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Versuch 10: MHK & MBK 02.03.2016 Martin Mackowiak Praktikum Mikrobiologie 2016

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Versuch 10: MHK & MBK

02.03.2016

Martin Mackowiak

Praktikum Mikrobiologie 2016

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Versuchsziel

Praktikum Mikrobiologie 2016

02.03.2016 | Martin Mackowiak

• Bestimmung von MHK und MBK verschiedener Desinfektionsmittel für Pseudomonas aeruginosa

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Definitionen

Praktikum Mikrobiologie 2016

02.03.2016 | Martin Mackowiak

• Desinfektion (= Entseuchung) Selektive Abtötung bzw. irreversible Inaktivierung aller Krankheitserreger

• MHK (Minimale Hemmkonzentration) Niedrigste Konzentration, die das Auswachsen des Inokulums innerhalb von 18 + 2 h verhindert (bakteriostatisch oder bakterizid) • MBK (Minimale bakterizide Konzentration)

Niedrigste Konzentration, bei der 99,9 % der Bakterien des Inokulums abgetötet wurden

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Desinfektionsmittel

Praktikum Mikrobiologie 2016

02.03.2016 | Martin Mackowiak

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Desinfektionsmittel

Praktikum Mikrobiologie 2015

02.03.2016 | Martin Mackowiak

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Testorganismus

Praktikum Mikrobiologie6

02.03.2016 | Martin Mackowiak

• Pseudomonas aeruginosa

o Ubiquitär in Boden und Wasser o Stäbchenförmig (2-4 µm) o Gram-negativ o Polar begeißelt o Nicht sporenbildend o Fakultativ pathogen (opportunistisch) o Auslöser systemischer oder lokaler, akuter oder chronischer Infektionen o Beispiele:

• Lungenentzündung • Cystische Fibrose (CF) • Entzündung von Haut und Bindegewebe, Mittelohr, etc.

http://www.pseudomonas.com/images/paeruginosa.jpg

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Durchführung MHK

Praktikum Mikrobiologie 2016

02.03.2016 | Martin Mackowiak

• Am Arbeitsplatz: o Herstellung einer Bakteriensuspension (OD600 = 0,2 + 0,03) o Von dieser Suspension 100 µl in 10 ml 2x NB überführen o Erst dann zur Sterilbank kommen!

• An der Sterilbank: o Herstellung von Verdünnungsreihen der untersuchten Desinfektionsmittel

mit der Mehrkanalpipette

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Durchführung MHK

Praktikum Mikrobiologie 2016

02.03.2016 | Martin Mackowiak

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Durchführung MHK

Praktikum Mikrobiologie 2016

02.03.2016 | Martin Mackowiak

50 µL NaCl 100 µl

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Durchführung MHK

Praktikum Mikrobiologie 2016

02.03.2016 | Martin Mackowiak

verwerfen

50 µl 50 µl 50 µl 50 µl 50 µl 50 µl 50 µl 50 µl 50 µl 50 µl 50 µl 50 µl

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Durchführung MHK

Praktikum Mikrobiologie 2016

02.03.2016 | Martin Mackowiak

50 µL verd. Bakteriensuspension

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Zeitplan

Praktikum Mikrobiologie 2016

02.03.2016 | Martin Mackowiak

Gruppen Durchführung MHK Auswertung MHK &

Durchführung MBK

Auswertung MBK

1 – 9 Mittwoch (Tag 3)

Donnerstag (Tag 4)

Freitag (Tag 5)

10 – 18 Donnerstag (Tag 4)

Freitag (Tag 5)

Montag (Tag 6)

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Zeitplan Mittwoch

Praktikum Mikrobiologie 2016

02.03.2016 | Martin Mackowiak

Uhrzeit Gruppe

10:30 1

10:55 2

11:20 3

11:45 4

12:45 5

13:10 6

13:35 7

14:00 8

14:25 9