TEKNIK MEMBUAT BIAKAN MURNIPosted January 14, 2011 by aguskrisno in KAJIAN MIKROBIOLOGI UMUM. Leave a Comment vIsolasi bakteri merupakan suatu cara untuk memisahkan atau memindahkan mikroba tertentu dari lingkungan sehingga diperoleh kultur murni atau biakan murni. Ada beberapa cara yang dapat dilakukan yaitu dengan cara goresan (streak plate), cara tuang (pour plate), cara sebar (spread plate), dan mikromanipulator ( Buckle,1998). Persyaratan utama bagi isolasi dan kultivasi fage adalah harus adanya kondisi optimum untuk pertumbuhan organisme inangnya. Sumber bakteriofage yang paling baik dan paling utama adalah habitat inang. Sebagai contoh fage koli yang dijumpai di dalam pencernaan dapat diisolasi dari limbah atau pupuk kandang. Hal ini dilakukan dengan sentifugasi atau filtrasi bahan sumbernya dan penambahan kloroform untuk membunuh sel-sel bakterinya (Adams, 2000). Pengembangan dalam cawan petri ada beberapa metode, yaitu: Metode Cawan Gores (Streak Plate) Prinsip metode ini yaitu mendapatkan koloni yang benar-benar terpisah dari koloni yang lain, sehingga mempermudah proses isolasi. Cara ini dilakukan dengan membagi 3-4 cawan petri. Ose steril yang telah disiapkan diletakkan pada sumber isolat , kemudian menggoreskan ose tersebut pada cawan petri berisi media steril. Goresan dapat dilakukan 3-4 kali membentuk garis horisontal disatu cawan. Ose disterilkan lagi dengan api bunsen. Setelah kering, ose tersebut digunakan untuk menggores goresan sebelumnya pada sisi cawan ke dua. Langkah ini dilanjutkan hingga keempat sisi cawan tergores. Metode Cawan Sebar (Spread Plate) Teknik spread plate (cawan sebar) adalah suatu teknik di dalam menumbuhkan mikroorganisme di dalam media agar dengan cara menuangkan stok kultur bakteri atau menghapuskannya di atas media agar yang telah memadat, sedangkan pour plate kultur dicampurkan ketika media masih cair (belom memadat). Kelebihan teknik ini adalah mikroorganisme yang tumbuh dapat tersebar merata pada bagian permukaan agar. Teknik Dilusi (Pengenceran) Tujuan dari teknik ini adalah melarutkan atau melepaskan mikroba dari substratnya ke dalam air sehingga lebih mudah penanganannya. Sampel yang telah diambil kemudian disuspensikan dalam aquades steril. Teknik dilusi sangat penting dalam analisa mikrobiologi karena hampir semua metode penelitian dan perhitungan jumlah sel mikroba menggunakan teknik ini, seperti TPC (Total Plate Counter). Ada beberapa tahap yang harus dilakukan sebelum melakukan teknik penanaman bakteri (inokulasi), yaitu: 1. Menyiapkan ruangan 2. Pemindahan dengan pipet 3. Pemindahan dengan kawat inokulasi Ada beberapa tahap yang harus dilakukan sebelum melakukan teknik penanaman bakteri (inokulasi) yaitu : 1. Menyiapkan ruangan Ruang tempat penanaman bakteri harus bersih dan keadannya harus steril agar tidak terjadi kesalahan dalam pengamatan atau percobaaan .dalam labotarium pembuataan serum vaksin dan sebagainya. Inokulasi dapat dilakukan dalam sebuah kotak kaca

(encast) udara yang lewat dalam kotak tersebut dilewatkan saringan melalui suatu jalan agar tekena sinar ultraviolet (Pelczar, 1986). 2. Pemindahan dengan dengan pipet Cara ini dilakukan dalam penyelidikan air minum atau pada penyelidikan untuk diambil 1 ml contoh yang akan diencerkan oleh air sebanyak 99 ml murni (Pelczar, 1986). 3. Pemindahan dengan kawat inokulasi Ujung kawat inokulasi sebaliknya dari platina atau nikel .ujungnya boleh lurus juga boleh berupa kolongan yang diametrnya 1-3mm. Dalam melakukuan penanaman bakteri kawat ini terlebih dahulu dipijarkan sedangkan sisanya tungkai cukup dilewatkan nyala api saja setelah dingin kembali kawat itu disentuhkan lagi dalam nyala (Pelczar, 1986). 2.3 Teknik Inokulasi Ada beberapa metode yang digunakan untuk mengisolasi biakan murni mikroorganisme yaitu : 2.3.1 Metode gores Teknik ini lebih menguntungkan jika ditinjau dari sudut ekonomi dan waktu, tetapi memerlukan ketrampilan-ketrampilan yang diperoleh dengan latihan. Penggoresan yang sempurna akan menghasilkan koloni yang terpisah. Inokulum digoreskan di permukaan media agar nutrien dalam cawaan petri dengan jarum pindah (lup inokulasi). Di antara garisgaris goresan akan terdapat sel-sel yang cukup terpisah sehingga dapat tumbuh menjadi koloni (Winarni, 1997). Cara penggarisan dilakukan pada medium pembiakan padat bentuk lempeng. Bila dilakukan dengan baik teknik inilah yang paling praktis. Dalam pengerjaannya terkadang berbeda pada masing-masing laboratorium tapi tujuannya sama yaiitu untuk membuat goresan sebanyak mungkin pada lempeng medium pembiakan (Kus Irianto, 2006). Ada beberapa teknik dalam metode goresan, yakni:

Teknik Gores T

Teknik Gores Kuadran

teknik Gores Sinambung

Teknik Gores Radian DAFTAR PUSTAKA Anonim, 2008.www. go ogl e. com. image s diakses pada tanggal 8 Januari 2011 pukul 13.40 WIB Anonim, 2008.www. wikipe dia .c om diakses pada tanggal 8 Januari 2011 pukul 13.40 WIB Buckle,K.ADwidjoseputro, D. 1998. Dasar-Dasar Mikrobiologi. Djambatan : Malang. Pelczar, M.1986. Dasar-Dasar Mikrobiologi I. Erlangga : Jakarta. Waluyo, L. 2005. Mikrobiologi Umum. MM Press: Malang. Winarni, D. 1997. Diktat Teknik Fermentasi. Program Studi D3 Teknik Kimia FTI-ITS : Surabaya.

Mikrobiologi budayaDari Wikipedia, ensiklopedia bebas Artikel ini kebutuhan tambahan kutipan untuk verifikasi . Harap membantu memperbaiki artikel ini dengan menambahkan kutipan ke sumber terpercaya . Unsourced bahan mungkin akan ditantang dan dihapus . (Mei 2010)

Sebuah budaya Bacillus anthracis

Budaya mikrobiologis, atau budaya mikroba, adalah metode mengalikan organisme mikroba dengan membiarkan mereka berkembang biak dalam media kultur yang telah ditentukan di bawah kondisi laboratorium yang terkontrol. Kultur mikroba yang digunakan untuk menentukan jenis organisme, kelimpahan dalam sampel yang diuji, atau keduanya. Ini adalah salah satu utama diagnostik metode mikrobiologi dan digunakan sebagai alat untuk menentukan penyebab penyakit menular dengan membiarkan agen biak dalam media yang telah ditentukan. Sebagai contoh, budaya tenggorokan diambil dengan mengikis lapisan jaringan di belakang tenggorokan dan blot sampel ke media untuk dapat layar untuk mikroorganisme berbahaya, seperti Streptococcus pyogenes , agen penyebab radang tenggorokan. [1 ] Selain itu, budaya istilah lebih umum digunakan secara informal untuk mengacu pada "selektif tumbuh" jenis tertentu mikroorganisme di laboratorium. Kultur mikroba adalah metode diagnostik dasar dan dasar yang digunakan secara luas sebagai alat penelitian dalam biologi molekuler . Hal ini sering penting untuk mengisolasi mikroorganisme kultur murni. Sebuah budaya (atau axenic) murni adalah sebuah populasi sel atau organisme multisel tumbuh tanpa adanya lainnya spesies atau jenis. Sebuah kultur murni mungkin berasal dari satu sel atau organisme tunggal, dalam hal ini sel-sel genetik klon satu sama lain. Untuk tujuan pembentuk gel budaya mikroba, medium gel agarosa (agar-agar) digunakan. Agar adalah zat gelatin yang berasal dari rumput laut. Pengganti murah untuk agar-agar getah guar, yang dapat digunakan untuk isolasi dan pemeliharaan thermophiles.

Isi[hide]

1 Bakteri budaya 2 Virus dan budaya fag 3 kultur sel eukariotik o 3.1 Isolasi kultur murni 4 Referensi 5 Eksternal Link 6 Lihat juga

[ sunting ] Bakteri budayaBudaya mikrobiologis dapat tumbuh di piring petri ukuran berbeda yang memiliki lapisan tipis agar-agar berbasis medium pertumbuhan. Setelah medium pertumbuhan dalam cawan petri yang diinokulasi dengan bakteri yang diinginkan, piring diinkubasi pada suhu terbaik untuk pertumbuhan bakteri yang dipilih (misalnya biasanya pada 37 derajat Celcius selama budaya dari manusia atau hewan, atau lebih rendah untuk budaya lingkungan ). Metode lain adalah budaya kultur bakteri cair, di mana bakteri yang diinginkan tersuspensi dalam kaldu cair, media nutrisi. Ini adalah ideal untuk persiapan assay antimikroba. Eksperimen ini akan menyuntik kaldu cair dengan bakteri dan biarkan tumbuh dalam

semalam (mereka mungkin menggunakan shaker untuk pertumbuhan seragam). Kemudian mereka akan mengambil alikuot sampel untuk menguji aktivitas antimikroba obat tertentu atau protein ( peptida antimikroba ). Atau, mikrobiologi dapat memutuskan untuk menggunakan kultur cair statis. Budaya ini tidak terguncang dan mereka menyediakan mikroba dengan gradien oksigen [2] . Yang utama adalah: [3]Koleksi Acronym ATCC BCCM CIP DSMZ JCM NCCB NCIMB Nama Budaya Amerika Jenis Koleksi Belgia Terkoordinasi Koleksi Mikroorganisme Koleksi d'Institut Pasteur Deutsche Sammlung von und Mikroorganismen Zellkulturen Jepang Koleksi Mikroorganisme Budaya Belanda Koleksi Bakteri Koleksi Nasional industri, Kelautan dan makanan bakteri Lokasi Manassas , Virginia Ghent , Belgia Paris , Prancis Braunschweig , Jerman Saitama , Jepang Utrecht , Belanda Aberdeen , Skotlandia

[ sunting ] Virus dan budaya fagVirus atau fag budaya membutuhkan sel inang di mana virus atau fag biak. Untuk bakteriofag , budaya yang tumbuh dengan menginfeksi sel-sel bakteri. Fag kemudian dapat diisolasi dari plak menghasilkan halaman bakteri pada piring. Virus budaya diperoleh dari sel inang yang sesuai eukariotik.

[ sunting ] kultur sel eukariotikArtikel utama: Budaya your [ sunting ] Isolasi kultur murni Artikel utama: axenic

Untuk eukariota bersel tunggal, seperti ragi, isolasi kultur murni menggunakan teknik yang sama seperti untuk kultur bakteri. Biakan murni dari organisme multiseluler sering lebih mudah terisolasi dengan hanya memilih sebuah individu untuk memulai suatu budaya. Ini adalah teknik yang berguna untuk kultur murni jamur , multiseluler ganggang , dan kecil metazoa , misalnya. m / M;

Mengembangkan teknik kultur murni adalah penting untuk pengamatan spesimen tersebut. Metode yang paling umum untuk mengisolasi sel-sel individual dan menghasilkan kultur murni adalah untuk mempersiapkan piring beruntun. Metode piring beruntun adalah cara untuk p

[ sunting ] Referensi1. ^ http://www.webmd.com/a-to-z-guides/throat-culture 2. ^ Lama, DC, Duguid, JP (1970). "Selektif hasil dari Bakteri Fimbriate dalam Medium Cair Statis" Journal of Bacteriology (American Society for Microbiology) 103 (2):. 447-456. PMID 248102 . 3. ^ Madigan, Michael (2009) Brock Biologi. Mikroorganisme. San Francisco:. Pearson / Benjamin Cummings ISBN 0132324601 .