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Producción in vitro de Piña (Ananas Comosus)

a través de meristemos.

Carmen Gutiérrez Córdoba.

Martha Gilda Oliva Umaña.

Objetivos de investigación

• Determinar el protocolo de micropropagación de piña (Ananas comosus)cultivar MS-2.

Objetivos de desarrollo tecnológico:

• Evaluar diferentes medios de cultivo en la

micropropagación de piña (Ananas comosus)cultivar MS-2 para su reproducción masiva.

• Regenerar plantas in vitro a través de meristemos.

El proyecto consiste de cuatro fases a realizar

• Establecimiento o iniciación.

• Multiplicación.

• Regeneración y enraizamiento.

• Aclimatación.

Generalidades de la piña

• La piña pertenece taxonómicamente al género:

Ananas familia: Bromeliaceas.

• Es una monocotiledónea, herbácea, perenne.

• Su reproducción es vegetativa por medio de

hijuelos que nacen en el mismo tronco.

Generalidades de la piña

• Después de dos cosechas las plantas deben ser eliminadas.

El cultivo “in vitro” de meristemos y yemas axilares,

ayudan a mejorar sustancialmente el proceso de

multiplicación para la siembra en el campo

(Casale y García, 1997).

• METODOLOGÍA.

FASE DE ESTABLECIMIENTO O INICIACION

• Las coronas de (Ananas comosus) cultivar MS-2 se lavan con agua y jabón a cada corona se le eliminan parte de las hojas que cubren el ápice .Se reduce el explante a 5cms de largo y 2-3 cms de ancho.

• Se desinfecta con hipoclorito de sodio (NaCLO) al 1.5% durante 10 minutos luego se lavan con agua destilada y esterilizada tres veces dentro de la cámara de flujo laminar.

Coronas de piña

Desinfección de explantes de piña

Establecimiento o iniciación:

• Extracción de meristemos de 0,5 cms o menos que se siembran en los diferentes medios de cultivo. Los explantes se colocan en un cuarto de crecimiento con un rango de temperatura entre 26-30 °C, un fotoperiodo de 16 horas luz y 8 oscuridad, humedad relativa entre 70-80% y una intensidad lumínica de 1500 a 3000 lux.

Establecimiento o iniciación:

MERISTEMOS

Diferencia entre un explante sano y uno contaminado por hongo y

bacteria endogena

contaminado sano

Medio de iniciación

• Medio básico el MS (1962) Murashige y Skoog (Anexo1) y se definieron concentraciones de auxinas y citoquininas de acuerdo a la fase del cultivo, se utilizo un pH de 5.8 , 30 g de azúcar, 3.0g de phytagel.

Medio de iniciación

• MS (1962) Murashige y Skoog

• BAP( benzilamino purina)

• 1.5mg/l

• AIA (acido indol acético)

• 0.10mg/l

FASE DE MULTIPLICACION

• El objetivo de esta fase es la multiplicación masiva de brotes en medios con concentraciones más altas de reguladores de crecimiento que los usados en la etapa de iniciación. En esta fase se están utilizando dos medios de cultivo con diferentes concentraciones de citoquininas,para evaluar el índice de multiplicación de brotes

MEDIOS USADOS EN FACE DE MULTIPLICACION

• MEDIOS DE MULTIPLICACION 1

• MS (1962) Murashige y Skoog

BAP( benzilamino purina)

3mg/l

AIA (acido indol acético)

0.10mg/l

MEDIOS USADOS EN LA FASE DE MULTIPLICACION

• MEDIOS DE MULTIPLICACION 2

• MS (1962) Murashige y Skoog

BAP( benzilamino purina)

4mg/l

AIA (acido indol acético)

0.10mg/l

RESULTADOS PARCIALES

• Entre los medios de multiplicación 1 y 2 el medio 2 es el que esta teniendo mejores resultados por tener un balance entre auxinas y citoquininas mas alto.