull Ciclo bioloacutegico Hospedeiro vertebrado e invertebrado
bull Hospedeiro invertebrado ndash Vetor
ndash Fecircmeas hematoacutefagas do gecircnero Anopheles
ndash Brasil Anopheles (N)darlingi A (N) aquasalis A (N) albitarsis A (K) cruzii e A (K) bellator
ndash Possuem haacutebito noturno penetrando nas casas no crespuacutesculo saindo ao amanhecer
Plasmodium
bull Hospedeiro vertebrado homem
bull Transmissatildeo
ndash Vetor
ndash Transfusatildeo de sangue
ndash Compartilhamento de seringas
ndash Acidente com agulhas
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
bull Ciclo preacute-eritrociacutetico
ndash Forma inoculada esporozoiacutetos
ndash A fecircmea do anofelino infectado inocula no homem as formas infectantes localizadas na saliva
ndash Os esporozoiacutetas permancem na circulaccedilatildeo por aproximadamente uma hora
ndash Invadem os hepatoacutecitos e se diferenciam em trofozoiacutetas (criptozoiacuteto)
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
ndash Esquizogonia e formaccedilatildeo de esquizontes
ndash Divisatildeo nuclear e liberaccedilatildeo de merozoiacutetos
ndash Aproximadamente 10000 merozoiacutetos por hepatoacutecito
ndash Rompimento do hepatoacutecito e liberaccedilatildeo de merozoiacutetos na circulaccedilatildeo
ndash Duraccedilatildeo do ciclo aprox 1 a 2 semanas
Ciclo evolutivo
bull PVivax e Povale
ndash Alguns esporozoiacutetos geneticamente diferentes ficam na forma latente nos hepatoacutecitos permanecendo muitos meses Satildeo classificados como hipnozoiacuteto
ndash Satildeo responsaacuteveis pelas recaiacutedas tardias e formas de malaacuteria com periacuteodo de encubaccedilatildeo longo ndash 6 a 9 meses
FASE HEPAacuteTICA OU EXOERITROCIacuteTICA
Hepatoacutecito
FIacuteGADO
Invasatildeo do hepatoacutecito
Reproduccedilatildeo Assexuada
Esporozoiacutetos Lise dos hepatoacutecitos
Liberaccedilatildeo dos protozoaacuterios na corrente sanguumliacutenea
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
bull Ciclo eritrociacutetico
ndash Os merozoiacutetos invadem as hemaacutecias
ndash Diferenciaccedilatildeo em trofozoiacutetos
ndash Esquizogonia esquizonte
ndash Produccedilatildeo de merozoiacutetos e rompimento da hemaacutecia
ndash Merozoiacutetos invasatildeo de novas hemaacutecias
ndash Apoacutes algumas geraccedilotildees os merozoiacutetos natildeo mais se dividem e se diferenciam em gametoacutecitos ndash micro e macrogametoacutecito
FASE ERITROCIacuteTICA
Hepatoacutecito destruiacutedo pelos protozoaacuterios
Penetraccedilatildeo dos protozoaacuterios
Reproduccedilatildeo assexuada
Protozoaacuterios destroem as hemaacutecias
Diferenciaccedilatildeo em gametoacutecitos
Fecircmeas de Anopheles sugam hemaacutecias com gametoacutecitos
Ciclo no hospedeiro invertebrado
Ocorre nas hemaacutecias ou Eritroacutecitos
nas hemaacutecias
Protozoaacuterio no interior da hemaacutecia
Hemaacutecia com gametoacutecito
T trofozoiacuteto Em esquizonte com merozoiacuteto
Fase eritrociacutetica
bull Ciclo sanguiacuteneo ndash Pfalciparum P vivax e Povale 48 horas
ndash Pmalariae 72 horas
ndash Fonte de nutriccedilatildeo do Plasmodium no ciclo sanguiacuteneo hemoglobina
ndash Produccedilatildeo do pigmento malaacuterico hemozoiacutena bull Granulaccedilotildees de Schuffner Plasmodium vivax
bull Granulaccedilotildees de Maurer P falciparum
bull Granulaccedilotildees de Ziemann P malariae
ndash Fagocitose pelas ceacutelulas de Kuppffer e macroacutefagos do baccedilo
Trofozoiacutetos Pfalciparum
Trofozoiacutetos Pfalciparum
Esquizonte ndash P falciparum
Raros no sangue perifeacuterico Possuem 2 a 24 merozoiacutetos
Ocupam 23 do gloacutebulo vermelho
Gametoacutecitos Pfalciparum
Ciclo evolutivo Pvivax
Esquizonte ndash P vivax
Satildeo grandes e ameboacuteides Cromatina organizada em duas ou mais massas
Possuem 2 a 24 merozoiacutetos com pontos de cromatina
Gametoacutecito ndash Pvivax
Macrogametoacutecitos satildeo redondos ou ovais e ocupam toda ceacutelula hospedeira O citoplasma eacute geralmente corado de azul mais escuro e conteacutem pigmento marrom Microgametoacutecitos satildeo geralmente do tamanho de um RBC natildeo infectados com citoplasma corados de azul paacutelido rosa ou cinza
Trofozoiacutetos - P malariae
Esquizontes ndash P malariae
Aproximadamente 6 a 12 merozoiacutetos com arranjo de rosetas
Gametoacutecitos ndash P malariae
Ciclo evolutivo ndash HI
bull Ingestatildeo de hemaacutecias contendo gametoacutecitos durante o repasto sanguiacuteneo da fecircmea do anofelino
bull No intestino meacutedio do vetor gametogecircnese ndash Macrogametoacutecito ndash macrogameta feminino ndash Microgametoacutecito o processo de exflagelaccedilatildeo daacute
origem a 8 microgametas masculinos ndash Produccedilatildeo de ovo ou zigoto ndash O ovo encista na camada epitelial do intestino meacutedio
oocisto ndash Esporogonia liberaccedilatildeo de esporozoiacutetos
Ciclo evolutivo ndash HInvertebrado
ndash Os esporozoiacutetos satildeo transportados pelo hemolinfa ateacute as glacircndulas salivares do vetor ateacute atingirem o ducto salivar
bull Inoculaccedilatildeo no hospedeiro vertebrado atraveacutes da picada do inseto
Hemaacutecia com gametoacutecito
Fecircmeas de Anopheles sugam hemaacutecias com gametoacutecitos
CICLO NO INVERTEBRADO
No tubo digestivo
Zigoto
Penetraccedilatildeo na parede do tubo
digestivo
Migraccedilatildeo para as glacircndulas salivares
Desenvolvimento
Mosquito infectado
Diagnoacutestico
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado e espesso corado pelo Giemsa
bull Sangue colhido sem anticoagulante para melhor fixaccedilatildeo em lacircmina
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo espesso eacute mais eficiente para detecccedilatildeo da infecccedilatildeo
bull Esfregaccedilo delgado eacute mais eficiente para diferenciaccedilatildeo morfoloacutegica das espeacutecies
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo semiquantitativo
ndash Exame de 100 campos microscoacutepicos com resultado expresso pelo sistema de cruzes
Parasitos contados Nuacutemero de campos
microscoacutepicos cruzes
40 a 60 100 +2
1 1 +
2-20 1 ++
21-200 1 +++
+ 200 1 ++++
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo quantitativo derivado de anaacutelise semiquantitativa
Contagem de parasitos por campo
Cruzes Parasitos por mm3
40 a 60100 +2 200-300
1 + 301-500
2-20 ++ 501 - 10000
21-200 +++ 10001 ndash 100000
+ 200 ++++ 100000 ou mais
Diagnoacutestico
bull P falciparum
ndash Parte do ciclo celular aderido ao endoteacutelio capilar Encontro somente de trofozoitos e gametoacutecitos no sangue perifeacuterico
ndash Raramente os esquizontes satildeo encontrados no sangue perifeacuterico
Diagnoacutestico ndash Pvivax ndash Encontro de todas as formas de desenvolvimento ndash
trofozoiacuteto jovem maduro esquizontes e gametoacutecitos
ndash Os trofozoiacutetos maduros tecircm geralmente um aspecto irregular com extensotildees ameboacuteides em seu citoplasma
Diagnoacutestico ndash Pvivax
ndash Os gametoacutecitos femininos coram-se mais intensamente que os masculinos e apresentam nuacutecleo mais compacto geralmente em localizaccedilatildeo perifeacuterica
ndash O pigmento malaacuterico geralmente eacute abundante
Diagnoacutestico - Pmalariae
bull Realizado por meio de caracteriacutesticas morfoloacutegicas do parasito
ndash Verificaccedilatildeo em esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado
ndash Posiccedilatildeo equatorial do parasito
ndash Desenvolvimento sem deformaccedilatildeo do eritroacutecito
Diagnoacutestico
bull QBC ndash Teacutecnica que combina concentraccedilatildeo dos parasitos
pela centrifugaccedilatildeo do sangue em em microhematoacutecrito e a coloraccedilatildeo dos aacutecidos nucleacuteicos do parasito pelo fluorcromo laranja de acridina
ndash Utilizaccedilatildeo de tubos especiais e microscopia epifluorescente
ndash Teste raacutepido
ndash Alta sensibilidade
Diagnoacutestico
bull ParaSight-F ( Becton amp Dickinson)
ndash Teste raacutepido para captura da proteiacutena rica em histidina 2 de Pfalciparum( PfHRP2) e enzimas conservadas de 4 espeacutecies de plasmoacutedio (DHL e aldolase
ndash Utilizaccedilatildeo de fita de nitrocelulose contendo ac monoclonal
ndash Lise de uma gota de sangue
ndash A reaccedilatildeo eacute revelada com adiccedilatildeo de ac policlonal anti-HRP2 conjugado com lipossomas contendo corante
Diagnoacutestico
bull PCR
ndash Sensibilidade e especificidade maior do que o esfregaccedilo sanguiacuteneo
Exame direto a fresco
bull Parasitas abundantes nos primeiros dias e semanas de incubaccedilatildeo
bull Colocar uma gota de sangue entre lacircmina e lamiacutenula e examinar imediatamente apoacutes a coleta para evitar a coagulaccedilatildeo
bull Para retardar a coagulaccedilatildeo adicionar uma gota de soluccedilatildeo salina
bull Analisar em microscoacutepio oacuteptico a presenccedila das formas tripomastigotas
Exame de sangue em gota espessa
bull Analisa uma maior quantidade de material bioloacutegico
bull Verifica a presenccedila de formas tripomastigotas sanguiacuteneas ndash Colocar 3 gotas de sangue na lacircmina ndash Com o canto de outra espalhar o material em uma
aacuterea de aproximadamente 1 cm da lacircmina ndash Deixar secar ao ar durante 6 horas Natildeo ultrapassar 36
horas ndash Corar pelo Giemsa Deixar em repouso por 30 min ndash Lavar e examinar
Esfregaccedilo sanguiacuteneo
bull Colocar uma gota de sangue na extremidade direita da lacircmina
bull Pegar outra lacircmina segurar por cima com a matildeo direita e com uma inclinaccedilatildeo de 45deg encostar adiante da gota
bull Deixar mesma se espalhar pela superfiacutecie de contato das duas lacircminas
bull Puxar a gota espalhada ateacute o final de lacircmina
bull Secar e corar pelo Giemsa ou Leishman
Esfregaccedilo sanguiacuteneo
Microhematoacutecrito Creme leucocitaacuterio
Microhematoacutecrito
bull Colher sangue em tubo capilar
bull Centrifugar em microcentriacutefuga por 5 minutos agrave 10000 rpm
bull Avaliar o microhematocrito em microscopia oacuteptica
bull Verificar a presenccedila das formas tripomastigotas presentes no creme leucocitaacuterio
bull Se positivo realizar esfregaccedilo do creme leucocitaacuterio
bull Fixar com aacutelcool metiacutelico e corar com Gienza Analisar em microscoacutepio oacuteptico
Meacutetodo de concentraccedilatildeo
bull Meacutetodo de Strout
ndash Realizar a coleta de sangue em tubo sem anticoagulante
ndash Aguardar a retraccedilatildeo do coaacutegulo Os parasitas concentrar-se-atildeo no soro a medida que ocorrer a retraccedilatildeo do coaacutegulo
ndash O soro eacute centrifugado para anaacutelise do sedimento
Inoculaccedilatildeo em animais
bull Inoculaccedilatildeo de sangue ou creme leucocitaacuterio em camundongos jovens
bull Inoculaccedilatildeo intra-peritoneal intra-conjuntival e a via oral
bull Avaliaccedilatildeo das formas de Tcruzi
bull Teacutecnica utilizada em pesquisa
Diagnoacutestico laboratorial Fase crocircnica
bull Xenodiagnoacutestico bull Hemocultura bull Reaccedilatildeo de hemaglutinaccedilatildeo indireta bull RIFI bull ELISA bull PCR bull PaGIA bull LMCo bull Pesquisa de anticorpos antitripomastigotas vivos
Hemocultura
bull Meio LIT ndash Liver Infusion Triptose
bull Meio NNN ndash McNeal Novy e Nicolle
bull Utilizaccedilatildeo de 30ml de sangue heparinizado
bull Centrifugaccedilatildeo por 30 minutos em 3000 rpm
bull Despreza-se o plasma e o sedimento celular eacute lavado com meio LIT ( Liver Infusion Triptose) para eliminaccedilatildeo de possiacuteveis anticorpos
Hemocultura
bull Sedimento distribuiacutedo em 6 tubos com 5 ml de LIT
bull Os tubos satildeo mantidos a 28degC homogeneizados 3x semana e avaliados quinzenalmente ateacute 90 dias
bull Centrifugaccedilatildeo e avaliaccedilatildeo do sedimento de hemaacutecias
bull Leitura realizada pela observaccedilatildeo microscoacutepica de gotas do meio
bull Aumento da positividade para sangue processado imediatamente apoacutes a coleta cultivado em prazo de tempo maior (120 dias) e repeticcedilatildeo da teacutecnica por 3 vezes
Wuchereria bancrofti
Taxonomia
bull Reino Animalia
bull Filo Nematoda
bull Classe Secernentea
bull Ordem Filariidea
bull Superfamiacutelia Filarioidea
bull FamiacuteliaOnchocercidae
bull GecircnerosWuchereria
bull Espeacutecie Wbancrofti
Formas evolutivas
bull Heteroxecircnico
bull Hospedeiro vertebrado homem
bull Hospedeiro intermediaacuterio Culex quinquefasciatus
bull Formas evolutivas ndash HV verme adulto (fecircmea e macho) localizados nos
vasos e gacircnglios linfaacuteticos da regiatildeo abdominal peacutelvica (perna e escroto) mamas e braccedilo
ndash microfilaacuterias eliminadas pelas fecircmeas graacutevidas Saem dos ductos linfaacuteticos e atingem circulaccedilatildeo sanguiacutenea
ndash HI larva L1 L2 e L3 (infectante)
Culex quinquefasciatus
Morfologia
bull Macho 35 a 4 cm x 01mm com extremidade posterior enrrolada ventralmente
bull Fecircmea 7 a 10cm x 03 mm com vagina exteriorizada em uma vulva localizada proacutexima agrave extremidade anterior
bull Microfilaacuteria Presenccedila de bainha e estilete bucal na parte anterior que as diferencia de outros filariacutedeos sanguiacuteneos Possuem 250 a 300 microm e uma grande qtde de nuacutecleos
bull Larva L3 possui aproximadamente 15 a 20 mm de comprimento
Microfilaacuteria
Ciclo evolutivo
bull Fecircmea do inseto realiza o hematofagismo noturno e ingere as microfilaacuterias
bull Estocircmago do vetor microfilaacuterias perdem a bainha atravessam a parede do estocircmago e migram para os muacutesculos toraacutecicos ndash L1
bull Apoacutes 20 dias a larva estaacute na forma infectante L3 medindo aproximadamente 2mm
bull Migraccedilatildeo da larva para a proboacutescida concentrando-se no laacutebio do moquito
Microfilaacuteria Presenccedila de bainha Cauda pontuda com nuacutecleos grandes largos e bem separados Nuacutecleos caudais em fila uacutenica
Ciclo evolutivo
bull Repasto sanguiacuteneo do inseto infectado
ndash As larvas L3 migram do laacutebio do vetor para a pele do HV
ndash Migram para os vasos linfaacuteticos e tornam-se vermes adultos
ndash Apoacutes 8 meses as fecircmeas graacutevidas produzem as primeiras microfilaacuterias
Periodicidade
bull Periodicidade noturna das microfilaacuterias
ndash Durante o dia localizam-se nos capilares profundos
ndash Durante a noite vasos sanguiacuteneos perifeacutericos
ndash Pico da microfilaremia meia-noite coincidindo com o horaacuterio de hematofagismo do inseto transmissor
Patologia
bull Periacuteodo assintomaacutetico bull Fase aguda bull Processos inflamatoacuterios produzidos por larvas L4 e adultos jovens
que colonizam as vias linfaacuteticas ndash Linfadenites linfonodos inguinais epitrocleanos e axilares com
desenvolvimento de granulomas com calcificaccedilatildeo apoacutes a morte dos vermes
ndash Linfangite inflamaccedilatildeo e dilataccedilatildeo dos vasos linfaacuteticos ndash Febre mal estar ndash Funiculite filariana linfangite do cordatildeo espermaacutetico e varicocele
bull Fase crocircnica ndash Hidrocele ndash Linfedema ndash Quiluacuteria ndash Elefantiacutease
Quiluacuteria
Patologia
bull Processos obstrutivos ndash Formaccedilatildeo de novelos envolvidos por reaccedilatildeo
inflamatoacuteria e pela formaccedilatildeo de fibrose
ndash Estase e congestatildeo da linfa produzindo linfoedema tecidual
ndash Extravasamento produzindo derrame linfaacutetico ascite linfaacutetica linfuacuteria linforreacuteia linfotoacuterax linfocele etc
ndash A ruptura de vasos linfaacuteticos para o interior do sistema excretor urinaacuterio daacute origem agrave quiluacuteria
Patologia
bull Complicaccedilotildees associadas agrave filariose
ndash Elefantiacutease
bull Caracterizada por processo inflamatoacuterio e fibrose crocircnica do oacutergatildeo atingido
bull Hipertrofia da derme do tecido conjuntivo aumento exagerado do volume do oacutergatildeo com queratinizaccedilatildeo e rugosidade
bull A pele perde a elasticidade resseca e se torna sujeita a infecccedilotildees bacterianas
Patologia
bull Permanecimento na aacuterea endecircmica
bull Nuacutemero de larvas inoculadas
bull Frequecircncia das re-infecccedilotildees
bull O nuacutemero de acasalamento dos vermes e suas localizaccedilotildees anatocircmicas
bull A sensibilizaccedilatildeo do organismo e a intensidade das reaccedilotildees inflamatoacuterias do paciente
bull As infecccedilotildees bacterianas associadas
Diagnoacutestico
bull Pesquisa de microfilaacuterias no sangue perifeacuterico ndash 20 40 ou 60 microL- de preferecircncia entre as 10 h da noite e 4h da manhatilde
ndash Gota espessa Coloraccedilatildeo de Giemsa
ndash Meacutetodos de concentraccedilatildeo Filtraccedilatildeo em membrana de policarbonato milipore ou nucleopore
ndash Meacutetodo de Knott
bull Na fase crocircnica as microfilaacuterias raramente satildeo detectadas no sangue perifeacuterico
Gota espessa
bull Possibilita a visualizaccedilatildeo da bainha fato que difere a microfilaria de W bancrofti de outro filariacutedeos sanguiacuteneos
bull Apresenta um baixo custo em comparaccedilatildeo com outras mais avanccediladas como a filtraccedilatildeo de sangue em membrana de policarbonato
bull Possui baixa sensibilidade natildeo indicada em situaccedilotildees em que os parasitados se mostram com baixa microfilaremia ou amicrofilarecircmicos
Concentraccedilatildeo
bull Baseia-se na passagem de sangue venoso atraveacutes de uma membrana (Milipore ou Nuclepore) de diacircmetro de 13 a 25 mm e poros de 5 ou 3 μm
bull O material retido na membrana sendo fixado corado e observado ao microscoacutepio
bull Essa teacutecnica assim como a de Knott permite a identificaccedilatildeo de indiviacuteduos com baixiacutessimas parasitemias (quantidade de microfilarias natildeo detectaacuteveis pela teacutecnica de gota espessa)
Teacutecnica de Knott
bull Retirar 2 ml de sangue total por punccedilatildeo venosa e colocar imediatamente em um tubo contendo 10 ml de formol a 2
bull Fechar o tubo e misture completamente invertendo-o e agitando-o O formol hemolisa as hemaacutecias mata fixa e distende as microfilaacuterias
bull Centrifugar o sangue a 1500 rpm por 5 minutos
bull Decantar o sobrenadante
Teacutecnica de Knott
bull Retirar o sedimento com uma pipeta Pasteur e espalhar a gota espessa sobre uma lacircmina
bull Deixar secar bem e corar com Giemsa
bull Examinar com objetiva de imersatildeo
bull Esta teacutecnica possibilita que o exame microscoacutepico laboratorial seja realizado vaacuterios dias apoacutes a coleta de material realizada no campo
Exames de imagem
bull Ultranossografia
ndash Possibilidade de visualizar os movimentos de vermes adultos vivos de W bancrofti em vaso linfaacutetico especificamente em vasos intraescrotais do cordatildeo espermaacutetico
ndash O movimento ativo e ininterrupto dos vermes adultos durante as 24 horas do dia eacute denominado sinal da ldquodanccedila das filaacuteriasrdquo
Diagnoacutestico soroloacutegico
bull Teste imunocromatograacutefico desenvolvido pelo ICT Diagnostic - ICT card
ndash Teste qualilativo
ndash Cartatildeo possui ac de antifilaacuteria e o controle eacute formado por ac anti Ig G humano
Plasmodium spp
Taxonomia
bull Reino Protozoa
bull FiloApicomplexa
bull Classe Sporozoea
bull Ordem Hemosporidiida
bull Famiacutelia Plasmodiidae
bull Gecircneros Plasmodium
bull Espeacutecie Pfalciparum Pvivax Povale e Pmalariae
Plasmodium
bull Ciclo bioloacutegico Hospedeiro vertebrado e invertebrado
bull Hospedeiro invertebrado ndash Vetor
ndash Fecircmeas hematoacutefagas do gecircnero Anopheles
ndash Brasil Anopheles (N)darlingi A (N) aquasalis A (N) albitarsis A (K) cruzii e A (K) bellator
ndash Possuem haacutebito noturno penetrando nas casas no crespuacutesculo saindo ao amanhecer
Plasmodium
bull Hospedeiro vertebrado homem
bull Transmissatildeo
ndash Vetor
ndash Transfusatildeo de sangue
ndash Compartilhamento de seringas
ndash Acidente com agulhas
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
bull Ciclo preacute-eritrociacutetico
ndash Forma inoculada esporozoiacutetos
ndash A fecircmea do anofelino infectado inocula no homem as formas infectantes localizadas na saliva
ndash Os esporozoiacutetas permancem na circulaccedilatildeo por aproximadamente uma hora
ndash Invadem os hepatoacutecitos e se diferenciam em trofozoiacutetas (criptozoiacuteto)
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
ndash Esquizogonia e formaccedilatildeo de esquizontes
ndash Divisatildeo nuclear e liberaccedilatildeo de merozoiacutetos
ndash Aproximadamente 10000 merozoiacutetos por hepatoacutecito
ndash Rompimento do hepatoacutecito e liberaccedilatildeo de merozoiacutetos na circulaccedilatildeo
ndash Duraccedilatildeo do ciclo aprox 1 a 2 semanas
Ciclo evolutivo
bull PVivax e Povale
ndash Alguns esporozoiacutetos geneticamente diferentes ficam na forma latente nos hepatoacutecitos permanecendo muitos meses Satildeo classificados como hipnozoiacuteto
ndash Satildeo responsaacuteveis pelas recaiacutedas tardias e formas de malaacuteria com periacuteodo de encubaccedilatildeo longo ndash 6 a 9 meses
FASE HEPAacuteTICA OU EXOERITROCIacuteTICA
Hepatoacutecito
FIacuteGADO
Invasatildeo do hepatoacutecito
Reproduccedilatildeo Assexuada
Esporozoiacutetos Lise dos hepatoacutecitos
Liberaccedilatildeo dos protozoaacuterios na corrente sanguumliacutenea
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
bull Ciclo eritrociacutetico
ndash Os merozoiacutetos invadem as hemaacutecias
ndash Diferenciaccedilatildeo em trofozoiacutetos
ndash Esquizogonia esquizonte
ndash Produccedilatildeo de merozoiacutetos e rompimento da hemaacutecia
ndash Merozoiacutetos invasatildeo de novas hemaacutecias
ndash Apoacutes algumas geraccedilotildees os merozoiacutetos natildeo mais se dividem e se diferenciam em gametoacutecitos ndash micro e macrogametoacutecito
FASE ERITROCIacuteTICA
Hepatoacutecito destruiacutedo pelos protozoaacuterios
Penetraccedilatildeo dos protozoaacuterios
Reproduccedilatildeo assexuada
Protozoaacuterios destroem as hemaacutecias
Diferenciaccedilatildeo em gametoacutecitos
Fecircmeas de Anopheles sugam hemaacutecias com gametoacutecitos
Ciclo no hospedeiro invertebrado
Ocorre nas hemaacutecias ou Eritroacutecitos
nas hemaacutecias
Protozoaacuterio no interior da hemaacutecia
Hemaacutecia com gametoacutecito
T trofozoiacuteto Em esquizonte com merozoiacuteto
Fase eritrociacutetica
bull Ciclo sanguiacuteneo ndash Pfalciparum P vivax e Povale 48 horas
ndash Pmalariae 72 horas
ndash Fonte de nutriccedilatildeo do Plasmodium no ciclo sanguiacuteneo hemoglobina
ndash Produccedilatildeo do pigmento malaacuterico hemozoiacutena bull Granulaccedilotildees de Schuffner Plasmodium vivax
bull Granulaccedilotildees de Maurer P falciparum
bull Granulaccedilotildees de Ziemann P malariae
ndash Fagocitose pelas ceacutelulas de Kuppffer e macroacutefagos do baccedilo
Trofozoiacutetos Pfalciparum
Trofozoiacutetos Pfalciparum
Esquizonte ndash P falciparum
Raros no sangue perifeacuterico Possuem 2 a 24 merozoiacutetos
Ocupam 23 do gloacutebulo vermelho
Gametoacutecitos Pfalciparum
Ciclo evolutivo Pvivax
Esquizonte ndash P vivax
Satildeo grandes e ameboacuteides Cromatina organizada em duas ou mais massas
Possuem 2 a 24 merozoiacutetos com pontos de cromatina
Gametoacutecito ndash Pvivax
Macrogametoacutecitos satildeo redondos ou ovais e ocupam toda ceacutelula hospedeira O citoplasma eacute geralmente corado de azul mais escuro e conteacutem pigmento marrom Microgametoacutecitos satildeo geralmente do tamanho de um RBC natildeo infectados com citoplasma corados de azul paacutelido rosa ou cinza
Trofozoiacutetos - P malariae
Esquizontes ndash P malariae
Aproximadamente 6 a 12 merozoiacutetos com arranjo de rosetas
Gametoacutecitos ndash P malariae
Ciclo evolutivo ndash HI
bull Ingestatildeo de hemaacutecias contendo gametoacutecitos durante o repasto sanguiacuteneo da fecircmea do anofelino
bull No intestino meacutedio do vetor gametogecircnese ndash Macrogametoacutecito ndash macrogameta feminino ndash Microgametoacutecito o processo de exflagelaccedilatildeo daacute
origem a 8 microgametas masculinos ndash Produccedilatildeo de ovo ou zigoto ndash O ovo encista na camada epitelial do intestino meacutedio
oocisto ndash Esporogonia liberaccedilatildeo de esporozoiacutetos
Ciclo evolutivo ndash HInvertebrado
ndash Os esporozoiacutetos satildeo transportados pelo hemolinfa ateacute as glacircndulas salivares do vetor ateacute atingirem o ducto salivar
bull Inoculaccedilatildeo no hospedeiro vertebrado atraveacutes da picada do inseto
Hemaacutecia com gametoacutecito
Fecircmeas de Anopheles sugam hemaacutecias com gametoacutecitos
CICLO NO INVERTEBRADO
No tubo digestivo
Zigoto
Penetraccedilatildeo na parede do tubo
digestivo
Migraccedilatildeo para as glacircndulas salivares
Desenvolvimento
Mosquito infectado
Diagnoacutestico
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado e espesso corado pelo Giemsa
bull Sangue colhido sem anticoagulante para melhor fixaccedilatildeo em lacircmina
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo espesso eacute mais eficiente para detecccedilatildeo da infecccedilatildeo
bull Esfregaccedilo delgado eacute mais eficiente para diferenciaccedilatildeo morfoloacutegica das espeacutecies
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo semiquantitativo
ndash Exame de 100 campos microscoacutepicos com resultado expresso pelo sistema de cruzes
Parasitos contados Nuacutemero de campos
microscoacutepicos cruzes
40 a 60 100 +2
1 1 +
2-20 1 ++
21-200 1 +++
+ 200 1 ++++
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo quantitativo derivado de anaacutelise semiquantitativa
Contagem de parasitos por campo
Cruzes Parasitos por mm3
40 a 60100 +2 200-300
1 + 301-500
2-20 ++ 501 - 10000
21-200 +++ 10001 ndash 100000
+ 200 ++++ 100000 ou mais
Diagnoacutestico
bull P falciparum
ndash Parte do ciclo celular aderido ao endoteacutelio capilar Encontro somente de trofozoitos e gametoacutecitos no sangue perifeacuterico
ndash Raramente os esquizontes satildeo encontrados no sangue perifeacuterico
Diagnoacutestico ndash Pvivax ndash Encontro de todas as formas de desenvolvimento ndash
trofozoiacuteto jovem maduro esquizontes e gametoacutecitos
ndash Os trofozoiacutetos maduros tecircm geralmente um aspecto irregular com extensotildees ameboacuteides em seu citoplasma
Diagnoacutestico ndash Pvivax
ndash Os gametoacutecitos femininos coram-se mais intensamente que os masculinos e apresentam nuacutecleo mais compacto geralmente em localizaccedilatildeo perifeacuterica
ndash O pigmento malaacuterico geralmente eacute abundante
Diagnoacutestico - Pmalariae
bull Realizado por meio de caracteriacutesticas morfoloacutegicas do parasito
ndash Verificaccedilatildeo em esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado
ndash Posiccedilatildeo equatorial do parasito
ndash Desenvolvimento sem deformaccedilatildeo do eritroacutecito
Diagnoacutestico
bull QBC ndash Teacutecnica que combina concentraccedilatildeo dos parasitos
pela centrifugaccedilatildeo do sangue em em microhematoacutecrito e a coloraccedilatildeo dos aacutecidos nucleacuteicos do parasito pelo fluorcromo laranja de acridina
ndash Utilizaccedilatildeo de tubos especiais e microscopia epifluorescente
ndash Teste raacutepido
ndash Alta sensibilidade
Diagnoacutestico
bull ParaSight-F ( Becton amp Dickinson)
ndash Teste raacutepido para captura da proteiacutena rica em histidina 2 de Pfalciparum( PfHRP2) e enzimas conservadas de 4 espeacutecies de plasmoacutedio (DHL e aldolase
ndash Utilizaccedilatildeo de fita de nitrocelulose contendo ac monoclonal
ndash Lise de uma gota de sangue
ndash A reaccedilatildeo eacute revelada com adiccedilatildeo de ac policlonal anti-HRP2 conjugado com lipossomas contendo corante
Diagnoacutestico
bull PCR
ndash Sensibilidade e especificidade maior do que o esfregaccedilo sanguiacuteneo
Exame de sangue em gota espessa
bull Analisa uma maior quantidade de material bioloacutegico
bull Verifica a presenccedila de formas tripomastigotas sanguiacuteneas ndash Colocar 3 gotas de sangue na lacircmina ndash Com o canto de outra espalhar o material em uma
aacuterea de aproximadamente 1 cm da lacircmina ndash Deixar secar ao ar durante 6 horas Natildeo ultrapassar 36
horas ndash Corar pelo Giemsa Deixar em repouso por 30 min ndash Lavar e examinar
Esfregaccedilo sanguiacuteneo
bull Colocar uma gota de sangue na extremidade direita da lacircmina
bull Pegar outra lacircmina segurar por cima com a matildeo direita e com uma inclinaccedilatildeo de 45deg encostar adiante da gota
bull Deixar mesma se espalhar pela superfiacutecie de contato das duas lacircminas
bull Puxar a gota espalhada ateacute o final de lacircmina
bull Secar e corar pelo Giemsa ou Leishman
Esfregaccedilo sanguiacuteneo
Microhematoacutecrito Creme leucocitaacuterio
Microhematoacutecrito
bull Colher sangue em tubo capilar
bull Centrifugar em microcentriacutefuga por 5 minutos agrave 10000 rpm
bull Avaliar o microhematocrito em microscopia oacuteptica
bull Verificar a presenccedila das formas tripomastigotas presentes no creme leucocitaacuterio
bull Se positivo realizar esfregaccedilo do creme leucocitaacuterio
bull Fixar com aacutelcool metiacutelico e corar com Gienza Analisar em microscoacutepio oacuteptico
Meacutetodo de concentraccedilatildeo
bull Meacutetodo de Strout
ndash Realizar a coleta de sangue em tubo sem anticoagulante
ndash Aguardar a retraccedilatildeo do coaacutegulo Os parasitas concentrar-se-atildeo no soro a medida que ocorrer a retraccedilatildeo do coaacutegulo
ndash O soro eacute centrifugado para anaacutelise do sedimento
Inoculaccedilatildeo em animais
bull Inoculaccedilatildeo de sangue ou creme leucocitaacuterio em camundongos jovens
bull Inoculaccedilatildeo intra-peritoneal intra-conjuntival e a via oral
bull Avaliaccedilatildeo das formas de Tcruzi
bull Teacutecnica utilizada em pesquisa
Diagnoacutestico laboratorial Fase crocircnica
bull Xenodiagnoacutestico bull Hemocultura bull Reaccedilatildeo de hemaglutinaccedilatildeo indireta bull RIFI bull ELISA bull PCR bull PaGIA bull LMCo bull Pesquisa de anticorpos antitripomastigotas vivos
Hemocultura
bull Meio LIT ndash Liver Infusion Triptose
bull Meio NNN ndash McNeal Novy e Nicolle
bull Utilizaccedilatildeo de 30ml de sangue heparinizado
bull Centrifugaccedilatildeo por 30 minutos em 3000 rpm
bull Despreza-se o plasma e o sedimento celular eacute lavado com meio LIT ( Liver Infusion Triptose) para eliminaccedilatildeo de possiacuteveis anticorpos
Hemocultura
bull Sedimento distribuiacutedo em 6 tubos com 5 ml de LIT
bull Os tubos satildeo mantidos a 28degC homogeneizados 3x semana e avaliados quinzenalmente ateacute 90 dias
bull Centrifugaccedilatildeo e avaliaccedilatildeo do sedimento de hemaacutecias
bull Leitura realizada pela observaccedilatildeo microscoacutepica de gotas do meio
bull Aumento da positividade para sangue processado imediatamente apoacutes a coleta cultivado em prazo de tempo maior (120 dias) e repeticcedilatildeo da teacutecnica por 3 vezes
Wuchereria bancrofti
Taxonomia
bull Reino Animalia
bull Filo Nematoda
bull Classe Secernentea
bull Ordem Filariidea
bull Superfamiacutelia Filarioidea
bull FamiacuteliaOnchocercidae
bull GecircnerosWuchereria
bull Espeacutecie Wbancrofti
Formas evolutivas
bull Heteroxecircnico
bull Hospedeiro vertebrado homem
bull Hospedeiro intermediaacuterio Culex quinquefasciatus
bull Formas evolutivas ndash HV verme adulto (fecircmea e macho) localizados nos
vasos e gacircnglios linfaacuteticos da regiatildeo abdominal peacutelvica (perna e escroto) mamas e braccedilo
ndash microfilaacuterias eliminadas pelas fecircmeas graacutevidas Saem dos ductos linfaacuteticos e atingem circulaccedilatildeo sanguiacutenea
ndash HI larva L1 L2 e L3 (infectante)
Culex quinquefasciatus
Morfologia
bull Macho 35 a 4 cm x 01mm com extremidade posterior enrrolada ventralmente
bull Fecircmea 7 a 10cm x 03 mm com vagina exteriorizada em uma vulva localizada proacutexima agrave extremidade anterior
bull Microfilaacuteria Presenccedila de bainha e estilete bucal na parte anterior que as diferencia de outros filariacutedeos sanguiacuteneos Possuem 250 a 300 microm e uma grande qtde de nuacutecleos
bull Larva L3 possui aproximadamente 15 a 20 mm de comprimento
Microfilaacuteria
Ciclo evolutivo
bull Fecircmea do inseto realiza o hematofagismo noturno e ingere as microfilaacuterias
bull Estocircmago do vetor microfilaacuterias perdem a bainha atravessam a parede do estocircmago e migram para os muacutesculos toraacutecicos ndash L1
bull Apoacutes 20 dias a larva estaacute na forma infectante L3 medindo aproximadamente 2mm
bull Migraccedilatildeo da larva para a proboacutescida concentrando-se no laacutebio do moquito
Microfilaacuteria Presenccedila de bainha Cauda pontuda com nuacutecleos grandes largos e bem separados Nuacutecleos caudais em fila uacutenica
Ciclo evolutivo
bull Repasto sanguiacuteneo do inseto infectado
ndash As larvas L3 migram do laacutebio do vetor para a pele do HV
ndash Migram para os vasos linfaacuteticos e tornam-se vermes adultos
ndash Apoacutes 8 meses as fecircmeas graacutevidas produzem as primeiras microfilaacuterias
Periodicidade
bull Periodicidade noturna das microfilaacuterias
ndash Durante o dia localizam-se nos capilares profundos
ndash Durante a noite vasos sanguiacuteneos perifeacutericos
ndash Pico da microfilaremia meia-noite coincidindo com o horaacuterio de hematofagismo do inseto transmissor
Patologia
bull Periacuteodo assintomaacutetico bull Fase aguda bull Processos inflamatoacuterios produzidos por larvas L4 e adultos jovens
que colonizam as vias linfaacuteticas ndash Linfadenites linfonodos inguinais epitrocleanos e axilares com
desenvolvimento de granulomas com calcificaccedilatildeo apoacutes a morte dos vermes
ndash Linfangite inflamaccedilatildeo e dilataccedilatildeo dos vasos linfaacuteticos ndash Febre mal estar ndash Funiculite filariana linfangite do cordatildeo espermaacutetico e varicocele
bull Fase crocircnica ndash Hidrocele ndash Linfedema ndash Quiluacuteria ndash Elefantiacutease
Quiluacuteria
Patologia
bull Processos obstrutivos ndash Formaccedilatildeo de novelos envolvidos por reaccedilatildeo
inflamatoacuteria e pela formaccedilatildeo de fibrose
ndash Estase e congestatildeo da linfa produzindo linfoedema tecidual
ndash Extravasamento produzindo derrame linfaacutetico ascite linfaacutetica linfuacuteria linforreacuteia linfotoacuterax linfocele etc
ndash A ruptura de vasos linfaacuteticos para o interior do sistema excretor urinaacuterio daacute origem agrave quiluacuteria
Patologia
bull Complicaccedilotildees associadas agrave filariose
ndash Elefantiacutease
bull Caracterizada por processo inflamatoacuterio e fibrose crocircnica do oacutergatildeo atingido
bull Hipertrofia da derme do tecido conjuntivo aumento exagerado do volume do oacutergatildeo com queratinizaccedilatildeo e rugosidade
bull A pele perde a elasticidade resseca e se torna sujeita a infecccedilotildees bacterianas
Patologia
bull Permanecimento na aacuterea endecircmica
bull Nuacutemero de larvas inoculadas
bull Frequecircncia das re-infecccedilotildees
bull O nuacutemero de acasalamento dos vermes e suas localizaccedilotildees anatocircmicas
bull A sensibilizaccedilatildeo do organismo e a intensidade das reaccedilotildees inflamatoacuterias do paciente
bull As infecccedilotildees bacterianas associadas
Diagnoacutestico
bull Pesquisa de microfilaacuterias no sangue perifeacuterico ndash 20 40 ou 60 microL- de preferecircncia entre as 10 h da noite e 4h da manhatilde
ndash Gota espessa Coloraccedilatildeo de Giemsa
ndash Meacutetodos de concentraccedilatildeo Filtraccedilatildeo em membrana de policarbonato milipore ou nucleopore
ndash Meacutetodo de Knott
bull Na fase crocircnica as microfilaacuterias raramente satildeo detectadas no sangue perifeacuterico
Gota espessa
bull Possibilita a visualizaccedilatildeo da bainha fato que difere a microfilaria de W bancrofti de outro filariacutedeos sanguiacuteneos
bull Apresenta um baixo custo em comparaccedilatildeo com outras mais avanccediladas como a filtraccedilatildeo de sangue em membrana de policarbonato
bull Possui baixa sensibilidade natildeo indicada em situaccedilotildees em que os parasitados se mostram com baixa microfilaremia ou amicrofilarecircmicos
Concentraccedilatildeo
bull Baseia-se na passagem de sangue venoso atraveacutes de uma membrana (Milipore ou Nuclepore) de diacircmetro de 13 a 25 mm e poros de 5 ou 3 μm
bull O material retido na membrana sendo fixado corado e observado ao microscoacutepio
bull Essa teacutecnica assim como a de Knott permite a identificaccedilatildeo de indiviacuteduos com baixiacutessimas parasitemias (quantidade de microfilarias natildeo detectaacuteveis pela teacutecnica de gota espessa)
Teacutecnica de Knott
bull Retirar 2 ml de sangue total por punccedilatildeo venosa e colocar imediatamente em um tubo contendo 10 ml de formol a 2
bull Fechar o tubo e misture completamente invertendo-o e agitando-o O formol hemolisa as hemaacutecias mata fixa e distende as microfilaacuterias
bull Centrifugar o sangue a 1500 rpm por 5 minutos
bull Decantar o sobrenadante
Teacutecnica de Knott
bull Retirar o sedimento com uma pipeta Pasteur e espalhar a gota espessa sobre uma lacircmina
bull Deixar secar bem e corar com Giemsa
bull Examinar com objetiva de imersatildeo
bull Esta teacutecnica possibilita que o exame microscoacutepico laboratorial seja realizado vaacuterios dias apoacutes a coleta de material realizada no campo
Exames de imagem
bull Ultranossografia
ndash Possibilidade de visualizar os movimentos de vermes adultos vivos de W bancrofti em vaso linfaacutetico especificamente em vasos intraescrotais do cordatildeo espermaacutetico
ndash O movimento ativo e ininterrupto dos vermes adultos durante as 24 horas do dia eacute denominado sinal da ldquodanccedila das filaacuteriasrdquo
Diagnoacutestico soroloacutegico
bull Teste imunocromatograacutefico desenvolvido pelo ICT Diagnostic - ICT card
ndash Teste qualilativo
ndash Cartatildeo possui ac de antifilaacuteria e o controle eacute formado por ac anti Ig G humano
Plasmodium spp
Taxonomia
bull Reino Protozoa
bull FiloApicomplexa
bull Classe Sporozoea
bull Ordem Hemosporidiida
bull Famiacutelia Plasmodiidae
bull Gecircneros Plasmodium
bull Espeacutecie Pfalciparum Pvivax Povale e Pmalariae
Plasmodium
bull Ciclo bioloacutegico Hospedeiro vertebrado e invertebrado
bull Hospedeiro invertebrado ndash Vetor
ndash Fecircmeas hematoacutefagas do gecircnero Anopheles
ndash Brasil Anopheles (N)darlingi A (N) aquasalis A (N) albitarsis A (K) cruzii e A (K) bellator
ndash Possuem haacutebito noturno penetrando nas casas no crespuacutesculo saindo ao amanhecer
Plasmodium
bull Hospedeiro vertebrado homem
bull Transmissatildeo
ndash Vetor
ndash Transfusatildeo de sangue
ndash Compartilhamento de seringas
ndash Acidente com agulhas
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
bull Ciclo preacute-eritrociacutetico
ndash Forma inoculada esporozoiacutetos
ndash A fecircmea do anofelino infectado inocula no homem as formas infectantes localizadas na saliva
ndash Os esporozoiacutetas permancem na circulaccedilatildeo por aproximadamente uma hora
ndash Invadem os hepatoacutecitos e se diferenciam em trofozoiacutetas (criptozoiacuteto)
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
ndash Esquizogonia e formaccedilatildeo de esquizontes
ndash Divisatildeo nuclear e liberaccedilatildeo de merozoiacutetos
ndash Aproximadamente 10000 merozoiacutetos por hepatoacutecito
ndash Rompimento do hepatoacutecito e liberaccedilatildeo de merozoiacutetos na circulaccedilatildeo
ndash Duraccedilatildeo do ciclo aprox 1 a 2 semanas
Ciclo evolutivo
bull PVivax e Povale
ndash Alguns esporozoiacutetos geneticamente diferentes ficam na forma latente nos hepatoacutecitos permanecendo muitos meses Satildeo classificados como hipnozoiacuteto
ndash Satildeo responsaacuteveis pelas recaiacutedas tardias e formas de malaacuteria com periacuteodo de encubaccedilatildeo longo ndash 6 a 9 meses
FASE HEPAacuteTICA OU EXOERITROCIacuteTICA
Hepatoacutecito
FIacuteGADO
Invasatildeo do hepatoacutecito
Reproduccedilatildeo Assexuada
Esporozoiacutetos Lise dos hepatoacutecitos
Liberaccedilatildeo dos protozoaacuterios na corrente sanguumliacutenea
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
bull Ciclo eritrociacutetico
ndash Os merozoiacutetos invadem as hemaacutecias
ndash Diferenciaccedilatildeo em trofozoiacutetos
ndash Esquizogonia esquizonte
ndash Produccedilatildeo de merozoiacutetos e rompimento da hemaacutecia
ndash Merozoiacutetos invasatildeo de novas hemaacutecias
ndash Apoacutes algumas geraccedilotildees os merozoiacutetos natildeo mais se dividem e se diferenciam em gametoacutecitos ndash micro e macrogametoacutecito
FASE ERITROCIacuteTICA
Hepatoacutecito destruiacutedo pelos protozoaacuterios
Penetraccedilatildeo dos protozoaacuterios
Reproduccedilatildeo assexuada
Protozoaacuterios destroem as hemaacutecias
Diferenciaccedilatildeo em gametoacutecitos
Fecircmeas de Anopheles sugam hemaacutecias com gametoacutecitos
Ciclo no hospedeiro invertebrado
Ocorre nas hemaacutecias ou Eritroacutecitos
nas hemaacutecias
Protozoaacuterio no interior da hemaacutecia
Hemaacutecia com gametoacutecito
T trofozoiacuteto Em esquizonte com merozoiacuteto
Fase eritrociacutetica
bull Ciclo sanguiacuteneo ndash Pfalciparum P vivax e Povale 48 horas
ndash Pmalariae 72 horas
ndash Fonte de nutriccedilatildeo do Plasmodium no ciclo sanguiacuteneo hemoglobina
ndash Produccedilatildeo do pigmento malaacuterico hemozoiacutena bull Granulaccedilotildees de Schuffner Plasmodium vivax
bull Granulaccedilotildees de Maurer P falciparum
bull Granulaccedilotildees de Ziemann P malariae
ndash Fagocitose pelas ceacutelulas de Kuppffer e macroacutefagos do baccedilo
Trofozoiacutetos Pfalciparum
Trofozoiacutetos Pfalciparum
Esquizonte ndash P falciparum
Raros no sangue perifeacuterico Possuem 2 a 24 merozoiacutetos
Ocupam 23 do gloacutebulo vermelho
Gametoacutecitos Pfalciparum
Ciclo evolutivo Pvivax
Esquizonte ndash P vivax
Satildeo grandes e ameboacuteides Cromatina organizada em duas ou mais massas
Possuem 2 a 24 merozoiacutetos com pontos de cromatina
Gametoacutecito ndash Pvivax
Macrogametoacutecitos satildeo redondos ou ovais e ocupam toda ceacutelula hospedeira O citoplasma eacute geralmente corado de azul mais escuro e conteacutem pigmento marrom Microgametoacutecitos satildeo geralmente do tamanho de um RBC natildeo infectados com citoplasma corados de azul paacutelido rosa ou cinza
Trofozoiacutetos - P malariae
Esquizontes ndash P malariae
Aproximadamente 6 a 12 merozoiacutetos com arranjo de rosetas
Gametoacutecitos ndash P malariae
Ciclo evolutivo ndash HI
bull Ingestatildeo de hemaacutecias contendo gametoacutecitos durante o repasto sanguiacuteneo da fecircmea do anofelino
bull No intestino meacutedio do vetor gametogecircnese ndash Macrogametoacutecito ndash macrogameta feminino ndash Microgametoacutecito o processo de exflagelaccedilatildeo daacute
origem a 8 microgametas masculinos ndash Produccedilatildeo de ovo ou zigoto ndash O ovo encista na camada epitelial do intestino meacutedio
oocisto ndash Esporogonia liberaccedilatildeo de esporozoiacutetos
Ciclo evolutivo ndash HInvertebrado
ndash Os esporozoiacutetos satildeo transportados pelo hemolinfa ateacute as glacircndulas salivares do vetor ateacute atingirem o ducto salivar
bull Inoculaccedilatildeo no hospedeiro vertebrado atraveacutes da picada do inseto
Hemaacutecia com gametoacutecito
Fecircmeas de Anopheles sugam hemaacutecias com gametoacutecitos
CICLO NO INVERTEBRADO
No tubo digestivo
Zigoto
Penetraccedilatildeo na parede do tubo
digestivo
Migraccedilatildeo para as glacircndulas salivares
Desenvolvimento
Mosquito infectado
Diagnoacutestico
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado e espesso corado pelo Giemsa
bull Sangue colhido sem anticoagulante para melhor fixaccedilatildeo em lacircmina
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo espesso eacute mais eficiente para detecccedilatildeo da infecccedilatildeo
bull Esfregaccedilo delgado eacute mais eficiente para diferenciaccedilatildeo morfoloacutegica das espeacutecies
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo semiquantitativo
ndash Exame de 100 campos microscoacutepicos com resultado expresso pelo sistema de cruzes
Parasitos contados Nuacutemero de campos
microscoacutepicos cruzes
40 a 60 100 +2
1 1 +
2-20 1 ++
21-200 1 +++
+ 200 1 ++++
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo quantitativo derivado de anaacutelise semiquantitativa
Contagem de parasitos por campo
Cruzes Parasitos por mm3
40 a 60100 +2 200-300
1 + 301-500
2-20 ++ 501 - 10000
21-200 +++ 10001 ndash 100000
+ 200 ++++ 100000 ou mais
Diagnoacutestico
bull P falciparum
ndash Parte do ciclo celular aderido ao endoteacutelio capilar Encontro somente de trofozoitos e gametoacutecitos no sangue perifeacuterico
ndash Raramente os esquizontes satildeo encontrados no sangue perifeacuterico
Diagnoacutestico ndash Pvivax ndash Encontro de todas as formas de desenvolvimento ndash
trofozoiacuteto jovem maduro esquizontes e gametoacutecitos
ndash Os trofozoiacutetos maduros tecircm geralmente um aspecto irregular com extensotildees ameboacuteides em seu citoplasma
Diagnoacutestico ndash Pvivax
ndash Os gametoacutecitos femininos coram-se mais intensamente que os masculinos e apresentam nuacutecleo mais compacto geralmente em localizaccedilatildeo perifeacuterica
ndash O pigmento malaacuterico geralmente eacute abundante
Diagnoacutestico - Pmalariae
bull Realizado por meio de caracteriacutesticas morfoloacutegicas do parasito
ndash Verificaccedilatildeo em esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado
ndash Posiccedilatildeo equatorial do parasito
ndash Desenvolvimento sem deformaccedilatildeo do eritroacutecito
Diagnoacutestico
bull QBC ndash Teacutecnica que combina concentraccedilatildeo dos parasitos
pela centrifugaccedilatildeo do sangue em em microhematoacutecrito e a coloraccedilatildeo dos aacutecidos nucleacuteicos do parasito pelo fluorcromo laranja de acridina
ndash Utilizaccedilatildeo de tubos especiais e microscopia epifluorescente
ndash Teste raacutepido
ndash Alta sensibilidade
Diagnoacutestico
bull ParaSight-F ( Becton amp Dickinson)
ndash Teste raacutepido para captura da proteiacutena rica em histidina 2 de Pfalciparum( PfHRP2) e enzimas conservadas de 4 espeacutecies de plasmoacutedio (DHL e aldolase
ndash Utilizaccedilatildeo de fita de nitrocelulose contendo ac monoclonal
ndash Lise de uma gota de sangue
ndash A reaccedilatildeo eacute revelada com adiccedilatildeo de ac policlonal anti-HRP2 conjugado com lipossomas contendo corante
Diagnoacutestico
bull PCR
ndash Sensibilidade e especificidade maior do que o esfregaccedilo sanguiacuteneo
Esfregaccedilo sanguiacuteneo
bull Colocar uma gota de sangue na extremidade direita da lacircmina
bull Pegar outra lacircmina segurar por cima com a matildeo direita e com uma inclinaccedilatildeo de 45deg encostar adiante da gota
bull Deixar mesma se espalhar pela superfiacutecie de contato das duas lacircminas
bull Puxar a gota espalhada ateacute o final de lacircmina
bull Secar e corar pelo Giemsa ou Leishman
Esfregaccedilo sanguiacuteneo
Microhematoacutecrito Creme leucocitaacuterio
Microhematoacutecrito
bull Colher sangue em tubo capilar
bull Centrifugar em microcentriacutefuga por 5 minutos agrave 10000 rpm
bull Avaliar o microhematocrito em microscopia oacuteptica
bull Verificar a presenccedila das formas tripomastigotas presentes no creme leucocitaacuterio
bull Se positivo realizar esfregaccedilo do creme leucocitaacuterio
bull Fixar com aacutelcool metiacutelico e corar com Gienza Analisar em microscoacutepio oacuteptico
Meacutetodo de concentraccedilatildeo
bull Meacutetodo de Strout
ndash Realizar a coleta de sangue em tubo sem anticoagulante
ndash Aguardar a retraccedilatildeo do coaacutegulo Os parasitas concentrar-se-atildeo no soro a medida que ocorrer a retraccedilatildeo do coaacutegulo
ndash O soro eacute centrifugado para anaacutelise do sedimento
Inoculaccedilatildeo em animais
bull Inoculaccedilatildeo de sangue ou creme leucocitaacuterio em camundongos jovens
bull Inoculaccedilatildeo intra-peritoneal intra-conjuntival e a via oral
bull Avaliaccedilatildeo das formas de Tcruzi
bull Teacutecnica utilizada em pesquisa
Diagnoacutestico laboratorial Fase crocircnica
bull Xenodiagnoacutestico bull Hemocultura bull Reaccedilatildeo de hemaglutinaccedilatildeo indireta bull RIFI bull ELISA bull PCR bull PaGIA bull LMCo bull Pesquisa de anticorpos antitripomastigotas vivos
Hemocultura
bull Meio LIT ndash Liver Infusion Triptose
bull Meio NNN ndash McNeal Novy e Nicolle
bull Utilizaccedilatildeo de 30ml de sangue heparinizado
bull Centrifugaccedilatildeo por 30 minutos em 3000 rpm
bull Despreza-se o plasma e o sedimento celular eacute lavado com meio LIT ( Liver Infusion Triptose) para eliminaccedilatildeo de possiacuteveis anticorpos
Hemocultura
bull Sedimento distribuiacutedo em 6 tubos com 5 ml de LIT
bull Os tubos satildeo mantidos a 28degC homogeneizados 3x semana e avaliados quinzenalmente ateacute 90 dias
bull Centrifugaccedilatildeo e avaliaccedilatildeo do sedimento de hemaacutecias
bull Leitura realizada pela observaccedilatildeo microscoacutepica de gotas do meio
bull Aumento da positividade para sangue processado imediatamente apoacutes a coleta cultivado em prazo de tempo maior (120 dias) e repeticcedilatildeo da teacutecnica por 3 vezes
Wuchereria bancrofti
Taxonomia
bull Reino Animalia
bull Filo Nematoda
bull Classe Secernentea
bull Ordem Filariidea
bull Superfamiacutelia Filarioidea
bull FamiacuteliaOnchocercidae
bull GecircnerosWuchereria
bull Espeacutecie Wbancrofti
Formas evolutivas
bull Heteroxecircnico
bull Hospedeiro vertebrado homem
bull Hospedeiro intermediaacuterio Culex quinquefasciatus
bull Formas evolutivas ndash HV verme adulto (fecircmea e macho) localizados nos
vasos e gacircnglios linfaacuteticos da regiatildeo abdominal peacutelvica (perna e escroto) mamas e braccedilo
ndash microfilaacuterias eliminadas pelas fecircmeas graacutevidas Saem dos ductos linfaacuteticos e atingem circulaccedilatildeo sanguiacutenea
ndash HI larva L1 L2 e L3 (infectante)
Culex quinquefasciatus
Morfologia
bull Macho 35 a 4 cm x 01mm com extremidade posterior enrrolada ventralmente
bull Fecircmea 7 a 10cm x 03 mm com vagina exteriorizada em uma vulva localizada proacutexima agrave extremidade anterior
bull Microfilaacuteria Presenccedila de bainha e estilete bucal na parte anterior que as diferencia de outros filariacutedeos sanguiacuteneos Possuem 250 a 300 microm e uma grande qtde de nuacutecleos
bull Larva L3 possui aproximadamente 15 a 20 mm de comprimento
Microfilaacuteria
Ciclo evolutivo
bull Fecircmea do inseto realiza o hematofagismo noturno e ingere as microfilaacuterias
bull Estocircmago do vetor microfilaacuterias perdem a bainha atravessam a parede do estocircmago e migram para os muacutesculos toraacutecicos ndash L1
bull Apoacutes 20 dias a larva estaacute na forma infectante L3 medindo aproximadamente 2mm
bull Migraccedilatildeo da larva para a proboacutescida concentrando-se no laacutebio do moquito
Microfilaacuteria Presenccedila de bainha Cauda pontuda com nuacutecleos grandes largos e bem separados Nuacutecleos caudais em fila uacutenica
Ciclo evolutivo
bull Repasto sanguiacuteneo do inseto infectado
ndash As larvas L3 migram do laacutebio do vetor para a pele do HV
ndash Migram para os vasos linfaacuteticos e tornam-se vermes adultos
ndash Apoacutes 8 meses as fecircmeas graacutevidas produzem as primeiras microfilaacuterias
Periodicidade
bull Periodicidade noturna das microfilaacuterias
ndash Durante o dia localizam-se nos capilares profundos
ndash Durante a noite vasos sanguiacuteneos perifeacutericos
ndash Pico da microfilaremia meia-noite coincidindo com o horaacuterio de hematofagismo do inseto transmissor
Patologia
bull Periacuteodo assintomaacutetico bull Fase aguda bull Processos inflamatoacuterios produzidos por larvas L4 e adultos jovens
que colonizam as vias linfaacuteticas ndash Linfadenites linfonodos inguinais epitrocleanos e axilares com
desenvolvimento de granulomas com calcificaccedilatildeo apoacutes a morte dos vermes
ndash Linfangite inflamaccedilatildeo e dilataccedilatildeo dos vasos linfaacuteticos ndash Febre mal estar ndash Funiculite filariana linfangite do cordatildeo espermaacutetico e varicocele
bull Fase crocircnica ndash Hidrocele ndash Linfedema ndash Quiluacuteria ndash Elefantiacutease
Quiluacuteria
Patologia
bull Processos obstrutivos ndash Formaccedilatildeo de novelos envolvidos por reaccedilatildeo
inflamatoacuteria e pela formaccedilatildeo de fibrose
ndash Estase e congestatildeo da linfa produzindo linfoedema tecidual
ndash Extravasamento produzindo derrame linfaacutetico ascite linfaacutetica linfuacuteria linforreacuteia linfotoacuterax linfocele etc
ndash A ruptura de vasos linfaacuteticos para o interior do sistema excretor urinaacuterio daacute origem agrave quiluacuteria
Patologia
bull Complicaccedilotildees associadas agrave filariose
ndash Elefantiacutease
bull Caracterizada por processo inflamatoacuterio e fibrose crocircnica do oacutergatildeo atingido
bull Hipertrofia da derme do tecido conjuntivo aumento exagerado do volume do oacutergatildeo com queratinizaccedilatildeo e rugosidade
bull A pele perde a elasticidade resseca e se torna sujeita a infecccedilotildees bacterianas
Patologia
bull Permanecimento na aacuterea endecircmica
bull Nuacutemero de larvas inoculadas
bull Frequecircncia das re-infecccedilotildees
bull O nuacutemero de acasalamento dos vermes e suas localizaccedilotildees anatocircmicas
bull A sensibilizaccedilatildeo do organismo e a intensidade das reaccedilotildees inflamatoacuterias do paciente
bull As infecccedilotildees bacterianas associadas
Diagnoacutestico
bull Pesquisa de microfilaacuterias no sangue perifeacuterico ndash 20 40 ou 60 microL- de preferecircncia entre as 10 h da noite e 4h da manhatilde
ndash Gota espessa Coloraccedilatildeo de Giemsa
ndash Meacutetodos de concentraccedilatildeo Filtraccedilatildeo em membrana de policarbonato milipore ou nucleopore
ndash Meacutetodo de Knott
bull Na fase crocircnica as microfilaacuterias raramente satildeo detectadas no sangue perifeacuterico
Gota espessa
bull Possibilita a visualizaccedilatildeo da bainha fato que difere a microfilaria de W bancrofti de outro filariacutedeos sanguiacuteneos
bull Apresenta um baixo custo em comparaccedilatildeo com outras mais avanccediladas como a filtraccedilatildeo de sangue em membrana de policarbonato
bull Possui baixa sensibilidade natildeo indicada em situaccedilotildees em que os parasitados se mostram com baixa microfilaremia ou amicrofilarecircmicos
Concentraccedilatildeo
bull Baseia-se na passagem de sangue venoso atraveacutes de uma membrana (Milipore ou Nuclepore) de diacircmetro de 13 a 25 mm e poros de 5 ou 3 μm
bull O material retido na membrana sendo fixado corado e observado ao microscoacutepio
bull Essa teacutecnica assim como a de Knott permite a identificaccedilatildeo de indiviacuteduos com baixiacutessimas parasitemias (quantidade de microfilarias natildeo detectaacuteveis pela teacutecnica de gota espessa)
Teacutecnica de Knott
bull Retirar 2 ml de sangue total por punccedilatildeo venosa e colocar imediatamente em um tubo contendo 10 ml de formol a 2
bull Fechar o tubo e misture completamente invertendo-o e agitando-o O formol hemolisa as hemaacutecias mata fixa e distende as microfilaacuterias
bull Centrifugar o sangue a 1500 rpm por 5 minutos
bull Decantar o sobrenadante
Teacutecnica de Knott
bull Retirar o sedimento com uma pipeta Pasteur e espalhar a gota espessa sobre uma lacircmina
bull Deixar secar bem e corar com Giemsa
bull Examinar com objetiva de imersatildeo
bull Esta teacutecnica possibilita que o exame microscoacutepico laboratorial seja realizado vaacuterios dias apoacutes a coleta de material realizada no campo
Exames de imagem
bull Ultranossografia
ndash Possibilidade de visualizar os movimentos de vermes adultos vivos de W bancrofti em vaso linfaacutetico especificamente em vasos intraescrotais do cordatildeo espermaacutetico
ndash O movimento ativo e ininterrupto dos vermes adultos durante as 24 horas do dia eacute denominado sinal da ldquodanccedila das filaacuteriasrdquo
Diagnoacutestico soroloacutegico
bull Teste imunocromatograacutefico desenvolvido pelo ICT Diagnostic - ICT card
ndash Teste qualilativo
ndash Cartatildeo possui ac de antifilaacuteria e o controle eacute formado por ac anti Ig G humano
Plasmodium spp
Taxonomia
bull Reino Protozoa
bull FiloApicomplexa
bull Classe Sporozoea
bull Ordem Hemosporidiida
bull Famiacutelia Plasmodiidae
bull Gecircneros Plasmodium
bull Espeacutecie Pfalciparum Pvivax Povale e Pmalariae
Plasmodium
bull Ciclo bioloacutegico Hospedeiro vertebrado e invertebrado
bull Hospedeiro invertebrado ndash Vetor
ndash Fecircmeas hematoacutefagas do gecircnero Anopheles
ndash Brasil Anopheles (N)darlingi A (N) aquasalis A (N) albitarsis A (K) cruzii e A (K) bellator
ndash Possuem haacutebito noturno penetrando nas casas no crespuacutesculo saindo ao amanhecer
Plasmodium
bull Hospedeiro vertebrado homem
bull Transmissatildeo
ndash Vetor
ndash Transfusatildeo de sangue
ndash Compartilhamento de seringas
ndash Acidente com agulhas
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
bull Ciclo preacute-eritrociacutetico
ndash Forma inoculada esporozoiacutetos
ndash A fecircmea do anofelino infectado inocula no homem as formas infectantes localizadas na saliva
ndash Os esporozoiacutetas permancem na circulaccedilatildeo por aproximadamente uma hora
ndash Invadem os hepatoacutecitos e se diferenciam em trofozoiacutetas (criptozoiacuteto)
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
ndash Esquizogonia e formaccedilatildeo de esquizontes
ndash Divisatildeo nuclear e liberaccedilatildeo de merozoiacutetos
ndash Aproximadamente 10000 merozoiacutetos por hepatoacutecito
ndash Rompimento do hepatoacutecito e liberaccedilatildeo de merozoiacutetos na circulaccedilatildeo
ndash Duraccedilatildeo do ciclo aprox 1 a 2 semanas
Ciclo evolutivo
bull PVivax e Povale
ndash Alguns esporozoiacutetos geneticamente diferentes ficam na forma latente nos hepatoacutecitos permanecendo muitos meses Satildeo classificados como hipnozoiacuteto
ndash Satildeo responsaacuteveis pelas recaiacutedas tardias e formas de malaacuteria com periacuteodo de encubaccedilatildeo longo ndash 6 a 9 meses
FASE HEPAacuteTICA OU EXOERITROCIacuteTICA
Hepatoacutecito
FIacuteGADO
Invasatildeo do hepatoacutecito
Reproduccedilatildeo Assexuada
Esporozoiacutetos Lise dos hepatoacutecitos
Liberaccedilatildeo dos protozoaacuterios na corrente sanguumliacutenea
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
bull Ciclo eritrociacutetico
ndash Os merozoiacutetos invadem as hemaacutecias
ndash Diferenciaccedilatildeo em trofozoiacutetos
ndash Esquizogonia esquizonte
ndash Produccedilatildeo de merozoiacutetos e rompimento da hemaacutecia
ndash Merozoiacutetos invasatildeo de novas hemaacutecias
ndash Apoacutes algumas geraccedilotildees os merozoiacutetos natildeo mais se dividem e se diferenciam em gametoacutecitos ndash micro e macrogametoacutecito
FASE ERITROCIacuteTICA
Hepatoacutecito destruiacutedo pelos protozoaacuterios
Penetraccedilatildeo dos protozoaacuterios
Reproduccedilatildeo assexuada
Protozoaacuterios destroem as hemaacutecias
Diferenciaccedilatildeo em gametoacutecitos
Fecircmeas de Anopheles sugam hemaacutecias com gametoacutecitos
Ciclo no hospedeiro invertebrado
Ocorre nas hemaacutecias ou Eritroacutecitos
nas hemaacutecias
Protozoaacuterio no interior da hemaacutecia
Hemaacutecia com gametoacutecito
T trofozoiacuteto Em esquizonte com merozoiacuteto
Fase eritrociacutetica
bull Ciclo sanguiacuteneo ndash Pfalciparum P vivax e Povale 48 horas
ndash Pmalariae 72 horas
ndash Fonte de nutriccedilatildeo do Plasmodium no ciclo sanguiacuteneo hemoglobina
ndash Produccedilatildeo do pigmento malaacuterico hemozoiacutena bull Granulaccedilotildees de Schuffner Plasmodium vivax
bull Granulaccedilotildees de Maurer P falciparum
bull Granulaccedilotildees de Ziemann P malariae
ndash Fagocitose pelas ceacutelulas de Kuppffer e macroacutefagos do baccedilo
Trofozoiacutetos Pfalciparum
Trofozoiacutetos Pfalciparum
Esquizonte ndash P falciparum
Raros no sangue perifeacuterico Possuem 2 a 24 merozoiacutetos
Ocupam 23 do gloacutebulo vermelho
Gametoacutecitos Pfalciparum
Ciclo evolutivo Pvivax
Esquizonte ndash P vivax
Satildeo grandes e ameboacuteides Cromatina organizada em duas ou mais massas
Possuem 2 a 24 merozoiacutetos com pontos de cromatina
Gametoacutecito ndash Pvivax
Macrogametoacutecitos satildeo redondos ou ovais e ocupam toda ceacutelula hospedeira O citoplasma eacute geralmente corado de azul mais escuro e conteacutem pigmento marrom Microgametoacutecitos satildeo geralmente do tamanho de um RBC natildeo infectados com citoplasma corados de azul paacutelido rosa ou cinza
Trofozoiacutetos - P malariae
Esquizontes ndash P malariae
Aproximadamente 6 a 12 merozoiacutetos com arranjo de rosetas
Gametoacutecitos ndash P malariae
Ciclo evolutivo ndash HI
bull Ingestatildeo de hemaacutecias contendo gametoacutecitos durante o repasto sanguiacuteneo da fecircmea do anofelino
bull No intestino meacutedio do vetor gametogecircnese ndash Macrogametoacutecito ndash macrogameta feminino ndash Microgametoacutecito o processo de exflagelaccedilatildeo daacute
origem a 8 microgametas masculinos ndash Produccedilatildeo de ovo ou zigoto ndash O ovo encista na camada epitelial do intestino meacutedio
oocisto ndash Esporogonia liberaccedilatildeo de esporozoiacutetos
Ciclo evolutivo ndash HInvertebrado
ndash Os esporozoiacutetos satildeo transportados pelo hemolinfa ateacute as glacircndulas salivares do vetor ateacute atingirem o ducto salivar
bull Inoculaccedilatildeo no hospedeiro vertebrado atraveacutes da picada do inseto
Hemaacutecia com gametoacutecito
Fecircmeas de Anopheles sugam hemaacutecias com gametoacutecitos
CICLO NO INVERTEBRADO
No tubo digestivo
Zigoto
Penetraccedilatildeo na parede do tubo
digestivo
Migraccedilatildeo para as glacircndulas salivares
Desenvolvimento
Mosquito infectado
Diagnoacutestico
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado e espesso corado pelo Giemsa
bull Sangue colhido sem anticoagulante para melhor fixaccedilatildeo em lacircmina
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo espesso eacute mais eficiente para detecccedilatildeo da infecccedilatildeo
bull Esfregaccedilo delgado eacute mais eficiente para diferenciaccedilatildeo morfoloacutegica das espeacutecies
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo semiquantitativo
ndash Exame de 100 campos microscoacutepicos com resultado expresso pelo sistema de cruzes
Parasitos contados Nuacutemero de campos
microscoacutepicos cruzes
40 a 60 100 +2
1 1 +
2-20 1 ++
21-200 1 +++
+ 200 1 ++++
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo quantitativo derivado de anaacutelise semiquantitativa
Contagem de parasitos por campo
Cruzes Parasitos por mm3
40 a 60100 +2 200-300
1 + 301-500
2-20 ++ 501 - 10000
21-200 +++ 10001 ndash 100000
+ 200 ++++ 100000 ou mais
Diagnoacutestico
bull P falciparum
ndash Parte do ciclo celular aderido ao endoteacutelio capilar Encontro somente de trofozoitos e gametoacutecitos no sangue perifeacuterico
ndash Raramente os esquizontes satildeo encontrados no sangue perifeacuterico
Diagnoacutestico ndash Pvivax ndash Encontro de todas as formas de desenvolvimento ndash
trofozoiacuteto jovem maduro esquizontes e gametoacutecitos
ndash Os trofozoiacutetos maduros tecircm geralmente um aspecto irregular com extensotildees ameboacuteides em seu citoplasma
Diagnoacutestico ndash Pvivax
ndash Os gametoacutecitos femininos coram-se mais intensamente que os masculinos e apresentam nuacutecleo mais compacto geralmente em localizaccedilatildeo perifeacuterica
ndash O pigmento malaacuterico geralmente eacute abundante
Diagnoacutestico - Pmalariae
bull Realizado por meio de caracteriacutesticas morfoloacutegicas do parasito
ndash Verificaccedilatildeo em esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado
ndash Posiccedilatildeo equatorial do parasito
ndash Desenvolvimento sem deformaccedilatildeo do eritroacutecito
Diagnoacutestico
bull QBC ndash Teacutecnica que combina concentraccedilatildeo dos parasitos
pela centrifugaccedilatildeo do sangue em em microhematoacutecrito e a coloraccedilatildeo dos aacutecidos nucleacuteicos do parasito pelo fluorcromo laranja de acridina
ndash Utilizaccedilatildeo de tubos especiais e microscopia epifluorescente
ndash Teste raacutepido
ndash Alta sensibilidade
Diagnoacutestico
bull ParaSight-F ( Becton amp Dickinson)
ndash Teste raacutepido para captura da proteiacutena rica em histidina 2 de Pfalciparum( PfHRP2) e enzimas conservadas de 4 espeacutecies de plasmoacutedio (DHL e aldolase
ndash Utilizaccedilatildeo de fita de nitrocelulose contendo ac monoclonal
ndash Lise de uma gota de sangue
ndash A reaccedilatildeo eacute revelada com adiccedilatildeo de ac policlonal anti-HRP2 conjugado com lipossomas contendo corante
Diagnoacutestico
bull PCR
ndash Sensibilidade e especificidade maior do que o esfregaccedilo sanguiacuteneo
Esfregaccedilo sanguiacuteneo
Microhematoacutecrito Creme leucocitaacuterio
Microhematoacutecrito
bull Colher sangue em tubo capilar
bull Centrifugar em microcentriacutefuga por 5 minutos agrave 10000 rpm
bull Avaliar o microhematocrito em microscopia oacuteptica
bull Verificar a presenccedila das formas tripomastigotas presentes no creme leucocitaacuterio
bull Se positivo realizar esfregaccedilo do creme leucocitaacuterio
bull Fixar com aacutelcool metiacutelico e corar com Gienza Analisar em microscoacutepio oacuteptico
Meacutetodo de concentraccedilatildeo
bull Meacutetodo de Strout
ndash Realizar a coleta de sangue em tubo sem anticoagulante
ndash Aguardar a retraccedilatildeo do coaacutegulo Os parasitas concentrar-se-atildeo no soro a medida que ocorrer a retraccedilatildeo do coaacutegulo
ndash O soro eacute centrifugado para anaacutelise do sedimento
Inoculaccedilatildeo em animais
bull Inoculaccedilatildeo de sangue ou creme leucocitaacuterio em camundongos jovens
bull Inoculaccedilatildeo intra-peritoneal intra-conjuntival e a via oral
bull Avaliaccedilatildeo das formas de Tcruzi
bull Teacutecnica utilizada em pesquisa
Diagnoacutestico laboratorial Fase crocircnica
bull Xenodiagnoacutestico bull Hemocultura bull Reaccedilatildeo de hemaglutinaccedilatildeo indireta bull RIFI bull ELISA bull PCR bull PaGIA bull LMCo bull Pesquisa de anticorpos antitripomastigotas vivos
Hemocultura
bull Meio LIT ndash Liver Infusion Triptose
bull Meio NNN ndash McNeal Novy e Nicolle
bull Utilizaccedilatildeo de 30ml de sangue heparinizado
bull Centrifugaccedilatildeo por 30 minutos em 3000 rpm
bull Despreza-se o plasma e o sedimento celular eacute lavado com meio LIT ( Liver Infusion Triptose) para eliminaccedilatildeo de possiacuteveis anticorpos
Hemocultura
bull Sedimento distribuiacutedo em 6 tubos com 5 ml de LIT
bull Os tubos satildeo mantidos a 28degC homogeneizados 3x semana e avaliados quinzenalmente ateacute 90 dias
bull Centrifugaccedilatildeo e avaliaccedilatildeo do sedimento de hemaacutecias
bull Leitura realizada pela observaccedilatildeo microscoacutepica de gotas do meio
bull Aumento da positividade para sangue processado imediatamente apoacutes a coleta cultivado em prazo de tempo maior (120 dias) e repeticcedilatildeo da teacutecnica por 3 vezes
Wuchereria bancrofti
Taxonomia
bull Reino Animalia
bull Filo Nematoda
bull Classe Secernentea
bull Ordem Filariidea
bull Superfamiacutelia Filarioidea
bull FamiacuteliaOnchocercidae
bull GecircnerosWuchereria
bull Espeacutecie Wbancrofti
Formas evolutivas
bull Heteroxecircnico
bull Hospedeiro vertebrado homem
bull Hospedeiro intermediaacuterio Culex quinquefasciatus
bull Formas evolutivas ndash HV verme adulto (fecircmea e macho) localizados nos
vasos e gacircnglios linfaacuteticos da regiatildeo abdominal peacutelvica (perna e escroto) mamas e braccedilo
ndash microfilaacuterias eliminadas pelas fecircmeas graacutevidas Saem dos ductos linfaacuteticos e atingem circulaccedilatildeo sanguiacutenea
ndash HI larva L1 L2 e L3 (infectante)
Culex quinquefasciatus
Morfologia
bull Macho 35 a 4 cm x 01mm com extremidade posterior enrrolada ventralmente
bull Fecircmea 7 a 10cm x 03 mm com vagina exteriorizada em uma vulva localizada proacutexima agrave extremidade anterior
bull Microfilaacuteria Presenccedila de bainha e estilete bucal na parte anterior que as diferencia de outros filariacutedeos sanguiacuteneos Possuem 250 a 300 microm e uma grande qtde de nuacutecleos
bull Larva L3 possui aproximadamente 15 a 20 mm de comprimento
Microfilaacuteria
Ciclo evolutivo
bull Fecircmea do inseto realiza o hematofagismo noturno e ingere as microfilaacuterias
bull Estocircmago do vetor microfilaacuterias perdem a bainha atravessam a parede do estocircmago e migram para os muacutesculos toraacutecicos ndash L1
bull Apoacutes 20 dias a larva estaacute na forma infectante L3 medindo aproximadamente 2mm
bull Migraccedilatildeo da larva para a proboacutescida concentrando-se no laacutebio do moquito
Microfilaacuteria Presenccedila de bainha Cauda pontuda com nuacutecleos grandes largos e bem separados Nuacutecleos caudais em fila uacutenica
Ciclo evolutivo
bull Repasto sanguiacuteneo do inseto infectado
ndash As larvas L3 migram do laacutebio do vetor para a pele do HV
ndash Migram para os vasos linfaacuteticos e tornam-se vermes adultos
ndash Apoacutes 8 meses as fecircmeas graacutevidas produzem as primeiras microfilaacuterias
Periodicidade
bull Periodicidade noturna das microfilaacuterias
ndash Durante o dia localizam-se nos capilares profundos
ndash Durante a noite vasos sanguiacuteneos perifeacutericos
ndash Pico da microfilaremia meia-noite coincidindo com o horaacuterio de hematofagismo do inseto transmissor
Patologia
bull Periacuteodo assintomaacutetico bull Fase aguda bull Processos inflamatoacuterios produzidos por larvas L4 e adultos jovens
que colonizam as vias linfaacuteticas ndash Linfadenites linfonodos inguinais epitrocleanos e axilares com
desenvolvimento de granulomas com calcificaccedilatildeo apoacutes a morte dos vermes
ndash Linfangite inflamaccedilatildeo e dilataccedilatildeo dos vasos linfaacuteticos ndash Febre mal estar ndash Funiculite filariana linfangite do cordatildeo espermaacutetico e varicocele
bull Fase crocircnica ndash Hidrocele ndash Linfedema ndash Quiluacuteria ndash Elefantiacutease
Quiluacuteria
Patologia
bull Processos obstrutivos ndash Formaccedilatildeo de novelos envolvidos por reaccedilatildeo
inflamatoacuteria e pela formaccedilatildeo de fibrose
ndash Estase e congestatildeo da linfa produzindo linfoedema tecidual
ndash Extravasamento produzindo derrame linfaacutetico ascite linfaacutetica linfuacuteria linforreacuteia linfotoacuterax linfocele etc
ndash A ruptura de vasos linfaacuteticos para o interior do sistema excretor urinaacuterio daacute origem agrave quiluacuteria
Patologia
bull Complicaccedilotildees associadas agrave filariose
ndash Elefantiacutease
bull Caracterizada por processo inflamatoacuterio e fibrose crocircnica do oacutergatildeo atingido
bull Hipertrofia da derme do tecido conjuntivo aumento exagerado do volume do oacutergatildeo com queratinizaccedilatildeo e rugosidade
bull A pele perde a elasticidade resseca e se torna sujeita a infecccedilotildees bacterianas
Patologia
bull Permanecimento na aacuterea endecircmica
bull Nuacutemero de larvas inoculadas
bull Frequecircncia das re-infecccedilotildees
bull O nuacutemero de acasalamento dos vermes e suas localizaccedilotildees anatocircmicas
bull A sensibilizaccedilatildeo do organismo e a intensidade das reaccedilotildees inflamatoacuterias do paciente
bull As infecccedilotildees bacterianas associadas
Diagnoacutestico
bull Pesquisa de microfilaacuterias no sangue perifeacuterico ndash 20 40 ou 60 microL- de preferecircncia entre as 10 h da noite e 4h da manhatilde
ndash Gota espessa Coloraccedilatildeo de Giemsa
ndash Meacutetodos de concentraccedilatildeo Filtraccedilatildeo em membrana de policarbonato milipore ou nucleopore
ndash Meacutetodo de Knott
bull Na fase crocircnica as microfilaacuterias raramente satildeo detectadas no sangue perifeacuterico
Gota espessa
bull Possibilita a visualizaccedilatildeo da bainha fato que difere a microfilaria de W bancrofti de outro filariacutedeos sanguiacuteneos
bull Apresenta um baixo custo em comparaccedilatildeo com outras mais avanccediladas como a filtraccedilatildeo de sangue em membrana de policarbonato
bull Possui baixa sensibilidade natildeo indicada em situaccedilotildees em que os parasitados se mostram com baixa microfilaremia ou amicrofilarecircmicos
Concentraccedilatildeo
bull Baseia-se na passagem de sangue venoso atraveacutes de uma membrana (Milipore ou Nuclepore) de diacircmetro de 13 a 25 mm e poros de 5 ou 3 μm
bull O material retido na membrana sendo fixado corado e observado ao microscoacutepio
bull Essa teacutecnica assim como a de Knott permite a identificaccedilatildeo de indiviacuteduos com baixiacutessimas parasitemias (quantidade de microfilarias natildeo detectaacuteveis pela teacutecnica de gota espessa)
Teacutecnica de Knott
bull Retirar 2 ml de sangue total por punccedilatildeo venosa e colocar imediatamente em um tubo contendo 10 ml de formol a 2
bull Fechar o tubo e misture completamente invertendo-o e agitando-o O formol hemolisa as hemaacutecias mata fixa e distende as microfilaacuterias
bull Centrifugar o sangue a 1500 rpm por 5 minutos
bull Decantar o sobrenadante
Teacutecnica de Knott
bull Retirar o sedimento com uma pipeta Pasteur e espalhar a gota espessa sobre uma lacircmina
bull Deixar secar bem e corar com Giemsa
bull Examinar com objetiva de imersatildeo
bull Esta teacutecnica possibilita que o exame microscoacutepico laboratorial seja realizado vaacuterios dias apoacutes a coleta de material realizada no campo
Exames de imagem
bull Ultranossografia
ndash Possibilidade de visualizar os movimentos de vermes adultos vivos de W bancrofti em vaso linfaacutetico especificamente em vasos intraescrotais do cordatildeo espermaacutetico
ndash O movimento ativo e ininterrupto dos vermes adultos durante as 24 horas do dia eacute denominado sinal da ldquodanccedila das filaacuteriasrdquo
Diagnoacutestico soroloacutegico
bull Teste imunocromatograacutefico desenvolvido pelo ICT Diagnostic - ICT card
ndash Teste qualilativo
ndash Cartatildeo possui ac de antifilaacuteria e o controle eacute formado por ac anti Ig G humano
Plasmodium spp
Taxonomia
bull Reino Protozoa
bull FiloApicomplexa
bull Classe Sporozoea
bull Ordem Hemosporidiida
bull Famiacutelia Plasmodiidae
bull Gecircneros Plasmodium
bull Espeacutecie Pfalciparum Pvivax Povale e Pmalariae
Plasmodium
bull Ciclo bioloacutegico Hospedeiro vertebrado e invertebrado
bull Hospedeiro invertebrado ndash Vetor
ndash Fecircmeas hematoacutefagas do gecircnero Anopheles
ndash Brasil Anopheles (N)darlingi A (N) aquasalis A (N) albitarsis A (K) cruzii e A (K) bellator
ndash Possuem haacutebito noturno penetrando nas casas no crespuacutesculo saindo ao amanhecer
Plasmodium
bull Hospedeiro vertebrado homem
bull Transmissatildeo
ndash Vetor
ndash Transfusatildeo de sangue
ndash Compartilhamento de seringas
ndash Acidente com agulhas
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
bull Ciclo preacute-eritrociacutetico
ndash Forma inoculada esporozoiacutetos
ndash A fecircmea do anofelino infectado inocula no homem as formas infectantes localizadas na saliva
ndash Os esporozoiacutetas permancem na circulaccedilatildeo por aproximadamente uma hora
ndash Invadem os hepatoacutecitos e se diferenciam em trofozoiacutetas (criptozoiacuteto)
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
ndash Esquizogonia e formaccedilatildeo de esquizontes
ndash Divisatildeo nuclear e liberaccedilatildeo de merozoiacutetos
ndash Aproximadamente 10000 merozoiacutetos por hepatoacutecito
ndash Rompimento do hepatoacutecito e liberaccedilatildeo de merozoiacutetos na circulaccedilatildeo
ndash Duraccedilatildeo do ciclo aprox 1 a 2 semanas
Ciclo evolutivo
bull PVivax e Povale
ndash Alguns esporozoiacutetos geneticamente diferentes ficam na forma latente nos hepatoacutecitos permanecendo muitos meses Satildeo classificados como hipnozoiacuteto
ndash Satildeo responsaacuteveis pelas recaiacutedas tardias e formas de malaacuteria com periacuteodo de encubaccedilatildeo longo ndash 6 a 9 meses
FASE HEPAacuteTICA OU EXOERITROCIacuteTICA
Hepatoacutecito
FIacuteGADO
Invasatildeo do hepatoacutecito
Reproduccedilatildeo Assexuada
Esporozoiacutetos Lise dos hepatoacutecitos
Liberaccedilatildeo dos protozoaacuterios na corrente sanguumliacutenea
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
bull Ciclo eritrociacutetico
ndash Os merozoiacutetos invadem as hemaacutecias
ndash Diferenciaccedilatildeo em trofozoiacutetos
ndash Esquizogonia esquizonte
ndash Produccedilatildeo de merozoiacutetos e rompimento da hemaacutecia
ndash Merozoiacutetos invasatildeo de novas hemaacutecias
ndash Apoacutes algumas geraccedilotildees os merozoiacutetos natildeo mais se dividem e se diferenciam em gametoacutecitos ndash micro e macrogametoacutecito
FASE ERITROCIacuteTICA
Hepatoacutecito destruiacutedo pelos protozoaacuterios
Penetraccedilatildeo dos protozoaacuterios
Reproduccedilatildeo assexuada
Protozoaacuterios destroem as hemaacutecias
Diferenciaccedilatildeo em gametoacutecitos
Fecircmeas de Anopheles sugam hemaacutecias com gametoacutecitos
Ciclo no hospedeiro invertebrado
Ocorre nas hemaacutecias ou Eritroacutecitos
nas hemaacutecias
Protozoaacuterio no interior da hemaacutecia
Hemaacutecia com gametoacutecito
T trofozoiacuteto Em esquizonte com merozoiacuteto
Fase eritrociacutetica
bull Ciclo sanguiacuteneo ndash Pfalciparum P vivax e Povale 48 horas
ndash Pmalariae 72 horas
ndash Fonte de nutriccedilatildeo do Plasmodium no ciclo sanguiacuteneo hemoglobina
ndash Produccedilatildeo do pigmento malaacuterico hemozoiacutena bull Granulaccedilotildees de Schuffner Plasmodium vivax
bull Granulaccedilotildees de Maurer P falciparum
bull Granulaccedilotildees de Ziemann P malariae
ndash Fagocitose pelas ceacutelulas de Kuppffer e macroacutefagos do baccedilo
Trofozoiacutetos Pfalciparum
Trofozoiacutetos Pfalciparum
Esquizonte ndash P falciparum
Raros no sangue perifeacuterico Possuem 2 a 24 merozoiacutetos
Ocupam 23 do gloacutebulo vermelho
Gametoacutecitos Pfalciparum
Ciclo evolutivo Pvivax
Esquizonte ndash P vivax
Satildeo grandes e ameboacuteides Cromatina organizada em duas ou mais massas
Possuem 2 a 24 merozoiacutetos com pontos de cromatina
Gametoacutecito ndash Pvivax
Macrogametoacutecitos satildeo redondos ou ovais e ocupam toda ceacutelula hospedeira O citoplasma eacute geralmente corado de azul mais escuro e conteacutem pigmento marrom Microgametoacutecitos satildeo geralmente do tamanho de um RBC natildeo infectados com citoplasma corados de azul paacutelido rosa ou cinza
Trofozoiacutetos - P malariae
Esquizontes ndash P malariae
Aproximadamente 6 a 12 merozoiacutetos com arranjo de rosetas
Gametoacutecitos ndash P malariae
Ciclo evolutivo ndash HI
bull Ingestatildeo de hemaacutecias contendo gametoacutecitos durante o repasto sanguiacuteneo da fecircmea do anofelino
bull No intestino meacutedio do vetor gametogecircnese ndash Macrogametoacutecito ndash macrogameta feminino ndash Microgametoacutecito o processo de exflagelaccedilatildeo daacute
origem a 8 microgametas masculinos ndash Produccedilatildeo de ovo ou zigoto ndash O ovo encista na camada epitelial do intestino meacutedio
oocisto ndash Esporogonia liberaccedilatildeo de esporozoiacutetos
Ciclo evolutivo ndash HInvertebrado
ndash Os esporozoiacutetos satildeo transportados pelo hemolinfa ateacute as glacircndulas salivares do vetor ateacute atingirem o ducto salivar
bull Inoculaccedilatildeo no hospedeiro vertebrado atraveacutes da picada do inseto
Hemaacutecia com gametoacutecito
Fecircmeas de Anopheles sugam hemaacutecias com gametoacutecitos
CICLO NO INVERTEBRADO
No tubo digestivo
Zigoto
Penetraccedilatildeo na parede do tubo
digestivo
Migraccedilatildeo para as glacircndulas salivares
Desenvolvimento
Mosquito infectado
Diagnoacutestico
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado e espesso corado pelo Giemsa
bull Sangue colhido sem anticoagulante para melhor fixaccedilatildeo em lacircmina
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo espesso eacute mais eficiente para detecccedilatildeo da infecccedilatildeo
bull Esfregaccedilo delgado eacute mais eficiente para diferenciaccedilatildeo morfoloacutegica das espeacutecies
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo semiquantitativo
ndash Exame de 100 campos microscoacutepicos com resultado expresso pelo sistema de cruzes
Parasitos contados Nuacutemero de campos
microscoacutepicos cruzes
40 a 60 100 +2
1 1 +
2-20 1 ++
21-200 1 +++
+ 200 1 ++++
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo quantitativo derivado de anaacutelise semiquantitativa
Contagem de parasitos por campo
Cruzes Parasitos por mm3
40 a 60100 +2 200-300
1 + 301-500
2-20 ++ 501 - 10000
21-200 +++ 10001 ndash 100000
+ 200 ++++ 100000 ou mais
Diagnoacutestico
bull P falciparum
ndash Parte do ciclo celular aderido ao endoteacutelio capilar Encontro somente de trofozoitos e gametoacutecitos no sangue perifeacuterico
ndash Raramente os esquizontes satildeo encontrados no sangue perifeacuterico
Diagnoacutestico ndash Pvivax ndash Encontro de todas as formas de desenvolvimento ndash
trofozoiacuteto jovem maduro esquizontes e gametoacutecitos
ndash Os trofozoiacutetos maduros tecircm geralmente um aspecto irregular com extensotildees ameboacuteides em seu citoplasma
Diagnoacutestico ndash Pvivax
ndash Os gametoacutecitos femininos coram-se mais intensamente que os masculinos e apresentam nuacutecleo mais compacto geralmente em localizaccedilatildeo perifeacuterica
ndash O pigmento malaacuterico geralmente eacute abundante
Diagnoacutestico - Pmalariae
bull Realizado por meio de caracteriacutesticas morfoloacutegicas do parasito
ndash Verificaccedilatildeo em esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado
ndash Posiccedilatildeo equatorial do parasito
ndash Desenvolvimento sem deformaccedilatildeo do eritroacutecito
Diagnoacutestico
bull QBC ndash Teacutecnica que combina concentraccedilatildeo dos parasitos
pela centrifugaccedilatildeo do sangue em em microhematoacutecrito e a coloraccedilatildeo dos aacutecidos nucleacuteicos do parasito pelo fluorcromo laranja de acridina
ndash Utilizaccedilatildeo de tubos especiais e microscopia epifluorescente
ndash Teste raacutepido
ndash Alta sensibilidade
Diagnoacutestico
bull ParaSight-F ( Becton amp Dickinson)
ndash Teste raacutepido para captura da proteiacutena rica em histidina 2 de Pfalciparum( PfHRP2) e enzimas conservadas de 4 espeacutecies de plasmoacutedio (DHL e aldolase
ndash Utilizaccedilatildeo de fita de nitrocelulose contendo ac monoclonal
ndash Lise de uma gota de sangue
ndash A reaccedilatildeo eacute revelada com adiccedilatildeo de ac policlonal anti-HRP2 conjugado com lipossomas contendo corante
Diagnoacutestico
bull PCR
ndash Sensibilidade e especificidade maior do que o esfregaccedilo sanguiacuteneo
Microhematoacutecrito Creme leucocitaacuterio
Microhematoacutecrito
bull Colher sangue em tubo capilar
bull Centrifugar em microcentriacutefuga por 5 minutos agrave 10000 rpm
bull Avaliar o microhematocrito em microscopia oacuteptica
bull Verificar a presenccedila das formas tripomastigotas presentes no creme leucocitaacuterio
bull Se positivo realizar esfregaccedilo do creme leucocitaacuterio
bull Fixar com aacutelcool metiacutelico e corar com Gienza Analisar em microscoacutepio oacuteptico
Meacutetodo de concentraccedilatildeo
bull Meacutetodo de Strout
ndash Realizar a coleta de sangue em tubo sem anticoagulante
ndash Aguardar a retraccedilatildeo do coaacutegulo Os parasitas concentrar-se-atildeo no soro a medida que ocorrer a retraccedilatildeo do coaacutegulo
ndash O soro eacute centrifugado para anaacutelise do sedimento
Inoculaccedilatildeo em animais
bull Inoculaccedilatildeo de sangue ou creme leucocitaacuterio em camundongos jovens
bull Inoculaccedilatildeo intra-peritoneal intra-conjuntival e a via oral
bull Avaliaccedilatildeo das formas de Tcruzi
bull Teacutecnica utilizada em pesquisa
Diagnoacutestico laboratorial Fase crocircnica
bull Xenodiagnoacutestico bull Hemocultura bull Reaccedilatildeo de hemaglutinaccedilatildeo indireta bull RIFI bull ELISA bull PCR bull PaGIA bull LMCo bull Pesquisa de anticorpos antitripomastigotas vivos
Hemocultura
bull Meio LIT ndash Liver Infusion Triptose
bull Meio NNN ndash McNeal Novy e Nicolle
bull Utilizaccedilatildeo de 30ml de sangue heparinizado
bull Centrifugaccedilatildeo por 30 minutos em 3000 rpm
bull Despreza-se o plasma e o sedimento celular eacute lavado com meio LIT ( Liver Infusion Triptose) para eliminaccedilatildeo de possiacuteveis anticorpos
Hemocultura
bull Sedimento distribuiacutedo em 6 tubos com 5 ml de LIT
bull Os tubos satildeo mantidos a 28degC homogeneizados 3x semana e avaliados quinzenalmente ateacute 90 dias
bull Centrifugaccedilatildeo e avaliaccedilatildeo do sedimento de hemaacutecias
bull Leitura realizada pela observaccedilatildeo microscoacutepica de gotas do meio
bull Aumento da positividade para sangue processado imediatamente apoacutes a coleta cultivado em prazo de tempo maior (120 dias) e repeticcedilatildeo da teacutecnica por 3 vezes
Wuchereria bancrofti
Taxonomia
bull Reino Animalia
bull Filo Nematoda
bull Classe Secernentea
bull Ordem Filariidea
bull Superfamiacutelia Filarioidea
bull FamiacuteliaOnchocercidae
bull GecircnerosWuchereria
bull Espeacutecie Wbancrofti
Formas evolutivas
bull Heteroxecircnico
bull Hospedeiro vertebrado homem
bull Hospedeiro intermediaacuterio Culex quinquefasciatus
bull Formas evolutivas ndash HV verme adulto (fecircmea e macho) localizados nos
vasos e gacircnglios linfaacuteticos da regiatildeo abdominal peacutelvica (perna e escroto) mamas e braccedilo
ndash microfilaacuterias eliminadas pelas fecircmeas graacutevidas Saem dos ductos linfaacuteticos e atingem circulaccedilatildeo sanguiacutenea
ndash HI larva L1 L2 e L3 (infectante)
Culex quinquefasciatus
Morfologia
bull Macho 35 a 4 cm x 01mm com extremidade posterior enrrolada ventralmente
bull Fecircmea 7 a 10cm x 03 mm com vagina exteriorizada em uma vulva localizada proacutexima agrave extremidade anterior
bull Microfilaacuteria Presenccedila de bainha e estilete bucal na parte anterior que as diferencia de outros filariacutedeos sanguiacuteneos Possuem 250 a 300 microm e uma grande qtde de nuacutecleos
bull Larva L3 possui aproximadamente 15 a 20 mm de comprimento
Microfilaacuteria
Ciclo evolutivo
bull Fecircmea do inseto realiza o hematofagismo noturno e ingere as microfilaacuterias
bull Estocircmago do vetor microfilaacuterias perdem a bainha atravessam a parede do estocircmago e migram para os muacutesculos toraacutecicos ndash L1
bull Apoacutes 20 dias a larva estaacute na forma infectante L3 medindo aproximadamente 2mm
bull Migraccedilatildeo da larva para a proboacutescida concentrando-se no laacutebio do moquito
Microfilaacuteria Presenccedila de bainha Cauda pontuda com nuacutecleos grandes largos e bem separados Nuacutecleos caudais em fila uacutenica
Ciclo evolutivo
bull Repasto sanguiacuteneo do inseto infectado
ndash As larvas L3 migram do laacutebio do vetor para a pele do HV
ndash Migram para os vasos linfaacuteticos e tornam-se vermes adultos
ndash Apoacutes 8 meses as fecircmeas graacutevidas produzem as primeiras microfilaacuterias
Periodicidade
bull Periodicidade noturna das microfilaacuterias
ndash Durante o dia localizam-se nos capilares profundos
ndash Durante a noite vasos sanguiacuteneos perifeacutericos
ndash Pico da microfilaremia meia-noite coincidindo com o horaacuterio de hematofagismo do inseto transmissor
Patologia
bull Periacuteodo assintomaacutetico bull Fase aguda bull Processos inflamatoacuterios produzidos por larvas L4 e adultos jovens
que colonizam as vias linfaacuteticas ndash Linfadenites linfonodos inguinais epitrocleanos e axilares com
desenvolvimento de granulomas com calcificaccedilatildeo apoacutes a morte dos vermes
ndash Linfangite inflamaccedilatildeo e dilataccedilatildeo dos vasos linfaacuteticos ndash Febre mal estar ndash Funiculite filariana linfangite do cordatildeo espermaacutetico e varicocele
bull Fase crocircnica ndash Hidrocele ndash Linfedema ndash Quiluacuteria ndash Elefantiacutease
Quiluacuteria
Patologia
bull Processos obstrutivos ndash Formaccedilatildeo de novelos envolvidos por reaccedilatildeo
inflamatoacuteria e pela formaccedilatildeo de fibrose
ndash Estase e congestatildeo da linfa produzindo linfoedema tecidual
ndash Extravasamento produzindo derrame linfaacutetico ascite linfaacutetica linfuacuteria linforreacuteia linfotoacuterax linfocele etc
ndash A ruptura de vasos linfaacuteticos para o interior do sistema excretor urinaacuterio daacute origem agrave quiluacuteria
Patologia
bull Complicaccedilotildees associadas agrave filariose
ndash Elefantiacutease
bull Caracterizada por processo inflamatoacuterio e fibrose crocircnica do oacutergatildeo atingido
bull Hipertrofia da derme do tecido conjuntivo aumento exagerado do volume do oacutergatildeo com queratinizaccedilatildeo e rugosidade
bull A pele perde a elasticidade resseca e se torna sujeita a infecccedilotildees bacterianas
Patologia
bull Permanecimento na aacuterea endecircmica
bull Nuacutemero de larvas inoculadas
bull Frequecircncia das re-infecccedilotildees
bull O nuacutemero de acasalamento dos vermes e suas localizaccedilotildees anatocircmicas
bull A sensibilizaccedilatildeo do organismo e a intensidade das reaccedilotildees inflamatoacuterias do paciente
bull As infecccedilotildees bacterianas associadas
Diagnoacutestico
bull Pesquisa de microfilaacuterias no sangue perifeacuterico ndash 20 40 ou 60 microL- de preferecircncia entre as 10 h da noite e 4h da manhatilde
ndash Gota espessa Coloraccedilatildeo de Giemsa
ndash Meacutetodos de concentraccedilatildeo Filtraccedilatildeo em membrana de policarbonato milipore ou nucleopore
ndash Meacutetodo de Knott
bull Na fase crocircnica as microfilaacuterias raramente satildeo detectadas no sangue perifeacuterico
Gota espessa
bull Possibilita a visualizaccedilatildeo da bainha fato que difere a microfilaria de W bancrofti de outro filariacutedeos sanguiacuteneos
bull Apresenta um baixo custo em comparaccedilatildeo com outras mais avanccediladas como a filtraccedilatildeo de sangue em membrana de policarbonato
bull Possui baixa sensibilidade natildeo indicada em situaccedilotildees em que os parasitados se mostram com baixa microfilaremia ou amicrofilarecircmicos
Concentraccedilatildeo
bull Baseia-se na passagem de sangue venoso atraveacutes de uma membrana (Milipore ou Nuclepore) de diacircmetro de 13 a 25 mm e poros de 5 ou 3 μm
bull O material retido na membrana sendo fixado corado e observado ao microscoacutepio
bull Essa teacutecnica assim como a de Knott permite a identificaccedilatildeo de indiviacuteduos com baixiacutessimas parasitemias (quantidade de microfilarias natildeo detectaacuteveis pela teacutecnica de gota espessa)
Teacutecnica de Knott
bull Retirar 2 ml de sangue total por punccedilatildeo venosa e colocar imediatamente em um tubo contendo 10 ml de formol a 2
bull Fechar o tubo e misture completamente invertendo-o e agitando-o O formol hemolisa as hemaacutecias mata fixa e distende as microfilaacuterias
bull Centrifugar o sangue a 1500 rpm por 5 minutos
bull Decantar o sobrenadante
Teacutecnica de Knott
bull Retirar o sedimento com uma pipeta Pasteur e espalhar a gota espessa sobre uma lacircmina
bull Deixar secar bem e corar com Giemsa
bull Examinar com objetiva de imersatildeo
bull Esta teacutecnica possibilita que o exame microscoacutepico laboratorial seja realizado vaacuterios dias apoacutes a coleta de material realizada no campo
Exames de imagem
bull Ultranossografia
ndash Possibilidade de visualizar os movimentos de vermes adultos vivos de W bancrofti em vaso linfaacutetico especificamente em vasos intraescrotais do cordatildeo espermaacutetico
ndash O movimento ativo e ininterrupto dos vermes adultos durante as 24 horas do dia eacute denominado sinal da ldquodanccedila das filaacuteriasrdquo
Diagnoacutestico soroloacutegico
bull Teste imunocromatograacutefico desenvolvido pelo ICT Diagnostic - ICT card
ndash Teste qualilativo
ndash Cartatildeo possui ac de antifilaacuteria e o controle eacute formado por ac anti Ig G humano
Plasmodium spp
Taxonomia
bull Reino Protozoa
bull FiloApicomplexa
bull Classe Sporozoea
bull Ordem Hemosporidiida
bull Famiacutelia Plasmodiidae
bull Gecircneros Plasmodium
bull Espeacutecie Pfalciparum Pvivax Povale e Pmalariae
Plasmodium
bull Ciclo bioloacutegico Hospedeiro vertebrado e invertebrado
bull Hospedeiro invertebrado ndash Vetor
ndash Fecircmeas hematoacutefagas do gecircnero Anopheles
ndash Brasil Anopheles (N)darlingi A (N) aquasalis A (N) albitarsis A (K) cruzii e A (K) bellator
ndash Possuem haacutebito noturno penetrando nas casas no crespuacutesculo saindo ao amanhecer
Plasmodium
bull Hospedeiro vertebrado homem
bull Transmissatildeo
ndash Vetor
ndash Transfusatildeo de sangue
ndash Compartilhamento de seringas
ndash Acidente com agulhas
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
bull Ciclo preacute-eritrociacutetico
ndash Forma inoculada esporozoiacutetos
ndash A fecircmea do anofelino infectado inocula no homem as formas infectantes localizadas na saliva
ndash Os esporozoiacutetas permancem na circulaccedilatildeo por aproximadamente uma hora
ndash Invadem os hepatoacutecitos e se diferenciam em trofozoiacutetas (criptozoiacuteto)
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
ndash Esquizogonia e formaccedilatildeo de esquizontes
ndash Divisatildeo nuclear e liberaccedilatildeo de merozoiacutetos
ndash Aproximadamente 10000 merozoiacutetos por hepatoacutecito
ndash Rompimento do hepatoacutecito e liberaccedilatildeo de merozoiacutetos na circulaccedilatildeo
ndash Duraccedilatildeo do ciclo aprox 1 a 2 semanas
Ciclo evolutivo
bull PVivax e Povale
ndash Alguns esporozoiacutetos geneticamente diferentes ficam na forma latente nos hepatoacutecitos permanecendo muitos meses Satildeo classificados como hipnozoiacuteto
ndash Satildeo responsaacuteveis pelas recaiacutedas tardias e formas de malaacuteria com periacuteodo de encubaccedilatildeo longo ndash 6 a 9 meses
FASE HEPAacuteTICA OU EXOERITROCIacuteTICA
Hepatoacutecito
FIacuteGADO
Invasatildeo do hepatoacutecito
Reproduccedilatildeo Assexuada
Esporozoiacutetos Lise dos hepatoacutecitos
Liberaccedilatildeo dos protozoaacuterios na corrente sanguumliacutenea
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
bull Ciclo eritrociacutetico
ndash Os merozoiacutetos invadem as hemaacutecias
ndash Diferenciaccedilatildeo em trofozoiacutetos
ndash Esquizogonia esquizonte
ndash Produccedilatildeo de merozoiacutetos e rompimento da hemaacutecia
ndash Merozoiacutetos invasatildeo de novas hemaacutecias
ndash Apoacutes algumas geraccedilotildees os merozoiacutetos natildeo mais se dividem e se diferenciam em gametoacutecitos ndash micro e macrogametoacutecito
FASE ERITROCIacuteTICA
Hepatoacutecito destruiacutedo pelos protozoaacuterios
Penetraccedilatildeo dos protozoaacuterios
Reproduccedilatildeo assexuada
Protozoaacuterios destroem as hemaacutecias
Diferenciaccedilatildeo em gametoacutecitos
Fecircmeas de Anopheles sugam hemaacutecias com gametoacutecitos
Ciclo no hospedeiro invertebrado
Ocorre nas hemaacutecias ou Eritroacutecitos
nas hemaacutecias
Protozoaacuterio no interior da hemaacutecia
Hemaacutecia com gametoacutecito
T trofozoiacuteto Em esquizonte com merozoiacuteto
Fase eritrociacutetica
bull Ciclo sanguiacuteneo ndash Pfalciparum P vivax e Povale 48 horas
ndash Pmalariae 72 horas
ndash Fonte de nutriccedilatildeo do Plasmodium no ciclo sanguiacuteneo hemoglobina
ndash Produccedilatildeo do pigmento malaacuterico hemozoiacutena bull Granulaccedilotildees de Schuffner Plasmodium vivax
bull Granulaccedilotildees de Maurer P falciparum
bull Granulaccedilotildees de Ziemann P malariae
ndash Fagocitose pelas ceacutelulas de Kuppffer e macroacutefagos do baccedilo
Trofozoiacutetos Pfalciparum
Trofozoiacutetos Pfalciparum
Esquizonte ndash P falciparum
Raros no sangue perifeacuterico Possuem 2 a 24 merozoiacutetos
Ocupam 23 do gloacutebulo vermelho
Gametoacutecitos Pfalciparum
Ciclo evolutivo Pvivax
Esquizonte ndash P vivax
Satildeo grandes e ameboacuteides Cromatina organizada em duas ou mais massas
Possuem 2 a 24 merozoiacutetos com pontos de cromatina
Gametoacutecito ndash Pvivax
Macrogametoacutecitos satildeo redondos ou ovais e ocupam toda ceacutelula hospedeira O citoplasma eacute geralmente corado de azul mais escuro e conteacutem pigmento marrom Microgametoacutecitos satildeo geralmente do tamanho de um RBC natildeo infectados com citoplasma corados de azul paacutelido rosa ou cinza
Trofozoiacutetos - P malariae
Esquizontes ndash P malariae
Aproximadamente 6 a 12 merozoiacutetos com arranjo de rosetas
Gametoacutecitos ndash P malariae
Ciclo evolutivo ndash HI
bull Ingestatildeo de hemaacutecias contendo gametoacutecitos durante o repasto sanguiacuteneo da fecircmea do anofelino
bull No intestino meacutedio do vetor gametogecircnese ndash Macrogametoacutecito ndash macrogameta feminino ndash Microgametoacutecito o processo de exflagelaccedilatildeo daacute
origem a 8 microgametas masculinos ndash Produccedilatildeo de ovo ou zigoto ndash O ovo encista na camada epitelial do intestino meacutedio
oocisto ndash Esporogonia liberaccedilatildeo de esporozoiacutetos
Ciclo evolutivo ndash HInvertebrado
ndash Os esporozoiacutetos satildeo transportados pelo hemolinfa ateacute as glacircndulas salivares do vetor ateacute atingirem o ducto salivar
bull Inoculaccedilatildeo no hospedeiro vertebrado atraveacutes da picada do inseto
Hemaacutecia com gametoacutecito
Fecircmeas de Anopheles sugam hemaacutecias com gametoacutecitos
CICLO NO INVERTEBRADO
No tubo digestivo
Zigoto
Penetraccedilatildeo na parede do tubo
digestivo
Migraccedilatildeo para as glacircndulas salivares
Desenvolvimento
Mosquito infectado
Diagnoacutestico
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado e espesso corado pelo Giemsa
bull Sangue colhido sem anticoagulante para melhor fixaccedilatildeo em lacircmina
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo espesso eacute mais eficiente para detecccedilatildeo da infecccedilatildeo
bull Esfregaccedilo delgado eacute mais eficiente para diferenciaccedilatildeo morfoloacutegica das espeacutecies
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo semiquantitativo
ndash Exame de 100 campos microscoacutepicos com resultado expresso pelo sistema de cruzes
Parasitos contados Nuacutemero de campos
microscoacutepicos cruzes
40 a 60 100 +2
1 1 +
2-20 1 ++
21-200 1 +++
+ 200 1 ++++
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo quantitativo derivado de anaacutelise semiquantitativa
Contagem de parasitos por campo
Cruzes Parasitos por mm3
40 a 60100 +2 200-300
1 + 301-500
2-20 ++ 501 - 10000
21-200 +++ 10001 ndash 100000
+ 200 ++++ 100000 ou mais
Diagnoacutestico
bull P falciparum
ndash Parte do ciclo celular aderido ao endoteacutelio capilar Encontro somente de trofozoitos e gametoacutecitos no sangue perifeacuterico
ndash Raramente os esquizontes satildeo encontrados no sangue perifeacuterico
Diagnoacutestico ndash Pvivax ndash Encontro de todas as formas de desenvolvimento ndash
trofozoiacuteto jovem maduro esquizontes e gametoacutecitos
ndash Os trofozoiacutetos maduros tecircm geralmente um aspecto irregular com extensotildees ameboacuteides em seu citoplasma
Diagnoacutestico ndash Pvivax
ndash Os gametoacutecitos femininos coram-se mais intensamente que os masculinos e apresentam nuacutecleo mais compacto geralmente em localizaccedilatildeo perifeacuterica
ndash O pigmento malaacuterico geralmente eacute abundante
Diagnoacutestico - Pmalariae
bull Realizado por meio de caracteriacutesticas morfoloacutegicas do parasito
ndash Verificaccedilatildeo em esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado
ndash Posiccedilatildeo equatorial do parasito
ndash Desenvolvimento sem deformaccedilatildeo do eritroacutecito
Diagnoacutestico
bull QBC ndash Teacutecnica que combina concentraccedilatildeo dos parasitos
pela centrifugaccedilatildeo do sangue em em microhematoacutecrito e a coloraccedilatildeo dos aacutecidos nucleacuteicos do parasito pelo fluorcromo laranja de acridina
ndash Utilizaccedilatildeo de tubos especiais e microscopia epifluorescente
ndash Teste raacutepido
ndash Alta sensibilidade
Diagnoacutestico
bull ParaSight-F ( Becton amp Dickinson)
ndash Teste raacutepido para captura da proteiacutena rica em histidina 2 de Pfalciparum( PfHRP2) e enzimas conservadas de 4 espeacutecies de plasmoacutedio (DHL e aldolase
ndash Utilizaccedilatildeo de fita de nitrocelulose contendo ac monoclonal
ndash Lise de uma gota de sangue
ndash A reaccedilatildeo eacute revelada com adiccedilatildeo de ac policlonal anti-HRP2 conjugado com lipossomas contendo corante
Diagnoacutestico
bull PCR
ndash Sensibilidade e especificidade maior do que o esfregaccedilo sanguiacuteneo
Microhematoacutecrito
bull Colher sangue em tubo capilar
bull Centrifugar em microcentriacutefuga por 5 minutos agrave 10000 rpm
bull Avaliar o microhematocrito em microscopia oacuteptica
bull Verificar a presenccedila das formas tripomastigotas presentes no creme leucocitaacuterio
bull Se positivo realizar esfregaccedilo do creme leucocitaacuterio
bull Fixar com aacutelcool metiacutelico e corar com Gienza Analisar em microscoacutepio oacuteptico
Meacutetodo de concentraccedilatildeo
bull Meacutetodo de Strout
ndash Realizar a coleta de sangue em tubo sem anticoagulante
ndash Aguardar a retraccedilatildeo do coaacutegulo Os parasitas concentrar-se-atildeo no soro a medida que ocorrer a retraccedilatildeo do coaacutegulo
ndash O soro eacute centrifugado para anaacutelise do sedimento
Inoculaccedilatildeo em animais
bull Inoculaccedilatildeo de sangue ou creme leucocitaacuterio em camundongos jovens
bull Inoculaccedilatildeo intra-peritoneal intra-conjuntival e a via oral
bull Avaliaccedilatildeo das formas de Tcruzi
bull Teacutecnica utilizada em pesquisa
Diagnoacutestico laboratorial Fase crocircnica
bull Xenodiagnoacutestico bull Hemocultura bull Reaccedilatildeo de hemaglutinaccedilatildeo indireta bull RIFI bull ELISA bull PCR bull PaGIA bull LMCo bull Pesquisa de anticorpos antitripomastigotas vivos
Hemocultura
bull Meio LIT ndash Liver Infusion Triptose
bull Meio NNN ndash McNeal Novy e Nicolle
bull Utilizaccedilatildeo de 30ml de sangue heparinizado
bull Centrifugaccedilatildeo por 30 minutos em 3000 rpm
bull Despreza-se o plasma e o sedimento celular eacute lavado com meio LIT ( Liver Infusion Triptose) para eliminaccedilatildeo de possiacuteveis anticorpos
Hemocultura
bull Sedimento distribuiacutedo em 6 tubos com 5 ml de LIT
bull Os tubos satildeo mantidos a 28degC homogeneizados 3x semana e avaliados quinzenalmente ateacute 90 dias
bull Centrifugaccedilatildeo e avaliaccedilatildeo do sedimento de hemaacutecias
bull Leitura realizada pela observaccedilatildeo microscoacutepica de gotas do meio
bull Aumento da positividade para sangue processado imediatamente apoacutes a coleta cultivado em prazo de tempo maior (120 dias) e repeticcedilatildeo da teacutecnica por 3 vezes
Wuchereria bancrofti
Taxonomia
bull Reino Animalia
bull Filo Nematoda
bull Classe Secernentea
bull Ordem Filariidea
bull Superfamiacutelia Filarioidea
bull FamiacuteliaOnchocercidae
bull GecircnerosWuchereria
bull Espeacutecie Wbancrofti
Formas evolutivas
bull Heteroxecircnico
bull Hospedeiro vertebrado homem
bull Hospedeiro intermediaacuterio Culex quinquefasciatus
bull Formas evolutivas ndash HV verme adulto (fecircmea e macho) localizados nos
vasos e gacircnglios linfaacuteticos da regiatildeo abdominal peacutelvica (perna e escroto) mamas e braccedilo
ndash microfilaacuterias eliminadas pelas fecircmeas graacutevidas Saem dos ductos linfaacuteticos e atingem circulaccedilatildeo sanguiacutenea
ndash HI larva L1 L2 e L3 (infectante)
Culex quinquefasciatus
Morfologia
bull Macho 35 a 4 cm x 01mm com extremidade posterior enrrolada ventralmente
bull Fecircmea 7 a 10cm x 03 mm com vagina exteriorizada em uma vulva localizada proacutexima agrave extremidade anterior
bull Microfilaacuteria Presenccedila de bainha e estilete bucal na parte anterior que as diferencia de outros filariacutedeos sanguiacuteneos Possuem 250 a 300 microm e uma grande qtde de nuacutecleos
bull Larva L3 possui aproximadamente 15 a 20 mm de comprimento
Microfilaacuteria
Ciclo evolutivo
bull Fecircmea do inseto realiza o hematofagismo noturno e ingere as microfilaacuterias
bull Estocircmago do vetor microfilaacuterias perdem a bainha atravessam a parede do estocircmago e migram para os muacutesculos toraacutecicos ndash L1
bull Apoacutes 20 dias a larva estaacute na forma infectante L3 medindo aproximadamente 2mm
bull Migraccedilatildeo da larva para a proboacutescida concentrando-se no laacutebio do moquito
Microfilaacuteria Presenccedila de bainha Cauda pontuda com nuacutecleos grandes largos e bem separados Nuacutecleos caudais em fila uacutenica
Ciclo evolutivo
bull Repasto sanguiacuteneo do inseto infectado
ndash As larvas L3 migram do laacutebio do vetor para a pele do HV
ndash Migram para os vasos linfaacuteticos e tornam-se vermes adultos
ndash Apoacutes 8 meses as fecircmeas graacutevidas produzem as primeiras microfilaacuterias
Periodicidade
bull Periodicidade noturna das microfilaacuterias
ndash Durante o dia localizam-se nos capilares profundos
ndash Durante a noite vasos sanguiacuteneos perifeacutericos
ndash Pico da microfilaremia meia-noite coincidindo com o horaacuterio de hematofagismo do inseto transmissor
Patologia
bull Periacuteodo assintomaacutetico bull Fase aguda bull Processos inflamatoacuterios produzidos por larvas L4 e adultos jovens
que colonizam as vias linfaacuteticas ndash Linfadenites linfonodos inguinais epitrocleanos e axilares com
desenvolvimento de granulomas com calcificaccedilatildeo apoacutes a morte dos vermes
ndash Linfangite inflamaccedilatildeo e dilataccedilatildeo dos vasos linfaacuteticos ndash Febre mal estar ndash Funiculite filariana linfangite do cordatildeo espermaacutetico e varicocele
bull Fase crocircnica ndash Hidrocele ndash Linfedema ndash Quiluacuteria ndash Elefantiacutease
Quiluacuteria
Patologia
bull Processos obstrutivos ndash Formaccedilatildeo de novelos envolvidos por reaccedilatildeo
inflamatoacuteria e pela formaccedilatildeo de fibrose
ndash Estase e congestatildeo da linfa produzindo linfoedema tecidual
ndash Extravasamento produzindo derrame linfaacutetico ascite linfaacutetica linfuacuteria linforreacuteia linfotoacuterax linfocele etc
ndash A ruptura de vasos linfaacuteticos para o interior do sistema excretor urinaacuterio daacute origem agrave quiluacuteria
Patologia
bull Complicaccedilotildees associadas agrave filariose
ndash Elefantiacutease
bull Caracterizada por processo inflamatoacuterio e fibrose crocircnica do oacutergatildeo atingido
bull Hipertrofia da derme do tecido conjuntivo aumento exagerado do volume do oacutergatildeo com queratinizaccedilatildeo e rugosidade
bull A pele perde a elasticidade resseca e se torna sujeita a infecccedilotildees bacterianas
Patologia
bull Permanecimento na aacuterea endecircmica
bull Nuacutemero de larvas inoculadas
bull Frequecircncia das re-infecccedilotildees
bull O nuacutemero de acasalamento dos vermes e suas localizaccedilotildees anatocircmicas
bull A sensibilizaccedilatildeo do organismo e a intensidade das reaccedilotildees inflamatoacuterias do paciente
bull As infecccedilotildees bacterianas associadas
Diagnoacutestico
bull Pesquisa de microfilaacuterias no sangue perifeacuterico ndash 20 40 ou 60 microL- de preferecircncia entre as 10 h da noite e 4h da manhatilde
ndash Gota espessa Coloraccedilatildeo de Giemsa
ndash Meacutetodos de concentraccedilatildeo Filtraccedilatildeo em membrana de policarbonato milipore ou nucleopore
ndash Meacutetodo de Knott
bull Na fase crocircnica as microfilaacuterias raramente satildeo detectadas no sangue perifeacuterico
Gota espessa
bull Possibilita a visualizaccedilatildeo da bainha fato que difere a microfilaria de W bancrofti de outro filariacutedeos sanguiacuteneos
bull Apresenta um baixo custo em comparaccedilatildeo com outras mais avanccediladas como a filtraccedilatildeo de sangue em membrana de policarbonato
bull Possui baixa sensibilidade natildeo indicada em situaccedilotildees em que os parasitados se mostram com baixa microfilaremia ou amicrofilarecircmicos
Concentraccedilatildeo
bull Baseia-se na passagem de sangue venoso atraveacutes de uma membrana (Milipore ou Nuclepore) de diacircmetro de 13 a 25 mm e poros de 5 ou 3 μm
bull O material retido na membrana sendo fixado corado e observado ao microscoacutepio
bull Essa teacutecnica assim como a de Knott permite a identificaccedilatildeo de indiviacuteduos com baixiacutessimas parasitemias (quantidade de microfilarias natildeo detectaacuteveis pela teacutecnica de gota espessa)
Teacutecnica de Knott
bull Retirar 2 ml de sangue total por punccedilatildeo venosa e colocar imediatamente em um tubo contendo 10 ml de formol a 2
bull Fechar o tubo e misture completamente invertendo-o e agitando-o O formol hemolisa as hemaacutecias mata fixa e distende as microfilaacuterias
bull Centrifugar o sangue a 1500 rpm por 5 minutos
bull Decantar o sobrenadante
Teacutecnica de Knott
bull Retirar o sedimento com uma pipeta Pasteur e espalhar a gota espessa sobre uma lacircmina
bull Deixar secar bem e corar com Giemsa
bull Examinar com objetiva de imersatildeo
bull Esta teacutecnica possibilita que o exame microscoacutepico laboratorial seja realizado vaacuterios dias apoacutes a coleta de material realizada no campo
Exames de imagem
bull Ultranossografia
ndash Possibilidade de visualizar os movimentos de vermes adultos vivos de W bancrofti em vaso linfaacutetico especificamente em vasos intraescrotais do cordatildeo espermaacutetico
ndash O movimento ativo e ininterrupto dos vermes adultos durante as 24 horas do dia eacute denominado sinal da ldquodanccedila das filaacuteriasrdquo
Diagnoacutestico soroloacutegico
bull Teste imunocromatograacutefico desenvolvido pelo ICT Diagnostic - ICT card
ndash Teste qualilativo
ndash Cartatildeo possui ac de antifilaacuteria e o controle eacute formado por ac anti Ig G humano
Plasmodium spp
Taxonomia
bull Reino Protozoa
bull FiloApicomplexa
bull Classe Sporozoea
bull Ordem Hemosporidiida
bull Famiacutelia Plasmodiidae
bull Gecircneros Plasmodium
bull Espeacutecie Pfalciparum Pvivax Povale e Pmalariae
Plasmodium
bull Ciclo bioloacutegico Hospedeiro vertebrado e invertebrado
bull Hospedeiro invertebrado ndash Vetor
ndash Fecircmeas hematoacutefagas do gecircnero Anopheles
ndash Brasil Anopheles (N)darlingi A (N) aquasalis A (N) albitarsis A (K) cruzii e A (K) bellator
ndash Possuem haacutebito noturno penetrando nas casas no crespuacutesculo saindo ao amanhecer
Plasmodium
bull Hospedeiro vertebrado homem
bull Transmissatildeo
ndash Vetor
ndash Transfusatildeo de sangue
ndash Compartilhamento de seringas
ndash Acidente com agulhas
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
bull Ciclo preacute-eritrociacutetico
ndash Forma inoculada esporozoiacutetos
ndash A fecircmea do anofelino infectado inocula no homem as formas infectantes localizadas na saliva
ndash Os esporozoiacutetas permancem na circulaccedilatildeo por aproximadamente uma hora
ndash Invadem os hepatoacutecitos e se diferenciam em trofozoiacutetas (criptozoiacuteto)
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
ndash Esquizogonia e formaccedilatildeo de esquizontes
ndash Divisatildeo nuclear e liberaccedilatildeo de merozoiacutetos
ndash Aproximadamente 10000 merozoiacutetos por hepatoacutecito
ndash Rompimento do hepatoacutecito e liberaccedilatildeo de merozoiacutetos na circulaccedilatildeo
ndash Duraccedilatildeo do ciclo aprox 1 a 2 semanas
Ciclo evolutivo
bull PVivax e Povale
ndash Alguns esporozoiacutetos geneticamente diferentes ficam na forma latente nos hepatoacutecitos permanecendo muitos meses Satildeo classificados como hipnozoiacuteto
ndash Satildeo responsaacuteveis pelas recaiacutedas tardias e formas de malaacuteria com periacuteodo de encubaccedilatildeo longo ndash 6 a 9 meses
FASE HEPAacuteTICA OU EXOERITROCIacuteTICA
Hepatoacutecito
FIacuteGADO
Invasatildeo do hepatoacutecito
Reproduccedilatildeo Assexuada
Esporozoiacutetos Lise dos hepatoacutecitos
Liberaccedilatildeo dos protozoaacuterios na corrente sanguumliacutenea
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
bull Ciclo eritrociacutetico
ndash Os merozoiacutetos invadem as hemaacutecias
ndash Diferenciaccedilatildeo em trofozoiacutetos
ndash Esquizogonia esquizonte
ndash Produccedilatildeo de merozoiacutetos e rompimento da hemaacutecia
ndash Merozoiacutetos invasatildeo de novas hemaacutecias
ndash Apoacutes algumas geraccedilotildees os merozoiacutetos natildeo mais se dividem e se diferenciam em gametoacutecitos ndash micro e macrogametoacutecito
FASE ERITROCIacuteTICA
Hepatoacutecito destruiacutedo pelos protozoaacuterios
Penetraccedilatildeo dos protozoaacuterios
Reproduccedilatildeo assexuada
Protozoaacuterios destroem as hemaacutecias
Diferenciaccedilatildeo em gametoacutecitos
Fecircmeas de Anopheles sugam hemaacutecias com gametoacutecitos
Ciclo no hospedeiro invertebrado
Ocorre nas hemaacutecias ou Eritroacutecitos
nas hemaacutecias
Protozoaacuterio no interior da hemaacutecia
Hemaacutecia com gametoacutecito
T trofozoiacuteto Em esquizonte com merozoiacuteto
Fase eritrociacutetica
bull Ciclo sanguiacuteneo ndash Pfalciparum P vivax e Povale 48 horas
ndash Pmalariae 72 horas
ndash Fonte de nutriccedilatildeo do Plasmodium no ciclo sanguiacuteneo hemoglobina
ndash Produccedilatildeo do pigmento malaacuterico hemozoiacutena bull Granulaccedilotildees de Schuffner Plasmodium vivax
bull Granulaccedilotildees de Maurer P falciparum
bull Granulaccedilotildees de Ziemann P malariae
ndash Fagocitose pelas ceacutelulas de Kuppffer e macroacutefagos do baccedilo
Trofozoiacutetos Pfalciparum
Trofozoiacutetos Pfalciparum
Esquizonte ndash P falciparum
Raros no sangue perifeacuterico Possuem 2 a 24 merozoiacutetos
Ocupam 23 do gloacutebulo vermelho
Gametoacutecitos Pfalciparum
Ciclo evolutivo Pvivax
Esquizonte ndash P vivax
Satildeo grandes e ameboacuteides Cromatina organizada em duas ou mais massas
Possuem 2 a 24 merozoiacutetos com pontos de cromatina
Gametoacutecito ndash Pvivax
Macrogametoacutecitos satildeo redondos ou ovais e ocupam toda ceacutelula hospedeira O citoplasma eacute geralmente corado de azul mais escuro e conteacutem pigmento marrom Microgametoacutecitos satildeo geralmente do tamanho de um RBC natildeo infectados com citoplasma corados de azul paacutelido rosa ou cinza
Trofozoiacutetos - P malariae
Esquizontes ndash P malariae
Aproximadamente 6 a 12 merozoiacutetos com arranjo de rosetas
Gametoacutecitos ndash P malariae
Ciclo evolutivo ndash HI
bull Ingestatildeo de hemaacutecias contendo gametoacutecitos durante o repasto sanguiacuteneo da fecircmea do anofelino
bull No intestino meacutedio do vetor gametogecircnese ndash Macrogametoacutecito ndash macrogameta feminino ndash Microgametoacutecito o processo de exflagelaccedilatildeo daacute
origem a 8 microgametas masculinos ndash Produccedilatildeo de ovo ou zigoto ndash O ovo encista na camada epitelial do intestino meacutedio
oocisto ndash Esporogonia liberaccedilatildeo de esporozoiacutetos
Ciclo evolutivo ndash HInvertebrado
ndash Os esporozoiacutetos satildeo transportados pelo hemolinfa ateacute as glacircndulas salivares do vetor ateacute atingirem o ducto salivar
bull Inoculaccedilatildeo no hospedeiro vertebrado atraveacutes da picada do inseto
Hemaacutecia com gametoacutecito
Fecircmeas de Anopheles sugam hemaacutecias com gametoacutecitos
CICLO NO INVERTEBRADO
No tubo digestivo
Zigoto
Penetraccedilatildeo na parede do tubo
digestivo
Migraccedilatildeo para as glacircndulas salivares
Desenvolvimento
Mosquito infectado
Diagnoacutestico
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado e espesso corado pelo Giemsa
bull Sangue colhido sem anticoagulante para melhor fixaccedilatildeo em lacircmina
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo espesso eacute mais eficiente para detecccedilatildeo da infecccedilatildeo
bull Esfregaccedilo delgado eacute mais eficiente para diferenciaccedilatildeo morfoloacutegica das espeacutecies
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo semiquantitativo
ndash Exame de 100 campos microscoacutepicos com resultado expresso pelo sistema de cruzes
Parasitos contados Nuacutemero de campos
microscoacutepicos cruzes
40 a 60 100 +2
1 1 +
2-20 1 ++
21-200 1 +++
+ 200 1 ++++
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo quantitativo derivado de anaacutelise semiquantitativa
Contagem de parasitos por campo
Cruzes Parasitos por mm3
40 a 60100 +2 200-300
1 + 301-500
2-20 ++ 501 - 10000
21-200 +++ 10001 ndash 100000
+ 200 ++++ 100000 ou mais
Diagnoacutestico
bull P falciparum
ndash Parte do ciclo celular aderido ao endoteacutelio capilar Encontro somente de trofozoitos e gametoacutecitos no sangue perifeacuterico
ndash Raramente os esquizontes satildeo encontrados no sangue perifeacuterico
Diagnoacutestico ndash Pvivax ndash Encontro de todas as formas de desenvolvimento ndash
trofozoiacuteto jovem maduro esquizontes e gametoacutecitos
ndash Os trofozoiacutetos maduros tecircm geralmente um aspecto irregular com extensotildees ameboacuteides em seu citoplasma
Diagnoacutestico ndash Pvivax
ndash Os gametoacutecitos femininos coram-se mais intensamente que os masculinos e apresentam nuacutecleo mais compacto geralmente em localizaccedilatildeo perifeacuterica
ndash O pigmento malaacuterico geralmente eacute abundante
Diagnoacutestico - Pmalariae
bull Realizado por meio de caracteriacutesticas morfoloacutegicas do parasito
ndash Verificaccedilatildeo em esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado
ndash Posiccedilatildeo equatorial do parasito
ndash Desenvolvimento sem deformaccedilatildeo do eritroacutecito
Diagnoacutestico
bull QBC ndash Teacutecnica que combina concentraccedilatildeo dos parasitos
pela centrifugaccedilatildeo do sangue em em microhematoacutecrito e a coloraccedilatildeo dos aacutecidos nucleacuteicos do parasito pelo fluorcromo laranja de acridina
ndash Utilizaccedilatildeo de tubos especiais e microscopia epifluorescente
ndash Teste raacutepido
ndash Alta sensibilidade
Diagnoacutestico
bull ParaSight-F ( Becton amp Dickinson)
ndash Teste raacutepido para captura da proteiacutena rica em histidina 2 de Pfalciparum( PfHRP2) e enzimas conservadas de 4 espeacutecies de plasmoacutedio (DHL e aldolase
ndash Utilizaccedilatildeo de fita de nitrocelulose contendo ac monoclonal
ndash Lise de uma gota de sangue
ndash A reaccedilatildeo eacute revelada com adiccedilatildeo de ac policlonal anti-HRP2 conjugado com lipossomas contendo corante
Diagnoacutestico
bull PCR
ndash Sensibilidade e especificidade maior do que o esfregaccedilo sanguiacuteneo
Meacutetodo de concentraccedilatildeo
bull Meacutetodo de Strout
ndash Realizar a coleta de sangue em tubo sem anticoagulante
ndash Aguardar a retraccedilatildeo do coaacutegulo Os parasitas concentrar-se-atildeo no soro a medida que ocorrer a retraccedilatildeo do coaacutegulo
ndash O soro eacute centrifugado para anaacutelise do sedimento
Inoculaccedilatildeo em animais
bull Inoculaccedilatildeo de sangue ou creme leucocitaacuterio em camundongos jovens
bull Inoculaccedilatildeo intra-peritoneal intra-conjuntival e a via oral
bull Avaliaccedilatildeo das formas de Tcruzi
bull Teacutecnica utilizada em pesquisa
Diagnoacutestico laboratorial Fase crocircnica
bull Xenodiagnoacutestico bull Hemocultura bull Reaccedilatildeo de hemaglutinaccedilatildeo indireta bull RIFI bull ELISA bull PCR bull PaGIA bull LMCo bull Pesquisa de anticorpos antitripomastigotas vivos
Hemocultura
bull Meio LIT ndash Liver Infusion Triptose
bull Meio NNN ndash McNeal Novy e Nicolle
bull Utilizaccedilatildeo de 30ml de sangue heparinizado
bull Centrifugaccedilatildeo por 30 minutos em 3000 rpm
bull Despreza-se o plasma e o sedimento celular eacute lavado com meio LIT ( Liver Infusion Triptose) para eliminaccedilatildeo de possiacuteveis anticorpos
Hemocultura
bull Sedimento distribuiacutedo em 6 tubos com 5 ml de LIT
bull Os tubos satildeo mantidos a 28degC homogeneizados 3x semana e avaliados quinzenalmente ateacute 90 dias
bull Centrifugaccedilatildeo e avaliaccedilatildeo do sedimento de hemaacutecias
bull Leitura realizada pela observaccedilatildeo microscoacutepica de gotas do meio
bull Aumento da positividade para sangue processado imediatamente apoacutes a coleta cultivado em prazo de tempo maior (120 dias) e repeticcedilatildeo da teacutecnica por 3 vezes
Wuchereria bancrofti
Taxonomia
bull Reino Animalia
bull Filo Nematoda
bull Classe Secernentea
bull Ordem Filariidea
bull Superfamiacutelia Filarioidea
bull FamiacuteliaOnchocercidae
bull GecircnerosWuchereria
bull Espeacutecie Wbancrofti
Formas evolutivas
bull Heteroxecircnico
bull Hospedeiro vertebrado homem
bull Hospedeiro intermediaacuterio Culex quinquefasciatus
bull Formas evolutivas ndash HV verme adulto (fecircmea e macho) localizados nos
vasos e gacircnglios linfaacuteticos da regiatildeo abdominal peacutelvica (perna e escroto) mamas e braccedilo
ndash microfilaacuterias eliminadas pelas fecircmeas graacutevidas Saem dos ductos linfaacuteticos e atingem circulaccedilatildeo sanguiacutenea
ndash HI larva L1 L2 e L3 (infectante)
Culex quinquefasciatus
Morfologia
bull Macho 35 a 4 cm x 01mm com extremidade posterior enrrolada ventralmente
bull Fecircmea 7 a 10cm x 03 mm com vagina exteriorizada em uma vulva localizada proacutexima agrave extremidade anterior
bull Microfilaacuteria Presenccedila de bainha e estilete bucal na parte anterior que as diferencia de outros filariacutedeos sanguiacuteneos Possuem 250 a 300 microm e uma grande qtde de nuacutecleos
bull Larva L3 possui aproximadamente 15 a 20 mm de comprimento
Microfilaacuteria
Ciclo evolutivo
bull Fecircmea do inseto realiza o hematofagismo noturno e ingere as microfilaacuterias
bull Estocircmago do vetor microfilaacuterias perdem a bainha atravessam a parede do estocircmago e migram para os muacutesculos toraacutecicos ndash L1
bull Apoacutes 20 dias a larva estaacute na forma infectante L3 medindo aproximadamente 2mm
bull Migraccedilatildeo da larva para a proboacutescida concentrando-se no laacutebio do moquito
Microfilaacuteria Presenccedila de bainha Cauda pontuda com nuacutecleos grandes largos e bem separados Nuacutecleos caudais em fila uacutenica
Ciclo evolutivo
bull Repasto sanguiacuteneo do inseto infectado
ndash As larvas L3 migram do laacutebio do vetor para a pele do HV
ndash Migram para os vasos linfaacuteticos e tornam-se vermes adultos
ndash Apoacutes 8 meses as fecircmeas graacutevidas produzem as primeiras microfilaacuterias
Periodicidade
bull Periodicidade noturna das microfilaacuterias
ndash Durante o dia localizam-se nos capilares profundos
ndash Durante a noite vasos sanguiacuteneos perifeacutericos
ndash Pico da microfilaremia meia-noite coincidindo com o horaacuterio de hematofagismo do inseto transmissor
Patologia
bull Periacuteodo assintomaacutetico bull Fase aguda bull Processos inflamatoacuterios produzidos por larvas L4 e adultos jovens
que colonizam as vias linfaacuteticas ndash Linfadenites linfonodos inguinais epitrocleanos e axilares com
desenvolvimento de granulomas com calcificaccedilatildeo apoacutes a morte dos vermes
ndash Linfangite inflamaccedilatildeo e dilataccedilatildeo dos vasos linfaacuteticos ndash Febre mal estar ndash Funiculite filariana linfangite do cordatildeo espermaacutetico e varicocele
bull Fase crocircnica ndash Hidrocele ndash Linfedema ndash Quiluacuteria ndash Elefantiacutease
Quiluacuteria
Patologia
bull Processos obstrutivos ndash Formaccedilatildeo de novelos envolvidos por reaccedilatildeo
inflamatoacuteria e pela formaccedilatildeo de fibrose
ndash Estase e congestatildeo da linfa produzindo linfoedema tecidual
ndash Extravasamento produzindo derrame linfaacutetico ascite linfaacutetica linfuacuteria linforreacuteia linfotoacuterax linfocele etc
ndash A ruptura de vasos linfaacuteticos para o interior do sistema excretor urinaacuterio daacute origem agrave quiluacuteria
Patologia
bull Complicaccedilotildees associadas agrave filariose
ndash Elefantiacutease
bull Caracterizada por processo inflamatoacuterio e fibrose crocircnica do oacutergatildeo atingido
bull Hipertrofia da derme do tecido conjuntivo aumento exagerado do volume do oacutergatildeo com queratinizaccedilatildeo e rugosidade
bull A pele perde a elasticidade resseca e se torna sujeita a infecccedilotildees bacterianas
Patologia
bull Permanecimento na aacuterea endecircmica
bull Nuacutemero de larvas inoculadas
bull Frequecircncia das re-infecccedilotildees
bull O nuacutemero de acasalamento dos vermes e suas localizaccedilotildees anatocircmicas
bull A sensibilizaccedilatildeo do organismo e a intensidade das reaccedilotildees inflamatoacuterias do paciente
bull As infecccedilotildees bacterianas associadas
Diagnoacutestico
bull Pesquisa de microfilaacuterias no sangue perifeacuterico ndash 20 40 ou 60 microL- de preferecircncia entre as 10 h da noite e 4h da manhatilde
ndash Gota espessa Coloraccedilatildeo de Giemsa
ndash Meacutetodos de concentraccedilatildeo Filtraccedilatildeo em membrana de policarbonato milipore ou nucleopore
ndash Meacutetodo de Knott
bull Na fase crocircnica as microfilaacuterias raramente satildeo detectadas no sangue perifeacuterico
Gota espessa
bull Possibilita a visualizaccedilatildeo da bainha fato que difere a microfilaria de W bancrofti de outro filariacutedeos sanguiacuteneos
bull Apresenta um baixo custo em comparaccedilatildeo com outras mais avanccediladas como a filtraccedilatildeo de sangue em membrana de policarbonato
bull Possui baixa sensibilidade natildeo indicada em situaccedilotildees em que os parasitados se mostram com baixa microfilaremia ou amicrofilarecircmicos
Concentraccedilatildeo
bull Baseia-se na passagem de sangue venoso atraveacutes de uma membrana (Milipore ou Nuclepore) de diacircmetro de 13 a 25 mm e poros de 5 ou 3 μm
bull O material retido na membrana sendo fixado corado e observado ao microscoacutepio
bull Essa teacutecnica assim como a de Knott permite a identificaccedilatildeo de indiviacuteduos com baixiacutessimas parasitemias (quantidade de microfilarias natildeo detectaacuteveis pela teacutecnica de gota espessa)
Teacutecnica de Knott
bull Retirar 2 ml de sangue total por punccedilatildeo venosa e colocar imediatamente em um tubo contendo 10 ml de formol a 2
bull Fechar o tubo e misture completamente invertendo-o e agitando-o O formol hemolisa as hemaacutecias mata fixa e distende as microfilaacuterias
bull Centrifugar o sangue a 1500 rpm por 5 minutos
bull Decantar o sobrenadante
Teacutecnica de Knott
bull Retirar o sedimento com uma pipeta Pasteur e espalhar a gota espessa sobre uma lacircmina
bull Deixar secar bem e corar com Giemsa
bull Examinar com objetiva de imersatildeo
bull Esta teacutecnica possibilita que o exame microscoacutepico laboratorial seja realizado vaacuterios dias apoacutes a coleta de material realizada no campo
Exames de imagem
bull Ultranossografia
ndash Possibilidade de visualizar os movimentos de vermes adultos vivos de W bancrofti em vaso linfaacutetico especificamente em vasos intraescrotais do cordatildeo espermaacutetico
ndash O movimento ativo e ininterrupto dos vermes adultos durante as 24 horas do dia eacute denominado sinal da ldquodanccedila das filaacuteriasrdquo
Diagnoacutestico soroloacutegico
bull Teste imunocromatograacutefico desenvolvido pelo ICT Diagnostic - ICT card
ndash Teste qualilativo
ndash Cartatildeo possui ac de antifilaacuteria e o controle eacute formado por ac anti Ig G humano
Plasmodium spp
Taxonomia
bull Reino Protozoa
bull FiloApicomplexa
bull Classe Sporozoea
bull Ordem Hemosporidiida
bull Famiacutelia Plasmodiidae
bull Gecircneros Plasmodium
bull Espeacutecie Pfalciparum Pvivax Povale e Pmalariae
Plasmodium
bull Ciclo bioloacutegico Hospedeiro vertebrado e invertebrado
bull Hospedeiro invertebrado ndash Vetor
ndash Fecircmeas hematoacutefagas do gecircnero Anopheles
ndash Brasil Anopheles (N)darlingi A (N) aquasalis A (N) albitarsis A (K) cruzii e A (K) bellator
ndash Possuem haacutebito noturno penetrando nas casas no crespuacutesculo saindo ao amanhecer
Plasmodium
bull Hospedeiro vertebrado homem
bull Transmissatildeo
ndash Vetor
ndash Transfusatildeo de sangue
ndash Compartilhamento de seringas
ndash Acidente com agulhas
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
bull Ciclo preacute-eritrociacutetico
ndash Forma inoculada esporozoiacutetos
ndash A fecircmea do anofelino infectado inocula no homem as formas infectantes localizadas na saliva
ndash Os esporozoiacutetas permancem na circulaccedilatildeo por aproximadamente uma hora
ndash Invadem os hepatoacutecitos e se diferenciam em trofozoiacutetas (criptozoiacuteto)
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
ndash Esquizogonia e formaccedilatildeo de esquizontes
ndash Divisatildeo nuclear e liberaccedilatildeo de merozoiacutetos
ndash Aproximadamente 10000 merozoiacutetos por hepatoacutecito
ndash Rompimento do hepatoacutecito e liberaccedilatildeo de merozoiacutetos na circulaccedilatildeo
ndash Duraccedilatildeo do ciclo aprox 1 a 2 semanas
Ciclo evolutivo
bull PVivax e Povale
ndash Alguns esporozoiacutetos geneticamente diferentes ficam na forma latente nos hepatoacutecitos permanecendo muitos meses Satildeo classificados como hipnozoiacuteto
ndash Satildeo responsaacuteveis pelas recaiacutedas tardias e formas de malaacuteria com periacuteodo de encubaccedilatildeo longo ndash 6 a 9 meses
FASE HEPAacuteTICA OU EXOERITROCIacuteTICA
Hepatoacutecito
FIacuteGADO
Invasatildeo do hepatoacutecito
Reproduccedilatildeo Assexuada
Esporozoiacutetos Lise dos hepatoacutecitos
Liberaccedilatildeo dos protozoaacuterios na corrente sanguumliacutenea
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
bull Ciclo eritrociacutetico
ndash Os merozoiacutetos invadem as hemaacutecias
ndash Diferenciaccedilatildeo em trofozoiacutetos
ndash Esquizogonia esquizonte
ndash Produccedilatildeo de merozoiacutetos e rompimento da hemaacutecia
ndash Merozoiacutetos invasatildeo de novas hemaacutecias
ndash Apoacutes algumas geraccedilotildees os merozoiacutetos natildeo mais se dividem e se diferenciam em gametoacutecitos ndash micro e macrogametoacutecito
FASE ERITROCIacuteTICA
Hepatoacutecito destruiacutedo pelos protozoaacuterios
Penetraccedilatildeo dos protozoaacuterios
Reproduccedilatildeo assexuada
Protozoaacuterios destroem as hemaacutecias
Diferenciaccedilatildeo em gametoacutecitos
Fecircmeas de Anopheles sugam hemaacutecias com gametoacutecitos
Ciclo no hospedeiro invertebrado
Ocorre nas hemaacutecias ou Eritroacutecitos
nas hemaacutecias
Protozoaacuterio no interior da hemaacutecia
Hemaacutecia com gametoacutecito
T trofozoiacuteto Em esquizonte com merozoiacuteto
Fase eritrociacutetica
bull Ciclo sanguiacuteneo ndash Pfalciparum P vivax e Povale 48 horas
ndash Pmalariae 72 horas
ndash Fonte de nutriccedilatildeo do Plasmodium no ciclo sanguiacuteneo hemoglobina
ndash Produccedilatildeo do pigmento malaacuterico hemozoiacutena bull Granulaccedilotildees de Schuffner Plasmodium vivax
bull Granulaccedilotildees de Maurer P falciparum
bull Granulaccedilotildees de Ziemann P malariae
ndash Fagocitose pelas ceacutelulas de Kuppffer e macroacutefagos do baccedilo
Trofozoiacutetos Pfalciparum
Trofozoiacutetos Pfalciparum
Esquizonte ndash P falciparum
Raros no sangue perifeacuterico Possuem 2 a 24 merozoiacutetos
Ocupam 23 do gloacutebulo vermelho
Gametoacutecitos Pfalciparum
Ciclo evolutivo Pvivax
Esquizonte ndash P vivax
Satildeo grandes e ameboacuteides Cromatina organizada em duas ou mais massas
Possuem 2 a 24 merozoiacutetos com pontos de cromatina
Gametoacutecito ndash Pvivax
Macrogametoacutecitos satildeo redondos ou ovais e ocupam toda ceacutelula hospedeira O citoplasma eacute geralmente corado de azul mais escuro e conteacutem pigmento marrom Microgametoacutecitos satildeo geralmente do tamanho de um RBC natildeo infectados com citoplasma corados de azul paacutelido rosa ou cinza
Trofozoiacutetos - P malariae
Esquizontes ndash P malariae
Aproximadamente 6 a 12 merozoiacutetos com arranjo de rosetas
Gametoacutecitos ndash P malariae
Ciclo evolutivo ndash HI
bull Ingestatildeo de hemaacutecias contendo gametoacutecitos durante o repasto sanguiacuteneo da fecircmea do anofelino
bull No intestino meacutedio do vetor gametogecircnese ndash Macrogametoacutecito ndash macrogameta feminino ndash Microgametoacutecito o processo de exflagelaccedilatildeo daacute
origem a 8 microgametas masculinos ndash Produccedilatildeo de ovo ou zigoto ndash O ovo encista na camada epitelial do intestino meacutedio
oocisto ndash Esporogonia liberaccedilatildeo de esporozoiacutetos
Ciclo evolutivo ndash HInvertebrado
ndash Os esporozoiacutetos satildeo transportados pelo hemolinfa ateacute as glacircndulas salivares do vetor ateacute atingirem o ducto salivar
bull Inoculaccedilatildeo no hospedeiro vertebrado atraveacutes da picada do inseto
Hemaacutecia com gametoacutecito
Fecircmeas de Anopheles sugam hemaacutecias com gametoacutecitos
CICLO NO INVERTEBRADO
No tubo digestivo
Zigoto
Penetraccedilatildeo na parede do tubo
digestivo
Migraccedilatildeo para as glacircndulas salivares
Desenvolvimento
Mosquito infectado
Diagnoacutestico
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado e espesso corado pelo Giemsa
bull Sangue colhido sem anticoagulante para melhor fixaccedilatildeo em lacircmina
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo espesso eacute mais eficiente para detecccedilatildeo da infecccedilatildeo
bull Esfregaccedilo delgado eacute mais eficiente para diferenciaccedilatildeo morfoloacutegica das espeacutecies
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo semiquantitativo
ndash Exame de 100 campos microscoacutepicos com resultado expresso pelo sistema de cruzes
Parasitos contados Nuacutemero de campos
microscoacutepicos cruzes
40 a 60 100 +2
1 1 +
2-20 1 ++
21-200 1 +++
+ 200 1 ++++
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo quantitativo derivado de anaacutelise semiquantitativa
Contagem de parasitos por campo
Cruzes Parasitos por mm3
40 a 60100 +2 200-300
1 + 301-500
2-20 ++ 501 - 10000
21-200 +++ 10001 ndash 100000
+ 200 ++++ 100000 ou mais
Diagnoacutestico
bull P falciparum
ndash Parte do ciclo celular aderido ao endoteacutelio capilar Encontro somente de trofozoitos e gametoacutecitos no sangue perifeacuterico
ndash Raramente os esquizontes satildeo encontrados no sangue perifeacuterico
Diagnoacutestico ndash Pvivax ndash Encontro de todas as formas de desenvolvimento ndash
trofozoiacuteto jovem maduro esquizontes e gametoacutecitos
ndash Os trofozoiacutetos maduros tecircm geralmente um aspecto irregular com extensotildees ameboacuteides em seu citoplasma
Diagnoacutestico ndash Pvivax
ndash Os gametoacutecitos femininos coram-se mais intensamente que os masculinos e apresentam nuacutecleo mais compacto geralmente em localizaccedilatildeo perifeacuterica
ndash O pigmento malaacuterico geralmente eacute abundante
Diagnoacutestico - Pmalariae
bull Realizado por meio de caracteriacutesticas morfoloacutegicas do parasito
ndash Verificaccedilatildeo em esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado
ndash Posiccedilatildeo equatorial do parasito
ndash Desenvolvimento sem deformaccedilatildeo do eritroacutecito
Diagnoacutestico
bull QBC ndash Teacutecnica que combina concentraccedilatildeo dos parasitos
pela centrifugaccedilatildeo do sangue em em microhematoacutecrito e a coloraccedilatildeo dos aacutecidos nucleacuteicos do parasito pelo fluorcromo laranja de acridina
ndash Utilizaccedilatildeo de tubos especiais e microscopia epifluorescente
ndash Teste raacutepido
ndash Alta sensibilidade
Diagnoacutestico
bull ParaSight-F ( Becton amp Dickinson)
ndash Teste raacutepido para captura da proteiacutena rica em histidina 2 de Pfalciparum( PfHRP2) e enzimas conservadas de 4 espeacutecies de plasmoacutedio (DHL e aldolase
ndash Utilizaccedilatildeo de fita de nitrocelulose contendo ac monoclonal
ndash Lise de uma gota de sangue
ndash A reaccedilatildeo eacute revelada com adiccedilatildeo de ac policlonal anti-HRP2 conjugado com lipossomas contendo corante
Diagnoacutestico
bull PCR
ndash Sensibilidade e especificidade maior do que o esfregaccedilo sanguiacuteneo
Inoculaccedilatildeo em animais
bull Inoculaccedilatildeo de sangue ou creme leucocitaacuterio em camundongos jovens
bull Inoculaccedilatildeo intra-peritoneal intra-conjuntival e a via oral
bull Avaliaccedilatildeo das formas de Tcruzi
bull Teacutecnica utilizada em pesquisa
Diagnoacutestico laboratorial Fase crocircnica
bull Xenodiagnoacutestico bull Hemocultura bull Reaccedilatildeo de hemaglutinaccedilatildeo indireta bull RIFI bull ELISA bull PCR bull PaGIA bull LMCo bull Pesquisa de anticorpos antitripomastigotas vivos
Hemocultura
bull Meio LIT ndash Liver Infusion Triptose
bull Meio NNN ndash McNeal Novy e Nicolle
bull Utilizaccedilatildeo de 30ml de sangue heparinizado
bull Centrifugaccedilatildeo por 30 minutos em 3000 rpm
bull Despreza-se o plasma e o sedimento celular eacute lavado com meio LIT ( Liver Infusion Triptose) para eliminaccedilatildeo de possiacuteveis anticorpos
Hemocultura
bull Sedimento distribuiacutedo em 6 tubos com 5 ml de LIT
bull Os tubos satildeo mantidos a 28degC homogeneizados 3x semana e avaliados quinzenalmente ateacute 90 dias
bull Centrifugaccedilatildeo e avaliaccedilatildeo do sedimento de hemaacutecias
bull Leitura realizada pela observaccedilatildeo microscoacutepica de gotas do meio
bull Aumento da positividade para sangue processado imediatamente apoacutes a coleta cultivado em prazo de tempo maior (120 dias) e repeticcedilatildeo da teacutecnica por 3 vezes
Wuchereria bancrofti
Taxonomia
bull Reino Animalia
bull Filo Nematoda
bull Classe Secernentea
bull Ordem Filariidea
bull Superfamiacutelia Filarioidea
bull FamiacuteliaOnchocercidae
bull GecircnerosWuchereria
bull Espeacutecie Wbancrofti
Formas evolutivas
bull Heteroxecircnico
bull Hospedeiro vertebrado homem
bull Hospedeiro intermediaacuterio Culex quinquefasciatus
bull Formas evolutivas ndash HV verme adulto (fecircmea e macho) localizados nos
vasos e gacircnglios linfaacuteticos da regiatildeo abdominal peacutelvica (perna e escroto) mamas e braccedilo
ndash microfilaacuterias eliminadas pelas fecircmeas graacutevidas Saem dos ductos linfaacuteticos e atingem circulaccedilatildeo sanguiacutenea
ndash HI larva L1 L2 e L3 (infectante)
Culex quinquefasciatus
Morfologia
bull Macho 35 a 4 cm x 01mm com extremidade posterior enrrolada ventralmente
bull Fecircmea 7 a 10cm x 03 mm com vagina exteriorizada em uma vulva localizada proacutexima agrave extremidade anterior
bull Microfilaacuteria Presenccedila de bainha e estilete bucal na parte anterior que as diferencia de outros filariacutedeos sanguiacuteneos Possuem 250 a 300 microm e uma grande qtde de nuacutecleos
bull Larva L3 possui aproximadamente 15 a 20 mm de comprimento
Microfilaacuteria
Ciclo evolutivo
bull Fecircmea do inseto realiza o hematofagismo noturno e ingere as microfilaacuterias
bull Estocircmago do vetor microfilaacuterias perdem a bainha atravessam a parede do estocircmago e migram para os muacutesculos toraacutecicos ndash L1
bull Apoacutes 20 dias a larva estaacute na forma infectante L3 medindo aproximadamente 2mm
bull Migraccedilatildeo da larva para a proboacutescida concentrando-se no laacutebio do moquito
Microfilaacuteria Presenccedila de bainha Cauda pontuda com nuacutecleos grandes largos e bem separados Nuacutecleos caudais em fila uacutenica
Ciclo evolutivo
bull Repasto sanguiacuteneo do inseto infectado
ndash As larvas L3 migram do laacutebio do vetor para a pele do HV
ndash Migram para os vasos linfaacuteticos e tornam-se vermes adultos
ndash Apoacutes 8 meses as fecircmeas graacutevidas produzem as primeiras microfilaacuterias
Periodicidade
bull Periodicidade noturna das microfilaacuterias
ndash Durante o dia localizam-se nos capilares profundos
ndash Durante a noite vasos sanguiacuteneos perifeacutericos
ndash Pico da microfilaremia meia-noite coincidindo com o horaacuterio de hematofagismo do inseto transmissor
Patologia
bull Periacuteodo assintomaacutetico bull Fase aguda bull Processos inflamatoacuterios produzidos por larvas L4 e adultos jovens
que colonizam as vias linfaacuteticas ndash Linfadenites linfonodos inguinais epitrocleanos e axilares com
desenvolvimento de granulomas com calcificaccedilatildeo apoacutes a morte dos vermes
ndash Linfangite inflamaccedilatildeo e dilataccedilatildeo dos vasos linfaacuteticos ndash Febre mal estar ndash Funiculite filariana linfangite do cordatildeo espermaacutetico e varicocele
bull Fase crocircnica ndash Hidrocele ndash Linfedema ndash Quiluacuteria ndash Elefantiacutease
Quiluacuteria
Patologia
bull Processos obstrutivos ndash Formaccedilatildeo de novelos envolvidos por reaccedilatildeo
inflamatoacuteria e pela formaccedilatildeo de fibrose
ndash Estase e congestatildeo da linfa produzindo linfoedema tecidual
ndash Extravasamento produzindo derrame linfaacutetico ascite linfaacutetica linfuacuteria linforreacuteia linfotoacuterax linfocele etc
ndash A ruptura de vasos linfaacuteticos para o interior do sistema excretor urinaacuterio daacute origem agrave quiluacuteria
Patologia
bull Complicaccedilotildees associadas agrave filariose
ndash Elefantiacutease
bull Caracterizada por processo inflamatoacuterio e fibrose crocircnica do oacutergatildeo atingido
bull Hipertrofia da derme do tecido conjuntivo aumento exagerado do volume do oacutergatildeo com queratinizaccedilatildeo e rugosidade
bull A pele perde a elasticidade resseca e se torna sujeita a infecccedilotildees bacterianas
Patologia
bull Permanecimento na aacuterea endecircmica
bull Nuacutemero de larvas inoculadas
bull Frequecircncia das re-infecccedilotildees
bull O nuacutemero de acasalamento dos vermes e suas localizaccedilotildees anatocircmicas
bull A sensibilizaccedilatildeo do organismo e a intensidade das reaccedilotildees inflamatoacuterias do paciente
bull As infecccedilotildees bacterianas associadas
Diagnoacutestico
bull Pesquisa de microfilaacuterias no sangue perifeacuterico ndash 20 40 ou 60 microL- de preferecircncia entre as 10 h da noite e 4h da manhatilde
ndash Gota espessa Coloraccedilatildeo de Giemsa
ndash Meacutetodos de concentraccedilatildeo Filtraccedilatildeo em membrana de policarbonato milipore ou nucleopore
ndash Meacutetodo de Knott
bull Na fase crocircnica as microfilaacuterias raramente satildeo detectadas no sangue perifeacuterico
Gota espessa
bull Possibilita a visualizaccedilatildeo da bainha fato que difere a microfilaria de W bancrofti de outro filariacutedeos sanguiacuteneos
bull Apresenta um baixo custo em comparaccedilatildeo com outras mais avanccediladas como a filtraccedilatildeo de sangue em membrana de policarbonato
bull Possui baixa sensibilidade natildeo indicada em situaccedilotildees em que os parasitados se mostram com baixa microfilaremia ou amicrofilarecircmicos
Concentraccedilatildeo
bull Baseia-se na passagem de sangue venoso atraveacutes de uma membrana (Milipore ou Nuclepore) de diacircmetro de 13 a 25 mm e poros de 5 ou 3 μm
bull O material retido na membrana sendo fixado corado e observado ao microscoacutepio
bull Essa teacutecnica assim como a de Knott permite a identificaccedilatildeo de indiviacuteduos com baixiacutessimas parasitemias (quantidade de microfilarias natildeo detectaacuteveis pela teacutecnica de gota espessa)
Teacutecnica de Knott
bull Retirar 2 ml de sangue total por punccedilatildeo venosa e colocar imediatamente em um tubo contendo 10 ml de formol a 2
bull Fechar o tubo e misture completamente invertendo-o e agitando-o O formol hemolisa as hemaacutecias mata fixa e distende as microfilaacuterias
bull Centrifugar o sangue a 1500 rpm por 5 minutos
bull Decantar o sobrenadante
Teacutecnica de Knott
bull Retirar o sedimento com uma pipeta Pasteur e espalhar a gota espessa sobre uma lacircmina
bull Deixar secar bem e corar com Giemsa
bull Examinar com objetiva de imersatildeo
bull Esta teacutecnica possibilita que o exame microscoacutepico laboratorial seja realizado vaacuterios dias apoacutes a coleta de material realizada no campo
Exames de imagem
bull Ultranossografia
ndash Possibilidade de visualizar os movimentos de vermes adultos vivos de W bancrofti em vaso linfaacutetico especificamente em vasos intraescrotais do cordatildeo espermaacutetico
ndash O movimento ativo e ininterrupto dos vermes adultos durante as 24 horas do dia eacute denominado sinal da ldquodanccedila das filaacuteriasrdquo
Diagnoacutestico soroloacutegico
bull Teste imunocromatograacutefico desenvolvido pelo ICT Diagnostic - ICT card
ndash Teste qualilativo
ndash Cartatildeo possui ac de antifilaacuteria e o controle eacute formado por ac anti Ig G humano
Plasmodium spp
Taxonomia
bull Reino Protozoa
bull FiloApicomplexa
bull Classe Sporozoea
bull Ordem Hemosporidiida
bull Famiacutelia Plasmodiidae
bull Gecircneros Plasmodium
bull Espeacutecie Pfalciparum Pvivax Povale e Pmalariae
Plasmodium
bull Ciclo bioloacutegico Hospedeiro vertebrado e invertebrado
bull Hospedeiro invertebrado ndash Vetor
ndash Fecircmeas hematoacutefagas do gecircnero Anopheles
ndash Brasil Anopheles (N)darlingi A (N) aquasalis A (N) albitarsis A (K) cruzii e A (K) bellator
ndash Possuem haacutebito noturno penetrando nas casas no crespuacutesculo saindo ao amanhecer
Plasmodium
bull Hospedeiro vertebrado homem
bull Transmissatildeo
ndash Vetor
ndash Transfusatildeo de sangue
ndash Compartilhamento de seringas
ndash Acidente com agulhas
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
bull Ciclo preacute-eritrociacutetico
ndash Forma inoculada esporozoiacutetos
ndash A fecircmea do anofelino infectado inocula no homem as formas infectantes localizadas na saliva
ndash Os esporozoiacutetas permancem na circulaccedilatildeo por aproximadamente uma hora
ndash Invadem os hepatoacutecitos e se diferenciam em trofozoiacutetas (criptozoiacuteto)
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
ndash Esquizogonia e formaccedilatildeo de esquizontes
ndash Divisatildeo nuclear e liberaccedilatildeo de merozoiacutetos
ndash Aproximadamente 10000 merozoiacutetos por hepatoacutecito
ndash Rompimento do hepatoacutecito e liberaccedilatildeo de merozoiacutetos na circulaccedilatildeo
ndash Duraccedilatildeo do ciclo aprox 1 a 2 semanas
Ciclo evolutivo
bull PVivax e Povale
ndash Alguns esporozoiacutetos geneticamente diferentes ficam na forma latente nos hepatoacutecitos permanecendo muitos meses Satildeo classificados como hipnozoiacuteto
ndash Satildeo responsaacuteveis pelas recaiacutedas tardias e formas de malaacuteria com periacuteodo de encubaccedilatildeo longo ndash 6 a 9 meses
FASE HEPAacuteTICA OU EXOERITROCIacuteTICA
Hepatoacutecito
FIacuteGADO
Invasatildeo do hepatoacutecito
Reproduccedilatildeo Assexuada
Esporozoiacutetos Lise dos hepatoacutecitos
Liberaccedilatildeo dos protozoaacuterios na corrente sanguumliacutenea
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
bull Ciclo eritrociacutetico
ndash Os merozoiacutetos invadem as hemaacutecias
ndash Diferenciaccedilatildeo em trofozoiacutetos
ndash Esquizogonia esquizonte
ndash Produccedilatildeo de merozoiacutetos e rompimento da hemaacutecia
ndash Merozoiacutetos invasatildeo de novas hemaacutecias
ndash Apoacutes algumas geraccedilotildees os merozoiacutetos natildeo mais se dividem e se diferenciam em gametoacutecitos ndash micro e macrogametoacutecito
FASE ERITROCIacuteTICA
Hepatoacutecito destruiacutedo pelos protozoaacuterios
Penetraccedilatildeo dos protozoaacuterios
Reproduccedilatildeo assexuada
Protozoaacuterios destroem as hemaacutecias
Diferenciaccedilatildeo em gametoacutecitos
Fecircmeas de Anopheles sugam hemaacutecias com gametoacutecitos
Ciclo no hospedeiro invertebrado
Ocorre nas hemaacutecias ou Eritroacutecitos
nas hemaacutecias
Protozoaacuterio no interior da hemaacutecia
Hemaacutecia com gametoacutecito
T trofozoiacuteto Em esquizonte com merozoiacuteto
Fase eritrociacutetica
bull Ciclo sanguiacuteneo ndash Pfalciparum P vivax e Povale 48 horas
ndash Pmalariae 72 horas
ndash Fonte de nutriccedilatildeo do Plasmodium no ciclo sanguiacuteneo hemoglobina
ndash Produccedilatildeo do pigmento malaacuterico hemozoiacutena bull Granulaccedilotildees de Schuffner Plasmodium vivax
bull Granulaccedilotildees de Maurer P falciparum
bull Granulaccedilotildees de Ziemann P malariae
ndash Fagocitose pelas ceacutelulas de Kuppffer e macroacutefagos do baccedilo
Trofozoiacutetos Pfalciparum
Trofozoiacutetos Pfalciparum
Esquizonte ndash P falciparum
Raros no sangue perifeacuterico Possuem 2 a 24 merozoiacutetos
Ocupam 23 do gloacutebulo vermelho
Gametoacutecitos Pfalciparum
Ciclo evolutivo Pvivax
Esquizonte ndash P vivax
Satildeo grandes e ameboacuteides Cromatina organizada em duas ou mais massas
Possuem 2 a 24 merozoiacutetos com pontos de cromatina
Gametoacutecito ndash Pvivax
Macrogametoacutecitos satildeo redondos ou ovais e ocupam toda ceacutelula hospedeira O citoplasma eacute geralmente corado de azul mais escuro e conteacutem pigmento marrom Microgametoacutecitos satildeo geralmente do tamanho de um RBC natildeo infectados com citoplasma corados de azul paacutelido rosa ou cinza
Trofozoiacutetos - P malariae
Esquizontes ndash P malariae
Aproximadamente 6 a 12 merozoiacutetos com arranjo de rosetas
Gametoacutecitos ndash P malariae
Ciclo evolutivo ndash HI
bull Ingestatildeo de hemaacutecias contendo gametoacutecitos durante o repasto sanguiacuteneo da fecircmea do anofelino
bull No intestino meacutedio do vetor gametogecircnese ndash Macrogametoacutecito ndash macrogameta feminino ndash Microgametoacutecito o processo de exflagelaccedilatildeo daacute
origem a 8 microgametas masculinos ndash Produccedilatildeo de ovo ou zigoto ndash O ovo encista na camada epitelial do intestino meacutedio
oocisto ndash Esporogonia liberaccedilatildeo de esporozoiacutetos
Ciclo evolutivo ndash HInvertebrado
ndash Os esporozoiacutetos satildeo transportados pelo hemolinfa ateacute as glacircndulas salivares do vetor ateacute atingirem o ducto salivar
bull Inoculaccedilatildeo no hospedeiro vertebrado atraveacutes da picada do inseto
Hemaacutecia com gametoacutecito
Fecircmeas de Anopheles sugam hemaacutecias com gametoacutecitos
CICLO NO INVERTEBRADO
No tubo digestivo
Zigoto
Penetraccedilatildeo na parede do tubo
digestivo
Migraccedilatildeo para as glacircndulas salivares
Desenvolvimento
Mosquito infectado
Diagnoacutestico
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado e espesso corado pelo Giemsa
bull Sangue colhido sem anticoagulante para melhor fixaccedilatildeo em lacircmina
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo espesso eacute mais eficiente para detecccedilatildeo da infecccedilatildeo
bull Esfregaccedilo delgado eacute mais eficiente para diferenciaccedilatildeo morfoloacutegica das espeacutecies
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo semiquantitativo
ndash Exame de 100 campos microscoacutepicos com resultado expresso pelo sistema de cruzes
Parasitos contados Nuacutemero de campos
microscoacutepicos cruzes
40 a 60 100 +2
1 1 +
2-20 1 ++
21-200 1 +++
+ 200 1 ++++
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo quantitativo derivado de anaacutelise semiquantitativa
Contagem de parasitos por campo
Cruzes Parasitos por mm3
40 a 60100 +2 200-300
1 + 301-500
2-20 ++ 501 - 10000
21-200 +++ 10001 ndash 100000
+ 200 ++++ 100000 ou mais
Diagnoacutestico
bull P falciparum
ndash Parte do ciclo celular aderido ao endoteacutelio capilar Encontro somente de trofozoitos e gametoacutecitos no sangue perifeacuterico
ndash Raramente os esquizontes satildeo encontrados no sangue perifeacuterico
Diagnoacutestico ndash Pvivax ndash Encontro de todas as formas de desenvolvimento ndash
trofozoiacuteto jovem maduro esquizontes e gametoacutecitos
ndash Os trofozoiacutetos maduros tecircm geralmente um aspecto irregular com extensotildees ameboacuteides em seu citoplasma
Diagnoacutestico ndash Pvivax
ndash Os gametoacutecitos femininos coram-se mais intensamente que os masculinos e apresentam nuacutecleo mais compacto geralmente em localizaccedilatildeo perifeacuterica
ndash O pigmento malaacuterico geralmente eacute abundante
Diagnoacutestico - Pmalariae
bull Realizado por meio de caracteriacutesticas morfoloacutegicas do parasito
ndash Verificaccedilatildeo em esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado
ndash Posiccedilatildeo equatorial do parasito
ndash Desenvolvimento sem deformaccedilatildeo do eritroacutecito
Diagnoacutestico
bull QBC ndash Teacutecnica que combina concentraccedilatildeo dos parasitos
pela centrifugaccedilatildeo do sangue em em microhematoacutecrito e a coloraccedilatildeo dos aacutecidos nucleacuteicos do parasito pelo fluorcromo laranja de acridina
ndash Utilizaccedilatildeo de tubos especiais e microscopia epifluorescente
ndash Teste raacutepido
ndash Alta sensibilidade
Diagnoacutestico
bull ParaSight-F ( Becton amp Dickinson)
ndash Teste raacutepido para captura da proteiacutena rica em histidina 2 de Pfalciparum( PfHRP2) e enzimas conservadas de 4 espeacutecies de plasmoacutedio (DHL e aldolase
ndash Utilizaccedilatildeo de fita de nitrocelulose contendo ac monoclonal
ndash Lise de uma gota de sangue
ndash A reaccedilatildeo eacute revelada com adiccedilatildeo de ac policlonal anti-HRP2 conjugado com lipossomas contendo corante
Diagnoacutestico
bull PCR
ndash Sensibilidade e especificidade maior do que o esfregaccedilo sanguiacuteneo
Diagnoacutestico laboratorial Fase crocircnica
bull Xenodiagnoacutestico bull Hemocultura bull Reaccedilatildeo de hemaglutinaccedilatildeo indireta bull RIFI bull ELISA bull PCR bull PaGIA bull LMCo bull Pesquisa de anticorpos antitripomastigotas vivos
Hemocultura
bull Meio LIT ndash Liver Infusion Triptose
bull Meio NNN ndash McNeal Novy e Nicolle
bull Utilizaccedilatildeo de 30ml de sangue heparinizado
bull Centrifugaccedilatildeo por 30 minutos em 3000 rpm
bull Despreza-se o plasma e o sedimento celular eacute lavado com meio LIT ( Liver Infusion Triptose) para eliminaccedilatildeo de possiacuteveis anticorpos
Hemocultura
bull Sedimento distribuiacutedo em 6 tubos com 5 ml de LIT
bull Os tubos satildeo mantidos a 28degC homogeneizados 3x semana e avaliados quinzenalmente ateacute 90 dias
bull Centrifugaccedilatildeo e avaliaccedilatildeo do sedimento de hemaacutecias
bull Leitura realizada pela observaccedilatildeo microscoacutepica de gotas do meio
bull Aumento da positividade para sangue processado imediatamente apoacutes a coleta cultivado em prazo de tempo maior (120 dias) e repeticcedilatildeo da teacutecnica por 3 vezes
Wuchereria bancrofti
Taxonomia
bull Reino Animalia
bull Filo Nematoda
bull Classe Secernentea
bull Ordem Filariidea
bull Superfamiacutelia Filarioidea
bull FamiacuteliaOnchocercidae
bull GecircnerosWuchereria
bull Espeacutecie Wbancrofti
Formas evolutivas
bull Heteroxecircnico
bull Hospedeiro vertebrado homem
bull Hospedeiro intermediaacuterio Culex quinquefasciatus
bull Formas evolutivas ndash HV verme adulto (fecircmea e macho) localizados nos
vasos e gacircnglios linfaacuteticos da regiatildeo abdominal peacutelvica (perna e escroto) mamas e braccedilo
ndash microfilaacuterias eliminadas pelas fecircmeas graacutevidas Saem dos ductos linfaacuteticos e atingem circulaccedilatildeo sanguiacutenea
ndash HI larva L1 L2 e L3 (infectante)
Culex quinquefasciatus
Morfologia
bull Macho 35 a 4 cm x 01mm com extremidade posterior enrrolada ventralmente
bull Fecircmea 7 a 10cm x 03 mm com vagina exteriorizada em uma vulva localizada proacutexima agrave extremidade anterior
bull Microfilaacuteria Presenccedila de bainha e estilete bucal na parte anterior que as diferencia de outros filariacutedeos sanguiacuteneos Possuem 250 a 300 microm e uma grande qtde de nuacutecleos
bull Larva L3 possui aproximadamente 15 a 20 mm de comprimento
Microfilaacuteria
Ciclo evolutivo
bull Fecircmea do inseto realiza o hematofagismo noturno e ingere as microfilaacuterias
bull Estocircmago do vetor microfilaacuterias perdem a bainha atravessam a parede do estocircmago e migram para os muacutesculos toraacutecicos ndash L1
bull Apoacutes 20 dias a larva estaacute na forma infectante L3 medindo aproximadamente 2mm
bull Migraccedilatildeo da larva para a proboacutescida concentrando-se no laacutebio do moquito
Microfilaacuteria Presenccedila de bainha Cauda pontuda com nuacutecleos grandes largos e bem separados Nuacutecleos caudais em fila uacutenica
Ciclo evolutivo
bull Repasto sanguiacuteneo do inseto infectado
ndash As larvas L3 migram do laacutebio do vetor para a pele do HV
ndash Migram para os vasos linfaacuteticos e tornam-se vermes adultos
ndash Apoacutes 8 meses as fecircmeas graacutevidas produzem as primeiras microfilaacuterias
Periodicidade
bull Periodicidade noturna das microfilaacuterias
ndash Durante o dia localizam-se nos capilares profundos
ndash Durante a noite vasos sanguiacuteneos perifeacutericos
ndash Pico da microfilaremia meia-noite coincidindo com o horaacuterio de hematofagismo do inseto transmissor
Patologia
bull Periacuteodo assintomaacutetico bull Fase aguda bull Processos inflamatoacuterios produzidos por larvas L4 e adultos jovens
que colonizam as vias linfaacuteticas ndash Linfadenites linfonodos inguinais epitrocleanos e axilares com
desenvolvimento de granulomas com calcificaccedilatildeo apoacutes a morte dos vermes
ndash Linfangite inflamaccedilatildeo e dilataccedilatildeo dos vasos linfaacuteticos ndash Febre mal estar ndash Funiculite filariana linfangite do cordatildeo espermaacutetico e varicocele
bull Fase crocircnica ndash Hidrocele ndash Linfedema ndash Quiluacuteria ndash Elefantiacutease
Quiluacuteria
Patologia
bull Processos obstrutivos ndash Formaccedilatildeo de novelos envolvidos por reaccedilatildeo
inflamatoacuteria e pela formaccedilatildeo de fibrose
ndash Estase e congestatildeo da linfa produzindo linfoedema tecidual
ndash Extravasamento produzindo derrame linfaacutetico ascite linfaacutetica linfuacuteria linforreacuteia linfotoacuterax linfocele etc
ndash A ruptura de vasos linfaacuteticos para o interior do sistema excretor urinaacuterio daacute origem agrave quiluacuteria
Patologia
bull Complicaccedilotildees associadas agrave filariose
ndash Elefantiacutease
bull Caracterizada por processo inflamatoacuterio e fibrose crocircnica do oacutergatildeo atingido
bull Hipertrofia da derme do tecido conjuntivo aumento exagerado do volume do oacutergatildeo com queratinizaccedilatildeo e rugosidade
bull A pele perde a elasticidade resseca e se torna sujeita a infecccedilotildees bacterianas
Patologia
bull Permanecimento na aacuterea endecircmica
bull Nuacutemero de larvas inoculadas
bull Frequecircncia das re-infecccedilotildees
bull O nuacutemero de acasalamento dos vermes e suas localizaccedilotildees anatocircmicas
bull A sensibilizaccedilatildeo do organismo e a intensidade das reaccedilotildees inflamatoacuterias do paciente
bull As infecccedilotildees bacterianas associadas
Diagnoacutestico
bull Pesquisa de microfilaacuterias no sangue perifeacuterico ndash 20 40 ou 60 microL- de preferecircncia entre as 10 h da noite e 4h da manhatilde
ndash Gota espessa Coloraccedilatildeo de Giemsa
ndash Meacutetodos de concentraccedilatildeo Filtraccedilatildeo em membrana de policarbonato milipore ou nucleopore
ndash Meacutetodo de Knott
bull Na fase crocircnica as microfilaacuterias raramente satildeo detectadas no sangue perifeacuterico
Gota espessa
bull Possibilita a visualizaccedilatildeo da bainha fato que difere a microfilaria de W bancrofti de outro filariacutedeos sanguiacuteneos
bull Apresenta um baixo custo em comparaccedilatildeo com outras mais avanccediladas como a filtraccedilatildeo de sangue em membrana de policarbonato
bull Possui baixa sensibilidade natildeo indicada em situaccedilotildees em que os parasitados se mostram com baixa microfilaremia ou amicrofilarecircmicos
Concentraccedilatildeo
bull Baseia-se na passagem de sangue venoso atraveacutes de uma membrana (Milipore ou Nuclepore) de diacircmetro de 13 a 25 mm e poros de 5 ou 3 μm
bull O material retido na membrana sendo fixado corado e observado ao microscoacutepio
bull Essa teacutecnica assim como a de Knott permite a identificaccedilatildeo de indiviacuteduos com baixiacutessimas parasitemias (quantidade de microfilarias natildeo detectaacuteveis pela teacutecnica de gota espessa)
Teacutecnica de Knott
bull Retirar 2 ml de sangue total por punccedilatildeo venosa e colocar imediatamente em um tubo contendo 10 ml de formol a 2
bull Fechar o tubo e misture completamente invertendo-o e agitando-o O formol hemolisa as hemaacutecias mata fixa e distende as microfilaacuterias
bull Centrifugar o sangue a 1500 rpm por 5 minutos
bull Decantar o sobrenadante
Teacutecnica de Knott
bull Retirar o sedimento com uma pipeta Pasteur e espalhar a gota espessa sobre uma lacircmina
bull Deixar secar bem e corar com Giemsa
bull Examinar com objetiva de imersatildeo
bull Esta teacutecnica possibilita que o exame microscoacutepico laboratorial seja realizado vaacuterios dias apoacutes a coleta de material realizada no campo
Exames de imagem
bull Ultranossografia
ndash Possibilidade de visualizar os movimentos de vermes adultos vivos de W bancrofti em vaso linfaacutetico especificamente em vasos intraescrotais do cordatildeo espermaacutetico
ndash O movimento ativo e ininterrupto dos vermes adultos durante as 24 horas do dia eacute denominado sinal da ldquodanccedila das filaacuteriasrdquo
Diagnoacutestico soroloacutegico
bull Teste imunocromatograacutefico desenvolvido pelo ICT Diagnostic - ICT card
ndash Teste qualilativo
ndash Cartatildeo possui ac de antifilaacuteria e o controle eacute formado por ac anti Ig G humano
Plasmodium spp
Taxonomia
bull Reino Protozoa
bull FiloApicomplexa
bull Classe Sporozoea
bull Ordem Hemosporidiida
bull Famiacutelia Plasmodiidae
bull Gecircneros Plasmodium
bull Espeacutecie Pfalciparum Pvivax Povale e Pmalariae
Plasmodium
bull Ciclo bioloacutegico Hospedeiro vertebrado e invertebrado
bull Hospedeiro invertebrado ndash Vetor
ndash Fecircmeas hematoacutefagas do gecircnero Anopheles
ndash Brasil Anopheles (N)darlingi A (N) aquasalis A (N) albitarsis A (K) cruzii e A (K) bellator
ndash Possuem haacutebito noturno penetrando nas casas no crespuacutesculo saindo ao amanhecer
Plasmodium
bull Hospedeiro vertebrado homem
bull Transmissatildeo
ndash Vetor
ndash Transfusatildeo de sangue
ndash Compartilhamento de seringas
ndash Acidente com agulhas
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
bull Ciclo preacute-eritrociacutetico
ndash Forma inoculada esporozoiacutetos
ndash A fecircmea do anofelino infectado inocula no homem as formas infectantes localizadas na saliva
ndash Os esporozoiacutetas permancem na circulaccedilatildeo por aproximadamente uma hora
ndash Invadem os hepatoacutecitos e se diferenciam em trofozoiacutetas (criptozoiacuteto)
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
ndash Esquizogonia e formaccedilatildeo de esquizontes
ndash Divisatildeo nuclear e liberaccedilatildeo de merozoiacutetos
ndash Aproximadamente 10000 merozoiacutetos por hepatoacutecito
ndash Rompimento do hepatoacutecito e liberaccedilatildeo de merozoiacutetos na circulaccedilatildeo
ndash Duraccedilatildeo do ciclo aprox 1 a 2 semanas
Ciclo evolutivo
bull PVivax e Povale
ndash Alguns esporozoiacutetos geneticamente diferentes ficam na forma latente nos hepatoacutecitos permanecendo muitos meses Satildeo classificados como hipnozoiacuteto
ndash Satildeo responsaacuteveis pelas recaiacutedas tardias e formas de malaacuteria com periacuteodo de encubaccedilatildeo longo ndash 6 a 9 meses
FASE HEPAacuteTICA OU EXOERITROCIacuteTICA
Hepatoacutecito
FIacuteGADO
Invasatildeo do hepatoacutecito
Reproduccedilatildeo Assexuada
Esporozoiacutetos Lise dos hepatoacutecitos
Liberaccedilatildeo dos protozoaacuterios na corrente sanguumliacutenea
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
bull Ciclo eritrociacutetico
ndash Os merozoiacutetos invadem as hemaacutecias
ndash Diferenciaccedilatildeo em trofozoiacutetos
ndash Esquizogonia esquizonte
ndash Produccedilatildeo de merozoiacutetos e rompimento da hemaacutecia
ndash Merozoiacutetos invasatildeo de novas hemaacutecias
ndash Apoacutes algumas geraccedilotildees os merozoiacutetos natildeo mais se dividem e se diferenciam em gametoacutecitos ndash micro e macrogametoacutecito
FASE ERITROCIacuteTICA
Hepatoacutecito destruiacutedo pelos protozoaacuterios
Penetraccedilatildeo dos protozoaacuterios
Reproduccedilatildeo assexuada
Protozoaacuterios destroem as hemaacutecias
Diferenciaccedilatildeo em gametoacutecitos
Fecircmeas de Anopheles sugam hemaacutecias com gametoacutecitos
Ciclo no hospedeiro invertebrado
Ocorre nas hemaacutecias ou Eritroacutecitos
nas hemaacutecias
Protozoaacuterio no interior da hemaacutecia
Hemaacutecia com gametoacutecito
T trofozoiacuteto Em esquizonte com merozoiacuteto
Fase eritrociacutetica
bull Ciclo sanguiacuteneo ndash Pfalciparum P vivax e Povale 48 horas
ndash Pmalariae 72 horas
ndash Fonte de nutriccedilatildeo do Plasmodium no ciclo sanguiacuteneo hemoglobina
ndash Produccedilatildeo do pigmento malaacuterico hemozoiacutena bull Granulaccedilotildees de Schuffner Plasmodium vivax
bull Granulaccedilotildees de Maurer P falciparum
bull Granulaccedilotildees de Ziemann P malariae
ndash Fagocitose pelas ceacutelulas de Kuppffer e macroacutefagos do baccedilo
Trofozoiacutetos Pfalciparum
Trofozoiacutetos Pfalciparum
Esquizonte ndash P falciparum
Raros no sangue perifeacuterico Possuem 2 a 24 merozoiacutetos
Ocupam 23 do gloacutebulo vermelho
Gametoacutecitos Pfalciparum
Ciclo evolutivo Pvivax
Esquizonte ndash P vivax
Satildeo grandes e ameboacuteides Cromatina organizada em duas ou mais massas
Possuem 2 a 24 merozoiacutetos com pontos de cromatina
Gametoacutecito ndash Pvivax
Macrogametoacutecitos satildeo redondos ou ovais e ocupam toda ceacutelula hospedeira O citoplasma eacute geralmente corado de azul mais escuro e conteacutem pigmento marrom Microgametoacutecitos satildeo geralmente do tamanho de um RBC natildeo infectados com citoplasma corados de azul paacutelido rosa ou cinza
Trofozoiacutetos - P malariae
Esquizontes ndash P malariae
Aproximadamente 6 a 12 merozoiacutetos com arranjo de rosetas
Gametoacutecitos ndash P malariae
Ciclo evolutivo ndash HI
bull Ingestatildeo de hemaacutecias contendo gametoacutecitos durante o repasto sanguiacuteneo da fecircmea do anofelino
bull No intestino meacutedio do vetor gametogecircnese ndash Macrogametoacutecito ndash macrogameta feminino ndash Microgametoacutecito o processo de exflagelaccedilatildeo daacute
origem a 8 microgametas masculinos ndash Produccedilatildeo de ovo ou zigoto ndash O ovo encista na camada epitelial do intestino meacutedio
oocisto ndash Esporogonia liberaccedilatildeo de esporozoiacutetos
Ciclo evolutivo ndash HInvertebrado
ndash Os esporozoiacutetos satildeo transportados pelo hemolinfa ateacute as glacircndulas salivares do vetor ateacute atingirem o ducto salivar
bull Inoculaccedilatildeo no hospedeiro vertebrado atraveacutes da picada do inseto
Hemaacutecia com gametoacutecito
Fecircmeas de Anopheles sugam hemaacutecias com gametoacutecitos
CICLO NO INVERTEBRADO
No tubo digestivo
Zigoto
Penetraccedilatildeo na parede do tubo
digestivo
Migraccedilatildeo para as glacircndulas salivares
Desenvolvimento
Mosquito infectado
Diagnoacutestico
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado e espesso corado pelo Giemsa
bull Sangue colhido sem anticoagulante para melhor fixaccedilatildeo em lacircmina
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo espesso eacute mais eficiente para detecccedilatildeo da infecccedilatildeo
bull Esfregaccedilo delgado eacute mais eficiente para diferenciaccedilatildeo morfoloacutegica das espeacutecies
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo semiquantitativo
ndash Exame de 100 campos microscoacutepicos com resultado expresso pelo sistema de cruzes
Parasitos contados Nuacutemero de campos
microscoacutepicos cruzes
40 a 60 100 +2
1 1 +
2-20 1 ++
21-200 1 +++
+ 200 1 ++++
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo quantitativo derivado de anaacutelise semiquantitativa
Contagem de parasitos por campo
Cruzes Parasitos por mm3
40 a 60100 +2 200-300
1 + 301-500
2-20 ++ 501 - 10000
21-200 +++ 10001 ndash 100000
+ 200 ++++ 100000 ou mais
Diagnoacutestico
bull P falciparum
ndash Parte do ciclo celular aderido ao endoteacutelio capilar Encontro somente de trofozoitos e gametoacutecitos no sangue perifeacuterico
ndash Raramente os esquizontes satildeo encontrados no sangue perifeacuterico
Diagnoacutestico ndash Pvivax ndash Encontro de todas as formas de desenvolvimento ndash
trofozoiacuteto jovem maduro esquizontes e gametoacutecitos
ndash Os trofozoiacutetos maduros tecircm geralmente um aspecto irregular com extensotildees ameboacuteides em seu citoplasma
Diagnoacutestico ndash Pvivax
ndash Os gametoacutecitos femininos coram-se mais intensamente que os masculinos e apresentam nuacutecleo mais compacto geralmente em localizaccedilatildeo perifeacuterica
ndash O pigmento malaacuterico geralmente eacute abundante
Diagnoacutestico - Pmalariae
bull Realizado por meio de caracteriacutesticas morfoloacutegicas do parasito
ndash Verificaccedilatildeo em esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado
ndash Posiccedilatildeo equatorial do parasito
ndash Desenvolvimento sem deformaccedilatildeo do eritroacutecito
Diagnoacutestico
bull QBC ndash Teacutecnica que combina concentraccedilatildeo dos parasitos
pela centrifugaccedilatildeo do sangue em em microhematoacutecrito e a coloraccedilatildeo dos aacutecidos nucleacuteicos do parasito pelo fluorcromo laranja de acridina
ndash Utilizaccedilatildeo de tubos especiais e microscopia epifluorescente
ndash Teste raacutepido
ndash Alta sensibilidade
Diagnoacutestico
bull ParaSight-F ( Becton amp Dickinson)
ndash Teste raacutepido para captura da proteiacutena rica em histidina 2 de Pfalciparum( PfHRP2) e enzimas conservadas de 4 espeacutecies de plasmoacutedio (DHL e aldolase
ndash Utilizaccedilatildeo de fita de nitrocelulose contendo ac monoclonal
ndash Lise de uma gota de sangue
ndash A reaccedilatildeo eacute revelada com adiccedilatildeo de ac policlonal anti-HRP2 conjugado com lipossomas contendo corante
Diagnoacutestico
bull PCR
ndash Sensibilidade e especificidade maior do que o esfregaccedilo sanguiacuteneo
Hemocultura
bull Meio LIT ndash Liver Infusion Triptose
bull Meio NNN ndash McNeal Novy e Nicolle
bull Utilizaccedilatildeo de 30ml de sangue heparinizado
bull Centrifugaccedilatildeo por 30 minutos em 3000 rpm
bull Despreza-se o plasma e o sedimento celular eacute lavado com meio LIT ( Liver Infusion Triptose) para eliminaccedilatildeo de possiacuteveis anticorpos
Hemocultura
bull Sedimento distribuiacutedo em 6 tubos com 5 ml de LIT
bull Os tubos satildeo mantidos a 28degC homogeneizados 3x semana e avaliados quinzenalmente ateacute 90 dias
bull Centrifugaccedilatildeo e avaliaccedilatildeo do sedimento de hemaacutecias
bull Leitura realizada pela observaccedilatildeo microscoacutepica de gotas do meio
bull Aumento da positividade para sangue processado imediatamente apoacutes a coleta cultivado em prazo de tempo maior (120 dias) e repeticcedilatildeo da teacutecnica por 3 vezes
Wuchereria bancrofti
Taxonomia
bull Reino Animalia
bull Filo Nematoda
bull Classe Secernentea
bull Ordem Filariidea
bull Superfamiacutelia Filarioidea
bull FamiacuteliaOnchocercidae
bull GecircnerosWuchereria
bull Espeacutecie Wbancrofti
Formas evolutivas
bull Heteroxecircnico
bull Hospedeiro vertebrado homem
bull Hospedeiro intermediaacuterio Culex quinquefasciatus
bull Formas evolutivas ndash HV verme adulto (fecircmea e macho) localizados nos
vasos e gacircnglios linfaacuteticos da regiatildeo abdominal peacutelvica (perna e escroto) mamas e braccedilo
ndash microfilaacuterias eliminadas pelas fecircmeas graacutevidas Saem dos ductos linfaacuteticos e atingem circulaccedilatildeo sanguiacutenea
ndash HI larva L1 L2 e L3 (infectante)
Culex quinquefasciatus
Morfologia
bull Macho 35 a 4 cm x 01mm com extremidade posterior enrrolada ventralmente
bull Fecircmea 7 a 10cm x 03 mm com vagina exteriorizada em uma vulva localizada proacutexima agrave extremidade anterior
bull Microfilaacuteria Presenccedila de bainha e estilete bucal na parte anterior que as diferencia de outros filariacutedeos sanguiacuteneos Possuem 250 a 300 microm e uma grande qtde de nuacutecleos
bull Larva L3 possui aproximadamente 15 a 20 mm de comprimento
Microfilaacuteria
Ciclo evolutivo
bull Fecircmea do inseto realiza o hematofagismo noturno e ingere as microfilaacuterias
bull Estocircmago do vetor microfilaacuterias perdem a bainha atravessam a parede do estocircmago e migram para os muacutesculos toraacutecicos ndash L1
bull Apoacutes 20 dias a larva estaacute na forma infectante L3 medindo aproximadamente 2mm
bull Migraccedilatildeo da larva para a proboacutescida concentrando-se no laacutebio do moquito
Microfilaacuteria Presenccedila de bainha Cauda pontuda com nuacutecleos grandes largos e bem separados Nuacutecleos caudais em fila uacutenica
Ciclo evolutivo
bull Repasto sanguiacuteneo do inseto infectado
ndash As larvas L3 migram do laacutebio do vetor para a pele do HV
ndash Migram para os vasos linfaacuteticos e tornam-se vermes adultos
ndash Apoacutes 8 meses as fecircmeas graacutevidas produzem as primeiras microfilaacuterias
Periodicidade
bull Periodicidade noturna das microfilaacuterias
ndash Durante o dia localizam-se nos capilares profundos
ndash Durante a noite vasos sanguiacuteneos perifeacutericos
ndash Pico da microfilaremia meia-noite coincidindo com o horaacuterio de hematofagismo do inseto transmissor
Patologia
bull Periacuteodo assintomaacutetico bull Fase aguda bull Processos inflamatoacuterios produzidos por larvas L4 e adultos jovens
que colonizam as vias linfaacuteticas ndash Linfadenites linfonodos inguinais epitrocleanos e axilares com
desenvolvimento de granulomas com calcificaccedilatildeo apoacutes a morte dos vermes
ndash Linfangite inflamaccedilatildeo e dilataccedilatildeo dos vasos linfaacuteticos ndash Febre mal estar ndash Funiculite filariana linfangite do cordatildeo espermaacutetico e varicocele
bull Fase crocircnica ndash Hidrocele ndash Linfedema ndash Quiluacuteria ndash Elefantiacutease
Quiluacuteria
Patologia
bull Processos obstrutivos ndash Formaccedilatildeo de novelos envolvidos por reaccedilatildeo
inflamatoacuteria e pela formaccedilatildeo de fibrose
ndash Estase e congestatildeo da linfa produzindo linfoedema tecidual
ndash Extravasamento produzindo derrame linfaacutetico ascite linfaacutetica linfuacuteria linforreacuteia linfotoacuterax linfocele etc
ndash A ruptura de vasos linfaacuteticos para o interior do sistema excretor urinaacuterio daacute origem agrave quiluacuteria
Patologia
bull Complicaccedilotildees associadas agrave filariose
ndash Elefantiacutease
bull Caracterizada por processo inflamatoacuterio e fibrose crocircnica do oacutergatildeo atingido
bull Hipertrofia da derme do tecido conjuntivo aumento exagerado do volume do oacutergatildeo com queratinizaccedilatildeo e rugosidade
bull A pele perde a elasticidade resseca e se torna sujeita a infecccedilotildees bacterianas
Patologia
bull Permanecimento na aacuterea endecircmica
bull Nuacutemero de larvas inoculadas
bull Frequecircncia das re-infecccedilotildees
bull O nuacutemero de acasalamento dos vermes e suas localizaccedilotildees anatocircmicas
bull A sensibilizaccedilatildeo do organismo e a intensidade das reaccedilotildees inflamatoacuterias do paciente
bull As infecccedilotildees bacterianas associadas
Diagnoacutestico
bull Pesquisa de microfilaacuterias no sangue perifeacuterico ndash 20 40 ou 60 microL- de preferecircncia entre as 10 h da noite e 4h da manhatilde
ndash Gota espessa Coloraccedilatildeo de Giemsa
ndash Meacutetodos de concentraccedilatildeo Filtraccedilatildeo em membrana de policarbonato milipore ou nucleopore
ndash Meacutetodo de Knott
bull Na fase crocircnica as microfilaacuterias raramente satildeo detectadas no sangue perifeacuterico
Gota espessa
bull Possibilita a visualizaccedilatildeo da bainha fato que difere a microfilaria de W bancrofti de outro filariacutedeos sanguiacuteneos
bull Apresenta um baixo custo em comparaccedilatildeo com outras mais avanccediladas como a filtraccedilatildeo de sangue em membrana de policarbonato
bull Possui baixa sensibilidade natildeo indicada em situaccedilotildees em que os parasitados se mostram com baixa microfilaremia ou amicrofilarecircmicos
Concentraccedilatildeo
bull Baseia-se na passagem de sangue venoso atraveacutes de uma membrana (Milipore ou Nuclepore) de diacircmetro de 13 a 25 mm e poros de 5 ou 3 μm
bull O material retido na membrana sendo fixado corado e observado ao microscoacutepio
bull Essa teacutecnica assim como a de Knott permite a identificaccedilatildeo de indiviacuteduos com baixiacutessimas parasitemias (quantidade de microfilarias natildeo detectaacuteveis pela teacutecnica de gota espessa)
Teacutecnica de Knott
bull Retirar 2 ml de sangue total por punccedilatildeo venosa e colocar imediatamente em um tubo contendo 10 ml de formol a 2
bull Fechar o tubo e misture completamente invertendo-o e agitando-o O formol hemolisa as hemaacutecias mata fixa e distende as microfilaacuterias
bull Centrifugar o sangue a 1500 rpm por 5 minutos
bull Decantar o sobrenadante
Teacutecnica de Knott
bull Retirar o sedimento com uma pipeta Pasteur e espalhar a gota espessa sobre uma lacircmina
bull Deixar secar bem e corar com Giemsa
bull Examinar com objetiva de imersatildeo
bull Esta teacutecnica possibilita que o exame microscoacutepico laboratorial seja realizado vaacuterios dias apoacutes a coleta de material realizada no campo
Exames de imagem
bull Ultranossografia
ndash Possibilidade de visualizar os movimentos de vermes adultos vivos de W bancrofti em vaso linfaacutetico especificamente em vasos intraescrotais do cordatildeo espermaacutetico
ndash O movimento ativo e ininterrupto dos vermes adultos durante as 24 horas do dia eacute denominado sinal da ldquodanccedila das filaacuteriasrdquo
Diagnoacutestico soroloacutegico
bull Teste imunocromatograacutefico desenvolvido pelo ICT Diagnostic - ICT card
ndash Teste qualilativo
ndash Cartatildeo possui ac de antifilaacuteria e o controle eacute formado por ac anti Ig G humano
Plasmodium spp
Taxonomia
bull Reino Protozoa
bull FiloApicomplexa
bull Classe Sporozoea
bull Ordem Hemosporidiida
bull Famiacutelia Plasmodiidae
bull Gecircneros Plasmodium
bull Espeacutecie Pfalciparum Pvivax Povale e Pmalariae
Plasmodium
bull Ciclo bioloacutegico Hospedeiro vertebrado e invertebrado
bull Hospedeiro invertebrado ndash Vetor
ndash Fecircmeas hematoacutefagas do gecircnero Anopheles
ndash Brasil Anopheles (N)darlingi A (N) aquasalis A (N) albitarsis A (K) cruzii e A (K) bellator
ndash Possuem haacutebito noturno penetrando nas casas no crespuacutesculo saindo ao amanhecer
Plasmodium
bull Hospedeiro vertebrado homem
bull Transmissatildeo
ndash Vetor
ndash Transfusatildeo de sangue
ndash Compartilhamento de seringas
ndash Acidente com agulhas
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
bull Ciclo preacute-eritrociacutetico
ndash Forma inoculada esporozoiacutetos
ndash A fecircmea do anofelino infectado inocula no homem as formas infectantes localizadas na saliva
ndash Os esporozoiacutetas permancem na circulaccedilatildeo por aproximadamente uma hora
ndash Invadem os hepatoacutecitos e se diferenciam em trofozoiacutetas (criptozoiacuteto)
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
ndash Esquizogonia e formaccedilatildeo de esquizontes
ndash Divisatildeo nuclear e liberaccedilatildeo de merozoiacutetos
ndash Aproximadamente 10000 merozoiacutetos por hepatoacutecito
ndash Rompimento do hepatoacutecito e liberaccedilatildeo de merozoiacutetos na circulaccedilatildeo
ndash Duraccedilatildeo do ciclo aprox 1 a 2 semanas
Ciclo evolutivo
bull PVivax e Povale
ndash Alguns esporozoiacutetos geneticamente diferentes ficam na forma latente nos hepatoacutecitos permanecendo muitos meses Satildeo classificados como hipnozoiacuteto
ndash Satildeo responsaacuteveis pelas recaiacutedas tardias e formas de malaacuteria com periacuteodo de encubaccedilatildeo longo ndash 6 a 9 meses
FASE HEPAacuteTICA OU EXOERITROCIacuteTICA
Hepatoacutecito
FIacuteGADO
Invasatildeo do hepatoacutecito
Reproduccedilatildeo Assexuada
Esporozoiacutetos Lise dos hepatoacutecitos
Liberaccedilatildeo dos protozoaacuterios na corrente sanguumliacutenea
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
bull Ciclo eritrociacutetico
ndash Os merozoiacutetos invadem as hemaacutecias
ndash Diferenciaccedilatildeo em trofozoiacutetos
ndash Esquizogonia esquizonte
ndash Produccedilatildeo de merozoiacutetos e rompimento da hemaacutecia
ndash Merozoiacutetos invasatildeo de novas hemaacutecias
ndash Apoacutes algumas geraccedilotildees os merozoiacutetos natildeo mais se dividem e se diferenciam em gametoacutecitos ndash micro e macrogametoacutecito
FASE ERITROCIacuteTICA
Hepatoacutecito destruiacutedo pelos protozoaacuterios
Penetraccedilatildeo dos protozoaacuterios
Reproduccedilatildeo assexuada
Protozoaacuterios destroem as hemaacutecias
Diferenciaccedilatildeo em gametoacutecitos
Fecircmeas de Anopheles sugam hemaacutecias com gametoacutecitos
Ciclo no hospedeiro invertebrado
Ocorre nas hemaacutecias ou Eritroacutecitos
nas hemaacutecias
Protozoaacuterio no interior da hemaacutecia
Hemaacutecia com gametoacutecito
T trofozoiacuteto Em esquizonte com merozoiacuteto
Fase eritrociacutetica
bull Ciclo sanguiacuteneo ndash Pfalciparum P vivax e Povale 48 horas
ndash Pmalariae 72 horas
ndash Fonte de nutriccedilatildeo do Plasmodium no ciclo sanguiacuteneo hemoglobina
ndash Produccedilatildeo do pigmento malaacuterico hemozoiacutena bull Granulaccedilotildees de Schuffner Plasmodium vivax
bull Granulaccedilotildees de Maurer P falciparum
bull Granulaccedilotildees de Ziemann P malariae
ndash Fagocitose pelas ceacutelulas de Kuppffer e macroacutefagos do baccedilo
Trofozoiacutetos Pfalciparum
Trofozoiacutetos Pfalciparum
Esquizonte ndash P falciparum
Raros no sangue perifeacuterico Possuem 2 a 24 merozoiacutetos
Ocupam 23 do gloacutebulo vermelho
Gametoacutecitos Pfalciparum
Ciclo evolutivo Pvivax
Esquizonte ndash P vivax
Satildeo grandes e ameboacuteides Cromatina organizada em duas ou mais massas
Possuem 2 a 24 merozoiacutetos com pontos de cromatina
Gametoacutecito ndash Pvivax
Macrogametoacutecitos satildeo redondos ou ovais e ocupam toda ceacutelula hospedeira O citoplasma eacute geralmente corado de azul mais escuro e conteacutem pigmento marrom Microgametoacutecitos satildeo geralmente do tamanho de um RBC natildeo infectados com citoplasma corados de azul paacutelido rosa ou cinza
Trofozoiacutetos - P malariae
Esquizontes ndash P malariae
Aproximadamente 6 a 12 merozoiacutetos com arranjo de rosetas
Gametoacutecitos ndash P malariae
Ciclo evolutivo ndash HI
bull Ingestatildeo de hemaacutecias contendo gametoacutecitos durante o repasto sanguiacuteneo da fecircmea do anofelino
bull No intestino meacutedio do vetor gametogecircnese ndash Macrogametoacutecito ndash macrogameta feminino ndash Microgametoacutecito o processo de exflagelaccedilatildeo daacute
origem a 8 microgametas masculinos ndash Produccedilatildeo de ovo ou zigoto ndash O ovo encista na camada epitelial do intestino meacutedio
oocisto ndash Esporogonia liberaccedilatildeo de esporozoiacutetos
Ciclo evolutivo ndash HInvertebrado
ndash Os esporozoiacutetos satildeo transportados pelo hemolinfa ateacute as glacircndulas salivares do vetor ateacute atingirem o ducto salivar
bull Inoculaccedilatildeo no hospedeiro vertebrado atraveacutes da picada do inseto
Hemaacutecia com gametoacutecito
Fecircmeas de Anopheles sugam hemaacutecias com gametoacutecitos
CICLO NO INVERTEBRADO
No tubo digestivo
Zigoto
Penetraccedilatildeo na parede do tubo
digestivo
Migraccedilatildeo para as glacircndulas salivares
Desenvolvimento
Mosquito infectado
Diagnoacutestico
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado e espesso corado pelo Giemsa
bull Sangue colhido sem anticoagulante para melhor fixaccedilatildeo em lacircmina
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo espesso eacute mais eficiente para detecccedilatildeo da infecccedilatildeo
bull Esfregaccedilo delgado eacute mais eficiente para diferenciaccedilatildeo morfoloacutegica das espeacutecies
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo semiquantitativo
ndash Exame de 100 campos microscoacutepicos com resultado expresso pelo sistema de cruzes
Parasitos contados Nuacutemero de campos
microscoacutepicos cruzes
40 a 60 100 +2
1 1 +
2-20 1 ++
21-200 1 +++
+ 200 1 ++++
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo quantitativo derivado de anaacutelise semiquantitativa
Contagem de parasitos por campo
Cruzes Parasitos por mm3
40 a 60100 +2 200-300
1 + 301-500
2-20 ++ 501 - 10000
21-200 +++ 10001 ndash 100000
+ 200 ++++ 100000 ou mais
Diagnoacutestico
bull P falciparum
ndash Parte do ciclo celular aderido ao endoteacutelio capilar Encontro somente de trofozoitos e gametoacutecitos no sangue perifeacuterico
ndash Raramente os esquizontes satildeo encontrados no sangue perifeacuterico
Diagnoacutestico ndash Pvivax ndash Encontro de todas as formas de desenvolvimento ndash
trofozoiacuteto jovem maduro esquizontes e gametoacutecitos
ndash Os trofozoiacutetos maduros tecircm geralmente um aspecto irregular com extensotildees ameboacuteides em seu citoplasma
Diagnoacutestico ndash Pvivax
ndash Os gametoacutecitos femininos coram-se mais intensamente que os masculinos e apresentam nuacutecleo mais compacto geralmente em localizaccedilatildeo perifeacuterica
ndash O pigmento malaacuterico geralmente eacute abundante
Diagnoacutestico - Pmalariae
bull Realizado por meio de caracteriacutesticas morfoloacutegicas do parasito
ndash Verificaccedilatildeo em esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado
ndash Posiccedilatildeo equatorial do parasito
ndash Desenvolvimento sem deformaccedilatildeo do eritroacutecito
Diagnoacutestico
bull QBC ndash Teacutecnica que combina concentraccedilatildeo dos parasitos
pela centrifugaccedilatildeo do sangue em em microhematoacutecrito e a coloraccedilatildeo dos aacutecidos nucleacuteicos do parasito pelo fluorcromo laranja de acridina
ndash Utilizaccedilatildeo de tubos especiais e microscopia epifluorescente
ndash Teste raacutepido
ndash Alta sensibilidade
Diagnoacutestico
bull ParaSight-F ( Becton amp Dickinson)
ndash Teste raacutepido para captura da proteiacutena rica em histidina 2 de Pfalciparum( PfHRP2) e enzimas conservadas de 4 espeacutecies de plasmoacutedio (DHL e aldolase
ndash Utilizaccedilatildeo de fita de nitrocelulose contendo ac monoclonal
ndash Lise de uma gota de sangue
ndash A reaccedilatildeo eacute revelada com adiccedilatildeo de ac policlonal anti-HRP2 conjugado com lipossomas contendo corante
Diagnoacutestico
bull PCR
ndash Sensibilidade e especificidade maior do que o esfregaccedilo sanguiacuteneo
Hemocultura
bull Sedimento distribuiacutedo em 6 tubos com 5 ml de LIT
bull Os tubos satildeo mantidos a 28degC homogeneizados 3x semana e avaliados quinzenalmente ateacute 90 dias
bull Centrifugaccedilatildeo e avaliaccedilatildeo do sedimento de hemaacutecias
bull Leitura realizada pela observaccedilatildeo microscoacutepica de gotas do meio
bull Aumento da positividade para sangue processado imediatamente apoacutes a coleta cultivado em prazo de tempo maior (120 dias) e repeticcedilatildeo da teacutecnica por 3 vezes
Wuchereria bancrofti
Taxonomia
bull Reino Animalia
bull Filo Nematoda
bull Classe Secernentea
bull Ordem Filariidea
bull Superfamiacutelia Filarioidea
bull FamiacuteliaOnchocercidae
bull GecircnerosWuchereria
bull Espeacutecie Wbancrofti
Formas evolutivas
bull Heteroxecircnico
bull Hospedeiro vertebrado homem
bull Hospedeiro intermediaacuterio Culex quinquefasciatus
bull Formas evolutivas ndash HV verme adulto (fecircmea e macho) localizados nos
vasos e gacircnglios linfaacuteticos da regiatildeo abdominal peacutelvica (perna e escroto) mamas e braccedilo
ndash microfilaacuterias eliminadas pelas fecircmeas graacutevidas Saem dos ductos linfaacuteticos e atingem circulaccedilatildeo sanguiacutenea
ndash HI larva L1 L2 e L3 (infectante)
Culex quinquefasciatus
Morfologia
bull Macho 35 a 4 cm x 01mm com extremidade posterior enrrolada ventralmente
bull Fecircmea 7 a 10cm x 03 mm com vagina exteriorizada em uma vulva localizada proacutexima agrave extremidade anterior
bull Microfilaacuteria Presenccedila de bainha e estilete bucal na parte anterior que as diferencia de outros filariacutedeos sanguiacuteneos Possuem 250 a 300 microm e uma grande qtde de nuacutecleos
bull Larva L3 possui aproximadamente 15 a 20 mm de comprimento
Microfilaacuteria
Ciclo evolutivo
bull Fecircmea do inseto realiza o hematofagismo noturno e ingere as microfilaacuterias
bull Estocircmago do vetor microfilaacuterias perdem a bainha atravessam a parede do estocircmago e migram para os muacutesculos toraacutecicos ndash L1
bull Apoacutes 20 dias a larva estaacute na forma infectante L3 medindo aproximadamente 2mm
bull Migraccedilatildeo da larva para a proboacutescida concentrando-se no laacutebio do moquito
Microfilaacuteria Presenccedila de bainha Cauda pontuda com nuacutecleos grandes largos e bem separados Nuacutecleos caudais em fila uacutenica
Ciclo evolutivo
bull Repasto sanguiacuteneo do inseto infectado
ndash As larvas L3 migram do laacutebio do vetor para a pele do HV
ndash Migram para os vasos linfaacuteticos e tornam-se vermes adultos
ndash Apoacutes 8 meses as fecircmeas graacutevidas produzem as primeiras microfilaacuterias
Periodicidade
bull Periodicidade noturna das microfilaacuterias
ndash Durante o dia localizam-se nos capilares profundos
ndash Durante a noite vasos sanguiacuteneos perifeacutericos
ndash Pico da microfilaremia meia-noite coincidindo com o horaacuterio de hematofagismo do inseto transmissor
Patologia
bull Periacuteodo assintomaacutetico bull Fase aguda bull Processos inflamatoacuterios produzidos por larvas L4 e adultos jovens
que colonizam as vias linfaacuteticas ndash Linfadenites linfonodos inguinais epitrocleanos e axilares com
desenvolvimento de granulomas com calcificaccedilatildeo apoacutes a morte dos vermes
ndash Linfangite inflamaccedilatildeo e dilataccedilatildeo dos vasos linfaacuteticos ndash Febre mal estar ndash Funiculite filariana linfangite do cordatildeo espermaacutetico e varicocele
bull Fase crocircnica ndash Hidrocele ndash Linfedema ndash Quiluacuteria ndash Elefantiacutease
Quiluacuteria
Patologia
bull Processos obstrutivos ndash Formaccedilatildeo de novelos envolvidos por reaccedilatildeo
inflamatoacuteria e pela formaccedilatildeo de fibrose
ndash Estase e congestatildeo da linfa produzindo linfoedema tecidual
ndash Extravasamento produzindo derrame linfaacutetico ascite linfaacutetica linfuacuteria linforreacuteia linfotoacuterax linfocele etc
ndash A ruptura de vasos linfaacuteticos para o interior do sistema excretor urinaacuterio daacute origem agrave quiluacuteria
Patologia
bull Complicaccedilotildees associadas agrave filariose
ndash Elefantiacutease
bull Caracterizada por processo inflamatoacuterio e fibrose crocircnica do oacutergatildeo atingido
bull Hipertrofia da derme do tecido conjuntivo aumento exagerado do volume do oacutergatildeo com queratinizaccedilatildeo e rugosidade
bull A pele perde a elasticidade resseca e se torna sujeita a infecccedilotildees bacterianas
Patologia
bull Permanecimento na aacuterea endecircmica
bull Nuacutemero de larvas inoculadas
bull Frequecircncia das re-infecccedilotildees
bull O nuacutemero de acasalamento dos vermes e suas localizaccedilotildees anatocircmicas
bull A sensibilizaccedilatildeo do organismo e a intensidade das reaccedilotildees inflamatoacuterias do paciente
bull As infecccedilotildees bacterianas associadas
Diagnoacutestico
bull Pesquisa de microfilaacuterias no sangue perifeacuterico ndash 20 40 ou 60 microL- de preferecircncia entre as 10 h da noite e 4h da manhatilde
ndash Gota espessa Coloraccedilatildeo de Giemsa
ndash Meacutetodos de concentraccedilatildeo Filtraccedilatildeo em membrana de policarbonato milipore ou nucleopore
ndash Meacutetodo de Knott
bull Na fase crocircnica as microfilaacuterias raramente satildeo detectadas no sangue perifeacuterico
Gota espessa
bull Possibilita a visualizaccedilatildeo da bainha fato que difere a microfilaria de W bancrofti de outro filariacutedeos sanguiacuteneos
bull Apresenta um baixo custo em comparaccedilatildeo com outras mais avanccediladas como a filtraccedilatildeo de sangue em membrana de policarbonato
bull Possui baixa sensibilidade natildeo indicada em situaccedilotildees em que os parasitados se mostram com baixa microfilaremia ou amicrofilarecircmicos
Concentraccedilatildeo
bull Baseia-se na passagem de sangue venoso atraveacutes de uma membrana (Milipore ou Nuclepore) de diacircmetro de 13 a 25 mm e poros de 5 ou 3 μm
bull O material retido na membrana sendo fixado corado e observado ao microscoacutepio
bull Essa teacutecnica assim como a de Knott permite a identificaccedilatildeo de indiviacuteduos com baixiacutessimas parasitemias (quantidade de microfilarias natildeo detectaacuteveis pela teacutecnica de gota espessa)
Teacutecnica de Knott
bull Retirar 2 ml de sangue total por punccedilatildeo venosa e colocar imediatamente em um tubo contendo 10 ml de formol a 2
bull Fechar o tubo e misture completamente invertendo-o e agitando-o O formol hemolisa as hemaacutecias mata fixa e distende as microfilaacuterias
bull Centrifugar o sangue a 1500 rpm por 5 minutos
bull Decantar o sobrenadante
Teacutecnica de Knott
bull Retirar o sedimento com uma pipeta Pasteur e espalhar a gota espessa sobre uma lacircmina
bull Deixar secar bem e corar com Giemsa
bull Examinar com objetiva de imersatildeo
bull Esta teacutecnica possibilita que o exame microscoacutepico laboratorial seja realizado vaacuterios dias apoacutes a coleta de material realizada no campo
Exames de imagem
bull Ultranossografia
ndash Possibilidade de visualizar os movimentos de vermes adultos vivos de W bancrofti em vaso linfaacutetico especificamente em vasos intraescrotais do cordatildeo espermaacutetico
ndash O movimento ativo e ininterrupto dos vermes adultos durante as 24 horas do dia eacute denominado sinal da ldquodanccedila das filaacuteriasrdquo
Diagnoacutestico soroloacutegico
bull Teste imunocromatograacutefico desenvolvido pelo ICT Diagnostic - ICT card
ndash Teste qualilativo
ndash Cartatildeo possui ac de antifilaacuteria e o controle eacute formado por ac anti Ig G humano
Plasmodium spp
Taxonomia
bull Reino Protozoa
bull FiloApicomplexa
bull Classe Sporozoea
bull Ordem Hemosporidiida
bull Famiacutelia Plasmodiidae
bull Gecircneros Plasmodium
bull Espeacutecie Pfalciparum Pvivax Povale e Pmalariae
Plasmodium
bull Ciclo bioloacutegico Hospedeiro vertebrado e invertebrado
bull Hospedeiro invertebrado ndash Vetor
ndash Fecircmeas hematoacutefagas do gecircnero Anopheles
ndash Brasil Anopheles (N)darlingi A (N) aquasalis A (N) albitarsis A (K) cruzii e A (K) bellator
ndash Possuem haacutebito noturno penetrando nas casas no crespuacutesculo saindo ao amanhecer
Plasmodium
bull Hospedeiro vertebrado homem
bull Transmissatildeo
ndash Vetor
ndash Transfusatildeo de sangue
ndash Compartilhamento de seringas
ndash Acidente com agulhas
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
bull Ciclo preacute-eritrociacutetico
ndash Forma inoculada esporozoiacutetos
ndash A fecircmea do anofelino infectado inocula no homem as formas infectantes localizadas na saliva
ndash Os esporozoiacutetas permancem na circulaccedilatildeo por aproximadamente uma hora
ndash Invadem os hepatoacutecitos e se diferenciam em trofozoiacutetas (criptozoiacuteto)
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
ndash Esquizogonia e formaccedilatildeo de esquizontes
ndash Divisatildeo nuclear e liberaccedilatildeo de merozoiacutetos
ndash Aproximadamente 10000 merozoiacutetos por hepatoacutecito
ndash Rompimento do hepatoacutecito e liberaccedilatildeo de merozoiacutetos na circulaccedilatildeo
ndash Duraccedilatildeo do ciclo aprox 1 a 2 semanas
Ciclo evolutivo
bull PVivax e Povale
ndash Alguns esporozoiacutetos geneticamente diferentes ficam na forma latente nos hepatoacutecitos permanecendo muitos meses Satildeo classificados como hipnozoiacuteto
ndash Satildeo responsaacuteveis pelas recaiacutedas tardias e formas de malaacuteria com periacuteodo de encubaccedilatildeo longo ndash 6 a 9 meses
FASE HEPAacuteTICA OU EXOERITROCIacuteTICA
Hepatoacutecito
FIacuteGADO
Invasatildeo do hepatoacutecito
Reproduccedilatildeo Assexuada
Esporozoiacutetos Lise dos hepatoacutecitos
Liberaccedilatildeo dos protozoaacuterios na corrente sanguumliacutenea
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
bull Ciclo eritrociacutetico
ndash Os merozoiacutetos invadem as hemaacutecias
ndash Diferenciaccedilatildeo em trofozoiacutetos
ndash Esquizogonia esquizonte
ndash Produccedilatildeo de merozoiacutetos e rompimento da hemaacutecia
ndash Merozoiacutetos invasatildeo de novas hemaacutecias
ndash Apoacutes algumas geraccedilotildees os merozoiacutetos natildeo mais se dividem e se diferenciam em gametoacutecitos ndash micro e macrogametoacutecito
FASE ERITROCIacuteTICA
Hepatoacutecito destruiacutedo pelos protozoaacuterios
Penetraccedilatildeo dos protozoaacuterios
Reproduccedilatildeo assexuada
Protozoaacuterios destroem as hemaacutecias
Diferenciaccedilatildeo em gametoacutecitos
Fecircmeas de Anopheles sugam hemaacutecias com gametoacutecitos
Ciclo no hospedeiro invertebrado
Ocorre nas hemaacutecias ou Eritroacutecitos
nas hemaacutecias
Protozoaacuterio no interior da hemaacutecia
Hemaacutecia com gametoacutecito
T trofozoiacuteto Em esquizonte com merozoiacuteto
Fase eritrociacutetica
bull Ciclo sanguiacuteneo ndash Pfalciparum P vivax e Povale 48 horas
ndash Pmalariae 72 horas
ndash Fonte de nutriccedilatildeo do Plasmodium no ciclo sanguiacuteneo hemoglobina
ndash Produccedilatildeo do pigmento malaacuterico hemozoiacutena bull Granulaccedilotildees de Schuffner Plasmodium vivax
bull Granulaccedilotildees de Maurer P falciparum
bull Granulaccedilotildees de Ziemann P malariae
ndash Fagocitose pelas ceacutelulas de Kuppffer e macroacutefagos do baccedilo
Trofozoiacutetos Pfalciparum
Trofozoiacutetos Pfalciparum
Esquizonte ndash P falciparum
Raros no sangue perifeacuterico Possuem 2 a 24 merozoiacutetos
Ocupam 23 do gloacutebulo vermelho
Gametoacutecitos Pfalciparum
Ciclo evolutivo Pvivax
Esquizonte ndash P vivax
Satildeo grandes e ameboacuteides Cromatina organizada em duas ou mais massas
Possuem 2 a 24 merozoiacutetos com pontos de cromatina
Gametoacutecito ndash Pvivax
Macrogametoacutecitos satildeo redondos ou ovais e ocupam toda ceacutelula hospedeira O citoplasma eacute geralmente corado de azul mais escuro e conteacutem pigmento marrom Microgametoacutecitos satildeo geralmente do tamanho de um RBC natildeo infectados com citoplasma corados de azul paacutelido rosa ou cinza
Trofozoiacutetos - P malariae
Esquizontes ndash P malariae
Aproximadamente 6 a 12 merozoiacutetos com arranjo de rosetas
Gametoacutecitos ndash P malariae
Ciclo evolutivo ndash HI
bull Ingestatildeo de hemaacutecias contendo gametoacutecitos durante o repasto sanguiacuteneo da fecircmea do anofelino
bull No intestino meacutedio do vetor gametogecircnese ndash Macrogametoacutecito ndash macrogameta feminino ndash Microgametoacutecito o processo de exflagelaccedilatildeo daacute
origem a 8 microgametas masculinos ndash Produccedilatildeo de ovo ou zigoto ndash O ovo encista na camada epitelial do intestino meacutedio
oocisto ndash Esporogonia liberaccedilatildeo de esporozoiacutetos
Ciclo evolutivo ndash HInvertebrado
ndash Os esporozoiacutetos satildeo transportados pelo hemolinfa ateacute as glacircndulas salivares do vetor ateacute atingirem o ducto salivar
bull Inoculaccedilatildeo no hospedeiro vertebrado atraveacutes da picada do inseto
Hemaacutecia com gametoacutecito
Fecircmeas de Anopheles sugam hemaacutecias com gametoacutecitos
CICLO NO INVERTEBRADO
No tubo digestivo
Zigoto
Penetraccedilatildeo na parede do tubo
digestivo
Migraccedilatildeo para as glacircndulas salivares
Desenvolvimento
Mosquito infectado
Diagnoacutestico
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado e espesso corado pelo Giemsa
bull Sangue colhido sem anticoagulante para melhor fixaccedilatildeo em lacircmina
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo espesso eacute mais eficiente para detecccedilatildeo da infecccedilatildeo
bull Esfregaccedilo delgado eacute mais eficiente para diferenciaccedilatildeo morfoloacutegica das espeacutecies
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo semiquantitativo
ndash Exame de 100 campos microscoacutepicos com resultado expresso pelo sistema de cruzes
Parasitos contados Nuacutemero de campos
microscoacutepicos cruzes
40 a 60 100 +2
1 1 +
2-20 1 ++
21-200 1 +++
+ 200 1 ++++
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo quantitativo derivado de anaacutelise semiquantitativa
Contagem de parasitos por campo
Cruzes Parasitos por mm3
40 a 60100 +2 200-300
1 + 301-500
2-20 ++ 501 - 10000
21-200 +++ 10001 ndash 100000
+ 200 ++++ 100000 ou mais
Diagnoacutestico
bull P falciparum
ndash Parte do ciclo celular aderido ao endoteacutelio capilar Encontro somente de trofozoitos e gametoacutecitos no sangue perifeacuterico
ndash Raramente os esquizontes satildeo encontrados no sangue perifeacuterico
Diagnoacutestico ndash Pvivax ndash Encontro de todas as formas de desenvolvimento ndash
trofozoiacuteto jovem maduro esquizontes e gametoacutecitos
ndash Os trofozoiacutetos maduros tecircm geralmente um aspecto irregular com extensotildees ameboacuteides em seu citoplasma
Diagnoacutestico ndash Pvivax
ndash Os gametoacutecitos femininos coram-se mais intensamente que os masculinos e apresentam nuacutecleo mais compacto geralmente em localizaccedilatildeo perifeacuterica
ndash O pigmento malaacuterico geralmente eacute abundante
Diagnoacutestico - Pmalariae
bull Realizado por meio de caracteriacutesticas morfoloacutegicas do parasito
ndash Verificaccedilatildeo em esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado
ndash Posiccedilatildeo equatorial do parasito
ndash Desenvolvimento sem deformaccedilatildeo do eritroacutecito
Diagnoacutestico
bull QBC ndash Teacutecnica que combina concentraccedilatildeo dos parasitos
pela centrifugaccedilatildeo do sangue em em microhematoacutecrito e a coloraccedilatildeo dos aacutecidos nucleacuteicos do parasito pelo fluorcromo laranja de acridina
ndash Utilizaccedilatildeo de tubos especiais e microscopia epifluorescente
ndash Teste raacutepido
ndash Alta sensibilidade
Diagnoacutestico
bull ParaSight-F ( Becton amp Dickinson)
ndash Teste raacutepido para captura da proteiacutena rica em histidina 2 de Pfalciparum( PfHRP2) e enzimas conservadas de 4 espeacutecies de plasmoacutedio (DHL e aldolase
ndash Utilizaccedilatildeo de fita de nitrocelulose contendo ac monoclonal
ndash Lise de uma gota de sangue
ndash A reaccedilatildeo eacute revelada com adiccedilatildeo de ac policlonal anti-HRP2 conjugado com lipossomas contendo corante
Diagnoacutestico
bull PCR
ndash Sensibilidade e especificidade maior do que o esfregaccedilo sanguiacuteneo
Wuchereria bancrofti
Taxonomia
bull Reino Animalia
bull Filo Nematoda
bull Classe Secernentea
bull Ordem Filariidea
bull Superfamiacutelia Filarioidea
bull FamiacuteliaOnchocercidae
bull GecircnerosWuchereria
bull Espeacutecie Wbancrofti
Formas evolutivas
bull Heteroxecircnico
bull Hospedeiro vertebrado homem
bull Hospedeiro intermediaacuterio Culex quinquefasciatus
bull Formas evolutivas ndash HV verme adulto (fecircmea e macho) localizados nos
vasos e gacircnglios linfaacuteticos da regiatildeo abdominal peacutelvica (perna e escroto) mamas e braccedilo
ndash microfilaacuterias eliminadas pelas fecircmeas graacutevidas Saem dos ductos linfaacuteticos e atingem circulaccedilatildeo sanguiacutenea
ndash HI larva L1 L2 e L3 (infectante)
Culex quinquefasciatus
Morfologia
bull Macho 35 a 4 cm x 01mm com extremidade posterior enrrolada ventralmente
bull Fecircmea 7 a 10cm x 03 mm com vagina exteriorizada em uma vulva localizada proacutexima agrave extremidade anterior
bull Microfilaacuteria Presenccedila de bainha e estilete bucal na parte anterior que as diferencia de outros filariacutedeos sanguiacuteneos Possuem 250 a 300 microm e uma grande qtde de nuacutecleos
bull Larva L3 possui aproximadamente 15 a 20 mm de comprimento
Microfilaacuteria
Ciclo evolutivo
bull Fecircmea do inseto realiza o hematofagismo noturno e ingere as microfilaacuterias
bull Estocircmago do vetor microfilaacuterias perdem a bainha atravessam a parede do estocircmago e migram para os muacutesculos toraacutecicos ndash L1
bull Apoacutes 20 dias a larva estaacute na forma infectante L3 medindo aproximadamente 2mm
bull Migraccedilatildeo da larva para a proboacutescida concentrando-se no laacutebio do moquito
Microfilaacuteria Presenccedila de bainha Cauda pontuda com nuacutecleos grandes largos e bem separados Nuacutecleos caudais em fila uacutenica
Ciclo evolutivo
bull Repasto sanguiacuteneo do inseto infectado
ndash As larvas L3 migram do laacutebio do vetor para a pele do HV
ndash Migram para os vasos linfaacuteticos e tornam-se vermes adultos
ndash Apoacutes 8 meses as fecircmeas graacutevidas produzem as primeiras microfilaacuterias
Periodicidade
bull Periodicidade noturna das microfilaacuterias
ndash Durante o dia localizam-se nos capilares profundos
ndash Durante a noite vasos sanguiacuteneos perifeacutericos
ndash Pico da microfilaremia meia-noite coincidindo com o horaacuterio de hematofagismo do inseto transmissor
Patologia
bull Periacuteodo assintomaacutetico bull Fase aguda bull Processos inflamatoacuterios produzidos por larvas L4 e adultos jovens
que colonizam as vias linfaacuteticas ndash Linfadenites linfonodos inguinais epitrocleanos e axilares com
desenvolvimento de granulomas com calcificaccedilatildeo apoacutes a morte dos vermes
ndash Linfangite inflamaccedilatildeo e dilataccedilatildeo dos vasos linfaacuteticos ndash Febre mal estar ndash Funiculite filariana linfangite do cordatildeo espermaacutetico e varicocele
bull Fase crocircnica ndash Hidrocele ndash Linfedema ndash Quiluacuteria ndash Elefantiacutease
Quiluacuteria
Patologia
bull Processos obstrutivos ndash Formaccedilatildeo de novelos envolvidos por reaccedilatildeo
inflamatoacuteria e pela formaccedilatildeo de fibrose
ndash Estase e congestatildeo da linfa produzindo linfoedema tecidual
ndash Extravasamento produzindo derrame linfaacutetico ascite linfaacutetica linfuacuteria linforreacuteia linfotoacuterax linfocele etc
ndash A ruptura de vasos linfaacuteticos para o interior do sistema excretor urinaacuterio daacute origem agrave quiluacuteria
Patologia
bull Complicaccedilotildees associadas agrave filariose
ndash Elefantiacutease
bull Caracterizada por processo inflamatoacuterio e fibrose crocircnica do oacutergatildeo atingido
bull Hipertrofia da derme do tecido conjuntivo aumento exagerado do volume do oacutergatildeo com queratinizaccedilatildeo e rugosidade
bull A pele perde a elasticidade resseca e se torna sujeita a infecccedilotildees bacterianas
Patologia
bull Permanecimento na aacuterea endecircmica
bull Nuacutemero de larvas inoculadas
bull Frequecircncia das re-infecccedilotildees
bull O nuacutemero de acasalamento dos vermes e suas localizaccedilotildees anatocircmicas
bull A sensibilizaccedilatildeo do organismo e a intensidade das reaccedilotildees inflamatoacuterias do paciente
bull As infecccedilotildees bacterianas associadas
Diagnoacutestico
bull Pesquisa de microfilaacuterias no sangue perifeacuterico ndash 20 40 ou 60 microL- de preferecircncia entre as 10 h da noite e 4h da manhatilde
ndash Gota espessa Coloraccedilatildeo de Giemsa
ndash Meacutetodos de concentraccedilatildeo Filtraccedilatildeo em membrana de policarbonato milipore ou nucleopore
ndash Meacutetodo de Knott
bull Na fase crocircnica as microfilaacuterias raramente satildeo detectadas no sangue perifeacuterico
Gota espessa
bull Possibilita a visualizaccedilatildeo da bainha fato que difere a microfilaria de W bancrofti de outro filariacutedeos sanguiacuteneos
bull Apresenta um baixo custo em comparaccedilatildeo com outras mais avanccediladas como a filtraccedilatildeo de sangue em membrana de policarbonato
bull Possui baixa sensibilidade natildeo indicada em situaccedilotildees em que os parasitados se mostram com baixa microfilaremia ou amicrofilarecircmicos
Concentraccedilatildeo
bull Baseia-se na passagem de sangue venoso atraveacutes de uma membrana (Milipore ou Nuclepore) de diacircmetro de 13 a 25 mm e poros de 5 ou 3 μm
bull O material retido na membrana sendo fixado corado e observado ao microscoacutepio
bull Essa teacutecnica assim como a de Knott permite a identificaccedilatildeo de indiviacuteduos com baixiacutessimas parasitemias (quantidade de microfilarias natildeo detectaacuteveis pela teacutecnica de gota espessa)
Teacutecnica de Knott
bull Retirar 2 ml de sangue total por punccedilatildeo venosa e colocar imediatamente em um tubo contendo 10 ml de formol a 2
bull Fechar o tubo e misture completamente invertendo-o e agitando-o O formol hemolisa as hemaacutecias mata fixa e distende as microfilaacuterias
bull Centrifugar o sangue a 1500 rpm por 5 minutos
bull Decantar o sobrenadante
Teacutecnica de Knott
bull Retirar o sedimento com uma pipeta Pasteur e espalhar a gota espessa sobre uma lacircmina
bull Deixar secar bem e corar com Giemsa
bull Examinar com objetiva de imersatildeo
bull Esta teacutecnica possibilita que o exame microscoacutepico laboratorial seja realizado vaacuterios dias apoacutes a coleta de material realizada no campo
Exames de imagem
bull Ultranossografia
ndash Possibilidade de visualizar os movimentos de vermes adultos vivos de W bancrofti em vaso linfaacutetico especificamente em vasos intraescrotais do cordatildeo espermaacutetico
ndash O movimento ativo e ininterrupto dos vermes adultos durante as 24 horas do dia eacute denominado sinal da ldquodanccedila das filaacuteriasrdquo
Diagnoacutestico soroloacutegico
bull Teste imunocromatograacutefico desenvolvido pelo ICT Diagnostic - ICT card
ndash Teste qualilativo
ndash Cartatildeo possui ac de antifilaacuteria e o controle eacute formado por ac anti Ig G humano
Plasmodium spp
Taxonomia
bull Reino Protozoa
bull FiloApicomplexa
bull Classe Sporozoea
bull Ordem Hemosporidiida
bull Famiacutelia Plasmodiidae
bull Gecircneros Plasmodium
bull Espeacutecie Pfalciparum Pvivax Povale e Pmalariae
Plasmodium
bull Ciclo bioloacutegico Hospedeiro vertebrado e invertebrado
bull Hospedeiro invertebrado ndash Vetor
ndash Fecircmeas hematoacutefagas do gecircnero Anopheles
ndash Brasil Anopheles (N)darlingi A (N) aquasalis A (N) albitarsis A (K) cruzii e A (K) bellator
ndash Possuem haacutebito noturno penetrando nas casas no crespuacutesculo saindo ao amanhecer
Plasmodium
bull Hospedeiro vertebrado homem
bull Transmissatildeo
ndash Vetor
ndash Transfusatildeo de sangue
ndash Compartilhamento de seringas
ndash Acidente com agulhas
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
bull Ciclo preacute-eritrociacutetico
ndash Forma inoculada esporozoiacutetos
ndash A fecircmea do anofelino infectado inocula no homem as formas infectantes localizadas na saliva
ndash Os esporozoiacutetas permancem na circulaccedilatildeo por aproximadamente uma hora
ndash Invadem os hepatoacutecitos e se diferenciam em trofozoiacutetas (criptozoiacuteto)
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
ndash Esquizogonia e formaccedilatildeo de esquizontes
ndash Divisatildeo nuclear e liberaccedilatildeo de merozoiacutetos
ndash Aproximadamente 10000 merozoiacutetos por hepatoacutecito
ndash Rompimento do hepatoacutecito e liberaccedilatildeo de merozoiacutetos na circulaccedilatildeo
ndash Duraccedilatildeo do ciclo aprox 1 a 2 semanas
Ciclo evolutivo
bull PVivax e Povale
ndash Alguns esporozoiacutetos geneticamente diferentes ficam na forma latente nos hepatoacutecitos permanecendo muitos meses Satildeo classificados como hipnozoiacuteto
ndash Satildeo responsaacuteveis pelas recaiacutedas tardias e formas de malaacuteria com periacuteodo de encubaccedilatildeo longo ndash 6 a 9 meses
FASE HEPAacuteTICA OU EXOERITROCIacuteTICA
Hepatoacutecito
FIacuteGADO
Invasatildeo do hepatoacutecito
Reproduccedilatildeo Assexuada
Esporozoiacutetos Lise dos hepatoacutecitos
Liberaccedilatildeo dos protozoaacuterios na corrente sanguumliacutenea
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
bull Ciclo eritrociacutetico
ndash Os merozoiacutetos invadem as hemaacutecias
ndash Diferenciaccedilatildeo em trofozoiacutetos
ndash Esquizogonia esquizonte
ndash Produccedilatildeo de merozoiacutetos e rompimento da hemaacutecia
ndash Merozoiacutetos invasatildeo de novas hemaacutecias
ndash Apoacutes algumas geraccedilotildees os merozoiacutetos natildeo mais se dividem e se diferenciam em gametoacutecitos ndash micro e macrogametoacutecito
FASE ERITROCIacuteTICA
Hepatoacutecito destruiacutedo pelos protozoaacuterios
Penetraccedilatildeo dos protozoaacuterios
Reproduccedilatildeo assexuada
Protozoaacuterios destroem as hemaacutecias
Diferenciaccedilatildeo em gametoacutecitos
Fecircmeas de Anopheles sugam hemaacutecias com gametoacutecitos
Ciclo no hospedeiro invertebrado
Ocorre nas hemaacutecias ou Eritroacutecitos
nas hemaacutecias
Protozoaacuterio no interior da hemaacutecia
Hemaacutecia com gametoacutecito
T trofozoiacuteto Em esquizonte com merozoiacuteto
Fase eritrociacutetica
bull Ciclo sanguiacuteneo ndash Pfalciparum P vivax e Povale 48 horas
ndash Pmalariae 72 horas
ndash Fonte de nutriccedilatildeo do Plasmodium no ciclo sanguiacuteneo hemoglobina
ndash Produccedilatildeo do pigmento malaacuterico hemozoiacutena bull Granulaccedilotildees de Schuffner Plasmodium vivax
bull Granulaccedilotildees de Maurer P falciparum
bull Granulaccedilotildees de Ziemann P malariae
ndash Fagocitose pelas ceacutelulas de Kuppffer e macroacutefagos do baccedilo
Trofozoiacutetos Pfalciparum
Trofozoiacutetos Pfalciparum
Esquizonte ndash P falciparum
Raros no sangue perifeacuterico Possuem 2 a 24 merozoiacutetos
Ocupam 23 do gloacutebulo vermelho
Gametoacutecitos Pfalciparum
Ciclo evolutivo Pvivax
Esquizonte ndash P vivax
Satildeo grandes e ameboacuteides Cromatina organizada em duas ou mais massas
Possuem 2 a 24 merozoiacutetos com pontos de cromatina
Gametoacutecito ndash Pvivax
Macrogametoacutecitos satildeo redondos ou ovais e ocupam toda ceacutelula hospedeira O citoplasma eacute geralmente corado de azul mais escuro e conteacutem pigmento marrom Microgametoacutecitos satildeo geralmente do tamanho de um RBC natildeo infectados com citoplasma corados de azul paacutelido rosa ou cinza
Trofozoiacutetos - P malariae
Esquizontes ndash P malariae
Aproximadamente 6 a 12 merozoiacutetos com arranjo de rosetas
Gametoacutecitos ndash P malariae
Ciclo evolutivo ndash HI
bull Ingestatildeo de hemaacutecias contendo gametoacutecitos durante o repasto sanguiacuteneo da fecircmea do anofelino
bull No intestino meacutedio do vetor gametogecircnese ndash Macrogametoacutecito ndash macrogameta feminino ndash Microgametoacutecito o processo de exflagelaccedilatildeo daacute
origem a 8 microgametas masculinos ndash Produccedilatildeo de ovo ou zigoto ndash O ovo encista na camada epitelial do intestino meacutedio
oocisto ndash Esporogonia liberaccedilatildeo de esporozoiacutetos
Ciclo evolutivo ndash HInvertebrado
ndash Os esporozoiacutetos satildeo transportados pelo hemolinfa ateacute as glacircndulas salivares do vetor ateacute atingirem o ducto salivar
bull Inoculaccedilatildeo no hospedeiro vertebrado atraveacutes da picada do inseto
Hemaacutecia com gametoacutecito
Fecircmeas de Anopheles sugam hemaacutecias com gametoacutecitos
CICLO NO INVERTEBRADO
No tubo digestivo
Zigoto
Penetraccedilatildeo na parede do tubo
digestivo
Migraccedilatildeo para as glacircndulas salivares
Desenvolvimento
Mosquito infectado
Diagnoacutestico
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado e espesso corado pelo Giemsa
bull Sangue colhido sem anticoagulante para melhor fixaccedilatildeo em lacircmina
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo espesso eacute mais eficiente para detecccedilatildeo da infecccedilatildeo
bull Esfregaccedilo delgado eacute mais eficiente para diferenciaccedilatildeo morfoloacutegica das espeacutecies
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo semiquantitativo
ndash Exame de 100 campos microscoacutepicos com resultado expresso pelo sistema de cruzes
Parasitos contados Nuacutemero de campos
microscoacutepicos cruzes
40 a 60 100 +2
1 1 +
2-20 1 ++
21-200 1 +++
+ 200 1 ++++
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo quantitativo derivado de anaacutelise semiquantitativa
Contagem de parasitos por campo
Cruzes Parasitos por mm3
40 a 60100 +2 200-300
1 + 301-500
2-20 ++ 501 - 10000
21-200 +++ 10001 ndash 100000
+ 200 ++++ 100000 ou mais
Diagnoacutestico
bull P falciparum
ndash Parte do ciclo celular aderido ao endoteacutelio capilar Encontro somente de trofozoitos e gametoacutecitos no sangue perifeacuterico
ndash Raramente os esquizontes satildeo encontrados no sangue perifeacuterico
Diagnoacutestico ndash Pvivax ndash Encontro de todas as formas de desenvolvimento ndash
trofozoiacuteto jovem maduro esquizontes e gametoacutecitos
ndash Os trofozoiacutetos maduros tecircm geralmente um aspecto irregular com extensotildees ameboacuteides em seu citoplasma
Diagnoacutestico ndash Pvivax
ndash Os gametoacutecitos femininos coram-se mais intensamente que os masculinos e apresentam nuacutecleo mais compacto geralmente em localizaccedilatildeo perifeacuterica
ndash O pigmento malaacuterico geralmente eacute abundante
Diagnoacutestico - Pmalariae
bull Realizado por meio de caracteriacutesticas morfoloacutegicas do parasito
ndash Verificaccedilatildeo em esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado
ndash Posiccedilatildeo equatorial do parasito
ndash Desenvolvimento sem deformaccedilatildeo do eritroacutecito
Diagnoacutestico
bull QBC ndash Teacutecnica que combina concentraccedilatildeo dos parasitos
pela centrifugaccedilatildeo do sangue em em microhematoacutecrito e a coloraccedilatildeo dos aacutecidos nucleacuteicos do parasito pelo fluorcromo laranja de acridina
ndash Utilizaccedilatildeo de tubos especiais e microscopia epifluorescente
ndash Teste raacutepido
ndash Alta sensibilidade
Diagnoacutestico
bull ParaSight-F ( Becton amp Dickinson)
ndash Teste raacutepido para captura da proteiacutena rica em histidina 2 de Pfalciparum( PfHRP2) e enzimas conservadas de 4 espeacutecies de plasmoacutedio (DHL e aldolase
ndash Utilizaccedilatildeo de fita de nitrocelulose contendo ac monoclonal
ndash Lise de uma gota de sangue
ndash A reaccedilatildeo eacute revelada com adiccedilatildeo de ac policlonal anti-HRP2 conjugado com lipossomas contendo corante
Diagnoacutestico
bull PCR
ndash Sensibilidade e especificidade maior do que o esfregaccedilo sanguiacuteneo
Taxonomia
bull Reino Animalia
bull Filo Nematoda
bull Classe Secernentea
bull Ordem Filariidea
bull Superfamiacutelia Filarioidea
bull FamiacuteliaOnchocercidae
bull GecircnerosWuchereria
bull Espeacutecie Wbancrofti
Formas evolutivas
bull Heteroxecircnico
bull Hospedeiro vertebrado homem
bull Hospedeiro intermediaacuterio Culex quinquefasciatus
bull Formas evolutivas ndash HV verme adulto (fecircmea e macho) localizados nos
vasos e gacircnglios linfaacuteticos da regiatildeo abdominal peacutelvica (perna e escroto) mamas e braccedilo
ndash microfilaacuterias eliminadas pelas fecircmeas graacutevidas Saem dos ductos linfaacuteticos e atingem circulaccedilatildeo sanguiacutenea
ndash HI larva L1 L2 e L3 (infectante)
Culex quinquefasciatus
Morfologia
bull Macho 35 a 4 cm x 01mm com extremidade posterior enrrolada ventralmente
bull Fecircmea 7 a 10cm x 03 mm com vagina exteriorizada em uma vulva localizada proacutexima agrave extremidade anterior
bull Microfilaacuteria Presenccedila de bainha e estilete bucal na parte anterior que as diferencia de outros filariacutedeos sanguiacuteneos Possuem 250 a 300 microm e uma grande qtde de nuacutecleos
bull Larva L3 possui aproximadamente 15 a 20 mm de comprimento
Microfilaacuteria
Ciclo evolutivo
bull Fecircmea do inseto realiza o hematofagismo noturno e ingere as microfilaacuterias
bull Estocircmago do vetor microfilaacuterias perdem a bainha atravessam a parede do estocircmago e migram para os muacutesculos toraacutecicos ndash L1
bull Apoacutes 20 dias a larva estaacute na forma infectante L3 medindo aproximadamente 2mm
bull Migraccedilatildeo da larva para a proboacutescida concentrando-se no laacutebio do moquito
Microfilaacuteria Presenccedila de bainha Cauda pontuda com nuacutecleos grandes largos e bem separados Nuacutecleos caudais em fila uacutenica
Ciclo evolutivo
bull Repasto sanguiacuteneo do inseto infectado
ndash As larvas L3 migram do laacutebio do vetor para a pele do HV
ndash Migram para os vasos linfaacuteticos e tornam-se vermes adultos
ndash Apoacutes 8 meses as fecircmeas graacutevidas produzem as primeiras microfilaacuterias
Periodicidade
bull Periodicidade noturna das microfilaacuterias
ndash Durante o dia localizam-se nos capilares profundos
ndash Durante a noite vasos sanguiacuteneos perifeacutericos
ndash Pico da microfilaremia meia-noite coincidindo com o horaacuterio de hematofagismo do inseto transmissor
Patologia
bull Periacuteodo assintomaacutetico bull Fase aguda bull Processos inflamatoacuterios produzidos por larvas L4 e adultos jovens
que colonizam as vias linfaacuteticas ndash Linfadenites linfonodos inguinais epitrocleanos e axilares com
desenvolvimento de granulomas com calcificaccedilatildeo apoacutes a morte dos vermes
ndash Linfangite inflamaccedilatildeo e dilataccedilatildeo dos vasos linfaacuteticos ndash Febre mal estar ndash Funiculite filariana linfangite do cordatildeo espermaacutetico e varicocele
bull Fase crocircnica ndash Hidrocele ndash Linfedema ndash Quiluacuteria ndash Elefantiacutease
Quiluacuteria
Patologia
bull Processos obstrutivos ndash Formaccedilatildeo de novelos envolvidos por reaccedilatildeo
inflamatoacuteria e pela formaccedilatildeo de fibrose
ndash Estase e congestatildeo da linfa produzindo linfoedema tecidual
ndash Extravasamento produzindo derrame linfaacutetico ascite linfaacutetica linfuacuteria linforreacuteia linfotoacuterax linfocele etc
ndash A ruptura de vasos linfaacuteticos para o interior do sistema excretor urinaacuterio daacute origem agrave quiluacuteria
Patologia
bull Complicaccedilotildees associadas agrave filariose
ndash Elefantiacutease
bull Caracterizada por processo inflamatoacuterio e fibrose crocircnica do oacutergatildeo atingido
bull Hipertrofia da derme do tecido conjuntivo aumento exagerado do volume do oacutergatildeo com queratinizaccedilatildeo e rugosidade
bull A pele perde a elasticidade resseca e se torna sujeita a infecccedilotildees bacterianas
Patologia
bull Permanecimento na aacuterea endecircmica
bull Nuacutemero de larvas inoculadas
bull Frequecircncia das re-infecccedilotildees
bull O nuacutemero de acasalamento dos vermes e suas localizaccedilotildees anatocircmicas
bull A sensibilizaccedilatildeo do organismo e a intensidade das reaccedilotildees inflamatoacuterias do paciente
bull As infecccedilotildees bacterianas associadas
Diagnoacutestico
bull Pesquisa de microfilaacuterias no sangue perifeacuterico ndash 20 40 ou 60 microL- de preferecircncia entre as 10 h da noite e 4h da manhatilde
ndash Gota espessa Coloraccedilatildeo de Giemsa
ndash Meacutetodos de concentraccedilatildeo Filtraccedilatildeo em membrana de policarbonato milipore ou nucleopore
ndash Meacutetodo de Knott
bull Na fase crocircnica as microfilaacuterias raramente satildeo detectadas no sangue perifeacuterico
Gota espessa
bull Possibilita a visualizaccedilatildeo da bainha fato que difere a microfilaria de W bancrofti de outro filariacutedeos sanguiacuteneos
bull Apresenta um baixo custo em comparaccedilatildeo com outras mais avanccediladas como a filtraccedilatildeo de sangue em membrana de policarbonato
bull Possui baixa sensibilidade natildeo indicada em situaccedilotildees em que os parasitados se mostram com baixa microfilaremia ou amicrofilarecircmicos
Concentraccedilatildeo
bull Baseia-se na passagem de sangue venoso atraveacutes de uma membrana (Milipore ou Nuclepore) de diacircmetro de 13 a 25 mm e poros de 5 ou 3 μm
bull O material retido na membrana sendo fixado corado e observado ao microscoacutepio
bull Essa teacutecnica assim como a de Knott permite a identificaccedilatildeo de indiviacuteduos com baixiacutessimas parasitemias (quantidade de microfilarias natildeo detectaacuteveis pela teacutecnica de gota espessa)
Teacutecnica de Knott
bull Retirar 2 ml de sangue total por punccedilatildeo venosa e colocar imediatamente em um tubo contendo 10 ml de formol a 2
bull Fechar o tubo e misture completamente invertendo-o e agitando-o O formol hemolisa as hemaacutecias mata fixa e distende as microfilaacuterias
bull Centrifugar o sangue a 1500 rpm por 5 minutos
bull Decantar o sobrenadante
Teacutecnica de Knott
bull Retirar o sedimento com uma pipeta Pasteur e espalhar a gota espessa sobre uma lacircmina
bull Deixar secar bem e corar com Giemsa
bull Examinar com objetiva de imersatildeo
bull Esta teacutecnica possibilita que o exame microscoacutepico laboratorial seja realizado vaacuterios dias apoacutes a coleta de material realizada no campo
Exames de imagem
bull Ultranossografia
ndash Possibilidade de visualizar os movimentos de vermes adultos vivos de W bancrofti em vaso linfaacutetico especificamente em vasos intraescrotais do cordatildeo espermaacutetico
ndash O movimento ativo e ininterrupto dos vermes adultos durante as 24 horas do dia eacute denominado sinal da ldquodanccedila das filaacuteriasrdquo
Diagnoacutestico soroloacutegico
bull Teste imunocromatograacutefico desenvolvido pelo ICT Diagnostic - ICT card
ndash Teste qualilativo
ndash Cartatildeo possui ac de antifilaacuteria e o controle eacute formado por ac anti Ig G humano
Plasmodium spp
Taxonomia
bull Reino Protozoa
bull FiloApicomplexa
bull Classe Sporozoea
bull Ordem Hemosporidiida
bull Famiacutelia Plasmodiidae
bull Gecircneros Plasmodium
bull Espeacutecie Pfalciparum Pvivax Povale e Pmalariae
Plasmodium
bull Ciclo bioloacutegico Hospedeiro vertebrado e invertebrado
bull Hospedeiro invertebrado ndash Vetor
ndash Fecircmeas hematoacutefagas do gecircnero Anopheles
ndash Brasil Anopheles (N)darlingi A (N) aquasalis A (N) albitarsis A (K) cruzii e A (K) bellator
ndash Possuem haacutebito noturno penetrando nas casas no crespuacutesculo saindo ao amanhecer
Plasmodium
bull Hospedeiro vertebrado homem
bull Transmissatildeo
ndash Vetor
ndash Transfusatildeo de sangue
ndash Compartilhamento de seringas
ndash Acidente com agulhas
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
bull Ciclo preacute-eritrociacutetico
ndash Forma inoculada esporozoiacutetos
ndash A fecircmea do anofelino infectado inocula no homem as formas infectantes localizadas na saliva
ndash Os esporozoiacutetas permancem na circulaccedilatildeo por aproximadamente uma hora
ndash Invadem os hepatoacutecitos e se diferenciam em trofozoiacutetas (criptozoiacuteto)
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
ndash Esquizogonia e formaccedilatildeo de esquizontes
ndash Divisatildeo nuclear e liberaccedilatildeo de merozoiacutetos
ndash Aproximadamente 10000 merozoiacutetos por hepatoacutecito
ndash Rompimento do hepatoacutecito e liberaccedilatildeo de merozoiacutetos na circulaccedilatildeo
ndash Duraccedilatildeo do ciclo aprox 1 a 2 semanas
Ciclo evolutivo
bull PVivax e Povale
ndash Alguns esporozoiacutetos geneticamente diferentes ficam na forma latente nos hepatoacutecitos permanecendo muitos meses Satildeo classificados como hipnozoiacuteto
ndash Satildeo responsaacuteveis pelas recaiacutedas tardias e formas de malaacuteria com periacuteodo de encubaccedilatildeo longo ndash 6 a 9 meses
FASE HEPAacuteTICA OU EXOERITROCIacuteTICA
Hepatoacutecito
FIacuteGADO
Invasatildeo do hepatoacutecito
Reproduccedilatildeo Assexuada
Esporozoiacutetos Lise dos hepatoacutecitos
Liberaccedilatildeo dos protozoaacuterios na corrente sanguumliacutenea
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
bull Ciclo eritrociacutetico
ndash Os merozoiacutetos invadem as hemaacutecias
ndash Diferenciaccedilatildeo em trofozoiacutetos
ndash Esquizogonia esquizonte
ndash Produccedilatildeo de merozoiacutetos e rompimento da hemaacutecia
ndash Merozoiacutetos invasatildeo de novas hemaacutecias
ndash Apoacutes algumas geraccedilotildees os merozoiacutetos natildeo mais se dividem e se diferenciam em gametoacutecitos ndash micro e macrogametoacutecito
FASE ERITROCIacuteTICA
Hepatoacutecito destruiacutedo pelos protozoaacuterios
Penetraccedilatildeo dos protozoaacuterios
Reproduccedilatildeo assexuada
Protozoaacuterios destroem as hemaacutecias
Diferenciaccedilatildeo em gametoacutecitos
Fecircmeas de Anopheles sugam hemaacutecias com gametoacutecitos
Ciclo no hospedeiro invertebrado
Ocorre nas hemaacutecias ou Eritroacutecitos
nas hemaacutecias
Protozoaacuterio no interior da hemaacutecia
Hemaacutecia com gametoacutecito
T trofozoiacuteto Em esquizonte com merozoiacuteto
Fase eritrociacutetica
bull Ciclo sanguiacuteneo ndash Pfalciparum P vivax e Povale 48 horas
ndash Pmalariae 72 horas
ndash Fonte de nutriccedilatildeo do Plasmodium no ciclo sanguiacuteneo hemoglobina
ndash Produccedilatildeo do pigmento malaacuterico hemozoiacutena bull Granulaccedilotildees de Schuffner Plasmodium vivax
bull Granulaccedilotildees de Maurer P falciparum
bull Granulaccedilotildees de Ziemann P malariae
ndash Fagocitose pelas ceacutelulas de Kuppffer e macroacutefagos do baccedilo
Trofozoiacutetos Pfalciparum
Trofozoiacutetos Pfalciparum
Esquizonte ndash P falciparum
Raros no sangue perifeacuterico Possuem 2 a 24 merozoiacutetos
Ocupam 23 do gloacutebulo vermelho
Gametoacutecitos Pfalciparum
Ciclo evolutivo Pvivax
Esquizonte ndash P vivax
Satildeo grandes e ameboacuteides Cromatina organizada em duas ou mais massas
Possuem 2 a 24 merozoiacutetos com pontos de cromatina
Gametoacutecito ndash Pvivax
Macrogametoacutecitos satildeo redondos ou ovais e ocupam toda ceacutelula hospedeira O citoplasma eacute geralmente corado de azul mais escuro e conteacutem pigmento marrom Microgametoacutecitos satildeo geralmente do tamanho de um RBC natildeo infectados com citoplasma corados de azul paacutelido rosa ou cinza
Trofozoiacutetos - P malariae
Esquizontes ndash P malariae
Aproximadamente 6 a 12 merozoiacutetos com arranjo de rosetas
Gametoacutecitos ndash P malariae
Ciclo evolutivo ndash HI
bull Ingestatildeo de hemaacutecias contendo gametoacutecitos durante o repasto sanguiacuteneo da fecircmea do anofelino
bull No intestino meacutedio do vetor gametogecircnese ndash Macrogametoacutecito ndash macrogameta feminino ndash Microgametoacutecito o processo de exflagelaccedilatildeo daacute
origem a 8 microgametas masculinos ndash Produccedilatildeo de ovo ou zigoto ndash O ovo encista na camada epitelial do intestino meacutedio
oocisto ndash Esporogonia liberaccedilatildeo de esporozoiacutetos
Ciclo evolutivo ndash HInvertebrado
ndash Os esporozoiacutetos satildeo transportados pelo hemolinfa ateacute as glacircndulas salivares do vetor ateacute atingirem o ducto salivar
bull Inoculaccedilatildeo no hospedeiro vertebrado atraveacutes da picada do inseto
Hemaacutecia com gametoacutecito
Fecircmeas de Anopheles sugam hemaacutecias com gametoacutecitos
CICLO NO INVERTEBRADO
No tubo digestivo
Zigoto
Penetraccedilatildeo na parede do tubo
digestivo
Migraccedilatildeo para as glacircndulas salivares
Desenvolvimento
Mosquito infectado
Diagnoacutestico
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado e espesso corado pelo Giemsa
bull Sangue colhido sem anticoagulante para melhor fixaccedilatildeo em lacircmina
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo espesso eacute mais eficiente para detecccedilatildeo da infecccedilatildeo
bull Esfregaccedilo delgado eacute mais eficiente para diferenciaccedilatildeo morfoloacutegica das espeacutecies
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo semiquantitativo
ndash Exame de 100 campos microscoacutepicos com resultado expresso pelo sistema de cruzes
Parasitos contados Nuacutemero de campos
microscoacutepicos cruzes
40 a 60 100 +2
1 1 +
2-20 1 ++
21-200 1 +++
+ 200 1 ++++
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo quantitativo derivado de anaacutelise semiquantitativa
Contagem de parasitos por campo
Cruzes Parasitos por mm3
40 a 60100 +2 200-300
1 + 301-500
2-20 ++ 501 - 10000
21-200 +++ 10001 ndash 100000
+ 200 ++++ 100000 ou mais
Diagnoacutestico
bull P falciparum
ndash Parte do ciclo celular aderido ao endoteacutelio capilar Encontro somente de trofozoitos e gametoacutecitos no sangue perifeacuterico
ndash Raramente os esquizontes satildeo encontrados no sangue perifeacuterico
Diagnoacutestico ndash Pvivax ndash Encontro de todas as formas de desenvolvimento ndash
trofozoiacuteto jovem maduro esquizontes e gametoacutecitos
ndash Os trofozoiacutetos maduros tecircm geralmente um aspecto irregular com extensotildees ameboacuteides em seu citoplasma
Diagnoacutestico ndash Pvivax
ndash Os gametoacutecitos femininos coram-se mais intensamente que os masculinos e apresentam nuacutecleo mais compacto geralmente em localizaccedilatildeo perifeacuterica
ndash O pigmento malaacuterico geralmente eacute abundante
Diagnoacutestico - Pmalariae
bull Realizado por meio de caracteriacutesticas morfoloacutegicas do parasito
ndash Verificaccedilatildeo em esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado
ndash Posiccedilatildeo equatorial do parasito
ndash Desenvolvimento sem deformaccedilatildeo do eritroacutecito
Diagnoacutestico
bull QBC ndash Teacutecnica que combina concentraccedilatildeo dos parasitos
pela centrifugaccedilatildeo do sangue em em microhematoacutecrito e a coloraccedilatildeo dos aacutecidos nucleacuteicos do parasito pelo fluorcromo laranja de acridina
ndash Utilizaccedilatildeo de tubos especiais e microscopia epifluorescente
ndash Teste raacutepido
ndash Alta sensibilidade
Diagnoacutestico
bull ParaSight-F ( Becton amp Dickinson)
ndash Teste raacutepido para captura da proteiacutena rica em histidina 2 de Pfalciparum( PfHRP2) e enzimas conservadas de 4 espeacutecies de plasmoacutedio (DHL e aldolase
ndash Utilizaccedilatildeo de fita de nitrocelulose contendo ac monoclonal
ndash Lise de uma gota de sangue
ndash A reaccedilatildeo eacute revelada com adiccedilatildeo de ac policlonal anti-HRP2 conjugado com lipossomas contendo corante
Diagnoacutestico
bull PCR
ndash Sensibilidade e especificidade maior do que o esfregaccedilo sanguiacuteneo
Formas evolutivas
bull Heteroxecircnico
bull Hospedeiro vertebrado homem
bull Hospedeiro intermediaacuterio Culex quinquefasciatus
bull Formas evolutivas ndash HV verme adulto (fecircmea e macho) localizados nos
vasos e gacircnglios linfaacuteticos da regiatildeo abdominal peacutelvica (perna e escroto) mamas e braccedilo
ndash microfilaacuterias eliminadas pelas fecircmeas graacutevidas Saem dos ductos linfaacuteticos e atingem circulaccedilatildeo sanguiacutenea
ndash HI larva L1 L2 e L3 (infectante)
Culex quinquefasciatus
Morfologia
bull Macho 35 a 4 cm x 01mm com extremidade posterior enrrolada ventralmente
bull Fecircmea 7 a 10cm x 03 mm com vagina exteriorizada em uma vulva localizada proacutexima agrave extremidade anterior
bull Microfilaacuteria Presenccedila de bainha e estilete bucal na parte anterior que as diferencia de outros filariacutedeos sanguiacuteneos Possuem 250 a 300 microm e uma grande qtde de nuacutecleos
bull Larva L3 possui aproximadamente 15 a 20 mm de comprimento
Microfilaacuteria
Ciclo evolutivo
bull Fecircmea do inseto realiza o hematofagismo noturno e ingere as microfilaacuterias
bull Estocircmago do vetor microfilaacuterias perdem a bainha atravessam a parede do estocircmago e migram para os muacutesculos toraacutecicos ndash L1
bull Apoacutes 20 dias a larva estaacute na forma infectante L3 medindo aproximadamente 2mm
bull Migraccedilatildeo da larva para a proboacutescida concentrando-se no laacutebio do moquito
Microfilaacuteria Presenccedila de bainha Cauda pontuda com nuacutecleos grandes largos e bem separados Nuacutecleos caudais em fila uacutenica
Ciclo evolutivo
bull Repasto sanguiacuteneo do inseto infectado
ndash As larvas L3 migram do laacutebio do vetor para a pele do HV
ndash Migram para os vasos linfaacuteticos e tornam-se vermes adultos
ndash Apoacutes 8 meses as fecircmeas graacutevidas produzem as primeiras microfilaacuterias
Periodicidade
bull Periodicidade noturna das microfilaacuterias
ndash Durante o dia localizam-se nos capilares profundos
ndash Durante a noite vasos sanguiacuteneos perifeacutericos
ndash Pico da microfilaremia meia-noite coincidindo com o horaacuterio de hematofagismo do inseto transmissor
Patologia
bull Periacuteodo assintomaacutetico bull Fase aguda bull Processos inflamatoacuterios produzidos por larvas L4 e adultos jovens
que colonizam as vias linfaacuteticas ndash Linfadenites linfonodos inguinais epitrocleanos e axilares com
desenvolvimento de granulomas com calcificaccedilatildeo apoacutes a morte dos vermes
ndash Linfangite inflamaccedilatildeo e dilataccedilatildeo dos vasos linfaacuteticos ndash Febre mal estar ndash Funiculite filariana linfangite do cordatildeo espermaacutetico e varicocele
bull Fase crocircnica ndash Hidrocele ndash Linfedema ndash Quiluacuteria ndash Elefantiacutease
Quiluacuteria
Patologia
bull Processos obstrutivos ndash Formaccedilatildeo de novelos envolvidos por reaccedilatildeo
inflamatoacuteria e pela formaccedilatildeo de fibrose
ndash Estase e congestatildeo da linfa produzindo linfoedema tecidual
ndash Extravasamento produzindo derrame linfaacutetico ascite linfaacutetica linfuacuteria linforreacuteia linfotoacuterax linfocele etc
ndash A ruptura de vasos linfaacuteticos para o interior do sistema excretor urinaacuterio daacute origem agrave quiluacuteria
Patologia
bull Complicaccedilotildees associadas agrave filariose
ndash Elefantiacutease
bull Caracterizada por processo inflamatoacuterio e fibrose crocircnica do oacutergatildeo atingido
bull Hipertrofia da derme do tecido conjuntivo aumento exagerado do volume do oacutergatildeo com queratinizaccedilatildeo e rugosidade
bull A pele perde a elasticidade resseca e se torna sujeita a infecccedilotildees bacterianas
Patologia
bull Permanecimento na aacuterea endecircmica
bull Nuacutemero de larvas inoculadas
bull Frequecircncia das re-infecccedilotildees
bull O nuacutemero de acasalamento dos vermes e suas localizaccedilotildees anatocircmicas
bull A sensibilizaccedilatildeo do organismo e a intensidade das reaccedilotildees inflamatoacuterias do paciente
bull As infecccedilotildees bacterianas associadas
Diagnoacutestico
bull Pesquisa de microfilaacuterias no sangue perifeacuterico ndash 20 40 ou 60 microL- de preferecircncia entre as 10 h da noite e 4h da manhatilde
ndash Gota espessa Coloraccedilatildeo de Giemsa
ndash Meacutetodos de concentraccedilatildeo Filtraccedilatildeo em membrana de policarbonato milipore ou nucleopore
ndash Meacutetodo de Knott
bull Na fase crocircnica as microfilaacuterias raramente satildeo detectadas no sangue perifeacuterico
Gota espessa
bull Possibilita a visualizaccedilatildeo da bainha fato que difere a microfilaria de W bancrofti de outro filariacutedeos sanguiacuteneos
bull Apresenta um baixo custo em comparaccedilatildeo com outras mais avanccediladas como a filtraccedilatildeo de sangue em membrana de policarbonato
bull Possui baixa sensibilidade natildeo indicada em situaccedilotildees em que os parasitados se mostram com baixa microfilaremia ou amicrofilarecircmicos
Concentraccedilatildeo
bull Baseia-se na passagem de sangue venoso atraveacutes de uma membrana (Milipore ou Nuclepore) de diacircmetro de 13 a 25 mm e poros de 5 ou 3 μm
bull O material retido na membrana sendo fixado corado e observado ao microscoacutepio
bull Essa teacutecnica assim como a de Knott permite a identificaccedilatildeo de indiviacuteduos com baixiacutessimas parasitemias (quantidade de microfilarias natildeo detectaacuteveis pela teacutecnica de gota espessa)
Teacutecnica de Knott
bull Retirar 2 ml de sangue total por punccedilatildeo venosa e colocar imediatamente em um tubo contendo 10 ml de formol a 2
bull Fechar o tubo e misture completamente invertendo-o e agitando-o O formol hemolisa as hemaacutecias mata fixa e distende as microfilaacuterias
bull Centrifugar o sangue a 1500 rpm por 5 minutos
bull Decantar o sobrenadante
Teacutecnica de Knott
bull Retirar o sedimento com uma pipeta Pasteur e espalhar a gota espessa sobre uma lacircmina
bull Deixar secar bem e corar com Giemsa
bull Examinar com objetiva de imersatildeo
bull Esta teacutecnica possibilita que o exame microscoacutepico laboratorial seja realizado vaacuterios dias apoacutes a coleta de material realizada no campo
Exames de imagem
bull Ultranossografia
ndash Possibilidade de visualizar os movimentos de vermes adultos vivos de W bancrofti em vaso linfaacutetico especificamente em vasos intraescrotais do cordatildeo espermaacutetico
ndash O movimento ativo e ininterrupto dos vermes adultos durante as 24 horas do dia eacute denominado sinal da ldquodanccedila das filaacuteriasrdquo
Diagnoacutestico soroloacutegico
bull Teste imunocromatograacutefico desenvolvido pelo ICT Diagnostic - ICT card
ndash Teste qualilativo
ndash Cartatildeo possui ac de antifilaacuteria e o controle eacute formado por ac anti Ig G humano
Plasmodium spp
Taxonomia
bull Reino Protozoa
bull FiloApicomplexa
bull Classe Sporozoea
bull Ordem Hemosporidiida
bull Famiacutelia Plasmodiidae
bull Gecircneros Plasmodium
bull Espeacutecie Pfalciparum Pvivax Povale e Pmalariae
Plasmodium
bull Ciclo bioloacutegico Hospedeiro vertebrado e invertebrado
bull Hospedeiro invertebrado ndash Vetor
ndash Fecircmeas hematoacutefagas do gecircnero Anopheles
ndash Brasil Anopheles (N)darlingi A (N) aquasalis A (N) albitarsis A (K) cruzii e A (K) bellator
ndash Possuem haacutebito noturno penetrando nas casas no crespuacutesculo saindo ao amanhecer
Plasmodium
bull Hospedeiro vertebrado homem
bull Transmissatildeo
ndash Vetor
ndash Transfusatildeo de sangue
ndash Compartilhamento de seringas
ndash Acidente com agulhas
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
bull Ciclo preacute-eritrociacutetico
ndash Forma inoculada esporozoiacutetos
ndash A fecircmea do anofelino infectado inocula no homem as formas infectantes localizadas na saliva
ndash Os esporozoiacutetas permancem na circulaccedilatildeo por aproximadamente uma hora
ndash Invadem os hepatoacutecitos e se diferenciam em trofozoiacutetas (criptozoiacuteto)
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
ndash Esquizogonia e formaccedilatildeo de esquizontes
ndash Divisatildeo nuclear e liberaccedilatildeo de merozoiacutetos
ndash Aproximadamente 10000 merozoiacutetos por hepatoacutecito
ndash Rompimento do hepatoacutecito e liberaccedilatildeo de merozoiacutetos na circulaccedilatildeo
ndash Duraccedilatildeo do ciclo aprox 1 a 2 semanas
Ciclo evolutivo
bull PVivax e Povale
ndash Alguns esporozoiacutetos geneticamente diferentes ficam na forma latente nos hepatoacutecitos permanecendo muitos meses Satildeo classificados como hipnozoiacuteto
ndash Satildeo responsaacuteveis pelas recaiacutedas tardias e formas de malaacuteria com periacuteodo de encubaccedilatildeo longo ndash 6 a 9 meses
FASE HEPAacuteTICA OU EXOERITROCIacuteTICA
Hepatoacutecito
FIacuteGADO
Invasatildeo do hepatoacutecito
Reproduccedilatildeo Assexuada
Esporozoiacutetos Lise dos hepatoacutecitos
Liberaccedilatildeo dos protozoaacuterios na corrente sanguumliacutenea
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
bull Ciclo eritrociacutetico
ndash Os merozoiacutetos invadem as hemaacutecias
ndash Diferenciaccedilatildeo em trofozoiacutetos
ndash Esquizogonia esquizonte
ndash Produccedilatildeo de merozoiacutetos e rompimento da hemaacutecia
ndash Merozoiacutetos invasatildeo de novas hemaacutecias
ndash Apoacutes algumas geraccedilotildees os merozoiacutetos natildeo mais se dividem e se diferenciam em gametoacutecitos ndash micro e macrogametoacutecito
FASE ERITROCIacuteTICA
Hepatoacutecito destruiacutedo pelos protozoaacuterios
Penetraccedilatildeo dos protozoaacuterios
Reproduccedilatildeo assexuada
Protozoaacuterios destroem as hemaacutecias
Diferenciaccedilatildeo em gametoacutecitos
Fecircmeas de Anopheles sugam hemaacutecias com gametoacutecitos
Ciclo no hospedeiro invertebrado
Ocorre nas hemaacutecias ou Eritroacutecitos
nas hemaacutecias
Protozoaacuterio no interior da hemaacutecia
Hemaacutecia com gametoacutecito
T trofozoiacuteto Em esquizonte com merozoiacuteto
Fase eritrociacutetica
bull Ciclo sanguiacuteneo ndash Pfalciparum P vivax e Povale 48 horas
ndash Pmalariae 72 horas
ndash Fonte de nutriccedilatildeo do Plasmodium no ciclo sanguiacuteneo hemoglobina
ndash Produccedilatildeo do pigmento malaacuterico hemozoiacutena bull Granulaccedilotildees de Schuffner Plasmodium vivax
bull Granulaccedilotildees de Maurer P falciparum
bull Granulaccedilotildees de Ziemann P malariae
ndash Fagocitose pelas ceacutelulas de Kuppffer e macroacutefagos do baccedilo
Trofozoiacutetos Pfalciparum
Trofozoiacutetos Pfalciparum
Esquizonte ndash P falciparum
Raros no sangue perifeacuterico Possuem 2 a 24 merozoiacutetos
Ocupam 23 do gloacutebulo vermelho
Gametoacutecitos Pfalciparum
Ciclo evolutivo Pvivax
Esquizonte ndash P vivax
Satildeo grandes e ameboacuteides Cromatina organizada em duas ou mais massas
Possuem 2 a 24 merozoiacutetos com pontos de cromatina
Gametoacutecito ndash Pvivax
Macrogametoacutecitos satildeo redondos ou ovais e ocupam toda ceacutelula hospedeira O citoplasma eacute geralmente corado de azul mais escuro e conteacutem pigmento marrom Microgametoacutecitos satildeo geralmente do tamanho de um RBC natildeo infectados com citoplasma corados de azul paacutelido rosa ou cinza
Trofozoiacutetos - P malariae
Esquizontes ndash P malariae
Aproximadamente 6 a 12 merozoiacutetos com arranjo de rosetas
Gametoacutecitos ndash P malariae
Ciclo evolutivo ndash HI
bull Ingestatildeo de hemaacutecias contendo gametoacutecitos durante o repasto sanguiacuteneo da fecircmea do anofelino
bull No intestino meacutedio do vetor gametogecircnese ndash Macrogametoacutecito ndash macrogameta feminino ndash Microgametoacutecito o processo de exflagelaccedilatildeo daacute
origem a 8 microgametas masculinos ndash Produccedilatildeo de ovo ou zigoto ndash O ovo encista na camada epitelial do intestino meacutedio
oocisto ndash Esporogonia liberaccedilatildeo de esporozoiacutetos
Ciclo evolutivo ndash HInvertebrado
ndash Os esporozoiacutetos satildeo transportados pelo hemolinfa ateacute as glacircndulas salivares do vetor ateacute atingirem o ducto salivar
bull Inoculaccedilatildeo no hospedeiro vertebrado atraveacutes da picada do inseto
Hemaacutecia com gametoacutecito
Fecircmeas de Anopheles sugam hemaacutecias com gametoacutecitos
CICLO NO INVERTEBRADO
No tubo digestivo
Zigoto
Penetraccedilatildeo na parede do tubo
digestivo
Migraccedilatildeo para as glacircndulas salivares
Desenvolvimento
Mosquito infectado
Diagnoacutestico
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado e espesso corado pelo Giemsa
bull Sangue colhido sem anticoagulante para melhor fixaccedilatildeo em lacircmina
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo espesso eacute mais eficiente para detecccedilatildeo da infecccedilatildeo
bull Esfregaccedilo delgado eacute mais eficiente para diferenciaccedilatildeo morfoloacutegica das espeacutecies
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo semiquantitativo
ndash Exame de 100 campos microscoacutepicos com resultado expresso pelo sistema de cruzes
Parasitos contados Nuacutemero de campos
microscoacutepicos cruzes
40 a 60 100 +2
1 1 +
2-20 1 ++
21-200 1 +++
+ 200 1 ++++
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo quantitativo derivado de anaacutelise semiquantitativa
Contagem de parasitos por campo
Cruzes Parasitos por mm3
40 a 60100 +2 200-300
1 + 301-500
2-20 ++ 501 - 10000
21-200 +++ 10001 ndash 100000
+ 200 ++++ 100000 ou mais
Diagnoacutestico
bull P falciparum
ndash Parte do ciclo celular aderido ao endoteacutelio capilar Encontro somente de trofozoitos e gametoacutecitos no sangue perifeacuterico
ndash Raramente os esquizontes satildeo encontrados no sangue perifeacuterico
Diagnoacutestico ndash Pvivax ndash Encontro de todas as formas de desenvolvimento ndash
trofozoiacuteto jovem maduro esquizontes e gametoacutecitos
ndash Os trofozoiacutetos maduros tecircm geralmente um aspecto irregular com extensotildees ameboacuteides em seu citoplasma
Diagnoacutestico ndash Pvivax
ndash Os gametoacutecitos femininos coram-se mais intensamente que os masculinos e apresentam nuacutecleo mais compacto geralmente em localizaccedilatildeo perifeacuterica
ndash O pigmento malaacuterico geralmente eacute abundante
Diagnoacutestico - Pmalariae
bull Realizado por meio de caracteriacutesticas morfoloacutegicas do parasito
ndash Verificaccedilatildeo em esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado
ndash Posiccedilatildeo equatorial do parasito
ndash Desenvolvimento sem deformaccedilatildeo do eritroacutecito
Diagnoacutestico
bull QBC ndash Teacutecnica que combina concentraccedilatildeo dos parasitos
pela centrifugaccedilatildeo do sangue em em microhematoacutecrito e a coloraccedilatildeo dos aacutecidos nucleacuteicos do parasito pelo fluorcromo laranja de acridina
ndash Utilizaccedilatildeo de tubos especiais e microscopia epifluorescente
ndash Teste raacutepido
ndash Alta sensibilidade
Diagnoacutestico
bull ParaSight-F ( Becton amp Dickinson)
ndash Teste raacutepido para captura da proteiacutena rica em histidina 2 de Pfalciparum( PfHRP2) e enzimas conservadas de 4 espeacutecies de plasmoacutedio (DHL e aldolase
ndash Utilizaccedilatildeo de fita de nitrocelulose contendo ac monoclonal
ndash Lise de uma gota de sangue
ndash A reaccedilatildeo eacute revelada com adiccedilatildeo de ac policlonal anti-HRP2 conjugado com lipossomas contendo corante
Diagnoacutestico
bull PCR
ndash Sensibilidade e especificidade maior do que o esfregaccedilo sanguiacuteneo
Culex quinquefasciatus
Morfologia
bull Macho 35 a 4 cm x 01mm com extremidade posterior enrrolada ventralmente
bull Fecircmea 7 a 10cm x 03 mm com vagina exteriorizada em uma vulva localizada proacutexima agrave extremidade anterior
bull Microfilaacuteria Presenccedila de bainha e estilete bucal na parte anterior que as diferencia de outros filariacutedeos sanguiacuteneos Possuem 250 a 300 microm e uma grande qtde de nuacutecleos
bull Larva L3 possui aproximadamente 15 a 20 mm de comprimento
Microfilaacuteria
Ciclo evolutivo
bull Fecircmea do inseto realiza o hematofagismo noturno e ingere as microfilaacuterias
bull Estocircmago do vetor microfilaacuterias perdem a bainha atravessam a parede do estocircmago e migram para os muacutesculos toraacutecicos ndash L1
bull Apoacutes 20 dias a larva estaacute na forma infectante L3 medindo aproximadamente 2mm
bull Migraccedilatildeo da larva para a proboacutescida concentrando-se no laacutebio do moquito
Microfilaacuteria Presenccedila de bainha Cauda pontuda com nuacutecleos grandes largos e bem separados Nuacutecleos caudais em fila uacutenica
Ciclo evolutivo
bull Repasto sanguiacuteneo do inseto infectado
ndash As larvas L3 migram do laacutebio do vetor para a pele do HV
ndash Migram para os vasos linfaacuteticos e tornam-se vermes adultos
ndash Apoacutes 8 meses as fecircmeas graacutevidas produzem as primeiras microfilaacuterias
Periodicidade
bull Periodicidade noturna das microfilaacuterias
ndash Durante o dia localizam-se nos capilares profundos
ndash Durante a noite vasos sanguiacuteneos perifeacutericos
ndash Pico da microfilaremia meia-noite coincidindo com o horaacuterio de hematofagismo do inseto transmissor
Patologia
bull Periacuteodo assintomaacutetico bull Fase aguda bull Processos inflamatoacuterios produzidos por larvas L4 e adultos jovens
que colonizam as vias linfaacuteticas ndash Linfadenites linfonodos inguinais epitrocleanos e axilares com
desenvolvimento de granulomas com calcificaccedilatildeo apoacutes a morte dos vermes
ndash Linfangite inflamaccedilatildeo e dilataccedilatildeo dos vasos linfaacuteticos ndash Febre mal estar ndash Funiculite filariana linfangite do cordatildeo espermaacutetico e varicocele
bull Fase crocircnica ndash Hidrocele ndash Linfedema ndash Quiluacuteria ndash Elefantiacutease
Quiluacuteria
Patologia
bull Processos obstrutivos ndash Formaccedilatildeo de novelos envolvidos por reaccedilatildeo
inflamatoacuteria e pela formaccedilatildeo de fibrose
ndash Estase e congestatildeo da linfa produzindo linfoedema tecidual
ndash Extravasamento produzindo derrame linfaacutetico ascite linfaacutetica linfuacuteria linforreacuteia linfotoacuterax linfocele etc
ndash A ruptura de vasos linfaacuteticos para o interior do sistema excretor urinaacuterio daacute origem agrave quiluacuteria
Patologia
bull Complicaccedilotildees associadas agrave filariose
ndash Elefantiacutease
bull Caracterizada por processo inflamatoacuterio e fibrose crocircnica do oacutergatildeo atingido
bull Hipertrofia da derme do tecido conjuntivo aumento exagerado do volume do oacutergatildeo com queratinizaccedilatildeo e rugosidade
bull A pele perde a elasticidade resseca e se torna sujeita a infecccedilotildees bacterianas
Patologia
bull Permanecimento na aacuterea endecircmica
bull Nuacutemero de larvas inoculadas
bull Frequecircncia das re-infecccedilotildees
bull O nuacutemero de acasalamento dos vermes e suas localizaccedilotildees anatocircmicas
bull A sensibilizaccedilatildeo do organismo e a intensidade das reaccedilotildees inflamatoacuterias do paciente
bull As infecccedilotildees bacterianas associadas
Diagnoacutestico
bull Pesquisa de microfilaacuterias no sangue perifeacuterico ndash 20 40 ou 60 microL- de preferecircncia entre as 10 h da noite e 4h da manhatilde
ndash Gota espessa Coloraccedilatildeo de Giemsa
ndash Meacutetodos de concentraccedilatildeo Filtraccedilatildeo em membrana de policarbonato milipore ou nucleopore
ndash Meacutetodo de Knott
bull Na fase crocircnica as microfilaacuterias raramente satildeo detectadas no sangue perifeacuterico
Gota espessa
bull Possibilita a visualizaccedilatildeo da bainha fato que difere a microfilaria de W bancrofti de outro filariacutedeos sanguiacuteneos
bull Apresenta um baixo custo em comparaccedilatildeo com outras mais avanccediladas como a filtraccedilatildeo de sangue em membrana de policarbonato
bull Possui baixa sensibilidade natildeo indicada em situaccedilotildees em que os parasitados se mostram com baixa microfilaremia ou amicrofilarecircmicos
Concentraccedilatildeo
bull Baseia-se na passagem de sangue venoso atraveacutes de uma membrana (Milipore ou Nuclepore) de diacircmetro de 13 a 25 mm e poros de 5 ou 3 μm
bull O material retido na membrana sendo fixado corado e observado ao microscoacutepio
bull Essa teacutecnica assim como a de Knott permite a identificaccedilatildeo de indiviacuteduos com baixiacutessimas parasitemias (quantidade de microfilarias natildeo detectaacuteveis pela teacutecnica de gota espessa)
Teacutecnica de Knott
bull Retirar 2 ml de sangue total por punccedilatildeo venosa e colocar imediatamente em um tubo contendo 10 ml de formol a 2
bull Fechar o tubo e misture completamente invertendo-o e agitando-o O formol hemolisa as hemaacutecias mata fixa e distende as microfilaacuterias
bull Centrifugar o sangue a 1500 rpm por 5 minutos
bull Decantar o sobrenadante
Teacutecnica de Knott
bull Retirar o sedimento com uma pipeta Pasteur e espalhar a gota espessa sobre uma lacircmina
bull Deixar secar bem e corar com Giemsa
bull Examinar com objetiva de imersatildeo
bull Esta teacutecnica possibilita que o exame microscoacutepico laboratorial seja realizado vaacuterios dias apoacutes a coleta de material realizada no campo
Exames de imagem
bull Ultranossografia
ndash Possibilidade de visualizar os movimentos de vermes adultos vivos de W bancrofti em vaso linfaacutetico especificamente em vasos intraescrotais do cordatildeo espermaacutetico
ndash O movimento ativo e ininterrupto dos vermes adultos durante as 24 horas do dia eacute denominado sinal da ldquodanccedila das filaacuteriasrdquo
Diagnoacutestico soroloacutegico
bull Teste imunocromatograacutefico desenvolvido pelo ICT Diagnostic - ICT card
ndash Teste qualilativo
ndash Cartatildeo possui ac de antifilaacuteria e o controle eacute formado por ac anti Ig G humano
Plasmodium spp
Taxonomia
bull Reino Protozoa
bull FiloApicomplexa
bull Classe Sporozoea
bull Ordem Hemosporidiida
bull Famiacutelia Plasmodiidae
bull Gecircneros Plasmodium
bull Espeacutecie Pfalciparum Pvivax Povale e Pmalariae
Plasmodium
bull Ciclo bioloacutegico Hospedeiro vertebrado e invertebrado
bull Hospedeiro invertebrado ndash Vetor
ndash Fecircmeas hematoacutefagas do gecircnero Anopheles
ndash Brasil Anopheles (N)darlingi A (N) aquasalis A (N) albitarsis A (K) cruzii e A (K) bellator
ndash Possuem haacutebito noturno penetrando nas casas no crespuacutesculo saindo ao amanhecer
Plasmodium
bull Hospedeiro vertebrado homem
bull Transmissatildeo
ndash Vetor
ndash Transfusatildeo de sangue
ndash Compartilhamento de seringas
ndash Acidente com agulhas
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
bull Ciclo preacute-eritrociacutetico
ndash Forma inoculada esporozoiacutetos
ndash A fecircmea do anofelino infectado inocula no homem as formas infectantes localizadas na saliva
ndash Os esporozoiacutetas permancem na circulaccedilatildeo por aproximadamente uma hora
ndash Invadem os hepatoacutecitos e se diferenciam em trofozoiacutetas (criptozoiacuteto)
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
ndash Esquizogonia e formaccedilatildeo de esquizontes
ndash Divisatildeo nuclear e liberaccedilatildeo de merozoiacutetos
ndash Aproximadamente 10000 merozoiacutetos por hepatoacutecito
ndash Rompimento do hepatoacutecito e liberaccedilatildeo de merozoiacutetos na circulaccedilatildeo
ndash Duraccedilatildeo do ciclo aprox 1 a 2 semanas
Ciclo evolutivo
bull PVivax e Povale
ndash Alguns esporozoiacutetos geneticamente diferentes ficam na forma latente nos hepatoacutecitos permanecendo muitos meses Satildeo classificados como hipnozoiacuteto
ndash Satildeo responsaacuteveis pelas recaiacutedas tardias e formas de malaacuteria com periacuteodo de encubaccedilatildeo longo ndash 6 a 9 meses
FASE HEPAacuteTICA OU EXOERITROCIacuteTICA
Hepatoacutecito
FIacuteGADO
Invasatildeo do hepatoacutecito
Reproduccedilatildeo Assexuada
Esporozoiacutetos Lise dos hepatoacutecitos
Liberaccedilatildeo dos protozoaacuterios na corrente sanguumliacutenea
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
bull Ciclo eritrociacutetico
ndash Os merozoiacutetos invadem as hemaacutecias
ndash Diferenciaccedilatildeo em trofozoiacutetos
ndash Esquizogonia esquizonte
ndash Produccedilatildeo de merozoiacutetos e rompimento da hemaacutecia
ndash Merozoiacutetos invasatildeo de novas hemaacutecias
ndash Apoacutes algumas geraccedilotildees os merozoiacutetos natildeo mais se dividem e se diferenciam em gametoacutecitos ndash micro e macrogametoacutecito
FASE ERITROCIacuteTICA
Hepatoacutecito destruiacutedo pelos protozoaacuterios
Penetraccedilatildeo dos protozoaacuterios
Reproduccedilatildeo assexuada
Protozoaacuterios destroem as hemaacutecias
Diferenciaccedilatildeo em gametoacutecitos
Fecircmeas de Anopheles sugam hemaacutecias com gametoacutecitos
Ciclo no hospedeiro invertebrado
Ocorre nas hemaacutecias ou Eritroacutecitos
nas hemaacutecias
Protozoaacuterio no interior da hemaacutecia
Hemaacutecia com gametoacutecito
T trofozoiacuteto Em esquizonte com merozoiacuteto
Fase eritrociacutetica
bull Ciclo sanguiacuteneo ndash Pfalciparum P vivax e Povale 48 horas
ndash Pmalariae 72 horas
ndash Fonte de nutriccedilatildeo do Plasmodium no ciclo sanguiacuteneo hemoglobina
ndash Produccedilatildeo do pigmento malaacuterico hemozoiacutena bull Granulaccedilotildees de Schuffner Plasmodium vivax
bull Granulaccedilotildees de Maurer P falciparum
bull Granulaccedilotildees de Ziemann P malariae
ndash Fagocitose pelas ceacutelulas de Kuppffer e macroacutefagos do baccedilo
Trofozoiacutetos Pfalciparum
Trofozoiacutetos Pfalciparum
Esquizonte ndash P falciparum
Raros no sangue perifeacuterico Possuem 2 a 24 merozoiacutetos
Ocupam 23 do gloacutebulo vermelho
Gametoacutecitos Pfalciparum
Ciclo evolutivo Pvivax
Esquizonte ndash P vivax
Satildeo grandes e ameboacuteides Cromatina organizada em duas ou mais massas
Possuem 2 a 24 merozoiacutetos com pontos de cromatina
Gametoacutecito ndash Pvivax
Macrogametoacutecitos satildeo redondos ou ovais e ocupam toda ceacutelula hospedeira O citoplasma eacute geralmente corado de azul mais escuro e conteacutem pigmento marrom Microgametoacutecitos satildeo geralmente do tamanho de um RBC natildeo infectados com citoplasma corados de azul paacutelido rosa ou cinza
Trofozoiacutetos - P malariae
Esquizontes ndash P malariae
Aproximadamente 6 a 12 merozoiacutetos com arranjo de rosetas
Gametoacutecitos ndash P malariae
Ciclo evolutivo ndash HI
bull Ingestatildeo de hemaacutecias contendo gametoacutecitos durante o repasto sanguiacuteneo da fecircmea do anofelino
bull No intestino meacutedio do vetor gametogecircnese ndash Macrogametoacutecito ndash macrogameta feminino ndash Microgametoacutecito o processo de exflagelaccedilatildeo daacute
origem a 8 microgametas masculinos ndash Produccedilatildeo de ovo ou zigoto ndash O ovo encista na camada epitelial do intestino meacutedio
oocisto ndash Esporogonia liberaccedilatildeo de esporozoiacutetos
Ciclo evolutivo ndash HInvertebrado
ndash Os esporozoiacutetos satildeo transportados pelo hemolinfa ateacute as glacircndulas salivares do vetor ateacute atingirem o ducto salivar
bull Inoculaccedilatildeo no hospedeiro vertebrado atraveacutes da picada do inseto
Hemaacutecia com gametoacutecito
Fecircmeas de Anopheles sugam hemaacutecias com gametoacutecitos
CICLO NO INVERTEBRADO
No tubo digestivo
Zigoto
Penetraccedilatildeo na parede do tubo
digestivo
Migraccedilatildeo para as glacircndulas salivares
Desenvolvimento
Mosquito infectado
Diagnoacutestico
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado e espesso corado pelo Giemsa
bull Sangue colhido sem anticoagulante para melhor fixaccedilatildeo em lacircmina
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo espesso eacute mais eficiente para detecccedilatildeo da infecccedilatildeo
bull Esfregaccedilo delgado eacute mais eficiente para diferenciaccedilatildeo morfoloacutegica das espeacutecies
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo semiquantitativo
ndash Exame de 100 campos microscoacutepicos com resultado expresso pelo sistema de cruzes
Parasitos contados Nuacutemero de campos
microscoacutepicos cruzes
40 a 60 100 +2
1 1 +
2-20 1 ++
21-200 1 +++
+ 200 1 ++++
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo quantitativo derivado de anaacutelise semiquantitativa
Contagem de parasitos por campo
Cruzes Parasitos por mm3
40 a 60100 +2 200-300
1 + 301-500
2-20 ++ 501 - 10000
21-200 +++ 10001 ndash 100000
+ 200 ++++ 100000 ou mais
Diagnoacutestico
bull P falciparum
ndash Parte do ciclo celular aderido ao endoteacutelio capilar Encontro somente de trofozoitos e gametoacutecitos no sangue perifeacuterico
ndash Raramente os esquizontes satildeo encontrados no sangue perifeacuterico
Diagnoacutestico ndash Pvivax ndash Encontro de todas as formas de desenvolvimento ndash
trofozoiacuteto jovem maduro esquizontes e gametoacutecitos
ndash Os trofozoiacutetos maduros tecircm geralmente um aspecto irregular com extensotildees ameboacuteides em seu citoplasma
Diagnoacutestico ndash Pvivax
ndash Os gametoacutecitos femininos coram-se mais intensamente que os masculinos e apresentam nuacutecleo mais compacto geralmente em localizaccedilatildeo perifeacuterica
ndash O pigmento malaacuterico geralmente eacute abundante
Diagnoacutestico - Pmalariae
bull Realizado por meio de caracteriacutesticas morfoloacutegicas do parasito
ndash Verificaccedilatildeo em esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado
ndash Posiccedilatildeo equatorial do parasito
ndash Desenvolvimento sem deformaccedilatildeo do eritroacutecito
Diagnoacutestico
bull QBC ndash Teacutecnica que combina concentraccedilatildeo dos parasitos
pela centrifugaccedilatildeo do sangue em em microhematoacutecrito e a coloraccedilatildeo dos aacutecidos nucleacuteicos do parasito pelo fluorcromo laranja de acridina
ndash Utilizaccedilatildeo de tubos especiais e microscopia epifluorescente
ndash Teste raacutepido
ndash Alta sensibilidade
Diagnoacutestico
bull ParaSight-F ( Becton amp Dickinson)
ndash Teste raacutepido para captura da proteiacutena rica em histidina 2 de Pfalciparum( PfHRP2) e enzimas conservadas de 4 espeacutecies de plasmoacutedio (DHL e aldolase
ndash Utilizaccedilatildeo de fita de nitrocelulose contendo ac monoclonal
ndash Lise de uma gota de sangue
ndash A reaccedilatildeo eacute revelada com adiccedilatildeo de ac policlonal anti-HRP2 conjugado com lipossomas contendo corante
Diagnoacutestico
bull PCR
ndash Sensibilidade e especificidade maior do que o esfregaccedilo sanguiacuteneo
Morfologia
bull Macho 35 a 4 cm x 01mm com extremidade posterior enrrolada ventralmente
bull Fecircmea 7 a 10cm x 03 mm com vagina exteriorizada em uma vulva localizada proacutexima agrave extremidade anterior
bull Microfilaacuteria Presenccedila de bainha e estilete bucal na parte anterior que as diferencia de outros filariacutedeos sanguiacuteneos Possuem 250 a 300 microm e uma grande qtde de nuacutecleos
bull Larva L3 possui aproximadamente 15 a 20 mm de comprimento
Microfilaacuteria
Ciclo evolutivo
bull Fecircmea do inseto realiza o hematofagismo noturno e ingere as microfilaacuterias
bull Estocircmago do vetor microfilaacuterias perdem a bainha atravessam a parede do estocircmago e migram para os muacutesculos toraacutecicos ndash L1
bull Apoacutes 20 dias a larva estaacute na forma infectante L3 medindo aproximadamente 2mm
bull Migraccedilatildeo da larva para a proboacutescida concentrando-se no laacutebio do moquito
Microfilaacuteria Presenccedila de bainha Cauda pontuda com nuacutecleos grandes largos e bem separados Nuacutecleos caudais em fila uacutenica
Ciclo evolutivo
bull Repasto sanguiacuteneo do inseto infectado
ndash As larvas L3 migram do laacutebio do vetor para a pele do HV
ndash Migram para os vasos linfaacuteticos e tornam-se vermes adultos
ndash Apoacutes 8 meses as fecircmeas graacutevidas produzem as primeiras microfilaacuterias
Periodicidade
bull Periodicidade noturna das microfilaacuterias
ndash Durante o dia localizam-se nos capilares profundos
ndash Durante a noite vasos sanguiacuteneos perifeacutericos
ndash Pico da microfilaremia meia-noite coincidindo com o horaacuterio de hematofagismo do inseto transmissor
Patologia
bull Periacuteodo assintomaacutetico bull Fase aguda bull Processos inflamatoacuterios produzidos por larvas L4 e adultos jovens
que colonizam as vias linfaacuteticas ndash Linfadenites linfonodos inguinais epitrocleanos e axilares com
desenvolvimento de granulomas com calcificaccedilatildeo apoacutes a morte dos vermes
ndash Linfangite inflamaccedilatildeo e dilataccedilatildeo dos vasos linfaacuteticos ndash Febre mal estar ndash Funiculite filariana linfangite do cordatildeo espermaacutetico e varicocele
bull Fase crocircnica ndash Hidrocele ndash Linfedema ndash Quiluacuteria ndash Elefantiacutease
Quiluacuteria
Patologia
bull Processos obstrutivos ndash Formaccedilatildeo de novelos envolvidos por reaccedilatildeo
inflamatoacuteria e pela formaccedilatildeo de fibrose
ndash Estase e congestatildeo da linfa produzindo linfoedema tecidual
ndash Extravasamento produzindo derrame linfaacutetico ascite linfaacutetica linfuacuteria linforreacuteia linfotoacuterax linfocele etc
ndash A ruptura de vasos linfaacuteticos para o interior do sistema excretor urinaacuterio daacute origem agrave quiluacuteria
Patologia
bull Complicaccedilotildees associadas agrave filariose
ndash Elefantiacutease
bull Caracterizada por processo inflamatoacuterio e fibrose crocircnica do oacutergatildeo atingido
bull Hipertrofia da derme do tecido conjuntivo aumento exagerado do volume do oacutergatildeo com queratinizaccedilatildeo e rugosidade
bull A pele perde a elasticidade resseca e se torna sujeita a infecccedilotildees bacterianas
Patologia
bull Permanecimento na aacuterea endecircmica
bull Nuacutemero de larvas inoculadas
bull Frequecircncia das re-infecccedilotildees
bull O nuacutemero de acasalamento dos vermes e suas localizaccedilotildees anatocircmicas
bull A sensibilizaccedilatildeo do organismo e a intensidade das reaccedilotildees inflamatoacuterias do paciente
bull As infecccedilotildees bacterianas associadas
Diagnoacutestico
bull Pesquisa de microfilaacuterias no sangue perifeacuterico ndash 20 40 ou 60 microL- de preferecircncia entre as 10 h da noite e 4h da manhatilde
ndash Gota espessa Coloraccedilatildeo de Giemsa
ndash Meacutetodos de concentraccedilatildeo Filtraccedilatildeo em membrana de policarbonato milipore ou nucleopore
ndash Meacutetodo de Knott
bull Na fase crocircnica as microfilaacuterias raramente satildeo detectadas no sangue perifeacuterico
Gota espessa
bull Possibilita a visualizaccedilatildeo da bainha fato que difere a microfilaria de W bancrofti de outro filariacutedeos sanguiacuteneos
bull Apresenta um baixo custo em comparaccedilatildeo com outras mais avanccediladas como a filtraccedilatildeo de sangue em membrana de policarbonato
bull Possui baixa sensibilidade natildeo indicada em situaccedilotildees em que os parasitados se mostram com baixa microfilaremia ou amicrofilarecircmicos
Concentraccedilatildeo
bull Baseia-se na passagem de sangue venoso atraveacutes de uma membrana (Milipore ou Nuclepore) de diacircmetro de 13 a 25 mm e poros de 5 ou 3 μm
bull O material retido na membrana sendo fixado corado e observado ao microscoacutepio
bull Essa teacutecnica assim como a de Knott permite a identificaccedilatildeo de indiviacuteduos com baixiacutessimas parasitemias (quantidade de microfilarias natildeo detectaacuteveis pela teacutecnica de gota espessa)
Teacutecnica de Knott
bull Retirar 2 ml de sangue total por punccedilatildeo venosa e colocar imediatamente em um tubo contendo 10 ml de formol a 2
bull Fechar o tubo e misture completamente invertendo-o e agitando-o O formol hemolisa as hemaacutecias mata fixa e distende as microfilaacuterias
bull Centrifugar o sangue a 1500 rpm por 5 minutos
bull Decantar o sobrenadante
Teacutecnica de Knott
bull Retirar o sedimento com uma pipeta Pasteur e espalhar a gota espessa sobre uma lacircmina
bull Deixar secar bem e corar com Giemsa
bull Examinar com objetiva de imersatildeo
bull Esta teacutecnica possibilita que o exame microscoacutepico laboratorial seja realizado vaacuterios dias apoacutes a coleta de material realizada no campo
Exames de imagem
bull Ultranossografia
ndash Possibilidade de visualizar os movimentos de vermes adultos vivos de W bancrofti em vaso linfaacutetico especificamente em vasos intraescrotais do cordatildeo espermaacutetico
ndash O movimento ativo e ininterrupto dos vermes adultos durante as 24 horas do dia eacute denominado sinal da ldquodanccedila das filaacuteriasrdquo
Diagnoacutestico soroloacutegico
bull Teste imunocromatograacutefico desenvolvido pelo ICT Diagnostic - ICT card
ndash Teste qualilativo
ndash Cartatildeo possui ac de antifilaacuteria e o controle eacute formado por ac anti Ig G humano
Plasmodium spp
Taxonomia
bull Reino Protozoa
bull FiloApicomplexa
bull Classe Sporozoea
bull Ordem Hemosporidiida
bull Famiacutelia Plasmodiidae
bull Gecircneros Plasmodium
bull Espeacutecie Pfalciparum Pvivax Povale e Pmalariae
Plasmodium
bull Ciclo bioloacutegico Hospedeiro vertebrado e invertebrado
bull Hospedeiro invertebrado ndash Vetor
ndash Fecircmeas hematoacutefagas do gecircnero Anopheles
ndash Brasil Anopheles (N)darlingi A (N) aquasalis A (N) albitarsis A (K) cruzii e A (K) bellator
ndash Possuem haacutebito noturno penetrando nas casas no crespuacutesculo saindo ao amanhecer
Plasmodium
bull Hospedeiro vertebrado homem
bull Transmissatildeo
ndash Vetor
ndash Transfusatildeo de sangue
ndash Compartilhamento de seringas
ndash Acidente com agulhas
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
bull Ciclo preacute-eritrociacutetico
ndash Forma inoculada esporozoiacutetos
ndash A fecircmea do anofelino infectado inocula no homem as formas infectantes localizadas na saliva
ndash Os esporozoiacutetas permancem na circulaccedilatildeo por aproximadamente uma hora
ndash Invadem os hepatoacutecitos e se diferenciam em trofozoiacutetas (criptozoiacuteto)
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
ndash Esquizogonia e formaccedilatildeo de esquizontes
ndash Divisatildeo nuclear e liberaccedilatildeo de merozoiacutetos
ndash Aproximadamente 10000 merozoiacutetos por hepatoacutecito
ndash Rompimento do hepatoacutecito e liberaccedilatildeo de merozoiacutetos na circulaccedilatildeo
ndash Duraccedilatildeo do ciclo aprox 1 a 2 semanas
Ciclo evolutivo
bull PVivax e Povale
ndash Alguns esporozoiacutetos geneticamente diferentes ficam na forma latente nos hepatoacutecitos permanecendo muitos meses Satildeo classificados como hipnozoiacuteto
ndash Satildeo responsaacuteveis pelas recaiacutedas tardias e formas de malaacuteria com periacuteodo de encubaccedilatildeo longo ndash 6 a 9 meses
FASE HEPAacuteTICA OU EXOERITROCIacuteTICA
Hepatoacutecito
FIacuteGADO
Invasatildeo do hepatoacutecito
Reproduccedilatildeo Assexuada
Esporozoiacutetos Lise dos hepatoacutecitos
Liberaccedilatildeo dos protozoaacuterios na corrente sanguumliacutenea
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
bull Ciclo eritrociacutetico
ndash Os merozoiacutetos invadem as hemaacutecias
ndash Diferenciaccedilatildeo em trofozoiacutetos
ndash Esquizogonia esquizonte
ndash Produccedilatildeo de merozoiacutetos e rompimento da hemaacutecia
ndash Merozoiacutetos invasatildeo de novas hemaacutecias
ndash Apoacutes algumas geraccedilotildees os merozoiacutetos natildeo mais se dividem e se diferenciam em gametoacutecitos ndash micro e macrogametoacutecito
FASE ERITROCIacuteTICA
Hepatoacutecito destruiacutedo pelos protozoaacuterios
Penetraccedilatildeo dos protozoaacuterios
Reproduccedilatildeo assexuada
Protozoaacuterios destroem as hemaacutecias
Diferenciaccedilatildeo em gametoacutecitos
Fecircmeas de Anopheles sugam hemaacutecias com gametoacutecitos
Ciclo no hospedeiro invertebrado
Ocorre nas hemaacutecias ou Eritroacutecitos
nas hemaacutecias
Protozoaacuterio no interior da hemaacutecia
Hemaacutecia com gametoacutecito
T trofozoiacuteto Em esquizonte com merozoiacuteto
Fase eritrociacutetica
bull Ciclo sanguiacuteneo ndash Pfalciparum P vivax e Povale 48 horas
ndash Pmalariae 72 horas
ndash Fonte de nutriccedilatildeo do Plasmodium no ciclo sanguiacuteneo hemoglobina
ndash Produccedilatildeo do pigmento malaacuterico hemozoiacutena bull Granulaccedilotildees de Schuffner Plasmodium vivax
bull Granulaccedilotildees de Maurer P falciparum
bull Granulaccedilotildees de Ziemann P malariae
ndash Fagocitose pelas ceacutelulas de Kuppffer e macroacutefagos do baccedilo
Trofozoiacutetos Pfalciparum
Trofozoiacutetos Pfalciparum
Esquizonte ndash P falciparum
Raros no sangue perifeacuterico Possuem 2 a 24 merozoiacutetos
Ocupam 23 do gloacutebulo vermelho
Gametoacutecitos Pfalciparum
Ciclo evolutivo Pvivax
Esquizonte ndash P vivax
Satildeo grandes e ameboacuteides Cromatina organizada em duas ou mais massas
Possuem 2 a 24 merozoiacutetos com pontos de cromatina
Gametoacutecito ndash Pvivax
Macrogametoacutecitos satildeo redondos ou ovais e ocupam toda ceacutelula hospedeira O citoplasma eacute geralmente corado de azul mais escuro e conteacutem pigmento marrom Microgametoacutecitos satildeo geralmente do tamanho de um RBC natildeo infectados com citoplasma corados de azul paacutelido rosa ou cinza
Trofozoiacutetos - P malariae
Esquizontes ndash P malariae
Aproximadamente 6 a 12 merozoiacutetos com arranjo de rosetas
Gametoacutecitos ndash P malariae
Ciclo evolutivo ndash HI
bull Ingestatildeo de hemaacutecias contendo gametoacutecitos durante o repasto sanguiacuteneo da fecircmea do anofelino
bull No intestino meacutedio do vetor gametogecircnese ndash Macrogametoacutecito ndash macrogameta feminino ndash Microgametoacutecito o processo de exflagelaccedilatildeo daacute
origem a 8 microgametas masculinos ndash Produccedilatildeo de ovo ou zigoto ndash O ovo encista na camada epitelial do intestino meacutedio
oocisto ndash Esporogonia liberaccedilatildeo de esporozoiacutetos
Ciclo evolutivo ndash HInvertebrado
ndash Os esporozoiacutetos satildeo transportados pelo hemolinfa ateacute as glacircndulas salivares do vetor ateacute atingirem o ducto salivar
bull Inoculaccedilatildeo no hospedeiro vertebrado atraveacutes da picada do inseto
Hemaacutecia com gametoacutecito
Fecircmeas de Anopheles sugam hemaacutecias com gametoacutecitos
CICLO NO INVERTEBRADO
No tubo digestivo
Zigoto
Penetraccedilatildeo na parede do tubo
digestivo
Migraccedilatildeo para as glacircndulas salivares
Desenvolvimento
Mosquito infectado
Diagnoacutestico
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado e espesso corado pelo Giemsa
bull Sangue colhido sem anticoagulante para melhor fixaccedilatildeo em lacircmina
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo espesso eacute mais eficiente para detecccedilatildeo da infecccedilatildeo
bull Esfregaccedilo delgado eacute mais eficiente para diferenciaccedilatildeo morfoloacutegica das espeacutecies
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo semiquantitativo
ndash Exame de 100 campos microscoacutepicos com resultado expresso pelo sistema de cruzes
Parasitos contados Nuacutemero de campos
microscoacutepicos cruzes
40 a 60 100 +2
1 1 +
2-20 1 ++
21-200 1 +++
+ 200 1 ++++
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo quantitativo derivado de anaacutelise semiquantitativa
Contagem de parasitos por campo
Cruzes Parasitos por mm3
40 a 60100 +2 200-300
1 + 301-500
2-20 ++ 501 - 10000
21-200 +++ 10001 ndash 100000
+ 200 ++++ 100000 ou mais
Diagnoacutestico
bull P falciparum
ndash Parte do ciclo celular aderido ao endoteacutelio capilar Encontro somente de trofozoitos e gametoacutecitos no sangue perifeacuterico
ndash Raramente os esquizontes satildeo encontrados no sangue perifeacuterico
Diagnoacutestico ndash Pvivax ndash Encontro de todas as formas de desenvolvimento ndash
trofozoiacuteto jovem maduro esquizontes e gametoacutecitos
ndash Os trofozoiacutetos maduros tecircm geralmente um aspecto irregular com extensotildees ameboacuteides em seu citoplasma
Diagnoacutestico ndash Pvivax
ndash Os gametoacutecitos femininos coram-se mais intensamente que os masculinos e apresentam nuacutecleo mais compacto geralmente em localizaccedilatildeo perifeacuterica
ndash O pigmento malaacuterico geralmente eacute abundante
Diagnoacutestico - Pmalariae
bull Realizado por meio de caracteriacutesticas morfoloacutegicas do parasito
ndash Verificaccedilatildeo em esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado
ndash Posiccedilatildeo equatorial do parasito
ndash Desenvolvimento sem deformaccedilatildeo do eritroacutecito
Diagnoacutestico
bull QBC ndash Teacutecnica que combina concentraccedilatildeo dos parasitos
pela centrifugaccedilatildeo do sangue em em microhematoacutecrito e a coloraccedilatildeo dos aacutecidos nucleacuteicos do parasito pelo fluorcromo laranja de acridina
ndash Utilizaccedilatildeo de tubos especiais e microscopia epifluorescente
ndash Teste raacutepido
ndash Alta sensibilidade
Diagnoacutestico
bull ParaSight-F ( Becton amp Dickinson)
ndash Teste raacutepido para captura da proteiacutena rica em histidina 2 de Pfalciparum( PfHRP2) e enzimas conservadas de 4 espeacutecies de plasmoacutedio (DHL e aldolase
ndash Utilizaccedilatildeo de fita de nitrocelulose contendo ac monoclonal
ndash Lise de uma gota de sangue
ndash A reaccedilatildeo eacute revelada com adiccedilatildeo de ac policlonal anti-HRP2 conjugado com lipossomas contendo corante
Diagnoacutestico
bull PCR
ndash Sensibilidade e especificidade maior do que o esfregaccedilo sanguiacuteneo
Microfilaacuteria
Ciclo evolutivo
bull Fecircmea do inseto realiza o hematofagismo noturno e ingere as microfilaacuterias
bull Estocircmago do vetor microfilaacuterias perdem a bainha atravessam a parede do estocircmago e migram para os muacutesculos toraacutecicos ndash L1
bull Apoacutes 20 dias a larva estaacute na forma infectante L3 medindo aproximadamente 2mm
bull Migraccedilatildeo da larva para a proboacutescida concentrando-se no laacutebio do moquito
Microfilaacuteria Presenccedila de bainha Cauda pontuda com nuacutecleos grandes largos e bem separados Nuacutecleos caudais em fila uacutenica
Ciclo evolutivo
bull Repasto sanguiacuteneo do inseto infectado
ndash As larvas L3 migram do laacutebio do vetor para a pele do HV
ndash Migram para os vasos linfaacuteticos e tornam-se vermes adultos
ndash Apoacutes 8 meses as fecircmeas graacutevidas produzem as primeiras microfilaacuterias
Periodicidade
bull Periodicidade noturna das microfilaacuterias
ndash Durante o dia localizam-se nos capilares profundos
ndash Durante a noite vasos sanguiacuteneos perifeacutericos
ndash Pico da microfilaremia meia-noite coincidindo com o horaacuterio de hematofagismo do inseto transmissor
Patologia
bull Periacuteodo assintomaacutetico bull Fase aguda bull Processos inflamatoacuterios produzidos por larvas L4 e adultos jovens
que colonizam as vias linfaacuteticas ndash Linfadenites linfonodos inguinais epitrocleanos e axilares com
desenvolvimento de granulomas com calcificaccedilatildeo apoacutes a morte dos vermes
ndash Linfangite inflamaccedilatildeo e dilataccedilatildeo dos vasos linfaacuteticos ndash Febre mal estar ndash Funiculite filariana linfangite do cordatildeo espermaacutetico e varicocele
bull Fase crocircnica ndash Hidrocele ndash Linfedema ndash Quiluacuteria ndash Elefantiacutease
Quiluacuteria
Patologia
bull Processos obstrutivos ndash Formaccedilatildeo de novelos envolvidos por reaccedilatildeo
inflamatoacuteria e pela formaccedilatildeo de fibrose
ndash Estase e congestatildeo da linfa produzindo linfoedema tecidual
ndash Extravasamento produzindo derrame linfaacutetico ascite linfaacutetica linfuacuteria linforreacuteia linfotoacuterax linfocele etc
ndash A ruptura de vasos linfaacuteticos para o interior do sistema excretor urinaacuterio daacute origem agrave quiluacuteria
Patologia
bull Complicaccedilotildees associadas agrave filariose
ndash Elefantiacutease
bull Caracterizada por processo inflamatoacuterio e fibrose crocircnica do oacutergatildeo atingido
bull Hipertrofia da derme do tecido conjuntivo aumento exagerado do volume do oacutergatildeo com queratinizaccedilatildeo e rugosidade
bull A pele perde a elasticidade resseca e se torna sujeita a infecccedilotildees bacterianas
Patologia
bull Permanecimento na aacuterea endecircmica
bull Nuacutemero de larvas inoculadas
bull Frequecircncia das re-infecccedilotildees
bull O nuacutemero de acasalamento dos vermes e suas localizaccedilotildees anatocircmicas
bull A sensibilizaccedilatildeo do organismo e a intensidade das reaccedilotildees inflamatoacuterias do paciente
bull As infecccedilotildees bacterianas associadas
Diagnoacutestico
bull Pesquisa de microfilaacuterias no sangue perifeacuterico ndash 20 40 ou 60 microL- de preferecircncia entre as 10 h da noite e 4h da manhatilde
ndash Gota espessa Coloraccedilatildeo de Giemsa
ndash Meacutetodos de concentraccedilatildeo Filtraccedilatildeo em membrana de policarbonato milipore ou nucleopore
ndash Meacutetodo de Knott
bull Na fase crocircnica as microfilaacuterias raramente satildeo detectadas no sangue perifeacuterico
Gota espessa
bull Possibilita a visualizaccedilatildeo da bainha fato que difere a microfilaria de W bancrofti de outro filariacutedeos sanguiacuteneos
bull Apresenta um baixo custo em comparaccedilatildeo com outras mais avanccediladas como a filtraccedilatildeo de sangue em membrana de policarbonato
bull Possui baixa sensibilidade natildeo indicada em situaccedilotildees em que os parasitados se mostram com baixa microfilaremia ou amicrofilarecircmicos
Concentraccedilatildeo
bull Baseia-se na passagem de sangue venoso atraveacutes de uma membrana (Milipore ou Nuclepore) de diacircmetro de 13 a 25 mm e poros de 5 ou 3 μm
bull O material retido na membrana sendo fixado corado e observado ao microscoacutepio
bull Essa teacutecnica assim como a de Knott permite a identificaccedilatildeo de indiviacuteduos com baixiacutessimas parasitemias (quantidade de microfilarias natildeo detectaacuteveis pela teacutecnica de gota espessa)
Teacutecnica de Knott
bull Retirar 2 ml de sangue total por punccedilatildeo venosa e colocar imediatamente em um tubo contendo 10 ml de formol a 2
bull Fechar o tubo e misture completamente invertendo-o e agitando-o O formol hemolisa as hemaacutecias mata fixa e distende as microfilaacuterias
bull Centrifugar o sangue a 1500 rpm por 5 minutos
bull Decantar o sobrenadante
Teacutecnica de Knott
bull Retirar o sedimento com uma pipeta Pasteur e espalhar a gota espessa sobre uma lacircmina
bull Deixar secar bem e corar com Giemsa
bull Examinar com objetiva de imersatildeo
bull Esta teacutecnica possibilita que o exame microscoacutepico laboratorial seja realizado vaacuterios dias apoacutes a coleta de material realizada no campo
Exames de imagem
bull Ultranossografia
ndash Possibilidade de visualizar os movimentos de vermes adultos vivos de W bancrofti em vaso linfaacutetico especificamente em vasos intraescrotais do cordatildeo espermaacutetico
ndash O movimento ativo e ininterrupto dos vermes adultos durante as 24 horas do dia eacute denominado sinal da ldquodanccedila das filaacuteriasrdquo
Diagnoacutestico soroloacutegico
bull Teste imunocromatograacutefico desenvolvido pelo ICT Diagnostic - ICT card
ndash Teste qualilativo
ndash Cartatildeo possui ac de antifilaacuteria e o controle eacute formado por ac anti Ig G humano
Plasmodium spp
Taxonomia
bull Reino Protozoa
bull FiloApicomplexa
bull Classe Sporozoea
bull Ordem Hemosporidiida
bull Famiacutelia Plasmodiidae
bull Gecircneros Plasmodium
bull Espeacutecie Pfalciparum Pvivax Povale e Pmalariae
Plasmodium
bull Ciclo bioloacutegico Hospedeiro vertebrado e invertebrado
bull Hospedeiro invertebrado ndash Vetor
ndash Fecircmeas hematoacutefagas do gecircnero Anopheles
ndash Brasil Anopheles (N)darlingi A (N) aquasalis A (N) albitarsis A (K) cruzii e A (K) bellator
ndash Possuem haacutebito noturno penetrando nas casas no crespuacutesculo saindo ao amanhecer
Plasmodium
bull Hospedeiro vertebrado homem
bull Transmissatildeo
ndash Vetor
ndash Transfusatildeo de sangue
ndash Compartilhamento de seringas
ndash Acidente com agulhas
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
bull Ciclo preacute-eritrociacutetico
ndash Forma inoculada esporozoiacutetos
ndash A fecircmea do anofelino infectado inocula no homem as formas infectantes localizadas na saliva
ndash Os esporozoiacutetas permancem na circulaccedilatildeo por aproximadamente uma hora
ndash Invadem os hepatoacutecitos e se diferenciam em trofozoiacutetas (criptozoiacuteto)
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
ndash Esquizogonia e formaccedilatildeo de esquizontes
ndash Divisatildeo nuclear e liberaccedilatildeo de merozoiacutetos
ndash Aproximadamente 10000 merozoiacutetos por hepatoacutecito
ndash Rompimento do hepatoacutecito e liberaccedilatildeo de merozoiacutetos na circulaccedilatildeo
ndash Duraccedilatildeo do ciclo aprox 1 a 2 semanas
Ciclo evolutivo
bull PVivax e Povale
ndash Alguns esporozoiacutetos geneticamente diferentes ficam na forma latente nos hepatoacutecitos permanecendo muitos meses Satildeo classificados como hipnozoiacuteto
ndash Satildeo responsaacuteveis pelas recaiacutedas tardias e formas de malaacuteria com periacuteodo de encubaccedilatildeo longo ndash 6 a 9 meses
FASE HEPAacuteTICA OU EXOERITROCIacuteTICA
Hepatoacutecito
FIacuteGADO
Invasatildeo do hepatoacutecito
Reproduccedilatildeo Assexuada
Esporozoiacutetos Lise dos hepatoacutecitos
Liberaccedilatildeo dos protozoaacuterios na corrente sanguumliacutenea
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
bull Ciclo eritrociacutetico
ndash Os merozoiacutetos invadem as hemaacutecias
ndash Diferenciaccedilatildeo em trofozoiacutetos
ndash Esquizogonia esquizonte
ndash Produccedilatildeo de merozoiacutetos e rompimento da hemaacutecia
ndash Merozoiacutetos invasatildeo de novas hemaacutecias
ndash Apoacutes algumas geraccedilotildees os merozoiacutetos natildeo mais se dividem e se diferenciam em gametoacutecitos ndash micro e macrogametoacutecito
FASE ERITROCIacuteTICA
Hepatoacutecito destruiacutedo pelos protozoaacuterios
Penetraccedilatildeo dos protozoaacuterios
Reproduccedilatildeo assexuada
Protozoaacuterios destroem as hemaacutecias
Diferenciaccedilatildeo em gametoacutecitos
Fecircmeas de Anopheles sugam hemaacutecias com gametoacutecitos
Ciclo no hospedeiro invertebrado
Ocorre nas hemaacutecias ou Eritroacutecitos
nas hemaacutecias
Protozoaacuterio no interior da hemaacutecia
Hemaacutecia com gametoacutecito
T trofozoiacuteto Em esquizonte com merozoiacuteto
Fase eritrociacutetica
bull Ciclo sanguiacuteneo ndash Pfalciparum P vivax e Povale 48 horas
ndash Pmalariae 72 horas
ndash Fonte de nutriccedilatildeo do Plasmodium no ciclo sanguiacuteneo hemoglobina
ndash Produccedilatildeo do pigmento malaacuterico hemozoiacutena bull Granulaccedilotildees de Schuffner Plasmodium vivax
bull Granulaccedilotildees de Maurer P falciparum
bull Granulaccedilotildees de Ziemann P malariae
ndash Fagocitose pelas ceacutelulas de Kuppffer e macroacutefagos do baccedilo
Trofozoiacutetos Pfalciparum
Trofozoiacutetos Pfalciparum
Esquizonte ndash P falciparum
Raros no sangue perifeacuterico Possuem 2 a 24 merozoiacutetos
Ocupam 23 do gloacutebulo vermelho
Gametoacutecitos Pfalciparum
Ciclo evolutivo Pvivax
Esquizonte ndash P vivax
Satildeo grandes e ameboacuteides Cromatina organizada em duas ou mais massas
Possuem 2 a 24 merozoiacutetos com pontos de cromatina
Gametoacutecito ndash Pvivax
Macrogametoacutecitos satildeo redondos ou ovais e ocupam toda ceacutelula hospedeira O citoplasma eacute geralmente corado de azul mais escuro e conteacutem pigmento marrom Microgametoacutecitos satildeo geralmente do tamanho de um RBC natildeo infectados com citoplasma corados de azul paacutelido rosa ou cinza
Trofozoiacutetos - P malariae
Esquizontes ndash P malariae
Aproximadamente 6 a 12 merozoiacutetos com arranjo de rosetas
Gametoacutecitos ndash P malariae
Ciclo evolutivo ndash HI
bull Ingestatildeo de hemaacutecias contendo gametoacutecitos durante o repasto sanguiacuteneo da fecircmea do anofelino
bull No intestino meacutedio do vetor gametogecircnese ndash Macrogametoacutecito ndash macrogameta feminino ndash Microgametoacutecito o processo de exflagelaccedilatildeo daacute
origem a 8 microgametas masculinos ndash Produccedilatildeo de ovo ou zigoto ndash O ovo encista na camada epitelial do intestino meacutedio
oocisto ndash Esporogonia liberaccedilatildeo de esporozoiacutetos
Ciclo evolutivo ndash HInvertebrado
ndash Os esporozoiacutetos satildeo transportados pelo hemolinfa ateacute as glacircndulas salivares do vetor ateacute atingirem o ducto salivar
bull Inoculaccedilatildeo no hospedeiro vertebrado atraveacutes da picada do inseto
Hemaacutecia com gametoacutecito
Fecircmeas de Anopheles sugam hemaacutecias com gametoacutecitos
CICLO NO INVERTEBRADO
No tubo digestivo
Zigoto
Penetraccedilatildeo na parede do tubo
digestivo
Migraccedilatildeo para as glacircndulas salivares
Desenvolvimento
Mosquito infectado
Diagnoacutestico
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado e espesso corado pelo Giemsa
bull Sangue colhido sem anticoagulante para melhor fixaccedilatildeo em lacircmina
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo espesso eacute mais eficiente para detecccedilatildeo da infecccedilatildeo
bull Esfregaccedilo delgado eacute mais eficiente para diferenciaccedilatildeo morfoloacutegica das espeacutecies
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo semiquantitativo
ndash Exame de 100 campos microscoacutepicos com resultado expresso pelo sistema de cruzes
Parasitos contados Nuacutemero de campos
microscoacutepicos cruzes
40 a 60 100 +2
1 1 +
2-20 1 ++
21-200 1 +++
+ 200 1 ++++
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo quantitativo derivado de anaacutelise semiquantitativa
Contagem de parasitos por campo
Cruzes Parasitos por mm3
40 a 60100 +2 200-300
1 + 301-500
2-20 ++ 501 - 10000
21-200 +++ 10001 ndash 100000
+ 200 ++++ 100000 ou mais
Diagnoacutestico
bull P falciparum
ndash Parte do ciclo celular aderido ao endoteacutelio capilar Encontro somente de trofozoitos e gametoacutecitos no sangue perifeacuterico
ndash Raramente os esquizontes satildeo encontrados no sangue perifeacuterico
Diagnoacutestico ndash Pvivax ndash Encontro de todas as formas de desenvolvimento ndash
trofozoiacuteto jovem maduro esquizontes e gametoacutecitos
ndash Os trofozoiacutetos maduros tecircm geralmente um aspecto irregular com extensotildees ameboacuteides em seu citoplasma
Diagnoacutestico ndash Pvivax
ndash Os gametoacutecitos femininos coram-se mais intensamente que os masculinos e apresentam nuacutecleo mais compacto geralmente em localizaccedilatildeo perifeacuterica
ndash O pigmento malaacuterico geralmente eacute abundante
Diagnoacutestico - Pmalariae
bull Realizado por meio de caracteriacutesticas morfoloacutegicas do parasito
ndash Verificaccedilatildeo em esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado
ndash Posiccedilatildeo equatorial do parasito
ndash Desenvolvimento sem deformaccedilatildeo do eritroacutecito
Diagnoacutestico
bull QBC ndash Teacutecnica que combina concentraccedilatildeo dos parasitos
pela centrifugaccedilatildeo do sangue em em microhematoacutecrito e a coloraccedilatildeo dos aacutecidos nucleacuteicos do parasito pelo fluorcromo laranja de acridina
ndash Utilizaccedilatildeo de tubos especiais e microscopia epifluorescente
ndash Teste raacutepido
ndash Alta sensibilidade
Diagnoacutestico
bull ParaSight-F ( Becton amp Dickinson)
ndash Teste raacutepido para captura da proteiacutena rica em histidina 2 de Pfalciparum( PfHRP2) e enzimas conservadas de 4 espeacutecies de plasmoacutedio (DHL e aldolase
ndash Utilizaccedilatildeo de fita de nitrocelulose contendo ac monoclonal
ndash Lise de uma gota de sangue
ndash A reaccedilatildeo eacute revelada com adiccedilatildeo de ac policlonal anti-HRP2 conjugado com lipossomas contendo corante
Diagnoacutestico
bull PCR
ndash Sensibilidade e especificidade maior do que o esfregaccedilo sanguiacuteneo
Ciclo evolutivo
bull Fecircmea do inseto realiza o hematofagismo noturno e ingere as microfilaacuterias
bull Estocircmago do vetor microfilaacuterias perdem a bainha atravessam a parede do estocircmago e migram para os muacutesculos toraacutecicos ndash L1
bull Apoacutes 20 dias a larva estaacute na forma infectante L3 medindo aproximadamente 2mm
bull Migraccedilatildeo da larva para a proboacutescida concentrando-se no laacutebio do moquito
Microfilaacuteria Presenccedila de bainha Cauda pontuda com nuacutecleos grandes largos e bem separados Nuacutecleos caudais em fila uacutenica
Ciclo evolutivo
bull Repasto sanguiacuteneo do inseto infectado
ndash As larvas L3 migram do laacutebio do vetor para a pele do HV
ndash Migram para os vasos linfaacuteticos e tornam-se vermes adultos
ndash Apoacutes 8 meses as fecircmeas graacutevidas produzem as primeiras microfilaacuterias
Periodicidade
bull Periodicidade noturna das microfilaacuterias
ndash Durante o dia localizam-se nos capilares profundos
ndash Durante a noite vasos sanguiacuteneos perifeacutericos
ndash Pico da microfilaremia meia-noite coincidindo com o horaacuterio de hematofagismo do inseto transmissor
Patologia
bull Periacuteodo assintomaacutetico bull Fase aguda bull Processos inflamatoacuterios produzidos por larvas L4 e adultos jovens
que colonizam as vias linfaacuteticas ndash Linfadenites linfonodos inguinais epitrocleanos e axilares com
desenvolvimento de granulomas com calcificaccedilatildeo apoacutes a morte dos vermes
ndash Linfangite inflamaccedilatildeo e dilataccedilatildeo dos vasos linfaacuteticos ndash Febre mal estar ndash Funiculite filariana linfangite do cordatildeo espermaacutetico e varicocele
bull Fase crocircnica ndash Hidrocele ndash Linfedema ndash Quiluacuteria ndash Elefantiacutease
Quiluacuteria
Patologia
bull Processos obstrutivos ndash Formaccedilatildeo de novelos envolvidos por reaccedilatildeo
inflamatoacuteria e pela formaccedilatildeo de fibrose
ndash Estase e congestatildeo da linfa produzindo linfoedema tecidual
ndash Extravasamento produzindo derrame linfaacutetico ascite linfaacutetica linfuacuteria linforreacuteia linfotoacuterax linfocele etc
ndash A ruptura de vasos linfaacuteticos para o interior do sistema excretor urinaacuterio daacute origem agrave quiluacuteria
Patologia
bull Complicaccedilotildees associadas agrave filariose
ndash Elefantiacutease
bull Caracterizada por processo inflamatoacuterio e fibrose crocircnica do oacutergatildeo atingido
bull Hipertrofia da derme do tecido conjuntivo aumento exagerado do volume do oacutergatildeo com queratinizaccedilatildeo e rugosidade
bull A pele perde a elasticidade resseca e se torna sujeita a infecccedilotildees bacterianas
Patologia
bull Permanecimento na aacuterea endecircmica
bull Nuacutemero de larvas inoculadas
bull Frequecircncia das re-infecccedilotildees
bull O nuacutemero de acasalamento dos vermes e suas localizaccedilotildees anatocircmicas
bull A sensibilizaccedilatildeo do organismo e a intensidade das reaccedilotildees inflamatoacuterias do paciente
bull As infecccedilotildees bacterianas associadas
Diagnoacutestico
bull Pesquisa de microfilaacuterias no sangue perifeacuterico ndash 20 40 ou 60 microL- de preferecircncia entre as 10 h da noite e 4h da manhatilde
ndash Gota espessa Coloraccedilatildeo de Giemsa
ndash Meacutetodos de concentraccedilatildeo Filtraccedilatildeo em membrana de policarbonato milipore ou nucleopore
ndash Meacutetodo de Knott
bull Na fase crocircnica as microfilaacuterias raramente satildeo detectadas no sangue perifeacuterico
Gota espessa
bull Possibilita a visualizaccedilatildeo da bainha fato que difere a microfilaria de W bancrofti de outro filariacutedeos sanguiacuteneos
bull Apresenta um baixo custo em comparaccedilatildeo com outras mais avanccediladas como a filtraccedilatildeo de sangue em membrana de policarbonato
bull Possui baixa sensibilidade natildeo indicada em situaccedilotildees em que os parasitados se mostram com baixa microfilaremia ou amicrofilarecircmicos
Concentraccedilatildeo
bull Baseia-se na passagem de sangue venoso atraveacutes de uma membrana (Milipore ou Nuclepore) de diacircmetro de 13 a 25 mm e poros de 5 ou 3 μm
bull O material retido na membrana sendo fixado corado e observado ao microscoacutepio
bull Essa teacutecnica assim como a de Knott permite a identificaccedilatildeo de indiviacuteduos com baixiacutessimas parasitemias (quantidade de microfilarias natildeo detectaacuteveis pela teacutecnica de gota espessa)
Teacutecnica de Knott
bull Retirar 2 ml de sangue total por punccedilatildeo venosa e colocar imediatamente em um tubo contendo 10 ml de formol a 2
bull Fechar o tubo e misture completamente invertendo-o e agitando-o O formol hemolisa as hemaacutecias mata fixa e distende as microfilaacuterias
bull Centrifugar o sangue a 1500 rpm por 5 minutos
bull Decantar o sobrenadante
Teacutecnica de Knott
bull Retirar o sedimento com uma pipeta Pasteur e espalhar a gota espessa sobre uma lacircmina
bull Deixar secar bem e corar com Giemsa
bull Examinar com objetiva de imersatildeo
bull Esta teacutecnica possibilita que o exame microscoacutepico laboratorial seja realizado vaacuterios dias apoacutes a coleta de material realizada no campo
Exames de imagem
bull Ultranossografia
ndash Possibilidade de visualizar os movimentos de vermes adultos vivos de W bancrofti em vaso linfaacutetico especificamente em vasos intraescrotais do cordatildeo espermaacutetico
ndash O movimento ativo e ininterrupto dos vermes adultos durante as 24 horas do dia eacute denominado sinal da ldquodanccedila das filaacuteriasrdquo
Diagnoacutestico soroloacutegico
bull Teste imunocromatograacutefico desenvolvido pelo ICT Diagnostic - ICT card
ndash Teste qualilativo
ndash Cartatildeo possui ac de antifilaacuteria e o controle eacute formado por ac anti Ig G humano
Plasmodium spp
Taxonomia
bull Reino Protozoa
bull FiloApicomplexa
bull Classe Sporozoea
bull Ordem Hemosporidiida
bull Famiacutelia Plasmodiidae
bull Gecircneros Plasmodium
bull Espeacutecie Pfalciparum Pvivax Povale e Pmalariae
Plasmodium
bull Ciclo bioloacutegico Hospedeiro vertebrado e invertebrado
bull Hospedeiro invertebrado ndash Vetor
ndash Fecircmeas hematoacutefagas do gecircnero Anopheles
ndash Brasil Anopheles (N)darlingi A (N) aquasalis A (N) albitarsis A (K) cruzii e A (K) bellator
ndash Possuem haacutebito noturno penetrando nas casas no crespuacutesculo saindo ao amanhecer
Plasmodium
bull Hospedeiro vertebrado homem
bull Transmissatildeo
ndash Vetor
ndash Transfusatildeo de sangue
ndash Compartilhamento de seringas
ndash Acidente com agulhas
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
bull Ciclo preacute-eritrociacutetico
ndash Forma inoculada esporozoiacutetos
ndash A fecircmea do anofelino infectado inocula no homem as formas infectantes localizadas na saliva
ndash Os esporozoiacutetas permancem na circulaccedilatildeo por aproximadamente uma hora
ndash Invadem os hepatoacutecitos e se diferenciam em trofozoiacutetas (criptozoiacuteto)
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
ndash Esquizogonia e formaccedilatildeo de esquizontes
ndash Divisatildeo nuclear e liberaccedilatildeo de merozoiacutetos
ndash Aproximadamente 10000 merozoiacutetos por hepatoacutecito
ndash Rompimento do hepatoacutecito e liberaccedilatildeo de merozoiacutetos na circulaccedilatildeo
ndash Duraccedilatildeo do ciclo aprox 1 a 2 semanas
Ciclo evolutivo
bull PVivax e Povale
ndash Alguns esporozoiacutetos geneticamente diferentes ficam na forma latente nos hepatoacutecitos permanecendo muitos meses Satildeo classificados como hipnozoiacuteto
ndash Satildeo responsaacuteveis pelas recaiacutedas tardias e formas de malaacuteria com periacuteodo de encubaccedilatildeo longo ndash 6 a 9 meses
FASE HEPAacuteTICA OU EXOERITROCIacuteTICA
Hepatoacutecito
FIacuteGADO
Invasatildeo do hepatoacutecito
Reproduccedilatildeo Assexuada
Esporozoiacutetos Lise dos hepatoacutecitos
Liberaccedilatildeo dos protozoaacuterios na corrente sanguumliacutenea
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
bull Ciclo eritrociacutetico
ndash Os merozoiacutetos invadem as hemaacutecias
ndash Diferenciaccedilatildeo em trofozoiacutetos
ndash Esquizogonia esquizonte
ndash Produccedilatildeo de merozoiacutetos e rompimento da hemaacutecia
ndash Merozoiacutetos invasatildeo de novas hemaacutecias
ndash Apoacutes algumas geraccedilotildees os merozoiacutetos natildeo mais se dividem e se diferenciam em gametoacutecitos ndash micro e macrogametoacutecito
FASE ERITROCIacuteTICA
Hepatoacutecito destruiacutedo pelos protozoaacuterios
Penetraccedilatildeo dos protozoaacuterios
Reproduccedilatildeo assexuada
Protozoaacuterios destroem as hemaacutecias
Diferenciaccedilatildeo em gametoacutecitos
Fecircmeas de Anopheles sugam hemaacutecias com gametoacutecitos
Ciclo no hospedeiro invertebrado
Ocorre nas hemaacutecias ou Eritroacutecitos
nas hemaacutecias
Protozoaacuterio no interior da hemaacutecia
Hemaacutecia com gametoacutecito
T trofozoiacuteto Em esquizonte com merozoiacuteto
Fase eritrociacutetica
bull Ciclo sanguiacuteneo ndash Pfalciparum P vivax e Povale 48 horas
ndash Pmalariae 72 horas
ndash Fonte de nutriccedilatildeo do Plasmodium no ciclo sanguiacuteneo hemoglobina
ndash Produccedilatildeo do pigmento malaacuterico hemozoiacutena bull Granulaccedilotildees de Schuffner Plasmodium vivax
bull Granulaccedilotildees de Maurer P falciparum
bull Granulaccedilotildees de Ziemann P malariae
ndash Fagocitose pelas ceacutelulas de Kuppffer e macroacutefagos do baccedilo
Trofozoiacutetos Pfalciparum
Trofozoiacutetos Pfalciparum
Esquizonte ndash P falciparum
Raros no sangue perifeacuterico Possuem 2 a 24 merozoiacutetos
Ocupam 23 do gloacutebulo vermelho
Gametoacutecitos Pfalciparum
Ciclo evolutivo Pvivax
Esquizonte ndash P vivax
Satildeo grandes e ameboacuteides Cromatina organizada em duas ou mais massas
Possuem 2 a 24 merozoiacutetos com pontos de cromatina
Gametoacutecito ndash Pvivax
Macrogametoacutecitos satildeo redondos ou ovais e ocupam toda ceacutelula hospedeira O citoplasma eacute geralmente corado de azul mais escuro e conteacutem pigmento marrom Microgametoacutecitos satildeo geralmente do tamanho de um RBC natildeo infectados com citoplasma corados de azul paacutelido rosa ou cinza
Trofozoiacutetos - P malariae
Esquizontes ndash P malariae
Aproximadamente 6 a 12 merozoiacutetos com arranjo de rosetas
Gametoacutecitos ndash P malariae
Ciclo evolutivo ndash HI
bull Ingestatildeo de hemaacutecias contendo gametoacutecitos durante o repasto sanguiacuteneo da fecircmea do anofelino
bull No intestino meacutedio do vetor gametogecircnese ndash Macrogametoacutecito ndash macrogameta feminino ndash Microgametoacutecito o processo de exflagelaccedilatildeo daacute
origem a 8 microgametas masculinos ndash Produccedilatildeo de ovo ou zigoto ndash O ovo encista na camada epitelial do intestino meacutedio
oocisto ndash Esporogonia liberaccedilatildeo de esporozoiacutetos
Ciclo evolutivo ndash HInvertebrado
ndash Os esporozoiacutetos satildeo transportados pelo hemolinfa ateacute as glacircndulas salivares do vetor ateacute atingirem o ducto salivar
bull Inoculaccedilatildeo no hospedeiro vertebrado atraveacutes da picada do inseto
Hemaacutecia com gametoacutecito
Fecircmeas de Anopheles sugam hemaacutecias com gametoacutecitos
CICLO NO INVERTEBRADO
No tubo digestivo
Zigoto
Penetraccedilatildeo na parede do tubo
digestivo
Migraccedilatildeo para as glacircndulas salivares
Desenvolvimento
Mosquito infectado
Diagnoacutestico
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado e espesso corado pelo Giemsa
bull Sangue colhido sem anticoagulante para melhor fixaccedilatildeo em lacircmina
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo espesso eacute mais eficiente para detecccedilatildeo da infecccedilatildeo
bull Esfregaccedilo delgado eacute mais eficiente para diferenciaccedilatildeo morfoloacutegica das espeacutecies
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo semiquantitativo
ndash Exame de 100 campos microscoacutepicos com resultado expresso pelo sistema de cruzes
Parasitos contados Nuacutemero de campos
microscoacutepicos cruzes
40 a 60 100 +2
1 1 +
2-20 1 ++
21-200 1 +++
+ 200 1 ++++
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo quantitativo derivado de anaacutelise semiquantitativa
Contagem de parasitos por campo
Cruzes Parasitos por mm3
40 a 60100 +2 200-300
1 + 301-500
2-20 ++ 501 - 10000
21-200 +++ 10001 ndash 100000
+ 200 ++++ 100000 ou mais
Diagnoacutestico
bull P falciparum
ndash Parte do ciclo celular aderido ao endoteacutelio capilar Encontro somente de trofozoitos e gametoacutecitos no sangue perifeacuterico
ndash Raramente os esquizontes satildeo encontrados no sangue perifeacuterico
Diagnoacutestico ndash Pvivax ndash Encontro de todas as formas de desenvolvimento ndash
trofozoiacuteto jovem maduro esquizontes e gametoacutecitos
ndash Os trofozoiacutetos maduros tecircm geralmente um aspecto irregular com extensotildees ameboacuteides em seu citoplasma
Diagnoacutestico ndash Pvivax
ndash Os gametoacutecitos femininos coram-se mais intensamente que os masculinos e apresentam nuacutecleo mais compacto geralmente em localizaccedilatildeo perifeacuterica
ndash O pigmento malaacuterico geralmente eacute abundante
Diagnoacutestico - Pmalariae
bull Realizado por meio de caracteriacutesticas morfoloacutegicas do parasito
ndash Verificaccedilatildeo em esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado
ndash Posiccedilatildeo equatorial do parasito
ndash Desenvolvimento sem deformaccedilatildeo do eritroacutecito
Diagnoacutestico
bull QBC ndash Teacutecnica que combina concentraccedilatildeo dos parasitos
pela centrifugaccedilatildeo do sangue em em microhematoacutecrito e a coloraccedilatildeo dos aacutecidos nucleacuteicos do parasito pelo fluorcromo laranja de acridina
ndash Utilizaccedilatildeo de tubos especiais e microscopia epifluorescente
ndash Teste raacutepido
ndash Alta sensibilidade
Diagnoacutestico
bull ParaSight-F ( Becton amp Dickinson)
ndash Teste raacutepido para captura da proteiacutena rica em histidina 2 de Pfalciparum( PfHRP2) e enzimas conservadas de 4 espeacutecies de plasmoacutedio (DHL e aldolase
ndash Utilizaccedilatildeo de fita de nitrocelulose contendo ac monoclonal
ndash Lise de uma gota de sangue
ndash A reaccedilatildeo eacute revelada com adiccedilatildeo de ac policlonal anti-HRP2 conjugado com lipossomas contendo corante
Diagnoacutestico
bull PCR
ndash Sensibilidade e especificidade maior do que o esfregaccedilo sanguiacuteneo
Microfilaacuteria Presenccedila de bainha Cauda pontuda com nuacutecleos grandes largos e bem separados Nuacutecleos caudais em fila uacutenica
Ciclo evolutivo
bull Repasto sanguiacuteneo do inseto infectado
ndash As larvas L3 migram do laacutebio do vetor para a pele do HV
ndash Migram para os vasos linfaacuteticos e tornam-se vermes adultos
ndash Apoacutes 8 meses as fecircmeas graacutevidas produzem as primeiras microfilaacuterias
Periodicidade
bull Periodicidade noturna das microfilaacuterias
ndash Durante o dia localizam-se nos capilares profundos
ndash Durante a noite vasos sanguiacuteneos perifeacutericos
ndash Pico da microfilaremia meia-noite coincidindo com o horaacuterio de hematofagismo do inseto transmissor
Patologia
bull Periacuteodo assintomaacutetico bull Fase aguda bull Processos inflamatoacuterios produzidos por larvas L4 e adultos jovens
que colonizam as vias linfaacuteticas ndash Linfadenites linfonodos inguinais epitrocleanos e axilares com
desenvolvimento de granulomas com calcificaccedilatildeo apoacutes a morte dos vermes
ndash Linfangite inflamaccedilatildeo e dilataccedilatildeo dos vasos linfaacuteticos ndash Febre mal estar ndash Funiculite filariana linfangite do cordatildeo espermaacutetico e varicocele
bull Fase crocircnica ndash Hidrocele ndash Linfedema ndash Quiluacuteria ndash Elefantiacutease
Quiluacuteria
Patologia
bull Processos obstrutivos ndash Formaccedilatildeo de novelos envolvidos por reaccedilatildeo
inflamatoacuteria e pela formaccedilatildeo de fibrose
ndash Estase e congestatildeo da linfa produzindo linfoedema tecidual
ndash Extravasamento produzindo derrame linfaacutetico ascite linfaacutetica linfuacuteria linforreacuteia linfotoacuterax linfocele etc
ndash A ruptura de vasos linfaacuteticos para o interior do sistema excretor urinaacuterio daacute origem agrave quiluacuteria
Patologia
bull Complicaccedilotildees associadas agrave filariose
ndash Elefantiacutease
bull Caracterizada por processo inflamatoacuterio e fibrose crocircnica do oacutergatildeo atingido
bull Hipertrofia da derme do tecido conjuntivo aumento exagerado do volume do oacutergatildeo com queratinizaccedilatildeo e rugosidade
bull A pele perde a elasticidade resseca e se torna sujeita a infecccedilotildees bacterianas
Patologia
bull Permanecimento na aacuterea endecircmica
bull Nuacutemero de larvas inoculadas
bull Frequecircncia das re-infecccedilotildees
bull O nuacutemero de acasalamento dos vermes e suas localizaccedilotildees anatocircmicas
bull A sensibilizaccedilatildeo do organismo e a intensidade das reaccedilotildees inflamatoacuterias do paciente
bull As infecccedilotildees bacterianas associadas
Diagnoacutestico
bull Pesquisa de microfilaacuterias no sangue perifeacuterico ndash 20 40 ou 60 microL- de preferecircncia entre as 10 h da noite e 4h da manhatilde
ndash Gota espessa Coloraccedilatildeo de Giemsa
ndash Meacutetodos de concentraccedilatildeo Filtraccedilatildeo em membrana de policarbonato milipore ou nucleopore
ndash Meacutetodo de Knott
bull Na fase crocircnica as microfilaacuterias raramente satildeo detectadas no sangue perifeacuterico
Gota espessa
bull Possibilita a visualizaccedilatildeo da bainha fato que difere a microfilaria de W bancrofti de outro filariacutedeos sanguiacuteneos
bull Apresenta um baixo custo em comparaccedilatildeo com outras mais avanccediladas como a filtraccedilatildeo de sangue em membrana de policarbonato
bull Possui baixa sensibilidade natildeo indicada em situaccedilotildees em que os parasitados se mostram com baixa microfilaremia ou amicrofilarecircmicos
Concentraccedilatildeo
bull Baseia-se na passagem de sangue venoso atraveacutes de uma membrana (Milipore ou Nuclepore) de diacircmetro de 13 a 25 mm e poros de 5 ou 3 μm
bull O material retido na membrana sendo fixado corado e observado ao microscoacutepio
bull Essa teacutecnica assim como a de Knott permite a identificaccedilatildeo de indiviacuteduos com baixiacutessimas parasitemias (quantidade de microfilarias natildeo detectaacuteveis pela teacutecnica de gota espessa)
Teacutecnica de Knott
bull Retirar 2 ml de sangue total por punccedilatildeo venosa e colocar imediatamente em um tubo contendo 10 ml de formol a 2
bull Fechar o tubo e misture completamente invertendo-o e agitando-o O formol hemolisa as hemaacutecias mata fixa e distende as microfilaacuterias
bull Centrifugar o sangue a 1500 rpm por 5 minutos
bull Decantar o sobrenadante
Teacutecnica de Knott
bull Retirar o sedimento com uma pipeta Pasteur e espalhar a gota espessa sobre uma lacircmina
bull Deixar secar bem e corar com Giemsa
bull Examinar com objetiva de imersatildeo
bull Esta teacutecnica possibilita que o exame microscoacutepico laboratorial seja realizado vaacuterios dias apoacutes a coleta de material realizada no campo
Exames de imagem
bull Ultranossografia
ndash Possibilidade de visualizar os movimentos de vermes adultos vivos de W bancrofti em vaso linfaacutetico especificamente em vasos intraescrotais do cordatildeo espermaacutetico
ndash O movimento ativo e ininterrupto dos vermes adultos durante as 24 horas do dia eacute denominado sinal da ldquodanccedila das filaacuteriasrdquo
Diagnoacutestico soroloacutegico
bull Teste imunocromatograacutefico desenvolvido pelo ICT Diagnostic - ICT card
ndash Teste qualilativo
ndash Cartatildeo possui ac de antifilaacuteria e o controle eacute formado por ac anti Ig G humano
Plasmodium spp
Taxonomia
bull Reino Protozoa
bull FiloApicomplexa
bull Classe Sporozoea
bull Ordem Hemosporidiida
bull Famiacutelia Plasmodiidae
bull Gecircneros Plasmodium
bull Espeacutecie Pfalciparum Pvivax Povale e Pmalariae
Plasmodium
bull Ciclo bioloacutegico Hospedeiro vertebrado e invertebrado
bull Hospedeiro invertebrado ndash Vetor
ndash Fecircmeas hematoacutefagas do gecircnero Anopheles
ndash Brasil Anopheles (N)darlingi A (N) aquasalis A (N) albitarsis A (K) cruzii e A (K) bellator
ndash Possuem haacutebito noturno penetrando nas casas no crespuacutesculo saindo ao amanhecer
Plasmodium
bull Hospedeiro vertebrado homem
bull Transmissatildeo
ndash Vetor
ndash Transfusatildeo de sangue
ndash Compartilhamento de seringas
ndash Acidente com agulhas
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
bull Ciclo preacute-eritrociacutetico
ndash Forma inoculada esporozoiacutetos
ndash A fecircmea do anofelino infectado inocula no homem as formas infectantes localizadas na saliva
ndash Os esporozoiacutetas permancem na circulaccedilatildeo por aproximadamente uma hora
ndash Invadem os hepatoacutecitos e se diferenciam em trofozoiacutetas (criptozoiacuteto)
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
ndash Esquizogonia e formaccedilatildeo de esquizontes
ndash Divisatildeo nuclear e liberaccedilatildeo de merozoiacutetos
ndash Aproximadamente 10000 merozoiacutetos por hepatoacutecito
ndash Rompimento do hepatoacutecito e liberaccedilatildeo de merozoiacutetos na circulaccedilatildeo
ndash Duraccedilatildeo do ciclo aprox 1 a 2 semanas
Ciclo evolutivo
bull PVivax e Povale
ndash Alguns esporozoiacutetos geneticamente diferentes ficam na forma latente nos hepatoacutecitos permanecendo muitos meses Satildeo classificados como hipnozoiacuteto
ndash Satildeo responsaacuteveis pelas recaiacutedas tardias e formas de malaacuteria com periacuteodo de encubaccedilatildeo longo ndash 6 a 9 meses
FASE HEPAacuteTICA OU EXOERITROCIacuteTICA
Hepatoacutecito
FIacuteGADO
Invasatildeo do hepatoacutecito
Reproduccedilatildeo Assexuada
Esporozoiacutetos Lise dos hepatoacutecitos
Liberaccedilatildeo dos protozoaacuterios na corrente sanguumliacutenea
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
bull Ciclo eritrociacutetico
ndash Os merozoiacutetos invadem as hemaacutecias
ndash Diferenciaccedilatildeo em trofozoiacutetos
ndash Esquizogonia esquizonte
ndash Produccedilatildeo de merozoiacutetos e rompimento da hemaacutecia
ndash Merozoiacutetos invasatildeo de novas hemaacutecias
ndash Apoacutes algumas geraccedilotildees os merozoiacutetos natildeo mais se dividem e se diferenciam em gametoacutecitos ndash micro e macrogametoacutecito
FASE ERITROCIacuteTICA
Hepatoacutecito destruiacutedo pelos protozoaacuterios
Penetraccedilatildeo dos protozoaacuterios
Reproduccedilatildeo assexuada
Protozoaacuterios destroem as hemaacutecias
Diferenciaccedilatildeo em gametoacutecitos
Fecircmeas de Anopheles sugam hemaacutecias com gametoacutecitos
Ciclo no hospedeiro invertebrado
Ocorre nas hemaacutecias ou Eritroacutecitos
nas hemaacutecias
Protozoaacuterio no interior da hemaacutecia
Hemaacutecia com gametoacutecito
T trofozoiacuteto Em esquizonte com merozoiacuteto
Fase eritrociacutetica
bull Ciclo sanguiacuteneo ndash Pfalciparum P vivax e Povale 48 horas
ndash Pmalariae 72 horas
ndash Fonte de nutriccedilatildeo do Plasmodium no ciclo sanguiacuteneo hemoglobina
ndash Produccedilatildeo do pigmento malaacuterico hemozoiacutena bull Granulaccedilotildees de Schuffner Plasmodium vivax
bull Granulaccedilotildees de Maurer P falciparum
bull Granulaccedilotildees de Ziemann P malariae
ndash Fagocitose pelas ceacutelulas de Kuppffer e macroacutefagos do baccedilo
Trofozoiacutetos Pfalciparum
Trofozoiacutetos Pfalciparum
Esquizonte ndash P falciparum
Raros no sangue perifeacuterico Possuem 2 a 24 merozoiacutetos
Ocupam 23 do gloacutebulo vermelho
Gametoacutecitos Pfalciparum
Ciclo evolutivo Pvivax
Esquizonte ndash P vivax
Satildeo grandes e ameboacuteides Cromatina organizada em duas ou mais massas
Possuem 2 a 24 merozoiacutetos com pontos de cromatina
Gametoacutecito ndash Pvivax
Macrogametoacutecitos satildeo redondos ou ovais e ocupam toda ceacutelula hospedeira O citoplasma eacute geralmente corado de azul mais escuro e conteacutem pigmento marrom Microgametoacutecitos satildeo geralmente do tamanho de um RBC natildeo infectados com citoplasma corados de azul paacutelido rosa ou cinza
Trofozoiacutetos - P malariae
Esquizontes ndash P malariae
Aproximadamente 6 a 12 merozoiacutetos com arranjo de rosetas
Gametoacutecitos ndash P malariae
Ciclo evolutivo ndash HI
bull Ingestatildeo de hemaacutecias contendo gametoacutecitos durante o repasto sanguiacuteneo da fecircmea do anofelino
bull No intestino meacutedio do vetor gametogecircnese ndash Macrogametoacutecito ndash macrogameta feminino ndash Microgametoacutecito o processo de exflagelaccedilatildeo daacute
origem a 8 microgametas masculinos ndash Produccedilatildeo de ovo ou zigoto ndash O ovo encista na camada epitelial do intestino meacutedio
oocisto ndash Esporogonia liberaccedilatildeo de esporozoiacutetos
Ciclo evolutivo ndash HInvertebrado
ndash Os esporozoiacutetos satildeo transportados pelo hemolinfa ateacute as glacircndulas salivares do vetor ateacute atingirem o ducto salivar
bull Inoculaccedilatildeo no hospedeiro vertebrado atraveacutes da picada do inseto
Hemaacutecia com gametoacutecito
Fecircmeas de Anopheles sugam hemaacutecias com gametoacutecitos
CICLO NO INVERTEBRADO
No tubo digestivo
Zigoto
Penetraccedilatildeo na parede do tubo
digestivo
Migraccedilatildeo para as glacircndulas salivares
Desenvolvimento
Mosquito infectado
Diagnoacutestico
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado e espesso corado pelo Giemsa
bull Sangue colhido sem anticoagulante para melhor fixaccedilatildeo em lacircmina
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo espesso eacute mais eficiente para detecccedilatildeo da infecccedilatildeo
bull Esfregaccedilo delgado eacute mais eficiente para diferenciaccedilatildeo morfoloacutegica das espeacutecies
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo semiquantitativo
ndash Exame de 100 campos microscoacutepicos com resultado expresso pelo sistema de cruzes
Parasitos contados Nuacutemero de campos
microscoacutepicos cruzes
40 a 60 100 +2
1 1 +
2-20 1 ++
21-200 1 +++
+ 200 1 ++++
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo quantitativo derivado de anaacutelise semiquantitativa
Contagem de parasitos por campo
Cruzes Parasitos por mm3
40 a 60100 +2 200-300
1 + 301-500
2-20 ++ 501 - 10000
21-200 +++ 10001 ndash 100000
+ 200 ++++ 100000 ou mais
Diagnoacutestico
bull P falciparum
ndash Parte do ciclo celular aderido ao endoteacutelio capilar Encontro somente de trofozoitos e gametoacutecitos no sangue perifeacuterico
ndash Raramente os esquizontes satildeo encontrados no sangue perifeacuterico
Diagnoacutestico ndash Pvivax ndash Encontro de todas as formas de desenvolvimento ndash
trofozoiacuteto jovem maduro esquizontes e gametoacutecitos
ndash Os trofozoiacutetos maduros tecircm geralmente um aspecto irregular com extensotildees ameboacuteides em seu citoplasma
Diagnoacutestico ndash Pvivax
ndash Os gametoacutecitos femininos coram-se mais intensamente que os masculinos e apresentam nuacutecleo mais compacto geralmente em localizaccedilatildeo perifeacuterica
ndash O pigmento malaacuterico geralmente eacute abundante
Diagnoacutestico - Pmalariae
bull Realizado por meio de caracteriacutesticas morfoloacutegicas do parasito
ndash Verificaccedilatildeo em esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado
ndash Posiccedilatildeo equatorial do parasito
ndash Desenvolvimento sem deformaccedilatildeo do eritroacutecito
Diagnoacutestico
bull QBC ndash Teacutecnica que combina concentraccedilatildeo dos parasitos
pela centrifugaccedilatildeo do sangue em em microhematoacutecrito e a coloraccedilatildeo dos aacutecidos nucleacuteicos do parasito pelo fluorcromo laranja de acridina
ndash Utilizaccedilatildeo de tubos especiais e microscopia epifluorescente
ndash Teste raacutepido
ndash Alta sensibilidade
Diagnoacutestico
bull ParaSight-F ( Becton amp Dickinson)
ndash Teste raacutepido para captura da proteiacutena rica em histidina 2 de Pfalciparum( PfHRP2) e enzimas conservadas de 4 espeacutecies de plasmoacutedio (DHL e aldolase
ndash Utilizaccedilatildeo de fita de nitrocelulose contendo ac monoclonal
ndash Lise de uma gota de sangue
ndash A reaccedilatildeo eacute revelada com adiccedilatildeo de ac policlonal anti-HRP2 conjugado com lipossomas contendo corante
Diagnoacutestico
bull PCR
ndash Sensibilidade e especificidade maior do que o esfregaccedilo sanguiacuteneo
Ciclo evolutivo
bull Repasto sanguiacuteneo do inseto infectado
ndash As larvas L3 migram do laacutebio do vetor para a pele do HV
ndash Migram para os vasos linfaacuteticos e tornam-se vermes adultos
ndash Apoacutes 8 meses as fecircmeas graacutevidas produzem as primeiras microfilaacuterias
Periodicidade
bull Periodicidade noturna das microfilaacuterias
ndash Durante o dia localizam-se nos capilares profundos
ndash Durante a noite vasos sanguiacuteneos perifeacutericos
ndash Pico da microfilaremia meia-noite coincidindo com o horaacuterio de hematofagismo do inseto transmissor
Patologia
bull Periacuteodo assintomaacutetico bull Fase aguda bull Processos inflamatoacuterios produzidos por larvas L4 e adultos jovens
que colonizam as vias linfaacuteticas ndash Linfadenites linfonodos inguinais epitrocleanos e axilares com
desenvolvimento de granulomas com calcificaccedilatildeo apoacutes a morte dos vermes
ndash Linfangite inflamaccedilatildeo e dilataccedilatildeo dos vasos linfaacuteticos ndash Febre mal estar ndash Funiculite filariana linfangite do cordatildeo espermaacutetico e varicocele
bull Fase crocircnica ndash Hidrocele ndash Linfedema ndash Quiluacuteria ndash Elefantiacutease
Quiluacuteria
Patologia
bull Processos obstrutivos ndash Formaccedilatildeo de novelos envolvidos por reaccedilatildeo
inflamatoacuteria e pela formaccedilatildeo de fibrose
ndash Estase e congestatildeo da linfa produzindo linfoedema tecidual
ndash Extravasamento produzindo derrame linfaacutetico ascite linfaacutetica linfuacuteria linforreacuteia linfotoacuterax linfocele etc
ndash A ruptura de vasos linfaacuteticos para o interior do sistema excretor urinaacuterio daacute origem agrave quiluacuteria
Patologia
bull Complicaccedilotildees associadas agrave filariose
ndash Elefantiacutease
bull Caracterizada por processo inflamatoacuterio e fibrose crocircnica do oacutergatildeo atingido
bull Hipertrofia da derme do tecido conjuntivo aumento exagerado do volume do oacutergatildeo com queratinizaccedilatildeo e rugosidade
bull A pele perde a elasticidade resseca e se torna sujeita a infecccedilotildees bacterianas
Patologia
bull Permanecimento na aacuterea endecircmica
bull Nuacutemero de larvas inoculadas
bull Frequecircncia das re-infecccedilotildees
bull O nuacutemero de acasalamento dos vermes e suas localizaccedilotildees anatocircmicas
bull A sensibilizaccedilatildeo do organismo e a intensidade das reaccedilotildees inflamatoacuterias do paciente
bull As infecccedilotildees bacterianas associadas
Diagnoacutestico
bull Pesquisa de microfilaacuterias no sangue perifeacuterico ndash 20 40 ou 60 microL- de preferecircncia entre as 10 h da noite e 4h da manhatilde
ndash Gota espessa Coloraccedilatildeo de Giemsa
ndash Meacutetodos de concentraccedilatildeo Filtraccedilatildeo em membrana de policarbonato milipore ou nucleopore
ndash Meacutetodo de Knott
bull Na fase crocircnica as microfilaacuterias raramente satildeo detectadas no sangue perifeacuterico
Gota espessa
bull Possibilita a visualizaccedilatildeo da bainha fato que difere a microfilaria de W bancrofti de outro filariacutedeos sanguiacuteneos
bull Apresenta um baixo custo em comparaccedilatildeo com outras mais avanccediladas como a filtraccedilatildeo de sangue em membrana de policarbonato
bull Possui baixa sensibilidade natildeo indicada em situaccedilotildees em que os parasitados se mostram com baixa microfilaremia ou amicrofilarecircmicos
Concentraccedilatildeo
bull Baseia-se na passagem de sangue venoso atraveacutes de uma membrana (Milipore ou Nuclepore) de diacircmetro de 13 a 25 mm e poros de 5 ou 3 μm
bull O material retido na membrana sendo fixado corado e observado ao microscoacutepio
bull Essa teacutecnica assim como a de Knott permite a identificaccedilatildeo de indiviacuteduos com baixiacutessimas parasitemias (quantidade de microfilarias natildeo detectaacuteveis pela teacutecnica de gota espessa)
Teacutecnica de Knott
bull Retirar 2 ml de sangue total por punccedilatildeo venosa e colocar imediatamente em um tubo contendo 10 ml de formol a 2
bull Fechar o tubo e misture completamente invertendo-o e agitando-o O formol hemolisa as hemaacutecias mata fixa e distende as microfilaacuterias
bull Centrifugar o sangue a 1500 rpm por 5 minutos
bull Decantar o sobrenadante
Teacutecnica de Knott
bull Retirar o sedimento com uma pipeta Pasteur e espalhar a gota espessa sobre uma lacircmina
bull Deixar secar bem e corar com Giemsa
bull Examinar com objetiva de imersatildeo
bull Esta teacutecnica possibilita que o exame microscoacutepico laboratorial seja realizado vaacuterios dias apoacutes a coleta de material realizada no campo
Exames de imagem
bull Ultranossografia
ndash Possibilidade de visualizar os movimentos de vermes adultos vivos de W bancrofti em vaso linfaacutetico especificamente em vasos intraescrotais do cordatildeo espermaacutetico
ndash O movimento ativo e ininterrupto dos vermes adultos durante as 24 horas do dia eacute denominado sinal da ldquodanccedila das filaacuteriasrdquo
Diagnoacutestico soroloacutegico
bull Teste imunocromatograacutefico desenvolvido pelo ICT Diagnostic - ICT card
ndash Teste qualilativo
ndash Cartatildeo possui ac de antifilaacuteria e o controle eacute formado por ac anti Ig G humano
Plasmodium spp
Taxonomia
bull Reino Protozoa
bull FiloApicomplexa
bull Classe Sporozoea
bull Ordem Hemosporidiida
bull Famiacutelia Plasmodiidae
bull Gecircneros Plasmodium
bull Espeacutecie Pfalciparum Pvivax Povale e Pmalariae
Plasmodium
bull Ciclo bioloacutegico Hospedeiro vertebrado e invertebrado
bull Hospedeiro invertebrado ndash Vetor
ndash Fecircmeas hematoacutefagas do gecircnero Anopheles
ndash Brasil Anopheles (N)darlingi A (N) aquasalis A (N) albitarsis A (K) cruzii e A (K) bellator
ndash Possuem haacutebito noturno penetrando nas casas no crespuacutesculo saindo ao amanhecer
Plasmodium
bull Hospedeiro vertebrado homem
bull Transmissatildeo
ndash Vetor
ndash Transfusatildeo de sangue
ndash Compartilhamento de seringas
ndash Acidente com agulhas
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
bull Ciclo preacute-eritrociacutetico
ndash Forma inoculada esporozoiacutetos
ndash A fecircmea do anofelino infectado inocula no homem as formas infectantes localizadas na saliva
ndash Os esporozoiacutetas permancem na circulaccedilatildeo por aproximadamente uma hora
ndash Invadem os hepatoacutecitos e se diferenciam em trofozoiacutetas (criptozoiacuteto)
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
ndash Esquizogonia e formaccedilatildeo de esquizontes
ndash Divisatildeo nuclear e liberaccedilatildeo de merozoiacutetos
ndash Aproximadamente 10000 merozoiacutetos por hepatoacutecito
ndash Rompimento do hepatoacutecito e liberaccedilatildeo de merozoiacutetos na circulaccedilatildeo
ndash Duraccedilatildeo do ciclo aprox 1 a 2 semanas
Ciclo evolutivo
bull PVivax e Povale
ndash Alguns esporozoiacutetos geneticamente diferentes ficam na forma latente nos hepatoacutecitos permanecendo muitos meses Satildeo classificados como hipnozoiacuteto
ndash Satildeo responsaacuteveis pelas recaiacutedas tardias e formas de malaacuteria com periacuteodo de encubaccedilatildeo longo ndash 6 a 9 meses
FASE HEPAacuteTICA OU EXOERITROCIacuteTICA
Hepatoacutecito
FIacuteGADO
Invasatildeo do hepatoacutecito
Reproduccedilatildeo Assexuada
Esporozoiacutetos Lise dos hepatoacutecitos
Liberaccedilatildeo dos protozoaacuterios na corrente sanguumliacutenea
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
bull Ciclo eritrociacutetico
ndash Os merozoiacutetos invadem as hemaacutecias
ndash Diferenciaccedilatildeo em trofozoiacutetos
ndash Esquizogonia esquizonte
ndash Produccedilatildeo de merozoiacutetos e rompimento da hemaacutecia
ndash Merozoiacutetos invasatildeo de novas hemaacutecias
ndash Apoacutes algumas geraccedilotildees os merozoiacutetos natildeo mais se dividem e se diferenciam em gametoacutecitos ndash micro e macrogametoacutecito
FASE ERITROCIacuteTICA
Hepatoacutecito destruiacutedo pelos protozoaacuterios
Penetraccedilatildeo dos protozoaacuterios
Reproduccedilatildeo assexuada
Protozoaacuterios destroem as hemaacutecias
Diferenciaccedilatildeo em gametoacutecitos
Fecircmeas de Anopheles sugam hemaacutecias com gametoacutecitos
Ciclo no hospedeiro invertebrado
Ocorre nas hemaacutecias ou Eritroacutecitos
nas hemaacutecias
Protozoaacuterio no interior da hemaacutecia
Hemaacutecia com gametoacutecito
T trofozoiacuteto Em esquizonte com merozoiacuteto
Fase eritrociacutetica
bull Ciclo sanguiacuteneo ndash Pfalciparum P vivax e Povale 48 horas
ndash Pmalariae 72 horas
ndash Fonte de nutriccedilatildeo do Plasmodium no ciclo sanguiacuteneo hemoglobina
ndash Produccedilatildeo do pigmento malaacuterico hemozoiacutena bull Granulaccedilotildees de Schuffner Plasmodium vivax
bull Granulaccedilotildees de Maurer P falciparum
bull Granulaccedilotildees de Ziemann P malariae
ndash Fagocitose pelas ceacutelulas de Kuppffer e macroacutefagos do baccedilo
Trofozoiacutetos Pfalciparum
Trofozoiacutetos Pfalciparum
Esquizonte ndash P falciparum
Raros no sangue perifeacuterico Possuem 2 a 24 merozoiacutetos
Ocupam 23 do gloacutebulo vermelho
Gametoacutecitos Pfalciparum
Ciclo evolutivo Pvivax
Esquizonte ndash P vivax
Satildeo grandes e ameboacuteides Cromatina organizada em duas ou mais massas
Possuem 2 a 24 merozoiacutetos com pontos de cromatina
Gametoacutecito ndash Pvivax
Macrogametoacutecitos satildeo redondos ou ovais e ocupam toda ceacutelula hospedeira O citoplasma eacute geralmente corado de azul mais escuro e conteacutem pigmento marrom Microgametoacutecitos satildeo geralmente do tamanho de um RBC natildeo infectados com citoplasma corados de azul paacutelido rosa ou cinza
Trofozoiacutetos - P malariae
Esquizontes ndash P malariae
Aproximadamente 6 a 12 merozoiacutetos com arranjo de rosetas
Gametoacutecitos ndash P malariae
Ciclo evolutivo ndash HI
bull Ingestatildeo de hemaacutecias contendo gametoacutecitos durante o repasto sanguiacuteneo da fecircmea do anofelino
bull No intestino meacutedio do vetor gametogecircnese ndash Macrogametoacutecito ndash macrogameta feminino ndash Microgametoacutecito o processo de exflagelaccedilatildeo daacute
origem a 8 microgametas masculinos ndash Produccedilatildeo de ovo ou zigoto ndash O ovo encista na camada epitelial do intestino meacutedio
oocisto ndash Esporogonia liberaccedilatildeo de esporozoiacutetos
Ciclo evolutivo ndash HInvertebrado
ndash Os esporozoiacutetos satildeo transportados pelo hemolinfa ateacute as glacircndulas salivares do vetor ateacute atingirem o ducto salivar
bull Inoculaccedilatildeo no hospedeiro vertebrado atraveacutes da picada do inseto
Hemaacutecia com gametoacutecito
Fecircmeas de Anopheles sugam hemaacutecias com gametoacutecitos
CICLO NO INVERTEBRADO
No tubo digestivo
Zigoto
Penetraccedilatildeo na parede do tubo
digestivo
Migraccedilatildeo para as glacircndulas salivares
Desenvolvimento
Mosquito infectado
Diagnoacutestico
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado e espesso corado pelo Giemsa
bull Sangue colhido sem anticoagulante para melhor fixaccedilatildeo em lacircmina
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo espesso eacute mais eficiente para detecccedilatildeo da infecccedilatildeo
bull Esfregaccedilo delgado eacute mais eficiente para diferenciaccedilatildeo morfoloacutegica das espeacutecies
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo semiquantitativo
ndash Exame de 100 campos microscoacutepicos com resultado expresso pelo sistema de cruzes
Parasitos contados Nuacutemero de campos
microscoacutepicos cruzes
40 a 60 100 +2
1 1 +
2-20 1 ++
21-200 1 +++
+ 200 1 ++++
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo quantitativo derivado de anaacutelise semiquantitativa
Contagem de parasitos por campo
Cruzes Parasitos por mm3
40 a 60100 +2 200-300
1 + 301-500
2-20 ++ 501 - 10000
21-200 +++ 10001 ndash 100000
+ 200 ++++ 100000 ou mais
Diagnoacutestico
bull P falciparum
ndash Parte do ciclo celular aderido ao endoteacutelio capilar Encontro somente de trofozoitos e gametoacutecitos no sangue perifeacuterico
ndash Raramente os esquizontes satildeo encontrados no sangue perifeacuterico
Diagnoacutestico ndash Pvivax ndash Encontro de todas as formas de desenvolvimento ndash
trofozoiacuteto jovem maduro esquizontes e gametoacutecitos
ndash Os trofozoiacutetos maduros tecircm geralmente um aspecto irregular com extensotildees ameboacuteides em seu citoplasma
Diagnoacutestico ndash Pvivax
ndash Os gametoacutecitos femininos coram-se mais intensamente que os masculinos e apresentam nuacutecleo mais compacto geralmente em localizaccedilatildeo perifeacuterica
ndash O pigmento malaacuterico geralmente eacute abundante
Diagnoacutestico - Pmalariae
bull Realizado por meio de caracteriacutesticas morfoloacutegicas do parasito
ndash Verificaccedilatildeo em esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado
ndash Posiccedilatildeo equatorial do parasito
ndash Desenvolvimento sem deformaccedilatildeo do eritroacutecito
Diagnoacutestico
bull QBC ndash Teacutecnica que combina concentraccedilatildeo dos parasitos
pela centrifugaccedilatildeo do sangue em em microhematoacutecrito e a coloraccedilatildeo dos aacutecidos nucleacuteicos do parasito pelo fluorcromo laranja de acridina
ndash Utilizaccedilatildeo de tubos especiais e microscopia epifluorescente
ndash Teste raacutepido
ndash Alta sensibilidade
Diagnoacutestico
bull ParaSight-F ( Becton amp Dickinson)
ndash Teste raacutepido para captura da proteiacutena rica em histidina 2 de Pfalciparum( PfHRP2) e enzimas conservadas de 4 espeacutecies de plasmoacutedio (DHL e aldolase
ndash Utilizaccedilatildeo de fita de nitrocelulose contendo ac monoclonal
ndash Lise de uma gota de sangue
ndash A reaccedilatildeo eacute revelada com adiccedilatildeo de ac policlonal anti-HRP2 conjugado com lipossomas contendo corante
Diagnoacutestico
bull PCR
ndash Sensibilidade e especificidade maior do que o esfregaccedilo sanguiacuteneo
Periodicidade
bull Periodicidade noturna das microfilaacuterias
ndash Durante o dia localizam-se nos capilares profundos
ndash Durante a noite vasos sanguiacuteneos perifeacutericos
ndash Pico da microfilaremia meia-noite coincidindo com o horaacuterio de hematofagismo do inseto transmissor
Patologia
bull Periacuteodo assintomaacutetico bull Fase aguda bull Processos inflamatoacuterios produzidos por larvas L4 e adultos jovens
que colonizam as vias linfaacuteticas ndash Linfadenites linfonodos inguinais epitrocleanos e axilares com
desenvolvimento de granulomas com calcificaccedilatildeo apoacutes a morte dos vermes
ndash Linfangite inflamaccedilatildeo e dilataccedilatildeo dos vasos linfaacuteticos ndash Febre mal estar ndash Funiculite filariana linfangite do cordatildeo espermaacutetico e varicocele
bull Fase crocircnica ndash Hidrocele ndash Linfedema ndash Quiluacuteria ndash Elefantiacutease
Quiluacuteria
Patologia
bull Processos obstrutivos ndash Formaccedilatildeo de novelos envolvidos por reaccedilatildeo
inflamatoacuteria e pela formaccedilatildeo de fibrose
ndash Estase e congestatildeo da linfa produzindo linfoedema tecidual
ndash Extravasamento produzindo derrame linfaacutetico ascite linfaacutetica linfuacuteria linforreacuteia linfotoacuterax linfocele etc
ndash A ruptura de vasos linfaacuteticos para o interior do sistema excretor urinaacuterio daacute origem agrave quiluacuteria
Patologia
bull Complicaccedilotildees associadas agrave filariose
ndash Elefantiacutease
bull Caracterizada por processo inflamatoacuterio e fibrose crocircnica do oacutergatildeo atingido
bull Hipertrofia da derme do tecido conjuntivo aumento exagerado do volume do oacutergatildeo com queratinizaccedilatildeo e rugosidade
bull A pele perde a elasticidade resseca e se torna sujeita a infecccedilotildees bacterianas
Patologia
bull Permanecimento na aacuterea endecircmica
bull Nuacutemero de larvas inoculadas
bull Frequecircncia das re-infecccedilotildees
bull O nuacutemero de acasalamento dos vermes e suas localizaccedilotildees anatocircmicas
bull A sensibilizaccedilatildeo do organismo e a intensidade das reaccedilotildees inflamatoacuterias do paciente
bull As infecccedilotildees bacterianas associadas
Diagnoacutestico
bull Pesquisa de microfilaacuterias no sangue perifeacuterico ndash 20 40 ou 60 microL- de preferecircncia entre as 10 h da noite e 4h da manhatilde
ndash Gota espessa Coloraccedilatildeo de Giemsa
ndash Meacutetodos de concentraccedilatildeo Filtraccedilatildeo em membrana de policarbonato milipore ou nucleopore
ndash Meacutetodo de Knott
bull Na fase crocircnica as microfilaacuterias raramente satildeo detectadas no sangue perifeacuterico
Gota espessa
bull Possibilita a visualizaccedilatildeo da bainha fato que difere a microfilaria de W bancrofti de outro filariacutedeos sanguiacuteneos
bull Apresenta um baixo custo em comparaccedilatildeo com outras mais avanccediladas como a filtraccedilatildeo de sangue em membrana de policarbonato
bull Possui baixa sensibilidade natildeo indicada em situaccedilotildees em que os parasitados se mostram com baixa microfilaremia ou amicrofilarecircmicos
Concentraccedilatildeo
bull Baseia-se na passagem de sangue venoso atraveacutes de uma membrana (Milipore ou Nuclepore) de diacircmetro de 13 a 25 mm e poros de 5 ou 3 μm
bull O material retido na membrana sendo fixado corado e observado ao microscoacutepio
bull Essa teacutecnica assim como a de Knott permite a identificaccedilatildeo de indiviacuteduos com baixiacutessimas parasitemias (quantidade de microfilarias natildeo detectaacuteveis pela teacutecnica de gota espessa)
Teacutecnica de Knott
bull Retirar 2 ml de sangue total por punccedilatildeo venosa e colocar imediatamente em um tubo contendo 10 ml de formol a 2
bull Fechar o tubo e misture completamente invertendo-o e agitando-o O formol hemolisa as hemaacutecias mata fixa e distende as microfilaacuterias
bull Centrifugar o sangue a 1500 rpm por 5 minutos
bull Decantar o sobrenadante
Teacutecnica de Knott
bull Retirar o sedimento com uma pipeta Pasteur e espalhar a gota espessa sobre uma lacircmina
bull Deixar secar bem e corar com Giemsa
bull Examinar com objetiva de imersatildeo
bull Esta teacutecnica possibilita que o exame microscoacutepico laboratorial seja realizado vaacuterios dias apoacutes a coleta de material realizada no campo
Exames de imagem
bull Ultranossografia
ndash Possibilidade de visualizar os movimentos de vermes adultos vivos de W bancrofti em vaso linfaacutetico especificamente em vasos intraescrotais do cordatildeo espermaacutetico
ndash O movimento ativo e ininterrupto dos vermes adultos durante as 24 horas do dia eacute denominado sinal da ldquodanccedila das filaacuteriasrdquo
Diagnoacutestico soroloacutegico
bull Teste imunocromatograacutefico desenvolvido pelo ICT Diagnostic - ICT card
ndash Teste qualilativo
ndash Cartatildeo possui ac de antifilaacuteria e o controle eacute formado por ac anti Ig G humano
Plasmodium spp
Taxonomia
bull Reino Protozoa
bull FiloApicomplexa
bull Classe Sporozoea
bull Ordem Hemosporidiida
bull Famiacutelia Plasmodiidae
bull Gecircneros Plasmodium
bull Espeacutecie Pfalciparum Pvivax Povale e Pmalariae
Plasmodium
bull Ciclo bioloacutegico Hospedeiro vertebrado e invertebrado
bull Hospedeiro invertebrado ndash Vetor
ndash Fecircmeas hematoacutefagas do gecircnero Anopheles
ndash Brasil Anopheles (N)darlingi A (N) aquasalis A (N) albitarsis A (K) cruzii e A (K) bellator
ndash Possuem haacutebito noturno penetrando nas casas no crespuacutesculo saindo ao amanhecer
Plasmodium
bull Hospedeiro vertebrado homem
bull Transmissatildeo
ndash Vetor
ndash Transfusatildeo de sangue
ndash Compartilhamento de seringas
ndash Acidente com agulhas
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
bull Ciclo preacute-eritrociacutetico
ndash Forma inoculada esporozoiacutetos
ndash A fecircmea do anofelino infectado inocula no homem as formas infectantes localizadas na saliva
ndash Os esporozoiacutetas permancem na circulaccedilatildeo por aproximadamente uma hora
ndash Invadem os hepatoacutecitos e se diferenciam em trofozoiacutetas (criptozoiacuteto)
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
ndash Esquizogonia e formaccedilatildeo de esquizontes
ndash Divisatildeo nuclear e liberaccedilatildeo de merozoiacutetos
ndash Aproximadamente 10000 merozoiacutetos por hepatoacutecito
ndash Rompimento do hepatoacutecito e liberaccedilatildeo de merozoiacutetos na circulaccedilatildeo
ndash Duraccedilatildeo do ciclo aprox 1 a 2 semanas
Ciclo evolutivo
bull PVivax e Povale
ndash Alguns esporozoiacutetos geneticamente diferentes ficam na forma latente nos hepatoacutecitos permanecendo muitos meses Satildeo classificados como hipnozoiacuteto
ndash Satildeo responsaacuteveis pelas recaiacutedas tardias e formas de malaacuteria com periacuteodo de encubaccedilatildeo longo ndash 6 a 9 meses
FASE HEPAacuteTICA OU EXOERITROCIacuteTICA
Hepatoacutecito
FIacuteGADO
Invasatildeo do hepatoacutecito
Reproduccedilatildeo Assexuada
Esporozoiacutetos Lise dos hepatoacutecitos
Liberaccedilatildeo dos protozoaacuterios na corrente sanguumliacutenea
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
bull Ciclo eritrociacutetico
ndash Os merozoiacutetos invadem as hemaacutecias
ndash Diferenciaccedilatildeo em trofozoiacutetos
ndash Esquizogonia esquizonte
ndash Produccedilatildeo de merozoiacutetos e rompimento da hemaacutecia
ndash Merozoiacutetos invasatildeo de novas hemaacutecias
ndash Apoacutes algumas geraccedilotildees os merozoiacutetos natildeo mais se dividem e se diferenciam em gametoacutecitos ndash micro e macrogametoacutecito
FASE ERITROCIacuteTICA
Hepatoacutecito destruiacutedo pelos protozoaacuterios
Penetraccedilatildeo dos protozoaacuterios
Reproduccedilatildeo assexuada
Protozoaacuterios destroem as hemaacutecias
Diferenciaccedilatildeo em gametoacutecitos
Fecircmeas de Anopheles sugam hemaacutecias com gametoacutecitos
Ciclo no hospedeiro invertebrado
Ocorre nas hemaacutecias ou Eritroacutecitos
nas hemaacutecias
Protozoaacuterio no interior da hemaacutecia
Hemaacutecia com gametoacutecito
T trofozoiacuteto Em esquizonte com merozoiacuteto
Fase eritrociacutetica
bull Ciclo sanguiacuteneo ndash Pfalciparum P vivax e Povale 48 horas
ndash Pmalariae 72 horas
ndash Fonte de nutriccedilatildeo do Plasmodium no ciclo sanguiacuteneo hemoglobina
ndash Produccedilatildeo do pigmento malaacuterico hemozoiacutena bull Granulaccedilotildees de Schuffner Plasmodium vivax
bull Granulaccedilotildees de Maurer P falciparum
bull Granulaccedilotildees de Ziemann P malariae
ndash Fagocitose pelas ceacutelulas de Kuppffer e macroacutefagos do baccedilo
Trofozoiacutetos Pfalciparum
Trofozoiacutetos Pfalciparum
Esquizonte ndash P falciparum
Raros no sangue perifeacuterico Possuem 2 a 24 merozoiacutetos
Ocupam 23 do gloacutebulo vermelho
Gametoacutecitos Pfalciparum
Ciclo evolutivo Pvivax
Esquizonte ndash P vivax
Satildeo grandes e ameboacuteides Cromatina organizada em duas ou mais massas
Possuem 2 a 24 merozoiacutetos com pontos de cromatina
Gametoacutecito ndash Pvivax
Macrogametoacutecitos satildeo redondos ou ovais e ocupam toda ceacutelula hospedeira O citoplasma eacute geralmente corado de azul mais escuro e conteacutem pigmento marrom Microgametoacutecitos satildeo geralmente do tamanho de um RBC natildeo infectados com citoplasma corados de azul paacutelido rosa ou cinza
Trofozoiacutetos - P malariae
Esquizontes ndash P malariae
Aproximadamente 6 a 12 merozoiacutetos com arranjo de rosetas
Gametoacutecitos ndash P malariae
Ciclo evolutivo ndash HI
bull Ingestatildeo de hemaacutecias contendo gametoacutecitos durante o repasto sanguiacuteneo da fecircmea do anofelino
bull No intestino meacutedio do vetor gametogecircnese ndash Macrogametoacutecito ndash macrogameta feminino ndash Microgametoacutecito o processo de exflagelaccedilatildeo daacute
origem a 8 microgametas masculinos ndash Produccedilatildeo de ovo ou zigoto ndash O ovo encista na camada epitelial do intestino meacutedio
oocisto ndash Esporogonia liberaccedilatildeo de esporozoiacutetos
Ciclo evolutivo ndash HInvertebrado
ndash Os esporozoiacutetos satildeo transportados pelo hemolinfa ateacute as glacircndulas salivares do vetor ateacute atingirem o ducto salivar
bull Inoculaccedilatildeo no hospedeiro vertebrado atraveacutes da picada do inseto
Hemaacutecia com gametoacutecito
Fecircmeas de Anopheles sugam hemaacutecias com gametoacutecitos
CICLO NO INVERTEBRADO
No tubo digestivo
Zigoto
Penetraccedilatildeo na parede do tubo
digestivo
Migraccedilatildeo para as glacircndulas salivares
Desenvolvimento
Mosquito infectado
Diagnoacutestico
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado e espesso corado pelo Giemsa
bull Sangue colhido sem anticoagulante para melhor fixaccedilatildeo em lacircmina
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo espesso eacute mais eficiente para detecccedilatildeo da infecccedilatildeo
bull Esfregaccedilo delgado eacute mais eficiente para diferenciaccedilatildeo morfoloacutegica das espeacutecies
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo semiquantitativo
ndash Exame de 100 campos microscoacutepicos com resultado expresso pelo sistema de cruzes
Parasitos contados Nuacutemero de campos
microscoacutepicos cruzes
40 a 60 100 +2
1 1 +
2-20 1 ++
21-200 1 +++
+ 200 1 ++++
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo quantitativo derivado de anaacutelise semiquantitativa
Contagem de parasitos por campo
Cruzes Parasitos por mm3
40 a 60100 +2 200-300
1 + 301-500
2-20 ++ 501 - 10000
21-200 +++ 10001 ndash 100000
+ 200 ++++ 100000 ou mais
Diagnoacutestico
bull P falciparum
ndash Parte do ciclo celular aderido ao endoteacutelio capilar Encontro somente de trofozoitos e gametoacutecitos no sangue perifeacuterico
ndash Raramente os esquizontes satildeo encontrados no sangue perifeacuterico
Diagnoacutestico ndash Pvivax ndash Encontro de todas as formas de desenvolvimento ndash
trofozoiacuteto jovem maduro esquizontes e gametoacutecitos
ndash Os trofozoiacutetos maduros tecircm geralmente um aspecto irregular com extensotildees ameboacuteides em seu citoplasma
Diagnoacutestico ndash Pvivax
ndash Os gametoacutecitos femininos coram-se mais intensamente que os masculinos e apresentam nuacutecleo mais compacto geralmente em localizaccedilatildeo perifeacuterica
ndash O pigmento malaacuterico geralmente eacute abundante
Diagnoacutestico - Pmalariae
bull Realizado por meio de caracteriacutesticas morfoloacutegicas do parasito
ndash Verificaccedilatildeo em esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado
ndash Posiccedilatildeo equatorial do parasito
ndash Desenvolvimento sem deformaccedilatildeo do eritroacutecito
Diagnoacutestico
bull QBC ndash Teacutecnica que combina concentraccedilatildeo dos parasitos
pela centrifugaccedilatildeo do sangue em em microhematoacutecrito e a coloraccedilatildeo dos aacutecidos nucleacuteicos do parasito pelo fluorcromo laranja de acridina
ndash Utilizaccedilatildeo de tubos especiais e microscopia epifluorescente
ndash Teste raacutepido
ndash Alta sensibilidade
Diagnoacutestico
bull ParaSight-F ( Becton amp Dickinson)
ndash Teste raacutepido para captura da proteiacutena rica em histidina 2 de Pfalciparum( PfHRP2) e enzimas conservadas de 4 espeacutecies de plasmoacutedio (DHL e aldolase
ndash Utilizaccedilatildeo de fita de nitrocelulose contendo ac monoclonal
ndash Lise de uma gota de sangue
ndash A reaccedilatildeo eacute revelada com adiccedilatildeo de ac policlonal anti-HRP2 conjugado com lipossomas contendo corante
Diagnoacutestico
bull PCR
ndash Sensibilidade e especificidade maior do que o esfregaccedilo sanguiacuteneo
Patologia
bull Periacuteodo assintomaacutetico bull Fase aguda bull Processos inflamatoacuterios produzidos por larvas L4 e adultos jovens
que colonizam as vias linfaacuteticas ndash Linfadenites linfonodos inguinais epitrocleanos e axilares com
desenvolvimento de granulomas com calcificaccedilatildeo apoacutes a morte dos vermes
ndash Linfangite inflamaccedilatildeo e dilataccedilatildeo dos vasos linfaacuteticos ndash Febre mal estar ndash Funiculite filariana linfangite do cordatildeo espermaacutetico e varicocele
bull Fase crocircnica ndash Hidrocele ndash Linfedema ndash Quiluacuteria ndash Elefantiacutease
Quiluacuteria
Patologia
bull Processos obstrutivos ndash Formaccedilatildeo de novelos envolvidos por reaccedilatildeo
inflamatoacuteria e pela formaccedilatildeo de fibrose
ndash Estase e congestatildeo da linfa produzindo linfoedema tecidual
ndash Extravasamento produzindo derrame linfaacutetico ascite linfaacutetica linfuacuteria linforreacuteia linfotoacuterax linfocele etc
ndash A ruptura de vasos linfaacuteticos para o interior do sistema excretor urinaacuterio daacute origem agrave quiluacuteria
Patologia
bull Complicaccedilotildees associadas agrave filariose
ndash Elefantiacutease
bull Caracterizada por processo inflamatoacuterio e fibrose crocircnica do oacutergatildeo atingido
bull Hipertrofia da derme do tecido conjuntivo aumento exagerado do volume do oacutergatildeo com queratinizaccedilatildeo e rugosidade
bull A pele perde a elasticidade resseca e se torna sujeita a infecccedilotildees bacterianas
Patologia
bull Permanecimento na aacuterea endecircmica
bull Nuacutemero de larvas inoculadas
bull Frequecircncia das re-infecccedilotildees
bull O nuacutemero de acasalamento dos vermes e suas localizaccedilotildees anatocircmicas
bull A sensibilizaccedilatildeo do organismo e a intensidade das reaccedilotildees inflamatoacuterias do paciente
bull As infecccedilotildees bacterianas associadas
Diagnoacutestico
bull Pesquisa de microfilaacuterias no sangue perifeacuterico ndash 20 40 ou 60 microL- de preferecircncia entre as 10 h da noite e 4h da manhatilde
ndash Gota espessa Coloraccedilatildeo de Giemsa
ndash Meacutetodos de concentraccedilatildeo Filtraccedilatildeo em membrana de policarbonato milipore ou nucleopore
ndash Meacutetodo de Knott
bull Na fase crocircnica as microfilaacuterias raramente satildeo detectadas no sangue perifeacuterico
Gota espessa
bull Possibilita a visualizaccedilatildeo da bainha fato que difere a microfilaria de W bancrofti de outro filariacutedeos sanguiacuteneos
bull Apresenta um baixo custo em comparaccedilatildeo com outras mais avanccediladas como a filtraccedilatildeo de sangue em membrana de policarbonato
bull Possui baixa sensibilidade natildeo indicada em situaccedilotildees em que os parasitados se mostram com baixa microfilaremia ou amicrofilarecircmicos
Concentraccedilatildeo
bull Baseia-se na passagem de sangue venoso atraveacutes de uma membrana (Milipore ou Nuclepore) de diacircmetro de 13 a 25 mm e poros de 5 ou 3 μm
bull O material retido na membrana sendo fixado corado e observado ao microscoacutepio
bull Essa teacutecnica assim como a de Knott permite a identificaccedilatildeo de indiviacuteduos com baixiacutessimas parasitemias (quantidade de microfilarias natildeo detectaacuteveis pela teacutecnica de gota espessa)
Teacutecnica de Knott
bull Retirar 2 ml de sangue total por punccedilatildeo venosa e colocar imediatamente em um tubo contendo 10 ml de formol a 2
bull Fechar o tubo e misture completamente invertendo-o e agitando-o O formol hemolisa as hemaacutecias mata fixa e distende as microfilaacuterias
bull Centrifugar o sangue a 1500 rpm por 5 minutos
bull Decantar o sobrenadante
Teacutecnica de Knott
bull Retirar o sedimento com uma pipeta Pasteur e espalhar a gota espessa sobre uma lacircmina
bull Deixar secar bem e corar com Giemsa
bull Examinar com objetiva de imersatildeo
bull Esta teacutecnica possibilita que o exame microscoacutepico laboratorial seja realizado vaacuterios dias apoacutes a coleta de material realizada no campo
Exames de imagem
bull Ultranossografia
ndash Possibilidade de visualizar os movimentos de vermes adultos vivos de W bancrofti em vaso linfaacutetico especificamente em vasos intraescrotais do cordatildeo espermaacutetico
ndash O movimento ativo e ininterrupto dos vermes adultos durante as 24 horas do dia eacute denominado sinal da ldquodanccedila das filaacuteriasrdquo
Diagnoacutestico soroloacutegico
bull Teste imunocromatograacutefico desenvolvido pelo ICT Diagnostic - ICT card
ndash Teste qualilativo
ndash Cartatildeo possui ac de antifilaacuteria e o controle eacute formado por ac anti Ig G humano
Plasmodium spp
Taxonomia
bull Reino Protozoa
bull FiloApicomplexa
bull Classe Sporozoea
bull Ordem Hemosporidiida
bull Famiacutelia Plasmodiidae
bull Gecircneros Plasmodium
bull Espeacutecie Pfalciparum Pvivax Povale e Pmalariae
Plasmodium
bull Ciclo bioloacutegico Hospedeiro vertebrado e invertebrado
bull Hospedeiro invertebrado ndash Vetor
ndash Fecircmeas hematoacutefagas do gecircnero Anopheles
ndash Brasil Anopheles (N)darlingi A (N) aquasalis A (N) albitarsis A (K) cruzii e A (K) bellator
ndash Possuem haacutebito noturno penetrando nas casas no crespuacutesculo saindo ao amanhecer
Plasmodium
bull Hospedeiro vertebrado homem
bull Transmissatildeo
ndash Vetor
ndash Transfusatildeo de sangue
ndash Compartilhamento de seringas
ndash Acidente com agulhas
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
bull Ciclo preacute-eritrociacutetico
ndash Forma inoculada esporozoiacutetos
ndash A fecircmea do anofelino infectado inocula no homem as formas infectantes localizadas na saliva
ndash Os esporozoiacutetas permancem na circulaccedilatildeo por aproximadamente uma hora
ndash Invadem os hepatoacutecitos e se diferenciam em trofozoiacutetas (criptozoiacuteto)
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
ndash Esquizogonia e formaccedilatildeo de esquizontes
ndash Divisatildeo nuclear e liberaccedilatildeo de merozoiacutetos
ndash Aproximadamente 10000 merozoiacutetos por hepatoacutecito
ndash Rompimento do hepatoacutecito e liberaccedilatildeo de merozoiacutetos na circulaccedilatildeo
ndash Duraccedilatildeo do ciclo aprox 1 a 2 semanas
Ciclo evolutivo
bull PVivax e Povale
ndash Alguns esporozoiacutetos geneticamente diferentes ficam na forma latente nos hepatoacutecitos permanecendo muitos meses Satildeo classificados como hipnozoiacuteto
ndash Satildeo responsaacuteveis pelas recaiacutedas tardias e formas de malaacuteria com periacuteodo de encubaccedilatildeo longo ndash 6 a 9 meses
FASE HEPAacuteTICA OU EXOERITROCIacuteTICA
Hepatoacutecito
FIacuteGADO
Invasatildeo do hepatoacutecito
Reproduccedilatildeo Assexuada
Esporozoiacutetos Lise dos hepatoacutecitos
Liberaccedilatildeo dos protozoaacuterios na corrente sanguumliacutenea
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
bull Ciclo eritrociacutetico
ndash Os merozoiacutetos invadem as hemaacutecias
ndash Diferenciaccedilatildeo em trofozoiacutetos
ndash Esquizogonia esquizonte
ndash Produccedilatildeo de merozoiacutetos e rompimento da hemaacutecia
ndash Merozoiacutetos invasatildeo de novas hemaacutecias
ndash Apoacutes algumas geraccedilotildees os merozoiacutetos natildeo mais se dividem e se diferenciam em gametoacutecitos ndash micro e macrogametoacutecito
FASE ERITROCIacuteTICA
Hepatoacutecito destruiacutedo pelos protozoaacuterios
Penetraccedilatildeo dos protozoaacuterios
Reproduccedilatildeo assexuada
Protozoaacuterios destroem as hemaacutecias
Diferenciaccedilatildeo em gametoacutecitos
Fecircmeas de Anopheles sugam hemaacutecias com gametoacutecitos
Ciclo no hospedeiro invertebrado
Ocorre nas hemaacutecias ou Eritroacutecitos
nas hemaacutecias
Protozoaacuterio no interior da hemaacutecia
Hemaacutecia com gametoacutecito
T trofozoiacuteto Em esquizonte com merozoiacuteto
Fase eritrociacutetica
bull Ciclo sanguiacuteneo ndash Pfalciparum P vivax e Povale 48 horas
ndash Pmalariae 72 horas
ndash Fonte de nutriccedilatildeo do Plasmodium no ciclo sanguiacuteneo hemoglobina
ndash Produccedilatildeo do pigmento malaacuterico hemozoiacutena bull Granulaccedilotildees de Schuffner Plasmodium vivax
bull Granulaccedilotildees de Maurer P falciparum
bull Granulaccedilotildees de Ziemann P malariae
ndash Fagocitose pelas ceacutelulas de Kuppffer e macroacutefagos do baccedilo
Trofozoiacutetos Pfalciparum
Trofozoiacutetos Pfalciparum
Esquizonte ndash P falciparum
Raros no sangue perifeacuterico Possuem 2 a 24 merozoiacutetos
Ocupam 23 do gloacutebulo vermelho
Gametoacutecitos Pfalciparum
Ciclo evolutivo Pvivax
Esquizonte ndash P vivax
Satildeo grandes e ameboacuteides Cromatina organizada em duas ou mais massas
Possuem 2 a 24 merozoiacutetos com pontos de cromatina
Gametoacutecito ndash Pvivax
Macrogametoacutecitos satildeo redondos ou ovais e ocupam toda ceacutelula hospedeira O citoplasma eacute geralmente corado de azul mais escuro e conteacutem pigmento marrom Microgametoacutecitos satildeo geralmente do tamanho de um RBC natildeo infectados com citoplasma corados de azul paacutelido rosa ou cinza
Trofozoiacutetos - P malariae
Esquizontes ndash P malariae
Aproximadamente 6 a 12 merozoiacutetos com arranjo de rosetas
Gametoacutecitos ndash P malariae
Ciclo evolutivo ndash HI
bull Ingestatildeo de hemaacutecias contendo gametoacutecitos durante o repasto sanguiacuteneo da fecircmea do anofelino
bull No intestino meacutedio do vetor gametogecircnese ndash Macrogametoacutecito ndash macrogameta feminino ndash Microgametoacutecito o processo de exflagelaccedilatildeo daacute
origem a 8 microgametas masculinos ndash Produccedilatildeo de ovo ou zigoto ndash O ovo encista na camada epitelial do intestino meacutedio
oocisto ndash Esporogonia liberaccedilatildeo de esporozoiacutetos
Ciclo evolutivo ndash HInvertebrado
ndash Os esporozoiacutetos satildeo transportados pelo hemolinfa ateacute as glacircndulas salivares do vetor ateacute atingirem o ducto salivar
bull Inoculaccedilatildeo no hospedeiro vertebrado atraveacutes da picada do inseto
Hemaacutecia com gametoacutecito
Fecircmeas de Anopheles sugam hemaacutecias com gametoacutecitos
CICLO NO INVERTEBRADO
No tubo digestivo
Zigoto
Penetraccedilatildeo na parede do tubo
digestivo
Migraccedilatildeo para as glacircndulas salivares
Desenvolvimento
Mosquito infectado
Diagnoacutestico
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado e espesso corado pelo Giemsa
bull Sangue colhido sem anticoagulante para melhor fixaccedilatildeo em lacircmina
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo espesso eacute mais eficiente para detecccedilatildeo da infecccedilatildeo
bull Esfregaccedilo delgado eacute mais eficiente para diferenciaccedilatildeo morfoloacutegica das espeacutecies
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo semiquantitativo
ndash Exame de 100 campos microscoacutepicos com resultado expresso pelo sistema de cruzes
Parasitos contados Nuacutemero de campos
microscoacutepicos cruzes
40 a 60 100 +2
1 1 +
2-20 1 ++
21-200 1 +++
+ 200 1 ++++
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo quantitativo derivado de anaacutelise semiquantitativa
Contagem de parasitos por campo
Cruzes Parasitos por mm3
40 a 60100 +2 200-300
1 + 301-500
2-20 ++ 501 - 10000
21-200 +++ 10001 ndash 100000
+ 200 ++++ 100000 ou mais
Diagnoacutestico
bull P falciparum
ndash Parte do ciclo celular aderido ao endoteacutelio capilar Encontro somente de trofozoitos e gametoacutecitos no sangue perifeacuterico
ndash Raramente os esquizontes satildeo encontrados no sangue perifeacuterico
Diagnoacutestico ndash Pvivax ndash Encontro de todas as formas de desenvolvimento ndash
trofozoiacuteto jovem maduro esquizontes e gametoacutecitos
ndash Os trofozoiacutetos maduros tecircm geralmente um aspecto irregular com extensotildees ameboacuteides em seu citoplasma
Diagnoacutestico ndash Pvivax
ndash Os gametoacutecitos femininos coram-se mais intensamente que os masculinos e apresentam nuacutecleo mais compacto geralmente em localizaccedilatildeo perifeacuterica
ndash O pigmento malaacuterico geralmente eacute abundante
Diagnoacutestico - Pmalariae
bull Realizado por meio de caracteriacutesticas morfoloacutegicas do parasito
ndash Verificaccedilatildeo em esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado
ndash Posiccedilatildeo equatorial do parasito
ndash Desenvolvimento sem deformaccedilatildeo do eritroacutecito
Diagnoacutestico
bull QBC ndash Teacutecnica que combina concentraccedilatildeo dos parasitos
pela centrifugaccedilatildeo do sangue em em microhematoacutecrito e a coloraccedilatildeo dos aacutecidos nucleacuteicos do parasito pelo fluorcromo laranja de acridina
ndash Utilizaccedilatildeo de tubos especiais e microscopia epifluorescente
ndash Teste raacutepido
ndash Alta sensibilidade
Diagnoacutestico
bull ParaSight-F ( Becton amp Dickinson)
ndash Teste raacutepido para captura da proteiacutena rica em histidina 2 de Pfalciparum( PfHRP2) e enzimas conservadas de 4 espeacutecies de plasmoacutedio (DHL e aldolase
ndash Utilizaccedilatildeo de fita de nitrocelulose contendo ac monoclonal
ndash Lise de uma gota de sangue
ndash A reaccedilatildeo eacute revelada com adiccedilatildeo de ac policlonal anti-HRP2 conjugado com lipossomas contendo corante
Diagnoacutestico
bull PCR
ndash Sensibilidade e especificidade maior do que o esfregaccedilo sanguiacuteneo
Quiluacuteria
Patologia
bull Processos obstrutivos ndash Formaccedilatildeo de novelos envolvidos por reaccedilatildeo
inflamatoacuteria e pela formaccedilatildeo de fibrose
ndash Estase e congestatildeo da linfa produzindo linfoedema tecidual
ndash Extravasamento produzindo derrame linfaacutetico ascite linfaacutetica linfuacuteria linforreacuteia linfotoacuterax linfocele etc
ndash A ruptura de vasos linfaacuteticos para o interior do sistema excretor urinaacuterio daacute origem agrave quiluacuteria
Patologia
bull Complicaccedilotildees associadas agrave filariose
ndash Elefantiacutease
bull Caracterizada por processo inflamatoacuterio e fibrose crocircnica do oacutergatildeo atingido
bull Hipertrofia da derme do tecido conjuntivo aumento exagerado do volume do oacutergatildeo com queratinizaccedilatildeo e rugosidade
bull A pele perde a elasticidade resseca e se torna sujeita a infecccedilotildees bacterianas
Patologia
bull Permanecimento na aacuterea endecircmica
bull Nuacutemero de larvas inoculadas
bull Frequecircncia das re-infecccedilotildees
bull O nuacutemero de acasalamento dos vermes e suas localizaccedilotildees anatocircmicas
bull A sensibilizaccedilatildeo do organismo e a intensidade das reaccedilotildees inflamatoacuterias do paciente
bull As infecccedilotildees bacterianas associadas
Diagnoacutestico
bull Pesquisa de microfilaacuterias no sangue perifeacuterico ndash 20 40 ou 60 microL- de preferecircncia entre as 10 h da noite e 4h da manhatilde
ndash Gota espessa Coloraccedilatildeo de Giemsa
ndash Meacutetodos de concentraccedilatildeo Filtraccedilatildeo em membrana de policarbonato milipore ou nucleopore
ndash Meacutetodo de Knott
bull Na fase crocircnica as microfilaacuterias raramente satildeo detectadas no sangue perifeacuterico
Gota espessa
bull Possibilita a visualizaccedilatildeo da bainha fato que difere a microfilaria de W bancrofti de outro filariacutedeos sanguiacuteneos
bull Apresenta um baixo custo em comparaccedilatildeo com outras mais avanccediladas como a filtraccedilatildeo de sangue em membrana de policarbonato
bull Possui baixa sensibilidade natildeo indicada em situaccedilotildees em que os parasitados se mostram com baixa microfilaremia ou amicrofilarecircmicos
Concentraccedilatildeo
bull Baseia-se na passagem de sangue venoso atraveacutes de uma membrana (Milipore ou Nuclepore) de diacircmetro de 13 a 25 mm e poros de 5 ou 3 μm
bull O material retido na membrana sendo fixado corado e observado ao microscoacutepio
bull Essa teacutecnica assim como a de Knott permite a identificaccedilatildeo de indiviacuteduos com baixiacutessimas parasitemias (quantidade de microfilarias natildeo detectaacuteveis pela teacutecnica de gota espessa)
Teacutecnica de Knott
bull Retirar 2 ml de sangue total por punccedilatildeo venosa e colocar imediatamente em um tubo contendo 10 ml de formol a 2
bull Fechar o tubo e misture completamente invertendo-o e agitando-o O formol hemolisa as hemaacutecias mata fixa e distende as microfilaacuterias
bull Centrifugar o sangue a 1500 rpm por 5 minutos
bull Decantar o sobrenadante
Teacutecnica de Knott
bull Retirar o sedimento com uma pipeta Pasteur e espalhar a gota espessa sobre uma lacircmina
bull Deixar secar bem e corar com Giemsa
bull Examinar com objetiva de imersatildeo
bull Esta teacutecnica possibilita que o exame microscoacutepico laboratorial seja realizado vaacuterios dias apoacutes a coleta de material realizada no campo
Exames de imagem
bull Ultranossografia
ndash Possibilidade de visualizar os movimentos de vermes adultos vivos de W bancrofti em vaso linfaacutetico especificamente em vasos intraescrotais do cordatildeo espermaacutetico
ndash O movimento ativo e ininterrupto dos vermes adultos durante as 24 horas do dia eacute denominado sinal da ldquodanccedila das filaacuteriasrdquo
Diagnoacutestico soroloacutegico
bull Teste imunocromatograacutefico desenvolvido pelo ICT Diagnostic - ICT card
ndash Teste qualilativo
ndash Cartatildeo possui ac de antifilaacuteria e o controle eacute formado por ac anti Ig G humano
Plasmodium spp
Taxonomia
bull Reino Protozoa
bull FiloApicomplexa
bull Classe Sporozoea
bull Ordem Hemosporidiida
bull Famiacutelia Plasmodiidae
bull Gecircneros Plasmodium
bull Espeacutecie Pfalciparum Pvivax Povale e Pmalariae
Plasmodium
bull Ciclo bioloacutegico Hospedeiro vertebrado e invertebrado
bull Hospedeiro invertebrado ndash Vetor
ndash Fecircmeas hematoacutefagas do gecircnero Anopheles
ndash Brasil Anopheles (N)darlingi A (N) aquasalis A (N) albitarsis A (K) cruzii e A (K) bellator
ndash Possuem haacutebito noturno penetrando nas casas no crespuacutesculo saindo ao amanhecer
Plasmodium
bull Hospedeiro vertebrado homem
bull Transmissatildeo
ndash Vetor
ndash Transfusatildeo de sangue
ndash Compartilhamento de seringas
ndash Acidente com agulhas
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
bull Ciclo preacute-eritrociacutetico
ndash Forma inoculada esporozoiacutetos
ndash A fecircmea do anofelino infectado inocula no homem as formas infectantes localizadas na saliva
ndash Os esporozoiacutetas permancem na circulaccedilatildeo por aproximadamente uma hora
ndash Invadem os hepatoacutecitos e se diferenciam em trofozoiacutetas (criptozoiacuteto)
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
ndash Esquizogonia e formaccedilatildeo de esquizontes
ndash Divisatildeo nuclear e liberaccedilatildeo de merozoiacutetos
ndash Aproximadamente 10000 merozoiacutetos por hepatoacutecito
ndash Rompimento do hepatoacutecito e liberaccedilatildeo de merozoiacutetos na circulaccedilatildeo
ndash Duraccedilatildeo do ciclo aprox 1 a 2 semanas
Ciclo evolutivo
bull PVivax e Povale
ndash Alguns esporozoiacutetos geneticamente diferentes ficam na forma latente nos hepatoacutecitos permanecendo muitos meses Satildeo classificados como hipnozoiacuteto
ndash Satildeo responsaacuteveis pelas recaiacutedas tardias e formas de malaacuteria com periacuteodo de encubaccedilatildeo longo ndash 6 a 9 meses
FASE HEPAacuteTICA OU EXOERITROCIacuteTICA
Hepatoacutecito
FIacuteGADO
Invasatildeo do hepatoacutecito
Reproduccedilatildeo Assexuada
Esporozoiacutetos Lise dos hepatoacutecitos
Liberaccedilatildeo dos protozoaacuterios na corrente sanguumliacutenea
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
bull Ciclo eritrociacutetico
ndash Os merozoiacutetos invadem as hemaacutecias
ndash Diferenciaccedilatildeo em trofozoiacutetos
ndash Esquizogonia esquizonte
ndash Produccedilatildeo de merozoiacutetos e rompimento da hemaacutecia
ndash Merozoiacutetos invasatildeo de novas hemaacutecias
ndash Apoacutes algumas geraccedilotildees os merozoiacutetos natildeo mais se dividem e se diferenciam em gametoacutecitos ndash micro e macrogametoacutecito
FASE ERITROCIacuteTICA
Hepatoacutecito destruiacutedo pelos protozoaacuterios
Penetraccedilatildeo dos protozoaacuterios
Reproduccedilatildeo assexuada
Protozoaacuterios destroem as hemaacutecias
Diferenciaccedilatildeo em gametoacutecitos
Fecircmeas de Anopheles sugam hemaacutecias com gametoacutecitos
Ciclo no hospedeiro invertebrado
Ocorre nas hemaacutecias ou Eritroacutecitos
nas hemaacutecias
Protozoaacuterio no interior da hemaacutecia
Hemaacutecia com gametoacutecito
T trofozoiacuteto Em esquizonte com merozoiacuteto
Fase eritrociacutetica
bull Ciclo sanguiacuteneo ndash Pfalciparum P vivax e Povale 48 horas
ndash Pmalariae 72 horas
ndash Fonte de nutriccedilatildeo do Plasmodium no ciclo sanguiacuteneo hemoglobina
ndash Produccedilatildeo do pigmento malaacuterico hemozoiacutena bull Granulaccedilotildees de Schuffner Plasmodium vivax
bull Granulaccedilotildees de Maurer P falciparum
bull Granulaccedilotildees de Ziemann P malariae
ndash Fagocitose pelas ceacutelulas de Kuppffer e macroacutefagos do baccedilo
Trofozoiacutetos Pfalciparum
Trofozoiacutetos Pfalciparum
Esquizonte ndash P falciparum
Raros no sangue perifeacuterico Possuem 2 a 24 merozoiacutetos
Ocupam 23 do gloacutebulo vermelho
Gametoacutecitos Pfalciparum
Ciclo evolutivo Pvivax
Esquizonte ndash P vivax
Satildeo grandes e ameboacuteides Cromatina organizada em duas ou mais massas
Possuem 2 a 24 merozoiacutetos com pontos de cromatina
Gametoacutecito ndash Pvivax
Macrogametoacutecitos satildeo redondos ou ovais e ocupam toda ceacutelula hospedeira O citoplasma eacute geralmente corado de azul mais escuro e conteacutem pigmento marrom Microgametoacutecitos satildeo geralmente do tamanho de um RBC natildeo infectados com citoplasma corados de azul paacutelido rosa ou cinza
Trofozoiacutetos - P malariae
Esquizontes ndash P malariae
Aproximadamente 6 a 12 merozoiacutetos com arranjo de rosetas
Gametoacutecitos ndash P malariae
Ciclo evolutivo ndash HI
bull Ingestatildeo de hemaacutecias contendo gametoacutecitos durante o repasto sanguiacuteneo da fecircmea do anofelino
bull No intestino meacutedio do vetor gametogecircnese ndash Macrogametoacutecito ndash macrogameta feminino ndash Microgametoacutecito o processo de exflagelaccedilatildeo daacute
origem a 8 microgametas masculinos ndash Produccedilatildeo de ovo ou zigoto ndash O ovo encista na camada epitelial do intestino meacutedio
oocisto ndash Esporogonia liberaccedilatildeo de esporozoiacutetos
Ciclo evolutivo ndash HInvertebrado
ndash Os esporozoiacutetos satildeo transportados pelo hemolinfa ateacute as glacircndulas salivares do vetor ateacute atingirem o ducto salivar
bull Inoculaccedilatildeo no hospedeiro vertebrado atraveacutes da picada do inseto
Hemaacutecia com gametoacutecito
Fecircmeas de Anopheles sugam hemaacutecias com gametoacutecitos
CICLO NO INVERTEBRADO
No tubo digestivo
Zigoto
Penetraccedilatildeo na parede do tubo
digestivo
Migraccedilatildeo para as glacircndulas salivares
Desenvolvimento
Mosquito infectado
Diagnoacutestico
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado e espesso corado pelo Giemsa
bull Sangue colhido sem anticoagulante para melhor fixaccedilatildeo em lacircmina
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo espesso eacute mais eficiente para detecccedilatildeo da infecccedilatildeo
bull Esfregaccedilo delgado eacute mais eficiente para diferenciaccedilatildeo morfoloacutegica das espeacutecies
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo semiquantitativo
ndash Exame de 100 campos microscoacutepicos com resultado expresso pelo sistema de cruzes
Parasitos contados Nuacutemero de campos
microscoacutepicos cruzes
40 a 60 100 +2
1 1 +
2-20 1 ++
21-200 1 +++
+ 200 1 ++++
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo quantitativo derivado de anaacutelise semiquantitativa
Contagem de parasitos por campo
Cruzes Parasitos por mm3
40 a 60100 +2 200-300
1 + 301-500
2-20 ++ 501 - 10000
21-200 +++ 10001 ndash 100000
+ 200 ++++ 100000 ou mais
Diagnoacutestico
bull P falciparum
ndash Parte do ciclo celular aderido ao endoteacutelio capilar Encontro somente de trofozoitos e gametoacutecitos no sangue perifeacuterico
ndash Raramente os esquizontes satildeo encontrados no sangue perifeacuterico
Diagnoacutestico ndash Pvivax ndash Encontro de todas as formas de desenvolvimento ndash
trofozoiacuteto jovem maduro esquizontes e gametoacutecitos
ndash Os trofozoiacutetos maduros tecircm geralmente um aspecto irregular com extensotildees ameboacuteides em seu citoplasma
Diagnoacutestico ndash Pvivax
ndash Os gametoacutecitos femininos coram-se mais intensamente que os masculinos e apresentam nuacutecleo mais compacto geralmente em localizaccedilatildeo perifeacuterica
ndash O pigmento malaacuterico geralmente eacute abundante
Diagnoacutestico - Pmalariae
bull Realizado por meio de caracteriacutesticas morfoloacutegicas do parasito
ndash Verificaccedilatildeo em esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado
ndash Posiccedilatildeo equatorial do parasito
ndash Desenvolvimento sem deformaccedilatildeo do eritroacutecito
Diagnoacutestico
bull QBC ndash Teacutecnica que combina concentraccedilatildeo dos parasitos
pela centrifugaccedilatildeo do sangue em em microhematoacutecrito e a coloraccedilatildeo dos aacutecidos nucleacuteicos do parasito pelo fluorcromo laranja de acridina
ndash Utilizaccedilatildeo de tubos especiais e microscopia epifluorescente
ndash Teste raacutepido
ndash Alta sensibilidade
Diagnoacutestico
bull ParaSight-F ( Becton amp Dickinson)
ndash Teste raacutepido para captura da proteiacutena rica em histidina 2 de Pfalciparum( PfHRP2) e enzimas conservadas de 4 espeacutecies de plasmoacutedio (DHL e aldolase
ndash Utilizaccedilatildeo de fita de nitrocelulose contendo ac monoclonal
ndash Lise de uma gota de sangue
ndash A reaccedilatildeo eacute revelada com adiccedilatildeo de ac policlonal anti-HRP2 conjugado com lipossomas contendo corante
Diagnoacutestico
bull PCR
ndash Sensibilidade e especificidade maior do que o esfregaccedilo sanguiacuteneo
Patologia
bull Processos obstrutivos ndash Formaccedilatildeo de novelos envolvidos por reaccedilatildeo
inflamatoacuteria e pela formaccedilatildeo de fibrose
ndash Estase e congestatildeo da linfa produzindo linfoedema tecidual
ndash Extravasamento produzindo derrame linfaacutetico ascite linfaacutetica linfuacuteria linforreacuteia linfotoacuterax linfocele etc
ndash A ruptura de vasos linfaacuteticos para o interior do sistema excretor urinaacuterio daacute origem agrave quiluacuteria
Patologia
bull Complicaccedilotildees associadas agrave filariose
ndash Elefantiacutease
bull Caracterizada por processo inflamatoacuterio e fibrose crocircnica do oacutergatildeo atingido
bull Hipertrofia da derme do tecido conjuntivo aumento exagerado do volume do oacutergatildeo com queratinizaccedilatildeo e rugosidade
bull A pele perde a elasticidade resseca e se torna sujeita a infecccedilotildees bacterianas
Patologia
bull Permanecimento na aacuterea endecircmica
bull Nuacutemero de larvas inoculadas
bull Frequecircncia das re-infecccedilotildees
bull O nuacutemero de acasalamento dos vermes e suas localizaccedilotildees anatocircmicas
bull A sensibilizaccedilatildeo do organismo e a intensidade das reaccedilotildees inflamatoacuterias do paciente
bull As infecccedilotildees bacterianas associadas
Diagnoacutestico
bull Pesquisa de microfilaacuterias no sangue perifeacuterico ndash 20 40 ou 60 microL- de preferecircncia entre as 10 h da noite e 4h da manhatilde
ndash Gota espessa Coloraccedilatildeo de Giemsa
ndash Meacutetodos de concentraccedilatildeo Filtraccedilatildeo em membrana de policarbonato milipore ou nucleopore
ndash Meacutetodo de Knott
bull Na fase crocircnica as microfilaacuterias raramente satildeo detectadas no sangue perifeacuterico
Gota espessa
bull Possibilita a visualizaccedilatildeo da bainha fato que difere a microfilaria de W bancrofti de outro filariacutedeos sanguiacuteneos
bull Apresenta um baixo custo em comparaccedilatildeo com outras mais avanccediladas como a filtraccedilatildeo de sangue em membrana de policarbonato
bull Possui baixa sensibilidade natildeo indicada em situaccedilotildees em que os parasitados se mostram com baixa microfilaremia ou amicrofilarecircmicos
Concentraccedilatildeo
bull Baseia-se na passagem de sangue venoso atraveacutes de uma membrana (Milipore ou Nuclepore) de diacircmetro de 13 a 25 mm e poros de 5 ou 3 μm
bull O material retido na membrana sendo fixado corado e observado ao microscoacutepio
bull Essa teacutecnica assim como a de Knott permite a identificaccedilatildeo de indiviacuteduos com baixiacutessimas parasitemias (quantidade de microfilarias natildeo detectaacuteveis pela teacutecnica de gota espessa)
Teacutecnica de Knott
bull Retirar 2 ml de sangue total por punccedilatildeo venosa e colocar imediatamente em um tubo contendo 10 ml de formol a 2
bull Fechar o tubo e misture completamente invertendo-o e agitando-o O formol hemolisa as hemaacutecias mata fixa e distende as microfilaacuterias
bull Centrifugar o sangue a 1500 rpm por 5 minutos
bull Decantar o sobrenadante
Teacutecnica de Knott
bull Retirar o sedimento com uma pipeta Pasteur e espalhar a gota espessa sobre uma lacircmina
bull Deixar secar bem e corar com Giemsa
bull Examinar com objetiva de imersatildeo
bull Esta teacutecnica possibilita que o exame microscoacutepico laboratorial seja realizado vaacuterios dias apoacutes a coleta de material realizada no campo
Exames de imagem
bull Ultranossografia
ndash Possibilidade de visualizar os movimentos de vermes adultos vivos de W bancrofti em vaso linfaacutetico especificamente em vasos intraescrotais do cordatildeo espermaacutetico
ndash O movimento ativo e ininterrupto dos vermes adultos durante as 24 horas do dia eacute denominado sinal da ldquodanccedila das filaacuteriasrdquo
Diagnoacutestico soroloacutegico
bull Teste imunocromatograacutefico desenvolvido pelo ICT Diagnostic - ICT card
ndash Teste qualilativo
ndash Cartatildeo possui ac de antifilaacuteria e o controle eacute formado por ac anti Ig G humano
Plasmodium spp
Taxonomia
bull Reino Protozoa
bull FiloApicomplexa
bull Classe Sporozoea
bull Ordem Hemosporidiida
bull Famiacutelia Plasmodiidae
bull Gecircneros Plasmodium
bull Espeacutecie Pfalciparum Pvivax Povale e Pmalariae
Plasmodium
bull Ciclo bioloacutegico Hospedeiro vertebrado e invertebrado
bull Hospedeiro invertebrado ndash Vetor
ndash Fecircmeas hematoacutefagas do gecircnero Anopheles
ndash Brasil Anopheles (N)darlingi A (N) aquasalis A (N) albitarsis A (K) cruzii e A (K) bellator
ndash Possuem haacutebito noturno penetrando nas casas no crespuacutesculo saindo ao amanhecer
Plasmodium
bull Hospedeiro vertebrado homem
bull Transmissatildeo
ndash Vetor
ndash Transfusatildeo de sangue
ndash Compartilhamento de seringas
ndash Acidente com agulhas
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
bull Ciclo preacute-eritrociacutetico
ndash Forma inoculada esporozoiacutetos
ndash A fecircmea do anofelino infectado inocula no homem as formas infectantes localizadas na saliva
ndash Os esporozoiacutetas permancem na circulaccedilatildeo por aproximadamente uma hora
ndash Invadem os hepatoacutecitos e se diferenciam em trofozoiacutetas (criptozoiacuteto)
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
ndash Esquizogonia e formaccedilatildeo de esquizontes
ndash Divisatildeo nuclear e liberaccedilatildeo de merozoiacutetos
ndash Aproximadamente 10000 merozoiacutetos por hepatoacutecito
ndash Rompimento do hepatoacutecito e liberaccedilatildeo de merozoiacutetos na circulaccedilatildeo
ndash Duraccedilatildeo do ciclo aprox 1 a 2 semanas
Ciclo evolutivo
bull PVivax e Povale
ndash Alguns esporozoiacutetos geneticamente diferentes ficam na forma latente nos hepatoacutecitos permanecendo muitos meses Satildeo classificados como hipnozoiacuteto
ndash Satildeo responsaacuteveis pelas recaiacutedas tardias e formas de malaacuteria com periacuteodo de encubaccedilatildeo longo ndash 6 a 9 meses
FASE HEPAacuteTICA OU EXOERITROCIacuteTICA
Hepatoacutecito
FIacuteGADO
Invasatildeo do hepatoacutecito
Reproduccedilatildeo Assexuada
Esporozoiacutetos Lise dos hepatoacutecitos
Liberaccedilatildeo dos protozoaacuterios na corrente sanguumliacutenea
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
bull Ciclo eritrociacutetico
ndash Os merozoiacutetos invadem as hemaacutecias
ndash Diferenciaccedilatildeo em trofozoiacutetos
ndash Esquizogonia esquizonte
ndash Produccedilatildeo de merozoiacutetos e rompimento da hemaacutecia
ndash Merozoiacutetos invasatildeo de novas hemaacutecias
ndash Apoacutes algumas geraccedilotildees os merozoiacutetos natildeo mais se dividem e se diferenciam em gametoacutecitos ndash micro e macrogametoacutecito
FASE ERITROCIacuteTICA
Hepatoacutecito destruiacutedo pelos protozoaacuterios
Penetraccedilatildeo dos protozoaacuterios
Reproduccedilatildeo assexuada
Protozoaacuterios destroem as hemaacutecias
Diferenciaccedilatildeo em gametoacutecitos
Fecircmeas de Anopheles sugam hemaacutecias com gametoacutecitos
Ciclo no hospedeiro invertebrado
Ocorre nas hemaacutecias ou Eritroacutecitos
nas hemaacutecias
Protozoaacuterio no interior da hemaacutecia
Hemaacutecia com gametoacutecito
T trofozoiacuteto Em esquizonte com merozoiacuteto
Fase eritrociacutetica
bull Ciclo sanguiacuteneo ndash Pfalciparum P vivax e Povale 48 horas
ndash Pmalariae 72 horas
ndash Fonte de nutriccedilatildeo do Plasmodium no ciclo sanguiacuteneo hemoglobina
ndash Produccedilatildeo do pigmento malaacuterico hemozoiacutena bull Granulaccedilotildees de Schuffner Plasmodium vivax
bull Granulaccedilotildees de Maurer P falciparum
bull Granulaccedilotildees de Ziemann P malariae
ndash Fagocitose pelas ceacutelulas de Kuppffer e macroacutefagos do baccedilo
Trofozoiacutetos Pfalciparum
Trofozoiacutetos Pfalciparum
Esquizonte ndash P falciparum
Raros no sangue perifeacuterico Possuem 2 a 24 merozoiacutetos
Ocupam 23 do gloacutebulo vermelho
Gametoacutecitos Pfalciparum
Ciclo evolutivo Pvivax
Esquizonte ndash P vivax
Satildeo grandes e ameboacuteides Cromatina organizada em duas ou mais massas
Possuem 2 a 24 merozoiacutetos com pontos de cromatina
Gametoacutecito ndash Pvivax
Macrogametoacutecitos satildeo redondos ou ovais e ocupam toda ceacutelula hospedeira O citoplasma eacute geralmente corado de azul mais escuro e conteacutem pigmento marrom Microgametoacutecitos satildeo geralmente do tamanho de um RBC natildeo infectados com citoplasma corados de azul paacutelido rosa ou cinza
Trofozoiacutetos - P malariae
Esquizontes ndash P malariae
Aproximadamente 6 a 12 merozoiacutetos com arranjo de rosetas
Gametoacutecitos ndash P malariae
Ciclo evolutivo ndash HI
bull Ingestatildeo de hemaacutecias contendo gametoacutecitos durante o repasto sanguiacuteneo da fecircmea do anofelino
bull No intestino meacutedio do vetor gametogecircnese ndash Macrogametoacutecito ndash macrogameta feminino ndash Microgametoacutecito o processo de exflagelaccedilatildeo daacute
origem a 8 microgametas masculinos ndash Produccedilatildeo de ovo ou zigoto ndash O ovo encista na camada epitelial do intestino meacutedio
oocisto ndash Esporogonia liberaccedilatildeo de esporozoiacutetos
Ciclo evolutivo ndash HInvertebrado
ndash Os esporozoiacutetos satildeo transportados pelo hemolinfa ateacute as glacircndulas salivares do vetor ateacute atingirem o ducto salivar
bull Inoculaccedilatildeo no hospedeiro vertebrado atraveacutes da picada do inseto
Hemaacutecia com gametoacutecito
Fecircmeas de Anopheles sugam hemaacutecias com gametoacutecitos
CICLO NO INVERTEBRADO
No tubo digestivo
Zigoto
Penetraccedilatildeo na parede do tubo
digestivo
Migraccedilatildeo para as glacircndulas salivares
Desenvolvimento
Mosquito infectado
Diagnoacutestico
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado e espesso corado pelo Giemsa
bull Sangue colhido sem anticoagulante para melhor fixaccedilatildeo em lacircmina
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo espesso eacute mais eficiente para detecccedilatildeo da infecccedilatildeo
bull Esfregaccedilo delgado eacute mais eficiente para diferenciaccedilatildeo morfoloacutegica das espeacutecies
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo semiquantitativo
ndash Exame de 100 campos microscoacutepicos com resultado expresso pelo sistema de cruzes
Parasitos contados Nuacutemero de campos
microscoacutepicos cruzes
40 a 60 100 +2
1 1 +
2-20 1 ++
21-200 1 +++
+ 200 1 ++++
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo quantitativo derivado de anaacutelise semiquantitativa
Contagem de parasitos por campo
Cruzes Parasitos por mm3
40 a 60100 +2 200-300
1 + 301-500
2-20 ++ 501 - 10000
21-200 +++ 10001 ndash 100000
+ 200 ++++ 100000 ou mais
Diagnoacutestico
bull P falciparum
ndash Parte do ciclo celular aderido ao endoteacutelio capilar Encontro somente de trofozoitos e gametoacutecitos no sangue perifeacuterico
ndash Raramente os esquizontes satildeo encontrados no sangue perifeacuterico
Diagnoacutestico ndash Pvivax ndash Encontro de todas as formas de desenvolvimento ndash
trofozoiacuteto jovem maduro esquizontes e gametoacutecitos
ndash Os trofozoiacutetos maduros tecircm geralmente um aspecto irregular com extensotildees ameboacuteides em seu citoplasma
Diagnoacutestico ndash Pvivax
ndash Os gametoacutecitos femininos coram-se mais intensamente que os masculinos e apresentam nuacutecleo mais compacto geralmente em localizaccedilatildeo perifeacuterica
ndash O pigmento malaacuterico geralmente eacute abundante
Diagnoacutestico - Pmalariae
bull Realizado por meio de caracteriacutesticas morfoloacutegicas do parasito
ndash Verificaccedilatildeo em esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado
ndash Posiccedilatildeo equatorial do parasito
ndash Desenvolvimento sem deformaccedilatildeo do eritroacutecito
Diagnoacutestico
bull QBC ndash Teacutecnica que combina concentraccedilatildeo dos parasitos
pela centrifugaccedilatildeo do sangue em em microhematoacutecrito e a coloraccedilatildeo dos aacutecidos nucleacuteicos do parasito pelo fluorcromo laranja de acridina
ndash Utilizaccedilatildeo de tubos especiais e microscopia epifluorescente
ndash Teste raacutepido
ndash Alta sensibilidade
Diagnoacutestico
bull ParaSight-F ( Becton amp Dickinson)
ndash Teste raacutepido para captura da proteiacutena rica em histidina 2 de Pfalciparum( PfHRP2) e enzimas conservadas de 4 espeacutecies de plasmoacutedio (DHL e aldolase
ndash Utilizaccedilatildeo de fita de nitrocelulose contendo ac monoclonal
ndash Lise de uma gota de sangue
ndash A reaccedilatildeo eacute revelada com adiccedilatildeo de ac policlonal anti-HRP2 conjugado com lipossomas contendo corante
Diagnoacutestico
bull PCR
ndash Sensibilidade e especificidade maior do que o esfregaccedilo sanguiacuteneo
Patologia
bull Complicaccedilotildees associadas agrave filariose
ndash Elefantiacutease
bull Caracterizada por processo inflamatoacuterio e fibrose crocircnica do oacutergatildeo atingido
bull Hipertrofia da derme do tecido conjuntivo aumento exagerado do volume do oacutergatildeo com queratinizaccedilatildeo e rugosidade
bull A pele perde a elasticidade resseca e se torna sujeita a infecccedilotildees bacterianas
Patologia
bull Permanecimento na aacuterea endecircmica
bull Nuacutemero de larvas inoculadas
bull Frequecircncia das re-infecccedilotildees
bull O nuacutemero de acasalamento dos vermes e suas localizaccedilotildees anatocircmicas
bull A sensibilizaccedilatildeo do organismo e a intensidade das reaccedilotildees inflamatoacuterias do paciente
bull As infecccedilotildees bacterianas associadas
Diagnoacutestico
bull Pesquisa de microfilaacuterias no sangue perifeacuterico ndash 20 40 ou 60 microL- de preferecircncia entre as 10 h da noite e 4h da manhatilde
ndash Gota espessa Coloraccedilatildeo de Giemsa
ndash Meacutetodos de concentraccedilatildeo Filtraccedilatildeo em membrana de policarbonato milipore ou nucleopore
ndash Meacutetodo de Knott
bull Na fase crocircnica as microfilaacuterias raramente satildeo detectadas no sangue perifeacuterico
Gota espessa
bull Possibilita a visualizaccedilatildeo da bainha fato que difere a microfilaria de W bancrofti de outro filariacutedeos sanguiacuteneos
bull Apresenta um baixo custo em comparaccedilatildeo com outras mais avanccediladas como a filtraccedilatildeo de sangue em membrana de policarbonato
bull Possui baixa sensibilidade natildeo indicada em situaccedilotildees em que os parasitados se mostram com baixa microfilaremia ou amicrofilarecircmicos
Concentraccedilatildeo
bull Baseia-se na passagem de sangue venoso atraveacutes de uma membrana (Milipore ou Nuclepore) de diacircmetro de 13 a 25 mm e poros de 5 ou 3 μm
bull O material retido na membrana sendo fixado corado e observado ao microscoacutepio
bull Essa teacutecnica assim como a de Knott permite a identificaccedilatildeo de indiviacuteduos com baixiacutessimas parasitemias (quantidade de microfilarias natildeo detectaacuteveis pela teacutecnica de gota espessa)
Teacutecnica de Knott
bull Retirar 2 ml de sangue total por punccedilatildeo venosa e colocar imediatamente em um tubo contendo 10 ml de formol a 2
bull Fechar o tubo e misture completamente invertendo-o e agitando-o O formol hemolisa as hemaacutecias mata fixa e distende as microfilaacuterias
bull Centrifugar o sangue a 1500 rpm por 5 minutos
bull Decantar o sobrenadante
Teacutecnica de Knott
bull Retirar o sedimento com uma pipeta Pasteur e espalhar a gota espessa sobre uma lacircmina
bull Deixar secar bem e corar com Giemsa
bull Examinar com objetiva de imersatildeo
bull Esta teacutecnica possibilita que o exame microscoacutepico laboratorial seja realizado vaacuterios dias apoacutes a coleta de material realizada no campo
Exames de imagem
bull Ultranossografia
ndash Possibilidade de visualizar os movimentos de vermes adultos vivos de W bancrofti em vaso linfaacutetico especificamente em vasos intraescrotais do cordatildeo espermaacutetico
ndash O movimento ativo e ininterrupto dos vermes adultos durante as 24 horas do dia eacute denominado sinal da ldquodanccedila das filaacuteriasrdquo
Diagnoacutestico soroloacutegico
bull Teste imunocromatograacutefico desenvolvido pelo ICT Diagnostic - ICT card
ndash Teste qualilativo
ndash Cartatildeo possui ac de antifilaacuteria e o controle eacute formado por ac anti Ig G humano
Plasmodium spp
Taxonomia
bull Reino Protozoa
bull FiloApicomplexa
bull Classe Sporozoea
bull Ordem Hemosporidiida
bull Famiacutelia Plasmodiidae
bull Gecircneros Plasmodium
bull Espeacutecie Pfalciparum Pvivax Povale e Pmalariae
Plasmodium
bull Ciclo bioloacutegico Hospedeiro vertebrado e invertebrado
bull Hospedeiro invertebrado ndash Vetor
ndash Fecircmeas hematoacutefagas do gecircnero Anopheles
ndash Brasil Anopheles (N)darlingi A (N) aquasalis A (N) albitarsis A (K) cruzii e A (K) bellator
ndash Possuem haacutebito noturno penetrando nas casas no crespuacutesculo saindo ao amanhecer
Plasmodium
bull Hospedeiro vertebrado homem
bull Transmissatildeo
ndash Vetor
ndash Transfusatildeo de sangue
ndash Compartilhamento de seringas
ndash Acidente com agulhas
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
bull Ciclo preacute-eritrociacutetico
ndash Forma inoculada esporozoiacutetos
ndash A fecircmea do anofelino infectado inocula no homem as formas infectantes localizadas na saliva
ndash Os esporozoiacutetas permancem na circulaccedilatildeo por aproximadamente uma hora
ndash Invadem os hepatoacutecitos e se diferenciam em trofozoiacutetas (criptozoiacuteto)
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
ndash Esquizogonia e formaccedilatildeo de esquizontes
ndash Divisatildeo nuclear e liberaccedilatildeo de merozoiacutetos
ndash Aproximadamente 10000 merozoiacutetos por hepatoacutecito
ndash Rompimento do hepatoacutecito e liberaccedilatildeo de merozoiacutetos na circulaccedilatildeo
ndash Duraccedilatildeo do ciclo aprox 1 a 2 semanas
Ciclo evolutivo
bull PVivax e Povale
ndash Alguns esporozoiacutetos geneticamente diferentes ficam na forma latente nos hepatoacutecitos permanecendo muitos meses Satildeo classificados como hipnozoiacuteto
ndash Satildeo responsaacuteveis pelas recaiacutedas tardias e formas de malaacuteria com periacuteodo de encubaccedilatildeo longo ndash 6 a 9 meses
FASE HEPAacuteTICA OU EXOERITROCIacuteTICA
Hepatoacutecito
FIacuteGADO
Invasatildeo do hepatoacutecito
Reproduccedilatildeo Assexuada
Esporozoiacutetos Lise dos hepatoacutecitos
Liberaccedilatildeo dos protozoaacuterios na corrente sanguumliacutenea
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
bull Ciclo eritrociacutetico
ndash Os merozoiacutetos invadem as hemaacutecias
ndash Diferenciaccedilatildeo em trofozoiacutetos
ndash Esquizogonia esquizonte
ndash Produccedilatildeo de merozoiacutetos e rompimento da hemaacutecia
ndash Merozoiacutetos invasatildeo de novas hemaacutecias
ndash Apoacutes algumas geraccedilotildees os merozoiacutetos natildeo mais se dividem e se diferenciam em gametoacutecitos ndash micro e macrogametoacutecito
FASE ERITROCIacuteTICA
Hepatoacutecito destruiacutedo pelos protozoaacuterios
Penetraccedilatildeo dos protozoaacuterios
Reproduccedilatildeo assexuada
Protozoaacuterios destroem as hemaacutecias
Diferenciaccedilatildeo em gametoacutecitos
Fecircmeas de Anopheles sugam hemaacutecias com gametoacutecitos
Ciclo no hospedeiro invertebrado
Ocorre nas hemaacutecias ou Eritroacutecitos
nas hemaacutecias
Protozoaacuterio no interior da hemaacutecia
Hemaacutecia com gametoacutecito
T trofozoiacuteto Em esquizonte com merozoiacuteto
Fase eritrociacutetica
bull Ciclo sanguiacuteneo ndash Pfalciparum P vivax e Povale 48 horas
ndash Pmalariae 72 horas
ndash Fonte de nutriccedilatildeo do Plasmodium no ciclo sanguiacuteneo hemoglobina
ndash Produccedilatildeo do pigmento malaacuterico hemozoiacutena bull Granulaccedilotildees de Schuffner Plasmodium vivax
bull Granulaccedilotildees de Maurer P falciparum
bull Granulaccedilotildees de Ziemann P malariae
ndash Fagocitose pelas ceacutelulas de Kuppffer e macroacutefagos do baccedilo
Trofozoiacutetos Pfalciparum
Trofozoiacutetos Pfalciparum
Esquizonte ndash P falciparum
Raros no sangue perifeacuterico Possuem 2 a 24 merozoiacutetos
Ocupam 23 do gloacutebulo vermelho
Gametoacutecitos Pfalciparum
Ciclo evolutivo Pvivax
Esquizonte ndash P vivax
Satildeo grandes e ameboacuteides Cromatina organizada em duas ou mais massas
Possuem 2 a 24 merozoiacutetos com pontos de cromatina
Gametoacutecito ndash Pvivax
Macrogametoacutecitos satildeo redondos ou ovais e ocupam toda ceacutelula hospedeira O citoplasma eacute geralmente corado de azul mais escuro e conteacutem pigmento marrom Microgametoacutecitos satildeo geralmente do tamanho de um RBC natildeo infectados com citoplasma corados de azul paacutelido rosa ou cinza
Trofozoiacutetos - P malariae
Esquizontes ndash P malariae
Aproximadamente 6 a 12 merozoiacutetos com arranjo de rosetas
Gametoacutecitos ndash P malariae
Ciclo evolutivo ndash HI
bull Ingestatildeo de hemaacutecias contendo gametoacutecitos durante o repasto sanguiacuteneo da fecircmea do anofelino
bull No intestino meacutedio do vetor gametogecircnese ndash Macrogametoacutecito ndash macrogameta feminino ndash Microgametoacutecito o processo de exflagelaccedilatildeo daacute
origem a 8 microgametas masculinos ndash Produccedilatildeo de ovo ou zigoto ndash O ovo encista na camada epitelial do intestino meacutedio
oocisto ndash Esporogonia liberaccedilatildeo de esporozoiacutetos
Ciclo evolutivo ndash HInvertebrado
ndash Os esporozoiacutetos satildeo transportados pelo hemolinfa ateacute as glacircndulas salivares do vetor ateacute atingirem o ducto salivar
bull Inoculaccedilatildeo no hospedeiro vertebrado atraveacutes da picada do inseto
Hemaacutecia com gametoacutecito
Fecircmeas de Anopheles sugam hemaacutecias com gametoacutecitos
CICLO NO INVERTEBRADO
No tubo digestivo
Zigoto
Penetraccedilatildeo na parede do tubo
digestivo
Migraccedilatildeo para as glacircndulas salivares
Desenvolvimento
Mosquito infectado
Diagnoacutestico
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado e espesso corado pelo Giemsa
bull Sangue colhido sem anticoagulante para melhor fixaccedilatildeo em lacircmina
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo espesso eacute mais eficiente para detecccedilatildeo da infecccedilatildeo
bull Esfregaccedilo delgado eacute mais eficiente para diferenciaccedilatildeo morfoloacutegica das espeacutecies
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo semiquantitativo
ndash Exame de 100 campos microscoacutepicos com resultado expresso pelo sistema de cruzes
Parasitos contados Nuacutemero de campos
microscoacutepicos cruzes
40 a 60 100 +2
1 1 +
2-20 1 ++
21-200 1 +++
+ 200 1 ++++
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo quantitativo derivado de anaacutelise semiquantitativa
Contagem de parasitos por campo
Cruzes Parasitos por mm3
40 a 60100 +2 200-300
1 + 301-500
2-20 ++ 501 - 10000
21-200 +++ 10001 ndash 100000
+ 200 ++++ 100000 ou mais
Diagnoacutestico
bull P falciparum
ndash Parte do ciclo celular aderido ao endoteacutelio capilar Encontro somente de trofozoitos e gametoacutecitos no sangue perifeacuterico
ndash Raramente os esquizontes satildeo encontrados no sangue perifeacuterico
Diagnoacutestico ndash Pvivax ndash Encontro de todas as formas de desenvolvimento ndash
trofozoiacuteto jovem maduro esquizontes e gametoacutecitos
ndash Os trofozoiacutetos maduros tecircm geralmente um aspecto irregular com extensotildees ameboacuteides em seu citoplasma
Diagnoacutestico ndash Pvivax
ndash Os gametoacutecitos femininos coram-se mais intensamente que os masculinos e apresentam nuacutecleo mais compacto geralmente em localizaccedilatildeo perifeacuterica
ndash O pigmento malaacuterico geralmente eacute abundante
Diagnoacutestico - Pmalariae
bull Realizado por meio de caracteriacutesticas morfoloacutegicas do parasito
ndash Verificaccedilatildeo em esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado
ndash Posiccedilatildeo equatorial do parasito
ndash Desenvolvimento sem deformaccedilatildeo do eritroacutecito
Diagnoacutestico
bull QBC ndash Teacutecnica que combina concentraccedilatildeo dos parasitos
pela centrifugaccedilatildeo do sangue em em microhematoacutecrito e a coloraccedilatildeo dos aacutecidos nucleacuteicos do parasito pelo fluorcromo laranja de acridina
ndash Utilizaccedilatildeo de tubos especiais e microscopia epifluorescente
ndash Teste raacutepido
ndash Alta sensibilidade
Diagnoacutestico
bull ParaSight-F ( Becton amp Dickinson)
ndash Teste raacutepido para captura da proteiacutena rica em histidina 2 de Pfalciparum( PfHRP2) e enzimas conservadas de 4 espeacutecies de plasmoacutedio (DHL e aldolase
ndash Utilizaccedilatildeo de fita de nitrocelulose contendo ac monoclonal
ndash Lise de uma gota de sangue
ndash A reaccedilatildeo eacute revelada com adiccedilatildeo de ac policlonal anti-HRP2 conjugado com lipossomas contendo corante
Diagnoacutestico
bull PCR
ndash Sensibilidade e especificidade maior do que o esfregaccedilo sanguiacuteneo
Patologia
bull Permanecimento na aacuterea endecircmica
bull Nuacutemero de larvas inoculadas
bull Frequecircncia das re-infecccedilotildees
bull O nuacutemero de acasalamento dos vermes e suas localizaccedilotildees anatocircmicas
bull A sensibilizaccedilatildeo do organismo e a intensidade das reaccedilotildees inflamatoacuterias do paciente
bull As infecccedilotildees bacterianas associadas
Diagnoacutestico
bull Pesquisa de microfilaacuterias no sangue perifeacuterico ndash 20 40 ou 60 microL- de preferecircncia entre as 10 h da noite e 4h da manhatilde
ndash Gota espessa Coloraccedilatildeo de Giemsa
ndash Meacutetodos de concentraccedilatildeo Filtraccedilatildeo em membrana de policarbonato milipore ou nucleopore
ndash Meacutetodo de Knott
bull Na fase crocircnica as microfilaacuterias raramente satildeo detectadas no sangue perifeacuterico
Gota espessa
bull Possibilita a visualizaccedilatildeo da bainha fato que difere a microfilaria de W bancrofti de outro filariacutedeos sanguiacuteneos
bull Apresenta um baixo custo em comparaccedilatildeo com outras mais avanccediladas como a filtraccedilatildeo de sangue em membrana de policarbonato
bull Possui baixa sensibilidade natildeo indicada em situaccedilotildees em que os parasitados se mostram com baixa microfilaremia ou amicrofilarecircmicos
Concentraccedilatildeo
bull Baseia-se na passagem de sangue venoso atraveacutes de uma membrana (Milipore ou Nuclepore) de diacircmetro de 13 a 25 mm e poros de 5 ou 3 μm
bull O material retido na membrana sendo fixado corado e observado ao microscoacutepio
bull Essa teacutecnica assim como a de Knott permite a identificaccedilatildeo de indiviacuteduos com baixiacutessimas parasitemias (quantidade de microfilarias natildeo detectaacuteveis pela teacutecnica de gota espessa)
Teacutecnica de Knott
bull Retirar 2 ml de sangue total por punccedilatildeo venosa e colocar imediatamente em um tubo contendo 10 ml de formol a 2
bull Fechar o tubo e misture completamente invertendo-o e agitando-o O formol hemolisa as hemaacutecias mata fixa e distende as microfilaacuterias
bull Centrifugar o sangue a 1500 rpm por 5 minutos
bull Decantar o sobrenadante
Teacutecnica de Knott
bull Retirar o sedimento com uma pipeta Pasteur e espalhar a gota espessa sobre uma lacircmina
bull Deixar secar bem e corar com Giemsa
bull Examinar com objetiva de imersatildeo
bull Esta teacutecnica possibilita que o exame microscoacutepico laboratorial seja realizado vaacuterios dias apoacutes a coleta de material realizada no campo
Exames de imagem
bull Ultranossografia
ndash Possibilidade de visualizar os movimentos de vermes adultos vivos de W bancrofti em vaso linfaacutetico especificamente em vasos intraescrotais do cordatildeo espermaacutetico
ndash O movimento ativo e ininterrupto dos vermes adultos durante as 24 horas do dia eacute denominado sinal da ldquodanccedila das filaacuteriasrdquo
Diagnoacutestico soroloacutegico
bull Teste imunocromatograacutefico desenvolvido pelo ICT Diagnostic - ICT card
ndash Teste qualilativo
ndash Cartatildeo possui ac de antifilaacuteria e o controle eacute formado por ac anti Ig G humano
Plasmodium spp
Taxonomia
bull Reino Protozoa
bull FiloApicomplexa
bull Classe Sporozoea
bull Ordem Hemosporidiida
bull Famiacutelia Plasmodiidae
bull Gecircneros Plasmodium
bull Espeacutecie Pfalciparum Pvivax Povale e Pmalariae
Plasmodium
bull Ciclo bioloacutegico Hospedeiro vertebrado e invertebrado
bull Hospedeiro invertebrado ndash Vetor
ndash Fecircmeas hematoacutefagas do gecircnero Anopheles
ndash Brasil Anopheles (N)darlingi A (N) aquasalis A (N) albitarsis A (K) cruzii e A (K) bellator
ndash Possuem haacutebito noturno penetrando nas casas no crespuacutesculo saindo ao amanhecer
Plasmodium
bull Hospedeiro vertebrado homem
bull Transmissatildeo
ndash Vetor
ndash Transfusatildeo de sangue
ndash Compartilhamento de seringas
ndash Acidente com agulhas
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
bull Ciclo preacute-eritrociacutetico
ndash Forma inoculada esporozoiacutetos
ndash A fecircmea do anofelino infectado inocula no homem as formas infectantes localizadas na saliva
ndash Os esporozoiacutetas permancem na circulaccedilatildeo por aproximadamente uma hora
ndash Invadem os hepatoacutecitos e se diferenciam em trofozoiacutetas (criptozoiacuteto)
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
ndash Esquizogonia e formaccedilatildeo de esquizontes
ndash Divisatildeo nuclear e liberaccedilatildeo de merozoiacutetos
ndash Aproximadamente 10000 merozoiacutetos por hepatoacutecito
ndash Rompimento do hepatoacutecito e liberaccedilatildeo de merozoiacutetos na circulaccedilatildeo
ndash Duraccedilatildeo do ciclo aprox 1 a 2 semanas
Ciclo evolutivo
bull PVivax e Povale
ndash Alguns esporozoiacutetos geneticamente diferentes ficam na forma latente nos hepatoacutecitos permanecendo muitos meses Satildeo classificados como hipnozoiacuteto
ndash Satildeo responsaacuteveis pelas recaiacutedas tardias e formas de malaacuteria com periacuteodo de encubaccedilatildeo longo ndash 6 a 9 meses
FASE HEPAacuteTICA OU EXOERITROCIacuteTICA
Hepatoacutecito
FIacuteGADO
Invasatildeo do hepatoacutecito
Reproduccedilatildeo Assexuada
Esporozoiacutetos Lise dos hepatoacutecitos
Liberaccedilatildeo dos protozoaacuterios na corrente sanguumliacutenea
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
bull Ciclo eritrociacutetico
ndash Os merozoiacutetos invadem as hemaacutecias
ndash Diferenciaccedilatildeo em trofozoiacutetos
ndash Esquizogonia esquizonte
ndash Produccedilatildeo de merozoiacutetos e rompimento da hemaacutecia
ndash Merozoiacutetos invasatildeo de novas hemaacutecias
ndash Apoacutes algumas geraccedilotildees os merozoiacutetos natildeo mais se dividem e se diferenciam em gametoacutecitos ndash micro e macrogametoacutecito
FASE ERITROCIacuteTICA
Hepatoacutecito destruiacutedo pelos protozoaacuterios
Penetraccedilatildeo dos protozoaacuterios
Reproduccedilatildeo assexuada
Protozoaacuterios destroem as hemaacutecias
Diferenciaccedilatildeo em gametoacutecitos
Fecircmeas de Anopheles sugam hemaacutecias com gametoacutecitos
Ciclo no hospedeiro invertebrado
Ocorre nas hemaacutecias ou Eritroacutecitos
nas hemaacutecias
Protozoaacuterio no interior da hemaacutecia
Hemaacutecia com gametoacutecito
T trofozoiacuteto Em esquizonte com merozoiacuteto
Fase eritrociacutetica
bull Ciclo sanguiacuteneo ndash Pfalciparum P vivax e Povale 48 horas
ndash Pmalariae 72 horas
ndash Fonte de nutriccedilatildeo do Plasmodium no ciclo sanguiacuteneo hemoglobina
ndash Produccedilatildeo do pigmento malaacuterico hemozoiacutena bull Granulaccedilotildees de Schuffner Plasmodium vivax
bull Granulaccedilotildees de Maurer P falciparum
bull Granulaccedilotildees de Ziemann P malariae
ndash Fagocitose pelas ceacutelulas de Kuppffer e macroacutefagos do baccedilo
Trofozoiacutetos Pfalciparum
Trofozoiacutetos Pfalciparum
Esquizonte ndash P falciparum
Raros no sangue perifeacuterico Possuem 2 a 24 merozoiacutetos
Ocupam 23 do gloacutebulo vermelho
Gametoacutecitos Pfalciparum
Ciclo evolutivo Pvivax
Esquizonte ndash P vivax
Satildeo grandes e ameboacuteides Cromatina organizada em duas ou mais massas
Possuem 2 a 24 merozoiacutetos com pontos de cromatina
Gametoacutecito ndash Pvivax
Macrogametoacutecitos satildeo redondos ou ovais e ocupam toda ceacutelula hospedeira O citoplasma eacute geralmente corado de azul mais escuro e conteacutem pigmento marrom Microgametoacutecitos satildeo geralmente do tamanho de um RBC natildeo infectados com citoplasma corados de azul paacutelido rosa ou cinza
Trofozoiacutetos - P malariae
Esquizontes ndash P malariae
Aproximadamente 6 a 12 merozoiacutetos com arranjo de rosetas
Gametoacutecitos ndash P malariae
Ciclo evolutivo ndash HI
bull Ingestatildeo de hemaacutecias contendo gametoacutecitos durante o repasto sanguiacuteneo da fecircmea do anofelino
bull No intestino meacutedio do vetor gametogecircnese ndash Macrogametoacutecito ndash macrogameta feminino ndash Microgametoacutecito o processo de exflagelaccedilatildeo daacute
origem a 8 microgametas masculinos ndash Produccedilatildeo de ovo ou zigoto ndash O ovo encista na camada epitelial do intestino meacutedio
oocisto ndash Esporogonia liberaccedilatildeo de esporozoiacutetos
Ciclo evolutivo ndash HInvertebrado
ndash Os esporozoiacutetos satildeo transportados pelo hemolinfa ateacute as glacircndulas salivares do vetor ateacute atingirem o ducto salivar
bull Inoculaccedilatildeo no hospedeiro vertebrado atraveacutes da picada do inseto
Hemaacutecia com gametoacutecito
Fecircmeas de Anopheles sugam hemaacutecias com gametoacutecitos
CICLO NO INVERTEBRADO
No tubo digestivo
Zigoto
Penetraccedilatildeo na parede do tubo
digestivo
Migraccedilatildeo para as glacircndulas salivares
Desenvolvimento
Mosquito infectado
Diagnoacutestico
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado e espesso corado pelo Giemsa
bull Sangue colhido sem anticoagulante para melhor fixaccedilatildeo em lacircmina
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo espesso eacute mais eficiente para detecccedilatildeo da infecccedilatildeo
bull Esfregaccedilo delgado eacute mais eficiente para diferenciaccedilatildeo morfoloacutegica das espeacutecies
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo semiquantitativo
ndash Exame de 100 campos microscoacutepicos com resultado expresso pelo sistema de cruzes
Parasitos contados Nuacutemero de campos
microscoacutepicos cruzes
40 a 60 100 +2
1 1 +
2-20 1 ++
21-200 1 +++
+ 200 1 ++++
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo quantitativo derivado de anaacutelise semiquantitativa
Contagem de parasitos por campo
Cruzes Parasitos por mm3
40 a 60100 +2 200-300
1 + 301-500
2-20 ++ 501 - 10000
21-200 +++ 10001 ndash 100000
+ 200 ++++ 100000 ou mais
Diagnoacutestico
bull P falciparum
ndash Parte do ciclo celular aderido ao endoteacutelio capilar Encontro somente de trofozoitos e gametoacutecitos no sangue perifeacuterico
ndash Raramente os esquizontes satildeo encontrados no sangue perifeacuterico
Diagnoacutestico ndash Pvivax ndash Encontro de todas as formas de desenvolvimento ndash
trofozoiacuteto jovem maduro esquizontes e gametoacutecitos
ndash Os trofozoiacutetos maduros tecircm geralmente um aspecto irregular com extensotildees ameboacuteides em seu citoplasma
Diagnoacutestico ndash Pvivax
ndash Os gametoacutecitos femininos coram-se mais intensamente que os masculinos e apresentam nuacutecleo mais compacto geralmente em localizaccedilatildeo perifeacuterica
ndash O pigmento malaacuterico geralmente eacute abundante
Diagnoacutestico - Pmalariae
bull Realizado por meio de caracteriacutesticas morfoloacutegicas do parasito
ndash Verificaccedilatildeo em esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado
ndash Posiccedilatildeo equatorial do parasito
ndash Desenvolvimento sem deformaccedilatildeo do eritroacutecito
Diagnoacutestico
bull QBC ndash Teacutecnica que combina concentraccedilatildeo dos parasitos
pela centrifugaccedilatildeo do sangue em em microhematoacutecrito e a coloraccedilatildeo dos aacutecidos nucleacuteicos do parasito pelo fluorcromo laranja de acridina
ndash Utilizaccedilatildeo de tubos especiais e microscopia epifluorescente
ndash Teste raacutepido
ndash Alta sensibilidade
Diagnoacutestico
bull ParaSight-F ( Becton amp Dickinson)
ndash Teste raacutepido para captura da proteiacutena rica em histidina 2 de Pfalciparum( PfHRP2) e enzimas conservadas de 4 espeacutecies de plasmoacutedio (DHL e aldolase
ndash Utilizaccedilatildeo de fita de nitrocelulose contendo ac monoclonal
ndash Lise de uma gota de sangue
ndash A reaccedilatildeo eacute revelada com adiccedilatildeo de ac policlonal anti-HRP2 conjugado com lipossomas contendo corante
Diagnoacutestico
bull PCR
ndash Sensibilidade e especificidade maior do que o esfregaccedilo sanguiacuteneo
Diagnoacutestico
bull Pesquisa de microfilaacuterias no sangue perifeacuterico ndash 20 40 ou 60 microL- de preferecircncia entre as 10 h da noite e 4h da manhatilde
ndash Gota espessa Coloraccedilatildeo de Giemsa
ndash Meacutetodos de concentraccedilatildeo Filtraccedilatildeo em membrana de policarbonato milipore ou nucleopore
ndash Meacutetodo de Knott
bull Na fase crocircnica as microfilaacuterias raramente satildeo detectadas no sangue perifeacuterico
Gota espessa
bull Possibilita a visualizaccedilatildeo da bainha fato que difere a microfilaria de W bancrofti de outro filariacutedeos sanguiacuteneos
bull Apresenta um baixo custo em comparaccedilatildeo com outras mais avanccediladas como a filtraccedilatildeo de sangue em membrana de policarbonato
bull Possui baixa sensibilidade natildeo indicada em situaccedilotildees em que os parasitados se mostram com baixa microfilaremia ou amicrofilarecircmicos
Concentraccedilatildeo
bull Baseia-se na passagem de sangue venoso atraveacutes de uma membrana (Milipore ou Nuclepore) de diacircmetro de 13 a 25 mm e poros de 5 ou 3 μm
bull O material retido na membrana sendo fixado corado e observado ao microscoacutepio
bull Essa teacutecnica assim como a de Knott permite a identificaccedilatildeo de indiviacuteduos com baixiacutessimas parasitemias (quantidade de microfilarias natildeo detectaacuteveis pela teacutecnica de gota espessa)
Teacutecnica de Knott
bull Retirar 2 ml de sangue total por punccedilatildeo venosa e colocar imediatamente em um tubo contendo 10 ml de formol a 2
bull Fechar o tubo e misture completamente invertendo-o e agitando-o O formol hemolisa as hemaacutecias mata fixa e distende as microfilaacuterias
bull Centrifugar o sangue a 1500 rpm por 5 minutos
bull Decantar o sobrenadante
Teacutecnica de Knott
bull Retirar o sedimento com uma pipeta Pasteur e espalhar a gota espessa sobre uma lacircmina
bull Deixar secar bem e corar com Giemsa
bull Examinar com objetiva de imersatildeo
bull Esta teacutecnica possibilita que o exame microscoacutepico laboratorial seja realizado vaacuterios dias apoacutes a coleta de material realizada no campo
Exames de imagem
bull Ultranossografia
ndash Possibilidade de visualizar os movimentos de vermes adultos vivos de W bancrofti em vaso linfaacutetico especificamente em vasos intraescrotais do cordatildeo espermaacutetico
ndash O movimento ativo e ininterrupto dos vermes adultos durante as 24 horas do dia eacute denominado sinal da ldquodanccedila das filaacuteriasrdquo
Diagnoacutestico soroloacutegico
bull Teste imunocromatograacutefico desenvolvido pelo ICT Diagnostic - ICT card
ndash Teste qualilativo
ndash Cartatildeo possui ac de antifilaacuteria e o controle eacute formado por ac anti Ig G humano
Plasmodium spp
Taxonomia
bull Reino Protozoa
bull FiloApicomplexa
bull Classe Sporozoea
bull Ordem Hemosporidiida
bull Famiacutelia Plasmodiidae
bull Gecircneros Plasmodium
bull Espeacutecie Pfalciparum Pvivax Povale e Pmalariae
Plasmodium
bull Ciclo bioloacutegico Hospedeiro vertebrado e invertebrado
bull Hospedeiro invertebrado ndash Vetor
ndash Fecircmeas hematoacutefagas do gecircnero Anopheles
ndash Brasil Anopheles (N)darlingi A (N) aquasalis A (N) albitarsis A (K) cruzii e A (K) bellator
ndash Possuem haacutebito noturno penetrando nas casas no crespuacutesculo saindo ao amanhecer
Plasmodium
bull Hospedeiro vertebrado homem
bull Transmissatildeo
ndash Vetor
ndash Transfusatildeo de sangue
ndash Compartilhamento de seringas
ndash Acidente com agulhas
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
bull Ciclo preacute-eritrociacutetico
ndash Forma inoculada esporozoiacutetos
ndash A fecircmea do anofelino infectado inocula no homem as formas infectantes localizadas na saliva
ndash Os esporozoiacutetas permancem na circulaccedilatildeo por aproximadamente uma hora
ndash Invadem os hepatoacutecitos e se diferenciam em trofozoiacutetas (criptozoiacuteto)
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
ndash Esquizogonia e formaccedilatildeo de esquizontes
ndash Divisatildeo nuclear e liberaccedilatildeo de merozoiacutetos
ndash Aproximadamente 10000 merozoiacutetos por hepatoacutecito
ndash Rompimento do hepatoacutecito e liberaccedilatildeo de merozoiacutetos na circulaccedilatildeo
ndash Duraccedilatildeo do ciclo aprox 1 a 2 semanas
Ciclo evolutivo
bull PVivax e Povale
ndash Alguns esporozoiacutetos geneticamente diferentes ficam na forma latente nos hepatoacutecitos permanecendo muitos meses Satildeo classificados como hipnozoiacuteto
ndash Satildeo responsaacuteveis pelas recaiacutedas tardias e formas de malaacuteria com periacuteodo de encubaccedilatildeo longo ndash 6 a 9 meses
FASE HEPAacuteTICA OU EXOERITROCIacuteTICA
Hepatoacutecito
FIacuteGADO
Invasatildeo do hepatoacutecito
Reproduccedilatildeo Assexuada
Esporozoiacutetos Lise dos hepatoacutecitos
Liberaccedilatildeo dos protozoaacuterios na corrente sanguumliacutenea
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
bull Ciclo eritrociacutetico
ndash Os merozoiacutetos invadem as hemaacutecias
ndash Diferenciaccedilatildeo em trofozoiacutetos
ndash Esquizogonia esquizonte
ndash Produccedilatildeo de merozoiacutetos e rompimento da hemaacutecia
ndash Merozoiacutetos invasatildeo de novas hemaacutecias
ndash Apoacutes algumas geraccedilotildees os merozoiacutetos natildeo mais se dividem e se diferenciam em gametoacutecitos ndash micro e macrogametoacutecito
FASE ERITROCIacuteTICA
Hepatoacutecito destruiacutedo pelos protozoaacuterios
Penetraccedilatildeo dos protozoaacuterios
Reproduccedilatildeo assexuada
Protozoaacuterios destroem as hemaacutecias
Diferenciaccedilatildeo em gametoacutecitos
Fecircmeas de Anopheles sugam hemaacutecias com gametoacutecitos
Ciclo no hospedeiro invertebrado
Ocorre nas hemaacutecias ou Eritroacutecitos
nas hemaacutecias
Protozoaacuterio no interior da hemaacutecia
Hemaacutecia com gametoacutecito
T trofozoiacuteto Em esquizonte com merozoiacuteto
Fase eritrociacutetica
bull Ciclo sanguiacuteneo ndash Pfalciparum P vivax e Povale 48 horas
ndash Pmalariae 72 horas
ndash Fonte de nutriccedilatildeo do Plasmodium no ciclo sanguiacuteneo hemoglobina
ndash Produccedilatildeo do pigmento malaacuterico hemozoiacutena bull Granulaccedilotildees de Schuffner Plasmodium vivax
bull Granulaccedilotildees de Maurer P falciparum
bull Granulaccedilotildees de Ziemann P malariae
ndash Fagocitose pelas ceacutelulas de Kuppffer e macroacutefagos do baccedilo
Trofozoiacutetos Pfalciparum
Trofozoiacutetos Pfalciparum
Esquizonte ndash P falciparum
Raros no sangue perifeacuterico Possuem 2 a 24 merozoiacutetos
Ocupam 23 do gloacutebulo vermelho
Gametoacutecitos Pfalciparum
Ciclo evolutivo Pvivax
Esquizonte ndash P vivax
Satildeo grandes e ameboacuteides Cromatina organizada em duas ou mais massas
Possuem 2 a 24 merozoiacutetos com pontos de cromatina
Gametoacutecito ndash Pvivax
Macrogametoacutecitos satildeo redondos ou ovais e ocupam toda ceacutelula hospedeira O citoplasma eacute geralmente corado de azul mais escuro e conteacutem pigmento marrom Microgametoacutecitos satildeo geralmente do tamanho de um RBC natildeo infectados com citoplasma corados de azul paacutelido rosa ou cinza
Trofozoiacutetos - P malariae
Esquizontes ndash P malariae
Aproximadamente 6 a 12 merozoiacutetos com arranjo de rosetas
Gametoacutecitos ndash P malariae
Ciclo evolutivo ndash HI
bull Ingestatildeo de hemaacutecias contendo gametoacutecitos durante o repasto sanguiacuteneo da fecircmea do anofelino
bull No intestino meacutedio do vetor gametogecircnese ndash Macrogametoacutecito ndash macrogameta feminino ndash Microgametoacutecito o processo de exflagelaccedilatildeo daacute
origem a 8 microgametas masculinos ndash Produccedilatildeo de ovo ou zigoto ndash O ovo encista na camada epitelial do intestino meacutedio
oocisto ndash Esporogonia liberaccedilatildeo de esporozoiacutetos
Ciclo evolutivo ndash HInvertebrado
ndash Os esporozoiacutetos satildeo transportados pelo hemolinfa ateacute as glacircndulas salivares do vetor ateacute atingirem o ducto salivar
bull Inoculaccedilatildeo no hospedeiro vertebrado atraveacutes da picada do inseto
Hemaacutecia com gametoacutecito
Fecircmeas de Anopheles sugam hemaacutecias com gametoacutecitos
CICLO NO INVERTEBRADO
No tubo digestivo
Zigoto
Penetraccedilatildeo na parede do tubo
digestivo
Migraccedilatildeo para as glacircndulas salivares
Desenvolvimento
Mosquito infectado
Diagnoacutestico
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado e espesso corado pelo Giemsa
bull Sangue colhido sem anticoagulante para melhor fixaccedilatildeo em lacircmina
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo espesso eacute mais eficiente para detecccedilatildeo da infecccedilatildeo
bull Esfregaccedilo delgado eacute mais eficiente para diferenciaccedilatildeo morfoloacutegica das espeacutecies
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo semiquantitativo
ndash Exame de 100 campos microscoacutepicos com resultado expresso pelo sistema de cruzes
Parasitos contados Nuacutemero de campos
microscoacutepicos cruzes
40 a 60 100 +2
1 1 +
2-20 1 ++
21-200 1 +++
+ 200 1 ++++
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo quantitativo derivado de anaacutelise semiquantitativa
Contagem de parasitos por campo
Cruzes Parasitos por mm3
40 a 60100 +2 200-300
1 + 301-500
2-20 ++ 501 - 10000
21-200 +++ 10001 ndash 100000
+ 200 ++++ 100000 ou mais
Diagnoacutestico
bull P falciparum
ndash Parte do ciclo celular aderido ao endoteacutelio capilar Encontro somente de trofozoitos e gametoacutecitos no sangue perifeacuterico
ndash Raramente os esquizontes satildeo encontrados no sangue perifeacuterico
Diagnoacutestico ndash Pvivax ndash Encontro de todas as formas de desenvolvimento ndash
trofozoiacuteto jovem maduro esquizontes e gametoacutecitos
ndash Os trofozoiacutetos maduros tecircm geralmente um aspecto irregular com extensotildees ameboacuteides em seu citoplasma
Diagnoacutestico ndash Pvivax
ndash Os gametoacutecitos femininos coram-se mais intensamente que os masculinos e apresentam nuacutecleo mais compacto geralmente em localizaccedilatildeo perifeacuterica
ndash O pigmento malaacuterico geralmente eacute abundante
Diagnoacutestico - Pmalariae
bull Realizado por meio de caracteriacutesticas morfoloacutegicas do parasito
ndash Verificaccedilatildeo em esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado
ndash Posiccedilatildeo equatorial do parasito
ndash Desenvolvimento sem deformaccedilatildeo do eritroacutecito
Diagnoacutestico
bull QBC ndash Teacutecnica que combina concentraccedilatildeo dos parasitos
pela centrifugaccedilatildeo do sangue em em microhematoacutecrito e a coloraccedilatildeo dos aacutecidos nucleacuteicos do parasito pelo fluorcromo laranja de acridina
ndash Utilizaccedilatildeo de tubos especiais e microscopia epifluorescente
ndash Teste raacutepido
ndash Alta sensibilidade
Diagnoacutestico
bull ParaSight-F ( Becton amp Dickinson)
ndash Teste raacutepido para captura da proteiacutena rica em histidina 2 de Pfalciparum( PfHRP2) e enzimas conservadas de 4 espeacutecies de plasmoacutedio (DHL e aldolase
ndash Utilizaccedilatildeo de fita de nitrocelulose contendo ac monoclonal
ndash Lise de uma gota de sangue
ndash A reaccedilatildeo eacute revelada com adiccedilatildeo de ac policlonal anti-HRP2 conjugado com lipossomas contendo corante
Diagnoacutestico
bull PCR
ndash Sensibilidade e especificidade maior do que o esfregaccedilo sanguiacuteneo
Gota espessa
bull Possibilita a visualizaccedilatildeo da bainha fato que difere a microfilaria de W bancrofti de outro filariacutedeos sanguiacuteneos
bull Apresenta um baixo custo em comparaccedilatildeo com outras mais avanccediladas como a filtraccedilatildeo de sangue em membrana de policarbonato
bull Possui baixa sensibilidade natildeo indicada em situaccedilotildees em que os parasitados se mostram com baixa microfilaremia ou amicrofilarecircmicos
Concentraccedilatildeo
bull Baseia-se na passagem de sangue venoso atraveacutes de uma membrana (Milipore ou Nuclepore) de diacircmetro de 13 a 25 mm e poros de 5 ou 3 μm
bull O material retido na membrana sendo fixado corado e observado ao microscoacutepio
bull Essa teacutecnica assim como a de Knott permite a identificaccedilatildeo de indiviacuteduos com baixiacutessimas parasitemias (quantidade de microfilarias natildeo detectaacuteveis pela teacutecnica de gota espessa)
Teacutecnica de Knott
bull Retirar 2 ml de sangue total por punccedilatildeo venosa e colocar imediatamente em um tubo contendo 10 ml de formol a 2
bull Fechar o tubo e misture completamente invertendo-o e agitando-o O formol hemolisa as hemaacutecias mata fixa e distende as microfilaacuterias
bull Centrifugar o sangue a 1500 rpm por 5 minutos
bull Decantar o sobrenadante
Teacutecnica de Knott
bull Retirar o sedimento com uma pipeta Pasteur e espalhar a gota espessa sobre uma lacircmina
bull Deixar secar bem e corar com Giemsa
bull Examinar com objetiva de imersatildeo
bull Esta teacutecnica possibilita que o exame microscoacutepico laboratorial seja realizado vaacuterios dias apoacutes a coleta de material realizada no campo
Exames de imagem
bull Ultranossografia
ndash Possibilidade de visualizar os movimentos de vermes adultos vivos de W bancrofti em vaso linfaacutetico especificamente em vasos intraescrotais do cordatildeo espermaacutetico
ndash O movimento ativo e ininterrupto dos vermes adultos durante as 24 horas do dia eacute denominado sinal da ldquodanccedila das filaacuteriasrdquo
Diagnoacutestico soroloacutegico
bull Teste imunocromatograacutefico desenvolvido pelo ICT Diagnostic - ICT card
ndash Teste qualilativo
ndash Cartatildeo possui ac de antifilaacuteria e o controle eacute formado por ac anti Ig G humano
Plasmodium spp
Taxonomia
bull Reino Protozoa
bull FiloApicomplexa
bull Classe Sporozoea
bull Ordem Hemosporidiida
bull Famiacutelia Plasmodiidae
bull Gecircneros Plasmodium
bull Espeacutecie Pfalciparum Pvivax Povale e Pmalariae
Plasmodium
bull Ciclo bioloacutegico Hospedeiro vertebrado e invertebrado
bull Hospedeiro invertebrado ndash Vetor
ndash Fecircmeas hematoacutefagas do gecircnero Anopheles
ndash Brasil Anopheles (N)darlingi A (N) aquasalis A (N) albitarsis A (K) cruzii e A (K) bellator
ndash Possuem haacutebito noturno penetrando nas casas no crespuacutesculo saindo ao amanhecer
Plasmodium
bull Hospedeiro vertebrado homem
bull Transmissatildeo
ndash Vetor
ndash Transfusatildeo de sangue
ndash Compartilhamento de seringas
ndash Acidente com agulhas
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
bull Ciclo preacute-eritrociacutetico
ndash Forma inoculada esporozoiacutetos
ndash A fecircmea do anofelino infectado inocula no homem as formas infectantes localizadas na saliva
ndash Os esporozoiacutetas permancem na circulaccedilatildeo por aproximadamente uma hora
ndash Invadem os hepatoacutecitos e se diferenciam em trofozoiacutetas (criptozoiacuteto)
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
ndash Esquizogonia e formaccedilatildeo de esquizontes
ndash Divisatildeo nuclear e liberaccedilatildeo de merozoiacutetos
ndash Aproximadamente 10000 merozoiacutetos por hepatoacutecito
ndash Rompimento do hepatoacutecito e liberaccedilatildeo de merozoiacutetos na circulaccedilatildeo
ndash Duraccedilatildeo do ciclo aprox 1 a 2 semanas
Ciclo evolutivo
bull PVivax e Povale
ndash Alguns esporozoiacutetos geneticamente diferentes ficam na forma latente nos hepatoacutecitos permanecendo muitos meses Satildeo classificados como hipnozoiacuteto
ndash Satildeo responsaacuteveis pelas recaiacutedas tardias e formas de malaacuteria com periacuteodo de encubaccedilatildeo longo ndash 6 a 9 meses
FASE HEPAacuteTICA OU EXOERITROCIacuteTICA
Hepatoacutecito
FIacuteGADO
Invasatildeo do hepatoacutecito
Reproduccedilatildeo Assexuada
Esporozoiacutetos Lise dos hepatoacutecitos
Liberaccedilatildeo dos protozoaacuterios na corrente sanguumliacutenea
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
bull Ciclo eritrociacutetico
ndash Os merozoiacutetos invadem as hemaacutecias
ndash Diferenciaccedilatildeo em trofozoiacutetos
ndash Esquizogonia esquizonte
ndash Produccedilatildeo de merozoiacutetos e rompimento da hemaacutecia
ndash Merozoiacutetos invasatildeo de novas hemaacutecias
ndash Apoacutes algumas geraccedilotildees os merozoiacutetos natildeo mais se dividem e se diferenciam em gametoacutecitos ndash micro e macrogametoacutecito
FASE ERITROCIacuteTICA
Hepatoacutecito destruiacutedo pelos protozoaacuterios
Penetraccedilatildeo dos protozoaacuterios
Reproduccedilatildeo assexuada
Protozoaacuterios destroem as hemaacutecias
Diferenciaccedilatildeo em gametoacutecitos
Fecircmeas de Anopheles sugam hemaacutecias com gametoacutecitos
Ciclo no hospedeiro invertebrado
Ocorre nas hemaacutecias ou Eritroacutecitos
nas hemaacutecias
Protozoaacuterio no interior da hemaacutecia
Hemaacutecia com gametoacutecito
T trofozoiacuteto Em esquizonte com merozoiacuteto
Fase eritrociacutetica
bull Ciclo sanguiacuteneo ndash Pfalciparum P vivax e Povale 48 horas
ndash Pmalariae 72 horas
ndash Fonte de nutriccedilatildeo do Plasmodium no ciclo sanguiacuteneo hemoglobina
ndash Produccedilatildeo do pigmento malaacuterico hemozoiacutena bull Granulaccedilotildees de Schuffner Plasmodium vivax
bull Granulaccedilotildees de Maurer P falciparum
bull Granulaccedilotildees de Ziemann P malariae
ndash Fagocitose pelas ceacutelulas de Kuppffer e macroacutefagos do baccedilo
Trofozoiacutetos Pfalciparum
Trofozoiacutetos Pfalciparum
Esquizonte ndash P falciparum
Raros no sangue perifeacuterico Possuem 2 a 24 merozoiacutetos
Ocupam 23 do gloacutebulo vermelho
Gametoacutecitos Pfalciparum
Ciclo evolutivo Pvivax
Esquizonte ndash P vivax
Satildeo grandes e ameboacuteides Cromatina organizada em duas ou mais massas
Possuem 2 a 24 merozoiacutetos com pontos de cromatina
Gametoacutecito ndash Pvivax
Macrogametoacutecitos satildeo redondos ou ovais e ocupam toda ceacutelula hospedeira O citoplasma eacute geralmente corado de azul mais escuro e conteacutem pigmento marrom Microgametoacutecitos satildeo geralmente do tamanho de um RBC natildeo infectados com citoplasma corados de azul paacutelido rosa ou cinza
Trofozoiacutetos - P malariae
Esquizontes ndash P malariae
Aproximadamente 6 a 12 merozoiacutetos com arranjo de rosetas
Gametoacutecitos ndash P malariae
Ciclo evolutivo ndash HI
bull Ingestatildeo de hemaacutecias contendo gametoacutecitos durante o repasto sanguiacuteneo da fecircmea do anofelino
bull No intestino meacutedio do vetor gametogecircnese ndash Macrogametoacutecito ndash macrogameta feminino ndash Microgametoacutecito o processo de exflagelaccedilatildeo daacute
origem a 8 microgametas masculinos ndash Produccedilatildeo de ovo ou zigoto ndash O ovo encista na camada epitelial do intestino meacutedio
oocisto ndash Esporogonia liberaccedilatildeo de esporozoiacutetos
Ciclo evolutivo ndash HInvertebrado
ndash Os esporozoiacutetos satildeo transportados pelo hemolinfa ateacute as glacircndulas salivares do vetor ateacute atingirem o ducto salivar
bull Inoculaccedilatildeo no hospedeiro vertebrado atraveacutes da picada do inseto
Hemaacutecia com gametoacutecito
Fecircmeas de Anopheles sugam hemaacutecias com gametoacutecitos
CICLO NO INVERTEBRADO
No tubo digestivo
Zigoto
Penetraccedilatildeo na parede do tubo
digestivo
Migraccedilatildeo para as glacircndulas salivares
Desenvolvimento
Mosquito infectado
Diagnoacutestico
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado e espesso corado pelo Giemsa
bull Sangue colhido sem anticoagulante para melhor fixaccedilatildeo em lacircmina
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo espesso eacute mais eficiente para detecccedilatildeo da infecccedilatildeo
bull Esfregaccedilo delgado eacute mais eficiente para diferenciaccedilatildeo morfoloacutegica das espeacutecies
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo semiquantitativo
ndash Exame de 100 campos microscoacutepicos com resultado expresso pelo sistema de cruzes
Parasitos contados Nuacutemero de campos
microscoacutepicos cruzes
40 a 60 100 +2
1 1 +
2-20 1 ++
21-200 1 +++
+ 200 1 ++++
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo quantitativo derivado de anaacutelise semiquantitativa
Contagem de parasitos por campo
Cruzes Parasitos por mm3
40 a 60100 +2 200-300
1 + 301-500
2-20 ++ 501 - 10000
21-200 +++ 10001 ndash 100000
+ 200 ++++ 100000 ou mais
Diagnoacutestico
bull P falciparum
ndash Parte do ciclo celular aderido ao endoteacutelio capilar Encontro somente de trofozoitos e gametoacutecitos no sangue perifeacuterico
ndash Raramente os esquizontes satildeo encontrados no sangue perifeacuterico
Diagnoacutestico ndash Pvivax ndash Encontro de todas as formas de desenvolvimento ndash
trofozoiacuteto jovem maduro esquizontes e gametoacutecitos
ndash Os trofozoiacutetos maduros tecircm geralmente um aspecto irregular com extensotildees ameboacuteides em seu citoplasma
Diagnoacutestico ndash Pvivax
ndash Os gametoacutecitos femininos coram-se mais intensamente que os masculinos e apresentam nuacutecleo mais compacto geralmente em localizaccedilatildeo perifeacuterica
ndash O pigmento malaacuterico geralmente eacute abundante
Diagnoacutestico - Pmalariae
bull Realizado por meio de caracteriacutesticas morfoloacutegicas do parasito
ndash Verificaccedilatildeo em esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado
ndash Posiccedilatildeo equatorial do parasito
ndash Desenvolvimento sem deformaccedilatildeo do eritroacutecito
Diagnoacutestico
bull QBC ndash Teacutecnica que combina concentraccedilatildeo dos parasitos
pela centrifugaccedilatildeo do sangue em em microhematoacutecrito e a coloraccedilatildeo dos aacutecidos nucleacuteicos do parasito pelo fluorcromo laranja de acridina
ndash Utilizaccedilatildeo de tubos especiais e microscopia epifluorescente
ndash Teste raacutepido
ndash Alta sensibilidade
Diagnoacutestico
bull ParaSight-F ( Becton amp Dickinson)
ndash Teste raacutepido para captura da proteiacutena rica em histidina 2 de Pfalciparum( PfHRP2) e enzimas conservadas de 4 espeacutecies de plasmoacutedio (DHL e aldolase
ndash Utilizaccedilatildeo de fita de nitrocelulose contendo ac monoclonal
ndash Lise de uma gota de sangue
ndash A reaccedilatildeo eacute revelada com adiccedilatildeo de ac policlonal anti-HRP2 conjugado com lipossomas contendo corante
Diagnoacutestico
bull PCR
ndash Sensibilidade e especificidade maior do que o esfregaccedilo sanguiacuteneo
Concentraccedilatildeo
bull Baseia-se na passagem de sangue venoso atraveacutes de uma membrana (Milipore ou Nuclepore) de diacircmetro de 13 a 25 mm e poros de 5 ou 3 μm
bull O material retido na membrana sendo fixado corado e observado ao microscoacutepio
bull Essa teacutecnica assim como a de Knott permite a identificaccedilatildeo de indiviacuteduos com baixiacutessimas parasitemias (quantidade de microfilarias natildeo detectaacuteveis pela teacutecnica de gota espessa)
Teacutecnica de Knott
bull Retirar 2 ml de sangue total por punccedilatildeo venosa e colocar imediatamente em um tubo contendo 10 ml de formol a 2
bull Fechar o tubo e misture completamente invertendo-o e agitando-o O formol hemolisa as hemaacutecias mata fixa e distende as microfilaacuterias
bull Centrifugar o sangue a 1500 rpm por 5 minutos
bull Decantar o sobrenadante
Teacutecnica de Knott
bull Retirar o sedimento com uma pipeta Pasteur e espalhar a gota espessa sobre uma lacircmina
bull Deixar secar bem e corar com Giemsa
bull Examinar com objetiva de imersatildeo
bull Esta teacutecnica possibilita que o exame microscoacutepico laboratorial seja realizado vaacuterios dias apoacutes a coleta de material realizada no campo
Exames de imagem
bull Ultranossografia
ndash Possibilidade de visualizar os movimentos de vermes adultos vivos de W bancrofti em vaso linfaacutetico especificamente em vasos intraescrotais do cordatildeo espermaacutetico
ndash O movimento ativo e ininterrupto dos vermes adultos durante as 24 horas do dia eacute denominado sinal da ldquodanccedila das filaacuteriasrdquo
Diagnoacutestico soroloacutegico
bull Teste imunocromatograacutefico desenvolvido pelo ICT Diagnostic - ICT card
ndash Teste qualilativo
ndash Cartatildeo possui ac de antifilaacuteria e o controle eacute formado por ac anti Ig G humano
Plasmodium spp
Taxonomia
bull Reino Protozoa
bull FiloApicomplexa
bull Classe Sporozoea
bull Ordem Hemosporidiida
bull Famiacutelia Plasmodiidae
bull Gecircneros Plasmodium
bull Espeacutecie Pfalciparum Pvivax Povale e Pmalariae
Plasmodium
bull Ciclo bioloacutegico Hospedeiro vertebrado e invertebrado
bull Hospedeiro invertebrado ndash Vetor
ndash Fecircmeas hematoacutefagas do gecircnero Anopheles
ndash Brasil Anopheles (N)darlingi A (N) aquasalis A (N) albitarsis A (K) cruzii e A (K) bellator
ndash Possuem haacutebito noturno penetrando nas casas no crespuacutesculo saindo ao amanhecer
Plasmodium
bull Hospedeiro vertebrado homem
bull Transmissatildeo
ndash Vetor
ndash Transfusatildeo de sangue
ndash Compartilhamento de seringas
ndash Acidente com agulhas
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
bull Ciclo preacute-eritrociacutetico
ndash Forma inoculada esporozoiacutetos
ndash A fecircmea do anofelino infectado inocula no homem as formas infectantes localizadas na saliva
ndash Os esporozoiacutetas permancem na circulaccedilatildeo por aproximadamente uma hora
ndash Invadem os hepatoacutecitos e se diferenciam em trofozoiacutetas (criptozoiacuteto)
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
ndash Esquizogonia e formaccedilatildeo de esquizontes
ndash Divisatildeo nuclear e liberaccedilatildeo de merozoiacutetos
ndash Aproximadamente 10000 merozoiacutetos por hepatoacutecito
ndash Rompimento do hepatoacutecito e liberaccedilatildeo de merozoiacutetos na circulaccedilatildeo
ndash Duraccedilatildeo do ciclo aprox 1 a 2 semanas
Ciclo evolutivo
bull PVivax e Povale
ndash Alguns esporozoiacutetos geneticamente diferentes ficam na forma latente nos hepatoacutecitos permanecendo muitos meses Satildeo classificados como hipnozoiacuteto
ndash Satildeo responsaacuteveis pelas recaiacutedas tardias e formas de malaacuteria com periacuteodo de encubaccedilatildeo longo ndash 6 a 9 meses
FASE HEPAacuteTICA OU EXOERITROCIacuteTICA
Hepatoacutecito
FIacuteGADO
Invasatildeo do hepatoacutecito
Reproduccedilatildeo Assexuada
Esporozoiacutetos Lise dos hepatoacutecitos
Liberaccedilatildeo dos protozoaacuterios na corrente sanguumliacutenea
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
bull Ciclo eritrociacutetico
ndash Os merozoiacutetos invadem as hemaacutecias
ndash Diferenciaccedilatildeo em trofozoiacutetos
ndash Esquizogonia esquizonte
ndash Produccedilatildeo de merozoiacutetos e rompimento da hemaacutecia
ndash Merozoiacutetos invasatildeo de novas hemaacutecias
ndash Apoacutes algumas geraccedilotildees os merozoiacutetos natildeo mais se dividem e se diferenciam em gametoacutecitos ndash micro e macrogametoacutecito
FASE ERITROCIacuteTICA
Hepatoacutecito destruiacutedo pelos protozoaacuterios
Penetraccedilatildeo dos protozoaacuterios
Reproduccedilatildeo assexuada
Protozoaacuterios destroem as hemaacutecias
Diferenciaccedilatildeo em gametoacutecitos
Fecircmeas de Anopheles sugam hemaacutecias com gametoacutecitos
Ciclo no hospedeiro invertebrado
Ocorre nas hemaacutecias ou Eritroacutecitos
nas hemaacutecias
Protozoaacuterio no interior da hemaacutecia
Hemaacutecia com gametoacutecito
T trofozoiacuteto Em esquizonte com merozoiacuteto
Fase eritrociacutetica
bull Ciclo sanguiacuteneo ndash Pfalciparum P vivax e Povale 48 horas
ndash Pmalariae 72 horas
ndash Fonte de nutriccedilatildeo do Plasmodium no ciclo sanguiacuteneo hemoglobina
ndash Produccedilatildeo do pigmento malaacuterico hemozoiacutena bull Granulaccedilotildees de Schuffner Plasmodium vivax
bull Granulaccedilotildees de Maurer P falciparum
bull Granulaccedilotildees de Ziemann P malariae
ndash Fagocitose pelas ceacutelulas de Kuppffer e macroacutefagos do baccedilo
Trofozoiacutetos Pfalciparum
Trofozoiacutetos Pfalciparum
Esquizonte ndash P falciparum
Raros no sangue perifeacuterico Possuem 2 a 24 merozoiacutetos
Ocupam 23 do gloacutebulo vermelho
Gametoacutecitos Pfalciparum
Ciclo evolutivo Pvivax
Esquizonte ndash P vivax
Satildeo grandes e ameboacuteides Cromatina organizada em duas ou mais massas
Possuem 2 a 24 merozoiacutetos com pontos de cromatina
Gametoacutecito ndash Pvivax
Macrogametoacutecitos satildeo redondos ou ovais e ocupam toda ceacutelula hospedeira O citoplasma eacute geralmente corado de azul mais escuro e conteacutem pigmento marrom Microgametoacutecitos satildeo geralmente do tamanho de um RBC natildeo infectados com citoplasma corados de azul paacutelido rosa ou cinza
Trofozoiacutetos - P malariae
Esquizontes ndash P malariae
Aproximadamente 6 a 12 merozoiacutetos com arranjo de rosetas
Gametoacutecitos ndash P malariae
Ciclo evolutivo ndash HI
bull Ingestatildeo de hemaacutecias contendo gametoacutecitos durante o repasto sanguiacuteneo da fecircmea do anofelino
bull No intestino meacutedio do vetor gametogecircnese ndash Macrogametoacutecito ndash macrogameta feminino ndash Microgametoacutecito o processo de exflagelaccedilatildeo daacute
origem a 8 microgametas masculinos ndash Produccedilatildeo de ovo ou zigoto ndash O ovo encista na camada epitelial do intestino meacutedio
oocisto ndash Esporogonia liberaccedilatildeo de esporozoiacutetos
Ciclo evolutivo ndash HInvertebrado
ndash Os esporozoiacutetos satildeo transportados pelo hemolinfa ateacute as glacircndulas salivares do vetor ateacute atingirem o ducto salivar
bull Inoculaccedilatildeo no hospedeiro vertebrado atraveacutes da picada do inseto
Hemaacutecia com gametoacutecito
Fecircmeas de Anopheles sugam hemaacutecias com gametoacutecitos
CICLO NO INVERTEBRADO
No tubo digestivo
Zigoto
Penetraccedilatildeo na parede do tubo
digestivo
Migraccedilatildeo para as glacircndulas salivares
Desenvolvimento
Mosquito infectado
Diagnoacutestico
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado e espesso corado pelo Giemsa
bull Sangue colhido sem anticoagulante para melhor fixaccedilatildeo em lacircmina
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo espesso eacute mais eficiente para detecccedilatildeo da infecccedilatildeo
bull Esfregaccedilo delgado eacute mais eficiente para diferenciaccedilatildeo morfoloacutegica das espeacutecies
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo semiquantitativo
ndash Exame de 100 campos microscoacutepicos com resultado expresso pelo sistema de cruzes
Parasitos contados Nuacutemero de campos
microscoacutepicos cruzes
40 a 60 100 +2
1 1 +
2-20 1 ++
21-200 1 +++
+ 200 1 ++++
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo quantitativo derivado de anaacutelise semiquantitativa
Contagem de parasitos por campo
Cruzes Parasitos por mm3
40 a 60100 +2 200-300
1 + 301-500
2-20 ++ 501 - 10000
21-200 +++ 10001 ndash 100000
+ 200 ++++ 100000 ou mais
Diagnoacutestico
bull P falciparum
ndash Parte do ciclo celular aderido ao endoteacutelio capilar Encontro somente de trofozoitos e gametoacutecitos no sangue perifeacuterico
ndash Raramente os esquizontes satildeo encontrados no sangue perifeacuterico
Diagnoacutestico ndash Pvivax ndash Encontro de todas as formas de desenvolvimento ndash
trofozoiacuteto jovem maduro esquizontes e gametoacutecitos
ndash Os trofozoiacutetos maduros tecircm geralmente um aspecto irregular com extensotildees ameboacuteides em seu citoplasma
Diagnoacutestico ndash Pvivax
ndash Os gametoacutecitos femininos coram-se mais intensamente que os masculinos e apresentam nuacutecleo mais compacto geralmente em localizaccedilatildeo perifeacuterica
ndash O pigmento malaacuterico geralmente eacute abundante
Diagnoacutestico - Pmalariae
bull Realizado por meio de caracteriacutesticas morfoloacutegicas do parasito
ndash Verificaccedilatildeo em esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado
ndash Posiccedilatildeo equatorial do parasito
ndash Desenvolvimento sem deformaccedilatildeo do eritroacutecito
Diagnoacutestico
bull QBC ndash Teacutecnica que combina concentraccedilatildeo dos parasitos
pela centrifugaccedilatildeo do sangue em em microhematoacutecrito e a coloraccedilatildeo dos aacutecidos nucleacuteicos do parasito pelo fluorcromo laranja de acridina
ndash Utilizaccedilatildeo de tubos especiais e microscopia epifluorescente
ndash Teste raacutepido
ndash Alta sensibilidade
Diagnoacutestico
bull ParaSight-F ( Becton amp Dickinson)
ndash Teste raacutepido para captura da proteiacutena rica em histidina 2 de Pfalciparum( PfHRP2) e enzimas conservadas de 4 espeacutecies de plasmoacutedio (DHL e aldolase
ndash Utilizaccedilatildeo de fita de nitrocelulose contendo ac monoclonal
ndash Lise de uma gota de sangue
ndash A reaccedilatildeo eacute revelada com adiccedilatildeo de ac policlonal anti-HRP2 conjugado com lipossomas contendo corante
Diagnoacutestico
bull PCR
ndash Sensibilidade e especificidade maior do que o esfregaccedilo sanguiacuteneo
Teacutecnica de Knott
bull Retirar 2 ml de sangue total por punccedilatildeo venosa e colocar imediatamente em um tubo contendo 10 ml de formol a 2
bull Fechar o tubo e misture completamente invertendo-o e agitando-o O formol hemolisa as hemaacutecias mata fixa e distende as microfilaacuterias
bull Centrifugar o sangue a 1500 rpm por 5 minutos
bull Decantar o sobrenadante
Teacutecnica de Knott
bull Retirar o sedimento com uma pipeta Pasteur e espalhar a gota espessa sobre uma lacircmina
bull Deixar secar bem e corar com Giemsa
bull Examinar com objetiva de imersatildeo
bull Esta teacutecnica possibilita que o exame microscoacutepico laboratorial seja realizado vaacuterios dias apoacutes a coleta de material realizada no campo
Exames de imagem
bull Ultranossografia
ndash Possibilidade de visualizar os movimentos de vermes adultos vivos de W bancrofti em vaso linfaacutetico especificamente em vasos intraescrotais do cordatildeo espermaacutetico
ndash O movimento ativo e ininterrupto dos vermes adultos durante as 24 horas do dia eacute denominado sinal da ldquodanccedila das filaacuteriasrdquo
Diagnoacutestico soroloacutegico
bull Teste imunocromatograacutefico desenvolvido pelo ICT Diagnostic - ICT card
ndash Teste qualilativo
ndash Cartatildeo possui ac de antifilaacuteria e o controle eacute formado por ac anti Ig G humano
Plasmodium spp
Taxonomia
bull Reino Protozoa
bull FiloApicomplexa
bull Classe Sporozoea
bull Ordem Hemosporidiida
bull Famiacutelia Plasmodiidae
bull Gecircneros Plasmodium
bull Espeacutecie Pfalciparum Pvivax Povale e Pmalariae
Plasmodium
bull Ciclo bioloacutegico Hospedeiro vertebrado e invertebrado
bull Hospedeiro invertebrado ndash Vetor
ndash Fecircmeas hematoacutefagas do gecircnero Anopheles
ndash Brasil Anopheles (N)darlingi A (N) aquasalis A (N) albitarsis A (K) cruzii e A (K) bellator
ndash Possuem haacutebito noturno penetrando nas casas no crespuacutesculo saindo ao amanhecer
Plasmodium
bull Hospedeiro vertebrado homem
bull Transmissatildeo
ndash Vetor
ndash Transfusatildeo de sangue
ndash Compartilhamento de seringas
ndash Acidente com agulhas
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
bull Ciclo preacute-eritrociacutetico
ndash Forma inoculada esporozoiacutetos
ndash A fecircmea do anofelino infectado inocula no homem as formas infectantes localizadas na saliva
ndash Os esporozoiacutetas permancem na circulaccedilatildeo por aproximadamente uma hora
ndash Invadem os hepatoacutecitos e se diferenciam em trofozoiacutetas (criptozoiacuteto)
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
ndash Esquizogonia e formaccedilatildeo de esquizontes
ndash Divisatildeo nuclear e liberaccedilatildeo de merozoiacutetos
ndash Aproximadamente 10000 merozoiacutetos por hepatoacutecito
ndash Rompimento do hepatoacutecito e liberaccedilatildeo de merozoiacutetos na circulaccedilatildeo
ndash Duraccedilatildeo do ciclo aprox 1 a 2 semanas
Ciclo evolutivo
bull PVivax e Povale
ndash Alguns esporozoiacutetos geneticamente diferentes ficam na forma latente nos hepatoacutecitos permanecendo muitos meses Satildeo classificados como hipnozoiacuteto
ndash Satildeo responsaacuteveis pelas recaiacutedas tardias e formas de malaacuteria com periacuteodo de encubaccedilatildeo longo ndash 6 a 9 meses
FASE HEPAacuteTICA OU EXOERITROCIacuteTICA
Hepatoacutecito
FIacuteGADO
Invasatildeo do hepatoacutecito
Reproduccedilatildeo Assexuada
Esporozoiacutetos Lise dos hepatoacutecitos
Liberaccedilatildeo dos protozoaacuterios na corrente sanguumliacutenea
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
bull Ciclo eritrociacutetico
ndash Os merozoiacutetos invadem as hemaacutecias
ndash Diferenciaccedilatildeo em trofozoiacutetos
ndash Esquizogonia esquizonte
ndash Produccedilatildeo de merozoiacutetos e rompimento da hemaacutecia
ndash Merozoiacutetos invasatildeo de novas hemaacutecias
ndash Apoacutes algumas geraccedilotildees os merozoiacutetos natildeo mais se dividem e se diferenciam em gametoacutecitos ndash micro e macrogametoacutecito
FASE ERITROCIacuteTICA
Hepatoacutecito destruiacutedo pelos protozoaacuterios
Penetraccedilatildeo dos protozoaacuterios
Reproduccedilatildeo assexuada
Protozoaacuterios destroem as hemaacutecias
Diferenciaccedilatildeo em gametoacutecitos
Fecircmeas de Anopheles sugam hemaacutecias com gametoacutecitos
Ciclo no hospedeiro invertebrado
Ocorre nas hemaacutecias ou Eritroacutecitos
nas hemaacutecias
Protozoaacuterio no interior da hemaacutecia
Hemaacutecia com gametoacutecito
T trofozoiacuteto Em esquizonte com merozoiacuteto
Fase eritrociacutetica
bull Ciclo sanguiacuteneo ndash Pfalciparum P vivax e Povale 48 horas
ndash Pmalariae 72 horas
ndash Fonte de nutriccedilatildeo do Plasmodium no ciclo sanguiacuteneo hemoglobina
ndash Produccedilatildeo do pigmento malaacuterico hemozoiacutena bull Granulaccedilotildees de Schuffner Plasmodium vivax
bull Granulaccedilotildees de Maurer P falciparum
bull Granulaccedilotildees de Ziemann P malariae
ndash Fagocitose pelas ceacutelulas de Kuppffer e macroacutefagos do baccedilo
Trofozoiacutetos Pfalciparum
Trofozoiacutetos Pfalciparum
Esquizonte ndash P falciparum
Raros no sangue perifeacuterico Possuem 2 a 24 merozoiacutetos
Ocupam 23 do gloacutebulo vermelho
Gametoacutecitos Pfalciparum
Ciclo evolutivo Pvivax
Esquizonte ndash P vivax
Satildeo grandes e ameboacuteides Cromatina organizada em duas ou mais massas
Possuem 2 a 24 merozoiacutetos com pontos de cromatina
Gametoacutecito ndash Pvivax
Macrogametoacutecitos satildeo redondos ou ovais e ocupam toda ceacutelula hospedeira O citoplasma eacute geralmente corado de azul mais escuro e conteacutem pigmento marrom Microgametoacutecitos satildeo geralmente do tamanho de um RBC natildeo infectados com citoplasma corados de azul paacutelido rosa ou cinza
Trofozoiacutetos - P malariae
Esquizontes ndash P malariae
Aproximadamente 6 a 12 merozoiacutetos com arranjo de rosetas
Gametoacutecitos ndash P malariae
Ciclo evolutivo ndash HI
bull Ingestatildeo de hemaacutecias contendo gametoacutecitos durante o repasto sanguiacuteneo da fecircmea do anofelino
bull No intestino meacutedio do vetor gametogecircnese ndash Macrogametoacutecito ndash macrogameta feminino ndash Microgametoacutecito o processo de exflagelaccedilatildeo daacute
origem a 8 microgametas masculinos ndash Produccedilatildeo de ovo ou zigoto ndash O ovo encista na camada epitelial do intestino meacutedio
oocisto ndash Esporogonia liberaccedilatildeo de esporozoiacutetos
Ciclo evolutivo ndash HInvertebrado
ndash Os esporozoiacutetos satildeo transportados pelo hemolinfa ateacute as glacircndulas salivares do vetor ateacute atingirem o ducto salivar
bull Inoculaccedilatildeo no hospedeiro vertebrado atraveacutes da picada do inseto
Hemaacutecia com gametoacutecito
Fecircmeas de Anopheles sugam hemaacutecias com gametoacutecitos
CICLO NO INVERTEBRADO
No tubo digestivo
Zigoto
Penetraccedilatildeo na parede do tubo
digestivo
Migraccedilatildeo para as glacircndulas salivares
Desenvolvimento
Mosquito infectado
Diagnoacutestico
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado e espesso corado pelo Giemsa
bull Sangue colhido sem anticoagulante para melhor fixaccedilatildeo em lacircmina
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo espesso eacute mais eficiente para detecccedilatildeo da infecccedilatildeo
bull Esfregaccedilo delgado eacute mais eficiente para diferenciaccedilatildeo morfoloacutegica das espeacutecies
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo semiquantitativo
ndash Exame de 100 campos microscoacutepicos com resultado expresso pelo sistema de cruzes
Parasitos contados Nuacutemero de campos
microscoacutepicos cruzes
40 a 60 100 +2
1 1 +
2-20 1 ++
21-200 1 +++
+ 200 1 ++++
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo quantitativo derivado de anaacutelise semiquantitativa
Contagem de parasitos por campo
Cruzes Parasitos por mm3
40 a 60100 +2 200-300
1 + 301-500
2-20 ++ 501 - 10000
21-200 +++ 10001 ndash 100000
+ 200 ++++ 100000 ou mais
Diagnoacutestico
bull P falciparum
ndash Parte do ciclo celular aderido ao endoteacutelio capilar Encontro somente de trofozoitos e gametoacutecitos no sangue perifeacuterico
ndash Raramente os esquizontes satildeo encontrados no sangue perifeacuterico
Diagnoacutestico ndash Pvivax ndash Encontro de todas as formas de desenvolvimento ndash
trofozoiacuteto jovem maduro esquizontes e gametoacutecitos
ndash Os trofozoiacutetos maduros tecircm geralmente um aspecto irregular com extensotildees ameboacuteides em seu citoplasma
Diagnoacutestico ndash Pvivax
ndash Os gametoacutecitos femininos coram-se mais intensamente que os masculinos e apresentam nuacutecleo mais compacto geralmente em localizaccedilatildeo perifeacuterica
ndash O pigmento malaacuterico geralmente eacute abundante
Diagnoacutestico - Pmalariae
bull Realizado por meio de caracteriacutesticas morfoloacutegicas do parasito
ndash Verificaccedilatildeo em esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado
ndash Posiccedilatildeo equatorial do parasito
ndash Desenvolvimento sem deformaccedilatildeo do eritroacutecito
Diagnoacutestico
bull QBC ndash Teacutecnica que combina concentraccedilatildeo dos parasitos
pela centrifugaccedilatildeo do sangue em em microhematoacutecrito e a coloraccedilatildeo dos aacutecidos nucleacuteicos do parasito pelo fluorcromo laranja de acridina
ndash Utilizaccedilatildeo de tubos especiais e microscopia epifluorescente
ndash Teste raacutepido
ndash Alta sensibilidade
Diagnoacutestico
bull ParaSight-F ( Becton amp Dickinson)
ndash Teste raacutepido para captura da proteiacutena rica em histidina 2 de Pfalciparum( PfHRP2) e enzimas conservadas de 4 espeacutecies de plasmoacutedio (DHL e aldolase
ndash Utilizaccedilatildeo de fita de nitrocelulose contendo ac monoclonal
ndash Lise de uma gota de sangue
ndash A reaccedilatildeo eacute revelada com adiccedilatildeo de ac policlonal anti-HRP2 conjugado com lipossomas contendo corante
Diagnoacutestico
bull PCR
ndash Sensibilidade e especificidade maior do que o esfregaccedilo sanguiacuteneo
Teacutecnica de Knott
bull Retirar o sedimento com uma pipeta Pasteur e espalhar a gota espessa sobre uma lacircmina
bull Deixar secar bem e corar com Giemsa
bull Examinar com objetiva de imersatildeo
bull Esta teacutecnica possibilita que o exame microscoacutepico laboratorial seja realizado vaacuterios dias apoacutes a coleta de material realizada no campo
Exames de imagem
bull Ultranossografia
ndash Possibilidade de visualizar os movimentos de vermes adultos vivos de W bancrofti em vaso linfaacutetico especificamente em vasos intraescrotais do cordatildeo espermaacutetico
ndash O movimento ativo e ininterrupto dos vermes adultos durante as 24 horas do dia eacute denominado sinal da ldquodanccedila das filaacuteriasrdquo
Diagnoacutestico soroloacutegico
bull Teste imunocromatograacutefico desenvolvido pelo ICT Diagnostic - ICT card
ndash Teste qualilativo
ndash Cartatildeo possui ac de antifilaacuteria e o controle eacute formado por ac anti Ig G humano
Plasmodium spp
Taxonomia
bull Reino Protozoa
bull FiloApicomplexa
bull Classe Sporozoea
bull Ordem Hemosporidiida
bull Famiacutelia Plasmodiidae
bull Gecircneros Plasmodium
bull Espeacutecie Pfalciparum Pvivax Povale e Pmalariae
Plasmodium
bull Ciclo bioloacutegico Hospedeiro vertebrado e invertebrado
bull Hospedeiro invertebrado ndash Vetor
ndash Fecircmeas hematoacutefagas do gecircnero Anopheles
ndash Brasil Anopheles (N)darlingi A (N) aquasalis A (N) albitarsis A (K) cruzii e A (K) bellator
ndash Possuem haacutebito noturno penetrando nas casas no crespuacutesculo saindo ao amanhecer
Plasmodium
bull Hospedeiro vertebrado homem
bull Transmissatildeo
ndash Vetor
ndash Transfusatildeo de sangue
ndash Compartilhamento de seringas
ndash Acidente com agulhas
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
bull Ciclo preacute-eritrociacutetico
ndash Forma inoculada esporozoiacutetos
ndash A fecircmea do anofelino infectado inocula no homem as formas infectantes localizadas na saliva
ndash Os esporozoiacutetas permancem na circulaccedilatildeo por aproximadamente uma hora
ndash Invadem os hepatoacutecitos e se diferenciam em trofozoiacutetas (criptozoiacuteto)
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
ndash Esquizogonia e formaccedilatildeo de esquizontes
ndash Divisatildeo nuclear e liberaccedilatildeo de merozoiacutetos
ndash Aproximadamente 10000 merozoiacutetos por hepatoacutecito
ndash Rompimento do hepatoacutecito e liberaccedilatildeo de merozoiacutetos na circulaccedilatildeo
ndash Duraccedilatildeo do ciclo aprox 1 a 2 semanas
Ciclo evolutivo
bull PVivax e Povale
ndash Alguns esporozoiacutetos geneticamente diferentes ficam na forma latente nos hepatoacutecitos permanecendo muitos meses Satildeo classificados como hipnozoiacuteto
ndash Satildeo responsaacuteveis pelas recaiacutedas tardias e formas de malaacuteria com periacuteodo de encubaccedilatildeo longo ndash 6 a 9 meses
FASE HEPAacuteTICA OU EXOERITROCIacuteTICA
Hepatoacutecito
FIacuteGADO
Invasatildeo do hepatoacutecito
Reproduccedilatildeo Assexuada
Esporozoiacutetos Lise dos hepatoacutecitos
Liberaccedilatildeo dos protozoaacuterios na corrente sanguumliacutenea
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
bull Ciclo eritrociacutetico
ndash Os merozoiacutetos invadem as hemaacutecias
ndash Diferenciaccedilatildeo em trofozoiacutetos
ndash Esquizogonia esquizonte
ndash Produccedilatildeo de merozoiacutetos e rompimento da hemaacutecia
ndash Merozoiacutetos invasatildeo de novas hemaacutecias
ndash Apoacutes algumas geraccedilotildees os merozoiacutetos natildeo mais se dividem e se diferenciam em gametoacutecitos ndash micro e macrogametoacutecito
FASE ERITROCIacuteTICA
Hepatoacutecito destruiacutedo pelos protozoaacuterios
Penetraccedilatildeo dos protozoaacuterios
Reproduccedilatildeo assexuada
Protozoaacuterios destroem as hemaacutecias
Diferenciaccedilatildeo em gametoacutecitos
Fecircmeas de Anopheles sugam hemaacutecias com gametoacutecitos
Ciclo no hospedeiro invertebrado
Ocorre nas hemaacutecias ou Eritroacutecitos
nas hemaacutecias
Protozoaacuterio no interior da hemaacutecia
Hemaacutecia com gametoacutecito
T trofozoiacuteto Em esquizonte com merozoiacuteto
Fase eritrociacutetica
bull Ciclo sanguiacuteneo ndash Pfalciparum P vivax e Povale 48 horas
ndash Pmalariae 72 horas
ndash Fonte de nutriccedilatildeo do Plasmodium no ciclo sanguiacuteneo hemoglobina
ndash Produccedilatildeo do pigmento malaacuterico hemozoiacutena bull Granulaccedilotildees de Schuffner Plasmodium vivax
bull Granulaccedilotildees de Maurer P falciparum
bull Granulaccedilotildees de Ziemann P malariae
ndash Fagocitose pelas ceacutelulas de Kuppffer e macroacutefagos do baccedilo
Trofozoiacutetos Pfalciparum
Trofozoiacutetos Pfalciparum
Esquizonte ndash P falciparum
Raros no sangue perifeacuterico Possuem 2 a 24 merozoiacutetos
Ocupam 23 do gloacutebulo vermelho
Gametoacutecitos Pfalciparum
Ciclo evolutivo Pvivax
Esquizonte ndash P vivax
Satildeo grandes e ameboacuteides Cromatina organizada em duas ou mais massas
Possuem 2 a 24 merozoiacutetos com pontos de cromatina
Gametoacutecito ndash Pvivax
Macrogametoacutecitos satildeo redondos ou ovais e ocupam toda ceacutelula hospedeira O citoplasma eacute geralmente corado de azul mais escuro e conteacutem pigmento marrom Microgametoacutecitos satildeo geralmente do tamanho de um RBC natildeo infectados com citoplasma corados de azul paacutelido rosa ou cinza
Trofozoiacutetos - P malariae
Esquizontes ndash P malariae
Aproximadamente 6 a 12 merozoiacutetos com arranjo de rosetas
Gametoacutecitos ndash P malariae
Ciclo evolutivo ndash HI
bull Ingestatildeo de hemaacutecias contendo gametoacutecitos durante o repasto sanguiacuteneo da fecircmea do anofelino
bull No intestino meacutedio do vetor gametogecircnese ndash Macrogametoacutecito ndash macrogameta feminino ndash Microgametoacutecito o processo de exflagelaccedilatildeo daacute
origem a 8 microgametas masculinos ndash Produccedilatildeo de ovo ou zigoto ndash O ovo encista na camada epitelial do intestino meacutedio
oocisto ndash Esporogonia liberaccedilatildeo de esporozoiacutetos
Ciclo evolutivo ndash HInvertebrado
ndash Os esporozoiacutetos satildeo transportados pelo hemolinfa ateacute as glacircndulas salivares do vetor ateacute atingirem o ducto salivar
bull Inoculaccedilatildeo no hospedeiro vertebrado atraveacutes da picada do inseto
Hemaacutecia com gametoacutecito
Fecircmeas de Anopheles sugam hemaacutecias com gametoacutecitos
CICLO NO INVERTEBRADO
No tubo digestivo
Zigoto
Penetraccedilatildeo na parede do tubo
digestivo
Migraccedilatildeo para as glacircndulas salivares
Desenvolvimento
Mosquito infectado
Diagnoacutestico
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado e espesso corado pelo Giemsa
bull Sangue colhido sem anticoagulante para melhor fixaccedilatildeo em lacircmina
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo espesso eacute mais eficiente para detecccedilatildeo da infecccedilatildeo
bull Esfregaccedilo delgado eacute mais eficiente para diferenciaccedilatildeo morfoloacutegica das espeacutecies
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo semiquantitativo
ndash Exame de 100 campos microscoacutepicos com resultado expresso pelo sistema de cruzes
Parasitos contados Nuacutemero de campos
microscoacutepicos cruzes
40 a 60 100 +2
1 1 +
2-20 1 ++
21-200 1 +++
+ 200 1 ++++
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo quantitativo derivado de anaacutelise semiquantitativa
Contagem de parasitos por campo
Cruzes Parasitos por mm3
40 a 60100 +2 200-300
1 + 301-500
2-20 ++ 501 - 10000
21-200 +++ 10001 ndash 100000
+ 200 ++++ 100000 ou mais
Diagnoacutestico
bull P falciparum
ndash Parte do ciclo celular aderido ao endoteacutelio capilar Encontro somente de trofozoitos e gametoacutecitos no sangue perifeacuterico
ndash Raramente os esquizontes satildeo encontrados no sangue perifeacuterico
Diagnoacutestico ndash Pvivax ndash Encontro de todas as formas de desenvolvimento ndash
trofozoiacuteto jovem maduro esquizontes e gametoacutecitos
ndash Os trofozoiacutetos maduros tecircm geralmente um aspecto irregular com extensotildees ameboacuteides em seu citoplasma
Diagnoacutestico ndash Pvivax
ndash Os gametoacutecitos femininos coram-se mais intensamente que os masculinos e apresentam nuacutecleo mais compacto geralmente em localizaccedilatildeo perifeacuterica
ndash O pigmento malaacuterico geralmente eacute abundante
Diagnoacutestico - Pmalariae
bull Realizado por meio de caracteriacutesticas morfoloacutegicas do parasito
ndash Verificaccedilatildeo em esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado
ndash Posiccedilatildeo equatorial do parasito
ndash Desenvolvimento sem deformaccedilatildeo do eritroacutecito
Diagnoacutestico
bull QBC ndash Teacutecnica que combina concentraccedilatildeo dos parasitos
pela centrifugaccedilatildeo do sangue em em microhematoacutecrito e a coloraccedilatildeo dos aacutecidos nucleacuteicos do parasito pelo fluorcromo laranja de acridina
ndash Utilizaccedilatildeo de tubos especiais e microscopia epifluorescente
ndash Teste raacutepido
ndash Alta sensibilidade
Diagnoacutestico
bull ParaSight-F ( Becton amp Dickinson)
ndash Teste raacutepido para captura da proteiacutena rica em histidina 2 de Pfalciparum( PfHRP2) e enzimas conservadas de 4 espeacutecies de plasmoacutedio (DHL e aldolase
ndash Utilizaccedilatildeo de fita de nitrocelulose contendo ac monoclonal
ndash Lise de uma gota de sangue
ndash A reaccedilatildeo eacute revelada com adiccedilatildeo de ac policlonal anti-HRP2 conjugado com lipossomas contendo corante
Diagnoacutestico
bull PCR
ndash Sensibilidade e especificidade maior do que o esfregaccedilo sanguiacuteneo
Exames de imagem
bull Ultranossografia
ndash Possibilidade de visualizar os movimentos de vermes adultos vivos de W bancrofti em vaso linfaacutetico especificamente em vasos intraescrotais do cordatildeo espermaacutetico
ndash O movimento ativo e ininterrupto dos vermes adultos durante as 24 horas do dia eacute denominado sinal da ldquodanccedila das filaacuteriasrdquo
Diagnoacutestico soroloacutegico
bull Teste imunocromatograacutefico desenvolvido pelo ICT Diagnostic - ICT card
ndash Teste qualilativo
ndash Cartatildeo possui ac de antifilaacuteria e o controle eacute formado por ac anti Ig G humano
Plasmodium spp
Taxonomia
bull Reino Protozoa
bull FiloApicomplexa
bull Classe Sporozoea
bull Ordem Hemosporidiida
bull Famiacutelia Plasmodiidae
bull Gecircneros Plasmodium
bull Espeacutecie Pfalciparum Pvivax Povale e Pmalariae
Plasmodium
bull Ciclo bioloacutegico Hospedeiro vertebrado e invertebrado
bull Hospedeiro invertebrado ndash Vetor
ndash Fecircmeas hematoacutefagas do gecircnero Anopheles
ndash Brasil Anopheles (N)darlingi A (N) aquasalis A (N) albitarsis A (K) cruzii e A (K) bellator
ndash Possuem haacutebito noturno penetrando nas casas no crespuacutesculo saindo ao amanhecer
Plasmodium
bull Hospedeiro vertebrado homem
bull Transmissatildeo
ndash Vetor
ndash Transfusatildeo de sangue
ndash Compartilhamento de seringas
ndash Acidente com agulhas
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
bull Ciclo preacute-eritrociacutetico
ndash Forma inoculada esporozoiacutetos
ndash A fecircmea do anofelino infectado inocula no homem as formas infectantes localizadas na saliva
ndash Os esporozoiacutetas permancem na circulaccedilatildeo por aproximadamente uma hora
ndash Invadem os hepatoacutecitos e se diferenciam em trofozoiacutetas (criptozoiacuteto)
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
ndash Esquizogonia e formaccedilatildeo de esquizontes
ndash Divisatildeo nuclear e liberaccedilatildeo de merozoiacutetos
ndash Aproximadamente 10000 merozoiacutetos por hepatoacutecito
ndash Rompimento do hepatoacutecito e liberaccedilatildeo de merozoiacutetos na circulaccedilatildeo
ndash Duraccedilatildeo do ciclo aprox 1 a 2 semanas
Ciclo evolutivo
bull PVivax e Povale
ndash Alguns esporozoiacutetos geneticamente diferentes ficam na forma latente nos hepatoacutecitos permanecendo muitos meses Satildeo classificados como hipnozoiacuteto
ndash Satildeo responsaacuteveis pelas recaiacutedas tardias e formas de malaacuteria com periacuteodo de encubaccedilatildeo longo ndash 6 a 9 meses
FASE HEPAacuteTICA OU EXOERITROCIacuteTICA
Hepatoacutecito
FIacuteGADO
Invasatildeo do hepatoacutecito
Reproduccedilatildeo Assexuada
Esporozoiacutetos Lise dos hepatoacutecitos
Liberaccedilatildeo dos protozoaacuterios na corrente sanguumliacutenea
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
bull Ciclo eritrociacutetico
ndash Os merozoiacutetos invadem as hemaacutecias
ndash Diferenciaccedilatildeo em trofozoiacutetos
ndash Esquizogonia esquizonte
ndash Produccedilatildeo de merozoiacutetos e rompimento da hemaacutecia
ndash Merozoiacutetos invasatildeo de novas hemaacutecias
ndash Apoacutes algumas geraccedilotildees os merozoiacutetos natildeo mais se dividem e se diferenciam em gametoacutecitos ndash micro e macrogametoacutecito
FASE ERITROCIacuteTICA
Hepatoacutecito destruiacutedo pelos protozoaacuterios
Penetraccedilatildeo dos protozoaacuterios
Reproduccedilatildeo assexuada
Protozoaacuterios destroem as hemaacutecias
Diferenciaccedilatildeo em gametoacutecitos
Fecircmeas de Anopheles sugam hemaacutecias com gametoacutecitos
Ciclo no hospedeiro invertebrado
Ocorre nas hemaacutecias ou Eritroacutecitos
nas hemaacutecias
Protozoaacuterio no interior da hemaacutecia
Hemaacutecia com gametoacutecito
T trofozoiacuteto Em esquizonte com merozoiacuteto
Fase eritrociacutetica
bull Ciclo sanguiacuteneo ndash Pfalciparum P vivax e Povale 48 horas
ndash Pmalariae 72 horas
ndash Fonte de nutriccedilatildeo do Plasmodium no ciclo sanguiacuteneo hemoglobina
ndash Produccedilatildeo do pigmento malaacuterico hemozoiacutena bull Granulaccedilotildees de Schuffner Plasmodium vivax
bull Granulaccedilotildees de Maurer P falciparum
bull Granulaccedilotildees de Ziemann P malariae
ndash Fagocitose pelas ceacutelulas de Kuppffer e macroacutefagos do baccedilo
Trofozoiacutetos Pfalciparum
Trofozoiacutetos Pfalciparum
Esquizonte ndash P falciparum
Raros no sangue perifeacuterico Possuem 2 a 24 merozoiacutetos
Ocupam 23 do gloacutebulo vermelho
Gametoacutecitos Pfalciparum
Ciclo evolutivo Pvivax
Esquizonte ndash P vivax
Satildeo grandes e ameboacuteides Cromatina organizada em duas ou mais massas
Possuem 2 a 24 merozoiacutetos com pontos de cromatina
Gametoacutecito ndash Pvivax
Macrogametoacutecitos satildeo redondos ou ovais e ocupam toda ceacutelula hospedeira O citoplasma eacute geralmente corado de azul mais escuro e conteacutem pigmento marrom Microgametoacutecitos satildeo geralmente do tamanho de um RBC natildeo infectados com citoplasma corados de azul paacutelido rosa ou cinza
Trofozoiacutetos - P malariae
Esquizontes ndash P malariae
Aproximadamente 6 a 12 merozoiacutetos com arranjo de rosetas
Gametoacutecitos ndash P malariae
Ciclo evolutivo ndash HI
bull Ingestatildeo de hemaacutecias contendo gametoacutecitos durante o repasto sanguiacuteneo da fecircmea do anofelino
bull No intestino meacutedio do vetor gametogecircnese ndash Macrogametoacutecito ndash macrogameta feminino ndash Microgametoacutecito o processo de exflagelaccedilatildeo daacute
origem a 8 microgametas masculinos ndash Produccedilatildeo de ovo ou zigoto ndash O ovo encista na camada epitelial do intestino meacutedio
oocisto ndash Esporogonia liberaccedilatildeo de esporozoiacutetos
Ciclo evolutivo ndash HInvertebrado
ndash Os esporozoiacutetos satildeo transportados pelo hemolinfa ateacute as glacircndulas salivares do vetor ateacute atingirem o ducto salivar
bull Inoculaccedilatildeo no hospedeiro vertebrado atraveacutes da picada do inseto
Hemaacutecia com gametoacutecito
Fecircmeas de Anopheles sugam hemaacutecias com gametoacutecitos
CICLO NO INVERTEBRADO
No tubo digestivo
Zigoto
Penetraccedilatildeo na parede do tubo
digestivo
Migraccedilatildeo para as glacircndulas salivares
Desenvolvimento
Mosquito infectado
Diagnoacutestico
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado e espesso corado pelo Giemsa
bull Sangue colhido sem anticoagulante para melhor fixaccedilatildeo em lacircmina
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo espesso eacute mais eficiente para detecccedilatildeo da infecccedilatildeo
bull Esfregaccedilo delgado eacute mais eficiente para diferenciaccedilatildeo morfoloacutegica das espeacutecies
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo semiquantitativo
ndash Exame de 100 campos microscoacutepicos com resultado expresso pelo sistema de cruzes
Parasitos contados Nuacutemero de campos
microscoacutepicos cruzes
40 a 60 100 +2
1 1 +
2-20 1 ++
21-200 1 +++
+ 200 1 ++++
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo quantitativo derivado de anaacutelise semiquantitativa
Contagem de parasitos por campo
Cruzes Parasitos por mm3
40 a 60100 +2 200-300
1 + 301-500
2-20 ++ 501 - 10000
21-200 +++ 10001 ndash 100000
+ 200 ++++ 100000 ou mais
Diagnoacutestico
bull P falciparum
ndash Parte do ciclo celular aderido ao endoteacutelio capilar Encontro somente de trofozoitos e gametoacutecitos no sangue perifeacuterico
ndash Raramente os esquizontes satildeo encontrados no sangue perifeacuterico
Diagnoacutestico ndash Pvivax ndash Encontro de todas as formas de desenvolvimento ndash
trofozoiacuteto jovem maduro esquizontes e gametoacutecitos
ndash Os trofozoiacutetos maduros tecircm geralmente um aspecto irregular com extensotildees ameboacuteides em seu citoplasma
Diagnoacutestico ndash Pvivax
ndash Os gametoacutecitos femininos coram-se mais intensamente que os masculinos e apresentam nuacutecleo mais compacto geralmente em localizaccedilatildeo perifeacuterica
ndash O pigmento malaacuterico geralmente eacute abundante
Diagnoacutestico - Pmalariae
bull Realizado por meio de caracteriacutesticas morfoloacutegicas do parasito
ndash Verificaccedilatildeo em esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado
ndash Posiccedilatildeo equatorial do parasito
ndash Desenvolvimento sem deformaccedilatildeo do eritroacutecito
Diagnoacutestico
bull QBC ndash Teacutecnica que combina concentraccedilatildeo dos parasitos
pela centrifugaccedilatildeo do sangue em em microhematoacutecrito e a coloraccedilatildeo dos aacutecidos nucleacuteicos do parasito pelo fluorcromo laranja de acridina
ndash Utilizaccedilatildeo de tubos especiais e microscopia epifluorescente
ndash Teste raacutepido
ndash Alta sensibilidade
Diagnoacutestico
bull ParaSight-F ( Becton amp Dickinson)
ndash Teste raacutepido para captura da proteiacutena rica em histidina 2 de Pfalciparum( PfHRP2) e enzimas conservadas de 4 espeacutecies de plasmoacutedio (DHL e aldolase
ndash Utilizaccedilatildeo de fita de nitrocelulose contendo ac monoclonal
ndash Lise de uma gota de sangue
ndash A reaccedilatildeo eacute revelada com adiccedilatildeo de ac policlonal anti-HRP2 conjugado com lipossomas contendo corante
Diagnoacutestico
bull PCR
ndash Sensibilidade e especificidade maior do que o esfregaccedilo sanguiacuteneo
Diagnoacutestico soroloacutegico
bull Teste imunocromatograacutefico desenvolvido pelo ICT Diagnostic - ICT card
ndash Teste qualilativo
ndash Cartatildeo possui ac de antifilaacuteria e o controle eacute formado por ac anti Ig G humano
Plasmodium spp
Taxonomia
bull Reino Protozoa
bull FiloApicomplexa
bull Classe Sporozoea
bull Ordem Hemosporidiida
bull Famiacutelia Plasmodiidae
bull Gecircneros Plasmodium
bull Espeacutecie Pfalciparum Pvivax Povale e Pmalariae
Plasmodium
bull Ciclo bioloacutegico Hospedeiro vertebrado e invertebrado
bull Hospedeiro invertebrado ndash Vetor
ndash Fecircmeas hematoacutefagas do gecircnero Anopheles
ndash Brasil Anopheles (N)darlingi A (N) aquasalis A (N) albitarsis A (K) cruzii e A (K) bellator
ndash Possuem haacutebito noturno penetrando nas casas no crespuacutesculo saindo ao amanhecer
Plasmodium
bull Hospedeiro vertebrado homem
bull Transmissatildeo
ndash Vetor
ndash Transfusatildeo de sangue
ndash Compartilhamento de seringas
ndash Acidente com agulhas
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
bull Ciclo preacute-eritrociacutetico
ndash Forma inoculada esporozoiacutetos
ndash A fecircmea do anofelino infectado inocula no homem as formas infectantes localizadas na saliva
ndash Os esporozoiacutetas permancem na circulaccedilatildeo por aproximadamente uma hora
ndash Invadem os hepatoacutecitos e se diferenciam em trofozoiacutetas (criptozoiacuteto)
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
ndash Esquizogonia e formaccedilatildeo de esquizontes
ndash Divisatildeo nuclear e liberaccedilatildeo de merozoiacutetos
ndash Aproximadamente 10000 merozoiacutetos por hepatoacutecito
ndash Rompimento do hepatoacutecito e liberaccedilatildeo de merozoiacutetos na circulaccedilatildeo
ndash Duraccedilatildeo do ciclo aprox 1 a 2 semanas
Ciclo evolutivo
bull PVivax e Povale
ndash Alguns esporozoiacutetos geneticamente diferentes ficam na forma latente nos hepatoacutecitos permanecendo muitos meses Satildeo classificados como hipnozoiacuteto
ndash Satildeo responsaacuteveis pelas recaiacutedas tardias e formas de malaacuteria com periacuteodo de encubaccedilatildeo longo ndash 6 a 9 meses
FASE HEPAacuteTICA OU EXOERITROCIacuteTICA
Hepatoacutecito
FIacuteGADO
Invasatildeo do hepatoacutecito
Reproduccedilatildeo Assexuada
Esporozoiacutetos Lise dos hepatoacutecitos
Liberaccedilatildeo dos protozoaacuterios na corrente sanguumliacutenea
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
bull Ciclo eritrociacutetico
ndash Os merozoiacutetos invadem as hemaacutecias
ndash Diferenciaccedilatildeo em trofozoiacutetos
ndash Esquizogonia esquizonte
ndash Produccedilatildeo de merozoiacutetos e rompimento da hemaacutecia
ndash Merozoiacutetos invasatildeo de novas hemaacutecias
ndash Apoacutes algumas geraccedilotildees os merozoiacutetos natildeo mais se dividem e se diferenciam em gametoacutecitos ndash micro e macrogametoacutecito
FASE ERITROCIacuteTICA
Hepatoacutecito destruiacutedo pelos protozoaacuterios
Penetraccedilatildeo dos protozoaacuterios
Reproduccedilatildeo assexuada
Protozoaacuterios destroem as hemaacutecias
Diferenciaccedilatildeo em gametoacutecitos
Fecircmeas de Anopheles sugam hemaacutecias com gametoacutecitos
Ciclo no hospedeiro invertebrado
Ocorre nas hemaacutecias ou Eritroacutecitos
nas hemaacutecias
Protozoaacuterio no interior da hemaacutecia
Hemaacutecia com gametoacutecito
T trofozoiacuteto Em esquizonte com merozoiacuteto
Fase eritrociacutetica
bull Ciclo sanguiacuteneo ndash Pfalciparum P vivax e Povale 48 horas
ndash Pmalariae 72 horas
ndash Fonte de nutriccedilatildeo do Plasmodium no ciclo sanguiacuteneo hemoglobina
ndash Produccedilatildeo do pigmento malaacuterico hemozoiacutena bull Granulaccedilotildees de Schuffner Plasmodium vivax
bull Granulaccedilotildees de Maurer P falciparum
bull Granulaccedilotildees de Ziemann P malariae
ndash Fagocitose pelas ceacutelulas de Kuppffer e macroacutefagos do baccedilo
Trofozoiacutetos Pfalciparum
Trofozoiacutetos Pfalciparum
Esquizonte ndash P falciparum
Raros no sangue perifeacuterico Possuem 2 a 24 merozoiacutetos
Ocupam 23 do gloacutebulo vermelho
Gametoacutecitos Pfalciparum
Ciclo evolutivo Pvivax
Esquizonte ndash P vivax
Satildeo grandes e ameboacuteides Cromatina organizada em duas ou mais massas
Possuem 2 a 24 merozoiacutetos com pontos de cromatina
Gametoacutecito ndash Pvivax
Macrogametoacutecitos satildeo redondos ou ovais e ocupam toda ceacutelula hospedeira O citoplasma eacute geralmente corado de azul mais escuro e conteacutem pigmento marrom Microgametoacutecitos satildeo geralmente do tamanho de um RBC natildeo infectados com citoplasma corados de azul paacutelido rosa ou cinza
Trofozoiacutetos - P malariae
Esquizontes ndash P malariae
Aproximadamente 6 a 12 merozoiacutetos com arranjo de rosetas
Gametoacutecitos ndash P malariae
Ciclo evolutivo ndash HI
bull Ingestatildeo de hemaacutecias contendo gametoacutecitos durante o repasto sanguiacuteneo da fecircmea do anofelino
bull No intestino meacutedio do vetor gametogecircnese ndash Macrogametoacutecito ndash macrogameta feminino ndash Microgametoacutecito o processo de exflagelaccedilatildeo daacute
origem a 8 microgametas masculinos ndash Produccedilatildeo de ovo ou zigoto ndash O ovo encista na camada epitelial do intestino meacutedio
oocisto ndash Esporogonia liberaccedilatildeo de esporozoiacutetos
Ciclo evolutivo ndash HInvertebrado
ndash Os esporozoiacutetos satildeo transportados pelo hemolinfa ateacute as glacircndulas salivares do vetor ateacute atingirem o ducto salivar
bull Inoculaccedilatildeo no hospedeiro vertebrado atraveacutes da picada do inseto
Hemaacutecia com gametoacutecito
Fecircmeas de Anopheles sugam hemaacutecias com gametoacutecitos
CICLO NO INVERTEBRADO
No tubo digestivo
Zigoto
Penetraccedilatildeo na parede do tubo
digestivo
Migraccedilatildeo para as glacircndulas salivares
Desenvolvimento
Mosquito infectado
Diagnoacutestico
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado e espesso corado pelo Giemsa
bull Sangue colhido sem anticoagulante para melhor fixaccedilatildeo em lacircmina
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo espesso eacute mais eficiente para detecccedilatildeo da infecccedilatildeo
bull Esfregaccedilo delgado eacute mais eficiente para diferenciaccedilatildeo morfoloacutegica das espeacutecies
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo semiquantitativo
ndash Exame de 100 campos microscoacutepicos com resultado expresso pelo sistema de cruzes
Parasitos contados Nuacutemero de campos
microscoacutepicos cruzes
40 a 60 100 +2
1 1 +
2-20 1 ++
21-200 1 +++
+ 200 1 ++++
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo quantitativo derivado de anaacutelise semiquantitativa
Contagem de parasitos por campo
Cruzes Parasitos por mm3
40 a 60100 +2 200-300
1 + 301-500
2-20 ++ 501 - 10000
21-200 +++ 10001 ndash 100000
+ 200 ++++ 100000 ou mais
Diagnoacutestico
bull P falciparum
ndash Parte do ciclo celular aderido ao endoteacutelio capilar Encontro somente de trofozoitos e gametoacutecitos no sangue perifeacuterico
ndash Raramente os esquizontes satildeo encontrados no sangue perifeacuterico
Diagnoacutestico ndash Pvivax ndash Encontro de todas as formas de desenvolvimento ndash
trofozoiacuteto jovem maduro esquizontes e gametoacutecitos
ndash Os trofozoiacutetos maduros tecircm geralmente um aspecto irregular com extensotildees ameboacuteides em seu citoplasma
Diagnoacutestico ndash Pvivax
ndash Os gametoacutecitos femininos coram-se mais intensamente que os masculinos e apresentam nuacutecleo mais compacto geralmente em localizaccedilatildeo perifeacuterica
ndash O pigmento malaacuterico geralmente eacute abundante
Diagnoacutestico - Pmalariae
bull Realizado por meio de caracteriacutesticas morfoloacutegicas do parasito
ndash Verificaccedilatildeo em esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado
ndash Posiccedilatildeo equatorial do parasito
ndash Desenvolvimento sem deformaccedilatildeo do eritroacutecito
Diagnoacutestico
bull QBC ndash Teacutecnica que combina concentraccedilatildeo dos parasitos
pela centrifugaccedilatildeo do sangue em em microhematoacutecrito e a coloraccedilatildeo dos aacutecidos nucleacuteicos do parasito pelo fluorcromo laranja de acridina
ndash Utilizaccedilatildeo de tubos especiais e microscopia epifluorescente
ndash Teste raacutepido
ndash Alta sensibilidade
Diagnoacutestico
bull ParaSight-F ( Becton amp Dickinson)
ndash Teste raacutepido para captura da proteiacutena rica em histidina 2 de Pfalciparum( PfHRP2) e enzimas conservadas de 4 espeacutecies de plasmoacutedio (DHL e aldolase
ndash Utilizaccedilatildeo de fita de nitrocelulose contendo ac monoclonal
ndash Lise de uma gota de sangue
ndash A reaccedilatildeo eacute revelada com adiccedilatildeo de ac policlonal anti-HRP2 conjugado com lipossomas contendo corante
Diagnoacutestico
bull PCR
ndash Sensibilidade e especificidade maior do que o esfregaccedilo sanguiacuteneo
Plasmodium spp
Taxonomia
bull Reino Protozoa
bull FiloApicomplexa
bull Classe Sporozoea
bull Ordem Hemosporidiida
bull Famiacutelia Plasmodiidae
bull Gecircneros Plasmodium
bull Espeacutecie Pfalciparum Pvivax Povale e Pmalariae
Plasmodium
bull Ciclo bioloacutegico Hospedeiro vertebrado e invertebrado
bull Hospedeiro invertebrado ndash Vetor
ndash Fecircmeas hematoacutefagas do gecircnero Anopheles
ndash Brasil Anopheles (N)darlingi A (N) aquasalis A (N) albitarsis A (K) cruzii e A (K) bellator
ndash Possuem haacutebito noturno penetrando nas casas no crespuacutesculo saindo ao amanhecer
Plasmodium
bull Hospedeiro vertebrado homem
bull Transmissatildeo
ndash Vetor
ndash Transfusatildeo de sangue
ndash Compartilhamento de seringas
ndash Acidente com agulhas
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
bull Ciclo preacute-eritrociacutetico
ndash Forma inoculada esporozoiacutetos
ndash A fecircmea do anofelino infectado inocula no homem as formas infectantes localizadas na saliva
ndash Os esporozoiacutetas permancem na circulaccedilatildeo por aproximadamente uma hora
ndash Invadem os hepatoacutecitos e se diferenciam em trofozoiacutetas (criptozoiacuteto)
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
ndash Esquizogonia e formaccedilatildeo de esquizontes
ndash Divisatildeo nuclear e liberaccedilatildeo de merozoiacutetos
ndash Aproximadamente 10000 merozoiacutetos por hepatoacutecito
ndash Rompimento do hepatoacutecito e liberaccedilatildeo de merozoiacutetos na circulaccedilatildeo
ndash Duraccedilatildeo do ciclo aprox 1 a 2 semanas
Ciclo evolutivo
bull PVivax e Povale
ndash Alguns esporozoiacutetos geneticamente diferentes ficam na forma latente nos hepatoacutecitos permanecendo muitos meses Satildeo classificados como hipnozoiacuteto
ndash Satildeo responsaacuteveis pelas recaiacutedas tardias e formas de malaacuteria com periacuteodo de encubaccedilatildeo longo ndash 6 a 9 meses
FASE HEPAacuteTICA OU EXOERITROCIacuteTICA
Hepatoacutecito
FIacuteGADO
Invasatildeo do hepatoacutecito
Reproduccedilatildeo Assexuada
Esporozoiacutetos Lise dos hepatoacutecitos
Liberaccedilatildeo dos protozoaacuterios na corrente sanguumliacutenea
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
bull Ciclo eritrociacutetico
ndash Os merozoiacutetos invadem as hemaacutecias
ndash Diferenciaccedilatildeo em trofozoiacutetos
ndash Esquizogonia esquizonte
ndash Produccedilatildeo de merozoiacutetos e rompimento da hemaacutecia
ndash Merozoiacutetos invasatildeo de novas hemaacutecias
ndash Apoacutes algumas geraccedilotildees os merozoiacutetos natildeo mais se dividem e se diferenciam em gametoacutecitos ndash micro e macrogametoacutecito
FASE ERITROCIacuteTICA
Hepatoacutecito destruiacutedo pelos protozoaacuterios
Penetraccedilatildeo dos protozoaacuterios
Reproduccedilatildeo assexuada
Protozoaacuterios destroem as hemaacutecias
Diferenciaccedilatildeo em gametoacutecitos
Fecircmeas de Anopheles sugam hemaacutecias com gametoacutecitos
Ciclo no hospedeiro invertebrado
Ocorre nas hemaacutecias ou Eritroacutecitos
nas hemaacutecias
Protozoaacuterio no interior da hemaacutecia
Hemaacutecia com gametoacutecito
T trofozoiacuteto Em esquizonte com merozoiacuteto
Fase eritrociacutetica
bull Ciclo sanguiacuteneo ndash Pfalciparum P vivax e Povale 48 horas
ndash Pmalariae 72 horas
ndash Fonte de nutriccedilatildeo do Plasmodium no ciclo sanguiacuteneo hemoglobina
ndash Produccedilatildeo do pigmento malaacuterico hemozoiacutena bull Granulaccedilotildees de Schuffner Plasmodium vivax
bull Granulaccedilotildees de Maurer P falciparum
bull Granulaccedilotildees de Ziemann P malariae
ndash Fagocitose pelas ceacutelulas de Kuppffer e macroacutefagos do baccedilo
Trofozoiacutetos Pfalciparum
Trofozoiacutetos Pfalciparum
Esquizonte ndash P falciparum
Raros no sangue perifeacuterico Possuem 2 a 24 merozoiacutetos
Ocupam 23 do gloacutebulo vermelho
Gametoacutecitos Pfalciparum
Ciclo evolutivo Pvivax
Esquizonte ndash P vivax
Satildeo grandes e ameboacuteides Cromatina organizada em duas ou mais massas
Possuem 2 a 24 merozoiacutetos com pontos de cromatina
Gametoacutecito ndash Pvivax
Macrogametoacutecitos satildeo redondos ou ovais e ocupam toda ceacutelula hospedeira O citoplasma eacute geralmente corado de azul mais escuro e conteacutem pigmento marrom Microgametoacutecitos satildeo geralmente do tamanho de um RBC natildeo infectados com citoplasma corados de azul paacutelido rosa ou cinza
Trofozoiacutetos - P malariae
Esquizontes ndash P malariae
Aproximadamente 6 a 12 merozoiacutetos com arranjo de rosetas
Gametoacutecitos ndash P malariae
Ciclo evolutivo ndash HI
bull Ingestatildeo de hemaacutecias contendo gametoacutecitos durante o repasto sanguiacuteneo da fecircmea do anofelino
bull No intestino meacutedio do vetor gametogecircnese ndash Macrogametoacutecito ndash macrogameta feminino ndash Microgametoacutecito o processo de exflagelaccedilatildeo daacute
origem a 8 microgametas masculinos ndash Produccedilatildeo de ovo ou zigoto ndash O ovo encista na camada epitelial do intestino meacutedio
oocisto ndash Esporogonia liberaccedilatildeo de esporozoiacutetos
Ciclo evolutivo ndash HInvertebrado
ndash Os esporozoiacutetos satildeo transportados pelo hemolinfa ateacute as glacircndulas salivares do vetor ateacute atingirem o ducto salivar
bull Inoculaccedilatildeo no hospedeiro vertebrado atraveacutes da picada do inseto
Hemaacutecia com gametoacutecito
Fecircmeas de Anopheles sugam hemaacutecias com gametoacutecitos
CICLO NO INVERTEBRADO
No tubo digestivo
Zigoto
Penetraccedilatildeo na parede do tubo
digestivo
Migraccedilatildeo para as glacircndulas salivares
Desenvolvimento
Mosquito infectado
Diagnoacutestico
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado e espesso corado pelo Giemsa
bull Sangue colhido sem anticoagulante para melhor fixaccedilatildeo em lacircmina
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo espesso eacute mais eficiente para detecccedilatildeo da infecccedilatildeo
bull Esfregaccedilo delgado eacute mais eficiente para diferenciaccedilatildeo morfoloacutegica das espeacutecies
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo semiquantitativo
ndash Exame de 100 campos microscoacutepicos com resultado expresso pelo sistema de cruzes
Parasitos contados Nuacutemero de campos
microscoacutepicos cruzes
40 a 60 100 +2
1 1 +
2-20 1 ++
21-200 1 +++
+ 200 1 ++++
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo quantitativo derivado de anaacutelise semiquantitativa
Contagem de parasitos por campo
Cruzes Parasitos por mm3
40 a 60100 +2 200-300
1 + 301-500
2-20 ++ 501 - 10000
21-200 +++ 10001 ndash 100000
+ 200 ++++ 100000 ou mais
Diagnoacutestico
bull P falciparum
ndash Parte do ciclo celular aderido ao endoteacutelio capilar Encontro somente de trofozoitos e gametoacutecitos no sangue perifeacuterico
ndash Raramente os esquizontes satildeo encontrados no sangue perifeacuterico
Diagnoacutestico ndash Pvivax ndash Encontro de todas as formas de desenvolvimento ndash
trofozoiacuteto jovem maduro esquizontes e gametoacutecitos
ndash Os trofozoiacutetos maduros tecircm geralmente um aspecto irregular com extensotildees ameboacuteides em seu citoplasma
Diagnoacutestico ndash Pvivax
ndash Os gametoacutecitos femininos coram-se mais intensamente que os masculinos e apresentam nuacutecleo mais compacto geralmente em localizaccedilatildeo perifeacuterica
ndash O pigmento malaacuterico geralmente eacute abundante
Diagnoacutestico - Pmalariae
bull Realizado por meio de caracteriacutesticas morfoloacutegicas do parasito
ndash Verificaccedilatildeo em esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado
ndash Posiccedilatildeo equatorial do parasito
ndash Desenvolvimento sem deformaccedilatildeo do eritroacutecito
Diagnoacutestico
bull QBC ndash Teacutecnica que combina concentraccedilatildeo dos parasitos
pela centrifugaccedilatildeo do sangue em em microhematoacutecrito e a coloraccedilatildeo dos aacutecidos nucleacuteicos do parasito pelo fluorcromo laranja de acridina
ndash Utilizaccedilatildeo de tubos especiais e microscopia epifluorescente
ndash Teste raacutepido
ndash Alta sensibilidade
Diagnoacutestico
bull ParaSight-F ( Becton amp Dickinson)
ndash Teste raacutepido para captura da proteiacutena rica em histidina 2 de Pfalciparum( PfHRP2) e enzimas conservadas de 4 espeacutecies de plasmoacutedio (DHL e aldolase
ndash Utilizaccedilatildeo de fita de nitrocelulose contendo ac monoclonal
ndash Lise de uma gota de sangue
ndash A reaccedilatildeo eacute revelada com adiccedilatildeo de ac policlonal anti-HRP2 conjugado com lipossomas contendo corante
Diagnoacutestico
bull PCR
ndash Sensibilidade e especificidade maior do que o esfregaccedilo sanguiacuteneo
Taxonomia
bull Reino Protozoa
bull FiloApicomplexa
bull Classe Sporozoea
bull Ordem Hemosporidiida
bull Famiacutelia Plasmodiidae
bull Gecircneros Plasmodium
bull Espeacutecie Pfalciparum Pvivax Povale e Pmalariae
Plasmodium
bull Ciclo bioloacutegico Hospedeiro vertebrado e invertebrado
bull Hospedeiro invertebrado ndash Vetor
ndash Fecircmeas hematoacutefagas do gecircnero Anopheles
ndash Brasil Anopheles (N)darlingi A (N) aquasalis A (N) albitarsis A (K) cruzii e A (K) bellator
ndash Possuem haacutebito noturno penetrando nas casas no crespuacutesculo saindo ao amanhecer
Plasmodium
bull Hospedeiro vertebrado homem
bull Transmissatildeo
ndash Vetor
ndash Transfusatildeo de sangue
ndash Compartilhamento de seringas
ndash Acidente com agulhas
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
bull Ciclo preacute-eritrociacutetico
ndash Forma inoculada esporozoiacutetos
ndash A fecircmea do anofelino infectado inocula no homem as formas infectantes localizadas na saliva
ndash Os esporozoiacutetas permancem na circulaccedilatildeo por aproximadamente uma hora
ndash Invadem os hepatoacutecitos e se diferenciam em trofozoiacutetas (criptozoiacuteto)
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
ndash Esquizogonia e formaccedilatildeo de esquizontes
ndash Divisatildeo nuclear e liberaccedilatildeo de merozoiacutetos
ndash Aproximadamente 10000 merozoiacutetos por hepatoacutecito
ndash Rompimento do hepatoacutecito e liberaccedilatildeo de merozoiacutetos na circulaccedilatildeo
ndash Duraccedilatildeo do ciclo aprox 1 a 2 semanas
Ciclo evolutivo
bull PVivax e Povale
ndash Alguns esporozoiacutetos geneticamente diferentes ficam na forma latente nos hepatoacutecitos permanecendo muitos meses Satildeo classificados como hipnozoiacuteto
ndash Satildeo responsaacuteveis pelas recaiacutedas tardias e formas de malaacuteria com periacuteodo de encubaccedilatildeo longo ndash 6 a 9 meses
FASE HEPAacuteTICA OU EXOERITROCIacuteTICA
Hepatoacutecito
FIacuteGADO
Invasatildeo do hepatoacutecito
Reproduccedilatildeo Assexuada
Esporozoiacutetos Lise dos hepatoacutecitos
Liberaccedilatildeo dos protozoaacuterios na corrente sanguumliacutenea
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
bull Ciclo eritrociacutetico
ndash Os merozoiacutetos invadem as hemaacutecias
ndash Diferenciaccedilatildeo em trofozoiacutetos
ndash Esquizogonia esquizonte
ndash Produccedilatildeo de merozoiacutetos e rompimento da hemaacutecia
ndash Merozoiacutetos invasatildeo de novas hemaacutecias
ndash Apoacutes algumas geraccedilotildees os merozoiacutetos natildeo mais se dividem e se diferenciam em gametoacutecitos ndash micro e macrogametoacutecito
FASE ERITROCIacuteTICA
Hepatoacutecito destruiacutedo pelos protozoaacuterios
Penetraccedilatildeo dos protozoaacuterios
Reproduccedilatildeo assexuada
Protozoaacuterios destroem as hemaacutecias
Diferenciaccedilatildeo em gametoacutecitos
Fecircmeas de Anopheles sugam hemaacutecias com gametoacutecitos
Ciclo no hospedeiro invertebrado
Ocorre nas hemaacutecias ou Eritroacutecitos
nas hemaacutecias
Protozoaacuterio no interior da hemaacutecia
Hemaacutecia com gametoacutecito
T trofozoiacuteto Em esquizonte com merozoiacuteto
Fase eritrociacutetica
bull Ciclo sanguiacuteneo ndash Pfalciparum P vivax e Povale 48 horas
ndash Pmalariae 72 horas
ndash Fonte de nutriccedilatildeo do Plasmodium no ciclo sanguiacuteneo hemoglobina
ndash Produccedilatildeo do pigmento malaacuterico hemozoiacutena bull Granulaccedilotildees de Schuffner Plasmodium vivax
bull Granulaccedilotildees de Maurer P falciparum
bull Granulaccedilotildees de Ziemann P malariae
ndash Fagocitose pelas ceacutelulas de Kuppffer e macroacutefagos do baccedilo
Trofozoiacutetos Pfalciparum
Trofozoiacutetos Pfalciparum
Esquizonte ndash P falciparum
Raros no sangue perifeacuterico Possuem 2 a 24 merozoiacutetos
Ocupam 23 do gloacutebulo vermelho
Gametoacutecitos Pfalciparum
Ciclo evolutivo Pvivax
Esquizonte ndash P vivax
Satildeo grandes e ameboacuteides Cromatina organizada em duas ou mais massas
Possuem 2 a 24 merozoiacutetos com pontos de cromatina
Gametoacutecito ndash Pvivax
Macrogametoacutecitos satildeo redondos ou ovais e ocupam toda ceacutelula hospedeira O citoplasma eacute geralmente corado de azul mais escuro e conteacutem pigmento marrom Microgametoacutecitos satildeo geralmente do tamanho de um RBC natildeo infectados com citoplasma corados de azul paacutelido rosa ou cinza
Trofozoiacutetos - P malariae
Esquizontes ndash P malariae
Aproximadamente 6 a 12 merozoiacutetos com arranjo de rosetas
Gametoacutecitos ndash P malariae
Ciclo evolutivo ndash HI
bull Ingestatildeo de hemaacutecias contendo gametoacutecitos durante o repasto sanguiacuteneo da fecircmea do anofelino
bull No intestino meacutedio do vetor gametogecircnese ndash Macrogametoacutecito ndash macrogameta feminino ndash Microgametoacutecito o processo de exflagelaccedilatildeo daacute
origem a 8 microgametas masculinos ndash Produccedilatildeo de ovo ou zigoto ndash O ovo encista na camada epitelial do intestino meacutedio
oocisto ndash Esporogonia liberaccedilatildeo de esporozoiacutetos
Ciclo evolutivo ndash HInvertebrado
ndash Os esporozoiacutetos satildeo transportados pelo hemolinfa ateacute as glacircndulas salivares do vetor ateacute atingirem o ducto salivar
bull Inoculaccedilatildeo no hospedeiro vertebrado atraveacutes da picada do inseto
Hemaacutecia com gametoacutecito
Fecircmeas de Anopheles sugam hemaacutecias com gametoacutecitos
CICLO NO INVERTEBRADO
No tubo digestivo
Zigoto
Penetraccedilatildeo na parede do tubo
digestivo
Migraccedilatildeo para as glacircndulas salivares
Desenvolvimento
Mosquito infectado
Diagnoacutestico
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado e espesso corado pelo Giemsa
bull Sangue colhido sem anticoagulante para melhor fixaccedilatildeo em lacircmina
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo espesso eacute mais eficiente para detecccedilatildeo da infecccedilatildeo
bull Esfregaccedilo delgado eacute mais eficiente para diferenciaccedilatildeo morfoloacutegica das espeacutecies
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo semiquantitativo
ndash Exame de 100 campos microscoacutepicos com resultado expresso pelo sistema de cruzes
Parasitos contados Nuacutemero de campos
microscoacutepicos cruzes
40 a 60 100 +2
1 1 +
2-20 1 ++
21-200 1 +++
+ 200 1 ++++
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo quantitativo derivado de anaacutelise semiquantitativa
Contagem de parasitos por campo
Cruzes Parasitos por mm3
40 a 60100 +2 200-300
1 + 301-500
2-20 ++ 501 - 10000
21-200 +++ 10001 ndash 100000
+ 200 ++++ 100000 ou mais
Diagnoacutestico
bull P falciparum
ndash Parte do ciclo celular aderido ao endoteacutelio capilar Encontro somente de trofozoitos e gametoacutecitos no sangue perifeacuterico
ndash Raramente os esquizontes satildeo encontrados no sangue perifeacuterico
Diagnoacutestico ndash Pvivax ndash Encontro de todas as formas de desenvolvimento ndash
trofozoiacuteto jovem maduro esquizontes e gametoacutecitos
ndash Os trofozoiacutetos maduros tecircm geralmente um aspecto irregular com extensotildees ameboacuteides em seu citoplasma
Diagnoacutestico ndash Pvivax
ndash Os gametoacutecitos femininos coram-se mais intensamente que os masculinos e apresentam nuacutecleo mais compacto geralmente em localizaccedilatildeo perifeacuterica
ndash O pigmento malaacuterico geralmente eacute abundante
Diagnoacutestico - Pmalariae
bull Realizado por meio de caracteriacutesticas morfoloacutegicas do parasito
ndash Verificaccedilatildeo em esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado
ndash Posiccedilatildeo equatorial do parasito
ndash Desenvolvimento sem deformaccedilatildeo do eritroacutecito
Diagnoacutestico
bull QBC ndash Teacutecnica que combina concentraccedilatildeo dos parasitos
pela centrifugaccedilatildeo do sangue em em microhematoacutecrito e a coloraccedilatildeo dos aacutecidos nucleacuteicos do parasito pelo fluorcromo laranja de acridina
ndash Utilizaccedilatildeo de tubos especiais e microscopia epifluorescente
ndash Teste raacutepido
ndash Alta sensibilidade
Diagnoacutestico
bull ParaSight-F ( Becton amp Dickinson)
ndash Teste raacutepido para captura da proteiacutena rica em histidina 2 de Pfalciparum( PfHRP2) e enzimas conservadas de 4 espeacutecies de plasmoacutedio (DHL e aldolase
ndash Utilizaccedilatildeo de fita de nitrocelulose contendo ac monoclonal
ndash Lise de uma gota de sangue
ndash A reaccedilatildeo eacute revelada com adiccedilatildeo de ac policlonal anti-HRP2 conjugado com lipossomas contendo corante
Diagnoacutestico
bull PCR
ndash Sensibilidade e especificidade maior do que o esfregaccedilo sanguiacuteneo
Plasmodium
bull Ciclo bioloacutegico Hospedeiro vertebrado e invertebrado
bull Hospedeiro invertebrado ndash Vetor
ndash Fecircmeas hematoacutefagas do gecircnero Anopheles
ndash Brasil Anopheles (N)darlingi A (N) aquasalis A (N) albitarsis A (K) cruzii e A (K) bellator
ndash Possuem haacutebito noturno penetrando nas casas no crespuacutesculo saindo ao amanhecer
Plasmodium
bull Hospedeiro vertebrado homem
bull Transmissatildeo
ndash Vetor
ndash Transfusatildeo de sangue
ndash Compartilhamento de seringas
ndash Acidente com agulhas
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
bull Ciclo preacute-eritrociacutetico
ndash Forma inoculada esporozoiacutetos
ndash A fecircmea do anofelino infectado inocula no homem as formas infectantes localizadas na saliva
ndash Os esporozoiacutetas permancem na circulaccedilatildeo por aproximadamente uma hora
ndash Invadem os hepatoacutecitos e se diferenciam em trofozoiacutetas (criptozoiacuteto)
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
ndash Esquizogonia e formaccedilatildeo de esquizontes
ndash Divisatildeo nuclear e liberaccedilatildeo de merozoiacutetos
ndash Aproximadamente 10000 merozoiacutetos por hepatoacutecito
ndash Rompimento do hepatoacutecito e liberaccedilatildeo de merozoiacutetos na circulaccedilatildeo
ndash Duraccedilatildeo do ciclo aprox 1 a 2 semanas
Ciclo evolutivo
bull PVivax e Povale
ndash Alguns esporozoiacutetos geneticamente diferentes ficam na forma latente nos hepatoacutecitos permanecendo muitos meses Satildeo classificados como hipnozoiacuteto
ndash Satildeo responsaacuteveis pelas recaiacutedas tardias e formas de malaacuteria com periacuteodo de encubaccedilatildeo longo ndash 6 a 9 meses
FASE HEPAacuteTICA OU EXOERITROCIacuteTICA
Hepatoacutecito
FIacuteGADO
Invasatildeo do hepatoacutecito
Reproduccedilatildeo Assexuada
Esporozoiacutetos Lise dos hepatoacutecitos
Liberaccedilatildeo dos protozoaacuterios na corrente sanguumliacutenea
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
bull Ciclo eritrociacutetico
ndash Os merozoiacutetos invadem as hemaacutecias
ndash Diferenciaccedilatildeo em trofozoiacutetos
ndash Esquizogonia esquizonte
ndash Produccedilatildeo de merozoiacutetos e rompimento da hemaacutecia
ndash Merozoiacutetos invasatildeo de novas hemaacutecias
ndash Apoacutes algumas geraccedilotildees os merozoiacutetos natildeo mais se dividem e se diferenciam em gametoacutecitos ndash micro e macrogametoacutecito
FASE ERITROCIacuteTICA
Hepatoacutecito destruiacutedo pelos protozoaacuterios
Penetraccedilatildeo dos protozoaacuterios
Reproduccedilatildeo assexuada
Protozoaacuterios destroem as hemaacutecias
Diferenciaccedilatildeo em gametoacutecitos
Fecircmeas de Anopheles sugam hemaacutecias com gametoacutecitos
Ciclo no hospedeiro invertebrado
Ocorre nas hemaacutecias ou Eritroacutecitos
nas hemaacutecias
Protozoaacuterio no interior da hemaacutecia
Hemaacutecia com gametoacutecito
T trofozoiacuteto Em esquizonte com merozoiacuteto
Fase eritrociacutetica
bull Ciclo sanguiacuteneo ndash Pfalciparum P vivax e Povale 48 horas
ndash Pmalariae 72 horas
ndash Fonte de nutriccedilatildeo do Plasmodium no ciclo sanguiacuteneo hemoglobina
ndash Produccedilatildeo do pigmento malaacuterico hemozoiacutena bull Granulaccedilotildees de Schuffner Plasmodium vivax
bull Granulaccedilotildees de Maurer P falciparum
bull Granulaccedilotildees de Ziemann P malariae
ndash Fagocitose pelas ceacutelulas de Kuppffer e macroacutefagos do baccedilo
Trofozoiacutetos Pfalciparum
Trofozoiacutetos Pfalciparum
Esquizonte ndash P falciparum
Raros no sangue perifeacuterico Possuem 2 a 24 merozoiacutetos
Ocupam 23 do gloacutebulo vermelho
Gametoacutecitos Pfalciparum
Ciclo evolutivo Pvivax
Esquizonte ndash P vivax
Satildeo grandes e ameboacuteides Cromatina organizada em duas ou mais massas
Possuem 2 a 24 merozoiacutetos com pontos de cromatina
Gametoacutecito ndash Pvivax
Macrogametoacutecitos satildeo redondos ou ovais e ocupam toda ceacutelula hospedeira O citoplasma eacute geralmente corado de azul mais escuro e conteacutem pigmento marrom Microgametoacutecitos satildeo geralmente do tamanho de um RBC natildeo infectados com citoplasma corados de azul paacutelido rosa ou cinza
Trofozoiacutetos - P malariae
Esquizontes ndash P malariae
Aproximadamente 6 a 12 merozoiacutetos com arranjo de rosetas
Gametoacutecitos ndash P malariae
Ciclo evolutivo ndash HI
bull Ingestatildeo de hemaacutecias contendo gametoacutecitos durante o repasto sanguiacuteneo da fecircmea do anofelino
bull No intestino meacutedio do vetor gametogecircnese ndash Macrogametoacutecito ndash macrogameta feminino ndash Microgametoacutecito o processo de exflagelaccedilatildeo daacute
origem a 8 microgametas masculinos ndash Produccedilatildeo de ovo ou zigoto ndash O ovo encista na camada epitelial do intestino meacutedio
oocisto ndash Esporogonia liberaccedilatildeo de esporozoiacutetos
Ciclo evolutivo ndash HInvertebrado
ndash Os esporozoiacutetos satildeo transportados pelo hemolinfa ateacute as glacircndulas salivares do vetor ateacute atingirem o ducto salivar
bull Inoculaccedilatildeo no hospedeiro vertebrado atraveacutes da picada do inseto
Hemaacutecia com gametoacutecito
Fecircmeas de Anopheles sugam hemaacutecias com gametoacutecitos
CICLO NO INVERTEBRADO
No tubo digestivo
Zigoto
Penetraccedilatildeo na parede do tubo
digestivo
Migraccedilatildeo para as glacircndulas salivares
Desenvolvimento
Mosquito infectado
Diagnoacutestico
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado e espesso corado pelo Giemsa
bull Sangue colhido sem anticoagulante para melhor fixaccedilatildeo em lacircmina
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo espesso eacute mais eficiente para detecccedilatildeo da infecccedilatildeo
bull Esfregaccedilo delgado eacute mais eficiente para diferenciaccedilatildeo morfoloacutegica das espeacutecies
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo semiquantitativo
ndash Exame de 100 campos microscoacutepicos com resultado expresso pelo sistema de cruzes
Parasitos contados Nuacutemero de campos
microscoacutepicos cruzes
40 a 60 100 +2
1 1 +
2-20 1 ++
21-200 1 +++
+ 200 1 ++++
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo quantitativo derivado de anaacutelise semiquantitativa
Contagem de parasitos por campo
Cruzes Parasitos por mm3
40 a 60100 +2 200-300
1 + 301-500
2-20 ++ 501 - 10000
21-200 +++ 10001 ndash 100000
+ 200 ++++ 100000 ou mais
Diagnoacutestico
bull P falciparum
ndash Parte do ciclo celular aderido ao endoteacutelio capilar Encontro somente de trofozoitos e gametoacutecitos no sangue perifeacuterico
ndash Raramente os esquizontes satildeo encontrados no sangue perifeacuterico
Diagnoacutestico ndash Pvivax ndash Encontro de todas as formas de desenvolvimento ndash
trofozoiacuteto jovem maduro esquizontes e gametoacutecitos
ndash Os trofozoiacutetos maduros tecircm geralmente um aspecto irregular com extensotildees ameboacuteides em seu citoplasma
Diagnoacutestico ndash Pvivax
ndash Os gametoacutecitos femininos coram-se mais intensamente que os masculinos e apresentam nuacutecleo mais compacto geralmente em localizaccedilatildeo perifeacuterica
ndash O pigmento malaacuterico geralmente eacute abundante
Diagnoacutestico - Pmalariae
bull Realizado por meio de caracteriacutesticas morfoloacutegicas do parasito
ndash Verificaccedilatildeo em esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado
ndash Posiccedilatildeo equatorial do parasito
ndash Desenvolvimento sem deformaccedilatildeo do eritroacutecito
Diagnoacutestico
bull QBC ndash Teacutecnica que combina concentraccedilatildeo dos parasitos
pela centrifugaccedilatildeo do sangue em em microhematoacutecrito e a coloraccedilatildeo dos aacutecidos nucleacuteicos do parasito pelo fluorcromo laranja de acridina
ndash Utilizaccedilatildeo de tubos especiais e microscopia epifluorescente
ndash Teste raacutepido
ndash Alta sensibilidade
Diagnoacutestico
bull ParaSight-F ( Becton amp Dickinson)
ndash Teste raacutepido para captura da proteiacutena rica em histidina 2 de Pfalciparum( PfHRP2) e enzimas conservadas de 4 espeacutecies de plasmoacutedio (DHL e aldolase
ndash Utilizaccedilatildeo de fita de nitrocelulose contendo ac monoclonal
ndash Lise de uma gota de sangue
ndash A reaccedilatildeo eacute revelada com adiccedilatildeo de ac policlonal anti-HRP2 conjugado com lipossomas contendo corante
Diagnoacutestico
bull PCR
ndash Sensibilidade e especificidade maior do que o esfregaccedilo sanguiacuteneo
Plasmodium
bull Hospedeiro vertebrado homem
bull Transmissatildeo
ndash Vetor
ndash Transfusatildeo de sangue
ndash Compartilhamento de seringas
ndash Acidente com agulhas
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
bull Ciclo preacute-eritrociacutetico
ndash Forma inoculada esporozoiacutetos
ndash A fecircmea do anofelino infectado inocula no homem as formas infectantes localizadas na saliva
ndash Os esporozoiacutetas permancem na circulaccedilatildeo por aproximadamente uma hora
ndash Invadem os hepatoacutecitos e se diferenciam em trofozoiacutetas (criptozoiacuteto)
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
ndash Esquizogonia e formaccedilatildeo de esquizontes
ndash Divisatildeo nuclear e liberaccedilatildeo de merozoiacutetos
ndash Aproximadamente 10000 merozoiacutetos por hepatoacutecito
ndash Rompimento do hepatoacutecito e liberaccedilatildeo de merozoiacutetos na circulaccedilatildeo
ndash Duraccedilatildeo do ciclo aprox 1 a 2 semanas
Ciclo evolutivo
bull PVivax e Povale
ndash Alguns esporozoiacutetos geneticamente diferentes ficam na forma latente nos hepatoacutecitos permanecendo muitos meses Satildeo classificados como hipnozoiacuteto
ndash Satildeo responsaacuteveis pelas recaiacutedas tardias e formas de malaacuteria com periacuteodo de encubaccedilatildeo longo ndash 6 a 9 meses
FASE HEPAacuteTICA OU EXOERITROCIacuteTICA
Hepatoacutecito
FIacuteGADO
Invasatildeo do hepatoacutecito
Reproduccedilatildeo Assexuada
Esporozoiacutetos Lise dos hepatoacutecitos
Liberaccedilatildeo dos protozoaacuterios na corrente sanguumliacutenea
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
bull Ciclo eritrociacutetico
ndash Os merozoiacutetos invadem as hemaacutecias
ndash Diferenciaccedilatildeo em trofozoiacutetos
ndash Esquizogonia esquizonte
ndash Produccedilatildeo de merozoiacutetos e rompimento da hemaacutecia
ndash Merozoiacutetos invasatildeo de novas hemaacutecias
ndash Apoacutes algumas geraccedilotildees os merozoiacutetos natildeo mais se dividem e se diferenciam em gametoacutecitos ndash micro e macrogametoacutecito
FASE ERITROCIacuteTICA
Hepatoacutecito destruiacutedo pelos protozoaacuterios
Penetraccedilatildeo dos protozoaacuterios
Reproduccedilatildeo assexuada
Protozoaacuterios destroem as hemaacutecias
Diferenciaccedilatildeo em gametoacutecitos
Fecircmeas de Anopheles sugam hemaacutecias com gametoacutecitos
Ciclo no hospedeiro invertebrado
Ocorre nas hemaacutecias ou Eritroacutecitos
nas hemaacutecias
Protozoaacuterio no interior da hemaacutecia
Hemaacutecia com gametoacutecito
T trofozoiacuteto Em esquizonte com merozoiacuteto
Fase eritrociacutetica
bull Ciclo sanguiacuteneo ndash Pfalciparum P vivax e Povale 48 horas
ndash Pmalariae 72 horas
ndash Fonte de nutriccedilatildeo do Plasmodium no ciclo sanguiacuteneo hemoglobina
ndash Produccedilatildeo do pigmento malaacuterico hemozoiacutena bull Granulaccedilotildees de Schuffner Plasmodium vivax
bull Granulaccedilotildees de Maurer P falciparum
bull Granulaccedilotildees de Ziemann P malariae
ndash Fagocitose pelas ceacutelulas de Kuppffer e macroacutefagos do baccedilo
Trofozoiacutetos Pfalciparum
Trofozoiacutetos Pfalciparum
Esquizonte ndash P falciparum
Raros no sangue perifeacuterico Possuem 2 a 24 merozoiacutetos
Ocupam 23 do gloacutebulo vermelho
Gametoacutecitos Pfalciparum
Ciclo evolutivo Pvivax
Esquizonte ndash P vivax
Satildeo grandes e ameboacuteides Cromatina organizada em duas ou mais massas
Possuem 2 a 24 merozoiacutetos com pontos de cromatina
Gametoacutecito ndash Pvivax
Macrogametoacutecitos satildeo redondos ou ovais e ocupam toda ceacutelula hospedeira O citoplasma eacute geralmente corado de azul mais escuro e conteacutem pigmento marrom Microgametoacutecitos satildeo geralmente do tamanho de um RBC natildeo infectados com citoplasma corados de azul paacutelido rosa ou cinza
Trofozoiacutetos - P malariae
Esquizontes ndash P malariae
Aproximadamente 6 a 12 merozoiacutetos com arranjo de rosetas
Gametoacutecitos ndash P malariae
Ciclo evolutivo ndash HI
bull Ingestatildeo de hemaacutecias contendo gametoacutecitos durante o repasto sanguiacuteneo da fecircmea do anofelino
bull No intestino meacutedio do vetor gametogecircnese ndash Macrogametoacutecito ndash macrogameta feminino ndash Microgametoacutecito o processo de exflagelaccedilatildeo daacute
origem a 8 microgametas masculinos ndash Produccedilatildeo de ovo ou zigoto ndash O ovo encista na camada epitelial do intestino meacutedio
oocisto ndash Esporogonia liberaccedilatildeo de esporozoiacutetos
Ciclo evolutivo ndash HInvertebrado
ndash Os esporozoiacutetos satildeo transportados pelo hemolinfa ateacute as glacircndulas salivares do vetor ateacute atingirem o ducto salivar
bull Inoculaccedilatildeo no hospedeiro vertebrado atraveacutes da picada do inseto
Hemaacutecia com gametoacutecito
Fecircmeas de Anopheles sugam hemaacutecias com gametoacutecitos
CICLO NO INVERTEBRADO
No tubo digestivo
Zigoto
Penetraccedilatildeo na parede do tubo
digestivo
Migraccedilatildeo para as glacircndulas salivares
Desenvolvimento
Mosquito infectado
Diagnoacutestico
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado e espesso corado pelo Giemsa
bull Sangue colhido sem anticoagulante para melhor fixaccedilatildeo em lacircmina
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo espesso eacute mais eficiente para detecccedilatildeo da infecccedilatildeo
bull Esfregaccedilo delgado eacute mais eficiente para diferenciaccedilatildeo morfoloacutegica das espeacutecies
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo semiquantitativo
ndash Exame de 100 campos microscoacutepicos com resultado expresso pelo sistema de cruzes
Parasitos contados Nuacutemero de campos
microscoacutepicos cruzes
40 a 60 100 +2
1 1 +
2-20 1 ++
21-200 1 +++
+ 200 1 ++++
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo quantitativo derivado de anaacutelise semiquantitativa
Contagem de parasitos por campo
Cruzes Parasitos por mm3
40 a 60100 +2 200-300
1 + 301-500
2-20 ++ 501 - 10000
21-200 +++ 10001 ndash 100000
+ 200 ++++ 100000 ou mais
Diagnoacutestico
bull P falciparum
ndash Parte do ciclo celular aderido ao endoteacutelio capilar Encontro somente de trofozoitos e gametoacutecitos no sangue perifeacuterico
ndash Raramente os esquizontes satildeo encontrados no sangue perifeacuterico
Diagnoacutestico ndash Pvivax ndash Encontro de todas as formas de desenvolvimento ndash
trofozoiacuteto jovem maduro esquizontes e gametoacutecitos
ndash Os trofozoiacutetos maduros tecircm geralmente um aspecto irregular com extensotildees ameboacuteides em seu citoplasma
Diagnoacutestico ndash Pvivax
ndash Os gametoacutecitos femininos coram-se mais intensamente que os masculinos e apresentam nuacutecleo mais compacto geralmente em localizaccedilatildeo perifeacuterica
ndash O pigmento malaacuterico geralmente eacute abundante
Diagnoacutestico - Pmalariae
bull Realizado por meio de caracteriacutesticas morfoloacutegicas do parasito
ndash Verificaccedilatildeo em esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado
ndash Posiccedilatildeo equatorial do parasito
ndash Desenvolvimento sem deformaccedilatildeo do eritroacutecito
Diagnoacutestico
bull QBC ndash Teacutecnica que combina concentraccedilatildeo dos parasitos
pela centrifugaccedilatildeo do sangue em em microhematoacutecrito e a coloraccedilatildeo dos aacutecidos nucleacuteicos do parasito pelo fluorcromo laranja de acridina
ndash Utilizaccedilatildeo de tubos especiais e microscopia epifluorescente
ndash Teste raacutepido
ndash Alta sensibilidade
Diagnoacutestico
bull ParaSight-F ( Becton amp Dickinson)
ndash Teste raacutepido para captura da proteiacutena rica em histidina 2 de Pfalciparum( PfHRP2) e enzimas conservadas de 4 espeacutecies de plasmoacutedio (DHL e aldolase
ndash Utilizaccedilatildeo de fita de nitrocelulose contendo ac monoclonal
ndash Lise de uma gota de sangue
ndash A reaccedilatildeo eacute revelada com adiccedilatildeo de ac policlonal anti-HRP2 conjugado com lipossomas contendo corante
Diagnoacutestico
bull PCR
ndash Sensibilidade e especificidade maior do que o esfregaccedilo sanguiacuteneo
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
bull Ciclo preacute-eritrociacutetico
ndash Forma inoculada esporozoiacutetos
ndash A fecircmea do anofelino infectado inocula no homem as formas infectantes localizadas na saliva
ndash Os esporozoiacutetas permancem na circulaccedilatildeo por aproximadamente uma hora
ndash Invadem os hepatoacutecitos e se diferenciam em trofozoiacutetas (criptozoiacuteto)
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
ndash Esquizogonia e formaccedilatildeo de esquizontes
ndash Divisatildeo nuclear e liberaccedilatildeo de merozoiacutetos
ndash Aproximadamente 10000 merozoiacutetos por hepatoacutecito
ndash Rompimento do hepatoacutecito e liberaccedilatildeo de merozoiacutetos na circulaccedilatildeo
ndash Duraccedilatildeo do ciclo aprox 1 a 2 semanas
Ciclo evolutivo
bull PVivax e Povale
ndash Alguns esporozoiacutetos geneticamente diferentes ficam na forma latente nos hepatoacutecitos permanecendo muitos meses Satildeo classificados como hipnozoiacuteto
ndash Satildeo responsaacuteveis pelas recaiacutedas tardias e formas de malaacuteria com periacuteodo de encubaccedilatildeo longo ndash 6 a 9 meses
FASE HEPAacuteTICA OU EXOERITROCIacuteTICA
Hepatoacutecito
FIacuteGADO
Invasatildeo do hepatoacutecito
Reproduccedilatildeo Assexuada
Esporozoiacutetos Lise dos hepatoacutecitos
Liberaccedilatildeo dos protozoaacuterios na corrente sanguumliacutenea
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
bull Ciclo eritrociacutetico
ndash Os merozoiacutetos invadem as hemaacutecias
ndash Diferenciaccedilatildeo em trofozoiacutetos
ndash Esquizogonia esquizonte
ndash Produccedilatildeo de merozoiacutetos e rompimento da hemaacutecia
ndash Merozoiacutetos invasatildeo de novas hemaacutecias
ndash Apoacutes algumas geraccedilotildees os merozoiacutetos natildeo mais se dividem e se diferenciam em gametoacutecitos ndash micro e macrogametoacutecito
FASE ERITROCIacuteTICA
Hepatoacutecito destruiacutedo pelos protozoaacuterios
Penetraccedilatildeo dos protozoaacuterios
Reproduccedilatildeo assexuada
Protozoaacuterios destroem as hemaacutecias
Diferenciaccedilatildeo em gametoacutecitos
Fecircmeas de Anopheles sugam hemaacutecias com gametoacutecitos
Ciclo no hospedeiro invertebrado
Ocorre nas hemaacutecias ou Eritroacutecitos
nas hemaacutecias
Protozoaacuterio no interior da hemaacutecia
Hemaacutecia com gametoacutecito
T trofozoiacuteto Em esquizonte com merozoiacuteto
Fase eritrociacutetica
bull Ciclo sanguiacuteneo ndash Pfalciparum P vivax e Povale 48 horas
ndash Pmalariae 72 horas
ndash Fonte de nutriccedilatildeo do Plasmodium no ciclo sanguiacuteneo hemoglobina
ndash Produccedilatildeo do pigmento malaacuterico hemozoiacutena bull Granulaccedilotildees de Schuffner Plasmodium vivax
bull Granulaccedilotildees de Maurer P falciparum
bull Granulaccedilotildees de Ziemann P malariae
ndash Fagocitose pelas ceacutelulas de Kuppffer e macroacutefagos do baccedilo
Trofozoiacutetos Pfalciparum
Trofozoiacutetos Pfalciparum
Esquizonte ndash P falciparum
Raros no sangue perifeacuterico Possuem 2 a 24 merozoiacutetos
Ocupam 23 do gloacutebulo vermelho
Gametoacutecitos Pfalciparum
Ciclo evolutivo Pvivax
Esquizonte ndash P vivax
Satildeo grandes e ameboacuteides Cromatina organizada em duas ou mais massas
Possuem 2 a 24 merozoiacutetos com pontos de cromatina
Gametoacutecito ndash Pvivax
Macrogametoacutecitos satildeo redondos ou ovais e ocupam toda ceacutelula hospedeira O citoplasma eacute geralmente corado de azul mais escuro e conteacutem pigmento marrom Microgametoacutecitos satildeo geralmente do tamanho de um RBC natildeo infectados com citoplasma corados de azul paacutelido rosa ou cinza
Trofozoiacutetos - P malariae
Esquizontes ndash P malariae
Aproximadamente 6 a 12 merozoiacutetos com arranjo de rosetas
Gametoacutecitos ndash P malariae
Ciclo evolutivo ndash HI
bull Ingestatildeo de hemaacutecias contendo gametoacutecitos durante o repasto sanguiacuteneo da fecircmea do anofelino
bull No intestino meacutedio do vetor gametogecircnese ndash Macrogametoacutecito ndash macrogameta feminino ndash Microgametoacutecito o processo de exflagelaccedilatildeo daacute
origem a 8 microgametas masculinos ndash Produccedilatildeo de ovo ou zigoto ndash O ovo encista na camada epitelial do intestino meacutedio
oocisto ndash Esporogonia liberaccedilatildeo de esporozoiacutetos
Ciclo evolutivo ndash HInvertebrado
ndash Os esporozoiacutetos satildeo transportados pelo hemolinfa ateacute as glacircndulas salivares do vetor ateacute atingirem o ducto salivar
bull Inoculaccedilatildeo no hospedeiro vertebrado atraveacutes da picada do inseto
Hemaacutecia com gametoacutecito
Fecircmeas de Anopheles sugam hemaacutecias com gametoacutecitos
CICLO NO INVERTEBRADO
No tubo digestivo
Zigoto
Penetraccedilatildeo na parede do tubo
digestivo
Migraccedilatildeo para as glacircndulas salivares
Desenvolvimento
Mosquito infectado
Diagnoacutestico
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado e espesso corado pelo Giemsa
bull Sangue colhido sem anticoagulante para melhor fixaccedilatildeo em lacircmina
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo espesso eacute mais eficiente para detecccedilatildeo da infecccedilatildeo
bull Esfregaccedilo delgado eacute mais eficiente para diferenciaccedilatildeo morfoloacutegica das espeacutecies
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo semiquantitativo
ndash Exame de 100 campos microscoacutepicos com resultado expresso pelo sistema de cruzes
Parasitos contados Nuacutemero de campos
microscoacutepicos cruzes
40 a 60 100 +2
1 1 +
2-20 1 ++
21-200 1 +++
+ 200 1 ++++
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo quantitativo derivado de anaacutelise semiquantitativa
Contagem de parasitos por campo
Cruzes Parasitos por mm3
40 a 60100 +2 200-300
1 + 301-500
2-20 ++ 501 - 10000
21-200 +++ 10001 ndash 100000
+ 200 ++++ 100000 ou mais
Diagnoacutestico
bull P falciparum
ndash Parte do ciclo celular aderido ao endoteacutelio capilar Encontro somente de trofozoitos e gametoacutecitos no sangue perifeacuterico
ndash Raramente os esquizontes satildeo encontrados no sangue perifeacuterico
Diagnoacutestico ndash Pvivax ndash Encontro de todas as formas de desenvolvimento ndash
trofozoiacuteto jovem maduro esquizontes e gametoacutecitos
ndash Os trofozoiacutetos maduros tecircm geralmente um aspecto irregular com extensotildees ameboacuteides em seu citoplasma
Diagnoacutestico ndash Pvivax
ndash Os gametoacutecitos femininos coram-se mais intensamente que os masculinos e apresentam nuacutecleo mais compacto geralmente em localizaccedilatildeo perifeacuterica
ndash O pigmento malaacuterico geralmente eacute abundante
Diagnoacutestico - Pmalariae
bull Realizado por meio de caracteriacutesticas morfoloacutegicas do parasito
ndash Verificaccedilatildeo em esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado
ndash Posiccedilatildeo equatorial do parasito
ndash Desenvolvimento sem deformaccedilatildeo do eritroacutecito
Diagnoacutestico
bull QBC ndash Teacutecnica que combina concentraccedilatildeo dos parasitos
pela centrifugaccedilatildeo do sangue em em microhematoacutecrito e a coloraccedilatildeo dos aacutecidos nucleacuteicos do parasito pelo fluorcromo laranja de acridina
ndash Utilizaccedilatildeo de tubos especiais e microscopia epifluorescente
ndash Teste raacutepido
ndash Alta sensibilidade
Diagnoacutestico
bull ParaSight-F ( Becton amp Dickinson)
ndash Teste raacutepido para captura da proteiacutena rica em histidina 2 de Pfalciparum( PfHRP2) e enzimas conservadas de 4 espeacutecies de plasmoacutedio (DHL e aldolase
ndash Utilizaccedilatildeo de fita de nitrocelulose contendo ac monoclonal
ndash Lise de uma gota de sangue
ndash A reaccedilatildeo eacute revelada com adiccedilatildeo de ac policlonal anti-HRP2 conjugado com lipossomas contendo corante
Diagnoacutestico
bull PCR
ndash Sensibilidade e especificidade maior do que o esfregaccedilo sanguiacuteneo
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
ndash Esquizogonia e formaccedilatildeo de esquizontes
ndash Divisatildeo nuclear e liberaccedilatildeo de merozoiacutetos
ndash Aproximadamente 10000 merozoiacutetos por hepatoacutecito
ndash Rompimento do hepatoacutecito e liberaccedilatildeo de merozoiacutetos na circulaccedilatildeo
ndash Duraccedilatildeo do ciclo aprox 1 a 2 semanas
Ciclo evolutivo
bull PVivax e Povale
ndash Alguns esporozoiacutetos geneticamente diferentes ficam na forma latente nos hepatoacutecitos permanecendo muitos meses Satildeo classificados como hipnozoiacuteto
ndash Satildeo responsaacuteveis pelas recaiacutedas tardias e formas de malaacuteria com periacuteodo de encubaccedilatildeo longo ndash 6 a 9 meses
FASE HEPAacuteTICA OU EXOERITROCIacuteTICA
Hepatoacutecito
FIacuteGADO
Invasatildeo do hepatoacutecito
Reproduccedilatildeo Assexuada
Esporozoiacutetos Lise dos hepatoacutecitos
Liberaccedilatildeo dos protozoaacuterios na corrente sanguumliacutenea
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
bull Ciclo eritrociacutetico
ndash Os merozoiacutetos invadem as hemaacutecias
ndash Diferenciaccedilatildeo em trofozoiacutetos
ndash Esquizogonia esquizonte
ndash Produccedilatildeo de merozoiacutetos e rompimento da hemaacutecia
ndash Merozoiacutetos invasatildeo de novas hemaacutecias
ndash Apoacutes algumas geraccedilotildees os merozoiacutetos natildeo mais se dividem e se diferenciam em gametoacutecitos ndash micro e macrogametoacutecito
FASE ERITROCIacuteTICA
Hepatoacutecito destruiacutedo pelos protozoaacuterios
Penetraccedilatildeo dos protozoaacuterios
Reproduccedilatildeo assexuada
Protozoaacuterios destroem as hemaacutecias
Diferenciaccedilatildeo em gametoacutecitos
Fecircmeas de Anopheles sugam hemaacutecias com gametoacutecitos
Ciclo no hospedeiro invertebrado
Ocorre nas hemaacutecias ou Eritroacutecitos
nas hemaacutecias
Protozoaacuterio no interior da hemaacutecia
Hemaacutecia com gametoacutecito
T trofozoiacuteto Em esquizonte com merozoiacuteto
Fase eritrociacutetica
bull Ciclo sanguiacuteneo ndash Pfalciparum P vivax e Povale 48 horas
ndash Pmalariae 72 horas
ndash Fonte de nutriccedilatildeo do Plasmodium no ciclo sanguiacuteneo hemoglobina
ndash Produccedilatildeo do pigmento malaacuterico hemozoiacutena bull Granulaccedilotildees de Schuffner Plasmodium vivax
bull Granulaccedilotildees de Maurer P falciparum
bull Granulaccedilotildees de Ziemann P malariae
ndash Fagocitose pelas ceacutelulas de Kuppffer e macroacutefagos do baccedilo
Trofozoiacutetos Pfalciparum
Trofozoiacutetos Pfalciparum
Esquizonte ndash P falciparum
Raros no sangue perifeacuterico Possuem 2 a 24 merozoiacutetos
Ocupam 23 do gloacutebulo vermelho
Gametoacutecitos Pfalciparum
Ciclo evolutivo Pvivax
Esquizonte ndash P vivax
Satildeo grandes e ameboacuteides Cromatina organizada em duas ou mais massas
Possuem 2 a 24 merozoiacutetos com pontos de cromatina
Gametoacutecito ndash Pvivax
Macrogametoacutecitos satildeo redondos ou ovais e ocupam toda ceacutelula hospedeira O citoplasma eacute geralmente corado de azul mais escuro e conteacutem pigmento marrom Microgametoacutecitos satildeo geralmente do tamanho de um RBC natildeo infectados com citoplasma corados de azul paacutelido rosa ou cinza
Trofozoiacutetos - P malariae
Esquizontes ndash P malariae
Aproximadamente 6 a 12 merozoiacutetos com arranjo de rosetas
Gametoacutecitos ndash P malariae
Ciclo evolutivo ndash HI
bull Ingestatildeo de hemaacutecias contendo gametoacutecitos durante o repasto sanguiacuteneo da fecircmea do anofelino
bull No intestino meacutedio do vetor gametogecircnese ndash Macrogametoacutecito ndash macrogameta feminino ndash Microgametoacutecito o processo de exflagelaccedilatildeo daacute
origem a 8 microgametas masculinos ndash Produccedilatildeo de ovo ou zigoto ndash O ovo encista na camada epitelial do intestino meacutedio
oocisto ndash Esporogonia liberaccedilatildeo de esporozoiacutetos
Ciclo evolutivo ndash HInvertebrado
ndash Os esporozoiacutetos satildeo transportados pelo hemolinfa ateacute as glacircndulas salivares do vetor ateacute atingirem o ducto salivar
bull Inoculaccedilatildeo no hospedeiro vertebrado atraveacutes da picada do inseto
Hemaacutecia com gametoacutecito
Fecircmeas de Anopheles sugam hemaacutecias com gametoacutecitos
CICLO NO INVERTEBRADO
No tubo digestivo
Zigoto
Penetraccedilatildeo na parede do tubo
digestivo
Migraccedilatildeo para as glacircndulas salivares
Desenvolvimento
Mosquito infectado
Diagnoacutestico
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado e espesso corado pelo Giemsa
bull Sangue colhido sem anticoagulante para melhor fixaccedilatildeo em lacircmina
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo espesso eacute mais eficiente para detecccedilatildeo da infecccedilatildeo
bull Esfregaccedilo delgado eacute mais eficiente para diferenciaccedilatildeo morfoloacutegica das espeacutecies
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo semiquantitativo
ndash Exame de 100 campos microscoacutepicos com resultado expresso pelo sistema de cruzes
Parasitos contados Nuacutemero de campos
microscoacutepicos cruzes
40 a 60 100 +2
1 1 +
2-20 1 ++
21-200 1 +++
+ 200 1 ++++
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo quantitativo derivado de anaacutelise semiquantitativa
Contagem de parasitos por campo
Cruzes Parasitos por mm3
40 a 60100 +2 200-300
1 + 301-500
2-20 ++ 501 - 10000
21-200 +++ 10001 ndash 100000
+ 200 ++++ 100000 ou mais
Diagnoacutestico
bull P falciparum
ndash Parte do ciclo celular aderido ao endoteacutelio capilar Encontro somente de trofozoitos e gametoacutecitos no sangue perifeacuterico
ndash Raramente os esquizontes satildeo encontrados no sangue perifeacuterico
Diagnoacutestico ndash Pvivax ndash Encontro de todas as formas de desenvolvimento ndash
trofozoiacuteto jovem maduro esquizontes e gametoacutecitos
ndash Os trofozoiacutetos maduros tecircm geralmente um aspecto irregular com extensotildees ameboacuteides em seu citoplasma
Diagnoacutestico ndash Pvivax
ndash Os gametoacutecitos femininos coram-se mais intensamente que os masculinos e apresentam nuacutecleo mais compacto geralmente em localizaccedilatildeo perifeacuterica
ndash O pigmento malaacuterico geralmente eacute abundante
Diagnoacutestico - Pmalariae
bull Realizado por meio de caracteriacutesticas morfoloacutegicas do parasito
ndash Verificaccedilatildeo em esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado
ndash Posiccedilatildeo equatorial do parasito
ndash Desenvolvimento sem deformaccedilatildeo do eritroacutecito
Diagnoacutestico
bull QBC ndash Teacutecnica que combina concentraccedilatildeo dos parasitos
pela centrifugaccedilatildeo do sangue em em microhematoacutecrito e a coloraccedilatildeo dos aacutecidos nucleacuteicos do parasito pelo fluorcromo laranja de acridina
ndash Utilizaccedilatildeo de tubos especiais e microscopia epifluorescente
ndash Teste raacutepido
ndash Alta sensibilidade
Diagnoacutestico
bull ParaSight-F ( Becton amp Dickinson)
ndash Teste raacutepido para captura da proteiacutena rica em histidina 2 de Pfalciparum( PfHRP2) e enzimas conservadas de 4 espeacutecies de plasmoacutedio (DHL e aldolase
ndash Utilizaccedilatildeo de fita de nitrocelulose contendo ac monoclonal
ndash Lise de uma gota de sangue
ndash A reaccedilatildeo eacute revelada com adiccedilatildeo de ac policlonal anti-HRP2 conjugado com lipossomas contendo corante
Diagnoacutestico
bull PCR
ndash Sensibilidade e especificidade maior do que o esfregaccedilo sanguiacuteneo
Ciclo evolutivo
bull PVivax e Povale
ndash Alguns esporozoiacutetos geneticamente diferentes ficam na forma latente nos hepatoacutecitos permanecendo muitos meses Satildeo classificados como hipnozoiacuteto
ndash Satildeo responsaacuteveis pelas recaiacutedas tardias e formas de malaacuteria com periacuteodo de encubaccedilatildeo longo ndash 6 a 9 meses
FASE HEPAacuteTICA OU EXOERITROCIacuteTICA
Hepatoacutecito
FIacuteGADO
Invasatildeo do hepatoacutecito
Reproduccedilatildeo Assexuada
Esporozoiacutetos Lise dos hepatoacutecitos
Liberaccedilatildeo dos protozoaacuterios na corrente sanguumliacutenea
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
bull Ciclo eritrociacutetico
ndash Os merozoiacutetos invadem as hemaacutecias
ndash Diferenciaccedilatildeo em trofozoiacutetos
ndash Esquizogonia esquizonte
ndash Produccedilatildeo de merozoiacutetos e rompimento da hemaacutecia
ndash Merozoiacutetos invasatildeo de novas hemaacutecias
ndash Apoacutes algumas geraccedilotildees os merozoiacutetos natildeo mais se dividem e se diferenciam em gametoacutecitos ndash micro e macrogametoacutecito
FASE ERITROCIacuteTICA
Hepatoacutecito destruiacutedo pelos protozoaacuterios
Penetraccedilatildeo dos protozoaacuterios
Reproduccedilatildeo assexuada
Protozoaacuterios destroem as hemaacutecias
Diferenciaccedilatildeo em gametoacutecitos
Fecircmeas de Anopheles sugam hemaacutecias com gametoacutecitos
Ciclo no hospedeiro invertebrado
Ocorre nas hemaacutecias ou Eritroacutecitos
nas hemaacutecias
Protozoaacuterio no interior da hemaacutecia
Hemaacutecia com gametoacutecito
T trofozoiacuteto Em esquizonte com merozoiacuteto
Fase eritrociacutetica
bull Ciclo sanguiacuteneo ndash Pfalciparum P vivax e Povale 48 horas
ndash Pmalariae 72 horas
ndash Fonte de nutriccedilatildeo do Plasmodium no ciclo sanguiacuteneo hemoglobina
ndash Produccedilatildeo do pigmento malaacuterico hemozoiacutena bull Granulaccedilotildees de Schuffner Plasmodium vivax
bull Granulaccedilotildees de Maurer P falciparum
bull Granulaccedilotildees de Ziemann P malariae
ndash Fagocitose pelas ceacutelulas de Kuppffer e macroacutefagos do baccedilo
Trofozoiacutetos Pfalciparum
Trofozoiacutetos Pfalciparum
Esquizonte ndash P falciparum
Raros no sangue perifeacuterico Possuem 2 a 24 merozoiacutetos
Ocupam 23 do gloacutebulo vermelho
Gametoacutecitos Pfalciparum
Ciclo evolutivo Pvivax
Esquizonte ndash P vivax
Satildeo grandes e ameboacuteides Cromatina organizada em duas ou mais massas
Possuem 2 a 24 merozoiacutetos com pontos de cromatina
Gametoacutecito ndash Pvivax
Macrogametoacutecitos satildeo redondos ou ovais e ocupam toda ceacutelula hospedeira O citoplasma eacute geralmente corado de azul mais escuro e conteacutem pigmento marrom Microgametoacutecitos satildeo geralmente do tamanho de um RBC natildeo infectados com citoplasma corados de azul paacutelido rosa ou cinza
Trofozoiacutetos - P malariae
Esquizontes ndash P malariae
Aproximadamente 6 a 12 merozoiacutetos com arranjo de rosetas
Gametoacutecitos ndash P malariae
Ciclo evolutivo ndash HI
bull Ingestatildeo de hemaacutecias contendo gametoacutecitos durante o repasto sanguiacuteneo da fecircmea do anofelino
bull No intestino meacutedio do vetor gametogecircnese ndash Macrogametoacutecito ndash macrogameta feminino ndash Microgametoacutecito o processo de exflagelaccedilatildeo daacute
origem a 8 microgametas masculinos ndash Produccedilatildeo de ovo ou zigoto ndash O ovo encista na camada epitelial do intestino meacutedio
oocisto ndash Esporogonia liberaccedilatildeo de esporozoiacutetos
Ciclo evolutivo ndash HInvertebrado
ndash Os esporozoiacutetos satildeo transportados pelo hemolinfa ateacute as glacircndulas salivares do vetor ateacute atingirem o ducto salivar
bull Inoculaccedilatildeo no hospedeiro vertebrado atraveacutes da picada do inseto
Hemaacutecia com gametoacutecito
Fecircmeas de Anopheles sugam hemaacutecias com gametoacutecitos
CICLO NO INVERTEBRADO
No tubo digestivo
Zigoto
Penetraccedilatildeo na parede do tubo
digestivo
Migraccedilatildeo para as glacircndulas salivares
Desenvolvimento
Mosquito infectado
Diagnoacutestico
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado e espesso corado pelo Giemsa
bull Sangue colhido sem anticoagulante para melhor fixaccedilatildeo em lacircmina
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo espesso eacute mais eficiente para detecccedilatildeo da infecccedilatildeo
bull Esfregaccedilo delgado eacute mais eficiente para diferenciaccedilatildeo morfoloacutegica das espeacutecies
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo semiquantitativo
ndash Exame de 100 campos microscoacutepicos com resultado expresso pelo sistema de cruzes
Parasitos contados Nuacutemero de campos
microscoacutepicos cruzes
40 a 60 100 +2
1 1 +
2-20 1 ++
21-200 1 +++
+ 200 1 ++++
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo quantitativo derivado de anaacutelise semiquantitativa
Contagem de parasitos por campo
Cruzes Parasitos por mm3
40 a 60100 +2 200-300
1 + 301-500
2-20 ++ 501 - 10000
21-200 +++ 10001 ndash 100000
+ 200 ++++ 100000 ou mais
Diagnoacutestico
bull P falciparum
ndash Parte do ciclo celular aderido ao endoteacutelio capilar Encontro somente de trofozoitos e gametoacutecitos no sangue perifeacuterico
ndash Raramente os esquizontes satildeo encontrados no sangue perifeacuterico
Diagnoacutestico ndash Pvivax ndash Encontro de todas as formas de desenvolvimento ndash
trofozoiacuteto jovem maduro esquizontes e gametoacutecitos
ndash Os trofozoiacutetos maduros tecircm geralmente um aspecto irregular com extensotildees ameboacuteides em seu citoplasma
Diagnoacutestico ndash Pvivax
ndash Os gametoacutecitos femininos coram-se mais intensamente que os masculinos e apresentam nuacutecleo mais compacto geralmente em localizaccedilatildeo perifeacuterica
ndash O pigmento malaacuterico geralmente eacute abundante
Diagnoacutestico - Pmalariae
bull Realizado por meio de caracteriacutesticas morfoloacutegicas do parasito
ndash Verificaccedilatildeo em esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado
ndash Posiccedilatildeo equatorial do parasito
ndash Desenvolvimento sem deformaccedilatildeo do eritroacutecito
Diagnoacutestico
bull QBC ndash Teacutecnica que combina concentraccedilatildeo dos parasitos
pela centrifugaccedilatildeo do sangue em em microhematoacutecrito e a coloraccedilatildeo dos aacutecidos nucleacuteicos do parasito pelo fluorcromo laranja de acridina
ndash Utilizaccedilatildeo de tubos especiais e microscopia epifluorescente
ndash Teste raacutepido
ndash Alta sensibilidade
Diagnoacutestico
bull ParaSight-F ( Becton amp Dickinson)
ndash Teste raacutepido para captura da proteiacutena rica em histidina 2 de Pfalciparum( PfHRP2) e enzimas conservadas de 4 espeacutecies de plasmoacutedio (DHL e aldolase
ndash Utilizaccedilatildeo de fita de nitrocelulose contendo ac monoclonal
ndash Lise de uma gota de sangue
ndash A reaccedilatildeo eacute revelada com adiccedilatildeo de ac policlonal anti-HRP2 conjugado com lipossomas contendo corante
Diagnoacutestico
bull PCR
ndash Sensibilidade e especificidade maior do que o esfregaccedilo sanguiacuteneo
FASE HEPAacuteTICA OU EXOERITROCIacuteTICA
Hepatoacutecito
FIacuteGADO
Invasatildeo do hepatoacutecito
Reproduccedilatildeo Assexuada
Esporozoiacutetos Lise dos hepatoacutecitos
Liberaccedilatildeo dos protozoaacuterios na corrente sanguumliacutenea
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
bull Ciclo eritrociacutetico
ndash Os merozoiacutetos invadem as hemaacutecias
ndash Diferenciaccedilatildeo em trofozoiacutetos
ndash Esquizogonia esquizonte
ndash Produccedilatildeo de merozoiacutetos e rompimento da hemaacutecia
ndash Merozoiacutetos invasatildeo de novas hemaacutecias
ndash Apoacutes algumas geraccedilotildees os merozoiacutetos natildeo mais se dividem e se diferenciam em gametoacutecitos ndash micro e macrogametoacutecito
FASE ERITROCIacuteTICA
Hepatoacutecito destruiacutedo pelos protozoaacuterios
Penetraccedilatildeo dos protozoaacuterios
Reproduccedilatildeo assexuada
Protozoaacuterios destroem as hemaacutecias
Diferenciaccedilatildeo em gametoacutecitos
Fecircmeas de Anopheles sugam hemaacutecias com gametoacutecitos
Ciclo no hospedeiro invertebrado
Ocorre nas hemaacutecias ou Eritroacutecitos
nas hemaacutecias
Protozoaacuterio no interior da hemaacutecia
Hemaacutecia com gametoacutecito
T trofozoiacuteto Em esquizonte com merozoiacuteto
Fase eritrociacutetica
bull Ciclo sanguiacuteneo ndash Pfalciparum P vivax e Povale 48 horas
ndash Pmalariae 72 horas
ndash Fonte de nutriccedilatildeo do Plasmodium no ciclo sanguiacuteneo hemoglobina
ndash Produccedilatildeo do pigmento malaacuterico hemozoiacutena bull Granulaccedilotildees de Schuffner Plasmodium vivax
bull Granulaccedilotildees de Maurer P falciparum
bull Granulaccedilotildees de Ziemann P malariae
ndash Fagocitose pelas ceacutelulas de Kuppffer e macroacutefagos do baccedilo
Trofozoiacutetos Pfalciparum
Trofozoiacutetos Pfalciparum
Esquizonte ndash P falciparum
Raros no sangue perifeacuterico Possuem 2 a 24 merozoiacutetos
Ocupam 23 do gloacutebulo vermelho
Gametoacutecitos Pfalciparum
Ciclo evolutivo Pvivax
Esquizonte ndash P vivax
Satildeo grandes e ameboacuteides Cromatina organizada em duas ou mais massas
Possuem 2 a 24 merozoiacutetos com pontos de cromatina
Gametoacutecito ndash Pvivax
Macrogametoacutecitos satildeo redondos ou ovais e ocupam toda ceacutelula hospedeira O citoplasma eacute geralmente corado de azul mais escuro e conteacutem pigmento marrom Microgametoacutecitos satildeo geralmente do tamanho de um RBC natildeo infectados com citoplasma corados de azul paacutelido rosa ou cinza
Trofozoiacutetos - P malariae
Esquizontes ndash P malariae
Aproximadamente 6 a 12 merozoiacutetos com arranjo de rosetas
Gametoacutecitos ndash P malariae
Ciclo evolutivo ndash HI
bull Ingestatildeo de hemaacutecias contendo gametoacutecitos durante o repasto sanguiacuteneo da fecircmea do anofelino
bull No intestino meacutedio do vetor gametogecircnese ndash Macrogametoacutecito ndash macrogameta feminino ndash Microgametoacutecito o processo de exflagelaccedilatildeo daacute
origem a 8 microgametas masculinos ndash Produccedilatildeo de ovo ou zigoto ndash O ovo encista na camada epitelial do intestino meacutedio
oocisto ndash Esporogonia liberaccedilatildeo de esporozoiacutetos
Ciclo evolutivo ndash HInvertebrado
ndash Os esporozoiacutetos satildeo transportados pelo hemolinfa ateacute as glacircndulas salivares do vetor ateacute atingirem o ducto salivar
bull Inoculaccedilatildeo no hospedeiro vertebrado atraveacutes da picada do inseto
Hemaacutecia com gametoacutecito
Fecircmeas de Anopheles sugam hemaacutecias com gametoacutecitos
CICLO NO INVERTEBRADO
No tubo digestivo
Zigoto
Penetraccedilatildeo na parede do tubo
digestivo
Migraccedilatildeo para as glacircndulas salivares
Desenvolvimento
Mosquito infectado
Diagnoacutestico
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado e espesso corado pelo Giemsa
bull Sangue colhido sem anticoagulante para melhor fixaccedilatildeo em lacircmina
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo espesso eacute mais eficiente para detecccedilatildeo da infecccedilatildeo
bull Esfregaccedilo delgado eacute mais eficiente para diferenciaccedilatildeo morfoloacutegica das espeacutecies
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo semiquantitativo
ndash Exame de 100 campos microscoacutepicos com resultado expresso pelo sistema de cruzes
Parasitos contados Nuacutemero de campos
microscoacutepicos cruzes
40 a 60 100 +2
1 1 +
2-20 1 ++
21-200 1 +++
+ 200 1 ++++
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo quantitativo derivado de anaacutelise semiquantitativa
Contagem de parasitos por campo
Cruzes Parasitos por mm3
40 a 60100 +2 200-300
1 + 301-500
2-20 ++ 501 - 10000
21-200 +++ 10001 ndash 100000
+ 200 ++++ 100000 ou mais
Diagnoacutestico
bull P falciparum
ndash Parte do ciclo celular aderido ao endoteacutelio capilar Encontro somente de trofozoitos e gametoacutecitos no sangue perifeacuterico
ndash Raramente os esquizontes satildeo encontrados no sangue perifeacuterico
Diagnoacutestico ndash Pvivax ndash Encontro de todas as formas de desenvolvimento ndash
trofozoiacuteto jovem maduro esquizontes e gametoacutecitos
ndash Os trofozoiacutetos maduros tecircm geralmente um aspecto irregular com extensotildees ameboacuteides em seu citoplasma
Diagnoacutestico ndash Pvivax
ndash Os gametoacutecitos femininos coram-se mais intensamente que os masculinos e apresentam nuacutecleo mais compacto geralmente em localizaccedilatildeo perifeacuterica
ndash O pigmento malaacuterico geralmente eacute abundante
Diagnoacutestico - Pmalariae
bull Realizado por meio de caracteriacutesticas morfoloacutegicas do parasito
ndash Verificaccedilatildeo em esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado
ndash Posiccedilatildeo equatorial do parasito
ndash Desenvolvimento sem deformaccedilatildeo do eritroacutecito
Diagnoacutestico
bull QBC ndash Teacutecnica que combina concentraccedilatildeo dos parasitos
pela centrifugaccedilatildeo do sangue em em microhematoacutecrito e a coloraccedilatildeo dos aacutecidos nucleacuteicos do parasito pelo fluorcromo laranja de acridina
ndash Utilizaccedilatildeo de tubos especiais e microscopia epifluorescente
ndash Teste raacutepido
ndash Alta sensibilidade
Diagnoacutestico
bull ParaSight-F ( Becton amp Dickinson)
ndash Teste raacutepido para captura da proteiacutena rica em histidina 2 de Pfalciparum( PfHRP2) e enzimas conservadas de 4 espeacutecies de plasmoacutedio (DHL e aldolase
ndash Utilizaccedilatildeo de fita de nitrocelulose contendo ac monoclonal
ndash Lise de uma gota de sangue
ndash A reaccedilatildeo eacute revelada com adiccedilatildeo de ac policlonal anti-HRP2 conjugado com lipossomas contendo corante
Diagnoacutestico
bull PCR
ndash Sensibilidade e especificidade maior do que o esfregaccedilo sanguiacuteneo
Ciclo evolutivo ndash Hospedeiro Vertebrado
bull Ciclo eritrociacutetico
ndash Os merozoiacutetos invadem as hemaacutecias
ndash Diferenciaccedilatildeo em trofozoiacutetos
ndash Esquizogonia esquizonte
ndash Produccedilatildeo de merozoiacutetos e rompimento da hemaacutecia
ndash Merozoiacutetos invasatildeo de novas hemaacutecias
ndash Apoacutes algumas geraccedilotildees os merozoiacutetos natildeo mais se dividem e se diferenciam em gametoacutecitos ndash micro e macrogametoacutecito
FASE ERITROCIacuteTICA
Hepatoacutecito destruiacutedo pelos protozoaacuterios
Penetraccedilatildeo dos protozoaacuterios
Reproduccedilatildeo assexuada
Protozoaacuterios destroem as hemaacutecias
Diferenciaccedilatildeo em gametoacutecitos
Fecircmeas de Anopheles sugam hemaacutecias com gametoacutecitos
Ciclo no hospedeiro invertebrado
Ocorre nas hemaacutecias ou Eritroacutecitos
nas hemaacutecias
Protozoaacuterio no interior da hemaacutecia
Hemaacutecia com gametoacutecito
T trofozoiacuteto Em esquizonte com merozoiacuteto
Fase eritrociacutetica
bull Ciclo sanguiacuteneo ndash Pfalciparum P vivax e Povale 48 horas
ndash Pmalariae 72 horas
ndash Fonte de nutriccedilatildeo do Plasmodium no ciclo sanguiacuteneo hemoglobina
ndash Produccedilatildeo do pigmento malaacuterico hemozoiacutena bull Granulaccedilotildees de Schuffner Plasmodium vivax
bull Granulaccedilotildees de Maurer P falciparum
bull Granulaccedilotildees de Ziemann P malariae
ndash Fagocitose pelas ceacutelulas de Kuppffer e macroacutefagos do baccedilo
Trofozoiacutetos Pfalciparum
Trofozoiacutetos Pfalciparum
Esquizonte ndash P falciparum
Raros no sangue perifeacuterico Possuem 2 a 24 merozoiacutetos
Ocupam 23 do gloacutebulo vermelho
Gametoacutecitos Pfalciparum
Ciclo evolutivo Pvivax
Esquizonte ndash P vivax
Satildeo grandes e ameboacuteides Cromatina organizada em duas ou mais massas
Possuem 2 a 24 merozoiacutetos com pontos de cromatina
Gametoacutecito ndash Pvivax
Macrogametoacutecitos satildeo redondos ou ovais e ocupam toda ceacutelula hospedeira O citoplasma eacute geralmente corado de azul mais escuro e conteacutem pigmento marrom Microgametoacutecitos satildeo geralmente do tamanho de um RBC natildeo infectados com citoplasma corados de azul paacutelido rosa ou cinza
Trofozoiacutetos - P malariae
Esquizontes ndash P malariae
Aproximadamente 6 a 12 merozoiacutetos com arranjo de rosetas
Gametoacutecitos ndash P malariae
Ciclo evolutivo ndash HI
bull Ingestatildeo de hemaacutecias contendo gametoacutecitos durante o repasto sanguiacuteneo da fecircmea do anofelino
bull No intestino meacutedio do vetor gametogecircnese ndash Macrogametoacutecito ndash macrogameta feminino ndash Microgametoacutecito o processo de exflagelaccedilatildeo daacute
origem a 8 microgametas masculinos ndash Produccedilatildeo de ovo ou zigoto ndash O ovo encista na camada epitelial do intestino meacutedio
oocisto ndash Esporogonia liberaccedilatildeo de esporozoiacutetos
Ciclo evolutivo ndash HInvertebrado
ndash Os esporozoiacutetos satildeo transportados pelo hemolinfa ateacute as glacircndulas salivares do vetor ateacute atingirem o ducto salivar
bull Inoculaccedilatildeo no hospedeiro vertebrado atraveacutes da picada do inseto
Hemaacutecia com gametoacutecito
Fecircmeas de Anopheles sugam hemaacutecias com gametoacutecitos
CICLO NO INVERTEBRADO
No tubo digestivo
Zigoto
Penetraccedilatildeo na parede do tubo
digestivo
Migraccedilatildeo para as glacircndulas salivares
Desenvolvimento
Mosquito infectado
Diagnoacutestico
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado e espesso corado pelo Giemsa
bull Sangue colhido sem anticoagulante para melhor fixaccedilatildeo em lacircmina
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo espesso eacute mais eficiente para detecccedilatildeo da infecccedilatildeo
bull Esfregaccedilo delgado eacute mais eficiente para diferenciaccedilatildeo morfoloacutegica das espeacutecies
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo semiquantitativo
ndash Exame de 100 campos microscoacutepicos com resultado expresso pelo sistema de cruzes
Parasitos contados Nuacutemero de campos
microscoacutepicos cruzes
40 a 60 100 +2
1 1 +
2-20 1 ++
21-200 1 +++
+ 200 1 ++++
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo quantitativo derivado de anaacutelise semiquantitativa
Contagem de parasitos por campo
Cruzes Parasitos por mm3
40 a 60100 +2 200-300
1 + 301-500
2-20 ++ 501 - 10000
21-200 +++ 10001 ndash 100000
+ 200 ++++ 100000 ou mais
Diagnoacutestico
bull P falciparum
ndash Parte do ciclo celular aderido ao endoteacutelio capilar Encontro somente de trofozoitos e gametoacutecitos no sangue perifeacuterico
ndash Raramente os esquizontes satildeo encontrados no sangue perifeacuterico
Diagnoacutestico ndash Pvivax ndash Encontro de todas as formas de desenvolvimento ndash
trofozoiacuteto jovem maduro esquizontes e gametoacutecitos
ndash Os trofozoiacutetos maduros tecircm geralmente um aspecto irregular com extensotildees ameboacuteides em seu citoplasma
Diagnoacutestico ndash Pvivax
ndash Os gametoacutecitos femininos coram-se mais intensamente que os masculinos e apresentam nuacutecleo mais compacto geralmente em localizaccedilatildeo perifeacuterica
ndash O pigmento malaacuterico geralmente eacute abundante
Diagnoacutestico - Pmalariae
bull Realizado por meio de caracteriacutesticas morfoloacutegicas do parasito
ndash Verificaccedilatildeo em esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado
ndash Posiccedilatildeo equatorial do parasito
ndash Desenvolvimento sem deformaccedilatildeo do eritroacutecito
Diagnoacutestico
bull QBC ndash Teacutecnica que combina concentraccedilatildeo dos parasitos
pela centrifugaccedilatildeo do sangue em em microhematoacutecrito e a coloraccedilatildeo dos aacutecidos nucleacuteicos do parasito pelo fluorcromo laranja de acridina
ndash Utilizaccedilatildeo de tubos especiais e microscopia epifluorescente
ndash Teste raacutepido
ndash Alta sensibilidade
Diagnoacutestico
bull ParaSight-F ( Becton amp Dickinson)
ndash Teste raacutepido para captura da proteiacutena rica em histidina 2 de Pfalciparum( PfHRP2) e enzimas conservadas de 4 espeacutecies de plasmoacutedio (DHL e aldolase
ndash Utilizaccedilatildeo de fita de nitrocelulose contendo ac monoclonal
ndash Lise de uma gota de sangue
ndash A reaccedilatildeo eacute revelada com adiccedilatildeo de ac policlonal anti-HRP2 conjugado com lipossomas contendo corante
Diagnoacutestico
bull PCR
ndash Sensibilidade e especificidade maior do que o esfregaccedilo sanguiacuteneo
FASE ERITROCIacuteTICA
Hepatoacutecito destruiacutedo pelos protozoaacuterios
Penetraccedilatildeo dos protozoaacuterios
Reproduccedilatildeo assexuada
Protozoaacuterios destroem as hemaacutecias
Diferenciaccedilatildeo em gametoacutecitos
Fecircmeas de Anopheles sugam hemaacutecias com gametoacutecitos
Ciclo no hospedeiro invertebrado
Ocorre nas hemaacutecias ou Eritroacutecitos
nas hemaacutecias
Protozoaacuterio no interior da hemaacutecia
Hemaacutecia com gametoacutecito
T trofozoiacuteto Em esquizonte com merozoiacuteto
Fase eritrociacutetica
bull Ciclo sanguiacuteneo ndash Pfalciparum P vivax e Povale 48 horas
ndash Pmalariae 72 horas
ndash Fonte de nutriccedilatildeo do Plasmodium no ciclo sanguiacuteneo hemoglobina
ndash Produccedilatildeo do pigmento malaacuterico hemozoiacutena bull Granulaccedilotildees de Schuffner Plasmodium vivax
bull Granulaccedilotildees de Maurer P falciparum
bull Granulaccedilotildees de Ziemann P malariae
ndash Fagocitose pelas ceacutelulas de Kuppffer e macroacutefagos do baccedilo
Trofozoiacutetos Pfalciparum
Trofozoiacutetos Pfalciparum
Esquizonte ndash P falciparum
Raros no sangue perifeacuterico Possuem 2 a 24 merozoiacutetos
Ocupam 23 do gloacutebulo vermelho
Gametoacutecitos Pfalciparum
Ciclo evolutivo Pvivax
Esquizonte ndash P vivax
Satildeo grandes e ameboacuteides Cromatina organizada em duas ou mais massas
Possuem 2 a 24 merozoiacutetos com pontos de cromatina
Gametoacutecito ndash Pvivax
Macrogametoacutecitos satildeo redondos ou ovais e ocupam toda ceacutelula hospedeira O citoplasma eacute geralmente corado de azul mais escuro e conteacutem pigmento marrom Microgametoacutecitos satildeo geralmente do tamanho de um RBC natildeo infectados com citoplasma corados de azul paacutelido rosa ou cinza
Trofozoiacutetos - P malariae
Esquizontes ndash P malariae
Aproximadamente 6 a 12 merozoiacutetos com arranjo de rosetas
Gametoacutecitos ndash P malariae
Ciclo evolutivo ndash HI
bull Ingestatildeo de hemaacutecias contendo gametoacutecitos durante o repasto sanguiacuteneo da fecircmea do anofelino
bull No intestino meacutedio do vetor gametogecircnese ndash Macrogametoacutecito ndash macrogameta feminino ndash Microgametoacutecito o processo de exflagelaccedilatildeo daacute
origem a 8 microgametas masculinos ndash Produccedilatildeo de ovo ou zigoto ndash O ovo encista na camada epitelial do intestino meacutedio
oocisto ndash Esporogonia liberaccedilatildeo de esporozoiacutetos
Ciclo evolutivo ndash HInvertebrado
ndash Os esporozoiacutetos satildeo transportados pelo hemolinfa ateacute as glacircndulas salivares do vetor ateacute atingirem o ducto salivar
bull Inoculaccedilatildeo no hospedeiro vertebrado atraveacutes da picada do inseto
Hemaacutecia com gametoacutecito
Fecircmeas de Anopheles sugam hemaacutecias com gametoacutecitos
CICLO NO INVERTEBRADO
No tubo digestivo
Zigoto
Penetraccedilatildeo na parede do tubo
digestivo
Migraccedilatildeo para as glacircndulas salivares
Desenvolvimento
Mosquito infectado
Diagnoacutestico
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado e espesso corado pelo Giemsa
bull Sangue colhido sem anticoagulante para melhor fixaccedilatildeo em lacircmina
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo espesso eacute mais eficiente para detecccedilatildeo da infecccedilatildeo
bull Esfregaccedilo delgado eacute mais eficiente para diferenciaccedilatildeo morfoloacutegica das espeacutecies
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo semiquantitativo
ndash Exame de 100 campos microscoacutepicos com resultado expresso pelo sistema de cruzes
Parasitos contados Nuacutemero de campos
microscoacutepicos cruzes
40 a 60 100 +2
1 1 +
2-20 1 ++
21-200 1 +++
+ 200 1 ++++
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo quantitativo derivado de anaacutelise semiquantitativa
Contagem de parasitos por campo
Cruzes Parasitos por mm3
40 a 60100 +2 200-300
1 + 301-500
2-20 ++ 501 - 10000
21-200 +++ 10001 ndash 100000
+ 200 ++++ 100000 ou mais
Diagnoacutestico
bull P falciparum
ndash Parte do ciclo celular aderido ao endoteacutelio capilar Encontro somente de trofozoitos e gametoacutecitos no sangue perifeacuterico
ndash Raramente os esquizontes satildeo encontrados no sangue perifeacuterico
Diagnoacutestico ndash Pvivax ndash Encontro de todas as formas de desenvolvimento ndash
trofozoiacuteto jovem maduro esquizontes e gametoacutecitos
ndash Os trofozoiacutetos maduros tecircm geralmente um aspecto irregular com extensotildees ameboacuteides em seu citoplasma
Diagnoacutestico ndash Pvivax
ndash Os gametoacutecitos femininos coram-se mais intensamente que os masculinos e apresentam nuacutecleo mais compacto geralmente em localizaccedilatildeo perifeacuterica
ndash O pigmento malaacuterico geralmente eacute abundante
Diagnoacutestico - Pmalariae
bull Realizado por meio de caracteriacutesticas morfoloacutegicas do parasito
ndash Verificaccedilatildeo em esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado
ndash Posiccedilatildeo equatorial do parasito
ndash Desenvolvimento sem deformaccedilatildeo do eritroacutecito
Diagnoacutestico
bull QBC ndash Teacutecnica que combina concentraccedilatildeo dos parasitos
pela centrifugaccedilatildeo do sangue em em microhematoacutecrito e a coloraccedilatildeo dos aacutecidos nucleacuteicos do parasito pelo fluorcromo laranja de acridina
ndash Utilizaccedilatildeo de tubos especiais e microscopia epifluorescente
ndash Teste raacutepido
ndash Alta sensibilidade
Diagnoacutestico
bull ParaSight-F ( Becton amp Dickinson)
ndash Teste raacutepido para captura da proteiacutena rica em histidina 2 de Pfalciparum( PfHRP2) e enzimas conservadas de 4 espeacutecies de plasmoacutedio (DHL e aldolase
ndash Utilizaccedilatildeo de fita de nitrocelulose contendo ac monoclonal
ndash Lise de uma gota de sangue
ndash A reaccedilatildeo eacute revelada com adiccedilatildeo de ac policlonal anti-HRP2 conjugado com lipossomas contendo corante
Diagnoacutestico
bull PCR
ndash Sensibilidade e especificidade maior do que o esfregaccedilo sanguiacuteneo
T trofozoiacuteto Em esquizonte com merozoiacuteto
Fase eritrociacutetica
bull Ciclo sanguiacuteneo ndash Pfalciparum P vivax e Povale 48 horas
ndash Pmalariae 72 horas
ndash Fonte de nutriccedilatildeo do Plasmodium no ciclo sanguiacuteneo hemoglobina
ndash Produccedilatildeo do pigmento malaacuterico hemozoiacutena bull Granulaccedilotildees de Schuffner Plasmodium vivax
bull Granulaccedilotildees de Maurer P falciparum
bull Granulaccedilotildees de Ziemann P malariae
ndash Fagocitose pelas ceacutelulas de Kuppffer e macroacutefagos do baccedilo
Trofozoiacutetos Pfalciparum
Trofozoiacutetos Pfalciparum
Esquizonte ndash P falciparum
Raros no sangue perifeacuterico Possuem 2 a 24 merozoiacutetos
Ocupam 23 do gloacutebulo vermelho
Gametoacutecitos Pfalciparum
Ciclo evolutivo Pvivax
Esquizonte ndash P vivax
Satildeo grandes e ameboacuteides Cromatina organizada em duas ou mais massas
Possuem 2 a 24 merozoiacutetos com pontos de cromatina
Gametoacutecito ndash Pvivax
Macrogametoacutecitos satildeo redondos ou ovais e ocupam toda ceacutelula hospedeira O citoplasma eacute geralmente corado de azul mais escuro e conteacutem pigmento marrom Microgametoacutecitos satildeo geralmente do tamanho de um RBC natildeo infectados com citoplasma corados de azul paacutelido rosa ou cinza
Trofozoiacutetos - P malariae
Esquizontes ndash P malariae
Aproximadamente 6 a 12 merozoiacutetos com arranjo de rosetas
Gametoacutecitos ndash P malariae
Ciclo evolutivo ndash HI
bull Ingestatildeo de hemaacutecias contendo gametoacutecitos durante o repasto sanguiacuteneo da fecircmea do anofelino
bull No intestino meacutedio do vetor gametogecircnese ndash Macrogametoacutecito ndash macrogameta feminino ndash Microgametoacutecito o processo de exflagelaccedilatildeo daacute
origem a 8 microgametas masculinos ndash Produccedilatildeo de ovo ou zigoto ndash O ovo encista na camada epitelial do intestino meacutedio
oocisto ndash Esporogonia liberaccedilatildeo de esporozoiacutetos
Ciclo evolutivo ndash HInvertebrado
ndash Os esporozoiacutetos satildeo transportados pelo hemolinfa ateacute as glacircndulas salivares do vetor ateacute atingirem o ducto salivar
bull Inoculaccedilatildeo no hospedeiro vertebrado atraveacutes da picada do inseto
Hemaacutecia com gametoacutecito
Fecircmeas de Anopheles sugam hemaacutecias com gametoacutecitos
CICLO NO INVERTEBRADO
No tubo digestivo
Zigoto
Penetraccedilatildeo na parede do tubo
digestivo
Migraccedilatildeo para as glacircndulas salivares
Desenvolvimento
Mosquito infectado
Diagnoacutestico
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado e espesso corado pelo Giemsa
bull Sangue colhido sem anticoagulante para melhor fixaccedilatildeo em lacircmina
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo espesso eacute mais eficiente para detecccedilatildeo da infecccedilatildeo
bull Esfregaccedilo delgado eacute mais eficiente para diferenciaccedilatildeo morfoloacutegica das espeacutecies
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo semiquantitativo
ndash Exame de 100 campos microscoacutepicos com resultado expresso pelo sistema de cruzes
Parasitos contados Nuacutemero de campos
microscoacutepicos cruzes
40 a 60 100 +2
1 1 +
2-20 1 ++
21-200 1 +++
+ 200 1 ++++
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo quantitativo derivado de anaacutelise semiquantitativa
Contagem de parasitos por campo
Cruzes Parasitos por mm3
40 a 60100 +2 200-300
1 + 301-500
2-20 ++ 501 - 10000
21-200 +++ 10001 ndash 100000
+ 200 ++++ 100000 ou mais
Diagnoacutestico
bull P falciparum
ndash Parte do ciclo celular aderido ao endoteacutelio capilar Encontro somente de trofozoitos e gametoacutecitos no sangue perifeacuterico
ndash Raramente os esquizontes satildeo encontrados no sangue perifeacuterico
Diagnoacutestico ndash Pvivax ndash Encontro de todas as formas de desenvolvimento ndash
trofozoiacuteto jovem maduro esquizontes e gametoacutecitos
ndash Os trofozoiacutetos maduros tecircm geralmente um aspecto irregular com extensotildees ameboacuteides em seu citoplasma
Diagnoacutestico ndash Pvivax
ndash Os gametoacutecitos femininos coram-se mais intensamente que os masculinos e apresentam nuacutecleo mais compacto geralmente em localizaccedilatildeo perifeacuterica
ndash O pigmento malaacuterico geralmente eacute abundante
Diagnoacutestico - Pmalariae
bull Realizado por meio de caracteriacutesticas morfoloacutegicas do parasito
ndash Verificaccedilatildeo em esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado
ndash Posiccedilatildeo equatorial do parasito
ndash Desenvolvimento sem deformaccedilatildeo do eritroacutecito
Diagnoacutestico
bull QBC ndash Teacutecnica que combina concentraccedilatildeo dos parasitos
pela centrifugaccedilatildeo do sangue em em microhematoacutecrito e a coloraccedilatildeo dos aacutecidos nucleacuteicos do parasito pelo fluorcromo laranja de acridina
ndash Utilizaccedilatildeo de tubos especiais e microscopia epifluorescente
ndash Teste raacutepido
ndash Alta sensibilidade
Diagnoacutestico
bull ParaSight-F ( Becton amp Dickinson)
ndash Teste raacutepido para captura da proteiacutena rica em histidina 2 de Pfalciparum( PfHRP2) e enzimas conservadas de 4 espeacutecies de plasmoacutedio (DHL e aldolase
ndash Utilizaccedilatildeo de fita de nitrocelulose contendo ac monoclonal
ndash Lise de uma gota de sangue
ndash A reaccedilatildeo eacute revelada com adiccedilatildeo de ac policlonal anti-HRP2 conjugado com lipossomas contendo corante
Diagnoacutestico
bull PCR
ndash Sensibilidade e especificidade maior do que o esfregaccedilo sanguiacuteneo
Fase eritrociacutetica
bull Ciclo sanguiacuteneo ndash Pfalciparum P vivax e Povale 48 horas
ndash Pmalariae 72 horas
ndash Fonte de nutriccedilatildeo do Plasmodium no ciclo sanguiacuteneo hemoglobina
ndash Produccedilatildeo do pigmento malaacuterico hemozoiacutena bull Granulaccedilotildees de Schuffner Plasmodium vivax
bull Granulaccedilotildees de Maurer P falciparum
bull Granulaccedilotildees de Ziemann P malariae
ndash Fagocitose pelas ceacutelulas de Kuppffer e macroacutefagos do baccedilo
Trofozoiacutetos Pfalciparum
Trofozoiacutetos Pfalciparum
Esquizonte ndash P falciparum
Raros no sangue perifeacuterico Possuem 2 a 24 merozoiacutetos
Ocupam 23 do gloacutebulo vermelho
Gametoacutecitos Pfalciparum
Ciclo evolutivo Pvivax
Esquizonte ndash P vivax
Satildeo grandes e ameboacuteides Cromatina organizada em duas ou mais massas
Possuem 2 a 24 merozoiacutetos com pontos de cromatina
Gametoacutecito ndash Pvivax
Macrogametoacutecitos satildeo redondos ou ovais e ocupam toda ceacutelula hospedeira O citoplasma eacute geralmente corado de azul mais escuro e conteacutem pigmento marrom Microgametoacutecitos satildeo geralmente do tamanho de um RBC natildeo infectados com citoplasma corados de azul paacutelido rosa ou cinza
Trofozoiacutetos - P malariae
Esquizontes ndash P malariae
Aproximadamente 6 a 12 merozoiacutetos com arranjo de rosetas
Gametoacutecitos ndash P malariae
Ciclo evolutivo ndash HI
bull Ingestatildeo de hemaacutecias contendo gametoacutecitos durante o repasto sanguiacuteneo da fecircmea do anofelino
bull No intestino meacutedio do vetor gametogecircnese ndash Macrogametoacutecito ndash macrogameta feminino ndash Microgametoacutecito o processo de exflagelaccedilatildeo daacute
origem a 8 microgametas masculinos ndash Produccedilatildeo de ovo ou zigoto ndash O ovo encista na camada epitelial do intestino meacutedio
oocisto ndash Esporogonia liberaccedilatildeo de esporozoiacutetos
Ciclo evolutivo ndash HInvertebrado
ndash Os esporozoiacutetos satildeo transportados pelo hemolinfa ateacute as glacircndulas salivares do vetor ateacute atingirem o ducto salivar
bull Inoculaccedilatildeo no hospedeiro vertebrado atraveacutes da picada do inseto
Hemaacutecia com gametoacutecito
Fecircmeas de Anopheles sugam hemaacutecias com gametoacutecitos
CICLO NO INVERTEBRADO
No tubo digestivo
Zigoto
Penetraccedilatildeo na parede do tubo
digestivo
Migraccedilatildeo para as glacircndulas salivares
Desenvolvimento
Mosquito infectado
Diagnoacutestico
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado e espesso corado pelo Giemsa
bull Sangue colhido sem anticoagulante para melhor fixaccedilatildeo em lacircmina
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo espesso eacute mais eficiente para detecccedilatildeo da infecccedilatildeo
bull Esfregaccedilo delgado eacute mais eficiente para diferenciaccedilatildeo morfoloacutegica das espeacutecies
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo semiquantitativo
ndash Exame de 100 campos microscoacutepicos com resultado expresso pelo sistema de cruzes
Parasitos contados Nuacutemero de campos
microscoacutepicos cruzes
40 a 60 100 +2
1 1 +
2-20 1 ++
21-200 1 +++
+ 200 1 ++++
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo quantitativo derivado de anaacutelise semiquantitativa
Contagem de parasitos por campo
Cruzes Parasitos por mm3
40 a 60100 +2 200-300
1 + 301-500
2-20 ++ 501 - 10000
21-200 +++ 10001 ndash 100000
+ 200 ++++ 100000 ou mais
Diagnoacutestico
bull P falciparum
ndash Parte do ciclo celular aderido ao endoteacutelio capilar Encontro somente de trofozoitos e gametoacutecitos no sangue perifeacuterico
ndash Raramente os esquizontes satildeo encontrados no sangue perifeacuterico
Diagnoacutestico ndash Pvivax ndash Encontro de todas as formas de desenvolvimento ndash
trofozoiacuteto jovem maduro esquizontes e gametoacutecitos
ndash Os trofozoiacutetos maduros tecircm geralmente um aspecto irregular com extensotildees ameboacuteides em seu citoplasma
Diagnoacutestico ndash Pvivax
ndash Os gametoacutecitos femininos coram-se mais intensamente que os masculinos e apresentam nuacutecleo mais compacto geralmente em localizaccedilatildeo perifeacuterica
ndash O pigmento malaacuterico geralmente eacute abundante
Diagnoacutestico - Pmalariae
bull Realizado por meio de caracteriacutesticas morfoloacutegicas do parasito
ndash Verificaccedilatildeo em esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado
ndash Posiccedilatildeo equatorial do parasito
ndash Desenvolvimento sem deformaccedilatildeo do eritroacutecito
Diagnoacutestico
bull QBC ndash Teacutecnica que combina concentraccedilatildeo dos parasitos
pela centrifugaccedilatildeo do sangue em em microhematoacutecrito e a coloraccedilatildeo dos aacutecidos nucleacuteicos do parasito pelo fluorcromo laranja de acridina
ndash Utilizaccedilatildeo de tubos especiais e microscopia epifluorescente
ndash Teste raacutepido
ndash Alta sensibilidade
Diagnoacutestico
bull ParaSight-F ( Becton amp Dickinson)
ndash Teste raacutepido para captura da proteiacutena rica em histidina 2 de Pfalciparum( PfHRP2) e enzimas conservadas de 4 espeacutecies de plasmoacutedio (DHL e aldolase
ndash Utilizaccedilatildeo de fita de nitrocelulose contendo ac monoclonal
ndash Lise de uma gota de sangue
ndash A reaccedilatildeo eacute revelada com adiccedilatildeo de ac policlonal anti-HRP2 conjugado com lipossomas contendo corante
Diagnoacutestico
bull PCR
ndash Sensibilidade e especificidade maior do que o esfregaccedilo sanguiacuteneo
Trofozoiacutetos Pfalciparum
Trofozoiacutetos Pfalciparum
Esquizonte ndash P falciparum
Raros no sangue perifeacuterico Possuem 2 a 24 merozoiacutetos
Ocupam 23 do gloacutebulo vermelho
Gametoacutecitos Pfalciparum
Ciclo evolutivo Pvivax
Esquizonte ndash P vivax
Satildeo grandes e ameboacuteides Cromatina organizada em duas ou mais massas
Possuem 2 a 24 merozoiacutetos com pontos de cromatina
Gametoacutecito ndash Pvivax
Macrogametoacutecitos satildeo redondos ou ovais e ocupam toda ceacutelula hospedeira O citoplasma eacute geralmente corado de azul mais escuro e conteacutem pigmento marrom Microgametoacutecitos satildeo geralmente do tamanho de um RBC natildeo infectados com citoplasma corados de azul paacutelido rosa ou cinza
Trofozoiacutetos - P malariae
Esquizontes ndash P malariae
Aproximadamente 6 a 12 merozoiacutetos com arranjo de rosetas
Gametoacutecitos ndash P malariae
Ciclo evolutivo ndash HI
bull Ingestatildeo de hemaacutecias contendo gametoacutecitos durante o repasto sanguiacuteneo da fecircmea do anofelino
bull No intestino meacutedio do vetor gametogecircnese ndash Macrogametoacutecito ndash macrogameta feminino ndash Microgametoacutecito o processo de exflagelaccedilatildeo daacute
origem a 8 microgametas masculinos ndash Produccedilatildeo de ovo ou zigoto ndash O ovo encista na camada epitelial do intestino meacutedio
oocisto ndash Esporogonia liberaccedilatildeo de esporozoiacutetos
Ciclo evolutivo ndash HInvertebrado
ndash Os esporozoiacutetos satildeo transportados pelo hemolinfa ateacute as glacircndulas salivares do vetor ateacute atingirem o ducto salivar
bull Inoculaccedilatildeo no hospedeiro vertebrado atraveacutes da picada do inseto
Hemaacutecia com gametoacutecito
Fecircmeas de Anopheles sugam hemaacutecias com gametoacutecitos
CICLO NO INVERTEBRADO
No tubo digestivo
Zigoto
Penetraccedilatildeo na parede do tubo
digestivo
Migraccedilatildeo para as glacircndulas salivares
Desenvolvimento
Mosquito infectado
Diagnoacutestico
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado e espesso corado pelo Giemsa
bull Sangue colhido sem anticoagulante para melhor fixaccedilatildeo em lacircmina
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo espesso eacute mais eficiente para detecccedilatildeo da infecccedilatildeo
bull Esfregaccedilo delgado eacute mais eficiente para diferenciaccedilatildeo morfoloacutegica das espeacutecies
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo semiquantitativo
ndash Exame de 100 campos microscoacutepicos com resultado expresso pelo sistema de cruzes
Parasitos contados Nuacutemero de campos
microscoacutepicos cruzes
40 a 60 100 +2
1 1 +
2-20 1 ++
21-200 1 +++
+ 200 1 ++++
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo quantitativo derivado de anaacutelise semiquantitativa
Contagem de parasitos por campo
Cruzes Parasitos por mm3
40 a 60100 +2 200-300
1 + 301-500
2-20 ++ 501 - 10000
21-200 +++ 10001 ndash 100000
+ 200 ++++ 100000 ou mais
Diagnoacutestico
bull P falciparum
ndash Parte do ciclo celular aderido ao endoteacutelio capilar Encontro somente de trofozoitos e gametoacutecitos no sangue perifeacuterico
ndash Raramente os esquizontes satildeo encontrados no sangue perifeacuterico
Diagnoacutestico ndash Pvivax ndash Encontro de todas as formas de desenvolvimento ndash
trofozoiacuteto jovem maduro esquizontes e gametoacutecitos
ndash Os trofozoiacutetos maduros tecircm geralmente um aspecto irregular com extensotildees ameboacuteides em seu citoplasma
Diagnoacutestico ndash Pvivax
ndash Os gametoacutecitos femininos coram-se mais intensamente que os masculinos e apresentam nuacutecleo mais compacto geralmente em localizaccedilatildeo perifeacuterica
ndash O pigmento malaacuterico geralmente eacute abundante
Diagnoacutestico - Pmalariae
bull Realizado por meio de caracteriacutesticas morfoloacutegicas do parasito
ndash Verificaccedilatildeo em esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado
ndash Posiccedilatildeo equatorial do parasito
ndash Desenvolvimento sem deformaccedilatildeo do eritroacutecito
Diagnoacutestico
bull QBC ndash Teacutecnica que combina concentraccedilatildeo dos parasitos
pela centrifugaccedilatildeo do sangue em em microhematoacutecrito e a coloraccedilatildeo dos aacutecidos nucleacuteicos do parasito pelo fluorcromo laranja de acridina
ndash Utilizaccedilatildeo de tubos especiais e microscopia epifluorescente
ndash Teste raacutepido
ndash Alta sensibilidade
Diagnoacutestico
bull ParaSight-F ( Becton amp Dickinson)
ndash Teste raacutepido para captura da proteiacutena rica em histidina 2 de Pfalciparum( PfHRP2) e enzimas conservadas de 4 espeacutecies de plasmoacutedio (DHL e aldolase
ndash Utilizaccedilatildeo de fita de nitrocelulose contendo ac monoclonal
ndash Lise de uma gota de sangue
ndash A reaccedilatildeo eacute revelada com adiccedilatildeo de ac policlonal anti-HRP2 conjugado com lipossomas contendo corante
Diagnoacutestico
bull PCR
ndash Sensibilidade e especificidade maior do que o esfregaccedilo sanguiacuteneo
Trofozoiacutetos Pfalciparum
Esquizonte ndash P falciparum
Raros no sangue perifeacuterico Possuem 2 a 24 merozoiacutetos
Ocupam 23 do gloacutebulo vermelho
Gametoacutecitos Pfalciparum
Ciclo evolutivo Pvivax
Esquizonte ndash P vivax
Satildeo grandes e ameboacuteides Cromatina organizada em duas ou mais massas
Possuem 2 a 24 merozoiacutetos com pontos de cromatina
Gametoacutecito ndash Pvivax
Macrogametoacutecitos satildeo redondos ou ovais e ocupam toda ceacutelula hospedeira O citoplasma eacute geralmente corado de azul mais escuro e conteacutem pigmento marrom Microgametoacutecitos satildeo geralmente do tamanho de um RBC natildeo infectados com citoplasma corados de azul paacutelido rosa ou cinza
Trofozoiacutetos - P malariae
Esquizontes ndash P malariae
Aproximadamente 6 a 12 merozoiacutetos com arranjo de rosetas
Gametoacutecitos ndash P malariae
Ciclo evolutivo ndash HI
bull Ingestatildeo de hemaacutecias contendo gametoacutecitos durante o repasto sanguiacuteneo da fecircmea do anofelino
bull No intestino meacutedio do vetor gametogecircnese ndash Macrogametoacutecito ndash macrogameta feminino ndash Microgametoacutecito o processo de exflagelaccedilatildeo daacute
origem a 8 microgametas masculinos ndash Produccedilatildeo de ovo ou zigoto ndash O ovo encista na camada epitelial do intestino meacutedio
oocisto ndash Esporogonia liberaccedilatildeo de esporozoiacutetos
Ciclo evolutivo ndash HInvertebrado
ndash Os esporozoiacutetos satildeo transportados pelo hemolinfa ateacute as glacircndulas salivares do vetor ateacute atingirem o ducto salivar
bull Inoculaccedilatildeo no hospedeiro vertebrado atraveacutes da picada do inseto
Hemaacutecia com gametoacutecito
Fecircmeas de Anopheles sugam hemaacutecias com gametoacutecitos
CICLO NO INVERTEBRADO
No tubo digestivo
Zigoto
Penetraccedilatildeo na parede do tubo
digestivo
Migraccedilatildeo para as glacircndulas salivares
Desenvolvimento
Mosquito infectado
Diagnoacutestico
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado e espesso corado pelo Giemsa
bull Sangue colhido sem anticoagulante para melhor fixaccedilatildeo em lacircmina
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo espesso eacute mais eficiente para detecccedilatildeo da infecccedilatildeo
bull Esfregaccedilo delgado eacute mais eficiente para diferenciaccedilatildeo morfoloacutegica das espeacutecies
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo semiquantitativo
ndash Exame de 100 campos microscoacutepicos com resultado expresso pelo sistema de cruzes
Parasitos contados Nuacutemero de campos
microscoacutepicos cruzes
40 a 60 100 +2
1 1 +
2-20 1 ++
21-200 1 +++
+ 200 1 ++++
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo quantitativo derivado de anaacutelise semiquantitativa
Contagem de parasitos por campo
Cruzes Parasitos por mm3
40 a 60100 +2 200-300
1 + 301-500
2-20 ++ 501 - 10000
21-200 +++ 10001 ndash 100000
+ 200 ++++ 100000 ou mais
Diagnoacutestico
bull P falciparum
ndash Parte do ciclo celular aderido ao endoteacutelio capilar Encontro somente de trofozoitos e gametoacutecitos no sangue perifeacuterico
ndash Raramente os esquizontes satildeo encontrados no sangue perifeacuterico
Diagnoacutestico ndash Pvivax ndash Encontro de todas as formas de desenvolvimento ndash
trofozoiacuteto jovem maduro esquizontes e gametoacutecitos
ndash Os trofozoiacutetos maduros tecircm geralmente um aspecto irregular com extensotildees ameboacuteides em seu citoplasma
Diagnoacutestico ndash Pvivax
ndash Os gametoacutecitos femininos coram-se mais intensamente que os masculinos e apresentam nuacutecleo mais compacto geralmente em localizaccedilatildeo perifeacuterica
ndash O pigmento malaacuterico geralmente eacute abundante
Diagnoacutestico - Pmalariae
bull Realizado por meio de caracteriacutesticas morfoloacutegicas do parasito
ndash Verificaccedilatildeo em esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado
ndash Posiccedilatildeo equatorial do parasito
ndash Desenvolvimento sem deformaccedilatildeo do eritroacutecito
Diagnoacutestico
bull QBC ndash Teacutecnica que combina concentraccedilatildeo dos parasitos
pela centrifugaccedilatildeo do sangue em em microhematoacutecrito e a coloraccedilatildeo dos aacutecidos nucleacuteicos do parasito pelo fluorcromo laranja de acridina
ndash Utilizaccedilatildeo de tubos especiais e microscopia epifluorescente
ndash Teste raacutepido
ndash Alta sensibilidade
Diagnoacutestico
bull ParaSight-F ( Becton amp Dickinson)
ndash Teste raacutepido para captura da proteiacutena rica em histidina 2 de Pfalciparum( PfHRP2) e enzimas conservadas de 4 espeacutecies de plasmoacutedio (DHL e aldolase
ndash Utilizaccedilatildeo de fita de nitrocelulose contendo ac monoclonal
ndash Lise de uma gota de sangue
ndash A reaccedilatildeo eacute revelada com adiccedilatildeo de ac policlonal anti-HRP2 conjugado com lipossomas contendo corante
Diagnoacutestico
bull PCR
ndash Sensibilidade e especificidade maior do que o esfregaccedilo sanguiacuteneo
Esquizonte ndash P falciparum
Raros no sangue perifeacuterico Possuem 2 a 24 merozoiacutetos
Ocupam 23 do gloacutebulo vermelho
Gametoacutecitos Pfalciparum
Ciclo evolutivo Pvivax
Esquizonte ndash P vivax
Satildeo grandes e ameboacuteides Cromatina organizada em duas ou mais massas
Possuem 2 a 24 merozoiacutetos com pontos de cromatina
Gametoacutecito ndash Pvivax
Macrogametoacutecitos satildeo redondos ou ovais e ocupam toda ceacutelula hospedeira O citoplasma eacute geralmente corado de azul mais escuro e conteacutem pigmento marrom Microgametoacutecitos satildeo geralmente do tamanho de um RBC natildeo infectados com citoplasma corados de azul paacutelido rosa ou cinza
Trofozoiacutetos - P malariae
Esquizontes ndash P malariae
Aproximadamente 6 a 12 merozoiacutetos com arranjo de rosetas
Gametoacutecitos ndash P malariae
Ciclo evolutivo ndash HI
bull Ingestatildeo de hemaacutecias contendo gametoacutecitos durante o repasto sanguiacuteneo da fecircmea do anofelino
bull No intestino meacutedio do vetor gametogecircnese ndash Macrogametoacutecito ndash macrogameta feminino ndash Microgametoacutecito o processo de exflagelaccedilatildeo daacute
origem a 8 microgametas masculinos ndash Produccedilatildeo de ovo ou zigoto ndash O ovo encista na camada epitelial do intestino meacutedio
oocisto ndash Esporogonia liberaccedilatildeo de esporozoiacutetos
Ciclo evolutivo ndash HInvertebrado
ndash Os esporozoiacutetos satildeo transportados pelo hemolinfa ateacute as glacircndulas salivares do vetor ateacute atingirem o ducto salivar
bull Inoculaccedilatildeo no hospedeiro vertebrado atraveacutes da picada do inseto
Hemaacutecia com gametoacutecito
Fecircmeas de Anopheles sugam hemaacutecias com gametoacutecitos
CICLO NO INVERTEBRADO
No tubo digestivo
Zigoto
Penetraccedilatildeo na parede do tubo
digestivo
Migraccedilatildeo para as glacircndulas salivares
Desenvolvimento
Mosquito infectado
Diagnoacutestico
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado e espesso corado pelo Giemsa
bull Sangue colhido sem anticoagulante para melhor fixaccedilatildeo em lacircmina
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo espesso eacute mais eficiente para detecccedilatildeo da infecccedilatildeo
bull Esfregaccedilo delgado eacute mais eficiente para diferenciaccedilatildeo morfoloacutegica das espeacutecies
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo semiquantitativo
ndash Exame de 100 campos microscoacutepicos com resultado expresso pelo sistema de cruzes
Parasitos contados Nuacutemero de campos
microscoacutepicos cruzes
40 a 60 100 +2
1 1 +
2-20 1 ++
21-200 1 +++
+ 200 1 ++++
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo quantitativo derivado de anaacutelise semiquantitativa
Contagem de parasitos por campo
Cruzes Parasitos por mm3
40 a 60100 +2 200-300
1 + 301-500
2-20 ++ 501 - 10000
21-200 +++ 10001 ndash 100000
+ 200 ++++ 100000 ou mais
Diagnoacutestico
bull P falciparum
ndash Parte do ciclo celular aderido ao endoteacutelio capilar Encontro somente de trofozoitos e gametoacutecitos no sangue perifeacuterico
ndash Raramente os esquizontes satildeo encontrados no sangue perifeacuterico
Diagnoacutestico ndash Pvivax ndash Encontro de todas as formas de desenvolvimento ndash
trofozoiacuteto jovem maduro esquizontes e gametoacutecitos
ndash Os trofozoiacutetos maduros tecircm geralmente um aspecto irregular com extensotildees ameboacuteides em seu citoplasma
Diagnoacutestico ndash Pvivax
ndash Os gametoacutecitos femininos coram-se mais intensamente que os masculinos e apresentam nuacutecleo mais compacto geralmente em localizaccedilatildeo perifeacuterica
ndash O pigmento malaacuterico geralmente eacute abundante
Diagnoacutestico - Pmalariae
bull Realizado por meio de caracteriacutesticas morfoloacutegicas do parasito
ndash Verificaccedilatildeo em esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado
ndash Posiccedilatildeo equatorial do parasito
ndash Desenvolvimento sem deformaccedilatildeo do eritroacutecito
Diagnoacutestico
bull QBC ndash Teacutecnica que combina concentraccedilatildeo dos parasitos
pela centrifugaccedilatildeo do sangue em em microhematoacutecrito e a coloraccedilatildeo dos aacutecidos nucleacuteicos do parasito pelo fluorcromo laranja de acridina
ndash Utilizaccedilatildeo de tubos especiais e microscopia epifluorescente
ndash Teste raacutepido
ndash Alta sensibilidade
Diagnoacutestico
bull ParaSight-F ( Becton amp Dickinson)
ndash Teste raacutepido para captura da proteiacutena rica em histidina 2 de Pfalciparum( PfHRP2) e enzimas conservadas de 4 espeacutecies de plasmoacutedio (DHL e aldolase
ndash Utilizaccedilatildeo de fita de nitrocelulose contendo ac monoclonal
ndash Lise de uma gota de sangue
ndash A reaccedilatildeo eacute revelada com adiccedilatildeo de ac policlonal anti-HRP2 conjugado com lipossomas contendo corante
Diagnoacutestico
bull PCR
ndash Sensibilidade e especificidade maior do que o esfregaccedilo sanguiacuteneo
Gametoacutecitos Pfalciparum
Ciclo evolutivo Pvivax
Esquizonte ndash P vivax
Satildeo grandes e ameboacuteides Cromatina organizada em duas ou mais massas
Possuem 2 a 24 merozoiacutetos com pontos de cromatina
Gametoacutecito ndash Pvivax
Macrogametoacutecitos satildeo redondos ou ovais e ocupam toda ceacutelula hospedeira O citoplasma eacute geralmente corado de azul mais escuro e conteacutem pigmento marrom Microgametoacutecitos satildeo geralmente do tamanho de um RBC natildeo infectados com citoplasma corados de azul paacutelido rosa ou cinza
Trofozoiacutetos - P malariae
Esquizontes ndash P malariae
Aproximadamente 6 a 12 merozoiacutetos com arranjo de rosetas
Gametoacutecitos ndash P malariae
Ciclo evolutivo ndash HI
bull Ingestatildeo de hemaacutecias contendo gametoacutecitos durante o repasto sanguiacuteneo da fecircmea do anofelino
bull No intestino meacutedio do vetor gametogecircnese ndash Macrogametoacutecito ndash macrogameta feminino ndash Microgametoacutecito o processo de exflagelaccedilatildeo daacute
origem a 8 microgametas masculinos ndash Produccedilatildeo de ovo ou zigoto ndash O ovo encista na camada epitelial do intestino meacutedio
oocisto ndash Esporogonia liberaccedilatildeo de esporozoiacutetos
Ciclo evolutivo ndash HInvertebrado
ndash Os esporozoiacutetos satildeo transportados pelo hemolinfa ateacute as glacircndulas salivares do vetor ateacute atingirem o ducto salivar
bull Inoculaccedilatildeo no hospedeiro vertebrado atraveacutes da picada do inseto
Hemaacutecia com gametoacutecito
Fecircmeas de Anopheles sugam hemaacutecias com gametoacutecitos
CICLO NO INVERTEBRADO
No tubo digestivo
Zigoto
Penetraccedilatildeo na parede do tubo
digestivo
Migraccedilatildeo para as glacircndulas salivares
Desenvolvimento
Mosquito infectado
Diagnoacutestico
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado e espesso corado pelo Giemsa
bull Sangue colhido sem anticoagulante para melhor fixaccedilatildeo em lacircmina
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo espesso eacute mais eficiente para detecccedilatildeo da infecccedilatildeo
bull Esfregaccedilo delgado eacute mais eficiente para diferenciaccedilatildeo morfoloacutegica das espeacutecies
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo semiquantitativo
ndash Exame de 100 campos microscoacutepicos com resultado expresso pelo sistema de cruzes
Parasitos contados Nuacutemero de campos
microscoacutepicos cruzes
40 a 60 100 +2
1 1 +
2-20 1 ++
21-200 1 +++
+ 200 1 ++++
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo quantitativo derivado de anaacutelise semiquantitativa
Contagem de parasitos por campo
Cruzes Parasitos por mm3
40 a 60100 +2 200-300
1 + 301-500
2-20 ++ 501 - 10000
21-200 +++ 10001 ndash 100000
+ 200 ++++ 100000 ou mais
Diagnoacutestico
bull P falciparum
ndash Parte do ciclo celular aderido ao endoteacutelio capilar Encontro somente de trofozoitos e gametoacutecitos no sangue perifeacuterico
ndash Raramente os esquizontes satildeo encontrados no sangue perifeacuterico
Diagnoacutestico ndash Pvivax ndash Encontro de todas as formas de desenvolvimento ndash
trofozoiacuteto jovem maduro esquizontes e gametoacutecitos
ndash Os trofozoiacutetos maduros tecircm geralmente um aspecto irregular com extensotildees ameboacuteides em seu citoplasma
Diagnoacutestico ndash Pvivax
ndash Os gametoacutecitos femininos coram-se mais intensamente que os masculinos e apresentam nuacutecleo mais compacto geralmente em localizaccedilatildeo perifeacuterica
ndash O pigmento malaacuterico geralmente eacute abundante
Diagnoacutestico - Pmalariae
bull Realizado por meio de caracteriacutesticas morfoloacutegicas do parasito
ndash Verificaccedilatildeo em esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado
ndash Posiccedilatildeo equatorial do parasito
ndash Desenvolvimento sem deformaccedilatildeo do eritroacutecito
Diagnoacutestico
bull QBC ndash Teacutecnica que combina concentraccedilatildeo dos parasitos
pela centrifugaccedilatildeo do sangue em em microhematoacutecrito e a coloraccedilatildeo dos aacutecidos nucleacuteicos do parasito pelo fluorcromo laranja de acridina
ndash Utilizaccedilatildeo de tubos especiais e microscopia epifluorescente
ndash Teste raacutepido
ndash Alta sensibilidade
Diagnoacutestico
bull ParaSight-F ( Becton amp Dickinson)
ndash Teste raacutepido para captura da proteiacutena rica em histidina 2 de Pfalciparum( PfHRP2) e enzimas conservadas de 4 espeacutecies de plasmoacutedio (DHL e aldolase
ndash Utilizaccedilatildeo de fita de nitrocelulose contendo ac monoclonal
ndash Lise de uma gota de sangue
ndash A reaccedilatildeo eacute revelada com adiccedilatildeo de ac policlonal anti-HRP2 conjugado com lipossomas contendo corante
Diagnoacutestico
bull PCR
ndash Sensibilidade e especificidade maior do que o esfregaccedilo sanguiacuteneo
Ciclo evolutivo Pvivax
Esquizonte ndash P vivax
Satildeo grandes e ameboacuteides Cromatina organizada em duas ou mais massas
Possuem 2 a 24 merozoiacutetos com pontos de cromatina
Gametoacutecito ndash Pvivax
Macrogametoacutecitos satildeo redondos ou ovais e ocupam toda ceacutelula hospedeira O citoplasma eacute geralmente corado de azul mais escuro e conteacutem pigmento marrom Microgametoacutecitos satildeo geralmente do tamanho de um RBC natildeo infectados com citoplasma corados de azul paacutelido rosa ou cinza
Trofozoiacutetos - P malariae
Esquizontes ndash P malariae
Aproximadamente 6 a 12 merozoiacutetos com arranjo de rosetas
Gametoacutecitos ndash P malariae
Ciclo evolutivo ndash HI
bull Ingestatildeo de hemaacutecias contendo gametoacutecitos durante o repasto sanguiacuteneo da fecircmea do anofelino
bull No intestino meacutedio do vetor gametogecircnese ndash Macrogametoacutecito ndash macrogameta feminino ndash Microgametoacutecito o processo de exflagelaccedilatildeo daacute
origem a 8 microgametas masculinos ndash Produccedilatildeo de ovo ou zigoto ndash O ovo encista na camada epitelial do intestino meacutedio
oocisto ndash Esporogonia liberaccedilatildeo de esporozoiacutetos
Ciclo evolutivo ndash HInvertebrado
ndash Os esporozoiacutetos satildeo transportados pelo hemolinfa ateacute as glacircndulas salivares do vetor ateacute atingirem o ducto salivar
bull Inoculaccedilatildeo no hospedeiro vertebrado atraveacutes da picada do inseto
Hemaacutecia com gametoacutecito
Fecircmeas de Anopheles sugam hemaacutecias com gametoacutecitos
CICLO NO INVERTEBRADO
No tubo digestivo
Zigoto
Penetraccedilatildeo na parede do tubo
digestivo
Migraccedilatildeo para as glacircndulas salivares
Desenvolvimento
Mosquito infectado
Diagnoacutestico
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado e espesso corado pelo Giemsa
bull Sangue colhido sem anticoagulante para melhor fixaccedilatildeo em lacircmina
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo espesso eacute mais eficiente para detecccedilatildeo da infecccedilatildeo
bull Esfregaccedilo delgado eacute mais eficiente para diferenciaccedilatildeo morfoloacutegica das espeacutecies
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo semiquantitativo
ndash Exame de 100 campos microscoacutepicos com resultado expresso pelo sistema de cruzes
Parasitos contados Nuacutemero de campos
microscoacutepicos cruzes
40 a 60 100 +2
1 1 +
2-20 1 ++
21-200 1 +++
+ 200 1 ++++
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo quantitativo derivado de anaacutelise semiquantitativa
Contagem de parasitos por campo
Cruzes Parasitos por mm3
40 a 60100 +2 200-300
1 + 301-500
2-20 ++ 501 - 10000
21-200 +++ 10001 ndash 100000
+ 200 ++++ 100000 ou mais
Diagnoacutestico
bull P falciparum
ndash Parte do ciclo celular aderido ao endoteacutelio capilar Encontro somente de trofozoitos e gametoacutecitos no sangue perifeacuterico
ndash Raramente os esquizontes satildeo encontrados no sangue perifeacuterico
Diagnoacutestico ndash Pvivax ndash Encontro de todas as formas de desenvolvimento ndash
trofozoiacuteto jovem maduro esquizontes e gametoacutecitos
ndash Os trofozoiacutetos maduros tecircm geralmente um aspecto irregular com extensotildees ameboacuteides em seu citoplasma
Diagnoacutestico ndash Pvivax
ndash Os gametoacutecitos femininos coram-se mais intensamente que os masculinos e apresentam nuacutecleo mais compacto geralmente em localizaccedilatildeo perifeacuterica
ndash O pigmento malaacuterico geralmente eacute abundante
Diagnoacutestico - Pmalariae
bull Realizado por meio de caracteriacutesticas morfoloacutegicas do parasito
ndash Verificaccedilatildeo em esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado
ndash Posiccedilatildeo equatorial do parasito
ndash Desenvolvimento sem deformaccedilatildeo do eritroacutecito
Diagnoacutestico
bull QBC ndash Teacutecnica que combina concentraccedilatildeo dos parasitos
pela centrifugaccedilatildeo do sangue em em microhematoacutecrito e a coloraccedilatildeo dos aacutecidos nucleacuteicos do parasito pelo fluorcromo laranja de acridina
ndash Utilizaccedilatildeo de tubos especiais e microscopia epifluorescente
ndash Teste raacutepido
ndash Alta sensibilidade
Diagnoacutestico
bull ParaSight-F ( Becton amp Dickinson)
ndash Teste raacutepido para captura da proteiacutena rica em histidina 2 de Pfalciparum( PfHRP2) e enzimas conservadas de 4 espeacutecies de plasmoacutedio (DHL e aldolase
ndash Utilizaccedilatildeo de fita de nitrocelulose contendo ac monoclonal
ndash Lise de uma gota de sangue
ndash A reaccedilatildeo eacute revelada com adiccedilatildeo de ac policlonal anti-HRP2 conjugado com lipossomas contendo corante
Diagnoacutestico
bull PCR
ndash Sensibilidade e especificidade maior do que o esfregaccedilo sanguiacuteneo
Esquizonte ndash P vivax
Satildeo grandes e ameboacuteides Cromatina organizada em duas ou mais massas
Possuem 2 a 24 merozoiacutetos com pontos de cromatina
Gametoacutecito ndash Pvivax
Macrogametoacutecitos satildeo redondos ou ovais e ocupam toda ceacutelula hospedeira O citoplasma eacute geralmente corado de azul mais escuro e conteacutem pigmento marrom Microgametoacutecitos satildeo geralmente do tamanho de um RBC natildeo infectados com citoplasma corados de azul paacutelido rosa ou cinza
Trofozoiacutetos - P malariae
Esquizontes ndash P malariae
Aproximadamente 6 a 12 merozoiacutetos com arranjo de rosetas
Gametoacutecitos ndash P malariae
Ciclo evolutivo ndash HI
bull Ingestatildeo de hemaacutecias contendo gametoacutecitos durante o repasto sanguiacuteneo da fecircmea do anofelino
bull No intestino meacutedio do vetor gametogecircnese ndash Macrogametoacutecito ndash macrogameta feminino ndash Microgametoacutecito o processo de exflagelaccedilatildeo daacute
origem a 8 microgametas masculinos ndash Produccedilatildeo de ovo ou zigoto ndash O ovo encista na camada epitelial do intestino meacutedio
oocisto ndash Esporogonia liberaccedilatildeo de esporozoiacutetos
Ciclo evolutivo ndash HInvertebrado
ndash Os esporozoiacutetos satildeo transportados pelo hemolinfa ateacute as glacircndulas salivares do vetor ateacute atingirem o ducto salivar
bull Inoculaccedilatildeo no hospedeiro vertebrado atraveacutes da picada do inseto
Hemaacutecia com gametoacutecito
Fecircmeas de Anopheles sugam hemaacutecias com gametoacutecitos
CICLO NO INVERTEBRADO
No tubo digestivo
Zigoto
Penetraccedilatildeo na parede do tubo
digestivo
Migraccedilatildeo para as glacircndulas salivares
Desenvolvimento
Mosquito infectado
Diagnoacutestico
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado e espesso corado pelo Giemsa
bull Sangue colhido sem anticoagulante para melhor fixaccedilatildeo em lacircmina
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo espesso eacute mais eficiente para detecccedilatildeo da infecccedilatildeo
bull Esfregaccedilo delgado eacute mais eficiente para diferenciaccedilatildeo morfoloacutegica das espeacutecies
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo semiquantitativo
ndash Exame de 100 campos microscoacutepicos com resultado expresso pelo sistema de cruzes
Parasitos contados Nuacutemero de campos
microscoacutepicos cruzes
40 a 60 100 +2
1 1 +
2-20 1 ++
21-200 1 +++
+ 200 1 ++++
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo quantitativo derivado de anaacutelise semiquantitativa
Contagem de parasitos por campo
Cruzes Parasitos por mm3
40 a 60100 +2 200-300
1 + 301-500
2-20 ++ 501 - 10000
21-200 +++ 10001 ndash 100000
+ 200 ++++ 100000 ou mais
Diagnoacutestico
bull P falciparum
ndash Parte do ciclo celular aderido ao endoteacutelio capilar Encontro somente de trofozoitos e gametoacutecitos no sangue perifeacuterico
ndash Raramente os esquizontes satildeo encontrados no sangue perifeacuterico
Diagnoacutestico ndash Pvivax ndash Encontro de todas as formas de desenvolvimento ndash
trofozoiacuteto jovem maduro esquizontes e gametoacutecitos
ndash Os trofozoiacutetos maduros tecircm geralmente um aspecto irregular com extensotildees ameboacuteides em seu citoplasma
Diagnoacutestico ndash Pvivax
ndash Os gametoacutecitos femininos coram-se mais intensamente que os masculinos e apresentam nuacutecleo mais compacto geralmente em localizaccedilatildeo perifeacuterica
ndash O pigmento malaacuterico geralmente eacute abundante
Diagnoacutestico - Pmalariae
bull Realizado por meio de caracteriacutesticas morfoloacutegicas do parasito
ndash Verificaccedilatildeo em esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado
ndash Posiccedilatildeo equatorial do parasito
ndash Desenvolvimento sem deformaccedilatildeo do eritroacutecito
Diagnoacutestico
bull QBC ndash Teacutecnica que combina concentraccedilatildeo dos parasitos
pela centrifugaccedilatildeo do sangue em em microhematoacutecrito e a coloraccedilatildeo dos aacutecidos nucleacuteicos do parasito pelo fluorcromo laranja de acridina
ndash Utilizaccedilatildeo de tubos especiais e microscopia epifluorescente
ndash Teste raacutepido
ndash Alta sensibilidade
Diagnoacutestico
bull ParaSight-F ( Becton amp Dickinson)
ndash Teste raacutepido para captura da proteiacutena rica em histidina 2 de Pfalciparum( PfHRP2) e enzimas conservadas de 4 espeacutecies de plasmoacutedio (DHL e aldolase
ndash Utilizaccedilatildeo de fita de nitrocelulose contendo ac monoclonal
ndash Lise de uma gota de sangue
ndash A reaccedilatildeo eacute revelada com adiccedilatildeo de ac policlonal anti-HRP2 conjugado com lipossomas contendo corante
Diagnoacutestico
bull PCR
ndash Sensibilidade e especificidade maior do que o esfregaccedilo sanguiacuteneo
Gametoacutecito ndash Pvivax
Macrogametoacutecitos satildeo redondos ou ovais e ocupam toda ceacutelula hospedeira O citoplasma eacute geralmente corado de azul mais escuro e conteacutem pigmento marrom Microgametoacutecitos satildeo geralmente do tamanho de um RBC natildeo infectados com citoplasma corados de azul paacutelido rosa ou cinza
Trofozoiacutetos - P malariae
Esquizontes ndash P malariae
Aproximadamente 6 a 12 merozoiacutetos com arranjo de rosetas
Gametoacutecitos ndash P malariae
Ciclo evolutivo ndash HI
bull Ingestatildeo de hemaacutecias contendo gametoacutecitos durante o repasto sanguiacuteneo da fecircmea do anofelino
bull No intestino meacutedio do vetor gametogecircnese ndash Macrogametoacutecito ndash macrogameta feminino ndash Microgametoacutecito o processo de exflagelaccedilatildeo daacute
origem a 8 microgametas masculinos ndash Produccedilatildeo de ovo ou zigoto ndash O ovo encista na camada epitelial do intestino meacutedio
oocisto ndash Esporogonia liberaccedilatildeo de esporozoiacutetos
Ciclo evolutivo ndash HInvertebrado
ndash Os esporozoiacutetos satildeo transportados pelo hemolinfa ateacute as glacircndulas salivares do vetor ateacute atingirem o ducto salivar
bull Inoculaccedilatildeo no hospedeiro vertebrado atraveacutes da picada do inseto
Hemaacutecia com gametoacutecito
Fecircmeas de Anopheles sugam hemaacutecias com gametoacutecitos
CICLO NO INVERTEBRADO
No tubo digestivo
Zigoto
Penetraccedilatildeo na parede do tubo
digestivo
Migraccedilatildeo para as glacircndulas salivares
Desenvolvimento
Mosquito infectado
Diagnoacutestico
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado e espesso corado pelo Giemsa
bull Sangue colhido sem anticoagulante para melhor fixaccedilatildeo em lacircmina
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo espesso eacute mais eficiente para detecccedilatildeo da infecccedilatildeo
bull Esfregaccedilo delgado eacute mais eficiente para diferenciaccedilatildeo morfoloacutegica das espeacutecies
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo semiquantitativo
ndash Exame de 100 campos microscoacutepicos com resultado expresso pelo sistema de cruzes
Parasitos contados Nuacutemero de campos
microscoacutepicos cruzes
40 a 60 100 +2
1 1 +
2-20 1 ++
21-200 1 +++
+ 200 1 ++++
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo quantitativo derivado de anaacutelise semiquantitativa
Contagem de parasitos por campo
Cruzes Parasitos por mm3
40 a 60100 +2 200-300
1 + 301-500
2-20 ++ 501 - 10000
21-200 +++ 10001 ndash 100000
+ 200 ++++ 100000 ou mais
Diagnoacutestico
bull P falciparum
ndash Parte do ciclo celular aderido ao endoteacutelio capilar Encontro somente de trofozoitos e gametoacutecitos no sangue perifeacuterico
ndash Raramente os esquizontes satildeo encontrados no sangue perifeacuterico
Diagnoacutestico ndash Pvivax ndash Encontro de todas as formas de desenvolvimento ndash
trofozoiacuteto jovem maduro esquizontes e gametoacutecitos
ndash Os trofozoiacutetos maduros tecircm geralmente um aspecto irregular com extensotildees ameboacuteides em seu citoplasma
Diagnoacutestico ndash Pvivax
ndash Os gametoacutecitos femininos coram-se mais intensamente que os masculinos e apresentam nuacutecleo mais compacto geralmente em localizaccedilatildeo perifeacuterica
ndash O pigmento malaacuterico geralmente eacute abundante
Diagnoacutestico - Pmalariae
bull Realizado por meio de caracteriacutesticas morfoloacutegicas do parasito
ndash Verificaccedilatildeo em esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado
ndash Posiccedilatildeo equatorial do parasito
ndash Desenvolvimento sem deformaccedilatildeo do eritroacutecito
Diagnoacutestico
bull QBC ndash Teacutecnica que combina concentraccedilatildeo dos parasitos
pela centrifugaccedilatildeo do sangue em em microhematoacutecrito e a coloraccedilatildeo dos aacutecidos nucleacuteicos do parasito pelo fluorcromo laranja de acridina
ndash Utilizaccedilatildeo de tubos especiais e microscopia epifluorescente
ndash Teste raacutepido
ndash Alta sensibilidade
Diagnoacutestico
bull ParaSight-F ( Becton amp Dickinson)
ndash Teste raacutepido para captura da proteiacutena rica em histidina 2 de Pfalciparum( PfHRP2) e enzimas conservadas de 4 espeacutecies de plasmoacutedio (DHL e aldolase
ndash Utilizaccedilatildeo de fita de nitrocelulose contendo ac monoclonal
ndash Lise de uma gota de sangue
ndash A reaccedilatildeo eacute revelada com adiccedilatildeo de ac policlonal anti-HRP2 conjugado com lipossomas contendo corante
Diagnoacutestico
bull PCR
ndash Sensibilidade e especificidade maior do que o esfregaccedilo sanguiacuteneo
Trofozoiacutetos - P malariae
Esquizontes ndash P malariae
Aproximadamente 6 a 12 merozoiacutetos com arranjo de rosetas
Gametoacutecitos ndash P malariae
Ciclo evolutivo ndash HI
bull Ingestatildeo de hemaacutecias contendo gametoacutecitos durante o repasto sanguiacuteneo da fecircmea do anofelino
bull No intestino meacutedio do vetor gametogecircnese ndash Macrogametoacutecito ndash macrogameta feminino ndash Microgametoacutecito o processo de exflagelaccedilatildeo daacute
origem a 8 microgametas masculinos ndash Produccedilatildeo de ovo ou zigoto ndash O ovo encista na camada epitelial do intestino meacutedio
oocisto ndash Esporogonia liberaccedilatildeo de esporozoiacutetos
Ciclo evolutivo ndash HInvertebrado
ndash Os esporozoiacutetos satildeo transportados pelo hemolinfa ateacute as glacircndulas salivares do vetor ateacute atingirem o ducto salivar
bull Inoculaccedilatildeo no hospedeiro vertebrado atraveacutes da picada do inseto
Hemaacutecia com gametoacutecito
Fecircmeas de Anopheles sugam hemaacutecias com gametoacutecitos
CICLO NO INVERTEBRADO
No tubo digestivo
Zigoto
Penetraccedilatildeo na parede do tubo
digestivo
Migraccedilatildeo para as glacircndulas salivares
Desenvolvimento
Mosquito infectado
Diagnoacutestico
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado e espesso corado pelo Giemsa
bull Sangue colhido sem anticoagulante para melhor fixaccedilatildeo em lacircmina
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo espesso eacute mais eficiente para detecccedilatildeo da infecccedilatildeo
bull Esfregaccedilo delgado eacute mais eficiente para diferenciaccedilatildeo morfoloacutegica das espeacutecies
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo semiquantitativo
ndash Exame de 100 campos microscoacutepicos com resultado expresso pelo sistema de cruzes
Parasitos contados Nuacutemero de campos
microscoacutepicos cruzes
40 a 60 100 +2
1 1 +
2-20 1 ++
21-200 1 +++
+ 200 1 ++++
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo quantitativo derivado de anaacutelise semiquantitativa
Contagem de parasitos por campo
Cruzes Parasitos por mm3
40 a 60100 +2 200-300
1 + 301-500
2-20 ++ 501 - 10000
21-200 +++ 10001 ndash 100000
+ 200 ++++ 100000 ou mais
Diagnoacutestico
bull P falciparum
ndash Parte do ciclo celular aderido ao endoteacutelio capilar Encontro somente de trofozoitos e gametoacutecitos no sangue perifeacuterico
ndash Raramente os esquizontes satildeo encontrados no sangue perifeacuterico
Diagnoacutestico ndash Pvivax ndash Encontro de todas as formas de desenvolvimento ndash
trofozoiacuteto jovem maduro esquizontes e gametoacutecitos
ndash Os trofozoiacutetos maduros tecircm geralmente um aspecto irregular com extensotildees ameboacuteides em seu citoplasma
Diagnoacutestico ndash Pvivax
ndash Os gametoacutecitos femininos coram-se mais intensamente que os masculinos e apresentam nuacutecleo mais compacto geralmente em localizaccedilatildeo perifeacuterica
ndash O pigmento malaacuterico geralmente eacute abundante
Diagnoacutestico - Pmalariae
bull Realizado por meio de caracteriacutesticas morfoloacutegicas do parasito
ndash Verificaccedilatildeo em esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado
ndash Posiccedilatildeo equatorial do parasito
ndash Desenvolvimento sem deformaccedilatildeo do eritroacutecito
Diagnoacutestico
bull QBC ndash Teacutecnica que combina concentraccedilatildeo dos parasitos
pela centrifugaccedilatildeo do sangue em em microhematoacutecrito e a coloraccedilatildeo dos aacutecidos nucleacuteicos do parasito pelo fluorcromo laranja de acridina
ndash Utilizaccedilatildeo de tubos especiais e microscopia epifluorescente
ndash Teste raacutepido
ndash Alta sensibilidade
Diagnoacutestico
bull ParaSight-F ( Becton amp Dickinson)
ndash Teste raacutepido para captura da proteiacutena rica em histidina 2 de Pfalciparum( PfHRP2) e enzimas conservadas de 4 espeacutecies de plasmoacutedio (DHL e aldolase
ndash Utilizaccedilatildeo de fita de nitrocelulose contendo ac monoclonal
ndash Lise de uma gota de sangue
ndash A reaccedilatildeo eacute revelada com adiccedilatildeo de ac policlonal anti-HRP2 conjugado com lipossomas contendo corante
Diagnoacutestico
bull PCR
ndash Sensibilidade e especificidade maior do que o esfregaccedilo sanguiacuteneo
Esquizontes ndash P malariae
Aproximadamente 6 a 12 merozoiacutetos com arranjo de rosetas
Gametoacutecitos ndash P malariae
Ciclo evolutivo ndash HI
bull Ingestatildeo de hemaacutecias contendo gametoacutecitos durante o repasto sanguiacuteneo da fecircmea do anofelino
bull No intestino meacutedio do vetor gametogecircnese ndash Macrogametoacutecito ndash macrogameta feminino ndash Microgametoacutecito o processo de exflagelaccedilatildeo daacute
origem a 8 microgametas masculinos ndash Produccedilatildeo de ovo ou zigoto ndash O ovo encista na camada epitelial do intestino meacutedio
oocisto ndash Esporogonia liberaccedilatildeo de esporozoiacutetos
Ciclo evolutivo ndash HInvertebrado
ndash Os esporozoiacutetos satildeo transportados pelo hemolinfa ateacute as glacircndulas salivares do vetor ateacute atingirem o ducto salivar
bull Inoculaccedilatildeo no hospedeiro vertebrado atraveacutes da picada do inseto
Hemaacutecia com gametoacutecito
Fecircmeas de Anopheles sugam hemaacutecias com gametoacutecitos
CICLO NO INVERTEBRADO
No tubo digestivo
Zigoto
Penetraccedilatildeo na parede do tubo
digestivo
Migraccedilatildeo para as glacircndulas salivares
Desenvolvimento
Mosquito infectado
Diagnoacutestico
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado e espesso corado pelo Giemsa
bull Sangue colhido sem anticoagulante para melhor fixaccedilatildeo em lacircmina
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo espesso eacute mais eficiente para detecccedilatildeo da infecccedilatildeo
bull Esfregaccedilo delgado eacute mais eficiente para diferenciaccedilatildeo morfoloacutegica das espeacutecies
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo semiquantitativo
ndash Exame de 100 campos microscoacutepicos com resultado expresso pelo sistema de cruzes
Parasitos contados Nuacutemero de campos
microscoacutepicos cruzes
40 a 60 100 +2
1 1 +
2-20 1 ++
21-200 1 +++
+ 200 1 ++++
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo quantitativo derivado de anaacutelise semiquantitativa
Contagem de parasitos por campo
Cruzes Parasitos por mm3
40 a 60100 +2 200-300
1 + 301-500
2-20 ++ 501 - 10000
21-200 +++ 10001 ndash 100000
+ 200 ++++ 100000 ou mais
Diagnoacutestico
bull P falciparum
ndash Parte do ciclo celular aderido ao endoteacutelio capilar Encontro somente de trofozoitos e gametoacutecitos no sangue perifeacuterico
ndash Raramente os esquizontes satildeo encontrados no sangue perifeacuterico
Diagnoacutestico ndash Pvivax ndash Encontro de todas as formas de desenvolvimento ndash
trofozoiacuteto jovem maduro esquizontes e gametoacutecitos
ndash Os trofozoiacutetos maduros tecircm geralmente um aspecto irregular com extensotildees ameboacuteides em seu citoplasma
Diagnoacutestico ndash Pvivax
ndash Os gametoacutecitos femininos coram-se mais intensamente que os masculinos e apresentam nuacutecleo mais compacto geralmente em localizaccedilatildeo perifeacuterica
ndash O pigmento malaacuterico geralmente eacute abundante
Diagnoacutestico - Pmalariae
bull Realizado por meio de caracteriacutesticas morfoloacutegicas do parasito
ndash Verificaccedilatildeo em esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado
ndash Posiccedilatildeo equatorial do parasito
ndash Desenvolvimento sem deformaccedilatildeo do eritroacutecito
Diagnoacutestico
bull QBC ndash Teacutecnica que combina concentraccedilatildeo dos parasitos
pela centrifugaccedilatildeo do sangue em em microhematoacutecrito e a coloraccedilatildeo dos aacutecidos nucleacuteicos do parasito pelo fluorcromo laranja de acridina
ndash Utilizaccedilatildeo de tubos especiais e microscopia epifluorescente
ndash Teste raacutepido
ndash Alta sensibilidade
Diagnoacutestico
bull ParaSight-F ( Becton amp Dickinson)
ndash Teste raacutepido para captura da proteiacutena rica em histidina 2 de Pfalciparum( PfHRP2) e enzimas conservadas de 4 espeacutecies de plasmoacutedio (DHL e aldolase
ndash Utilizaccedilatildeo de fita de nitrocelulose contendo ac monoclonal
ndash Lise de uma gota de sangue
ndash A reaccedilatildeo eacute revelada com adiccedilatildeo de ac policlonal anti-HRP2 conjugado com lipossomas contendo corante
Diagnoacutestico
bull PCR
ndash Sensibilidade e especificidade maior do que o esfregaccedilo sanguiacuteneo
Gametoacutecitos ndash P malariae
Ciclo evolutivo ndash HI
bull Ingestatildeo de hemaacutecias contendo gametoacutecitos durante o repasto sanguiacuteneo da fecircmea do anofelino
bull No intestino meacutedio do vetor gametogecircnese ndash Macrogametoacutecito ndash macrogameta feminino ndash Microgametoacutecito o processo de exflagelaccedilatildeo daacute
origem a 8 microgametas masculinos ndash Produccedilatildeo de ovo ou zigoto ndash O ovo encista na camada epitelial do intestino meacutedio
oocisto ndash Esporogonia liberaccedilatildeo de esporozoiacutetos
Ciclo evolutivo ndash HInvertebrado
ndash Os esporozoiacutetos satildeo transportados pelo hemolinfa ateacute as glacircndulas salivares do vetor ateacute atingirem o ducto salivar
bull Inoculaccedilatildeo no hospedeiro vertebrado atraveacutes da picada do inseto
Hemaacutecia com gametoacutecito
Fecircmeas de Anopheles sugam hemaacutecias com gametoacutecitos
CICLO NO INVERTEBRADO
No tubo digestivo
Zigoto
Penetraccedilatildeo na parede do tubo
digestivo
Migraccedilatildeo para as glacircndulas salivares
Desenvolvimento
Mosquito infectado
Diagnoacutestico
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado e espesso corado pelo Giemsa
bull Sangue colhido sem anticoagulante para melhor fixaccedilatildeo em lacircmina
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo espesso eacute mais eficiente para detecccedilatildeo da infecccedilatildeo
bull Esfregaccedilo delgado eacute mais eficiente para diferenciaccedilatildeo morfoloacutegica das espeacutecies
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo semiquantitativo
ndash Exame de 100 campos microscoacutepicos com resultado expresso pelo sistema de cruzes
Parasitos contados Nuacutemero de campos
microscoacutepicos cruzes
40 a 60 100 +2
1 1 +
2-20 1 ++
21-200 1 +++
+ 200 1 ++++
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo quantitativo derivado de anaacutelise semiquantitativa
Contagem de parasitos por campo
Cruzes Parasitos por mm3
40 a 60100 +2 200-300
1 + 301-500
2-20 ++ 501 - 10000
21-200 +++ 10001 ndash 100000
+ 200 ++++ 100000 ou mais
Diagnoacutestico
bull P falciparum
ndash Parte do ciclo celular aderido ao endoteacutelio capilar Encontro somente de trofozoitos e gametoacutecitos no sangue perifeacuterico
ndash Raramente os esquizontes satildeo encontrados no sangue perifeacuterico
Diagnoacutestico ndash Pvivax ndash Encontro de todas as formas de desenvolvimento ndash
trofozoiacuteto jovem maduro esquizontes e gametoacutecitos
ndash Os trofozoiacutetos maduros tecircm geralmente um aspecto irregular com extensotildees ameboacuteides em seu citoplasma
Diagnoacutestico ndash Pvivax
ndash Os gametoacutecitos femininos coram-se mais intensamente que os masculinos e apresentam nuacutecleo mais compacto geralmente em localizaccedilatildeo perifeacuterica
ndash O pigmento malaacuterico geralmente eacute abundante
Diagnoacutestico - Pmalariae
bull Realizado por meio de caracteriacutesticas morfoloacutegicas do parasito
ndash Verificaccedilatildeo em esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado
ndash Posiccedilatildeo equatorial do parasito
ndash Desenvolvimento sem deformaccedilatildeo do eritroacutecito
Diagnoacutestico
bull QBC ndash Teacutecnica que combina concentraccedilatildeo dos parasitos
pela centrifugaccedilatildeo do sangue em em microhematoacutecrito e a coloraccedilatildeo dos aacutecidos nucleacuteicos do parasito pelo fluorcromo laranja de acridina
ndash Utilizaccedilatildeo de tubos especiais e microscopia epifluorescente
ndash Teste raacutepido
ndash Alta sensibilidade
Diagnoacutestico
bull ParaSight-F ( Becton amp Dickinson)
ndash Teste raacutepido para captura da proteiacutena rica em histidina 2 de Pfalciparum( PfHRP2) e enzimas conservadas de 4 espeacutecies de plasmoacutedio (DHL e aldolase
ndash Utilizaccedilatildeo de fita de nitrocelulose contendo ac monoclonal
ndash Lise de uma gota de sangue
ndash A reaccedilatildeo eacute revelada com adiccedilatildeo de ac policlonal anti-HRP2 conjugado com lipossomas contendo corante
Diagnoacutestico
bull PCR
ndash Sensibilidade e especificidade maior do que o esfregaccedilo sanguiacuteneo
Ciclo evolutivo ndash HI
bull Ingestatildeo de hemaacutecias contendo gametoacutecitos durante o repasto sanguiacuteneo da fecircmea do anofelino
bull No intestino meacutedio do vetor gametogecircnese ndash Macrogametoacutecito ndash macrogameta feminino ndash Microgametoacutecito o processo de exflagelaccedilatildeo daacute
origem a 8 microgametas masculinos ndash Produccedilatildeo de ovo ou zigoto ndash O ovo encista na camada epitelial do intestino meacutedio
oocisto ndash Esporogonia liberaccedilatildeo de esporozoiacutetos
Ciclo evolutivo ndash HInvertebrado
ndash Os esporozoiacutetos satildeo transportados pelo hemolinfa ateacute as glacircndulas salivares do vetor ateacute atingirem o ducto salivar
bull Inoculaccedilatildeo no hospedeiro vertebrado atraveacutes da picada do inseto
Hemaacutecia com gametoacutecito
Fecircmeas de Anopheles sugam hemaacutecias com gametoacutecitos
CICLO NO INVERTEBRADO
No tubo digestivo
Zigoto
Penetraccedilatildeo na parede do tubo
digestivo
Migraccedilatildeo para as glacircndulas salivares
Desenvolvimento
Mosquito infectado
Diagnoacutestico
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado e espesso corado pelo Giemsa
bull Sangue colhido sem anticoagulante para melhor fixaccedilatildeo em lacircmina
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo espesso eacute mais eficiente para detecccedilatildeo da infecccedilatildeo
bull Esfregaccedilo delgado eacute mais eficiente para diferenciaccedilatildeo morfoloacutegica das espeacutecies
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo semiquantitativo
ndash Exame de 100 campos microscoacutepicos com resultado expresso pelo sistema de cruzes
Parasitos contados Nuacutemero de campos
microscoacutepicos cruzes
40 a 60 100 +2
1 1 +
2-20 1 ++
21-200 1 +++
+ 200 1 ++++
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo quantitativo derivado de anaacutelise semiquantitativa
Contagem de parasitos por campo
Cruzes Parasitos por mm3
40 a 60100 +2 200-300
1 + 301-500
2-20 ++ 501 - 10000
21-200 +++ 10001 ndash 100000
+ 200 ++++ 100000 ou mais
Diagnoacutestico
bull P falciparum
ndash Parte do ciclo celular aderido ao endoteacutelio capilar Encontro somente de trofozoitos e gametoacutecitos no sangue perifeacuterico
ndash Raramente os esquizontes satildeo encontrados no sangue perifeacuterico
Diagnoacutestico ndash Pvivax ndash Encontro de todas as formas de desenvolvimento ndash
trofozoiacuteto jovem maduro esquizontes e gametoacutecitos
ndash Os trofozoiacutetos maduros tecircm geralmente um aspecto irregular com extensotildees ameboacuteides em seu citoplasma
Diagnoacutestico ndash Pvivax
ndash Os gametoacutecitos femininos coram-se mais intensamente que os masculinos e apresentam nuacutecleo mais compacto geralmente em localizaccedilatildeo perifeacuterica
ndash O pigmento malaacuterico geralmente eacute abundante
Diagnoacutestico - Pmalariae
bull Realizado por meio de caracteriacutesticas morfoloacutegicas do parasito
ndash Verificaccedilatildeo em esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado
ndash Posiccedilatildeo equatorial do parasito
ndash Desenvolvimento sem deformaccedilatildeo do eritroacutecito
Diagnoacutestico
bull QBC ndash Teacutecnica que combina concentraccedilatildeo dos parasitos
pela centrifugaccedilatildeo do sangue em em microhematoacutecrito e a coloraccedilatildeo dos aacutecidos nucleacuteicos do parasito pelo fluorcromo laranja de acridina
ndash Utilizaccedilatildeo de tubos especiais e microscopia epifluorescente
ndash Teste raacutepido
ndash Alta sensibilidade
Diagnoacutestico
bull ParaSight-F ( Becton amp Dickinson)
ndash Teste raacutepido para captura da proteiacutena rica em histidina 2 de Pfalciparum( PfHRP2) e enzimas conservadas de 4 espeacutecies de plasmoacutedio (DHL e aldolase
ndash Utilizaccedilatildeo de fita de nitrocelulose contendo ac monoclonal
ndash Lise de uma gota de sangue
ndash A reaccedilatildeo eacute revelada com adiccedilatildeo de ac policlonal anti-HRP2 conjugado com lipossomas contendo corante
Diagnoacutestico
bull PCR
ndash Sensibilidade e especificidade maior do que o esfregaccedilo sanguiacuteneo
Ciclo evolutivo ndash HInvertebrado
ndash Os esporozoiacutetos satildeo transportados pelo hemolinfa ateacute as glacircndulas salivares do vetor ateacute atingirem o ducto salivar
bull Inoculaccedilatildeo no hospedeiro vertebrado atraveacutes da picada do inseto
Hemaacutecia com gametoacutecito
Fecircmeas de Anopheles sugam hemaacutecias com gametoacutecitos
CICLO NO INVERTEBRADO
No tubo digestivo
Zigoto
Penetraccedilatildeo na parede do tubo
digestivo
Migraccedilatildeo para as glacircndulas salivares
Desenvolvimento
Mosquito infectado
Diagnoacutestico
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado e espesso corado pelo Giemsa
bull Sangue colhido sem anticoagulante para melhor fixaccedilatildeo em lacircmina
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo espesso eacute mais eficiente para detecccedilatildeo da infecccedilatildeo
bull Esfregaccedilo delgado eacute mais eficiente para diferenciaccedilatildeo morfoloacutegica das espeacutecies
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo semiquantitativo
ndash Exame de 100 campos microscoacutepicos com resultado expresso pelo sistema de cruzes
Parasitos contados Nuacutemero de campos
microscoacutepicos cruzes
40 a 60 100 +2
1 1 +
2-20 1 ++
21-200 1 +++
+ 200 1 ++++
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo quantitativo derivado de anaacutelise semiquantitativa
Contagem de parasitos por campo
Cruzes Parasitos por mm3
40 a 60100 +2 200-300
1 + 301-500
2-20 ++ 501 - 10000
21-200 +++ 10001 ndash 100000
+ 200 ++++ 100000 ou mais
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bull P falciparum
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ndash Raramente os esquizontes satildeo encontrados no sangue perifeacuterico
Diagnoacutestico ndash Pvivax ndash Encontro de todas as formas de desenvolvimento ndash
trofozoiacuteto jovem maduro esquizontes e gametoacutecitos
ndash Os trofozoiacutetos maduros tecircm geralmente um aspecto irregular com extensotildees ameboacuteides em seu citoplasma
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ndash Os gametoacutecitos femininos coram-se mais intensamente que os masculinos e apresentam nuacutecleo mais compacto geralmente em localizaccedilatildeo perifeacuterica
ndash O pigmento malaacuterico geralmente eacute abundante
Diagnoacutestico - Pmalariae
bull Realizado por meio de caracteriacutesticas morfoloacutegicas do parasito
ndash Verificaccedilatildeo em esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado
ndash Posiccedilatildeo equatorial do parasito
ndash Desenvolvimento sem deformaccedilatildeo do eritroacutecito
Diagnoacutestico
bull QBC ndash Teacutecnica que combina concentraccedilatildeo dos parasitos
pela centrifugaccedilatildeo do sangue em em microhematoacutecrito e a coloraccedilatildeo dos aacutecidos nucleacuteicos do parasito pelo fluorcromo laranja de acridina
ndash Utilizaccedilatildeo de tubos especiais e microscopia epifluorescente
ndash Teste raacutepido
ndash Alta sensibilidade
Diagnoacutestico
bull ParaSight-F ( Becton amp Dickinson)
ndash Teste raacutepido para captura da proteiacutena rica em histidina 2 de Pfalciparum( PfHRP2) e enzimas conservadas de 4 espeacutecies de plasmoacutedio (DHL e aldolase
ndash Utilizaccedilatildeo de fita de nitrocelulose contendo ac monoclonal
ndash Lise de uma gota de sangue
ndash A reaccedilatildeo eacute revelada com adiccedilatildeo de ac policlonal anti-HRP2 conjugado com lipossomas contendo corante
Diagnoacutestico
bull PCR
ndash Sensibilidade e especificidade maior do que o esfregaccedilo sanguiacuteneo
Hemaacutecia com gametoacutecito
Fecircmeas de Anopheles sugam hemaacutecias com gametoacutecitos
CICLO NO INVERTEBRADO
No tubo digestivo
Zigoto
Penetraccedilatildeo na parede do tubo
digestivo
Migraccedilatildeo para as glacircndulas salivares
Desenvolvimento
Mosquito infectado
Diagnoacutestico
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado e espesso corado pelo Giemsa
bull Sangue colhido sem anticoagulante para melhor fixaccedilatildeo em lacircmina
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo espesso eacute mais eficiente para detecccedilatildeo da infecccedilatildeo
bull Esfregaccedilo delgado eacute mais eficiente para diferenciaccedilatildeo morfoloacutegica das espeacutecies
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo semiquantitativo
ndash Exame de 100 campos microscoacutepicos com resultado expresso pelo sistema de cruzes
Parasitos contados Nuacutemero de campos
microscoacutepicos cruzes
40 a 60 100 +2
1 1 +
2-20 1 ++
21-200 1 +++
+ 200 1 ++++
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo quantitativo derivado de anaacutelise semiquantitativa
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Cruzes Parasitos por mm3
40 a 60100 +2 200-300
1 + 301-500
2-20 ++ 501 - 10000
21-200 +++ 10001 ndash 100000
+ 200 ++++ 100000 ou mais
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bull P falciparum
ndash Parte do ciclo celular aderido ao endoteacutelio capilar Encontro somente de trofozoitos e gametoacutecitos no sangue perifeacuterico
ndash Raramente os esquizontes satildeo encontrados no sangue perifeacuterico
Diagnoacutestico ndash Pvivax ndash Encontro de todas as formas de desenvolvimento ndash
trofozoiacuteto jovem maduro esquizontes e gametoacutecitos
ndash Os trofozoiacutetos maduros tecircm geralmente um aspecto irregular com extensotildees ameboacuteides em seu citoplasma
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ndash Os gametoacutecitos femininos coram-se mais intensamente que os masculinos e apresentam nuacutecleo mais compacto geralmente em localizaccedilatildeo perifeacuterica
ndash O pigmento malaacuterico geralmente eacute abundante
Diagnoacutestico - Pmalariae
bull Realizado por meio de caracteriacutesticas morfoloacutegicas do parasito
ndash Verificaccedilatildeo em esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado
ndash Posiccedilatildeo equatorial do parasito
ndash Desenvolvimento sem deformaccedilatildeo do eritroacutecito
Diagnoacutestico
bull QBC ndash Teacutecnica que combina concentraccedilatildeo dos parasitos
pela centrifugaccedilatildeo do sangue em em microhematoacutecrito e a coloraccedilatildeo dos aacutecidos nucleacuteicos do parasito pelo fluorcromo laranja de acridina
ndash Utilizaccedilatildeo de tubos especiais e microscopia epifluorescente
ndash Teste raacutepido
ndash Alta sensibilidade
Diagnoacutestico
bull ParaSight-F ( Becton amp Dickinson)
ndash Teste raacutepido para captura da proteiacutena rica em histidina 2 de Pfalciparum( PfHRP2) e enzimas conservadas de 4 espeacutecies de plasmoacutedio (DHL e aldolase
ndash Utilizaccedilatildeo de fita de nitrocelulose contendo ac monoclonal
ndash Lise de uma gota de sangue
ndash A reaccedilatildeo eacute revelada com adiccedilatildeo de ac policlonal anti-HRP2 conjugado com lipossomas contendo corante
Diagnoacutestico
bull PCR
ndash Sensibilidade e especificidade maior do que o esfregaccedilo sanguiacuteneo
Diagnoacutestico
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado e espesso corado pelo Giemsa
bull Sangue colhido sem anticoagulante para melhor fixaccedilatildeo em lacircmina
bull Esfregaccedilo sanguiacuteneo espesso eacute mais eficiente para detecccedilatildeo da infecccedilatildeo
bull Esfregaccedilo delgado eacute mais eficiente para diferenciaccedilatildeo morfoloacutegica das espeacutecies
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo semiquantitativo
ndash Exame de 100 campos microscoacutepicos com resultado expresso pelo sistema de cruzes
Parasitos contados Nuacutemero de campos
microscoacutepicos cruzes
40 a 60 100 +2
1 1 +
2-20 1 ++
21-200 1 +++
+ 200 1 ++++
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo quantitativo derivado de anaacutelise semiquantitativa
Contagem de parasitos por campo
Cruzes Parasitos por mm3
40 a 60100 +2 200-300
1 + 301-500
2-20 ++ 501 - 10000
21-200 +++ 10001 ndash 100000
+ 200 ++++ 100000 ou mais
Diagnoacutestico
bull P falciparum
ndash Parte do ciclo celular aderido ao endoteacutelio capilar Encontro somente de trofozoitos e gametoacutecitos no sangue perifeacuterico
ndash Raramente os esquizontes satildeo encontrados no sangue perifeacuterico
Diagnoacutestico ndash Pvivax ndash Encontro de todas as formas de desenvolvimento ndash
trofozoiacuteto jovem maduro esquizontes e gametoacutecitos
ndash Os trofozoiacutetos maduros tecircm geralmente um aspecto irregular com extensotildees ameboacuteides em seu citoplasma
Diagnoacutestico ndash Pvivax
ndash Os gametoacutecitos femininos coram-se mais intensamente que os masculinos e apresentam nuacutecleo mais compacto geralmente em localizaccedilatildeo perifeacuterica
ndash O pigmento malaacuterico geralmente eacute abundante
Diagnoacutestico - Pmalariae
bull Realizado por meio de caracteriacutesticas morfoloacutegicas do parasito
ndash Verificaccedilatildeo em esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado
ndash Posiccedilatildeo equatorial do parasito
ndash Desenvolvimento sem deformaccedilatildeo do eritroacutecito
Diagnoacutestico
bull QBC ndash Teacutecnica que combina concentraccedilatildeo dos parasitos
pela centrifugaccedilatildeo do sangue em em microhematoacutecrito e a coloraccedilatildeo dos aacutecidos nucleacuteicos do parasito pelo fluorcromo laranja de acridina
ndash Utilizaccedilatildeo de tubos especiais e microscopia epifluorescente
ndash Teste raacutepido
ndash Alta sensibilidade
Diagnoacutestico
bull ParaSight-F ( Becton amp Dickinson)
ndash Teste raacutepido para captura da proteiacutena rica em histidina 2 de Pfalciparum( PfHRP2) e enzimas conservadas de 4 espeacutecies de plasmoacutedio (DHL e aldolase
ndash Utilizaccedilatildeo de fita de nitrocelulose contendo ac monoclonal
ndash Lise de uma gota de sangue
ndash A reaccedilatildeo eacute revelada com adiccedilatildeo de ac policlonal anti-HRP2 conjugado com lipossomas contendo corante
Diagnoacutestico
bull PCR
ndash Sensibilidade e especificidade maior do que o esfregaccedilo sanguiacuteneo
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo semiquantitativo
ndash Exame de 100 campos microscoacutepicos com resultado expresso pelo sistema de cruzes
Parasitos contados Nuacutemero de campos
microscoacutepicos cruzes
40 a 60 100 +2
1 1 +
2-20 1 ++
21-200 1 +++
+ 200 1 ++++
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo quantitativo derivado de anaacutelise semiquantitativa
Contagem de parasitos por campo
Cruzes Parasitos por mm3
40 a 60100 +2 200-300
1 + 301-500
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21-200 +++ 10001 ndash 100000
+ 200 ++++ 100000 ou mais
Diagnoacutestico
bull P falciparum
ndash Parte do ciclo celular aderido ao endoteacutelio capilar Encontro somente de trofozoitos e gametoacutecitos no sangue perifeacuterico
ndash Raramente os esquizontes satildeo encontrados no sangue perifeacuterico
Diagnoacutestico ndash Pvivax ndash Encontro de todas as formas de desenvolvimento ndash
trofozoiacuteto jovem maduro esquizontes e gametoacutecitos
ndash Os trofozoiacutetos maduros tecircm geralmente um aspecto irregular com extensotildees ameboacuteides em seu citoplasma
Diagnoacutestico ndash Pvivax
ndash Os gametoacutecitos femininos coram-se mais intensamente que os masculinos e apresentam nuacutecleo mais compacto geralmente em localizaccedilatildeo perifeacuterica
ndash O pigmento malaacuterico geralmente eacute abundante
Diagnoacutestico - Pmalariae
bull Realizado por meio de caracteriacutesticas morfoloacutegicas do parasito
ndash Verificaccedilatildeo em esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado
ndash Posiccedilatildeo equatorial do parasito
ndash Desenvolvimento sem deformaccedilatildeo do eritroacutecito
Diagnoacutestico
bull QBC ndash Teacutecnica que combina concentraccedilatildeo dos parasitos
pela centrifugaccedilatildeo do sangue em em microhematoacutecrito e a coloraccedilatildeo dos aacutecidos nucleacuteicos do parasito pelo fluorcromo laranja de acridina
ndash Utilizaccedilatildeo de tubos especiais e microscopia epifluorescente
ndash Teste raacutepido
ndash Alta sensibilidade
Diagnoacutestico
bull ParaSight-F ( Becton amp Dickinson)
ndash Teste raacutepido para captura da proteiacutena rica em histidina 2 de Pfalciparum( PfHRP2) e enzimas conservadas de 4 espeacutecies de plasmoacutedio (DHL e aldolase
ndash Utilizaccedilatildeo de fita de nitrocelulose contendo ac monoclonal
ndash Lise de uma gota de sangue
ndash A reaccedilatildeo eacute revelada com adiccedilatildeo de ac policlonal anti-HRP2 conjugado com lipossomas contendo corante
Diagnoacutestico
bull PCR
ndash Sensibilidade e especificidade maior do que o esfregaccedilo sanguiacuteneo
Determinaccedilatildeo da densidade parasitaacuteria
bull Meacutetodo quantitativo derivado de anaacutelise semiquantitativa
Contagem de parasitos por campo
Cruzes Parasitos por mm3
40 a 60100 +2 200-300
1 + 301-500
2-20 ++ 501 - 10000
21-200 +++ 10001 ndash 100000
+ 200 ++++ 100000 ou mais
Diagnoacutestico
bull P falciparum
ndash Parte do ciclo celular aderido ao endoteacutelio capilar Encontro somente de trofozoitos e gametoacutecitos no sangue perifeacuterico
ndash Raramente os esquizontes satildeo encontrados no sangue perifeacuterico
Diagnoacutestico ndash Pvivax ndash Encontro de todas as formas de desenvolvimento ndash
trofozoiacuteto jovem maduro esquizontes e gametoacutecitos
ndash Os trofozoiacutetos maduros tecircm geralmente um aspecto irregular com extensotildees ameboacuteides em seu citoplasma
Diagnoacutestico ndash Pvivax
ndash Os gametoacutecitos femininos coram-se mais intensamente que os masculinos e apresentam nuacutecleo mais compacto geralmente em localizaccedilatildeo perifeacuterica
ndash O pigmento malaacuterico geralmente eacute abundante
Diagnoacutestico - Pmalariae
bull Realizado por meio de caracteriacutesticas morfoloacutegicas do parasito
ndash Verificaccedilatildeo em esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado
ndash Posiccedilatildeo equatorial do parasito
ndash Desenvolvimento sem deformaccedilatildeo do eritroacutecito
Diagnoacutestico
bull QBC ndash Teacutecnica que combina concentraccedilatildeo dos parasitos
pela centrifugaccedilatildeo do sangue em em microhematoacutecrito e a coloraccedilatildeo dos aacutecidos nucleacuteicos do parasito pelo fluorcromo laranja de acridina
ndash Utilizaccedilatildeo de tubos especiais e microscopia epifluorescente
ndash Teste raacutepido
ndash Alta sensibilidade
Diagnoacutestico
bull ParaSight-F ( Becton amp Dickinson)
ndash Teste raacutepido para captura da proteiacutena rica em histidina 2 de Pfalciparum( PfHRP2) e enzimas conservadas de 4 espeacutecies de plasmoacutedio (DHL e aldolase
ndash Utilizaccedilatildeo de fita de nitrocelulose contendo ac monoclonal
ndash Lise de uma gota de sangue
ndash A reaccedilatildeo eacute revelada com adiccedilatildeo de ac policlonal anti-HRP2 conjugado com lipossomas contendo corante
Diagnoacutestico
bull PCR
ndash Sensibilidade e especificidade maior do que o esfregaccedilo sanguiacuteneo
Diagnoacutestico
bull P falciparum
ndash Parte do ciclo celular aderido ao endoteacutelio capilar Encontro somente de trofozoitos e gametoacutecitos no sangue perifeacuterico
ndash Raramente os esquizontes satildeo encontrados no sangue perifeacuterico
Diagnoacutestico ndash Pvivax ndash Encontro de todas as formas de desenvolvimento ndash
trofozoiacuteto jovem maduro esquizontes e gametoacutecitos
ndash Os trofozoiacutetos maduros tecircm geralmente um aspecto irregular com extensotildees ameboacuteides em seu citoplasma
Diagnoacutestico ndash Pvivax
ndash Os gametoacutecitos femininos coram-se mais intensamente que os masculinos e apresentam nuacutecleo mais compacto geralmente em localizaccedilatildeo perifeacuterica
ndash O pigmento malaacuterico geralmente eacute abundante
Diagnoacutestico - Pmalariae
bull Realizado por meio de caracteriacutesticas morfoloacutegicas do parasito
ndash Verificaccedilatildeo em esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado
ndash Posiccedilatildeo equatorial do parasito
ndash Desenvolvimento sem deformaccedilatildeo do eritroacutecito
Diagnoacutestico
bull QBC ndash Teacutecnica que combina concentraccedilatildeo dos parasitos
pela centrifugaccedilatildeo do sangue em em microhematoacutecrito e a coloraccedilatildeo dos aacutecidos nucleacuteicos do parasito pelo fluorcromo laranja de acridina
ndash Utilizaccedilatildeo de tubos especiais e microscopia epifluorescente
ndash Teste raacutepido
ndash Alta sensibilidade
Diagnoacutestico
bull ParaSight-F ( Becton amp Dickinson)
ndash Teste raacutepido para captura da proteiacutena rica em histidina 2 de Pfalciparum( PfHRP2) e enzimas conservadas de 4 espeacutecies de plasmoacutedio (DHL e aldolase
ndash Utilizaccedilatildeo de fita de nitrocelulose contendo ac monoclonal
ndash Lise de uma gota de sangue
ndash A reaccedilatildeo eacute revelada com adiccedilatildeo de ac policlonal anti-HRP2 conjugado com lipossomas contendo corante
Diagnoacutestico
bull PCR
ndash Sensibilidade e especificidade maior do que o esfregaccedilo sanguiacuteneo
Diagnoacutestico ndash Pvivax ndash Encontro de todas as formas de desenvolvimento ndash
trofozoiacuteto jovem maduro esquizontes e gametoacutecitos
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Diagnoacutestico ndash Pvivax
ndash Os gametoacutecitos femininos coram-se mais intensamente que os masculinos e apresentam nuacutecleo mais compacto geralmente em localizaccedilatildeo perifeacuterica
ndash O pigmento malaacuterico geralmente eacute abundante
Diagnoacutestico - Pmalariae
bull Realizado por meio de caracteriacutesticas morfoloacutegicas do parasito
ndash Verificaccedilatildeo em esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado
ndash Posiccedilatildeo equatorial do parasito
ndash Desenvolvimento sem deformaccedilatildeo do eritroacutecito
Diagnoacutestico
bull QBC ndash Teacutecnica que combina concentraccedilatildeo dos parasitos
pela centrifugaccedilatildeo do sangue em em microhematoacutecrito e a coloraccedilatildeo dos aacutecidos nucleacuteicos do parasito pelo fluorcromo laranja de acridina
ndash Utilizaccedilatildeo de tubos especiais e microscopia epifluorescente
ndash Teste raacutepido
ndash Alta sensibilidade
Diagnoacutestico
bull ParaSight-F ( Becton amp Dickinson)
ndash Teste raacutepido para captura da proteiacutena rica em histidina 2 de Pfalciparum( PfHRP2) e enzimas conservadas de 4 espeacutecies de plasmoacutedio (DHL e aldolase
ndash Utilizaccedilatildeo de fita de nitrocelulose contendo ac monoclonal
ndash Lise de uma gota de sangue
ndash A reaccedilatildeo eacute revelada com adiccedilatildeo de ac policlonal anti-HRP2 conjugado com lipossomas contendo corante
Diagnoacutestico
bull PCR
ndash Sensibilidade e especificidade maior do que o esfregaccedilo sanguiacuteneo
Diagnoacutestico ndash Pvivax
ndash Os gametoacutecitos femininos coram-se mais intensamente que os masculinos e apresentam nuacutecleo mais compacto geralmente em localizaccedilatildeo perifeacuterica
ndash O pigmento malaacuterico geralmente eacute abundante
Diagnoacutestico - Pmalariae
bull Realizado por meio de caracteriacutesticas morfoloacutegicas do parasito
ndash Verificaccedilatildeo em esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado
ndash Posiccedilatildeo equatorial do parasito
ndash Desenvolvimento sem deformaccedilatildeo do eritroacutecito
Diagnoacutestico
bull QBC ndash Teacutecnica que combina concentraccedilatildeo dos parasitos
pela centrifugaccedilatildeo do sangue em em microhematoacutecrito e a coloraccedilatildeo dos aacutecidos nucleacuteicos do parasito pelo fluorcromo laranja de acridina
ndash Utilizaccedilatildeo de tubos especiais e microscopia epifluorescente
ndash Teste raacutepido
ndash Alta sensibilidade
Diagnoacutestico
bull ParaSight-F ( Becton amp Dickinson)
ndash Teste raacutepido para captura da proteiacutena rica em histidina 2 de Pfalciparum( PfHRP2) e enzimas conservadas de 4 espeacutecies de plasmoacutedio (DHL e aldolase
ndash Utilizaccedilatildeo de fita de nitrocelulose contendo ac monoclonal
ndash Lise de uma gota de sangue
ndash A reaccedilatildeo eacute revelada com adiccedilatildeo de ac policlonal anti-HRP2 conjugado com lipossomas contendo corante
Diagnoacutestico
bull PCR
ndash Sensibilidade e especificidade maior do que o esfregaccedilo sanguiacuteneo
Diagnoacutestico - Pmalariae
bull Realizado por meio de caracteriacutesticas morfoloacutegicas do parasito
ndash Verificaccedilatildeo em esfregaccedilo sanguiacuteneo delgado
ndash Posiccedilatildeo equatorial do parasito
ndash Desenvolvimento sem deformaccedilatildeo do eritroacutecito
Diagnoacutestico
bull QBC ndash Teacutecnica que combina concentraccedilatildeo dos parasitos
pela centrifugaccedilatildeo do sangue em em microhematoacutecrito e a coloraccedilatildeo dos aacutecidos nucleacuteicos do parasito pelo fluorcromo laranja de acridina
ndash Utilizaccedilatildeo de tubos especiais e microscopia epifluorescente
ndash Teste raacutepido
ndash Alta sensibilidade
Diagnoacutestico
bull ParaSight-F ( Becton amp Dickinson)
ndash Teste raacutepido para captura da proteiacutena rica em histidina 2 de Pfalciparum( PfHRP2) e enzimas conservadas de 4 espeacutecies de plasmoacutedio (DHL e aldolase
ndash Utilizaccedilatildeo de fita de nitrocelulose contendo ac monoclonal
ndash Lise de uma gota de sangue
ndash A reaccedilatildeo eacute revelada com adiccedilatildeo de ac policlonal anti-HRP2 conjugado com lipossomas contendo corante
Diagnoacutestico
bull PCR
ndash Sensibilidade e especificidade maior do que o esfregaccedilo sanguiacuteneo
Diagnoacutestico
bull QBC ndash Teacutecnica que combina concentraccedilatildeo dos parasitos
pela centrifugaccedilatildeo do sangue em em microhematoacutecrito e a coloraccedilatildeo dos aacutecidos nucleacuteicos do parasito pelo fluorcromo laranja de acridina
ndash Utilizaccedilatildeo de tubos especiais e microscopia epifluorescente
ndash Teste raacutepido
ndash Alta sensibilidade
Diagnoacutestico
bull ParaSight-F ( Becton amp Dickinson)
ndash Teste raacutepido para captura da proteiacutena rica em histidina 2 de Pfalciparum( PfHRP2) e enzimas conservadas de 4 espeacutecies de plasmoacutedio (DHL e aldolase
ndash Utilizaccedilatildeo de fita de nitrocelulose contendo ac monoclonal
ndash Lise de uma gota de sangue
ndash A reaccedilatildeo eacute revelada com adiccedilatildeo de ac policlonal anti-HRP2 conjugado com lipossomas contendo corante
Diagnoacutestico
bull PCR
ndash Sensibilidade e especificidade maior do que o esfregaccedilo sanguiacuteneo
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bull ParaSight-F ( Becton amp Dickinson)
ndash Teste raacutepido para captura da proteiacutena rica em histidina 2 de Pfalciparum( PfHRP2) e enzimas conservadas de 4 espeacutecies de plasmoacutedio (DHL e aldolase
ndash Utilizaccedilatildeo de fita de nitrocelulose contendo ac monoclonal
ndash Lise de uma gota de sangue
ndash A reaccedilatildeo eacute revelada com adiccedilatildeo de ac policlonal anti-HRP2 conjugado com lipossomas contendo corante
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bull PCR
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bull PCR
ndash Sensibilidade e especificidade maior do que o esfregaccedilo sanguiacuteneo
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