BAB I
PENDAHULUAN
1. 1 Latar Belakang
Dermatofitosis adalah penyakit yang disebabkan oleh golongan jamur
dermatofita, yang terdiri dari tiga genus yaitu Microsporum, Trichophyton, dan
Epidermophyton (Rianyta, 2011). Prevalensinya cukup tinggi di Indonesia,
mengingat Indonesia termasuk dalam negara beriklim tropis dan mempunyai
kelembaban yang tinggi.
Untuk kasus di Indonesia, dari hasil penelitian menunjukan dari seluruh
infeksi dermatomikosis, sebanyak 52 % adalah kasus dermatofitosis dengan T.
rubrum sebagai agen penyebab utama (Agustine, 2012). Sedangkan penelitian
mengenai kasus dermatofitosis di India menunjukkan sebanyak 71 pasien yang
menderita dermatofitosis memperlihatkan hasil biakan yang positif. Dimana hasil
kultur pada 66 pasien (93%) positif mengandung biakan Trichophyton spp,
dengan Trichophyton rubrum (Castell.) Sabour penyebab utama dermatofitosis di
India (Venkatesan, 2007).
Pengobatan secara medis selama ini untuk kasus dermatofitosis dengan lesi
lokal, menggunakan obat antifungal golongan imidazol seperti mikonazol dan
klotrimazol, sedangkan untuk lesi sistemik menggunakan ketokonazol, terbinafin
dan griseosulvin. Ketokonazol masih menjadi pilihan utama di beberapa negara
dan efektif terhadap tinea korporis, kruris, pedis, dan infeksi jamur pada kuku
(Weller. dkk., 2008), tetapi obat-obatan tersebut sulit untuk didapatkan bagi
masyarakat yang tinggal di daerah terpencil. Masyarakat di daerah Desa Tanjung
1
Ganti I, Kecamatan Kelam Tengah, Kabupaten Kaur masih menggunakan
pengobatan tradisional untuk pengobatan terhadap dermatofitosis.
Pengobatan tradisonal yang dilakukan di Desa Tanjung Ganti I, Kecamatan
Kelam Tengah, Kabupaten Kaur, menggunakan kombinasi rebusan akar
gelinggang dan jahe merah untuk mengobati penyakit kurap. Dari beberapa
penelitian yang telah dilakukan, akar gelinggang memiliki senyawa aktif seperti
rhein dan chrysophanol yang merupakan derivat dari anthrakuinon yang
memperlihatkan adanya aktivitas biologis seperti sebagai antimikroba, antijamur,
antitumor, antioksidan, dan sitotoksik. Di Suriname ektrak akar gelinggang
digunakan sebagai obat pada kasus gangguan ovarium (Fernand, 2008). Hasil
penelitian mengenai ekstrak daun gelinggang mempunyai pengaruh yang sangat
signifikan terhadap penghambatan pertumbuhan Trichophyton sp pada umur
kultur 1 x 24 jam, 2 x 24 jam (Hujjatusnaini, 2010). Kandungan senyawa
metabolit pada rimpang jahe merah seperti gingerol, shagol, dan zingeron
memiliki efek farmakologi sebagai antifungal (Supriadi, dkk., 2011).
Untuk pengobatan alternative menggunakan kombinasi ekstrak akar
gelinggang dan rimpang jahe merah yang didapatkan di Desa Tanjung Ganti I,
Kecamatan Kelam Tengah, Kabupaten Kaur belum pernah diteliti efektivitasnya
sebagai antifungal. Hal inilah yang mendasari peneliti ingin melakukan penelitian
mengenai “Uji Efektivitas Kombinasi Antifungal Ekstrak Akar Gelinggang
(Senna alata L.) dan Rimpang Jahe Merah (Zingiber officinale Rosc) Terhadap
Pertumbuhan Trichophyton rubrum (Castell.) Sabour.”
2
1.2 Rumusan Masalah
Berdasarkan uraian latar belakang tersebut, maka rumusan masalah pada
penelitian ini adalah:
1.2.1 Apakah kombinasi dari ekstrak akar gelinggang dan rimpang jahe merah
memiliki daya hambat terhadap pertumbuhan T. rubrum?
1.2.2 Bagaimana perbandingan efektifitas antifungal kombinasi ekstrak akar
gelinggang dan rimpang jahe merah dibandingkan dengan penggunaan
ekstrak akar gelinggang dan rimpang jahe merah saja?
1.3 Hipotesis
H0 : Kombinasi dari ekstrak akar gelinggang dan rimpang jahe merah tidak
memiliki daya hambat terhadap pertumbuhan T. rubrum.
H1 : Kombinasi dari ekstrak akar gelinggang dan rimpang jahe merah
memiliki daya hambat terhadap pertumbuhan T. rubrum.
H2 : Kombinasi ekstrak akar gelinggang dan rimpang jahe merah memiliki
efek daya hambat yang lebih kuat terhadap pertumbuhan T. rubrum
dibandingkan dengan hanya menggunakan ekstrak akar gelinggang dan
jahe merah saja.
1.4 Tujuan
- Tujuan pelaksanaan penelitian ini adalah untuk menentukan daya hambat
yang paling efektif dari kombinasi ekstrak akar gelinggang dan rimpang
jahe merah terhadap pertumbuhan T. rubrum.
- Untuk membandingkan daya hambat antara kombinasi akar gelinggang dan
rimpang jahe merah dengan penggunaan rimpang jahe merah saja maupun
akar gelinggang saja terhadap pertumbuhan T. rubrum.
3
1.5 Manfaat Penelitian
1.5.1 Hasil penelitian ini diharapkan dapat memberikan informasi mengenai
khasiat kombinasi ekstrak akar gelinggang dan rimpang jahe merah
dalam menghambat pertumbuhan T. rubrum sehingga dapat digunakan
dalam penatalaksaanan penyakit akibat infeksi T. rubrum.
1.5.2 Hasil dari penelitian ini dapat menjadi data awal untuk penelitian
selanjutnya mengenai efektivitas kombinasi ekstrak akar gelinggang
dan rimpang jahe merah dalam menghambat pertumbuhan T. rubrum
4
BAB II
TINJAUAN PUSTAKA
2.1 Trichophyton rubrum
Trichophyton rubrum (Castell.) Sabour., 1911 merupakan spesies jamur
golongan dermatofita yang menyebabkan infeksi dermatofitosis (Warrell. dkk.,
2012). Trichophyton rubrum dibedakan menjadi 2 tipe yaitu T. rubrum tipe downy
atau berbulu halus dan tipe granular. Trichophyton rubrum tipe downy memiliki
karakteristik memproduksi mikrokonidia dalam jumlah yang sedikit, halus, tipis,
kecil, dan tidak mempunyai makrokonidia. Sedangkan karakteristik T. rubrum
tipe granuler produksi mikrokonidia dan makrokonidia dalam jumlah yang sangat
banyak. Mikrokonidia berbentuk clavate dan pyriform, makrokonidia berdinding
tipis, dan berbentuk seperti cerutu. T. rubrum berbulu halus (downy) adalah strain
jamur yang paling banyak menginfeksi manusia dan paling sering menyebabkan
infeksi kronik pada kulit dan kuku. Sedangkan untuk T. rubrum tipe granular
menjadi penyebab paling sering tinea korporis di Asia Tenggara dan suku
Aborigin di Australia (Ellis. dkk., 2007).
5
Gambar 1. a. Hasil kultur T. rubrumgranular strain (Ellis. dkk., 2007)
b. Mikroskopik T. rubrumgranular strain (Ellis. dkk., 2007)
Makrokonidia
Mikrokonidia
Koloni jamur T.rubrum
Taksonomi Trichophyton rubrum (Alexopoulus, 1996) :
Kingdom : FungiFilum : AscomycotaKelas : EurotiomycetesOrdo : OnygenalesFamili : ArthrodermactaeceaeGenus : TrichophytonSpesies : Trichophyton rubrum
2.2 Infeksi Trichophyton rubrum
Trichophyton rubrum dapat menyebabkan penyakit dermatofitosis yang
ada di badan (tinea korporis), dermatofitosis pada selangkangan dan alat genital
(tinea kruris), dermatofitosis pada telapak tangan (tinea manuum), dermatofitosis
pada kaki (tinea pedis) dan dermatofitosis pada kuku (tinea unguium) (Weller.
dkk., 2008).
2.2.1 Epidemiologi
Penyakit dermatofitosis yang disebabkan oleh T. rubrum ini endemik di
beberapa wilayah di Asia Tenggara, bagian Afrika Selatan dan Australia bagian
Utara. Penyakit akibat T. rubrum ini juga sering terjadi pada kaki atlet yaitu tinea
6
Gambar 2. a. Hasil kultur T. rubrum Downy strain (Ellis. dkk., 2007)
b. Mikroskopis T. rubrumdowny strain (Ellis. dkk., 2007)
Koloni jamur T.rubrum
Hifa
Mikrokonidia
pedis. Tinea pedis ini juga terjadi pada wilayah dan temperatur yang sama dengan
insiden penyakit tinea korporis dan tinea kruris yaitu wilayah yang beriklim tropis
seperti Asia Tenggara dan Afrika Selatan (Warrell, dkk., 2012). Infeksi pada tinea
pedis sering menyebar pada tempat yang basah seperti di kolam berenang, di
kamar mandi ataupun memakai alas kaki penderita tinea pedis (Weller, dkk.,
2008).
2.2.2 Gejala Klinis
Infeksi T. rubrum ini menimbulkan gejala klinis berupa gatal sehinggga
kadang terlihat erosi dan krusta akibat garukan. Lesi berbentuk skuama yang
kering dengan vesikel serta papul yang terdapat di tepi. Lesi berbatas tegas,
bewarna merah dan hiperkeratotik. Tinea pada kuku (tinea unguium) lesi muncul
pada bagian tepi kuku yang bewarna kuning dan rapuh, yang kemudian diikuti
dengan penebalan serta hiperkeratotik pada kuku tersebut (Weller, dkk., 2008).
2.2.3 Patogenesis
Golongan jamur dermatofita jenis antropofilik seperti T. rubrum paling
sering menyerang manusia dikarenakan manusia dijadikan sebagai hospes
tetapnya. Golongan ini bisa membuat penderita mengalami penyakit yang
menahun akibat dari reaksi penolakan tubuh yang sangat ringan. Jamur T. rubrum
menginfeksi kulit dan kuku melalui degradasi keratin, hal ini disebabkan karena
kemampuan jamur mensekresi enzim proteolitik yang merupakan faktor virulensi
pada T. rubrum. Infeksi ini dapat ditularkan dari orang ke orang melalui kontak
kulit (Warrell, dkk., 2012).
7
2.3.4 Pengobatan
Pengobatan medis untuk dermatofitosis yang disebabkan oleh jamur T.
rubrum dengan lesi lokal yang minimal menggunakan preparat imidazol seperti
mikonazol dan klotrimazol, sedangkan untuk lesi yang sistemik menggunakan
ketokonazol, terbinafin dan griseosulvin (Weller, dkk., 2008).
2.3 Botani Gelinggang (Senna alata L.)
2.3.1 Deskripsi Gelinggang (Senna alata L.)
Gelinggang adalah tanaman yang berasal dari daerah tropis dan dapat
merupakan tanaman penting yang berguna sebagai tanaman obat dan tanaman
hias. Di daerah tropis tanaman gelinggang dapat tumbuh di ketinggian 1.200 M
diatas permukaan laut. Bunga gelinggang berwarna kuning, dan gelinggang
memiliki batang yang dapat tumbuh 3-4 M, dan mempunyai ukuran daun dengan
panjang 50-80 cm dan menutup dalam keadaan gelap (Hirt, dkk., 2008).
2.3.2 Taksonomi Senna alata L. (Hirt, dkk., 2008):
Kingdom : Plantae(unraked) : Angiosperms(unraked) : Eudicots(unraked) : RosidsOrder : FabalesFamily : FabaceaeSubfamily : CaesalpinioideaeTribe : CassieaeSubtribe : CassiinaeGenus : SennaSpesies : Senna alata L.Sinonim : Cassia alata (L.)
Cassia alata L. var. perennis Pams Cassia alata L. var. rumphiana DC Cassia bracteata L.f Cassia herpetica Jacq. Cassia rumphiana (DC.) Bojer Herpetica alata (L.) Raf
8
Gambar 3. Akar Gelinggang (dok. pribadi, 2013)
2.3.3 Kandungan Senyawa Kimia Akar Gelinggang
Skrining fitokimia dari daun dan akar Senna alata L. menunjukkan adanya
senyawa alkaloid, karbohidrat, tannin, saponin, fenol, flavonoid, anthraquinones
dan cardiac glycosides pada Tabel 2.1 (Mahmood, 2008).
Tabel 1. Kandungan Fitokimia ekstrak akar dan daun Senna alata L.
Kandungan Fitokimia Ekstrak Daun Ekstrak AkarAlkaloidKarbohidratTaninSaponinFenolFlavonoidAntrakuinonCardiac glicosida
++++++++
++++++++
Sumber : (Mahmood, 2008)
Dari hasil penelitian departemen kimia, Universitas Negri Lousiana, Baton
Rouge, LA, USA, bahwa terdapat kandungan senyawa kimia yaitu enam senyawa
fenolik, lima antrakuinon (Rhein, aloe-emodin, emodin, chrysophanol dan
physcion) dan flavonoid pada ekstrak akar gelinggang (Senna alata L.).
Identifikasi analit dilakukan dengan menggunakan standar dan on-line massa
9
deteksi spektrometri menggunakan tekanan atmosfer ionisasi kimia. Konsentrasi
senyawa fenolik dalam ekstrak akar ditentukan dengan menggunakan HPLC
dengan deteksi ultraviolet pada 260 nm (Fernand, 2008).
Gambar 4. Struktur kimia dari enam senyawa fenolik dalam ekstrak akar gelinggang (Fernand, 2008)
2.4 Botani Jahe Merah (Zingiber officinale Rosc.)
2.4.1 Deskripsi Jahe Merah (Zingiber officinale Rosc.)
Jahe merah adalah jenis jahe yang paling sering digunakan sebagai obat
tradisonal karena memiliki banyak keunggulan dibandingkan dengan jenis jahe
yang lainnya. Jahe merah yang dikenal di Indonesia hanya satu jenis, namun
di beberapa daerah termasuk di Bengkulu ditemukan jahe merah dengan
ukuran rimpang sangat kecil dan sangat pedas, sehingga diduga di Indonesia
terdapat 2 macam jahe merah, yaitu rimpang besar dan rimpang kecil. Jahe
merah atau jahe sunti memiliki rimpang berwarna merah dan lebih kecil
daripada jahe putih kecil. Daging rimpangnya berwarna jingga muda sampai
merah. Diameter rimpang dapat mencapai 4 cm dengan panjang rimpang hingga
12.5 cm (Supriadi, dkk., 2011).
10
Di Indonesia dikenal 3 jenis jahe yaitu jahe yakni jahe merah (Zingiber
officinale Roscoe), jahe putih kecil (Z. officinale var. amarum) dan jahe putih
besar (Z. officinale var. officinale). Ketiga varietas jahe tersebut memiliki
perbedaan morfologi pada warna kulit dan ukuran rimpang, akar, batang, kadar
serat, kadar pati, dan kadar minyak atsiri nya. (Supriadi, dkk., 2011).
2.4.2 Taksonomi Zingiber officinale Rosc. (Schauenberg, 1977):
Kingdom : PlantaeDivision : MagnoliophytaClass : LiliopsidaOrder : ZingiberalesFamily : Zingiberaceae MartinovGenus : Zingiber MillSpecies : Zingiber officinale Rosc.Sinonim : Amomum zingiber L.
Gambar 5. Rimpang Jahe merah (dok. pribadi, 2013)
2.4.3 Kandungan Senyawa Kimia Jahe Merah (Zingiber officinale Rosc.)
Bagian utama pada jahe yang dimanfaatkan adalah rimpangnya. Rimpang
jahe digunakan secara luas sebagai rempah bumbu dapur dan obat herbal untuk
beberapa penyakit. Rimpang jahe mengandung beberapa komponen kimia yang
berkhasiat bagi kesehatan. Rimpang jahe merah sudah digunakan sebagai obat
secara turuntemurun untuk beberapa macam penyakit seperti mual, sakit gigi,
demam reumatik. Jahe merah memiliki kandungan minyak atsiri dan pati yang
11
lebih tinggi dibanding jenis jahe lain yaitu, kandungan minyak atsiri sekitar 3,90%
dan kandungan pati sekitar 52,9 %. Dari hasil penelitian menyatakan bahwa dari
analisa kimia pada tanaman jahe dapat diketahui kandungan senyawa antara lain
flavonoida, polivenol, minyak atsiri (komponen utamanya adalah seskuiterpen
hidrokarbon dan monoterpen), gingerol (dapat terkonversi menjadi shogaol dan
zingeron), gingerdiol, gingerdion, zingiberen, zingiberol, paradol, limonene
(Supriadi, dkk., 2011).
2.5 Uji Aktivitas Antimikroba
Pada uji ini diukur respons pertumbuhan populasi mikroorganisme
terhadap agen antimikroba. Tujuan uji antimikroba (termasuk antibiotik dan
substansi antimikroba nonantibiotik, misalnya fenol, bisfenol, aldehid), adalah
untuk menentukan potensi dan kontrol kualitas selama proses produksi senyawa
antimikroba di pabrik, untuk menentukan farmakokinetik obat pada hewan atau
manusia, dan untuk memonitor dan mengontrol kemoterapi obat. Kegunaan uji
antimikroba adalah diperolehnya suatu sistem pengobatan yang efektif dan
efisien. (Pratiwi, 2008).
2.5.1 Metode Disc Difussion (tes Kirby dan Bauer)
Metode ini untuk menentukan aktivitas agen antimikroba. Piringan yang
berisi agen antimikroba diletakkan pada media agar yang telah ditanami mikroba
yang akan berdifusi pada media agar tersebut. Area jernih mengindikasi adanya
hambatan pertumbuhan mikroba oleh agen antimikroba pada permukaan media
agar (Pratiwi, 2008).
2.5.2 Metode Dilusi
12
Metode Dilusi dibedakan menjadi dua, yaitu Metode Dilusi Padat dan
Metode Dilusi Cair. Metode ini dapat digunakan untuk menentukan Minimum
Inhibitory Concentration (MIC) dan Minimum Bactericidal/Fungicidal
Concentration. Dimana metode dilusi cair menggunakan tabung reaksi yang diisi
dengan agen anti mikroba yang diencerkan dengan media cair dan ditambahkan
dengan jamur atau bakteri uji.
Sedangkan untuk dilusi padat prinsipnya sama dengan metode dilusi cair,
hanya saja media yang digunakan adalah media padat, dimana agen anti mikroba
dengan konsentrasi tertentu di larutkan dalam media padat, setelah itu inokulasi
jamur atau bakteri uji di atas media padat tersebut (Pratiwi, 2008).
2.6 Ketokonazol
Antijamur imidazol (ketokonazol) merupakan obat yang aktif secara oral
dan bermanfaat untuk terapi pada infeksi jamur setempat atau sistemik luas.
Semua antijamur golongan azol termasuk ketokonazol bekerja melalui
penghambatan biosintesis ergosterol jamur. Ketokonazol bermanfaat pada
pengobatan kandidiasis mukokutan kronik dan pada bentuk ekstrameningeal
kronik dari blastomikosis, koksidioidomikosis, parakokidodiomikosis, dan
histoplasmosis (Brooks, dkk., 1996). Ketokonazol merupakan antijamur sistemik
per-oral yang penyerapannya bervariasi tiap individu. Obat ini menghasilkan
kadar plasma yang cukup untuk menekan aktivitas berbagai jenis jamur. Obat ini
memiliki efek samping seperti mual dan muntah. Efek samping lain yang lebih
jarang seperti nyeri epigastrik, vertigo, sakit kepala, gusi berdarah, erupsi kulit,
dan fotofobia. Laki-laki dapat mengalami ginekomastia dan pada wanita
menyebabkan haid pada tidak teratur hal dikarenakan obat ini menghambat
13
biosintesis steroid melalui inhibisi enzim yang terkait dengan sitokrom P450.
Obat ini juga tidak dianjurkan untuk ibu hamil. Dosis untuk dewasa yaitu satu kali
200-400 mg sehari, sedangkan untuk anak-anak diberikan 3,3-6,6mg/kgBB/hari
(Gunawan, dkk., 2009).
2.7 Faktor-faktor yang mempengaruhi aktivitas antimikroba
Faktor-faktor yang mempengaruhi aktivitas antimikroba antara lain pH lingkungan,
komponen-komponen perbenihan, stabilitas obat, besarnya inokulum jamur, masa
pengeraman, aktivitas metabolik mikroba (Brooks, dkk., 1996).
2.8 Kerangka Penelitian
2.8.1 Kerangka Teori
14
Antifungal herbal (Ekstrak akar
gelinggang dan rimpang jahe merah)
Jamur Trichophyton
rubrum (Castell.)
Sabour., 1911
Efektif
Tidak efektif
2.8.2 Kerangka Konsep
15
Tanaman gelinggang (Senna alata L.)
Tanaman Jahe Merah (Zingiber officinale Rosc.)
Akar Rimpang
Maserasi dengan pelarut etanol 96%
Filtrat
Uji Aktivitas Antifungal Metode dilusi padat
Kontrol + Antifungal Standar (Ketokonazol)
Jamur Trichophyton rubrum (Castell.) Sabour., 1911
Efektif Tidak efektif
BAB III
METODOLOGI PENELITIAN
3.1 Tempat dan Waktu
Penelitian studi eksperimental ini dilakukan di Laboratorium Mikrobiologi
Fakultas Kedokteran dan Ilmu Kesehatan Universitas Bengkulu. Penelitian ini
berlangsung selama 4 bulan yaitu dari bulan September sampai Januari 2013.
Pembuatan skripsi berlangsung selama 3 bulan dari bulan Februari sampai April
2014.
3.2 Alat dan Bahan yang Digunakan
3.2.1 Alat
Peralatan yang digunakan pada penelitian ini, meliputi: Handscoon, cawan
petri 12,5 x 2,5 cm, tabung reaksi, rak tabung reaksi, gelas kimia 1000 ml,
autoklaf, pipet mikro, pipet tetes, batang pengaduk, pinset, kertas saring
Whatman 41, gelas ukur 250 ml dan 5 ml, labu erlenmeyer 500 ml, 250 ml,
100 ml, kawat ose, pipet pasteur, Spuit 5 ml, lampu spiritus, laminar air flow,
timer, lemari pendingin, inkubator (WTC binder), Rotary vacum evaporator,
penangas air/ hot plate, kertas label, plastik, jarum ose, penggaris millimeter,
kertas cakram, timbangan analitik, kapas, alumunium foil, cork borrer.
3.2.2 Bahan
Bahan utama yang digunakan dalam penelitian ini adalah akar gelinggang
(Senna alata L.) dan rimpang jahe merah (Zingiber officinale Rosc.) yang
berasal dari Desa Tanjung Ganti I, Kecamatan Kelam Tengah, Kabupaten
Kaur Provinsi Bengkulu. Ekstraksi akar gelinggang dan rimpang jahe merah
16
menggunakan pelarut etanol teknis 96%. Untuk uji antifungal menggunakan
bahan seperti media Potato Dextrose Agar (PDA), aquadest, etanol teknis
96%, antifungi (ketokonazol tablet 200 mg) sebagai kontrol positif, kertas
wathman, akuades steril, wrap serta biakan jamur T. rubrum downy strain.
3.3 Rancangan Penelitian
Penelitian ini menggunakan Rancangan Acak Lengkap Pola Faktorial,.
Pada percobaan ini terbagi menjadi 3 perlakuan yaitu, perlakuan yang
menggunakan ekstrak akar gelinggang, ekstrak rimpang jahe merah, dan
kombinasi dari kedua ekstrak tersebut.
3.4 Pengambilan Sampel
Bahan yang digunakan pada penelitian ini diperoleh dari akar tumbuhan
gelinggang dan rimpang jahe merah yang ada di Desa Tanjung Ganti I Kelam
Tengah, Kabupaten Kaur Provinsi Bengkulu. Pengambilan bahan ini dilakukan
pada tanggal 25 Oktober 2013 pada saat cuaca panas dan tidak hujan. Pelarut yang
digunakan untuk mendapatkan senyawa aktif yang terkandung dalam akar
gelinggang adalah dengan pelarut etanol 96%. Biakan jamur T. rubrum yang
digunakan pada penelitian ini diperoleh dari hasil biakan yang ada di
Laboratorium FMIPA Universitas Bengkulu.
3.5 Cara Kerja
3.5.1. Sterilisasi Alat dan Bahan
Semua alat sepeti cawan petri, tabung reaksi, erlenmeyer, pipet tetes,
batang pengaduk, tabung rekasi, pipet ukur, penjepit, dan medium Potato
17
Dextrose Agar sebelumnya dilapisi dengan kertas buram, setelah itu di sterilkan
menggunakan autoklaf pada suhu 121oC selama 15-20 menit.
3.5.2. Pembuatan Ekstrak Akar Gelinggang dan Rimpang Jahe Merah
Akar gelinggang dan rimpang jahe merah sebanyak 3 kg dipilih kemudian
dicuci bersih lalu di keringkan. Setelah itu masing-masing bahan dipotong kecil-
kecil dan dikeringanginkan. Lalu dimaserasi dengan menggunakan etanol 96%.
Dilakukan maserasi selama 3x24 jam pada suhu kamar sehingga diperoleh filtrat
dan residu. Kemudian ekstrak yang didapatkan diuapkan dalam penguap putar
(Rotary Vacum Evaporator) pada suhu 40 oC.
3.5.3 Pembuatan Media Tumbuh Jamur
Media untuk pertumbuhan jamur T. rubrum yang digunakan adalah Potato
Dextrose Agar (PDA). PDA memiliki komposisi per liter antara lain; Agar 15
gram, glukosa 20 gram, dan potato infusion 200 gram sama dengan 4 gram
ekstrak potato. Sehingga total PDA yang ditimbang sebanyak 39 gram serbuk
PDA, kemudian larutkan dengan aquades pada volume 1 liter. Setelah dipanaskan,
masukkan ke dalam labu Erlenmeyer dan selanjutnya sterilkan dalam autoklaf
dengan suhu 121˚C selama 15 menit. Setelah itu, Potato Dextrose Agar (PDA)
tuangkan secara aseptik pada cawan petri, dan Setelah sterilisasi dinginkan hingga
menjadi padat di tempat yang steril dan tertutup.
3.5.4 Pembuatan Larutan Kontrol Positif Ketokonazol
Gerus sediaan tablet ketokonazol 200 mg hingga halus dan ambil
sebanyak 0,0025 gram, kemudian larutkan didalam 0,5 ml akuades aduk sampai
homogen, sehingga diperoleh konsentrasi 5 mg/ml (Siswandono, 1995).
18
3.5.6 Uji Minimum Inhibitory Concentation
Minimum inhibitory concentration (MIC) merupakan konsentrasi minimal
yang dapat menghambat T. rubrum. Lakukan pengamatan pada konsentrasi yang
memiliki daya hambat 70-80% terbaik pada masing – masing perlakukan ekstrak
akar gelinggang dan ekstrak rimpang jahe merah. Daya hambat 70-80% diambil
dari diameter pertumbuhan koloni jamur yang terkecil yang terbentuk. Pembuatan
konsentrasi dilakukan dengan cara pengenceran, pengenceran dimulai dari variasi
konsentrasi 0% sampai 100%. Untuk pembuatan konsentrasi 10% ekstrak rimpang
jahe merah, ambil ekstrak kental rimpang jahe merah sebanyak 0,1 gram, ekstrak
rimpang jahe merah kemudian dilarutkan dengan aquades sampai 1 ml. Untuk
konsentrasi 20% ambil ekstrak sebanyak 0,2 gram lalu dilarutkan sampai 1 ml
aquades, begitu seterusnya pada konsentrasi lain sampai konsentrasi 100%. Dari
pengenceran didapatkan variasi konsentrasi seperti dibawah ini :
3.5.7.1. Ekstrak akar gelinggang (larutan G)
G1 : 10 %G2 : 20 %G3 : 30 %G4 : 40 %G5 : 50 %
3.5.7.2 Ekstrak rimpang jahe merah (larutan J)
J1 : 10 %J2 : 20 %J3 : 30 %J4 : 40 %J5 : 50 %
Selanjutnya lakukan penentuan uji MIC dengan menggunakan metode
dilusi padat. Metode ini dilakukan dengan cara konsentrasi ekstrak antimikroba
19
G6 : 60 %G7 : 70 %G8 : 80%G9 : 90 %G10 : 100 %
J6 : 60 %J7 : 70 %J8 : 80 %J9 : 90 %J10 : 100%
yang telah ditentukan dicampurkan dengan media PDA, setelah itu inkubasi pada
suhu 280 C sampai media memadat.
Setelah masing-masing media yang telah bercampur dengan tiap
konsentrasi ekstrak antimikroba memadat, ambil miselia jamur T. rubrum hasil
peremajaan dengan menggunakan cork borrer berukuran 0,7 cm lalu letakkan di
tengah media yang sudah padat, kemudian inkubasi pada suhu 250 C selama 7 hari
(Silvia, dkk., 2013). Setelah itu amati diameter koloni misellia T. rubrum yang
terbentuk. Semakin kecil diameter pertumbuhan koloni jamur yang tumbuh, maka
semakin besar daya hambat dari ekstrak tersebut.
3.5.7 Uji Efektivitas Kombinasi Ekstrak Akar Gelinggang dan Rimpang Jahe
Merah
Lakukan 5 perlakuan konsentrasi yang mendekati nilai daya hambat 70-
80%. Untuk pengujian aktivitas anti-fungal dilakukan dengan metode dilusi padat.
Beberapa perlakuan pada pengujian aktivitas anti-fungal ini, diantaranya:
3.5.7.1 Perlakuan ekstrak akar gelinggang dengan konsentrasi daya hambat
yang paling baik mendekati angka 70 – 80 % pada uji MIC (dikodekan
sebagai larutan G3). Kemudian dibuat pengenceran ke konsentrasi
lebih kecil dan lebih besar dengan jarak 7,5 % ( dikodekan sebagi
larutan G1, G2 < G3 > G4, G5.) dan tiap perlakuan dilakukan 5 kali
pengulangan
3.5.7.2 Perlakuan ekstrak jahe dengan konsentrasi daya hambat yang paling
baik mendekati angka 70 – 80 % pada uji MIC (dikodekan sebagai
larutan J3). Kemudian dibuat pengenceran ke konsentrasi lebih kecil
20
dan lebih besar dengan jarak 7,5 % (dikodekan sebagi larutan J1, J2 <
J3 > J4, J5) dan tiap perlakuan lakukan 5 kali pengulangan.
3.5.7.3 Perlakuan kombinasi
Selain dilakukan perlakuan pada setiap masing-masing ekstrak akar
gelinggang dan rimpang jahe merah, lakukan perlakuan kombinasi dari
kedua ekstrak tersebut dengan tiap perlakuan lakukan 3 kali
pengulangan. Adapun perlakuan ekstrak kombinasi akar gelinggang dan
rimpang jahe merah dapat dilihat pada Tabel 3.1.
Tabel 2. Perlakuan kombinasi ekstrak akar gelinggang dan rimpang jahe merah
G1 G2 G3 G4 G5
J1G1J1 G2J1 G3J1 G4J1 G5J1
J2G1J2 G2J2 34J2 G4J2 G5J2
J3G1J3 G2J3 G3J3 G4J3 G5J3
J4G1J4 G2J4 G3J4 G4J4 G5J4
J5G1J5 G2J5 G3J5 G4J5 G5J5
3.5.7.4 Setiap perlakuan ini akan diuji dengan cara :
3.5.7.4.1 Dimasukkan tiap konsentrasi ekstrak antimikroba sebanyak 1 ml
pada 9 ml Potato Dextrose Agar yang telah disterilisasi
sebelumnya pada tabung reaksi (Silvia, dkk., 2013).
21
3.5.7.4.2 Dipindahkan ke dalam cawan petri steril dengan cara aseptik dan
dibiarkan sampai memadat.
3.5.7.4.3 Miselia jamur T. rubrum hasil peremajaan diambil menggunakan
cork borrer 0,7 cm dan diletakkan pada media yang telah memadat.
3.5.7.4.4 Diinkubasi pada suhu 250 C selama 7 hari.
3.5.8 Penghitungan Zona Hambat
Penghitungan zona hambat dilakukan dengan cara mengukur diameter
pertumbuhan jamur T. rubrum yang tumbuh pada media-media yang telah
dimasukkan dengan berbagai konsentrasi ekstrak antimikroba menggunakan
penggaris dengan satuan cm dengan melakukan pengukuran diameter pada 4 sisi.
Setelah itu pada hasil tiap pengukuran ke 4 sisi tersebut lalu dirata-ratakan.
Adapun rumus untuk menghitung persentase penghambatan tersebut adalah
sebagai berikut :
X = b−a
bx 100%
Keterangan :
X = Persentase penghambat (%)
a = Diameter pertumbuhan T. rubrum pada perlakuan
b = Diameter pertumbuhan T. rubrum pada kontrol
3.6 Analisis Data
Penelitian ini adalah studi analitik eksperimental laboratorium.
Hasil pengukuran daya hambat yang terbetuk pada uji efektifitas tersebut
ditampilkan dalam bentuk tabel dan grafik.
22
BAB IV
HASIL DAN PEMBAHASAN
4.1 Uji Awal Penentuan Minimum Inhibitory Concentration
Uji ini dilakukan sebanyak 3 kali pengulangan, pada tahap awal uji ini
diambil sebanyak 10 konsentrasi, yaitu dari konsentrasi 10%-100% (10%, 20%,
30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, dan 100%) dengan kenaikan tiap
konsentrasi hanya sebanyak 10% dengan menggunakan akuades steril sebagai
pelarutnya. Hasil perhitungan daya hambat dari ekstrak akar gelinggang dan
ekstrak rimpang jahe merah dapat dilihat pada Gambar 6 dan 7.
10% 20% 30% 40% 50% 60% 70% 80% 90% 100%0
10
20
30
40
50
60
70
Konsentrasi Ekstrak Akar Gelinggang
Rat
a-ra
ta D
aya
Ham
bat
(%
)
Gambar 6. Hubungan Antara Daya Hambat Ekstrak Akar Gelinggang Terhadap Pertumbuhan Jamur T. rubrum
Dari data pada Gambar 6 terlihat bahwa konsentrasi yang paling baik dalam
menghambat pertumbuhan jamur T. rubrum yaitu pada konsentrasi 90%, dan
konsentrasi yang paling lemah dalam menghambat pertumbuhan jamur T. rubrum
yaitu pada konsentrasi 10%. Sehingga diambil 70%-80% terbaik dari konsentrasi
ekstrak akar gelinggang yaitu pada konsentrasi 30%. Selanjutnya hasil uji MIC
23
pada konsentrasi 30% (G3) digunakan sebagai titik tengah dan dibuat variasi
konsentrasi lebih besar dan lebih kecil dengan jarak 7,5%, dan didapatkan 5
konsentrasi yang digunakan untuk uji efektivitas yaitu, 15% (G1), 22,5% (G2),
30% (G3), 37,5% (G4), dan 45% (G5). Selanjutnya kelima konsentrasi tersebut
digunakan pada uji efektivitas terhadap T. rubrum.
10% 20% 30% 40% 50% 60% 70% 80% 90% 100%05
1015202530354045
Konsentrasi Ekstrak Rimpang Jahe merah
Rat
a-ra
ta d
aya
ham
bat
(%
)
Gambar 7. Hubungan antara daya hambat ekstrak rimpang jahe merah terhadappertumbuhan jamur T. rubrum
Dari data pada Gambar 7 dapat dilihat bahwa konsentrasi yang paling baik
dari ekstrak rimpang jahe merah dalam menghambat pertumbuhan jamur T.
rubrum yaitu pada konsentrasi 80%, dan konsentrasi yang paling lemah dalam
menghambat pertumbuhan jamur T. rubrum yaitu pada konsentrasi 30%.
Sehingga diambil 70%-80% terbaik dari konsentrasi ekstrak rimpang jahe merah
yaitu pada konsentrasi 50%. Selanjutnya hasil uji MIC pada konsenrasi 50% (J3)
digunakan sebagai titik tengah dan dibuat variasi konsentrasi lebih besar dan lebih
kecil dengan jarak 7,5%, dan didapatkan 5 konsentrasi yang digunakan untuk uji
efektivitas yaitu, 35% (J1), 42,5% (J2), 50% (J3), 57,5% (J4), dan 65% (J5).
Selanjutnya kelima konsentrasi tersebut diuji efektivitasya terhadap T. rubrum.
24
4.2 Uji Efektivitas
Uji efektivitas ekstrak akar gelinggang (Senna alata L.) maupun rimpang
jahe merah (Zingiber officinale Rosc.) terhadap jamur T. rubrum dilakukan
dengan menggunakan metode dilusi padat. Sebanyak 1 ml konsentrasi ekstrak
antimikroba dicampurkan pada 9 ml Potato Dextrose Agar yang telah disterilisasi
sebelumnya di dalam tabung reaksi.
Lalu dipindahkan ke dalam cawan petri steril dengan cara aseptik dan dibiarkan
sampai memadat. Setelah itu miselia jamur T. rubrum hasil peremajaan diletakan
di atas media yang telah memadat tadi menggunakan cork borrer 0,7 cm. Setelah
diinkubasi pada suhu 250 C selama 7 hari, terbentuk pertumbuhan dari jamur T.
rubrum. Semakin kecil diameter pertumbuhannya berarti semakin besar daya
hambat dari ekstrak tersebut. Dari hasil pengukuran terhadap kontrol negatif
didapatkan besarnya pertumbuhan dari jamur T. rubrum yaitu sebesar 4,3 cm.
Daya hambat dari ekstrak tersebut terhadap pertumbuhn T. rubrum ini di
tampilkan dalam bentuk persentase, dimana untuk menghitung persentase tersebut
menggunakan rumus sebagai berikut (Silvia, dkk., 2013).
X = b−a
bx 100%
Keterangan :
X = Persentase penghambat (%)
a = Diameter pertumbuhan T. rubrum pada perlakuan
b = Diameter pertumbuhan T. rubrum pada kontrol
Adapun hasil penghitungan diameter daya hambat dan persentase rata-rata
daya hambat dari ekstrak akar gelinggang G1, G2, G3, G4, dan G5, rimpang jahe
25
merah J1, J2, J3, J4, dan J5 maupun kombinasi terhadap pertumbuhan T. rubrum
yang terbentuk dapat dilihat pada Tabel 3, 4, dan 5
Tabel 3. Data rata-rata Diameter dan Persentase Daya Hambat Pengaruh Dari Ekstrak Akar Gelinggang (Senna alata L.) Terhadap Pertumbuhan T. rubrum (Castell.) Sabour., 1911
Perlakuan (Kode)Pengulangan (cm) Persentase
Daya Hambat (%)1 2 3 4 5
15% (G1) 1,52 1,62 1,77 2,02 1,8 59,394
22,5% (G2) 1,5 1,65 1,42 1,75 1,22 64,926
30% (G3) 1,3 1,3 1,32 1,72 1,32 67,624
37,5% (G4) 1,35 1,1 1,2 1,25 1,35 70,926
45% (G5) 1,22 1,15 1,12 1,17 1,3 72,274
Ketoconazole 1,45 1,75 1,5 1,17 1,25 64,41
Dari data Tabel 3 dapat dilihat terjadi peningkatan daya hambat dari
konsentrasi yang terkecil hingga konsentrasi terbesar. Untuk konsentrasi 15%
(G1) dari ekstrak akar gelinggang (Senna alata L.) dihasilkan daya hambat
terhadap pertumbuhan T. rubrum sebesar 59,394%, dan konsentrasi 22,5% (G2)
daya hambatnya sebesar 64,926%, dimana pada konsentrasi ini terjadi daya
hambat yang hampir sama besar dengan daya hambat yang dihasilkan pada
kontrol positif, konsentrasi 30% (G3) daya hambatnya 67,624%, konsentrasi
37,5% (G4) daya hambatnya sebesar 70,926%, sedangkan untuk konsentrasi 45%
(G5) daya hambat yang terbentuk sebesar 72,274%, konsentrasi 45% (G5) ini
memiliki daya hambat jauh lebih besar dibandingkan dengan daya hambat yang
dihasilkan oleh kontrol positif.
26
Grafik hubungan antara besarnya persentase daya hambat pertumbuhan
dari T. rubrum dengan ekstrak Akar Gelinggang (Senna alata L.) dapat dilihat
pada Gambar 8.
15.00% 22.50% 30.00% 37.50% 45.00%0
1020304050607080
Konsentrasi Ekstrak Akar Gelinggang
Rat
a-ra
ta D
aya
Ham
bat
(%
)
Gambar 8. Grafik hubungan antara besarnya persentase daya hambat pertumbuhan dari T. rubrum dengan ekstrak akar gelinggang (Senna alata L.)
Dari data grafik Gambar 8 dapat dilihat terjadi peningkatan daya hambat
terhadap pertumbuhan jamur T. rubrum dan kondisi ini berbanding lurus dengan
peningkatan konsentrasi dari ekstrak akar gelinggang (Senna alata L.) tersebut,
dengan konsentrasi 45% (G5) sebagai konsentrasi yang memiliki persentase daya
hambat paling besar dibandingkan konsentrasi ekstrak akar gelinggang lainnya,
dan konsentrasi 15% (G1) memiliki daya hambat terkecil dari semua konsentrasi
ekstrak akar gelinggang yang telah diujikan. Hal ini menunjukan bahwa semakin
tinggi konsentrasi dari ekstrak tersebut semakin besar pula daya hambat yang
dihasilkan. Jadi jelas bahwa zat antimikroba tersebut memiliki sifat concentration
dipendent killing, yang artinya semakin tinggi konsntrasi zat antimikroba tersebut
semakin besar pula daya bunuh atau daya hambatnya terhadap mikroba
(Gunawan, dkk., 2009).
27
Akar gelinggang mempunyai kandungan senyawa kimia seperti fenolik,
antrakuinon (Rhein, aloe-emodin, emodin, chrysophanol dan physcion), tanin,
alkaloid, fenol dan flavonoid (Mahmood, 2008). Dari beberapa kandungan
senyawa kimia tersebut juga terdapat pada bagian lain dari tumbuhan gelinggang
(Senna alata L.) yaitu bagian daunnya, seperti flavonoid, alkaloid, atrakuinon,
tanin (Hujjatusnaini, 2010). Beberapa penelitian membuktikan bahwa kandungan
senyawa kimia tersebut memiliki efek sebagai antifungal.
Hasil penelitian Hujjatusnaini (2010) menunjukkan daya hambat ekstrak
daun Senna alata L. yang efektif dalam menghambat jamur Trichophyton sp pada
konsentrasi 60% dengan lama kultur 1x24 sampai 2x24 jam setelah perlakuan.
Mekanisme dari kandungan senyawa antifungal yang terkandung dalam tanaman
gelinggang (Senna alata L.) tersebut dalam menghabat pertumbuhan jamur
Trichophyton sp adalah dengan cara menghambat kerja dari enzim tertentu yang
ada pada jamur dan mengakibatkan terganggunya metabolisme dari sel jamur,
sehingga akan menghambat proses pemanjangan hifa (misellium) pada jamur.
Terjadinya penghambatan dari fragmentasi hifa (misellium) disebabkan karena
terjadinya kerusakan pada jaringan hifa tersebut, secara bersamaan sel-sel jamur
tersebut sangat rentan terhadap fluktuasi dari perubahan lingkungan dan
menyebabkan sel jamur tidak dapat bertahan hidup. Hal ini bisa dikatakan bahwa
sel jamur tidak dapat berkembang biak sebagaimana mestinya, hal ini sejalan
dengan penelitian yang dilakukan oleh (Hujjatusnaini, 2010) tentang uji pengaruh
ekstrak daun ketepeng cina (Senna alata L.) terhadap pertumbuhan Trichophyton
sp. Untuk mekanisme dari senyawa flavonoid sebagai antifungal adalah dengan
28
cara mendenaturasikan protein dan membuat lisis membrane sel jamur yang
bersifat irreversibel (Robinson, 1995).
Menurut (Windarwati, 2011) mekanisme senyawa fenol dalam
menghambat pertumbuhan mikroba adalah dengan cara mengendapkan protein sel
si mikroba, merusak dan menembus dinding sel, serta merusak protoplasma dari si
mikroba. Enzim pada mikroba juga dapat didenaturasi oleh komponen dari
senyawa fenol dimana enzim tersebut bertanggung jawab terhadap asam amino
yang terlibat dalam proses germinas atau dengan kata lain berpengaruh terhadap
germinasi spora. Enzim esensial di dalam sel mikroba dapat diinaktifkan oleh
senyawa fenolik yang bermolekul besar walaupun pada konsentrasi yang sangat
rendah.
Selain itu senyawa fenol juga dapat memutuskan ikatan peptidoglikan yang
nantinya dapat menembus dinding sel mikroba. Setelah menembus dinding sel si
mikroba, terjadilah kebocoran nutrien sel dari mikroba, hal ini dikarenakan
larutnya komponen-komponen dari membran sel yang berikatan secara
hidrofobik, serta rusaknya komponen-komponen tersebut yang berakibat
meningkatnya permeabilitas membran. Sehingga mengakibatkan terhambatnya
aktivitas dan biosintesa enzim-enzim spesifik yang diperlukan dalam reaksi
metabolisme akibat kerusakan dari membran sel (Robinson, 1995).
29
Tabel 4. Data rata-rata Diameter dan Persentase Daya Hambat Pengaruh Dari Ekstrak Rimpang Jahe Merah (Zingiber officinale Rosc.) Terhadap Pertumbuhan T. rubrum
Perlakuan (Kode)
Pengulangan (cm)
Rata-rata (cm)
Persentase daya hambat
(%)1 2 3 4 5
35% (J1) 2,5 2,9 2,52 2,32 2,6 2,57 40,27
42,5% (J2) 2,45 2,4 2,12 2,6 2,63 2,44 43,27
50% (J3) 2,47 1,42 2,3 2,52 2,52 2,25 47,76
57,5% (J4) 2,5 2,67 2,37 2,3 2,4 2,45 43,39
65% (J5) 2,65 2,55 2,75 2,32 2,7 2,59 39,67
Ketoconazole 1,45 1,75 1,5 1,17 1,25 1,42 64,41
Untuk data daya hambat dari ekstrak rimpang jahe merah (Zingiber
officinale Rosc.) ini tidak ada satupun konsentrasi yang melebihi ataupun
menyamai besarnya daya hambat dari kontrol positif. Dimana untuk konsentrasi
35% (J1) persentase daya hambat yang terbentuk hanya sebesar 40,27%,
konsentrasi 42,5% (J2) sebesar 43,27%, konsentrasi 50% (J3) sebesar 47,76%
yang merupakan konsentrasi dengan daya hambat paling besar dari semua
konsentrasi ekstrak rimpang jahe merah, dan untuk konsetrasi 57,5% (J4)
memiliki daya hambat sebesar 43,39%, sedangkan konsentrasi 65% (J5)
merupakan konsentrasi dengan daya hambat terkecil dengan daya hambat sebesar
39,67%.
Grafik hubungan antara besarnya persentase daya hambat pertumbuhan
dari T. rubrum dengan ekstrak Rimpang Jahe Merah (Zingiber officinale Rosc.)
dapat dilihat pada Gambar 9.
30
35.00% 42.50% 50.00% 57.50% 65.00%0
10
20
30
40
50
Konsentrasi Ekstrak Rimpang Jahe Merah
Rat
a-ra
ta D
aya
Ham
bat
(%
)
Gambar 9. Grafik hubungan antara besarnya persentase daya hambat pertumbuhan dari T. rubrum dengan ekstrak Rimpang Jahe Merah (Zingiber officinale Rosc.)
Dari data grafik (Gambar 9) terlihat terjadi peningkatan daya hambat pada
konsentrasi 35% (J1) sampai dengan konsentrasi 50% (J3) dan mengalami
penurunan pada konsentrasi 50% (J3) sampai dengan konsentrasi 65% (J5).
Kondisi ini dikarenakan zat antimikroba yang bersifat time dipendent killing, yaitu
zat antimikroba jika kadarnya dipertahankan sedikit lama di atas kadar hambat
minimum/MIC akan menghasilkan daya bunuh maksimal terhadap mikroba.
Kadar konsentrasi zat antimikroba yang sangat tinggi tidak meningkatkan
efektivitas untuk membunuh kuman (Gunawan. dkk., 2009). Jadi, jelas disini yang
dibutuhkan adalah memperlama pajanan antimikroba kepada si mikroba.
Besarnya daya hambat yang dihasilkan oleh ekstrak rimpang jahe merah
(Zingiber officinale Rosc.) terhadap pertumbuhan dari jamur T. rubrum ini tidak
sebesar daya hambat yang dihasilkan oleh ekstrak akar gelinggang (Senna alata
L.). Hal ini dikarenakan ada beberapa faktor yang mempengaruhi kualitas dari
ekstrak rimpang jahe merah, seperti suhu. Dimana beberapa senyawa yang
terkandung dalam rimpang jahe merah yang berfungsi sebagai antifungal hanya
tahan pada suhu tertentu. Dimana untuk senyawa seperti gingerol yang
31
terkandung dalam rimpang jahe dapat dihasilkan rendemen yang paling tinggi
hanya pada suhu 400 C. Jika suhu lebih rendah dari suhu tersebut rendemen yang
dihasilkan juga akan semakin sedikit. dan jika suhu di atas 450C gingerol akan
berubah menjadi shagol (Gaedcke, 2005).
32
Tabel 5. Data Rata-rata Diameter Pertumbuhan dan Persentase Untuk Perlakuan Kombinasi Ekstrak Akar Gelinggang (Senna alata L.) dan rimpang jahe merah (Zingiber officinale Rosc.) terhadap pertumbuhan jamur T. rubrum (Castell.) Sabour
Perlakuan Kombinasi (Kode)Rata-Rata Persentase Daya
Hambat (%)35% (J1) 15% (G1) 40,54
35% (J1) 22,5% (G2) 53,33
35% (J1) 30% (G3) 61,70
35% (J1) 37,5% (G4) 51,97
35% (J1) 45% (G5) 57,67
42,5% (J2) 15% (G1) 41,93
42,5% (J2) 22,5% (G2) 57,05
42,5% (J2) 30% (G3) 56,04
42,5% (J2) 37,5% (G4) 61,46
42,5% (J2) 45% (G5) 46,35
50% (J3) 15% (G1) 52,38
50% (J3) 22,5% (G2) 55,65
50% (J3) 30% (G3) 52,94
50% (J3) 37,5% (G4) 48,29
50% (J3) 45% (G5) 52,4
57,5% ( J4) 15% (G1) 47,09
57,5% ( J4) 22,5% (G2) 44,64
57,5% ( J4) 30% (G3) 46,89
57,5% ( J4) 37,5% (G4) 57,20
57,5% ( J4) 45% (G5) 51,62
65% (J5) 15% (G1) 38,21
65% (J5) 22,5% (G2) 40,92
65% (J5) 30% (G3) 62,47
65% (J5) 37,5% (G4) 51,77
65% (J5) 45% (G5) 54,10
Pada Tabel 5 dapat dilihat hasil dengan persentase daya hambat tertinggi
konsentrasi dari kombinasi ekstrak rimpang jahe merah (Zingiber officinale Rosc.)
33
dan akar gelinggang (Senna alata L.) berada pada angka 62,47% yaitu pada
kombinasi 65% (J5) 30% (G3) dan untuk persentase daya hambat terendah dari
kombinasi ekstrak rimpang jahe merah (Zingiber officinale Rosc.) dan akar
gelinggang (Senna alata L.) adalah sebesar 38,21% yaitu pada kombinasi 65%
(J5) 15% (G1). Jika dibandingkan dengan persentase daya hambat ynag dihasilkan
oleh ekstrak akar gelinggag (Senna alata L.) saja, rata-rata konsentrasi dari
kombinasi ekstrak akar gelinggang (Senna alata L.) dan rimapng jahe merah
(Zingiber officinale Rosc.) memiliki persentase daya hambat yang lebih rendah.
Tetapi nilai persentase daya hambat tertinggi dari kombinasi ekstrak rimpang jahe
merah (Zingiber officinale Rosc.) dan akar gelinggang (Senna alata L.) yaitu pada
kombinasi 65% (J5) 30% (G3) hampir mendekati nilai persentase dari daya
hambat yang dihasilkan oleh kontrol positif (ketokonazole). Sedangkan jika
dibandingkan dengan rata-rata persentase daya hambat yang dihasilkan oleh
ekstrak rimpang jehe merah (Zingiber officinale Rosc.) saja, persentase daya
hambat yang dihasilkan oleh kombinasi ekstrak rimpang jahe merah (Zingiber
officinale Rosc.) dan akar gelinggang (Senna alata L.) masih memiliki persentase
daya hambat yang jauh lebih tinggi.
(Hayati, dkk., 2010) menjelaskan bahwa sampel tanaman yang sama tetapi
berasal dari daerah yang berbeda akan memberikan aktivitas yang berbeda pula.
Hal ini dikarenakan variasi dan jumlah senyawa aktif dalam tanaman dipengaruhi
oleh beberapa faktor, seperti : lingkungan geografis, iklim, tanah, morfologi
tanaman, serta sifat sinergis atau antagonis senyawa- senyawa dalam tanaman
tersebut.
34
Adapun beberapa faktor-faktor lain yang dapat mempengaruhi besarnya
daya hambat yang terbentuk pada uji yang telah dilakukan, yaitu antara lain
seperti jumlah dari mikroba (jamur) yang telah diinokulasikan pada cawan petri
yang telah diberikan senyawa antimikroba, dan kecepatan pertumbuhan mikroba
yang telah diujikan, serta kerentanan dari mikroba itu sendiri (WKU, 2005).
Selain itu juga pengaruh banyaknya konsentrasi senyawa antimikroba yang
diberikan kepada mikroba yang diujikan turut serta berperan terhadap besarnya
daya hambat yang terbentuk. Ini sering disebut juga sebagai concentration
dependent killing. Pada kondisi ini senyawa antimokroba akan menghasilkan daya
bunuh yang tinggi jika kadarnya diberikan dalam jumlah yang cukup tinggi
(Gunawan, dkk., 2009). Dari hasil penelitian yang dilakukan oleh (Hujjatusnaini,
2010) juga memperlihatkan perbandingan antara umur kultur 1x24 jam
dibandingkan dengan 4x24 dari konsentrasi ekstrak antimikroba yang diujikan
kepada Trichophyton sp, dimana kadar efektifitas dari senyawa antimikroba
tersebut memperlihatkan penurunan daya hambat pada umur kultur 4x24. Hal ini
menjelaskan bahwa kadar dari senyawa antimikroba berpengaruh terhadap waktu,
jadi semakin lama kadar senyawa tersebut tersebut diberikan maka efektifitasnya
juga akan semakin berkurang, sehingga perlu diberikan penambahan atau
pemberian ulang senyawa antimikroba. Ini perlu diperhatikan jika ingin
diaplikasikan untuk pengobatan terhadap infeksi yang disebabkan oleh jamur.
Beberapa zat aktif yang berperan sebagai antimikroba dalam jahe merah
masih belum diketahui interaksinya, oleh karena itu perlu dilakukan penelitian
lebih lanjut untuk mengetahui kemungkinan efek sinergisnya atau antagonisnya,
sama halnya dengan kombinasi dari ekstrak rimpang jahe merah dan akar
35
gelinggang yang masih memerlukan penelitian lebih lanjut mengenai efek
antagonis dari senyawa kimia yang terkandung dalam kedua ekstrak tersebut.
4.3 Analisis Data
Tabel 6. Tabel ANOVA dari Data Persentase Daya Hambat Kombinasi Ekstrak Rimpang Jahe Merah (Zingiber officinale Rosc.) dan Akar Gelinggang (Senna alata L.).
SK JK Db KT f-hitF table
5% 1%
Perlakuan 3304,04 24 137,668 2,56 s 1,74 2,18
Jahe 182,91 4 45,727 0,850 2,56 3,72
Gelinggang 1279,48 4 319,870 5,949 s 2,56 3,72
Interaksi
Jahe*Gelinggang1841,65 16 115,103 2,141 s 1,85 2,38
Galat 2688,26 50 53,765
Total 5992,3 74
Dari data Tabel 6 didapatkan bahwa nilai dari F hitung dari interaksi akar
gelinggang dan rimpang jahe merah lebih besar dari pada nilai F tabel pada taraf
1%, yang berarti bernilai signifikan dimana untuk nilai interaksi dari akar
gelinggang dan rimpang jahe merah adalah sebesar 2,141, sedangkan F tabel pada
taraf 1 % bernilai 2,38. Kemudian data tersebut masuk dalam kriteria untuk
dilakukan uji lanjut. Adapun uji lanjut yang digunakan adalah uji BNT.
Setlah dilakukan uji BNT dari data tersebut, maka hasil dari uji yang telah
dilakukan ditampilkan pada Tabel 7.
36
Tabel 7. Data Hasil Uji BNT Dari Perlakuan Kombinasi Ekstrak Akar Gelinggang (Senna alata L.) dan Rimpang Jahe Merah (Zingiber officinale Rosc.)
Konsentrasi (%)
Notasi* BNT 1%
J5G1 a 14,384
J1G1 ab
J5G2 ab
J2G1 abc
J4G2 abcd
J2G5 abcd
J4G3 abcd
J4G1 abcd
J3G4 abcde
J2G4 abcde
J4G5 abcde
J5G4 abcde
J1G4 abcde
J3G1 abcde
J3G5 abcde
J3G3 bcde
J1G2 bcde
J5G5 bcde
J3G2 cde
J2G3 cde
J2G2 de
J4G4 de
J1G5 de
J1G3 e
J5G3 e
Keterangan : * = notasi yang sama menunjukkan perlakuan yang memiliki
hasil tidak berbeda nyata.
37
Konsentrasi kombinasi ekstrak akar gelinggang dan rimpang jahe merah
yang secara statistik efektif dalam menghambat pertumbuhan T. rubrum adalah
konsentrasi J1G3, karena konsentrasi J1G3 merupakan konsentrasi terendah yang
mempunyai daya hambat yang efektif, sehingga pemilihan konsentrasi kombinasi
yang paling efektif adalah ekstrak rimpang jahe merah pada konsentrasi 35% (J1)
dikombinasikan dengan akar gelinggang pada konsentrasi 22,5% (G3).
38
BAB V
SIMPULAN DAN SARAN
5.1 Simpulan
Dari hasil penelitian yang sudah dilakukan maka peneliti dapat menyimpulkan
bahwa :
1. Kombinasi ekstrak akar gelinggang dan rimpang jahe merah memiliki
daya hambat paling efektif terhadap T. rubrum yaitu pada kombinasi
J1G3
2. Daya hambat yang dihasilkan oleh akar gelinggang saja jauh lebih besar
dibandingkan dengan kombinasi rimpang jahe merah dan akar
gelinggang maupun rimpang jahe merah saja
5.2 Saran
1. Perlu dilakukan fitokimia lebih lanjut untuk melihat efek sinergis dan
antagonis dari kombinasi ekstrak akar gelinggang dan rimpang jahe
merah.
2. Melakukan uji antifungi dari kombinasi ekstrak tersebut terhadap jenis
jamur yang lain.
3. Perlu dilakukan uji efek antifungal dari kombinasi ekstrak akar
gelinggang dan rimpang jahe merah secara in vivo terhadap hewan
coba.
39
DAFTAR PUSTAKA
Agustine R. 2012. Perbandingan Sensitivitas dan Spesifisitas Pemeriksaan Sediaan Langsung KOH 20% Dengan Sentrifugasi dan Tanpa Sentrifugasi
Tinea Kruris. Tesis. Fakultas Kedokteran Universitas Andalas. http://repository.unand.ac.id/18063/1/Perbandingan%20Sensitivitas%20Dan%20Spesifitas%20pemeriksaan%20sediaan%20langsung%20KOH%2020%25%20dengan%20Sentrifugasi%20dan%20tanpa%20sentrifugasi%20pada%20tinea%20kruris.pdf Diakses 25 April 2014
Alexopoulus J.C, Mims C.W, dan Well B. M. 1996. Introductory Mycology. Fourth Edition. Jhon Wiley & Sons. INC. New York
Brooks, Butel and Morse. 2008. Mikrobiologi Kedokteran Jawetz, Melnick & Adelberg. Edisi 23. EGC. Jakarta
Ellis D, Davis H, Handke R dan Bartley R. 2007. Descriptions Of Medical Fungi. Second Edition. Mycology Unit Women’s and Children’s Hospital. School Molecular and Biomedical Science University Of Adelaide. North Adelaide, Australia.
Fernand V. E. 2008. Determination of Pharmacologically Active Compounds in Root Extracts of Cassia alata L. by use of High Performance Liquid Chromatography. Journal of National Institute of Health (NIC Public Medicine Access). http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC2276639/ . (Edisi 74(4) ) : pp 896-902
Gaedcke, F. dan Feistel, B., (2005), ―Ginger Extract Preparation‖, U.S. Patent No. 10/496885. Dalam Ramadhan A., Phaza H. 2010. Pengaruh Konsentrasi Etanol, Suhu dan Jumlah Stage Pada Ekstraksi Oleoresin Jahe (Zingiber officinale Rosc) Secara Batch. Skripsi. Fakultas Teknik. Universitas Diponegoro Semarang.http://eprints.undip.ac.id/13902/1/Laporan_Penelitian_Pengaruh_Konsentrasi_etanol,_suhu_dan_jumlah_stage_pada_ekstraksi_oleoresin_ja.pdf. Diakses 07 april 2014
Gunawan S. G., Nafrialdi R. S, dan Elisabeth. 2009. Farmakologi dan Terapi. Edisi 5. Universitas Indonesia. Jakarta. pp 574-595
Hayati E. K, Fasyah A. G, dan Sa’adah L. 2010. Fraksinasi dan identifikasi senyawa tanin pada daun belimbing wuluh (Averrhoa bilimbi L). Jurnal Kimia 4(2). Hal:193-200
40
Hirt M. H, dan M'Pia Bindanda. 2008. Natural Medicine in the Tropics I: Foundation text. anamed, Winnenden, Jerman
Hujjatusnaini N. 2010. Uji Potensi Ekstrak Ketepang Cina (Cassia alata L.) Terhadap Penghambatan Pertumbuhan Trichopyton sp. Tesis. Jurnal Universitas Islam Negeri Malang. http://ejournal.uin-malang.ac.id/index.php/lemlit/article/view/2050/pdf Diakses 12 Januari 2014
Kusriningrum R.S. 2010. Perancangan Percobaan. Airlangga University Press.. Surabaya. pp 213 -215.
Mahmood El dan Doughari. 2008. Phytochemical screening and antibacterial evaluation of the leaf and root extracts of Cassia alata Linn. African Journal of Pharmacy and Pharmacology.http://sciencestage.com/uploads/text/XYnbyotXVTVzOJvCJf1I.pdf.(Edisi 2 (7) : pp. 124-129
Pratiwi S. T. 2008. Mikrobiologi Farmasi. Erlangga. Jakarta. pp 188-191.
Robinson T. 1995. Kandungan Organik Tumbuhan Tinggi. Edisi VI. ITB: Bandung.
Schauenberg P dan Paris F. 1977. Guide to medical plants. Keats Publishing New Canaan CT
Silvia F., Raharjo., dan Guntur T. 2013. Aktivitas Antifungi Ekstrak Daun Kedondong (Spondias pinnata) dalam Menghambat Pertumbuhan Aspergillus flavus. Jurnal Lentera Bio. http://ejournal.unesa.ac.id/index.php/lenterabio (Vol. 2 No. 2) : pp 125-129. Diakses 15 desember 2013
Siswandono S. B. 1995. Kimia Medisinal, Edisi I. Universitas Airlangga. Surabaya.
Supriadi., Yusron M., dan Wahyuno D. 2011. JAHE (Zingiber officinale Rosc.). Balai Penelitian Tanaman Obat dan Aromatik. Bogor
Venkatesan G. 2007. Trichophyton rubrum – the predominant etiological agent in human dermatophytoses in Chennai, India. African Journal of Microbiology Research. http://www.academicjournals.org/ajmr/pdf/Pdf2007/May/Venkatesan.pdf. pp. 009-012. diakses 25 januari 2014
Warrell D, Cox T, dan Firth J. 2012. Oxford Textbook of Medicine : Infection. Oxford University Press : United Kingdom.
41
Weller R, Hunter J, dan Dahl M. 2008. Cinical Dermatology. Fourth Edition. Blackwell publishing. USA.
Windarwati S. 2011. Pemanfaatan Fraksi Aktif Ekstrak Tanaman Jarak Pagar (Jatropha curcas Linn.) Sebagai Zat Antimikroba dan Antioksidan Dalam Sediaan Kosmetik. Tesis. IPB Bogor. http://fateta.ipb.ac.id/~tin/images/stories/jurnal/TESIS,%20POSTER%20PENELITIAN/Sri%20Windarwati%20%20F351074011/F351074011Sri%20Windarwati.pdf. Diakses 11 april 2014
WKU. 2005. Microbiology, General microbiology Lab Biology 208. Biology- Western Kentucky University.http://bioweb.wku.edu/courses/Biol208/Lab_Manual/208%20week%205-5.pdf.
42
LAMPIRAN
Lampiran 1. Foto- foto Penelitian Cara Pembuatan Ekstrak
43
Gambar 1. Pencucian bahan yang akan diekstraksi
Gambar 2. Pengeringan bahan setelah proses pencucian
Gambar 3. Proses pengering anginan potongan bahan yang akan
diekstrak
Gambar 4. Proses maserasi bahan menggunakan pelarut etanol 96%
44
Gambar 5. Proses penyaringan bahan setelah maserasi
Gambar 6. Proses pemisahan pelarut dan ekstrak (Rotary
Evaporator)
Gambar 7. Proses water bath Gambar 8. Hasil ekstraksi
Lampiran 2. Alat-alat yang digunakan
45
Gambar 9. Timbangan Analitik
Gambar 11. Hot Plate Gambar 12. Vortex
Gambar 13. Laminar air flow Gambar 14. Alat gelas
Gambar 15. Mikropipet dan Tip
Lampiran 3. Proses Uji Efektivitas
46
Gambar 24. Pencucian alat Gambar 25. Proses pembuatan media PDA
Gambar 26. Proses pensterilan alat menggunakan Autoklaf
Gambar 27. Proses peremajaan jamur dalam agar NB yang akan digunakan untuk uji efektivitas
47
Gambar 28. Hasil pembuatan media agar yang sudah diberikan ekstrak
rimpang jahe merah
Gambar 29. Proses inokulasi jamur pada media yang berisi ekstrak antifungal
Gambar 28. Hasil pembuatan media agar yang sudah diberikan ekstrak
gelinggang
Gambar 28. Hasil peremajaan jamur T. rubrum yang siap diinokulasi ke media
agar berisi ekstrak
Lampiran 4. Foto Hasil Uji Efektivitas
a. Akar Gelinggang
48
Gambar 4.3. Hasil Uji Efektivitas Akar Gelinggang
15% (G1)
Gambar 4.4. Hasil Uji Efektivitas Akar Gelinggang
22,5% (G2)
Gambar 4.5 Hasil Uji Efektivitas Akar Gelinggang
30% (G3)
Gambar 4.6 Hasil Uji Efektivitas Akar Gelinggang
37,5% (G4)
Gambar 4.7 Hasil Uji Efektivitas Akar Gelinggang
45% (G7)
Gambar 4.8 Hasil Uji Kontrol Positif (Ketokonazole)
1,5 cm1,75 cm
1,25 cm 1,39 cm
1,19 cm 1,42 cm
b. Rimpang Jahe Merah
49
Gambar 4.10 Hasil Uji Efektivitas Rimpang Jahe
Merah 35% (J1)
Gambar 4.11 Hasil Uji Efektivitas Rimpang Jahe
Merah 42,5% (J2)
Gambar 4.12 Hasil Uji Efektivitas Rimpang Jahe
Merah 50% (J3)
Gambar 4.13 Hasil Uji Efektivitas Rimpang Jahe
Merah 57,5% (J4)
Gambar 4.14 Hasil Uji Efektivitas Rimpang Jahe
Merah 65% (J5)
Gambar 4.15 Hasil Uji Kontrol Positif (Ketokonazole)
2,57 cm2,44 cm
2,25 cm2,45 cm
2,59 cm 1,42 cm
c. Kombinasi Akar Gelinggang dan Rimmpang Jahe Merah
50
Gambar 4.17 Hasil Uji Efektivitas Kombinasi Terkecil (J1G1)
Gambar 4.18 Hasil Uji Efektivitas Kombinasi Terbesar (J5G3)
Gambar 4.19 Hasil Uji Kontrol Negatif (Aquades)
Gambar 4.20 Hasil Uji Kontrol Positif (Ketokonazole)
2,56 cm 1,61 cm
4,3 cm 1,42 cm
Lampiran 4. Perhitungan ANOVA Pengaruh Ekstrak Rimpang Jahe Merah dan Akar Gelinggang Terhadap Pertumbuhan T. rubrum (Castell.) Sabour
Tabel 1 Data Rata-rata Presentase Daya Hambat pengaruh dari Ekstrak Rimpang Jahe Merah
Konsentrasi Pengulangan Jumlah Rata-rata1 2 3 4 5
35% (J1) 41,86 32,55 41,39 46,04 39,53 201,37 40,2742,5% (J2) 43,02 44,18 50,69 39,53 38,95 216,37 43,2750% (J3) 42,55 66,97 46,51 41,39 41,39 238,81 47,76
57,5% (J4) 41,86 39,53 44,88 46,51 44,18 216,96 43,3965% (J5) 38,37 40,70 36,05 46,04 37,21 198,37 39,67
Ketoconazole 66,27 59,30 65,11 60,46 70,93 322,07 64,41
Tabel 2 Data Kuadrat Presentase Daya Hambat pengaruh dari Ekstrak Rimpang Jahe Merah
Konsentrasi
Pengulangan Jumlah Rata-rata1 2 3 4 5
35% (J1) 1752,26
1059,50
1713,13
2119,68
1562,62
8207,19 1641,44
42,5% (J2) 1850,72
1951,87
2569,48
1562,62
1517,10
9451,79 1890,36
50% (J3) 1810,50
4484,98
2163,18
1713,13
1713,13
11884,92
2376,98
57,5% (J4) 1752,26
1562,62
2014,21
2163,18
1951,87
9444,14 1888,83
65% (J5) 1472,26
1656,49
1299,60
2119,68
1384,58
7932,61 1586,52
Ketoconazole
4391,71
3516,49
4239,31
3655,41
5031,06
20833,98
4166,8
Jk Total = ∑ Xi2 – (∑ Xi)2
N
= (8207,19+9451,79+11884,92+9444,14+7932,61+20833,98) -
(201,37+216,37+238,81+216,96+198,37+322,07)2
30
= 67754,68– 64769,887
= 2984,79
51
KT Total = JK Total
K−1
= 2984,79
5 = 596,96
Jk Perlakuan = ∑(∑ Xi)2
r -
∑( Xi)2
N
=
(40549,87+46815,97+57030,22+47071,64+39350,66+103729,08)❑
5
- (201,37+216,37+238,81+216,96+198,37+322,07)2
30
= 66909,488 – 64769,887
= 2139,601
KT Perlakuan = JK Per lakuan
K−1
=2139,601
5 = 427,920
JK Galat = JK Total –JK Perlakuan
= 2984,79 – 2139,601
= 845,189
KT Galat = JK Galat
N−K
KT Galat = 845,189
24 = 35,216
F- hitung = Varian Perlakuan
Varian Residu
= 427,92035,216
= 12,151
F Tabel = α = 0,05, db (K-1) (N-K)
α = 0,05, db (6-1) (30-6)
α = 0,05, db (5) (24)
52
F Tabel = α = 0,01, db (K-1) (N-K)
α = 0,01, db (6-1) (30-7)
α = 0,01, db (5) (24)
53
Tabel 3. ANOVA dari Data Pengukuran Presentase Daya Hambat Ekstrak
Rimpang Jahe Merah Terhadap T. rubrum (Castell.) Sabour
SK JK DB KT Fhitung Ftabel
5% 1%
Perlakuan 2139,601 5 427,920 12,151S 2,62 3,90
Galat 845,189 24 35,216
Total 2984,79 29
Keterangan :
SK : Sumber Keragaman
JK : Jumlah Kuadrat
DB : Derajat Bebas
KT : Kuadrat Tengah
S : Signifikan
Tabel 4 Data Rata-rata Presentase Daya Hambat Pengaruh Dari Ekstrak Akar Gelinggang
Konsentrasi Pengulangan Jumlah Rata-rata1 2 3 4 5
15% (G1) 64,65 62,33 58,83 53,02 58,14 296,97 59,39422,5% (G2) 65,12 61,62 66,97 59,30 71,62 324,63 64,92630% (G3) 69,76 69,76 69,30 60 69,30 338,12 67,624
37,5% (G4) 68,60 74,41 72,09 70,93 68,60 354,63 70,92645% (G5) 71,62 73,25 73,95 72,79 69,76 361,37 72,274
Ketoconazole 66,27 59,30 65,11 60,46 70,93 322,07 64,414
Tabel 5 Data Kuadrat Presentase Daya Hambat Pengaruh Dari Ekstrak Akar Gelinggang
Konsentrasi
Pengulangan Jumlah Rata-rata1 2 3 4 5
15% (G1) 4179,62
3885,03
3460,97
2811,12
3380,26
17717 3543,4
22,5% (G2) 4240,61
3797,02
4484,98
3516,49
5129,42
21168,52
4233,70
30% (G3) 4866,45
4866,45
4802,49
3600 4802,49
22937,88
4587,57
37,5% (G4) 4705,9 5536,8 5196,9 5031,0 4705,9 25176,8 5035,3
54
6 5 7 6 6 645% (G5) 5129,4
25365,5
65468,6
05298,3
84866,4
626128,4
25225,6
8Ketoconazol
e4391,7
13516,4
94239,3
13655,4
15031,0
620833,9
84166,8
Jk Total = ∑ Xi2 – (∑ Xi)2
N
= (17717+21168,52+22937,88+25176,8+26128,42+20833,98) -
(296,97+324,63+338,12+354,63+361,37+322,07)2
30
= 133962,6 – 133038,83
= 923,77
KT Total = JK Total
K−1
= 923,77
5 = 184,754
Jk Perlakuan = ∑(∑ Xi)2
r -
∑( Xi)2
N
=
(88191,18+105384,64+114325,13+125762,44+130588,28+103729,08)❑
5
- (296,97+324,63+338,12+354,63+361,37+322,07)2
30
= 133596,15 – 133038,83
= 557,32
KT Perlakuan = JK Perlakuan
K−1
= 557,32
5 = 111,464
JK Galat = JK Total –JK Perlakuan
= 923,77 – 557,32
= 366,45
55
KT Galat = JK Galat
N−K
KT Galat = 366,45
24 = 15,268
F- hitung = Varian Perlakuan
Varian Residu
= 111,46415,268
= 7,300
F Tabel = α = 0,05, db (K-1) (N-K)
α = 0,05, db (6-1) (30-6)
α = 0,05, db (5) (24)
F Tabel = α = 0,01, db (K-1) (N-K)
α = 0,01, db (6-1) (30-7)
α = 0,01, db (5) (24)
Tabel 6 ANOVA dari Data Pengukuran Presentase Daya Hambat Ekstrak Akar Gelinggang Terhadap T. rubrum (Castell.) Sabour
SK JK DB KT Fhitung Ftabel
5% 1%
Perlakuan 557,32 5 111,464 7,300 S 2,85 4,46
Galat 366,45 24 15,268
Total 923,77 29
Keterangan :
SK : Sumber Keragaman
JK : Jumlah Kuadrat
DB : Derajat Bebas
KT : Kuadrat TengahS : Signifikan
56
Tabel 7 Analisis Data untuk Perlakuan Kombinasi
Faktor J/ Rimpang Jahe
Merah
R Faktor G/ Akar Gelinggang Total15% (G1)
22,5% (G2)
30%(G3)
37,5%(G4)
45%(G5)
35% (J1)1 34,88 46,51 65,81 62,79 61,16 271,152 40,23 62,32 64,65 48,25 66,97 282,423 46,51 51,16 54,65 44,88 44,88 242,08
Sub Total 121,62 159,99 185,11 155,92 173,01 795,65
42,5% (J2)1 41,39 57,67 60,46 62,32 45,34 267,182 49,53 59,30 48,37 58,13 45,34 260,673 34,88 54,18 59,30 63,95 48,37 260,68
Sub Total 125,8 171,15 168,13 184,4 139,05 788,53
50% (J3)1 61,16 56,51 43,72 40,69 60 262,082 47,16 58,13 60,46 62,79 41,86 270,43 48,83 52,32 54,65 41,39 55,34 252,53
Sub Total 157,15 166,96 158,83 144,87 157,2 785,01
57,5% ( J4)1 46,51 32,55 50 47,67 49,53 226,262 47,09 53,02 48,83 62,32 61,62 272,883 47,67 48,37 41,86 61,62 43,72 243,24
Sub Total 141,27 133,94 140,69 171,61 154,87 742,38
65% (J5)1 44,88 38,37 70,46 51,16 51,16 256,032 34,88 36,74 53,48 58,13 52,32 235,553 34,88 47,67 63,48 46,04 58,83 250,9
Sub Total 114,64 122,78 187,42 155,33 162,31 742,48660,48 754,82 840,18 812,13 786,44 3854,05
Derajat bebas total (dbt) = (j x g x r) – 1 = (5*5*3) – 1 = 75 – 1 = 74Derajat bebas perlakuan (dbp) = (jg-1) = (5*5-1) = 24Derajat bebas faktor J (dbj) = j – 1 = 5 – 1 = 4Derajat bebas faktor G (dbg) = g – 1 = 5 – 1 = 4Derajat bebas interaksi faktor JG (dbj*g) = (j-1)(g-1) = (5-1)*(5-1) = 16Derajat bebas galat (dbg) = dbt – dbp = 74 – 24 = 50
Faktor Koreksi = (3854,05)2
5 x 5 x 3 = 198049,35
JK Total = ∑( Yijk)2- Faktor Koreksi
= 204041,65 – 198049,35
= 5992,3
JK Perlakuan = ∑(∑ yj)2
R- faktor koreksi
57
= 201353,39- 198049,35
= 3304,04
JK Faktor J = ∑(∑ yi)2
rb - faktor koreksi
= 198232,26 - 198049,35
= 182,91
JK Faktor G = ∑(∑ yj)2
ra - faktor koreksi
= 199328,83 - 198049,35
= 1279,48
JK J*G = JK Perlakuan – JK Faktor J –JK Faktor G
= 3304,04 - 182,91 - 1279,48
= 1841,65
JK Galat = JK Total – JK Perlakuan
= 5992,3 – 3304,04
= 2688,26
KT Perlakuan = JK Perlakuandb P(J .G−1)
= 3304,04
24
= 137,668
KT J =JKJ
db J (J−1)
= 182,91
4
= 45,727
KT G = JK G
dbG(G−1)
58
= 1279,48
4
= 319,870
KT J*G = JK J∗G
db J∗G ( J−1 ) .(G−1)
= 1841,65
16
= 115,103
KT Galat = JK Galat
db G(dbt−dbp)
= 2688,26
50
= 53,765
F- hitung:
F- hitung Perlakuan = KT Perlakuan
KT Galat =
137,66853,765
= 2,56
F-hitung J = KT J
KT Galat =
45,72753,765
= 0,850
F- hitung G = KT G
KTGalat =
319,87053,765
= 5,949
F-hitung J*G = KT J∗GKT Galat
= 115,10353,765
= 2,141
Tabel 8 ANOVA dari data pengukuran diameter daya hambat kombinasi ekstrak akar gelinggang (Senna alata L.) dan rimpang jahe merah (Zingiber officinale Rosc) terhadap T. rubrum (Castell.) Sabour
.
SK JK Db KT f-hit F table5% 1%
Perlakuan 3304,04 24 137,668 2,56 1,74 2,18Rimpng Jahe, J 182,91 4 45,727 0,850 2,56 3,72
Akar Gelinggang, G
1279,48 4 319,870 5,949 s 2,56 3,72
Interaksi 1841,65 16 115,103 2,141 s 1,85 2,38
59
Jahe*GelinggangGalat 2688,26 50 53,765Total 5992,3 74
Keterangan :
SK : Sumber Keragaman
JK : Jumlah Kuadrat
DB : Derajat Bebas
KT : Kuadrat Tengah
S : Signifikan
Lampiran 5. Perhitungan Standar Deviasi Daya Hambat Ekstrak Akar Gelinggang (Senna alata L.) dan Rrimpang Jahe Merah (Zingiber officinale Rosc) Terhadap T. rubrum.
Jahe : Konsentras
iPengulangan Rata-
rataStandar Deviasi1 2 3 4 5
35% (J1) 41,86 32,55 41,39 46,04 39,53 40,27 4,9342,5% (J2) 43,02 44,18 50,69 39,53 38,95 43,27 4,7050% (J3) 42,55 66,97 46,51 41,39 41,39 47,76 10,94
57,5% (J4) 41,86 39,53 44,88 46,51 44,18 43,39 2,7365% (J5) 38,37 40,70 36,05 46,04 37,21 39,67 3,95
Gelinggang :
Konsentrasi Pengulangan Rata-rata
Standar Deviasi1 2 3 4 5
15% (G1) 64,65 62,33 58,83 53,02 58,14 59,394 4,4322,5% (G2) 65,12 61,62 66,97 59,30 71,62 64,926 4,7830% (G3) 69,76 69,76 69,30 60 69,30 67,624 4,26
37,5% (G4) 68,60 74,41 72,09 70,93 68,60 70,926 2,4645% (G5) 71,62 73,25 73,95 72,79 69,76 72,274 1,64
Jahe:
SD 35% = √ n∑ Xi2−(∑ Xi )2
n(n−1) = √ 5 (8207,19)−(201,37)2
5(5−1) = 4,93
SD 42,5% = √ n∑ Xi2−(∑ Xi )2
n(n−1) = √ 5 (9451,79)−(216,37)2
5(5−1) = 4.70
60
SD 50% = √ n∑ Xi2−(∑ Xi )2
n(n−1)= √ 5 (11884,92)−(238,81)2
5(5−1) = 10,94
SD 57,5% = √ n∑ Xi2−(∑ Xi )2
n(n−1) = √ 5 (9444,14)−(216,96)2
5(5−1) = 2,73
SD 65% = √ n∑ Xi2−(∑ Xi )2
n(n−1)= √ 5 (7932,61)−(198,37)2
5 (5−1) = 3,95
Gelinggang:
SD 5% = √ n∑ Xi2−(∑ Xi )2
n(n−1) = √ 5 (17717)−(296,97)2
5(5−1) = 4,43
SD 42,5% = √ n∑ Xi2−(∑ Xi )2
n(n−1) = √ 5 (21168,52)−(324,63)2
5(5−1) = 4,78
SD 50% = √ n∑ Xi2−(∑ Xi )2
n(n−1) = √ 5 (22937,88)−(338,12)2
5 (5−1) = 4,26
SD 57,5% = √ n∑ Xi2−(∑ Xi )2
n(n−1)= √ 5 (25176,8)−(354,63)2
5 (5−1) = 2,46
SD 65% = √ n∑ Xi2−(∑ Xi )2
n(n−1) = √ 5 (26128,42)−(361,37)2
5 (5−1) = 1,64
61
Lampiran 6. Uji Lanjut BNT dari Data Pengukuran Diameter Daya Hambat Ekstrak Akar Gelinggang, Rimpang Jahe Merah dan Kombinasinya Terhadap T. rubrum
62
Konsentrasi (%)
Rata-rata presentase daya hambat (%) Notasi
BNT 1%
G1 (15%) 59,39 A 6,157
K+ 64,41 Ab
G2 (22,5%) 64,93 Abc
G3 (30%) 67,62 Bcd
G4 (37,5%) 70,93 Cd
G5 (45%) 72,27 D
J5 (65%) 39,67 A 9,352
J1 (35%) 40,27 A
J2 (42,5%) 43,27 A
J4 (57,5%) 43,39 A
J3 (50%) 47,76 A
K+ 64,41 B
Konsentrasi (%)
Rata-rata
Notasi BNT 1%
J5G1 38,21 a 14,384
J1G1 40,54 ab
J5G2 40,93 ab
J2G1 41,93 abc
J4G2 44,65 abcd
J2G5 46,35 abcd
J4G3 46,90 abcd
J4G1 47,09 abcd
J3G4 48,29 abcde
J2G4 51,47 abcde
J4G5 51,62 abcde
J5G4 51,78 abcde
J1G4 51,97 abcde
J3G1 52,38 abcde
J3G5 52,40 abcde
J3G3 52,94 bcde
J1G2 53,33 bcde
J5G5 54,10 bcde
J3G2 55,65 cde
J2G3 56,04 cde
J2G2 57,05 de
J4G4 57,20 de
J1G5 57,67 de
J1G3 61,70 e
J5G3 62,47 e
63
Recommended
