I. PENDAHULUAN Perhatian internasional lebih dan lebih fokus pada isu yang berkembang dari ATS (ATS). Khususnya selama 10 sampai 15 tahun, penyalahgunaan ATS, melibatkan amfetamin (amfetamin dan metamfetamin) dan zat dari "ekstasi" kelompok (MDMA, MDA, MDEA, dll), telah menjadi masalah global. Ada perbedaan regional, tapi hari ini tidak ada negara yang terhindar satu dari banyak aspek ATS manufaktur, perdagangan atau pelecehan. Ini situasi baru, yang melibatkan sering baru dan asing ATS, atau kombinasi, dan tren perdagangan, menyajikan sebuah tantangan baik untuk penegakan hukum nasional

pemerintah dan staf ilmiah laboratorium forensik. Hari ini, analis harus mampu menganalisis berbagai bahan dan persiapan, dan menggunakan lebih cepat, metode yang lebih akurat dan lebih spesifik untuk identifikasi

dan analisis dalam rangka mengatasi dengan omset analisis meningkat dan persyaratan hukum obat nasional kaku. Selain itu, karakter internasional perdagangan narkoba membutuhkan pertukaran tepat waktu data analitis antara laboratorium dan penegak hukum di tingkat nasional, regional dan internasional tingkat. Untuk alasan ini, Laboratorium dan Ilmiah Bagian UNODC memiliki sejak awal 1980-an mengejar program harmonisasi dan pembentukan metode pengujian dianjurkan untuk laboratorium pengujian obat nasional. Pertemuan konsultatif yang terdiri dari 13 ahli diselenggarakan pada bulan September 1998 di London oleh Laboratorium dan Ilmiah Bagian UNODC bekerja sama dengan Ilmu Forensik Layanan dari Inggris untuk meninjau metode untuk identifikasi dan analisis ATS (ATS) dan mereka analog cincin tersubstitusi dalam materi disita. Panduan ini mencerminkan kesimpulan dari pertemuan itu, ditinjau dan up-tanggal kembali di tahun 2004/05. Ini menyediakan praktis bantuan kepada otoritas nasional dengan menggambarkan metode yang direkomendasikan untuk digunakan dalam pengujian obat laboratorium untuk identifikasi dan analisis amphetaminetype stimulan (ATS) dan analog cincin tersubstitusi mereka. Panduan ini adalah salah satu dalam serangkaian publikasi yang sama berurusan dengan identifikasi dan analisis berbagai kelompok obat di bawah pengawasan internasional. Itu menggabungkan dan menggantikan manual sebelumnya diterbitkan pada Metode Direkomendasikan Pengujian Amphetamine dan Methamphetamine (ST/NAR/9, 1987) dan Metode yang direkomendasikan untuk Pengujian Gelap Ring-tersubstitusi Amphetamine Derivatif (ST/NAR/12, 1988). Manual sekarang dan sebelumnya menyarankan pendekatan yang dapat membantu obat

analis dalam pemilihan metode yang sesuai dengan sampel di bawah pemeriksaan, meninggalkan ruang juga untuk adaptasi dengan tingkat kecanggihan laboratorium yang berbeda. Untuk pertama kalinya dalam seri ini publikasi, manual ini mempunyai 1 2 Metode untuk identifikasi dan analisis amfetamin, metamfetamin juga dianeksasi dipilih metode divalidasi. Sebagian besar metode yang dijelaskan diterbitkan

dalam literatur ilmiah, dan telah digunakan selama beberapa tahun di reputasi laboratorium. Dalam mengidentifikasi metode tersebut, pertemuan konsultatif sadar bahwa

sejumlah metode yang diterbitkan lainnya dalam literatur ilmu forensik juga memproduksi hasil yang dapat diterima. Manual ini terbatas pada metode analisis untuk ATS. A terpisah manual tentang teknik analisis lebih umum, dan karakteristik mereka dan praktis digunakan untuk analisis obat, melengkapi seri ini manual pada direkomendasikan metode. II. PENGGUNAAN MANUAL THE Tidak semua metode yang dijelaskan dalam manual ini perlu diterapkan pada semua sampel yang dicurigai terdiri dari atau mengandung amfetamin, metamfetamin atau lainnya ATS. Pilihan metodologi dan pendekatan analisis mereka tetap dalam kebijaksanaan analis dan tergantung pada jenis obat yang terlibat, ketersediaan instrumentasi yang tepat dan bahan referensi serta pada Tingkat pembuktian secara hukum diterima dalam yurisdiksi di mana analis bekerja. Meskipun demikian diakui bahwa persyaratan unik dalam yurisdiksi yang berbeda dapat menentukan praktek yang sebenarnya diikuti oleh laboratorium tertentu, baik praktek laboratorium (GLP) mensyaratkan bahwa pendekatan analitis untuk membangun identitas obat dikendalikan dalam dugaan materi harus, minimal, memerlukan tekad setidaknya dua parameter berkorelasi. Pemilihan parameter ini dalam kasus tertentu harus memperhitungkan obat yang terlibat dan sumber daya laboratorium yang tersedia untuk analis. Bila mungkin, tiga sama sekali berbeda teknik analisis harus digunakan, misalnya: tes warna, kromatografi (Misalnya, TLC, GC atau HPLC) dan spektroskopi (misalnya, IR atau UV). Yg ditulis dgn tanda penghubung teknik, seperti GC-MS, dihitung sebagai dua parameter, memberikan informasi yang dari kedua teknik yang digunakan (yaitu waktu retensi dan karakteristik spektral massa). Perhatian juga tertarik pada betapa pentingnya ketersediaan obat analis buku referensi tentang penyalahgunaan obat dan teknik analisis. Selain itu, must analis kebutuhan terus mengikuti tren saat ini dalam analisis obat, secara konsisten

berikut analitis dan forensik literatur ilmu saat ini. UNODC membantu laboratorium dalam hal ini dengan menyediakan, atas permintaan, artikel yang dipilih dari literatur ilmiah. Laboratorium dan Ilmiah Bagian UNODC akan menyambut pengamatan pada isi dan kegunaan dari manual ini. Komentar dan saran dapat ditujukan kepada: Laboratorium dan Bagian Ilmiah Kantor PBB untuk Narkoba dan Kejahatan Vienna International Centre P.O. Kotak 500 1400 Wina, Austria Fax: (43-1) 26060-5967 E-mail: lab@unodc.org Semua manual, serta pedoman dan publikasi ilmiah-teknis lainnya mungkin diminta dengan menghubungi alamat di atas. 3

III. KLASIFIKASI / DEFINISI ATS (ATS) adalah kelompok zat, sebagian besar sintetis asal, yang secara struktural berasal dari _-phenethylamine (_-PEA, angka I). ATS umumnya merangsang sistem saraf pusat (SSP). Oleh karena itu, untuk berbagai derajat, mereka dianggap sebagai prototipe stimulan sistem saraf pusat dengan potensi toksisitas psikotik bila overdosis atau disalahgunakan untuk jangka waktu yang lama. ATS dapat menghasilkan satu atau gejala yang berhubungan dengan dosis lebih, termasuk peningkatan kewaspadaan dan euforia, peningkatan denyut jantung, tekanan darah, respirasi dan suhu tubuh. Agitasi, tremor, hipertensi, kehilangan memori, halusinasi, episode psikotik, delusi paranoid, dan perilaku kekerasan dapat hasil dari penyalahgunaan kronis. Penarikan dari dosis tinggi ATS bisa mengakibatkan depresi berat. ATS secara ilegal diproduksi dalam berbagai persiapan (bubuk, tablet, atau kapsul), dan mereka dapat disuntikkan, tertelan secara lisan, mendengus, atau merokok. Modifikasi kimia pada posisi R1 ke R9 * (gambar II) menghasilkan praktis jumlah yang tidak terbatas aktif secara farmakologi senyawa, beberapa di antaranya lebih kuat stimulan daripada yang lain. Meskipun ada beberapa kemungkinan modifikasi rantai sisi, substitusi pada cincin aromatik berkontribusi paling perbedaan kualitatif substansial efek farmakologis.

Dalam hal karakteristik struktural, ATS dapat dibagi menjadi tiga sub-kelompok besar, yang sebagian besar sesuai dengan berikut pola substitusi pada cincin aromatik: (A) Tidak ada substitusi pada cincin aromatik (misalnya amfetamin, metamfetamin, Fenetilin). (B) methylenedioxy-substitusi pada cincin aromatik (misalnya MDA, MDMA, MBDB). (C) pola substitusi lain, biasanya termasuk satu atau lebih alkiloksi kelompok (mis. 2C-B, STP / DOM). 5 NH2 _ _ R3 R5 R9 R8 R7 R6 N R2 R1 R4 Gambar I Gambar II * Semua substituen lain yang diperlukan untuk menjenuhkan valensi tidak ditampilkan, karena mereka biasanya hidrogen (H). Untuk alasan praktis, panduan ini memberikan data spesifik hanya untuk seleksi yang paling umum ATS. Secara khusus, itu termasuk ATS di bawah kontrol internasional dan dipilih ATS di bawah kendali nasional. Analis harus menyadari bahwa analog lainnya yang terkait erat mungkin ditemui. Dalam kebanyakan kasus, metodologi disajikan akan berlaku bagi mereka analog juga. Struktur kimia yang dipilih ATS, bersama dengan nama-nama umum dan IUPAC nomenklatur, diberikan dalam lampiran I. 6 Metode untuk identifikasi dan analisis amfetamin, metamfetamin IV. URAIAN SENYAWA MURNI Disita ATS yang biasa ditemui dalam bentuk garam, khususnya sebagai hidroklorida, sulfat, fosfat, atau garam bromida. Namun, tidak jarang di klandestin penyelidikan laboratorium untuk menemukan senyawa-senyawa dalam bentuk dasar serta (biasanya cairan berminyak kecoklatan). Garam adalah zat kristal atau bubuk, yang bervariasi dalam warna dari putih (mirip dengan produk kelas farmasi)

menjadi merah muda, kuning atau coklat. Mereka sering basah dengan bau khas, karena adanya pelarut dan / atau residu prekursor. ATS dapat juga ditemukan dalam bentuk tablet. Selain aktif ATS, tablet sering mengandung adulterants berbeda, agen memotong, warna makanan umum dan / atau eksipien yang berbeda dan agen mengikat. Amphetamine: amphetamine terlarang sering ditemui sebagai sulfat garam dalam bentuk bubuk, dan jarang sebagai tablet. Dasar Amphetamine dapat disita dalam laboratorium klandestin, biasanya sebagai cairan berminyak berwarna coklat gelap dengan karakteristik bau yang tidak menyenangkan dari 1-fenil-2-propanon (P-2-P) dan / atau residu pelarut. Metamfetamin: metamfetamin sah diproduksi tersedia dalam berbagai bentuk, tergantung pada wilayah geografis. Bentuk meliputi bubuk, kristal (Umumnya dikenal sebagai "Cristal", "Ice" atau "Shabu") dan tablet (umumnya dikenal sebagai "Yaba"). Bentuk garam yang paling sering ditemui adalah hidroklorida. Metilendioksi cincin tersubstitusi ATS: MDMA, MDA, dan MDEA biasanya ditemukan sebagai tablet yang mungkin atau tidak mungkin salah satu dari logo. Bubuk hanya kadang-kadang ditemukan, tetapi biasanya mengandung konsentrasi tinggi zat aktif. Tablet sering berwarna cerah; mereka sering bervariasi dalam ukuran. Isi obat biasanya berkisar 40-140 mg. Perbedaan regional dalam isi obat, dan perubahan dari waktu ke waktu, yang dikenal. Di Eropa, misalnya, isi MDMA rata dalam ekstasi tablet telah turun menjadi sekitar 60-70 mg (dibandingkan dengan sekitar 100 mg pada pertengahan 1990-an). Yang paling sering ditemui bentuk garam dari methylenedioxy-jenis ATS adalah hidroklorida, tetapi garam fosfat dan bromida juga terlihat

A. stereokimiaKebanyakan ATS memiliki setidaknya satu pusat kiral dan oleh karena itu dapat ditemukan sebagai sebuah rasematcampuran atau enantiomer sebagai individu. * Di pasar gelap, sebagian ATS ditemui7* Istilah (d) atau (+), (l) atau (-) dan (d, l) atau (±) biasanya digunakan untuk menunjuk rotasi optikzat kiral. (R) dan (S) sebutan menggambarkan konfigurasi sterik mutlak substituendi pusat-pusat kiral individu, dan lebih disukai, terutama dalam kasus diastereomer.8 Metode untuk identifikasi dan analisis amfetamin, metamfetamindalam khas stereokimia make-up. Amfetamin, misalnya, dan yang paling ringsubstitutedATS, biasanya ditemui sebagai rasemat, sementara methamphetaminesering dianggap sebagai S-, atau dextro, enantiomer (juga dikenal sebagai "es", atau"Shabu"), di samping rasemat. Analisis isomer optik digambarkan

dalam bab VI.G. di bawah ini.B. KARAKTERISTIK FISIKTitik leleh / didih: The mencair dan / atau titik didih yang tersedia untukyang paling sering ditemui ATS. Analis harus menyadari, bagaimanapun, bahwaData tersebut merujuk pada substansi murni. * Kecuali untuk kemurnian tinggi ATS, seperti kristalmethamphetamine ("es"), titik leleh karenanya hanya digunakan sebagaites dugaan (untuk penggunaan titik leleh untuk diferensiasi isomer,lihat bab VI.G.1, di bawah).Kelarutan: The kelarutan yang dipilih ATS dan garamnya disediakan dalambagian pada tes anion (lihat hal. 21 di bawah). Selektif re-kristalisasi berdasarkanperbedaan kelarutan dapat digunakan untuk pemisahan beberapa garam ATS (lihatBab VI.F. pada FTIR, di bawah).Data spektroskopi: spektral Massa (MS), infra merah (IR) dan nuklir magnetikresonance (NMR) data yang paling umum ATS tersedia di awaledisi dua manual PBB terkait dengan analisis ATS, yaitu,"Metode yang disarankan untuk pengujian amphetamine dan methamphetamine"Metode (ST/NAR/9), dan "Direkomendasikan untuk pengujian terlarang cincin tersubstitusiderivatif amphetamine "(ST/NAR/12). Data juga dapat diakses diLaboratorium dan halaman web Seksi Ilmiah.* Analis juga harus menyadari bahwa titik leleh untuk beberapa ATS juga dapat bervariasi, tergantungpada pelarut yang digunakan untuk kristalisasi.9V. Gelap ATS INDUSTRIPengetahuan tentang rute manufaktur gelap penyalahgunaan obat dapat memainkan pentingperan dalam interpretasi hasil analisis, terutama dalam kasus-kasus di manalebih mendalam analisis kotoran dan manufaktur oleh-produk, yang disebutpengotor profiling studi, dilakukan.Penggunaan metode sah diperoleh atau diterbitkan ("sastra underground" atauinternet) untuk sintesis, klandestin berpengalaman "kimia", laboratorium yang tidak pantasperalatan dan kurangnya kontrol kualitas laboratorium sering mengakibatkan tidak murni danproduk inferior, dan variabilitas dalam kualitas dan potensi. Akibatnya, sahobat yang diproduksi sering mengandung by-produk dan intermediet berasaldari bahan yang tidak murni awal, reaksi yang tidak lengkap, dan pemurnian yang tidak memadaiintermediet dan produk sintetis akhir. Jenis dan jumlah pengotorhadir dalam sampel ATS terlarang ("profil kenajisan") sangat tergantung padametode sintesis, proporsi, sumber dan kemurnian bahan awal,kondisi reaksi, dan prosedur pemurnian, jika ada.Ada atau tidak adanya kotoran tertentu (penanda) dapat berguna dalammenentukan rute sintetis yang digunakan, dan bahan awal (prekursor)

digunakan. Analisis pelarut dapat lebih menambah tubuh informasi, dan dengan demikian dapatmenjadi alat yang berguna untuk ATS perbandingan sampel dan karakterisasi.Sementara studi pengotor profil bukan subjek ini manual, beberapametode yang dijelaskan dapat disesuaikan untuk tujuan tersebut. *Beberapa rute sintesis untuk ATS dijelaskan dalam literatur dan digunakan olehilegal / produsen klandestin. Paling sering digunakan metode sintetis untukpembuatan gelap amphetamine dapat juga diubah untuk menghasilkan metamfetaminatau cincin tersubstitusi amfetamin. Hal ini paling sering dilakukan dengan menggantisumber amina atau sumber cincin aromatik, masing-masing, selamaproses reaksi. Secara umum, ketersediaan prekursor sangat menentukanpilihan sintesis rute yang digunakan dalam operasi terlarang.Deskripsi singkat tentang rute sintetis yang paling umum digunakan untukamfetamin, metamfetamin dan MDMA disajikan di bawah ini. **Rute sintesis diklasifikasikan berdasarkan jenis pengurangan yang digunakan dalamreaksi dan mekanisme pengurangan. Dalam prakteknya, banyak dari reaksi-reaksi tersebut* Untuk pengenalan umum ke subjek, pembaca disebut manual PBB"Karakterisasi Obat / kenajisan profil: Latar Belakang dan konsep" (ST/NAR/32/Rev.1, 2001); untukmetode yang lebih spesifik dan pendekatan untuk profiling pengotor metamfetamin lihat juga UNODCPublikasi Ilmiah dan Teknis No.17 (SCITEC/17), 2000.** Untuk rincian tambahan, pembaca disebut PBB manual "memproduksi Clandestinezat di bawah kontrol internasional "(ST/NAR/10/Rev.2, 1998)10 Metode untuk identifikasi dan analisis amfetamin, metamfetamindikenal dengan nama populer seperti "Leuckart" metode, hydriodic asam / fosfor merah,oxime, Nitrostyrene, Birch atau metode "Emde". Nama-nama populer adalahberdasarkan kimia yang pertama kali dijelaskan metode, atau reagen karakteristikatau intermediet penting. Nama-nama populer termasuk bila memungkinkan.A. Amphetamine SintesisReaksi sentral dari semua metode yang digunakan untuk sintesis amphetamine didasarkan padapengurangan katalitik dari 1-fenil-2-propanon (P-2-P, benzil metil keton, BMK,phenylacetone) di hadapan amonia atau methylamine. Yang paling populer reduksiMetode saat ini adalah metode Leuckart (non-logam pengurangan) dan katalitikreduksi logam (aminasi reduktif, hidrogenasi katalitik atau hidrogenolisis).Reaksi Leuckart (reduksi non-logam)Karena kesederhanaannya, yang "Leuckart" reaksi terus menjadi salah satu yang palingrute sintetis populer digunakan untuk pembuatan gelap amfetamin.The Leuckart sintesis adalah pengurangan non-logam biasanya dilakukan dalam tiga langkah.Untuk sintesis amphetamine, campuran P-2-P dan formamida (kadang-kadangdengan adanya asam format), atau amonium format, dipanaskan sampai kondensasihasil reaksi dalam produk setengah jadi N-formylamphetamine. Dalam

Langkah kedua, N-formylamphetamine dihidrolisis biasanya menggunakan asam klorida(Lihat gambar III). Campuran reaksi kemudian dibasakan, terisolasi, dan (steam) suling.Pada langkah terakhir, produk diendapkan dari solusi, biasanyasebagai garam sulfat. Dasar amfetamin adalah cairan berminyak dengan karakteristik"Amis-amine" bau.O HNO+H N 2 OP-2-P formamida N-formylamphetamineHCOOHHNON-formylamphetamineHClNH2amphetamineGambar III. Reaksi Leuckart digunakan dalam pembuatan amphetamine terlarangGelap ATS memproduksi 11Metode Leuckart adalah salah satu metode yang paling banyak dipelajari. Beberapa routespecifickotoran diidentifikasi dan dijelaskan dalam literatur. Yang paling menonjolkotoran adalah antara N-formylamphetamine (biasanya dibawamenjadi produk akhir) dan 4-metil-5-fenil pirimidin. Rute sintetis lainnyatidak memberikan banyak kotoran tertentu-rute sebagai metode Leuckart.Aminasi reduktif (pengurangan logam katalitik)Aminasi reduktif adalah proses reduksi katalitik atau kimia aldehidadan keton dengan adanya amonia, atau amina primer atau sekunder, sehinggadalam amina terkait tatanan yang lebih tinggi. Mekanisme reaksi berlangsung melaluipembentukan imin atau iminium menengah atas reaksi karbonil asenyawa dengan senyawa amino yang tepat, diikuti dengan reduksi. Perpaduanamphetamine menggunakan metode aminasi reduktif menggunakan P-2-P dan katalispilihan. Metode yang paling sering digunakan dapat dibagi menjadi tiga berbedajenis berdasarkan spesies mengurangi:(A) reduksi katalitik heterogen menggunakan platinum oksida, paladium atauNikel Raney(B) Pembubaran pengurangan logam dengan menggunakan aluminium, seng atau magnesium amalgam(C) pengurangan logam hidrida menggunakan lithium aluminium hydride (LiAlH4),natrium borohidrida (NaBH4) atau, lebih jarang, natrium cyanoborohydride(NaCNBH3).Katalitik pengurangan heterogen biasanya dicapai dengan menggunakan campuran

P-2-P dan amonia gas diisi dengan hidrogen dengan adanya katalis yang dipilih.Paladium pada arang (Pd / C) atau platinum oksida yang paling sering digunakankatalis, diikuti oleh Raney nikel. Penurunan biasanya dicapai pada tekanan rendahdan suhu rendah. Pada kesempatan langka, aminations tekanan tinggi dalam tekanan Parrperalatan reaksi ("tekanan" atau "bom pipa") juga telah ditemukan.Pembubaran pengurangan logam dengan menggunakan aluminium, seng atau magnesium amalgam adalahsalah satu yang paling umum digunakan metode aminasi reduktif. Yang paling populerProsedur menggunakan amalgam aluminium-merkuri (Al-Hg). Mekanisme amalgampengurangan hasil melalui pengurangan basis adisi Schiff dari P-2-P danamina yang sesuai. Dalam kondisi klandestin mentah, metode ini menggunakanaluminium foil atau grit, dan klorida merkuri (HgCl2).Kotoran yang paling khas dari aminations reduktif adalah Schiff basa,didalilkan sebagai yang dibentuk oleh kondensasi dari P-2-P dan amfetamin, namunmereka tidak spesifik kotoran-rute dan mungkin ada dalam setiap sintetisProsedur yang melibatkan P-2-P. P-2-P dan senyawa jenis imina dapat juga ditemukansebagai kotoran. Kotoran anorganik yang timbul dari penggunaan katalis tertentudapat berfungsi sebagai penanda.12 Metode untuk identifikasi dan analisis amfetamin, metamfetaminLainnya, lebih sering digunakan metode aminasi reduktif termasuk logampengurangan hidrida, seperti "nitropropane" rute dan "oxime" rute, bernamasetelah intermediet karakteristik (fenil-nitropropene dan oxime, masing-masing),yang terbentuk selama reaksi.The oxime rute adalah reaksi dari P-2-P dengan hidroksilamin. The oxime menengahselanjutnya dihidrogenasi untuk menghasilkan amfetamin. Sebuah oxime menengahbiasanya dihidrolisis oleh pengurangan logam dengan menggunakan Pd/H2, atau dengan hidrida logamreduksi menggunakan LiAlH4.The nitropropene rute melibatkan kondensasi benzaldehida dengannitroethane, yang menghasilkan 1-fenil-2-nitropropene. Hidrogenasi selanjutnya dariikatan ganda dan pengurangan nitro-kelompok menghasilkan amfetamin. Itufase reduksi biasanya diselesaikan dengan menggunakan Pd/H2 atau LiAlH4.B. Metamfetamin SINTESISMethamphetamine dapat juga disintesis menggunakan metode di atas dengan menggantiammonia dengan metil.Namun, rute sintetik methamphetamine paling populer mempekerjakanephedrine atau pseudoephedrine sebagai prekursor bukannya P-2-P. Reaksi yangbiasanya dilakukan oleh salah satu reaksi berikut (lihat gambar IV):(A) pengurangan non-logam seperti "hydriodic asam-red fosfor"metode,(B) melarutkan pengurangan logam seperti "Birch" pengurangan, atau(C) reduksi katalitik heterogen menggunakan thionylchloride dan paladium atau

platinum oksida sebagai katalis (metode "Emde").efedrin ataupseudoephedrineNH3methamphetamineLi atau logam Naefedrin ataupseudoephedrineHImethamphetamineP (red)Hydriodic fosfor rute asam-merah (Nagai rute)Pembubaran pengurangan logam (pengurangan Birch)NHOHNHNHOHNHGambar IV. Rute umum untuk pembuatan metamfetamin ilegalGelap ATS memproduksi 13Reaksi lain, seperti "nitropropene" atau "oxime" rute, jarangditemui.Efedrin dan pseudoefedrin yang banyak tersedia di batuk farmasipersiapan, banyak yang tersedia over-the-counter. Ramuan CinaMa-huang, yang ditemui di sejumlah suplemen makanan dan gaya hidupproduk merupakan salah satu sumber tersebut prekursor.Tidak seperti P-2-P, efedrin dan pseudoefedrin adalah zat kiral. Mereka adalahdiastereomer, dan ada dalam dua bentuk enansiomer, masing-masing (d-dan l-efedrin, dand-dan l-pseudoephedrine), di samping dua rasemat. Analisis kiralefedrin atau pseudoefedrin isomer juga dapat membantu dalam penentuanproses pembuatan metamfetamin terlarang.Semua metode manufaktur mulai dari l-efedrin atau d-pseudoefedrinmenghasilkan (+) - (S)-methamphetamine sebagai isomer optik tunggal, yang setidaknyadua kali lebih kuat sebagai campuran rasemat dihasilkan oleh reaksi mulai dari P-2-P.Hydriodic fosfor rute asam-red: ini biasanya dilakukan dengan pemanasanephedrine atau pseudoephedrine dengan fosfor merah dan asam hydriodic. ItuCampuran reaksi kemudian disaring, dibasakan dan diekstraksi ke dalam pelarut. Hasil dari paket tersebutdasar metamfetamin adalah cairan berminyak, sering disebut sebagai "meth minyak".Garam hidroklorida dikristalisasi dari ini cair menggunakan eter / aseton danasam klorida. Atau, gas hidrogen klorida (dari silinder, sebuah

larutan berair, atau dihasilkan dengan menggunakan asam sulfat dan natrium klorida) adalahdigelembungkan melalui minyak meth menyebabkan garam hidroklorida untuk mengendap darisolusi.Hl dan merah fosfor dapat digantikan oleh yodium dan asam hypophosphoric(Sodium hypophosphate), atau dengan air dan yodium. Pada kesempatan langka, reaksicampuran, kadang-kadang dikenal sebagai "sapi-darah", yang digunakan tanpa pemurnian lebih lanjut,kebanyakan oleh injeksi. Campuran berwarna merah, disebabkan oleh kelebihan yodium,berisi "meth minyak" dan kotoran yang berbeda terkait dengan Hl / red P rute.Kotoran khas ditemukan dalam sampel yang dihasilkan oleh pengurangan melibatkan Hl / redP atau yodium / asam hypophosphoric adalah efedrin atau pseudoefedrin, Aziridinedan dimethylnaphthalenes. Aziridine tidak dapat dianggap sebagai rute-spesifikkotoran karena mereka dapat juga diproduksi dari chloroephedrine oleh halogeneliminasi dan penutupan cincin (metode Emde), atau dari oksim menengah danN-hydroxymethamphetamine.efedrin ataupseudoephedrineSOCl2, atauchloroephedrinePOCl3Katalitik pengurangan heterogen (Emde rute)methamphetamineNH Pd/H2OHNH NHClGambar IV. (Lanjutan)14 Metode untuk identifikasi dan analisis amfetamin, metamfetaminPengurangan Birch: ini hasil melalui pengurangan logam melarutkan efedrinatau pseudoefedrin dengan adanya amonia. Reaksi ini melibatkan pencampuranephedrine atau pseudoephedrine dengan gas amonia anhidrat dan natrium ataulogam lithium. Campuran itu kemudian dibiarkan sampai amonia memilikimenguap. Isolasi minyak meth dilakukan dengan ekstraksi pelarut langsungdan filtrasi. Produk reaksi selanjutnya dimurnikan dengan pembentukan hidrokloridagaram dan re-kristalisasi. Dalam praktek terlarang, pengurangan Birch biasanyadiselesaikan dalam reaksi satu langkah menggunakan banyak tersedia amonia, dan lithiumstrip dari baterai. Meskipun demikian, pengurangan Birch biasanya menghasilkan sangat "bersih"produk akhir. Beberapa kotoran tertentu-rute seperti N-metil-1-(1 - (1,4-cyclohexadienyl)) -2-propanamine dilaporkan dalam literatur. Reaksi yang melibatkanamonia anhidrat berbahaya dan ledakan di laboratorium klandestin yangtidak biasa.

Metode Emde: efedrin atau pseudoefedrin biasanya bereaksi dengan tionilklorida untuk memberikan chloroephedrine menengah, yang kemudian dihidrogenasi lebihplatinum atau paladium katalis untuk menghasilkan metamfetamin. Dalam GC berbasis analitisskema, yang chloroephedrine menengah jarang ditemukan sebagai pengotor,karena terurai selama analisis untuk membentuk Aziridine. Chloroephedrine jugaterurai cepat selama ekstraksi dasar methamphetamine

SINTESIS RING-digantikan ATS Yang paling sering ditemui methylenedioxy-jenis ATS adalah MDMA, dan kadang-kadang MDEA dan MDA. Secara umum, rute sintesis yang digunakan untuk MDMA berlaku, dengan sedikit modifikasi, dengan lain methylenedioxy-tersubstitusi analog. Prekursor utama yang digunakan untuk sintesis tersebut adalah 3,4-methylenedioxyphenyl-2- propanon (juga dikenal sebagai 3,4-MDP-2-P, 3,4-metilendioksi-phenylacetone, piperonil methyl ketone, atau PMK). 3,4-MDP-2P adalah tersedia secara komersial, prekursor dikontrol secara internasional. MDMA juga dapat synthetised dari safrole (3,4-methylenedioxyallylbenzene), baik secara langsung, atau melalui isosafrol diperoleh dengan isomerisasi safrol. Safrol sendiri tersedia secara komersial, atau dapat diekstraksi dari minyak sassafras dan lainnya -safrole kaya minyak esensial atau bagian tanaman. Piperonal (heliotropin, 3,4-methylenedioxybenzaldehyde), bahan kimia industri yang digunakan secara luas, adalah alternatif lain prekursor untuk sintesis 3,4-MDP-2-P. Metode yang paling langsung untuk sintesis MDMA adalah melalui aminasi reduktif 3,4-MDP-2-P dengan metilamina dan gas hidrogen melalui katalis platinum (catalytic pengurangan logam). Penurunan ini juga dapat dicapai dengan melarutkan logam pengurangan menggunakan aluminium amalgam (aluminium foil dan merkuri klorida), atau dengan reduksi hidrida logam dengan menggunakan natrium cyanoborohydride (lihat gambar V). Mengganti ethylamine untuk metilamina menghasilkan MDE; gas amonia menghasilkan MDA, sementara dimetilamin menghasilkan MDDMA. Gelap ATS memproduksi 15 Analog dengan pembuatan amfetamin terlarang, metode yang umum digunakan dalam pembuatan gelap MDMA adalah metode Leuckart. 3,4-MDP-2-P dan N-methylformamide dikurangi dengan menggunakan asam format. Yang dihasilkan antara N-formil- MDMA yang dihidrolisis oleh refluks dengan asam kuat atau basa untuk menghasilkan MDMA. Metode nitropropene telah menjadi populer sejak awal 1990-an. Itu melibatkan reaksi piperonal dengan nitroethane dengan adanya katalis dasar, biasanya n-butylamine. Berbagai prosedur untuk produksi intermediate fenil-nitropropene dilaporkan dalam literatur, tetapi biasanya campuran dari piperonal dan nitroethane hanya didiamkan selama beberapa hari dalam gelap.

Atau, piperonal dan nitroethane yang direfluks dalam asam asetat dan ammonium asetat. The intermediet yang terbentuk dalam reaksi ini sangat khas dalam penampilan dan biasanya mengendap dari larutan reaksi sebagai kristal kuning cerah. Untuk menghasilkan MDA, intermediate biasanya berkurang dengan aluminium lithium hidrida. Untuk sintesis MDMA, MDEA atau lainnya ATS, nitropropene yang menengah diubah menjadi 3,4-MDP-2-P, yang kemudian dikurangi dengan salah satu metode aminasi reduktif dijelaskan sebelumnya. The nitropropene / Nitrostyrene intermediet adalah zat kristal oranye kuning cerah atau terang. MDMA juga biasa diproduksi dengan menggunakan apa yang disebut "bromosafrole" rute. Reaksi berlangsung melalui brominasi dari safrole dengan asam bromida di suhu rendah, diikuti dengan pengobatan dengan metilamina untuk membentuk produk akhir. Hasil akan tergantung pada kadar air dari campuran reaksi. Pergantian metilamina dengan amina lainnya menghasilkan berbeda MDMA-jenis produk (misalnya, MDA, MDEA, atau MDDMA). Methoxyamphetamine-jenis obat biasanya disintesis menggunakan sesuai aldehida dan nitroethane cincin tersubstitusi, sedangkan untuk mescaline, 2C-B, dan phenethylamines cincin tersubstitusi lainnya, nitromethane digunakan. + H2/Pt, Al / Hg, atau NaCNBH 3,4-MDP-2-P methylamine imina MDMA O O O O O N CH3 H N 2 O O N 3 Gambar V. aminasi reduktif digunakan dalam pembuatan MDMA terlarang 16 Metode untuk identifikasi dan analisis amfetamin, metamfetamin 2C-B diproduksi dengan mereaksikan 2,5-dimethoxybenzaldehyde dan nitromethane, diikuti dengan pengurangan LiAlH4 untuk membentuk 2,5-dimethoxyphenethylamine. 2,5-dimethoxyphenethylamine kemudian brominated untuk membentuk produk akhir. VI. Kualitatif dan Kuantitatif

ANALISIS ATS Secara umum, dalam upaya untuk menentukan identitas obat dikendalikan dalam dugaan material, pendekatan analitis harus memerlukan penentuan di setidaknya dua parameter berkorelasi. Hal ini diakui bahwa pemilihan ini parameter dalam kasus tertentu akan mempertimbangkan obat yang terlibat dan sumber daya laboratorium yang tersedia untuk analis. Hal ini juga menerima bahwa persyaratan unik dalam yurisdiksi yang berbeda dapat menentukan praktek-praktek yang sebenarnya diikuti oleh laboratorium tertentu. A. TES dugaan Tes presumtif yang cepat prosedur penyaringan yang biasanya terdiri dari dua atau tiga tes independen. Mereka dirancang untuk memberikan indikasi kehadiran atau tidak adanya kelas obat dalam sampel uji dan cepat menghilangkan sampel negatif. Teknik uji dugaan yang baik, karena semua teknik analisis, memaksimalkan probabilitas dari "benar" hasil, dan meminimalkan kemungkinan positif palsu. Namun, tes presumtif tidak dianggap cukup untuk identifikasi obat dan hasil harus dikonfirmasi dengan tes laboratorium tambahan. Dalam beberapa kali, tes presumtif lebih sering digunakan sebagai uji lapangan, meskipun mereka juga dilakukan di laboratorium sebagai prosedur penyaringan pertama. Untuk ATS skrining, tes warna, atau tes spot, biasanya digunakan, meskipun immunoassay tes dan sejumlah teknik instrumental cepat dan portabel juga tersedia. Metode skrining Instrumental seperti spektrofotometer mobilitas ion (ion-scan), spektrometer massa portabel, FTIR atau Raman spektrometer, baru-baru ini telah mendapatkan popularitas. Banyak alat tes komersial untuk skrining ATS yang tersedia, bagaimanapun, mereka harus dievaluasi "di rumah" untuk spesifisitas dan sensitivitas. 1. TES WARNA Tes Warna biasanya tes kimia sederhana dan tercepat yang seorang analis dapat diterapkan pada sampel. Kebanyakan tes warna sangat sensitif; dengan demikian, hanya menit jumlah sampel yang diperlukan untuk menyelesaikan tes yang sukses, dan sering 17 18 Metode untuk identifikasi dan analisis amfetamin, metamfetamin Hasil terbaik diperoleh dengan terkecil dari jumlah sampel, sering kurang dari satu mg. Karena sampel dapat bervariasi dalam kemurnian (konsentrasi ATS), dan zat-zat yang tidak terkait mungkin ada, warna yang ditunjukkan oleh tes ini harus ditafsirkan dengan hati-hati. Selain itu, aspek subjektif dari evaluasi warna harus selalu diingat. Teknik uji Warna Beberapa reagen yang berbeda biasanya digunakan untuk pengujian warna amphetamine ketik zat dan cincin tersubstitusi analog mereka. Yang paling penting tes warna untuk zat ini Marquis, Simon dan uji Chen. Itu

Uji Marquis memungkinkan perbedaan antara amphetamine dan cincin tersubstitusi nya analog. Tes Simon umumnya digunakan sebagai tes untuk amina sekunder, seperti methamphetamine dan amfetamin cincin tersubstitusi sekunder, termasuk MDMA dan MDE. Namun, amina sekunder lainnya, misalnya, dietilamina dan piperidin, dapat memberikan warna yang sama. Secara umum, warna yang intens namun mungkin cepat memudar di hadapan beberapa kotoran. Untuk alasan ini, adalah penting untuk analis untuk mengkonfirmasi hasil tes Simon dengan melakukan tes tambahan, misalnya, tes Marquis. Tes Chen digunakan untuk membedakan efedrin, pseudoefedrin, norephedrine, fenilpropanolamin dan methcathinone dari amphetamine dan methamphetamine, yang tidak bereaksi dengan Chen tes reagen. Tes keempat, uji asam galat, menyediakan cara sederhana untuk perbedaan MDMA, MDA dan MDEA dari amfetamin atau metamfetamin, karena bereaksi secara khusus dengan senyawa aromatik methylenedioxy-diganti. Prekursor berisi methylenedioxy-substruktur, seperti safrole dan isosafrol juga bereaksi. Metode Persiapan reagen dijelaskan dalam lampiran II. Reagen harus disiapkan baru. Uji Marquis _ Tempatkan sejumlah kecil (1-2 mg bubuk, atau 1-2 tetes cairan) dari bahan yang dicurigai dalam depresi di piring spot. _ Tambahkan satu tetes Marquis Reagent 1, maka satu tetes reagen 2, dan aduk. _ Amati warna campuran. Tes Simon _ Tempatkan sejumlah kecil (1-2 mg bubuk, atau 1-2 tetes cairan) dari bahan yang dicurigai dalam depresi di piring spot. Analisis kualitatif dan kuantitatif dari ATS 19 _ Tambahkan satu tetes Simon Reagen 1 dan aduk. _ Tambahkan satu tetes Simon Reagen 2, dan kemudian satu tetes reagen 3. _ Amati warna campuran. Tes Chen _ Tempatkan sejumlah kecil (1-2 mg bubuk, atau 1-2 tetes cairan) dari bahan yang dicurigai dalam depresi di piring spot. _ Tambahkan 2 tetes Chen Reagen 1. _ Tambahkan 2 tetes Chen Reagen 2, kemudian tambahkan 2 tetes Reagen 3 dan aduk. _ Amati warna campuran. Tes asam galat _ Tempatkan sejumlah kecil (1-2 mg bubuk, atau 1-2 tetes cairan) dari bahan yang dicurigai dalam tabung reaksi kecil. _ Tambahkan satu tetes Gallic acid Reagent.

_ Amati warna campuran. Hasil Tabel 1 memberikan hasil tiga tes warna utama yang paling umum ditemui ATS dan analog cincin tersubstitusi mereka. Karena tes asam galat terutama digunakan untuk mengidentifikasi, secara umum, metilen-dioxy substituen cincin dan tidak ATS individu dengan sub-struktur, hasilnya tidak disertakan secara terpisah, untuk zat individu, dalam tabel. Cerah warna hijau tua menunjukkan adanya MDA, MDMA, MDE, N-hidroksi- MDA atau MMDA. Dalam beberapa kasus, misalnya, MDE dan N-hidroksi-MDA, hijau warna dapat berubah menjadi coklat selama tes. Tabel hasil uji 1. Warna Senyawa Marquis reagent Simon reagen Chen reagen Amphetamine Orange, perlahan NR * NR * menjadi coklat Cathinone NR NR * Secara bertahap berubah menjadi kuning atau oranye Dimethylamphetamine Jeruk NR * NR * Ephedrine Pseudoephedrine NR NR * Purple N-Ethylamphetamine Kuning, menjadi coklat Metamfetamin Orange, perlahan Jauh NR biru * menjadi coklat Methcathinone NR sedikit biru, spot-atau bertahap berubah menjadi cincin seperti endapan oranye kuning atau Norephedrine NR NR Purple 2C-B Kuning -> NR green * NR * 2C-T-2 Cahaya pink, orange NR * 2C-T-7 NR NR * 20 Metode untuk identifikasi dan analisis amfetamin, metamfetamin Tabel 1. (Lanjutan) Senyawa Marquis reagent Simon reagen Chen reagen DMA green -> NR hijau tua * DOB Yellow -> NR green * NR * DOET kuning coklat NR * KUTU Dark blue / black MBDB Dark blue / biru hitam NR Jauh * MDA Dark blue / NR hitam * NR * MDDM Dark blue / black MDEA Dark blue / black (Jauh) biru -> NR * coklat MDMA Dark blue / biru hitam NR Jauh * MDOH Dark blue / black MMDA Purple NR * NR *

4-MTA NR NR * PMA NR -> NR hijau muda * STP / DOM Yellow NR * NR * TMA Jeruk NR * Catatan: NR = tidak ada reaksi * Warna reagen harus dianggap sebagai negatif. Catatan analitis (A) ATS spesifik Karena ATS, analog terutama cincin tersubstitusi dan methamphetamine di Tenggara Asia, yang sering ditemui dalam bentuk tablet berwarna cerah, hasil tes warna dapat bertopeng, atau perubahan hasil tes warna dapat terjadi. Meskipun berbagai macam warna yang digunakan untuk produksi tablet ATS, sebagian warna yang larut dalam air, dan kelarutan mereka dapat dimanipulasi dengan mengubah pH larutan. Dalam kasus tersebut, oleh karena itu, analis harus menyesuaikan ekstraksi prosedur dan menghilangkan warna sama sekali sebelum melanjutkan ke tes warna itu sendiri. Dalam kasus, ketika tes warna tidak dapat ditafsirkan dengan jelas karena kehadiran tablet pewarna, prosedur berikut akan sering menghasilkan hasil yang diterima: Tempatkan sejumlah kecil (sekitar 10 mg) dari sampel ke dalam tabung reaksi kecil. Menambahkan sekitar 1 ml metanol (atau 1 ml 4:1 campuran metanol: metilen klorida). Setelah penyaringan melalui glass wool, menguap sampai kering. Menyusun kembali itu sampel dalam jumlah minimum air, dan kemudian dilanjutkan dengan uji warna dengan hati-hati menyetorkan larutan sampel air di piring spot dan menambahkan warna reagen. Karena sampel yang sudah diencerkan, 3 tetes reagen per satu tetes larutan sampel akan cukup. Kehadiran pengencer dan adulterants juga dapat mengganggu reaksi warna dan menghasilkan dalam hasil tes negatif palsu. Sedangkan uji Simon dapat menyebabkan hasil negatif palsu ketika adulterants atau pengencer yang hadir dalam sampel ATS, tes Marquis kurang sensitif sampel tercemar dan, oleh karena itu, lebih baik ketika konsentrasi ATS di sampel sangat rendah. Analisis kualitatif dan kuantitatif dari ATS 21 (B) Umum Warna-warna yang dijelaskan adalah penilaian subjektif karena persepsi individu warna. Karena itu, aspek subjektif dari evaluasi warna, untuk itu diperlukan setiap analis untuk menguji standar referensi yang tepat untuk memastikan bahwa ia dapat mengenali setiap hasil uji warna. Demikian pula, disarankan untuk melakukan kosong menguji tanpa substansi sasaran untuk memastikan keakraban dengan warna reagen. Ketika preformed dengan benar, tes warna negatif umumnya cukup dapat diandalkan dalam membangun tidak adanya senyawa target; Namun, hasil positif hanya dugaan indikasi kemungkinan adanya suatu senyawa. Banyak lainnya senyawa, sering tidak berbahaya dan tidak terkendali oleh undang-undang nasional atau

internasional perjanjian, dapat memberikan warna yang sama dengan tes reagen warna yang diberikan. Oleh karena itu, wajib bagi analis untuk mengkonfirmasi tes warna positif untuk setiap dikendalikan senyawa secara hukum dengan menggunakan tes laboratorium tambahan. Untuk menghilangkan kemungkinan hasil positif palsu karena tempat yang terkontaminasi piring, mungkin menguntungkan untuk menempatkan reagen ke piring spot, dan kemudian menambahkan sejumlah kecil sampel untuk reagen. Bacaan lebih lanjut PBB (1995). Metode pengujian cepat penyalahgunaan obat, Manual untuk digunakan oleh nasional aparat penegak hukum dan narkotika laboratorium (ST/NAR/13/Rev.1) S. A. Johns, A. A. Tidakkah dan A. R. Najam (1979). Tes Spot: referensi bagan warna untuk ahli kimia forensik, J. Forensik Sci., vol. 24, hlm 631-649. E. Jungreis (1985), analisis uji Spot, Klinik, lingkungan, forensik dan geokimia aplikasi, John Wiley & Sons, New York-Chichester-Brisbane-Toronto-Singapura. AC Moffat, MD Osselton dan B. Widdop (eds.) (2004), Analisis Clarke Obat dan Racun, 3rd ed., Pharmaceutical Press, London-Chicago. C.L. O'Neil et al. (2000), Validasi dua belas tes tempat bahan kimia untuk mendeteksi penyalahgunaan obat, Forensik Sci. Int., Vol. 109, hlm 189-201. RAVelapoldi dan SA Wicks (1974), Penggunaan alat tes tempat kimia untuk dugaan tersebut identifikasi narkotika dan penyalahgunaan obat, J. Forensik Sci., vol. 19, hlm 636-654. 2. TES ANION Pengujian anion untuk tujuan forensik biasanya memanfaatkan kelarutan gabungan dengan reaksi yang dipilih di mana hasil ditentukan oleh ada atau tidak adanya, dan kelarutan, dari endapan. Kelarutan ATS berbeda dan garamnya dalam air dan beberapa umum sistem pelarut dijelaskan di bawah ini. 22 Metode untuk identifikasi dan analisis amfetamin, metamfetamin Amphetamine dan garamnya Basis Hidroklorida Phosphate Sulphate Air terlarut larut larut larut Metanol atau etanol larut larut terlarut terlarut Dietil eter larut larut larut larut Kloroform Larut larut larut larut Methamphetamine dan garamnya Basis Hidroklorida Air terlarut larut Metanol atau etanol larut larut Dietil eter larut larut Kloroform larut larut

Ring-tersubstitusi ATS dan garamnyaBasis bebas dari cincin tersubstitusi ATS umumnya tidak larut dalam air dan larut dalam etanol, dietileter, kloroform dan pelarut organik lainnya. Garam hidroklorida mereka larut dalam air dan etanol,sedikit larut dalam kloroform, dan tidak larut dalam dietil eter. Kelarutan zat individukelompok ini tergantung pada ATS cincin tersubstitusi tertentu yang dimaksud.MetodeSemua reagen harus disiapkan sesuai dengan prosedur yang ditetapkan. Rincianpersiapan reagen dijelaskan dalam lampiran II.Uji perak nitratSampel ATS diketahui dilarutkan dalam beberapa tetes air deionisasi dandiobati dengan 1-2 tetes larutan AgNO3. Hasil untuk anion umum adalahtercantum di bawah ini. Karena anion lain juga dapat memberikan hasil yang sama, tes tambahanatau sosialisasi keterbatasan pengujian harus dilakukan.Chloride: Bentuknya yang dadih endapan putih yang tidak larut dalam nitrat pekatasam. Setelah mencuci dengan air, endapan larut dalam larutan amonia encer,dari mana dapat kembali dipicu oleh penambahan asam nitrat.Bromida: Bentuk kuning pucat krim berwarna endapan yang tidak larut dalamasam nitrat. Setelah mencuci dengan air, endapan sangat lambat larut dalam encersolusi amonia dan larut dalam larutan amonia pekat. Hal ini dapat reprecipitateddari kedua solusi dengan penambahan asam nitrat.Analisis kualitatif dan kuantitatif dari ATS 23Iodida: Bentuk endapan kuning cerah yang sedikit larut dalam terkonsentrasilarutan amonia tetapi larut dalam larutan tiosulfat.Sulfat: Bentuk lampu berwarna kristal endapan yang dapat dengan mudah diidentifikasidengan menempatkan solusi pengujian pada slide mikroskop dan mencarikarakteristik "diamond" berbentuk kristal perak sulfat.Fosfat: Bentuk endapan kuning muda, yang larut dalam amonia encersolusi, atau asam nitrat dingin.Untuk sulfat dan fosfat garam, tes khusus tambahan dapat dilakukan:Uji garam sulfatYang tidak diketahui sampel ATS (sekitar 100 mg) dilarutkan dalam air dan diperlakukan denganlarutan barium klorida. Sebuah endapan putih, yang tidak larut dalam asam kloridaacid, menunjukkan adanya garam sulfat.Uji garam fosfatYang tidak diketahui sampel ATS (sekitar 100 mg) dilarutkan dalam larutan yang terbuat darivolume yang sama (misalnya, 1ml masing-masing) larutan asam nitrat (10% v / v) danlarutan amonium molibdat (10% b / v). Dengan pemanasan lembut, pembentukanterang kenari kuning endapan, yang larut dalam larutan amonia, menunjukkankehadiran garam fosfat.Catatan analitisKarena semua tes anion dilakukan dalam larutan air, air-kelarutan

Garam ATS merupakan pra-kondisi untuk hasil yang berarti.Mencuci endapan dengan air sebelum melakukan tes untuk pembubaranendapan sangat penting untuk menghilangkan larut (non-diendapkan) anion.Bacaan lebih lanjutMcKibben, T., Chappell, JS, Evans, H., Mausolf, N., Analisis Komponen AnorganikDitemukan di Clandestine Laboratory Obat Bukti, J. Cland. Lab. Berinvestasi. Chem. Ass., 5 (4),1995, 19-33.3. TES mikrokristalTes Microcrystal tes cepat, sederhana, dan sangat sensitif untuk identifikasizat dan isomer optik mereka. Mereka melibatkan pembentukan kristaldari reaksi senyawa target dengan pereaksi kimia, diikuti24 Metode untuk identifikasi dan analisis amfetamin, metamfetamindengan analisis kristal yang dihasilkan dengan menggunakan mikroskop polarisasi dandibandingkan dengan bahan referensi, biasanya foto kristal dikenal.MetodeBentuk paling sederhana dari tes terdiri dari penambahan setetes pereaksi sesuai dengantes substansi, diikuti dengan mengamati dan menganalisis kristal yang terbentuk di bawahmikroskop polarisasi.Dalam rangka mempertahankan catatan yang akurat, fitur karakteristik kristalharus dijelaskan. Rekor paling akurat dari hasil tes adalah dengan foto.Jika foto tidak tersedia sketsa bentuk kristal sangat membantu.Metode dan rincian prosedur untuk tes microcystal dari ATS dijelaskandalam bab VI.G.2. Istilah deskriptif untuk bentuk kristal dan foto kristalATS besar serta instrumen dan peralatan persyaratan dasar diberikandalam lampiran III.Bacaan lebih lanjutCunningham, M. D. (1973). Teknik cepat dan sensitif untuk diferensiasi optikbentuk isomer metamfetamin dan amfetamin, mikrogram, vol. 6, No 6, hal 87-95.Fulton, C. C. (1969). Tes Microcrystal Modern Obat. Wiley-Interscience, Divisi AJohn Wiley & Sons, New York-London-Sydney-Toronto.Ono, M., Microcrystal Test, Jepang, 1996. (Memberikan pengenalan yang komprehensif untukTeknik tes mikrokristal, dan termasuk foto-foto hasil uji mikrokristal dari 39ATS dan prekursor mereka).B. KROMATOGRAFI LAPIS TIPIS (TLC) *TLC telah menjadi salah satu teknik yang paling umum digunakan untuk pemisahandan identifikasi obat sah diproduksi. Hal ini cepat (analisis jaranglebih lama dari tiga puluh menit), sensitif (sub-miligram kuantitas analitdiperlukan), sangat fleksibel dalam fase gerak baik stasioner dan, dansehingga bisa menerima berbagai macam zat, di dasar dan garam bentuk, mulai daripaling polar dengan bahan non-polar yang paling. Hal ini juga setuju untuk varietasteknik visualisasi, dan itu adalah murah.Meskipun keuntungan nyata dari TLC, di banyak negara, tidak diterimasebagai suatu teknik untuk identifikasi obat.* Untuk lebih sistem TLC standar, lihat: Thin-layer nilai Rf kromatografi toksikologizat yang relevan pada sistem standar, kedua, direvisi dan diperbesar edisi, Laporan XVIIKomisi DFG untuk analisis klinis-toksikologi, edisi khusus dari TIAFT Bulletin, VCH

Verlagsgesellschaft mbH, 1992.Analisis kualitatif dan kuantitatif dari ATS 25Pelat TLC (fase stasioner)Coating: gel G Silica dengan ketebalan lapisan 0,25 mm, dan mengandung lembamindikator, yang berfluoresensi di bawah sinar UV panjang gelombang 254 nmCatatan: Pelat disiapkan oleh analis harus diaktifkan sebelum digunakan dengan menempatkan mereka ke dalam oven untuksetidaknya 10 sampai 30 menit pada suhu 120 ° C. Pelat kemudian disimpan dalam desikator lemak bebas silika birugel. Aktivasi panas biasanya tidak diperlukan untuk lapisan ikatan kimia (piring komersial).Ukuran piring yang khas: 20x20 cm, 20x10 cm, 10x5 cm (pelat 10x5 cm harusdigunakan dengan sisi 10 cm vertikal di tangki TLC)Sistem pelarut (fase gerak)Sistem A: Methanol 100Konsentrat amonia 1.5Sistem B: Ethyl acetate 85Methanol 10Konsentrat amonia 5Sistem C: Cyclohexane 75Toluene 15Diethylamine 10MetodeMetode yang direkomendasikan dan hasil yang dipilih yang disediakan di bawah, tapi tetaptanggung jawab analis untuk membiasakan dia / dirinya sendiri dengan hasil yang spesifikindividu ATS.Sistem pelarutSiapkan mengembangkan sistem pelarut seakurat mungkin dengan menggunakan pipetdan mengukur silinder. Biarkan sistem pelarut dalam tangki TLC untuk sementara waktucukup untuk memungkinkan saturasi fasa uap yang akan dicapai sebelum analisis(Dengan tangki kertas berlapis adsorben, ini memakan waktu sekitar 5 menit).Persiapan standar ATS dan solusi sampelBentuk standar dan sampel, garam atau dasar, tidak penting. Entah bentuk akanmemuaskan. Karena sifat dasar pelarut berkembang,senyawa bermigrasi dasar sebagaimana gratis.ATS solusi standar: solusi Standar ATS harus disiapkan pada konsentrasisekitar 2 mg / ml dalam metanol. Mereka harus disimpan dalam gelapdan tempat yang dingin.26 Metode untuk identifikasi dan analisis amfetamin, metamfetaminSolusi sampel ATS (ATS sampel tidak diketahui): solusi Sampel harus disiapkanpada konsentrasi sekitar 5mg/ml dalam metanol. Dalam kasus-kasus, di manakemurnian ATS diduga menjadi sangat rendah karena pemalsuan, mungkin diperlukanuntuk mempersiapkan solusi sampel lebih terkonsentrasi (sepuluh kali lebih terkonsentrasisolusi yang disarankan sebagai titik awal).Untuk sampel ATS dalam bentuk selain bubuk, solusi sampel harusdisiapkan sebagai berikut:

Tablet: Grind sejumlah perwakilan dari tablet (setelah pengambilan sampel umumrencana) sampai menjadi bubuk halus dan menyiapkan solusi untuk sebagai bubuk.Kapsul: Keluarkan isi dari sampel yang representatif dari kapsul (berikutrencana pengambilan sampel umum) dan mempersiapkan solusi seperti untuk bubuk.Larutan encer: Spot langsung, atau setara 5mg/ml, jika konsentrasidari ATS dikenal.Bercak dan mengembangkanTempatkan kedua 1 _L dan tempat 5 _L larutan sampel, bersama-sama dengan 2 _L darilarutan standar (s) ke pelat TLC (lebih disukai, juga tempat pelarut sebagai negatifKontrol harus diterapkan ke piring). Spotting harus dilakukan dengan hati-hati,tanpa merusak permukaan piring itu.Titik awal yang dijalankan, yaitu, "garis bercak," harus 2 cm daribagian bawah piring. Jarak antara aplikasi sampel (bercakpoin) harus minimal 1 cm, dan bintik-bintik tidak harus ditempatkan lebih dekat dari 1,5 cmke tepi sisi piring. Untuk menghindari noda menyebar selama pengembangan, ukurandari sampel tempat harus sekecil mungkin (_ 2 mm).Biarkan tempat kering, dan tempat piring ke pelarut jenuh TLC tank (saturasidari fasa uap dicapai dengan menggunakan bantalan pelarut jenuh atau kertas saringsebagai lapisan tangki). Lepaskan piring dari tangki pembangunan segera setelahpelarut mencapai garis pembangunan ditandai sebelumnya; jika tidak, bintik-bintik menyebarakan terjadi.Visualisasi / deteksiPelat harus dikeringkan sebelum visualisasi: Pelarut dapat dibiarkan menguappada suhu kamar, atau dihapus dengan blower udara panas. Jika udara panas yang digunakan,perawatan harus dilakukan karena volatilitas dasar gratis ATS. Hal ini pentinguntuk pengembangan warna yang tepat bahwa semua jejak amonia dihapus daripiring.Berikut ini adalah pemilihan metode visualisasi. Berdasarkan hasiltes dugaan, diantisipasi ATS harus ditargetkan menggunakan salah satu atau kombinasimetode dan reagen berikut:Analisis kualitatif dan kuantitatif dari ATS 27Metode / Visualisasi reagen analit Target dan hasilA. sinar UV pada 254 nm metode Universal. Banyak zat, termasuk ATS, memberikanbintik-bintik ungu di piring dinyatakan hijau neon

B. Ninhydrin reagen Banyak amina primer dan sekunder dilampirkan keatom karbon alifatik, seperti amphetamine danmethamphetamine, mengakibatkan violet atau bintik-bintik merah muda.C. diasamkan kalium Sensitif reagen umum. Kebanyakan primer dan sekunderamina reagen iodoplatinate memberikan tempat biru muda.D. Fast Black K primer dan amina sekunder memberikan tempat yang berbeda-beda diwarna dari violet (amina primer) ke oranye atau

oranye-merah (amina sekunder).E. Marquis Perbedaan antara reagen tersubstitusi dan cincin tersubstitusiATSF. Fluorescamine reagen (Fluram) reagen Sensitif untuk amina primer. Direkomendasikan untukdeteksi konsentrasi rendah amina primer.G. Simon reagen reagen umum untuk amina sekunder (efedrin danpseudoephedrine tidak bereaksi)H. Dragendorff ragent reagen umum untuk alkaloid dan basa nitrogenKey:Metode / Visualisasi reagenA. sinar UVAmati pelat dikeringkan di bawah sinar UV pada 254nm dan 366nm.B. Ninhydrin reagenSiapkan larutan 10% dalam etanol.Semprot piring dengan reagen ninhidrin dan panas dalam oven pada suhu 120 ° C selama minimal 15 menit.Violet atau pink spot diberikan oleh amina primer seperti amphetamine dan amina sekunderseperti methamphetamine. Efedrin juga menghasilkan tempat violet.C. diasamkan kalium iodoplatinate reagenLarutkan 0.25g platinic klorida dan 5g kalium iodida dalam air dan membuat hingga 100 ml.Tambahkan 2 ml asam klorida pekat.Semprot piring dengan larutan kalium iodoplatinate diasamkan dan mengamati bintik-bintik berwarnaAmphetamine dan methamphetamine memberikan kotor abu-abu ungu-coklat-bintik pada latar belakang merah muda.Solusi ini juga dapat digunakan untuk pelat overspray yang sebelumnya telah disemprot denganninhidrin.D. Fast Black KSolusi: Siapkan larutan 1% dari Cepat garam Hitam K dalam air [2,5-Dimethoxy-4-((4-nitrophenyl)azo) benzena diazonium tetrachlorozincate (2:1)]Solusi B: 1N NaOHSemprot piring dengan larutan A dan mengamati bintik-bintik berwarna. Amina sekunder sepertimethamphetamine dan MDMA menghasilkan bintik-bintik segera. Tercecer dengan larutan B menghasilkanbintik-bintik berwarna untuk amphetamine dan lainnya cincin tersubstitusi ATS. Air kering piring dansemprot sekali lagi dengan larutan A. ini memproduksi lebih intens bintik-bintik berwarna. Warna

bervariasi dari ungu untuk amina primer ke oranye atau oranye-merah untuk amina sekunder sepertimethamphetamine dan MDMA.E. Marquis reagentTambahkan 8-10 tetes larutan formaldehida 40% sampai 10 ml asam sulfat pekat. Mempersiapkansegar sebelum setiap penggunaan.28 Metode untuk identifikasi dan analisis amfetamin, metamfetaminPenyemprotan dengan Marquis reagent tidak dianjurkan karena asam sulfat pekatterlibat. Namun, memberikan informasi tambahan yang berguna untuk membedakan antara ATS,misalnya, setelah deteksi dengan ninhidrin. Untuk itu, drop reagen Marquis denganPasteur pipet pada tempat yang sudah terdeteksi.F. Fluorescamine reagen (Fluram)Larutkan 10 mg fluorescamine dalam 50 ml aseton. Siapkan harianSemprot piring dengan reagen fluorescamine. Air keringkan dengan blower udara panas. Amatipiring di bawah sinar UV pada 366 nm. Amphetamine memberikan kuning neon titik terang.Methamphetamine tidak terdeteksi. (Untuk stabilisasi pada 366 nm, semprot dengan larutan 10% v / vdari trietylamine dalam diklorometana).G. Simon reagenLarutkan 100 mg sodium nitroprusside dan 2 g natrium karbonat dalam 10 ml air (yaitu,larutan air yang mengandung natrium nitroprusside pada konsentrasi 1%, dan natrium karbonatpada 20%). Siapkan reagen baru sebelum digunakan.Semprot piring dengan reagen Simon. Tempatkan piring dalam tangki kosong berkembang bersamadengan gelas yang berisi asetaldehida. Tutup tangki. Uap asetaldehida akan menyebabkanmethamphetamine tempat untuk menjadi warna biru intens. (Metode ini dimodifikasi meningkatkansensitivitas untuk methamphetamine 0,1 _G (LOD). Amina primer tidak dapat dideteksi, karenasensitivitas rendah sistem untuk kelompok zat, dan gangguan pada latar belakangwarna ketika amonia digunakan dalam pelarut berkembang.)H. Dragendorff reagenLarutan stok: Larutkan 0,85 g bismut subnitrate (dasar) dalam 10 ml asam asetat. Encerkan dengan 50 mldengan air dan tambahkan 8 g kalium iodida dalam 20 ml airSemprot piring dengan larutan yang dibuat dari 1 ml larutan stok Dragendorff, 2 ml asetatasam dan 10 ml air. Warna bervariasi dari oranye ke ungu.Interpretasi

Setelah visualisasi, menandai tempat (misalnya, dengan pensil), dan menghitung faktor retardasi (Rf) nilai-nilai:Jarak migrasi: dari asal ke pusat zona analit (spot)Rf =Pengembangan jarak: dari asal pelarut depanHal ini sangat umum untuk mengekspresikan faktor retensi sebagai Rf x 100, disebut sebagai HRF.HasilBandingkan warna dan nilai-nilai Rf sampel ATS diketahui dengan orang-orang daristandar acuan ATS otentik yang dijalankan secara bersamaan di piring yang sama.Nilai Rf untuk beberapa yang paling umum ATS diberikan dalam Tabel 2.Tabel 2. Nilai Rf sering ditemui ATS dan adulterantsTLC sistem *Nama ATS A B CAmphetamine 0.48 (0.43) ** 0.37 (0.43) (0.20)Cathinone 0.66 0.56DOB 0.37 0.32 (0.13)DOET 0.36 0.32 (0.24)DMA 0.37 0.33 (0.19)N-Ethylamphetamine 0,47 0,37 (0,47)Methamphetamine 0.35 (0.31) 0.22 (0.42) (0.28)MDA 0,36 (0,39) 0,33 (0.42) (0.18)Analisis kualitatif dan kuantitatif dari ATS 29TLC sistem *Nama ATS A B CMDMA 0.31 (0.33) 0.21 (0.39) (0.24)MMDA 0.40 0.31PMA 0.41 (0.73) 0.33 (0.43) (0.23)STP / DOM 0.35 (0.51) 0.31 (0.41) (0.15)TMA 0.35 0.20Ephedrine (0.30) (0.25) (0.05)Kafein (0.52) (0.52) (0.03)* Sistem Solvent: A, B atau C; Pelat TLC: gel G Silica dengan ketebalan lapisan 0,25 mmSebuah sistem: Methanol: terkonsentrasi amonia (100:1.5)Sistem B: asetat Etil: Methanol: amonia terkonsentrasi (85:10:5)Sistem C: Cyclohexane: Toluena: Diethylamine (75:15:10)** Nilai Rf dalam kurung telah diperoleh dengan menggunakan pelat silika diresapi dengan metanol KOH (0,1 mol / l).Catatan analitisKarena perubahan kecil dalam komposisi pelat TLC dan aktivasi, dalam sistem pelarut, tangkisaturasi atau pengembangan jarak dapat mengakibatkan perubahan signifikan dalam nilai-nilai Rf, yang

nilai yang diberikan hanya harus dipertimbangkan sebagai indikasi kromatografi yangperilaku ATS dan adulterants terdaftar. Adalah penting bahwa standar referensi ATSdijalankan secara bersamaan di piring yang sama. Atau, reproducibility dapat secara signifikanditingkatkan dengan menggunakan senyawa referensi dan dikoreksi nilai Rf (Rfc).Untuk tujuan identifikasi, baik nilai Rf dan warna bercak setelah penyemprotandengan reagen visualisasi yang berbeda harus selalu dipertimbangkan.Bacaan lebih lanjutFried dan J. Sherma (Eds.), Praktis Kromatografi Thin-Layer, A MultidisiplinPendekatan, Boca Raton Press, 1995.Jork et al., Thin-Layer Chromatography, Reagen dan Deteksi Metode, Weinheim,VCH, vol. 1 (1990), vol. 2 (1992).Neumann, H. (1987). Nachweis und Identifizierung von Phenylethylaminen (Stimulantienund Halluzinogene), Sci. Pharm., Vol. 55, 1-11.Ojanpera, I., Wahala, K., dan Hase, TA (1990). Cepat garam Hitam K: a lapis tipis serbagunakromatografi visualisasi reagen untuk diferensiasi amina alifatik, Analis,vol. 115, hlm 263-267.Stead, AH, Gill, R., Wright, T., Gibbs, JP, Moffat, AC (1982), thinlayer Standarsistem kromatografi untuk identifikasi obat dan racun, Analis, vol. 107,hlm 1106-1168.30 Metode untuk identifikasi dan analisis amfetamin, metamfetaminC. KROMATOGRAFI GAS (GC)-ionisasi nyalaDETECTOR (FID)Untuk analisis GC dari ATS, prinsip-prinsip umum dari teknik berlaku. Hari ini,instrumen GC pilihan untuk pekerjaan analitis rutin adalah lubang sempitgas chromatograph kapiler, menggunakan kolom kapiler dengan diameter internalantara 0,2 dan 0,32 mm.Hal ini diakui bahwa ada laboratorium, yang untuk berbagai alasan,mungkin ingin mempertahankan sistem dikemas kolom. Bagi laboratorium, metodemenggunakan kolom dikemas digambarkan dalam edisi awal dari manual ini. GCprosedur memanfaatkan kolom megabore kapiler (0,53 mm diameter internal)merupakan sarana untuk memperbaiki menyelesaikan daya dibandingkan dengan kolom dikemas,dan lebih kuat daripada bore kapiler sistem kolom sempit. Lama GCsistem yang dirancang untuk kolom dikemas dapat dikonversi untuk digunakan dengankolom megabore.Metode1. ANALISIS KUALITATIFPersiapan standar ATS dan solusi sampelLarutan standar ATS: beratnya sekitar 25 mg garam ATS standar (s) * daribunga ke dalam labu volumetrik 25 ml dan membuat sampai tanda dengan air. Pipetsebuah aliquot dari 1 sampai 5 ml larutan ini ke dalam 10 ml gelas tutup tabung.

Tambahkan drop-bijaksana larutan 5% natrium hidroksida sampai pH 10. Kemudian tambahkan 5 mlpenggalian pelarut **.Stopper dan membalikkan tabung reaksi setidaknya 10 kali atau vortex selama 1 menit dan biarkanberdiri sampai lapisan terpisah. *** Dengan menggunakan pipet tetes, mentransfer lapisan pelarut(Misalnya, kloroform) melalui natrium sulfat anhidrat lapisan ke dalam botol GC.Inject 1-2 _L lapisan pelarut ke dalam GC.Solusi sampel ATS (unknown sample ATS): berat 25-150 mg sampel,tergantung pada kemurnian diantisipasi, untuk mendapatkan konsentrasi akhir sekitar* Kadang-kadang, standar ATS dapat diperoleh dalam bentuk dasar. Dalam kasus tersebut, ekstraksi tidakdiperlukan. Secara umum, bagaimanapun, adalah penting bahwa bentuk standar dan sampel akan selalusama.** Semua analit harus benar-benar larut dalam pelarut ekstraksi. Ekstraksi pelarut harusakan bercampur dengan lapisan berair. Pelarut yang sesuai meliputi n-heksana, kloroform, metilen kloridaatau butil asetat.Ketika *** kloroform digunakan sebagai pelarut pengekstrak, emulsi dapat membentuk. Dalam kasus tersebut, selainNaCl meningkatkan tingkat ekstraksi dengan melanggar emulsi. Jika shaker modern digunakan danCampuran kemudian disentrifugasi untuk pemisahan dari dua lapisan, pembentukan emulsi biasanya tidaktidak terjadi.Analisis kualitatif dan kuantitatif dari ATS 311 mg / ml garam analit, ke dalam labu ukur 25 ml dan make up kemenandai dengan air. Kemurnian sampel diantisipasi ditentukan secara empiris. *Pipet suatu aliquot dari 1 sampai 5 ml larutan ini ke dalam gelas 10 ml tutuptabung reaksi. Tambahkan drop-bijaksana larutan 5% natrium hidroksida sampai pH 10. Lalutambahkan 5 ml pelarut ekstraksi (misalnya, kloroform).Stopper dan membalikkan tabung reaksi setidaknya 10 kali atau vortex selama 1 menit dan biarkanberdiri sampai lapisan terpisah. Dengan menggunakan pipet tetes, mentransfer lapisan pelarutmelalui natrium sulfat anhidrat lapisan ke dalam botol GC.Inject 1-2 _L lapisan pelarut ke dalam GC.Jika sampel throughput cepat diperlukan, sampel dapat diambil secara langsungdalam etanol / amonia berair (99:1), dan disuntikkan ke kromatografi gas.Dengan menggunakan metode ini, kondisi injektor dan kolom dapat memburuklebih cepat dibandingkan dengan sampel diekstraksi (Catatan: Metode ini tidak cocok untuk

analisis kuantitatif karena sulit untuk menghasilkan kromatografi baik dikeberadaan amonia).Kondisi operasi GCDetector: FID (atau NPD, jika tersedia / diinginkan)Kolom: DB-5 (5% fenil 95% dimetil),DB-1 (100% dimetil-polisiloksan), atau setaraPanjang: 10-30 m, ID 0,20-0,53 mmKetebalan Film: 0,10-0,50 _mGas pembawa: ** Nitrogen, helium atau hidrogen, pada kira-kira.0.8ml/min. (N2) atau 1-1,2 ml / menit. (Dia atau H2)Rasio Split: 20:1 hingga 50:1Suhu kolom: suhu awal harus cukup rendah(Misalnya, 60-90 ° C) untuk memperhitungkan volatilitas tinggiATS basa, misalnya:. 60 ° C, tahan selama 0,5 menit,sampai 280 ° C, dengan laju 12 ° C / menit., tahan akhirsuhu selama 30 menit.Suhu Injector: 210-250 ° CDetektor suhu: 310 ° CHasilIdentifikasi dilakukan dengan membandingkan waktu retensi analitdengan standar referensi. Urutan elusi adalah sebagai berikut:* Penentuan kemurnian sampel dapat dilakukan berdasarkan pengalaman apotek, atau menggunakan berikutMetode kasar: Ambil 100 mg sampel dan larut dalam 2-3 ml kloroform. Filter solusi,mengumpulkan Insolubles, kering dan berat. Jumlah larut (misalnya, berat aslinya dikurangi keringInsolubles) adalah kemurnian sampel diantisipasi. Namun, perlu diketahui bahwa metode ini dapat mengakibatkan lebih rendahdari sampel kemurnian diantisipasi sebenarnya untuk garam yang tidak larut dalam kloroform (lihat bab VI.A.2,pada "tes anion", di atas).** Aliran gas tergantung pada kolom ID; pemrograman gradien tekanan dapat digunakan jika tersedia.32 Metode untuk identifikasi dan analisis amfetamin, metamfetaminamphetamine <methamphetamine <pseudoephedrine <efedrin <PMA <PMMA <MDA <MDMA <4-MTA <MDEA <MBDB <2C-B.Di bawah kondisi yang dijelaskan, kafein dan ketamin, yang seringditemukan dalam sampel ATS di beberapa daerah, terelusi setelah 2C-B.2. ANALISIS KUANTITATIFTiga metode untuk analisis GC-FID kuantitatif ATS disediakan di bawah ini:Sebuah metode standar tunggal (A) dan dua beberapa metode standar (B dan C).Metode A dan B tidak memerlukan derivatisasi, sedangkan metode C membutuhkan sililasi.

Semua tiga metode yang dijelaskan di sini untuk penggunaan umum. Lampiran IV memberikancontoh metode GC divalidasi untuk kuantisasi dipilih ATS.Metode A: metode standar TunggalMetode A cocok untuk kuantisasi paling ATS. Ini melibatkan persiapanhanya satu ATS larutan standar dengan konsentrasi yang sama dengan yang diantisipasikonsentrasi analit.Pembuatan larutan baku internal (IS): timbang akurat sekitar25 mg standar yang dipilih intern (misalnya, n-tetradecane atau lainnyan-alkana dengan bahkan jumlah atom karbon, atau difenilamin) dan melarutkandalam 25 ml pelarut pengekstrak (misalnya, kloroform). Jika standar internalsolusi digunakan untuk ekstraksi, konsentrasi sasaran harus disiapkan dalamrentang instrumen linear (tidak lebih dari 0,5 mg / ml).Persiapan standar ATS dan solusi sampel *: penyusunan ATSstandar dan solusi sampel harus mengikuti prosedur yang diuraikan di atas untukanalisis kualitatif, dengan menggunakan larutan standar internal untuk ekstraksi dari keduaATS standar dan sampel, sebagai berikut:(A) ATS solusi standarTimbang akurat sekitar 25 mg garam ATS standar (s) ** dari bunga menjadi25 ml volumetrik labu dan membuat sampai tanda dengan air. Akurat pipetsebuah aliquot dari 1 sampai 5 ml larutan ini ke dalam 10 ml gelas tutup tabung.Tambahkan drop-bijaksana larutan 5% natrium hidroksida sampai pH 10. Kemudian tambahkan 5 mllarutan baku internal, akurat ditiadakan.* Standar ATS dan sampel solusi dan konsentrasi mereka dirancang untuk digunakan dengan kapilerkolom dan prosedur yang dijelaskan di bawah ini. Penggunaan kolom alternatif dan sistem GCmungkin memerlukan perubahan baik dari segi komposisi relatif dan konsentrasi masing-masing komponen.** Jika standar ATS dalam bentuk dasar yang digunakan, ekstraksi tidak diperlukan. Dalam kasus tersebut, menimbangtidak kurang dari sekitar 10 mg standar ATS dan melarutkan langsung dalam 10 ml akurat dibagikanlarutan standar internal. Untuk kuantisasi akurat, penting bahwa bentuk analit(Garam atau basa) menjadi sama dengan standar ATS.Analisis kualitatif dan kuantitatif dari ATS 33Stopper dan membalikkan tabung reaksi setidaknya 10 kali atau vortex selama 1 menit dan biarkanberdiri sampai lapisan terpisah. Dengan menggunakan pipet tetes, mentransfer lapisan pelarutmelalui natrium sulfat anhidrat lapisan ke dalam botol GC.Inject 1-2 _L lapisan pelarut ke dalam GC. Menganalisis larutan standar dirangkap tiga atau lebih.

(B) ATS solusi sampel (sample diketahui ATS)Timbang akurat 25-150 mg sampel, tergantung pada kemurnian diantisipasi,untuk mendapatkan konsentrasi akhir sekitar 1 mg / ml garam analit, menjadi 25 mlvolumetrik flask dan membuat sampai tanda dengan air. Sampel diantisipasikemurnian ditentukan secara empiris.Akurat pipet suatu aliquot dari 1 sampai 5 ml larutan ini ke dalam gelas 10 mltutup tabung reaksi. Tambahkan drop-bijaksana larutan 5% natrium hidroksida sampai pH 10.Kemudian tambahkan 5 ml larutan baku internal, akurat ditiadakan.Stopper dan membalikkan tabung reaksi setidaknya 10 kali atau vortex selama 1 menit dan biarkanberdiri sampai lapisan terpisah. Dengan menggunakan pipet tetes, mentransfer lapisan pelarutmelalui natrium sulfat anhidrat lapisan ke dalam botol GC.Inject 1-2 _L lapisan pelarut ke dalam GC. Menganalisis diketahui ATSlarutan sampel sebaiknya dua kali atau lebih.Kondisi operasi GCSama seperti untuk analisis GC kualitatif (lihat hal. 30).PerhitunganDari beberapa suntikan, menghitung rasio luas puncak rata-rata: (a) relevanATS standar standar internal (AST / IS), dan (b) ATS diketahuistandar internal (AATS / IS).Isi obat persentase sampel dapat dihitung dengan menggunakan umumrumus:CST*AATS / ISATS (%) = 100 *CATS ast / ISdimanaATS (%) = Isi ATS diketahui (sebagai dasar atau garam, lihat catatan kaki **pada hal. 32) dalam bahan sampel asli (= kemurnian sampel)CST = Konsentrasi ATS larutan standar (mg / ml), yang telah dipersiapkanbawah (a), di atas (= berat standar murni ATS per mililiterpelarut)CATS = Konsentrasi ATS larutan sampel yang tidak diketahui (mg / ml),yang telah dipersiapkan di bawah (b), di atas (= berat diketahui ATSsampel per mililiter pelarut)34 Metode untuk identifikasi dan analisis amfetamin, metamfetaminAATS / IS = jumlah kawasan Puncak yang tidak diketahui ATS dibagi dengan luas puncaktuduhan standar internal (sebaiknya, rata-rata duplikatpenentuan)Ast / IS jumlah = Luas puncak standar ATS dibagi dengan jumlah luas puncak

dari standar internal (rata-rata penentuan rangkap tiga)Metode A dapat dimodifikasi dari satu ke metode standar ganda dengan berurutanmenipiskan aliquot dari larutan standar ATS dengan standar internalsolusi dengan menggunakan 10 botol volumetrik ml. Dengan cara itu, ATS konsentrasi standardapat disiapkan, menargetkan konsentrasi yang tepat dalam rentang linierinstrumen, dan mencapai beberapa titik kalibrasi.Metode B: metode Multiple-standar tanpa derivatisasiMetode di bawah ini adalah metode kalibrasi multi-titik yang direkomendasikan, divalidasiMetode GC untuk analisis kuantitatif dari ATS, dengan dan tanpa derivatisasi,diberikan dalam lampiran IV.Pembuatan larutan baku internal (IS)Timbang akurat 0,3-0,4 g standar internal yang dipilih (n-tetradecane,n-alkana lain, difenilamin, atau ATS struktural terkait dalam bentuk dasar) * ke500 ml labu ukur dan encerkan dengan volume suara dengan kloroform untuk memberikan internallarutan standar 0,6-0,8 mg / ml.Pembuatan larutan standar ATS (solusi kalibrasi GC)Larutan stok standar harus mengandung semua senyawa yang menarik dalam konsentrasisekitar 1000 mg / l. Mereka dapat disimpan dalam botol tertutup di lemari essampai satu tahun. Untuk persiapan larutan stok:(A) akurat beratnya sekitar 1000 mg garam ATS (s) dari bungamenjadi 1000 ml volumetrik labu dan membuat ke tanda dengan air.(B) akurat pipet 5 ml larutan ini ke dalam gelas tutup uji 20 mltabung. Basify untuk lakmus dengan menambahkan beberapa tetes amonia terkonsentrasisolusi. Akurat tambahkan 5 ml kloroform.(C) Stopper dan kocok dengan baik, kemudian diamkan sampai lapisan terpisah. Menggunakanpipet Pasteur, mentransfer sekitar 1 ml lapisan kloroformmelalui natrium sulfat anhidrat ke dalam gelas kecil. Standar inisolusi tidak boleh dibiarkan lebih dari setengah jam sebelum digunakanuntuk kalibrasi.(D) Untuk penyusunan standar kalibrasi untuk 5-titik kalibrasi, siapkantingkat yang berbeda seperti yang ditunjukkan dalam tabel berikut:* Jika standar internal dalam bentuk garam (misalnya garam dari ATS struktural terkait) digunakan, ekstraksidiperlukan. Dalam kasus tersebut, berat tidak kurang dari sekitar 10 mg standar ATS danmelarutkan langsung dalam 10 ml akurat dibagikan larutan standar internal.Analisis kualitatif dan kuantitatif dari ATS 35Persiapan beberapa standar kalibrasi titikKalibrasi ATS standar IS solusi Approx. konsentrasisolusi tingkat (_L) (_L) CHCl3 (_L) dari ATS-garam (mg / l)Level 1 20 100 880 20

Level 2 40 100 860 40Level 3 60 100 840 60Level 4 80 100 820 80Tingkat 5 100 100 800 100Inject, setidaknya dalam rangkap tiga, 1-2 _L dari setiap tingkat ke GC dan menggunakan nilai rata-ratauntuk pembentukan kurva kalibrasi.Pembuatan larutan sampel ATS (tidak diketahui sampel ATS)Secara umum, tetapi khusus untuk analisis kuantitatif, menghomogenkan sampel sebelummulai tes atau sub-sampling.(A) Timbang dengan akurat jumlah sampel yang cukup menjadi volumetrik 25 mllabu untuk mendapatkan konsentrasi akhir sekitar 0,2-1 mg / mlanalit. Buat tanda dengan air. (Jumlah sampel yang akanditimbang akan tergantung pada kemurnian diantisipasi, seperti yang ditunjukkan oleh awalMetode skrining. Sebagai contoh, jika kemurnian diantisipasi adalahsekitar 40%, jumlah sampel yang digunakan harus approx. 60 mg.)(B) akurat pipet 5 ml larutan ini ke dalam gelas tutup uji 20 mltabung. Basify untuk lakmus dengan menambahkan beberapa tetes amonia terkonsentrasisolusi. Akurat tambahkan 5 ml kloroform.(C) Stopper dan kocok dengan baik, kemudian diamkan sampai lapisan terpisah. Menggunakanpipet Pasteur, mentransfer sekitar 1 ml larutan sampel inimelalui natrium sulfat anhidrat ke dalam gelas kecil. Ukur 100 _Llarutan sampel, 100 _L larutan standar internal dan 800 _L darikloroform ke dalam GC sampel vial.(D) Inject 1-2 _L ke dalam kromatografi gas. Menganalisis diketahui ATSlarutan sampel sebaiknya dua kali atau lebih.Kondisi operasi GCUntuk analisis kuantitatif, GC dilengkapi dengan autosampler adalah lebih baik.Kondisi pengoperasian mungkin sama seperti untuk analisis kualitatif (lihat hal. 30).PerhitunganIsi obat persentase sampel dihitung dari konsentrasidari ATS larutan sampel yang tidak diketahui dan nilai-nilai yang sesuai dari kalibrasikurva. Dengan GC instrumentasi dan perangkat lunak modern, dan setelah input denganoperator konsentrasi standar kalibrasi yang berbeda danlarutan sampel tidak diketahui, kurva kalibrasi akan dibentuk dan perhitunganakan dilakukan secara otomatis untuk setiap titik sepanjang kurva pada36 Metode untuk identifikasi dan analisis amfetamin, metamfetaminpenyelesaian jangka analitis. Biasanya, hasilnya kemudian akan dinyatakan sebagaiisi persentase obat yang tidak diketahui dalam bahan sampel asli, yaitu,sebagai sampel kemurnian (berat analit relatif terhadap berat sampel).Metode C: metode Multiple-standar dengan derivatisasi

Siapkan diderivatisasi ATS standar dan sampel solusi dengan mengukur sebuah aliquot(Misalnya, 100 _L) dibebaskan dari basis kering (yaitu, setelah ditransfer sampel atausolusi standar melalui natrium sulfat anhidrat ke dalam gelas kecil; Langkah (c)di atas) bersama-sama dengan aliquot dari 100 _L larutan standar internal 750 _L darikloroform dan 50 _L dari BSTFA (atau BSTFA + 1% TMCS) menjadi sampel GC botol.Untuk kalibrasi beberapa titik, mengikuti metode B (lihat tabel di atas berjudul"Persiapan beberapa standar kalibrasi titik"), menggunakan 50 _L BSTFA di setiaplangkah untuk persiapan larutan standar dan sampel, dan menambahkan kloroformuntuk membuat sampai 1 ml.D. GAS spektrometri massa kromatografi (GC-MS)GC-MS adalah salah satu teknik yang paling umum digunakan untuk identifikasi, danbaru-baru ini juga kuantisasi, sampel obat forensik. Sebagai teknik ditulis dgn tanda penghubung,itu menyatukan kekuatan pemisahan dan sensitivitas dari GC-FID dengan analitspesifisitas teknik spektroskopi, menyediakan spektrum yang sangat spesifikdata senyawa individu dalam campuran kompleks dari senyawa tanpa izinpemisahan.Persiapan standar ATS dan solusi sampelSampel disiapkan seperti yang dijelaskan dalam metode GC yang diberikan sebelumnya.Sensitivitas analisis dan kekhususan spektrum massa ATSditingkatkan dengan derivatisasi (lihat lampiran VII). Persiapan derivatif sangatdiinginkan ketika spektrum massa molekul underivatized adalahnilai diagnostik rendah. Kebanyakan underivatized ATS memiliki ion fragmen m rendah / zrasio, intensitas rendah, dan hanya satu ion fragmen kelimpahan yang lebih tinggi (puncak dasar).Derivatisasi dari ATS biasanya menghasilkan ion fragmen rasio m / z lebih tinggi dankelimpahan yang lebih tinggi. Ion massa yang tinggi lebih spesifik dan mereka memiliki lebih besar diagnostiknilai, karena mereka tidak terpengaruh oleh campur ion latar belakang sepertikolom berdarah atau kontaminan lainnya.Serupa dengan analisis GC dijelaskan sebelumnya, jika sampel throughput cepatdiperlukan, sampel dapat diambil langsung dalam etanol / amonia berair (99:1)dan disuntikkan ke dalam GC-MS. Namun, dalam kasus ini, kondisi injektorAnalisis kualitatif dan kuantitatif dari ATS 37dan kolom dapat memburuk lebih cepat daripada dengan sampel diekstraksi. Untuk penggunaandi GC-MS, sampel amina primer juga dapat diambil langsung dalam karbondisulfida (CS2), yang menghasilkan pembentukan isothiocyanate, derivatifyang memberikan spektrum massa lebih karakteristik dari senyawa induk.Kondisi operasi GC-MSKondisi GC oven: sama seperti untuk analisis GC (Kondisi dariMetode A, B atau C dapat digunakan)

Kolom: sama seperti untuk analisis GC, misalnya:DB-5 (5% fenil 95% dimetil),DB-1 (100% dimetil),0,25 mm x 30 m x 0,25 _m, atau setaraMasukMode: Split / SplitlessTemp: 250 ° CGas pembawa: Helium, 1 ml / menitMode: Aliran konstan (atau tekanan konstan)DetektorModus ionisasi: modus EI, 70 eV (mode CI jika diinginkan)

C. Transfer line temp: 280 ° C Ion sumber temp: 230 ° C Parameter Scan: TIC (SIM jika diperlukan), kisaran scan: 35-450 (untuk zat seperti 2C-B yang mungkin mulai pada m / z 29) Hasil Identifikasi dilakukan dengan membandingkan waktu retensi dan spektrum massa analit dengan standar referensi. Semua senyawa diidentifikasi oleh GC-MS dan dilaporkan oleh analis harus dibandingkan dengan spektrum massa saat standar acuan yang tepat, sebaiknya diperoleh dari instrumen yang sama, dioperasikan di bawah kondisi yang sama. Ada beberapa referensi perpustakaan spektrum massa komersial yang tersedia. Dengan sebagian besar Instrumen GC-MS, banyak dari mereka perpustakaan juga tersedia sebagai pilihan on-line. Secara umum, itu adalah, bagaimanapun, penting untuk menggunakan perpustakaan spektral massa, baik dari sumber komersial atau user generated, untuk tujuan referensi saja. Bacaan lebih lanjut Sebuah sumber literatur tunggal untuk interpretasi spektral massa ATS tidak tersedia tapi ada beberapa sumber literatur umum yang baik, yang bersama-sama hadir cukup komprehensif data, misalnya: 38 Metode untuk identifikasi dan analisis amfetamin, metamfetamin Karl Pfleger, Hans H. Maurer, Armin Weber (2000), Mass spektral dan GC Data Obat, Racun, Pestisida, Polutan dan Metabolit mereka: Bagian I-IV, Wiley. UNODC juga memiliki koleksi terbatas spektrum massa terkait dengan ATS utama. Koleksi dapat diakses dari internet atau, atas permintaan, juga dapat dibuat tersedia pada CD-ROM. E. KROMATOGRAFI CAIR KINERJA TINGGI (HPLC) Selain GC, HPLC adalah teknik lain pemisahan utama yang biasa digunakan dalam analisis obat forensik. Untuk memudahkan persiapan sampel, reproduktifitas terbaik dan pendeteksian,

terbalik kromatografi fase direkomendasikan untuk analisis ATS dan cincin mereka tersubstitusi analog. Kolom paling universal dan serbaguna adalah terikat oktadesil silika kolom (C18). Panjang kolom, diameter, ukuran partikel, ukuran pori-pori dan beban karbon harus dipertimbangkan sebelum pemilihan akhir kolom. Karena ada berbagai macam fase stasioner dan mobile yang tersedia untuk analis, hanya pedoman disajikan di bawah ini. Metode Persiapan standar ATS dan solusi sampel Larutkan jumlah yang tepat dari standar atau sampel dalam fase gerak, penargetan

konsentrasi komponen aktif antara 0,05-0,50 mg / ml. Contoh solusi harus disaring sebelum analisis. Saham dan standar solusi harus disiapkan dari standar referensi. Standar kerja harus berada dalam rentang linear detektor dan sekitar 80-120% dari konsentrasi sasaran. Beberapa titik kalibrasi diinginkan tetapi metode standar tunggal juga diterima. Kondisi pengoperasian Detector: detektor Diode array, scanning cepat atau detektor panjang gelombang variabel, UV 200 - 210 nm (juga menggunakan 280-290 nm untuk methylenedioxy- phenethylamines diganti) Fase stasioner: C8 atau C18 dengan 5 ukuran partikel atau _m lebih kecil Panjang kolom: _ 30 cm Diameter Kolom: _ 5,0 mm Analisis kualitatif dan kuantitatif dari ATS 39 Pre-kolom: Diameter: 2-4 mm, panjang: 25 mm, fase terbalik C8 atau C18 Suhu kolom: 15-35 ° C (kontrol suhu sangat dianjurkan dalam nonthermostated lingkungan) Fase gerak penyangga: dapar fosfat pH 2,0-3,2 (Mis. natrium 50 mM monobasa fosfat disesuaikan dengan fosfat acid). Untuk tailing puncak, ponsel fase aditif seperti alkil sulfat atau alkil sulfonat atau amina mungkin diperlukan. Fase gerak modifier organik: metanol atau asetonitril antara 2% dan 20% (dengan gugus alkil yang lebih tinggi, pada alkil sulfat atau alkil sulfonat, konsentrasi organik lebih tinggi mungkin diperlukan). Laju alir: 0,1-2,0 ml / menit.

Volume injeksi: 1-100 _L Pemisahan: Analisis isokratik atau gradien harus dilakukan, menargetkan waktu retensi dari kurang dari 30 menit. Hasil Identifikasi dilakukan dengan membandingkan waktu retensi analit dengan bahwa standar referensi dan, jika tersedia, dengan menggunakan beberapa panjang gelombang UV atau diode array atau deteksi pemindaian UV cepat. Untuk cincin tersubstitusi analog seperti sebagai MDA, MDMA, dan MDEA, scan fluoresensi juga bisa digunakan. Kekhususan metode ini penting, karena selalu ada kemungkinan bahwa senyawa serupa mengelusi pada waktu retensi yang sama. Perintah elusi khas adalah sebagai berikut: norephedrine, efedrin, amfetamin, methamphetamine, MDA, MDMA dan MDEA. Pemisahan efedrin / pseudoefedrin dan norephedrine / norpseudoephedrine pasangan bisa sulit, dan mungkin memerlukan sedikit penyesuaian kondisi HPLC. Penghitungan: Kalibrasi standar eksternal atau internal dapat digunakan (standard kalibrasi eksternal dianjurkan terutama jika injektor-valve berbasis digunakan dalam pengisian berlebih yang mode). Penggunaan luas puncak untuk HPLC kuantitasi dianjurkan, karena memperluas puncak (penurunan tinggi puncak) dapat terjadi sebagai akibat dari kerusakan dari fase diam, rendering tinggi puncak tidak cocok untuk kuantisasi. 40 Metode untuk identifikasi dan analisis amfetamin, metamfetamin Kekhususan deteksi dapat ditingkatkan dengan menggunakan beberapa panjang gelombang UV atau deteksi fluoresensi. Sebuah metode HPLC divalidasi untuk kuantisasi ATS adalah dijelaskan dalam lampiran V. Bacaan lebih lanjut Aalberg, L., DeRuiter, J., Noggle, FT, Sippola, E. dan Clark, CR (2000). Kromatografi dan Mass spektral Metode Identifikasi untuk Side-Rantai dan Ring Regioisomers dari Methylenedioxymethamphetamine, J. Chromatogr. Sci., Vol. 38, hlm 329 - 337. Clark, CR, DeRuiter, J., Valer, A. dan Noggle, FT (1995). Gas kromatografi-Mass Spektrometri dan Analisis kromatografi cair dari Butanamines Designer Terkait MDMA, J. Chromatogr. Sci., Vol. 33 hlm 328-337. Lurie, I.S. (1995). Terbalik-Phase High Performance Liquid kromatografi Analisis Obat Tujuan Forensik, Chap. 4 dalam Analisis Addictive dan disalahgunakan Narkoba, Adamovics, JA, (Ed.), Marcel Dekker, New York, NY, USA hlm 51-132. Malone, J. V. (1998). Campuran HPLC Quantication dari sembunyi-sembunyi Diproduksi dari

Amphetamine dan Methamphetamine, mikrogram, vol. 31, hlm 304-307. Sadeghipour, F., Giroud, C., Rivier, L., dan Veuthey, J.-L (1997). Penentuan Cepat Amfetamin oleh High-Performance Liquid Chromatography dengan Deteksi UV, J. Chromatogr., Vol. 761, hlm 71-78. Sadeghipour, F., dan Veuthey, J.-L (1997). Penentuan Sensitif dan Selektif Methylenedioxylated Amfetamin oleh High-Performance Liquid Chromatography dengan Fluorimetric Detection, J. Chromatogr., Vol. 787, pp.137-143. Schneider, R. C, dan Kovar, K. A. (2003). Analisis Ecstasy dengan Monolithic Terbalik- Tahap Kolom, Chromatographia, vol. 57 hlm 287-291. F. FOURIER TRANSFORM INFRARED (FTIR) SPEKTROSKOPI Spektroskopi inframerah secara luas digunakan sebagai kualitatif dan, dalam beberapa kali, juga metode kuantitatif untuk penentuan dan analisis struktur ATS. Analisis FTIR dapat menjadi alat yang sangat berguna untuk penyaringan cepat ATS tablet dan bubuk, memberikan indikasi mengenai homogenitas tablet atau kehadiran batch campuran. Preparasi sampel Metode yang disukai untuk persiapan sampel adalah pembubaran sampel dalam pelarut yang sesuai, atau suspensi dalam mull minyak. Sebuah teknik kurang diinginkan adalah Analisis kualitatif dan kuantitatif dari ATS 41 metode halida disc, di mana sampel tersebar ke ditumbuk halus kalium halida (KBr atau KCl) dan ditekan menjadi disc tipis. Namun, sebagian besar laboratorium forensik mendukung metode halida disc untuk dua alasan: (a) halida kalium adalah IR transparan dalam apa yang disebut daerah sidik jari (2000-400 cm-1); dan (b) kalium halida disc umumnya dapat dianalisis ulang berkali-kali, jika disimpan lebih dari pengering a. Metode halida disk yang * terdiri dari penggilingan sampel kering dengan sangat halus bubuk, kemudian pencampuran sekitar 1 mg bubuk sampel dihomogenisasi dengan 200 mg hati-hati dikeringkan dan digiling halida alkali. Setelah penggilingan, campuran ditekan menjadi tipis, transparan disk. Kedua KCl dan KBr bekerja sama dengan baik. Namun, KCl sedikit kurang higroskopis, dan umumnya direkomendasikan atas KBr, terutama ketika analit adalah garam hidroklorida (untuk menghilangkan masalah pertukaran halida). Apakah KBr atau KCl digunakan, itu harus "IR grade" dan dikeringkan pada 110 ° C selama minimal satu jam. Hal ini dapat disimpan di atas sebuah pengering yang kuat (misalnya,

fosfor pentoksida) dalam desikator, atau kiri dalam oven dan dihapus pada "sesuai kebutuhan" dasar. Ini mungkin penting dalam setiap proses hukum selanjutnya. Selain itu, bahan di bawah investigasi dapat dipulihkan dari disk halida untuk pengujian lebih lanjut. The Nujol Metode mull membutuhkan pencampuran sampel serbuk halus (2-3 mg) dengan satu tetes Nujol (parafin cair atau perfluorinated rantai panjang alkana), dan kemudian menggiling campuran dalam mortar batu akik. Jumlah Nujol tambah disesuaikan sehingga mull akhir adalah konsistensi krim tipis. Itu mull dihasilkan tersebar pada halida disc alkali (biasanya KBr) dan disk yang sama

ditempatkan di atas. Film antara cakram halida harus tidak mengandung gelembung udara. Kerugian yang jelas dari metode ini adalah gangguan dari Nujol di spektrum. Pendekatan yang serupa, teknik film tipis, juga digunakan untuk langsung analisis ATS dasar gratis, yang biasanya cairan berminyak. Metode refleksi berlian ATR tunggal (misalnya "Golden Gate" device) adalah metode yang relatif baru untuk kedua cairan dan padatan, yang tidak memerlukan persiapan sampel. Namun, spektrum yang diperoleh dengan metode ini tidak dapat langsung dibandingkan dengan yang diperoleh dari salah satu metode yang dijelaskan di atas. Akhirnya, gas Metode sel adalah alat praktis untuk analisis cepat pelarut dan beberapa prekursor dari laboratorium klandestin. Isolasi obat murni dari sampel Isolasi basa bebas ATS Larutkan 25-50 mg sampel dalam 1 ml 0,1 N asam tartaric. Tambahkan 4-5 tetes amonium hidroksida dan ekstrak dengan kloroform. Melewati lapisan kloroform melalui kolom kecil berisi plug kapas untuk menghilangkan partikel tersuspensi. * Untuk padatan penting (a) untuk mengurangi ukuran partikel dengan menggiling ke dimensi kurang dari panjang gelombang analitis terpendek (untuk menghindari hamburan), dan (b) untuk mencairkan sampel dalam rangka untuk meminimalkan penyerapan dalam disk disiapkan. 42 Metode untuk identifikasi dan analisis amfetamin, metamfetamin Biarkan sebagian dari solusi kloroform menguap langsung ke cakram KBr dan merekam spektrum inframerah dari basa bebas, misalnya, dengan film tipis Teknik pada cakram KBr. Isolasi garam ATS Menggiling menjadi serbuk porsi 20-50 mg sampel dengan 1-2 ml kloroform. Saring, mengumpulkan ekstrak dan berkonsentrasi dengan menggunakan aliran lembut

dari nitrogen. Menyebabkan kristalisasi, filter, kristal kering, dan menjalankan spektrum inframerah Hasil dari paket yang ATS garam oleh salah satu metode yang dijelaskan di bawah ini. Metode Spectra garam ATS dicatat dengan sampel disusun sebagai berikut metode: _ KBr halida disc (1-1,5%) _ Nujol memikirkan metode _ Metode Langsung, misalnya pemantulan difusi ATR _ Metode membaur reflektansi Spectra ATS basa dicatat dengan sampel disusun sebagai berikut metode: _ Metode film tipis _ IR kartu _ Metode Langsung, misalnya pemantulan difusi ATR Metode persiapan sampel IR alternatif untuk methamphetamine Metode ekstraksi kering Serial Tempatkan 200 mg sampel bubuk methamphetamine ke Pasteur sekali pakai pipet dengan plug glass wool di akhir. Cuci sampel dengan dua 1 ml-bagian aseton dan mengumpulkan fraksi aseton. Setelah udara pengeringan mencuci kolom dengan dua 1 ml-bagian kloroform dan mengumpulkan fraksi kloroform. Biarkan kolom kering lagi dan kemudian bilas dengan dua 1 ml aliquot-metanol dan mengumpulkan fraksi metanol. Bahan larut kemudian dapat dihapus dari pipet. Semua fraksi diperiksa oleh spektroskopi inframerah untuk identifikasi. Pemisahan fisik / selektif re-kristalisasi Prosedur di bawah ini juga bekerja untuk jenis campuran ditunjukkan; mereka tidak bekerja dengan baik dengan amphetamine hydrochloride. Analisis kualitatif dan kuantitatif dari ATS 43 Campuran diketahui mengandung metamfetamin: Tambahkan dalam gelas 25 mg sampel 20 ml dari 2:1 campuran kloroform dan heksana, dan berkonsentrasi solusi kira-kira setengah volume aslinya. Tambahkan dietil eter untuk mengendapkan metamfetamin. Filter, kering dan memperoleh spektrum IR (methamphetamine hidroklorida). Campuran diketahui mengandung metamfetamin, pseudoefedrin, dan efedrin: Tempatkan 100 mg sampel dalam secarik kertas saring dan cuci dengan 40 ml 03:01

campuran kloroform dan heksana. Cuci bagian larut dengan kloroform, dan kering dan sembuh untuk pemeriksaan (efedrin hidroklorida). Menguapkan terlarut asli menjadi kekeringan dan membagi menjadi dua bagian yang sama. Larutkan satu setengah sampel ini dalam 20 ml 2:1 campuran kloroform dan heksana, berkonsentrasi sekitar setengah volume awal, dan menambahkan dietil eter untuk mengendapkan

methamphetamine. Filter, kering dan memperoleh spektrum IR (methamphetamine

hidroklorida). Larutkan setengah lainnya dari sampel dalam 2 ml kloroform dan tambahkan 1,6 ml heksana untuk mengendapkan pseudoefedrin tersebut. Filter, kering dan memperoleh IR spektrum (pseudoefedrin hidroklorida). Hasil Identifikasi dilakukan dengan membandingkan spektrum analit dengan standar referensi, atau dari perpustakaan spektral. Bacaan lebih lanjut Metode persiapan sampel IR alternatif untuk methamphetamine Ely, RA (1993), kering Serial Ekstraksi Gelap Metamfetamin Bubuk Untuk Identifikasi adulterants dan Pengencer By Infrared Spectroscopy, Jurnal Clandestine Laboratory Asosiasi Investigasi Kimiawan (JCLIC), vol. 3 (1), hlm 21-25. Oulton, SR (1997), Pemisahan dan Identifikasi Efedrin, Pseudoefedrin dan Campuran Methamphetamine, mikrogram, vol. 30 (12), hlm 289-296. Stinson, S.B. dan Berry, MR (1974), Pemisahan dan identifikasi amfetamin atau methamphetamine dalam kombinasi dengan efedrin atau kafein, vol. 7 (4), p. 51. General FTIR Metode Laboratory di Vibrational Spektroskopi (ed ketiga.) Diedit oleh Willis, HA, van der Maas JH dan Miller, RGJ, John Wiley & anak, Chichester, 1987 G. ANALISIS ISOMERS OPTIK Kebanyakan ATS memiliki satu atom karbon asimetrik mengakibatkan sepasang enantiomer untuk setiap ATS. Tergantung pada sumber, oleh karena itu, bentuk enansiomer yang berbeda 44 Metode untuk identifikasi dan analisis amfetamin, metamfetamin amfetamin, metamfetamin atau lainnya ATS mungkin ditemui di disita sampel diajukan untuk analisis. Di bawah tahun 1971 Konvensi PBB tentang Psikotropika, masing-masing optik isomer (d-dan l-) serta campuran rasemat (dl) dari amphetamine dan methamphetamine dijadwalkan. Dengan sebagian besar cincin tersubstitusi ATS, hanya rasemat adalah terdaftar, dan enansiomer individual termasuk melalui frase generik. Isomer optik berbeda sampai batas tertentu dalam aktivitas farmakologi dan tunduk pada langkah-langkah pengaturan yang berbeda di negara-negara tertentu. Di negara-negara di mana perundang-undangan nasional mensyaratkan bahwa spesifik isomer optik ini diidentifikasi, prosedur analitis berikut dapat digunakan. 1. MELTING POINT Perbandingan titik leleh sampel dicampur dengan yang dari enatiomerically standar acuan murni adalah tes cepat dan sederhana untuk membedakan optik isomer. Sebagai contoh, d-dan-l methamphetamine hydrochloride memiliki lebur yang sama

Titik (170-175 ° C), tetapi campuran dari jumlah yang sama dari kedua isomer optik (Campuran rasemat) memiliki titik lebur yang lebih rendah (130-135 ° C). Metode ini membutuhkan sampel yang cukup murni. Umumnya, titik leleh harus ditentukan dengan menggunakan sampel kering. 2. TES mikrokristal (Lihat juga bagian pada tes mikrokristal sebagai uji dugaan, di atas) Untuk ATS, yang "menggantung penurunan" teknik, atau tes volatilitas, biasanya digunakan. Teknik ini membutuhkan slide rongga, penutup kaca, reagen pengujian dan volatilizing reagen. Persiapan pengujian dan volatilisasi reagen dijelaskan dalam lampiran III. Tes mikrokristal untuk isomer optik amfetamin: Uji klorida emas [5% HAuCl4 di H3PO4] Mentransfer sejumlah kecil sampel bubuk ke dalam depresi rongga geser, dan tambahkan satu atau dua tetes reagen volatilizing (larutan NaOH 5%). Ini membebaskan amina bebas dalam bentuk basa bebas yang mudah menguap, yang naik dari solusi sebagai uap. Segera mentransfer setetes pereaksi pengujian (5% HAuCl4 di H3PO4) ke slide kaca dan membalikkan slide melintang atas sampel rongga. Reagen kemudian bereaksi dengan uap amina hadir dalam rongga. Setelah selang waktu yang tepat, membalikkan kembali slide reagen dan memeriksa untuk kristal dalam reagen atau di tepi drop reagen. Analisis kualitatif dan kuantitatif dari ATS 45 Hasil Baik d-dan l-amphetamine memberikan mikrokristal identik, menyerupai panjang kuning batang atau jarum kasar dan pisau panjang dan sempit. Cara untuk membedakan mereka adalah untuk membentuk rasemat, yang tidak memberikan kristal yang berbeda. The dl-amphetamine rasemat memberikan pada awalnya "berminyak" turun maka kristal platy berwarna. Kristal ini sebagian besar terbentuk setelah inversi. Perbedaan dari d-dan l-amphetamine Jika pengujian di atas menunjukkan bahwa sampel d atau l-amphetamine, perbedaan harus dilakukan untuk yang hadir. Untuk tujuan ini, menambahkan beberapa yang tidak diketahui bubuk sampel untuk sejumlah kecil dikenal garam d-amphetamine dalam satu rongga dan untuk sejumlah kecil-l amphetamine garam di negara lain. Ulangi tes di atas. Campuran

yaitu (d + d) atau (l + l) akan memberikan batang kuning panjang dll Campuran yang membuktikanmenjadi (d + l) akan memberikan kristal platy dari rasemat seperti yang dijelaskan sebelumnya.Metamfetamind-Methamphetamine diuji dengan 5% HAuCl4 di H3PO4 memberikan "V" pisau dengan satusisi yang lebih pendek dari sisi lain. Ini berkembang sangat pesat jika tes dilakukanlangsung pada sampel kering, atau lebih lambat jika sampel diencerkan atau dilakukanmenggunakan teknik penurunan gantung.l-Methamphetamine memberikan tunggal, pisau menyeberang, dan "v" pisau, yang bentukkarakteristik ujung berbentuk cerutu (mereka lancip di kedua sisi ujung pisau).d, l-Metamfetamin bentuk tunggal dan "X" pisau yang kadang-kadang"Pisau" berbentuk. Pisau berakhir hanya lancip di satu sisi mirip dengan pisau.MDMAMDMA diuji dengan 5% HAuCl4 di H3PO4 memberikan kristal berbentuk X putih birefringed tinggidengan gugus bintang seperti di bawah cahaya terpolarisasi. Kristal ini mirip dengan d, lmethamphetaminedengan emas klorida, namun dapat dibedakan dengan praktek.Catatan: Karena MDMA sangat sensitif dalam bereaksi dengan reagen emas klorida,hanya sebagian kecil sudah cukup untuk hasil yang baik.Tes emas klorida juga berguna untuk prekursor efedrin dan pseudoefedrin,dan dapat berguna untuk nikotinamida dan kafein. Sampel Referensizat ini harus digunakan untuk mendapatkan kristal referensi.Tes mikrokristal untuk isomer optik metamfetamin: [H3BiI6 dalam H2SO4]Gunakan menggantung prosedur penurunan seperti dijelaskan di atas untuk amphetamine tetapi menggunakan H3BiI6dalam pengujian H2SO4 reagen (lihat lampiran III untuk persiapan reagen).Hasild-Methamphetamine memberikan jarum orange panjang. dl-Methamphetamine memberikanbatang oranye-merah dengan karakteristik miring berakhir.46 Metode untuk identifikasi dan analisis amfetamin, metamfetaminBacaan lebih lanjutFulton, C. C. (1969). Tes Microcrystal Modern Obat, Wiley-Interscience, New York.Ono, M., Microcrystal Test, Jepang, 1996 (memberikan pengenalan yang komprehensif untukTeknik tes mikrokristal, dan termasuk foto-foto hasil uji mikrokristal dari39 ATS dan prekursor mereka).Ruybal, R. (1986). Uji mikrokristalin untuk MDMA, mikrogram, vol. 19 (6), hlm 79-80.American Society of Analytical Chemistry: AOAC Official Metode Analisis (1984),hlm 704-714.Stall, W. J. (1981). Pemisahan methamphetamine dan prokain memanfaatkan volatilitastest / menggantung metode drop untuk amfetamin, mikrogram, vol. 14 (10), hal.148.3. TEKNIK INSTRUMENTALAda beberapa metode instrumental langsung (GC kiral, HPLC atau CE) danmetode derivatisasi tidak langsung tersedia untuk analisis isomer optik

ATS. Pemilihan metode tergantung pada ruang lingkup analisis, ketersediaanperalatan dan persyaratan laboratorium lainnya. Keduanya langsung dan tidak langsungmetode harus dianggap sebagai pelengkap karena baik menawarkan universalsolusi untuk pemisahan kiral. Kekuatan dan kelemahan dari kedua pendekatanharus dipertimbangkan dengan hati-hati.Metode instrumental Direct memungkinkan analisis isomer optik tanpaderivatisasi, menggunakan fasa diam kiral dan / atau aditif kiral untuk menjalankanpenyangga (CE).Metode tidak langsung didasarkan pada derivatisasi analit dengan kirai areagen untuk menghasilkan dua diastereoisomer yang berbeda dengan yang berbeda fisiko-kimiasifat yang dapat dipisahkan pada fase diam akiral. Pilihanreagen kiral tergantung pada sejumlah faktor seperti daya pemisahan, sensitivitas,efisiensi derivatisasi, dan kompatibilitas dengan teknik instrumental.Metode menggunakan derivatisasi kiral dasarnya lebih murah dan melakukantidak memerlukan peralatan khusus atau kolom. Penggunaan normal, kolom akiralmemungkinkan integrasi yang mudah dari pemisahan kiral dalam skema analisis rutin.Teknik GCKromatografi gas (GC) adalah teknik mapan untuk pemisahan kiral. Itudapat dilakukan dengan menggunakan metode langsung, menggunakan kolom kapiler kiral, ataumetode tidak langsung, di mana pemisahan ini dicapai dengan menggunakan reagen kirai dan akiralfasa diam.Analisis kualitatif dan kuantitatif dari ATS 47Kromatografi gas kiral (metode GC langsung)Fasa diam yang tersedia secara komersial untuk pemisahan GC isomer optikbiasanya diproduksi dengan penambahan siklodekstrin makromolekul diderivatisasi untukfase diam umum. Yang paling umum digunakan fase diam kiral untukATS adalah beta-siklodekstrin berbasis.MetodePreparasi sampel (ekstraksi) untuk analisis GC kiral adalah sama seperti untuk normalGC (lihat di atas).Kondisi operasi GCKolom: Dexcst, 0,25 mm x 30 mx 0,25 mikron Film, atausetaraGas pembawa: Helium di sekitar. 1,2 ml / menitSuhu oven:. 120 ° C selama 1 menit, kemudian 1,5 ° C / menit sampai 175 ° C, tahan selama1.5 min.Volume Injeksi: 1 _LSuhu injektor: 190 ° CDetektor suhu: 280 ° CCatatan: kondisi operasi GC lainnya dapat digunakan, tetapi perlu diuji untuk pemisahan optimal kiral

senyawa. Penggunaan nitrogen sebagai gas pembawa memerlukan tingkat yang lebih rendah aliran (sekitar 0,8 ml / menit.) Untuk optimalkecepatan, sehingga puncak yang lebih luas.Derivatisasi kiral (metode GC tidak langsung)Diastereoisomer dari ATS dapat disusun dengan menggunakan reagen yang berbeda sepertiacylchlorides, alkylsulphonates, isothiocyanates, chloroformates. Asam Mosher[R (+) - atau S (-)-_-metoksi-_-(trifluoromethyl)-asam fenilasetat], asam Mosherklorida, dan N-trifluoroasetil-1-prolyl klorida (TPC, juga dikenal sebagai TFAP-Cl)paling populer.Asam dan asam klorida hasil Mosher dalam derivatisasi kuantitatif yang palingamina, dengan pengecualian efedrin dan pseudoefedrin. Hal ini dapat digunakan sebagaireagen untuk kedua GC dan analisis HPLC.TPC dikenal untuk menghasilkan turunan stabil hampir semua ATS termasukKelompok efedrin. Hal ini lebih setuju untuk analisis GC.Rincian ATS persiapan sampel menggunakan asam Mosher dan TPC untuk kiraiderivatizations dijelaskan dalam lampiran VII.Kondisi operasi GC untuk analisis GC kualitatif (lihat di atas) juga dapatdigunakan untuk analisis derivatif kiral.48 Metode untuk identifikasi dan analisis amfetamin, metamfetaminBacaan lebih lanjutBeckett, A. H. dan Testa, B. (1972). Pemisahan stereokimia dan penugasan configuraldengan kromatografi gas-cair amida N-trifluoroasetil-l-prolyl asimetrisl-phenylisopropyl-amina, J. Chromatogr., vol. 69, hlm 285.Cody, J. T., (1992). Penentuan rasio methamphetamine enantiomer dalam urin oleh gasspektrometri massa kromatografi, J. Chromatogr., vol. 580, hlm 77-95.Jirovský, D., et al. (1998). Methamphetamine-sifat dan metode analitispenentuan enantiomer, Forensik Sci. Int., Vol. 96, hlm 61-70.Liu, J. H. dan Ku, W. W. (1981). Penentuan enansiomer N-trifluoroasetil-l-prolylderivatif amphetamine klorida oleh kapiler gas kromatografi / spektrometer massa denganfasa diam kiral dan akiral, Anal. Chem., Vol. 53, hlm 2180.Liu, JH, Ku, WW, Tsay, JT, Fitzgerald, MP, dan Kim, S. (1982). Pendekatandiferensiasi sampel obat. III: Sebuah studi perbandingan penggunaan kiral dan akiralspektrometri kromatografi gas kolom kapiler / massa untuk penentuan methamphetamineenantiomer dan kemungkinan kotoran, J. Forensik Sci., vol. 27 (1), hlm 39-48.Liu, JH, Ku, WW dan Fitzgerald, MP (1983). Pemisahan dan karakterisasiamina obat-obatan dan enantiomer mereka dengan kapiler kolom kromatografi gas-spektrometri massa,J. Assoc. dari Anal. Chem., Vol. 66, hlm 1443.McKibben, T. (1992). Pemisahan dan Identifikasi Obat enansiomer via N TFA (S)Prolyl Chloride Derivatisasi, Jurnal Laboratorium Clandestine InvestigasiAsosiasi Kimiawan, vol. 2 (1), hlm 21 20. (Referensi ini termasuk derivatisasi keduaenansiomer dari amfetamin, metamfetamin, efedrin, pseudoefedrin, MDA,

MDMA, DOB, DOM, 2,4,6 TMA, 3,4,5 TMA, propylhexedrine, dan PMA.)R. Kaslauskas, G. Trouth dan A. Lissi (AGAL), 16 Cologne lokakarya tentang dopingAnalisis: Moshers acid,Pastor-Navarro, MD, Porras-Serrano, R., Herraez-Hernandez, R., Campins-Falco, P.(1998). Penentuan otomatis enansiomer amphetamine menggunakan dua dimensiKolom-switching sistem kromatografi untuk derivatisasi dan pemisahan, Analis,vol. 123, hlm 319.Shin, H. S. dan Donike, M. (1996). Derivatisasi stereospesifik amfetamin, fenolalkylamines, dan hydroxyamines dan kuantifikasi enansiomer oleh kapilerGLC / MS, Anal. Chem., Vol. 68, hlm 3015.Wells, C. E. (1970). Penentuan GLC dari isomer optik dari amphetamine, J. Assoc.dari Anal. Chem., Vol. 53, hlm 113.Teknik HPLCUntuk HPLC, berbagai pendekatan telah digunakan, termasuk derivatisasi dengan kiraireagen, penggabungan aditif kiral dalam fase gerak, dan penggunaanfasa diam kiral. Berbagai kolom HPLC kiral tersedia secara komersial.Kinerja fasa diam kiral dalam HPLC telah secara dramatismeningkat dalam beberapa tahun terakhir, meskipun analisis tersebut masih mahal.Analisis kualitatif dan kuantitatif dari ATS 49Bacaan lebih lanjutLemr, K., Jirovsky, D. dan Seveik, D. (1996). Pengaruh Beberapa Parameter pada enansiomerPemisahan Efedrin, Methamphetamine dan Selegiline menggunakan HPLC dengan _-siklodekstrinTahap Stationary, J. Liq. Chrom. & Rel. Technol., Vol. 19, hlm 3173-3191.Makino, Y., Suzuki, A., Shirota, T. Ogawa, Shirota, O. (1999). Analisis langsung metamfetaminenantiomer dalam urin dengan pertukaran kation kuat pra-kolom dan _-siklodekstrin-terikat kolom semi-mikro, J. Chromatography B, vol. 729, hlm 97-101.Noggle, FT, DeRuiter, J. dan Clark, CR (1986). Liquid kromatografi PenentuanKomposisi dari enansiomer dari Methamphetamine Diolah dari Efedrin danPseudoefedrin, Anal. Chem., Vol. 58, pp 1643-1648Pihlainen, K. dan Kostiainen, R. (2004). Pengaruh Eluen pada enansiomer PemisahanDikendalikan Obat oleh kromatografi cair-Ultraviolet Absorbance Detection-elektrosprayIonisasi Tandem Mass Spectrometry menggunakan Vancomycin dan Asli _-siklodekstrinFasa Diam kiral, J. Chromatogr. A., vol. 1033, hlm 91-99.Rizzi, AM, Hirz, R., Cladrowa-Runge, S. dan Jonsson, H. (1994). Pemisahan enansiomerdari Amphetamine, Methamphetamine dan Ring disubtitusi Amfetamin oleh Sarana dari _-Siklodekstrin-kiral Stationary Phase, Chromatographia, vol. 39, hlm 131-137.Sadeghipour, F. dan Veuthey, J. L. (1998). Pemisahan enansiomer dari Empat MethylenedioxylatedAmfetamin pada _-siklodekstrin kiral Stationary Phases, Chromatographia,vol. 47, hlm 285-290.Penjual, JK, Duffitt, GL, Gaines, ML dan Liu, RH (1996). High Performance LiquidKromatografi Analisis enansiomer Komposisi Obat Disalahgunakan, Forensik Sci.Wahyu, vol. 8, hlm 92-108.

Teknik CEZona elektroforesis kapiler sangat menguntungkan untuk analisis kiral karenamemungkinkan untuk pemisahan yang sangat efisien enansiomer tanpa derivatisasidan kolom khusus (kapiler). Untuk pemisahan ATS, aditif kiral untukbuffer run seperti hidroksil-propil beta-siklodekstrin yang umum digunakan.Bacaan lebih lanjutIwata, YT, Garcia, A, Kanamori, T., Inoue, H., Kishi. T. dan Lurie, I.S. (2002). PenggunaanSangat sulfat dari Cyclodextrin untuk Pemisahan kiral Simultan AmphetaminetypeStimulan oleh kapiler Electrophoreis, Electrophoreis., Vol. 23, hlm 1328-1334.Lurie, IS, Hays, PA dan Parker, KP (2004). Kapiler Electrophoreis Analisa terhadapLuas Ragam Obat sitaan Menggunakan kapiler Sama dengan Dynamic Coatings,Elektroforesis., Vol. 25, hlm 1580-1591.Lurie, IS, Klein, RFK, Dal Cason, T., LeBelle, M., Brenneisen dan R., Weinberger, R.(1994). Resolusi kiral dari Kationik Obat Menarik Forensik oleh kapiler Elektroforesisdengan Campuran dari Netral dan Anionik Siklodekstrin, Anal. Chem., Vol. 66, hlm4019-4026.50 Metode untuk identifikasi dan analisis amfetamin, metamfetaminVaresio, E., Gauvrit, JY, Longeray, R., Lanteri, P., Veuthey, JL (1997). PusatDesain komposit dalam Analisis kiral dari amfetamin oleh kapiler Elektroforesis,Elektroforesis., Vol. 18, hlm 931-937.Infrared (IR) teknikMeskipun enantiomer memiliki spektrum inframerah yang sama, inframerah (IR) spektroskopidapat digunakan untuk membedakan antara enantiomer dari senyawa yang diberikan setelah mengkonversimereka ke dalam diastereomer yang sesuai.ATS, karena semua basa organik dapat dengan mudah bereaksi dengan asam organik kiraluntuk membentuk diastereomer. D-dan l-amphetamine, misalnya, dapat digabungkan dengand-mandelic acid untuk membentuk dua diastereomer, d-amphetamine-d-mandelate danl-amphetamine-d-mandelate, yang memiliki spektrum IR yang berbeda.MetodeLarutan garam ATS (10-50 mg) dibuat basa, dan ATSdiekstraksi ke dalam metilen klorida. The methylene chloride dikeringkan anhidratnatrium sulfat dan terkonsentrasi sekitar 2 ml. Sebuah larutan jenuhd-mandelic acid dalam metilen klorida ditambahkan, beberapa tetes pada satu waktu, sampaiSolusi ATS dinetralkan (pH kertas). D-mandelate-ATS garam diperbolehkan untukmengkristal, solusi disaring melalui hisap, dan kristal dicuci dengansebagian kecil dari metilen klorida. Setelah kering, disc KBr dari kristal adalahdisiapkan, dan spektrum inframerah yang diperoleh. Prosedur ini diulang dengan menggunakandikenal optik isomer murni sesuai ATS.HasilIdentifikasi isomer optik dilakukan dengan membandingkan spektra yang dihasilkandengan yang diperoleh dari standar referensi murni sesuai. Band IR di

800-1600cm-1 daerah memberikan informasi yang paling analitis khas.Spektra IR dari garam-garam isomer optik amfetamin dengan asam mandelicdiberikan dalam edisi awal dari manual "metode yang direkomendasikan PBB untukpengujian amphetamine dan methamphetamine "(ST/NAR/9). Data juga dapatdiakses pada halaman web Laboratorium dan Ilmiah Bagian ini.Bacaan lebih lanjutChappell, J. S. (1997). Diskriminasi inframerah dari enansiomer diperkaya dan rasematsampel garam methamphetamine, Analis, vol. 122, hlm 755-760.Chappell, J. S. (1998). Sebuah metode inframerah baru untuk penentuan enansiomer tersebutkomposisi garam methamphetamine, Proceedings of the American Academy of ForensicIlmu, vol. 4, hal. 32.Heagy, J. (1970). Metode inframerah untuk membedakan isomer optik dari amphetamine,Analytical Chemistry, vol. 42, hlm 1459.51VII. TAMBAHAN ANALITISTEKNIK UNTUKANALISIS ATSAda beberapa teknik analisis tambahan cocok untuk forensikidentifikasi dan / atau kuantisasi ATS, seperti:_ Kapiler elektroforesis (CE)_ Gas kromatografi-Fourier berubah spektroskopi inframerah (GC-FTIR)_ LC-MS dan CE-MS_ Near Infrared (NIR) Spektroskopi_ Resonansi magnetik nuklir (NMR) spektroskopi (kualitatif dankuantitatif)_ Kuantitatif FTIR_ Kuantitatif TLC_ Raman spektroskopi FTIR

Kromatografi ekstraksi gas fase-mikro padat (SPME-GC)Penjelasan sebagian besar teknik ini adalah di luar lingkup ini "Manualpada direkomendasikan metode analisis untuk ATS ", dan analis yang dirujuk kepelengkap "Manual pada teknik analisis secara umum, karakteristik merekadan penggunaan praktis untuk analisis obat ". Empat teknik, NMR kualitatif, CE,SPME-GC, dan GC-FTIR secara singkat dijelaskan di bawah ini, karena mereka menawarkan spesifik,pilihan menarik untuk analisis ATS.RESONANSI MAGNETIK A. 1H-NUKLIR (NMR) TEKNIKKetersediaan sejumlah besar isomer posisi dari struktural terkaitATS, terutama cincin tersubstitusi ATS, membutuhkan alat yang efektif yang menyediakan diperlukaninformasi struktural untuk diferensiasi mereka. NMR memungkinkan analis untuktegas membedakan antara derivatif amphetamine cincin tersubstitusi yang berbeda,

bahkan di hadapan Pengencer dan adulterants lainnya. Meskipun substitusi tertentupola mirip satu sama lain di daerah sesuai dengan protondari rantai alkil samping, spektrum terpadu dan pola aromatiksinyal proton memungkinkan perbedaan mereka dari satu sama lain. Sementara menjadi kuatalat untuk identifikasi analog, biaya spektroskopi NMR dankeahlian teknis yang diperlukan mencegah aplikasi luas dalam analisis rutin.52 Metode untuk identifikasi dan analisis amfetamin, metamfetaminMetodeLarutkan sekitar 20 mg sampel obat dalam 1 ml D2O. Jika bahan tidak larutyang hadir, centrifuge, mengalihkan langsung supernatan ke dalam NMRtabung. Catat spektrum solusi ini mengandung bentuk garam dari ATS.Membebaskan basa bebas dari ATS in situ dengan penambahan 20-30 mgK2CO3 padat dan 0,5 ml CDCl3 dan merekam spektrum basa bebas.Bandingkan spektrum yang tidak diketahui dengan spektrum referensi, yangdirekam pada transformasi Fourier instrumen pada 90 MHz menggunakan sudut lain dari 18 °(1 _sec) tanpa penundaan setelah akuisisi data.Referensi NMR spektrum dipilih ATS diberikan dalam edisi sebelumnyadua manual PBB terkait dengan analisis ATS, yaitu, "Direkomendasikanmetode untuk pengujian amphetamine dan methamphetamine "(ST/NAR/9) dan"Metode yang disarankan untuk menguji terlarang derivatif amphetamine cincin tersubstitusi"(ST/NAR/12). Data juga dapat diakses di Laboratorium dan IlmiahHalaman web seksi.Bacaan lebih lanjutDawson, B. A. (1991). Penggunaan Nuclear Magnetic Resonance Spectroscopy untuk deteksidan kuantisasi obat disalahgunakan, dalam: Analisis penyalahgunaan obat, TA Gough(Ed.), Wiley & Sons Ltd, hlm 284-296.Lee GS H, Craig DC, Kannangar GSK, Dawson, M., Conn C., J. Robertson,Wilson M. A. (1999). Analisis 3,4-metilendioksi-N-methylamphetamine (MDMA) di"Ekstasi" tablet dengan 13C solid state resonansi magnetik nuklir (NMR) spektroskopi,J. Forensik Sci., Vol. 44 (4), hlm 761-771.Chew, S. L., dan Meyers, J. A. (2003). Identifikasi dan kuantisasi gamma-hidroksibutirat(NaGHB) dengan spektroskopi resonansi magnetik nuklir, J. Forensik Sci., Vol. 48(2), p. 292.Rothchild, R. (2003). Identifikasi heroin pengencer: proton satu dan dua dimensi danstudi karbon-13 NMR prokain hidroklorida: studi komputasi prokain danasamnya konjugasi, Spektroskopi Letters, vol. 36 (1 & 2), hlm 35-42.B. Kapiler ELEKTROFORESIS (CE)CE, mirip dengan HPLC, tidak memerlukan derivatisasi atau ekstraksi langkah-langkah, dan karena itumenguntungkan atas GC untuk analisis senyawa ATS. Berbeda dengan HPLC,CE menawarkan kekuatan menyelesaikan lebih tinggi untuk analisis zat terlarut tersebut, yang diterjemahkanke dalam analisis yang lebih cepat. Penggunaan kapiler dilapisi secara dinamis memberikanpeningkatan yang signifikan dalam presisi, efisiensi puncak dan / atau waktu pemisahan untuk

ATS senyawa lebih dari metode sebanding menggunakan kapiler uncoated. Tambahanpendekatan kapiler dilapisi secara dinamis dapat memungkinkan untuk analisis kiral cepatTeknik analisis tambahan untuk analisis ATS 53sampel menggunakan kapiler yang sama dan sampel botol tapi lari penyangga yang berbeda.Lihat lampiran VI untuk metode CE divalidasi untuk kuantisasi dipilih ATS dan untukmetodologi untuk membedakan isomer optik.Bacaan lebih lanjutLurie, IS, Hays, PA dan Parker, KP (2004). Kapiler Electrophoreis Analisa terhadapLuas Ragam Obat sitaan Menggunakan kapiler Sama dengan Dynamic Coatings,Elektroforesis., Vol. 25, hlm 1580-1591.Lurie, IS, Bethea, M. J., McKibben, TD, Hays, PA, Pellegrini, P., Sahai, R.,Garcia, A. G. dan Weinberger R. (2001). Penggunaan Kapiler dinamis Coated untukAnalisis Rutin Methamphetamine, Amphetamine, MDA, MDMA, MDEA dan Kokainmenggunakan kapiler Elektroforesis, J. Forensik Sci., vol. 46, hlm 1025-1032.Piette, V. dan Parmentier, F. (2002). Analisis Gelap Amphetamine Kejang oleh kapilerZona Electrophoreis, J. Chromatogr. A., vol. 979, hlm 345-352.C. SOLID PHASE-MICRO EKSTRAKSI-GAS KROMATOGRAFI(SPME-GC)SPME (ekstraksi fase padat mikro) adalah teknik persiapan sampel bebas pelarut,yang dapat digunakan untuk analisis headspace atas solusi, atau langsung di atasATS bubuk, atau dapat digunakan untuk (trace) analisis larutan air yang mengandungATS. SPME biasanya dilakukan dengan jarum suntik khusus dilengkapi dengan silikaserat ditempatkan di atas piston jarum suntik. Serat dilapisi dengan polimer yangfase seperti yang digunakan dalam kolom kapiler. Selama pengambilan sampel, serat lapisanmenyerap senyawa dari fase gas di headspace, atau langsung darifase cair. Banyak lapisan serat yang berbeda yang tersedia untuk analisis ATSdan zat lainnya. Salah satu yang paling digunakan, misalnya, sebuah polydimethylsiloxane(PDMS) serat dilapisi.Metode headspaceSebuah sampel ATS berair dibuat basa untuk mengubah amina ke dalam basis bebas,sehingga meningkatkan volatilitas mereka. Sampel dapat tambahan dipanaskan untukmeningkatkan jumlah amina dalam fase gas di atas larutan sampel. Itujarum suntik dengan serat terkena ditempatkan di ruang atas di atas solusi dandasar gratis ATS diserap pada bahan tersebut. Pada kesetimbangan, yang diekstraksijumlah setiap senyawa diserap pada bahan tersebut sebanding dengan konsentrasi merekadalam larutan, meskipun dengan koefisien distribusi yang berbeda. Setelah ekstraksiselesai, jarum suntik tersebut dipindahkan ke instrumen analitis yang dipilih.54 Metode untuk identifikasi dan analisis amfetamin, metamfetaminKetika serat dimasukkan ke dalam dipanaskan pelabuhan GC injector, amina diekstraktermal desorbed. Dalam HPLC, KTK dan CE, campuran pelarut yang terelusiamina membentuk serat.(Jejak) analisis dari sampel airSerat dicelupkan langsung ke dalam larutan sampel air, yang dibuat

basa untuk melepaskan dasar gratis ATS. Sampel larutan diaduk untukmeningkatkan pertukaran senyawa antara solusi dan serat untukekstraksi cepat. Analisis sampel dilakukan dengan cara yang sama seperti yang dijelaskandalam metode headspace.Bacaan lebih lanjutBattu, C., Marquet, P., Fauconnet, AL, Lacassie, E. dan Lachâtre, G. (1998). PenyaringanProsedur untuk 21 senyawa-amphetamine yang terkait dalam urin menggunakan fase padat microextractiondan gas kromatografi-spektrometri massa, J. Chromatogr. Sci., Vol. 36, hlm 1-7.Centini, F., Masti, A. dan Barni Comparini, I. (1996). Analisis kuantitatif dan kualitatifMDMA, MDEA, MA dan amfetamin dalam urin oleh fase head-space/solid microextraction(SPME) dan GC-MS, Forensic Science International, vol. 83, hlm 161-166.Pawliszyn, J., Solid Phase microextraction, Wiley-VCH, New York, 1997.Yashiki, M., Kojima, T., Miyazaki, T., Nagasawa, N., Iwasaki, Y. dan Hara, K. (1995).Deteksi amfetamin dalam urin menggunakan kepala ruang-fase padat microextraction danionisasi kimia yang dipilih pemantauan ion, Forensic Science International, vol. 76,hlm 169-177.Zhang, Z., Yang, M. J. dan Pawliszyn, J. (1994). Solid-Phase microextraction, AnalyticalChemistry, vol. 66, No 17, hlm 844A-855A.D. GAS KROMATOGRAFI-FOURIER TRANSFORMSPEKTROSKOPI INFRAMERAH (GC-FTIR)GC-FTIR, sebagai teknik ditulis dgn tanda penghubung lain, menyatukan keuntungan dari GCteknik pemisahan dengan kekhususan analit tinggi IR. GC-FTIR dengan cahayasel aliran pipa tidak memiliki keterbatasan untuk aliran gas pembawa, yang membuatnya idealuntuk digunakan dengan kolom bore lebar pendek, sehingga mengakibatkan analisis efisien dan cepat.Misalnya, ATS yang paling umum dapat dianalisis dalam waktu kurang dari lima menit.Namun, karena teknik ini agak sensitif, sejumlah besar zatharus disuntikkan, dan ketebalan film fase diam sangat penting dalamAgar tidak membebani kolom.Teknik analisis tambahan untuk analisis ATS 55MetodeATS persiapan sampelPersiapan sampel adalah sama seperti untuk analisis GC kualitatif di atas, tetapi targetkonsentrasi analit harus 1-10 mg / ml.Kondisi operasi GCKondisi GC Umum ditunjukkan di atas (misalnya, GC-FID atau metode GC-MS) dapatdigunakan, dengan modifikasi berikut:GC kolom: kolom bore lebar 0,32-0,53 mm IDPanjang kolom: 3-10 mKetebalan Film: _ 1,0 _mSuhu transfer line: 300 ° CResolusi spektral: 8 cm-1Hasil

Identifikasi dilakukan dengan membandingkan waktu retensi dan spektrum FTIRanalit dengan standar referensi.Bacaan lebih lanjutBergkvist, H., Eyem. J. dan Lundberg, L. in: Sandra, P. (Ed), Proceedings of the ThirteenthSimposium Internasional kapiler Kromatografi, Riva del Garda, 13-16 Mei 1991,Huertig, Heidelberg, hlm 1160-1170.Duncan, W. dan Soine, WH, Identifikasi Amphetamine Isomer oleh GC / IR / MS, J.Chromatogr. Sci., Vol. 26, 1988, hlm 521-526.Griffiths, PR dan de Haseth, JA, Fourier Transform Infrared Spectrometry, John Wiley& Sons, New York, 1986.

57Lampiran I. struktur kimia yang dipilih ATSTabel A1. Amfetamin Non-cincin tersubstitusiCatatan: Kecuali ditunjukkan secara khusus, nama tidak mengacu pada enansiomer individualNama umum Nama IUPAC R1 R2 R3 R4Amphetamine 1-metil-2-Phenylethylamine H H CH3 HMetamfetamin N-metil-N-(1-metil-2-phenylethyl) amine CH3 H CH3 HN-Ethylamphetamine N-etil-N-(1-metil-2-phenylethyl) amine C2H5 H CH3 HDimethylamphetamine N, N-dimetil-N-(1-metil-2-phenylethyl) amine CH3 CH3 CH3 HN-Hydroxyamphetamine N-(1-metil-2-phenylethyl)hidroksilamin H OH CH3 HN-Hydroxymethamphetamine N-metil-N-(1-metil-2-phenylethyl)hidroksilamin CH3 OH CH3 HKatin (1S, 2S)-2-amino-1-phenylpropan-1-ol H H CH3 OHCathinone 2-amino-1-phenylpropan-1-one H H CH3 = OMethcathinone 2 - (methylamino)-1-phenylpropan-1-one CH3 H CH3 = OFenetilin 1,3-dimetil-7-{2 -[(1-metil-2-phenylethyl) amino]etil} -3,7-dihidro-1H-purin-2,6-dion H theo-CH3 HphyllinePhenylpropylmethylamine N-metil-N-(2-fenilpropil) amine CH3 H CH3 CH3(PPMA)R3NR2R1R458 Metode untuk identifikasi dan analisis amfetamin, metamfetamin

Tabel A2. Metilendioksi diganti amfetaminCatatan: Kecuali ditunjukkan secara khusus, nama tidak mengacu pada enansiomer individualNama umum Nama IUPAC R1 R2 R3 R43,4-methylenedioxyamphetamine1 - (1,3-benzodioxol-5-il)(MDA, tenamfetamine) propan-2-amina H H CH3 H3,4-metilendioksi-N-[2 - (1,3-benzodioxol-5-il) -methamphetamine (MDMA) 1-metiletil]-N-CH3 H CH3 methylamine H3,4-methylenedioxyethylamphetamineN-[2 - (1,3-benzodioxol-5-il) -1 -(MDE, MDEA) metiletil]-N-etilamin C2H5 H CH3 H3,4-metilendioksi-N, NdimethylamphetamineN-[2 - (1,3-benzodioxol-5-il) -1 -(MDDM) metiletil]-N, N-CH3 CH3 CH3 dimetilamin HN-hydroxy-3 ,4-methylenedioxyamphetamine(N-hidroksi-MDA, N-[2 - (1,3-benzodioxol-5-il) -1 -N-hydroxytenamfetamine) metiletil] hidroksilamin H OH CH3 HN-hidroksi-N-methyl-3, 4 - N-[2 - (1,3-benzodioxol-5-il) -1 -methylenedioxyamphetamine metiletil]-N-(N-hidroksi-MDMA, KUTU) methylhydroxylamine CH3 OH CH3 HN-metil-1-(3,4-methylenedioxyphenyl) - N-[1 - (1,3-benzodioxol-5-ylmethyl)2-butanamine (MBDB) propil]-N-CH3 methylamine H C2H5 H1 - (3,4-methylenedioxyphenyl) - 1 - (1,3-benzodioxol-5-il)2-butanamine (BDB) butan-2-amina H H C2H5 H5-metoksi-3, 4 -methylenedioxyamphetamine 1 - (7-metoksi-1 ,3-benzodioxol-5-il)(MMDA) propan-2-amina H H CH3 OCH3NR3R2R1R6OOLampiran I. Struktur Kimia dipilih ATS 59Tabel A3. Cincin lainnya diganti amfetaminCatatan: Kecuali ditunjukkan secara khusus, nama tidak mengacu pada enansiomer individualNama umum Nama IUPAC R1 R3 R5 R6 R7 R82,4,5-Cincin diganti phenethylamines4-Bromo-2 ,5-dimetoksi-2 - (4-bromo-2 ,5-dimethoxyphenetylamine(2C-B, Nexus) fenil) ethanamine HH OCH3 H Br OCH34-methylthio-2 ,5-dimetoksi-2 - [2,5-dimetoksi-4-(methylphenethylamine(2C-T) thio) fenil] ethanamine HH OCH3 H SCH3 OCH34-Ethylthio-2 ,5-dimetoksi-2 - [4 - (ethylthio) -2,5-diphenethylamine(2C-T-2) methoxyphenyl] ethanamine H H OCH3 H SC2

H5 OCH34-Propylthio-2 ,5-dimetoksi-2 - [2,5-dimetoksi-4-(propylphenethylamine(2C-T-7) thio) fenil] ethanamine H H OCH3 H SC3H7 OCH34-Chloro-2 ,5-dimetoksi-2 - (4-kloro-2 ,5-dimethoxyphenethylamine(2C-C) fenil) ethanamine H H H Cl OCH3 OCH34-Iodo-2 ,5-dimetoksi-2 - (4-iodo-2 ,5-dimethoxyphenethylamine(2C-I) fenil) ethanamine H H OCH3 H I OCH32,4,5-Cincin diganti amfetamin2,4,5-Trimethoxyamphetamine 1 - (2,4,5-trimethoxyphenyl)(TMA-2) propan-2-amina H CH3 OCH3 H OCH3 OCH34-Methyl-2 ,5-dimetoksi-1 - (2,5-dimetoksi-4-amfetamin (DOM, STP) metilfenil) propan-2-amina H CH3 OCH3 H CH3 OCH34-Bromo-2 ,5-dimetoksi-1 - (4-bromo-2 ,5-dimethoxyamphetaminefenil) propan-2-amina(DOB, Bromo-STP, BDMA) H CH3 OCH3 H Br OCH34-Chloro-2 ,5-dimetoksi-1 - (4-kloro-2 ,5-dimethoxyamphetamine(DOC) fenil) propan-2-amina H CH3 OCH3 H Cl OCH34-Iodo-2 ,5-dimetoksi-1 - (4-iodo-2 ,5-dimethoxyamphetamine(DOI) fenil) propan-2-amina H CH3 OCH3 H I OCH34-Ethyl-2 ,5-dimetoksi-1 - (4-etil-2 ,5-dimethoxyamphetamine(DOET) fenil) propan-2-amina H CH3 OCH3 H C2H5 OCH3Pola substitusi cincin lainnya (phenethylamines dan amfetamin)3,4,5-Trimethoxyphenethyl-2 - (3,4,5-trimethoxyphenyl)amina (mescaline) ethanamine H H H OCH3 OCH3 OCH3para-Methoxyamphetamine 3 - (4-metoksifenil) -(PMA) 1-methylpropylamine H CH3 H H OCH3 Hpara-metoksi-N-[2 - (4-metoksifenil) -1 -methamphetamine (PMMA) metiletil]-N-CH3 CH3 methylamine HH OCH3 H2,5-Dimethoxyamphetamine 1 - (2,5-dimethoxyphenyl)(DMA) propan-2-amina H CH3 OCH3 H H OCH33,4,5-Trimethoxyamphetamine 1 - (3,4,5-trimethoxyphenyl)(TMA) propan-2-amina H CH3 H OCH3 OCH3 OCH34-Methylthioamphetamine 1 - [4 - (methylthio) fenil](4-MTA) propan-2-amina H CH3 H H H SCH3R3NHR1R6R5 R7R8

61Lampiran II. Persiapan warna danreagen uji anionSemua reagen harus disiapkan sesuai dengan prosedur yang ditetapkan.

Tes ChenReagen 1: Tambahkan 1 ml asam asetat glasial sampai 100 ml air (= 1% (v / v) airlarutan asam asetat)Reagen 2: Larutkan 1 g tembaga (II) sulfat dalam 100 ml air (= 1% (b / v)larutan CuSO4)Reagen 3: Larutkan 8 g natrium hidroksida dalam 100 ml air (= 2N berairlarutan natrium hidroksida).Tes asam galatReagen: Larutkan 0,1 g asam gallic dalam 20 ml asam sulfat pekat(= 0,5% (b /) solusi v)Uji MarquisReagen 1: Tambahkan 8-10 tetes (sekitar 0,25 ml) larutan formaldehida 37% sampai 10ml asam asetat glasialReagen 2: Asam sulfat pekatUji FosfatAmonium molibdat: Larutkan 10 g amonium molibdat [(NH4) 6Mo7O24 x4H2O] dalam 100 ml air (= 10% (b / v) amonium berairsolusi molybdate)Asam nitrat: Hati-hati tambahkan 10 ml asam nitrat 90 ml air (= 10% (v / v) nitratlarutan asam)Uji Perak nitrat (juga dikenal sebagai tes Chloride)Larutkan 1,7 g perak nitrat dalam 100ml air (= 1,7% berair perak nitratsolusi).Tes SimonReagen 1: Larutkan 2 g natrium karbonat dalam 100 ml air (= 2% berairlarutan natrium karbonat)Reagen 2: Larutkan 0,9 g natrium nitroprusside dalam 90 ml air (= 1% aqueouslarutan natrium nitroprusside)Reagen 3: Campurkan 10 ml larutan asetaldehida dan 10 ml etanol (= 50% (v / v)solusi asetaldehida etanol)62 Metode untuk identifikasi dan analisis amfetamin, metamfetaminUji sulfatLarutkan 5 g barium chloride dihydrate dalam 100 ml air (= approx. 5% berairbarium klorida).Ada prosedur yang ditetapkan lain untuk persiapan reagen uji warna, untukMisalnya, Clarke, yang menunjukkan sedikit variasi dalam resep.63Lampiran III. Tes MicrocrystalDiklasifikasikan mikrokristal khasBentuk khas dari mikrokristal dapat diklasifikasikan ke dalam sembilan kelompok, menggunakan istilah deskriptifdi bawah ini. Dalam rangka untuk memungkinkan keterangan tentang semua jenis mikrokristal, kata sifat sepertitidak teratur, halus, atau persegi dipotong harus ditambahkan dengan persyaratan dasar.ReagenPengujian reagen-5% HAuCl4 di H3PO4

Larutkan 1 g asam komersial triklorida emas (HAuCl4 x 4H2O) dalam 20 ml larutanmengandung satu volume H3PO4 pekat dan dua volume air.Sumber: Ono, M., Microcrystal Test, Jepang 199664 Metode untuk identifikasi dan analisis amfetamin, metamfetaminPengujian reagen-H3BiI6 di H2SO4Larutkan 1,25 g kalium iodida dalam 2,0 ml air. Tambahkan 2,5 ml larutan H2SO4diencerkan 1:07 dengan air, 0,5 ml terkonsentrasi Bi (NO3) 3 solusi dan 0,1 g natriumhypophosphite. Bi pekat (NO3) 3 larutan stok dibuat dengan melarutkan 50 gsubnitrate bismut dalam 70 ml larutan HNO3 (diencerkan 1:1 dengan air) dan membuathingga 100 ml dengan air. Pengujian reagen dapat disimpan selama beberapa bulan.Volatilising reagenSiapkan larutan NaOH 5%.65Lampiran IV. Metode GC divalidasi untukkuantisasi yang dipilih ATSContoh metode GC divalidasi untuk analisis kuantitatif dipilih ATS disediakandi bawah ini. Metode B tidak memerlukan derivatisasi, sedangkan metode C membutuhkan sililasi.Standar ATS dijelaskan dan solusi sampel dan konsentrasi mereka dirancanguntuk digunakan dengan kolom kapiler dan prosedur yang diuraikan di bawah ini. Penggunaan alternatifkolom dan sistem GC mungkin memerlukan perubahan baik dari segi komposisi relatifdan konsentrasi masing-masing komponen.Peralatan dan reagen_ Kelas B volumetrik gelas atau lebih baik._ Gas Chromatograph dilengkapi dengan detektor ionisasi nyala_ Keseimbangan Analytical mampu menimbang dengan akurasi ± 0,0001 g._ Semua reagen harus dari kelas reagen analitis.Metode B: metode kalibrasi Multiple-titik tanpa derivatisasiMetode B adalah metode divalidasi untuk analisis GC kuantitatif underivatized ATS,khususnya berikut: amfetamin, metamfetamin, MDA, MDMA, MDEA danMBDB.Pembuatan larutan baku internal (IS): Phenylbenzylamine (PBA)Timbang dengan akurat 0,3-0,4 g PBA ke dalam labu volumetrik 500 ml dan encerkan sampaiVolume dengan kloroform untuk memberikan larutan standar internal 0,6-0,8 mg / ml.Pembuatan larutan standar ATS (solusi kalibrasi GC)Larutan stok standar harus mengandung semua senyawa kepentingan dalam konsentrasisekitar 1000 mg / l. Mereka dapat disimpan dalam botol tertutup di lemari es sampaisatu tahun. Untuk persiapan larutan stok:(A) akurat beratnya sekitar 1000 mg dari senyawa (s) dari bunga menjadi1000 ml volumetrik labu dan membuat ke tanda dengan air.(B) akurat pipet 5 ml larutan ini ke dalam 20 ml gelas tutup tabung. Basifyuntuk lakmus dengan menambahkan beberapa tetes larutan amonia pekat. Akurat menambahkan5 ml kloroform.

(C) Stopper dan kocok dengan baik, kemudian diamkan sampai lapisan terpisah. Dengan menggunakan pipet tetes,mentransfer sekitar 1 ml lapisan kloroform melalui natrium sulfat anhidrat66 Metode untuk identifikasi dan analisis amfetamin, metamfetaminke dalam gelas kecil. Larutan standar ini tidak boleh dibiarkan lebih dari setengahsatu jam sebelum digunakan untuk kalibrasi.(D) Untuk penyusunan standar kalibrasi untuk 5-titik kalibrasi, mempersiapkantingkat yang berbeda sebagai berikut:Penyusunan standar kalibrasi 5-pointKalibrasi ATS standar IS solusi Approx. konsentrasisolusi tingkat (_L) (_L) CHCl3 (_L) dari ATS-garam (mg / l)Level 1 20 100 880 20Level 2 40 100 860 40Level 3 60 100 840 60Level 4 80 100 820 80Tingkat 5 100 100 800 100Pembuatan larutan sampel ATS (tidak diketahui sampel ATS)Secara umum, tetapi khusus untuk analisis kuantitatif, menghomogenkan sampel sebelum memulaites atau sub-sampling.(A) Timbang dengan akurat jumlah sampel yang cukup ke dalam labu 25 ml volumetrik untuk mendapatkankonsentrasi akhir sekitar 0,2-1 mg / ml analit. Membuat untuk menandai denganair. (Catatan: Jumlah sampel untuk ditimbang akan tergantung pada diantisipasikemurnian seperti yang ditunjukkan oleh metode skrining awal. Sebagai contoh, jikakemurnian diantisipasi adalah sekitar 40%, jumlah sampel yang digunakan harus approx. 60 mg.)(B) akurat pipet 5 ml larutan ini ke dalam 20 ml gelas tutup tabung. Basifyuntuk lakmus dengan menambahkan beberapa tetes larutan amonia pekat. Akurat menambahkan5 ml kloroform.(C) Stopper dan kocok dengan baik, kemudian diamkan sampai lapisan terpisah. Dengan menggunakan pipet tetes,mentransfer sekitar 1 ml larutan sampel ini melalui anhidrat natriumsulfat ke dalam gelas kecil. Ukur 100 _L larutan sampel, 100 _L internallarutan standar dan 800 _L kloroform ke dalam sampel GC vial.(D) Inject ke dalam kromatografi gas.Kondisi operasi GCUntuk analisis kuantitatif, GC dilengkapi dengan autosampler adalah lebih baik. Sekarangmengakui bahwa penggunaan instrumen yang berbeda mungkin memerlukan penyesuaian dalam operasikondisi.Kolom: HP-5, 0,32 mm x 30 m x 0,5 _mGas pembawa: Helium di sekitar. 1,2 ml / menit (tekanan kepala 12 psi)Suhu oven: 100 ° C selama 4 menit, kemudian 10 ° C / menit sampai 270 ° C, dan tahan selama

1 menitVolume Injeksi: 1 _LSuhu injektor: 190 ° CDetector: Api detektor ionisasi pada 270 ° CLampiran IV. Metode GC divalidasi untuk kuantisasi dipilih ATS 67Waktu retensi perkiraanAmphetamine 7.18 min.Methamphetamine 8.25 min.MDA 13.16 min.MDMA 13.93 min.MDEA 14.58 min.MBDB 15.17 min.Phenylbenzylamine (IS) 16.33 min.Kafein 17.92 min.Ketamine 18.33 min.PerhitunganUntuk analisis rutin, perangkat lunak komputer akan melakukan perhitungan setelah selesaidari jangka analitis. Hasilnya akan otomatis dicetak pada laporan dan dinyatakan sebagai% B / b dari suatu analit sebagai dasar (yaitu, berat analit, relatif terhadap sampel berat).Metode C: Metode Kalibrasi menggunakan BSTFA sebagai reagen derivatisasi(Satu atau beberapa titik kalibrasi)Metode C adalah metode divalidasi untuk analisis GC kuantitatif diderivatisasi ATS, khususnyaberikut: efedrin, pseudoefedrin, BDMA (4-bromo-2 ,5-dimethoxyamphetamine)dan 2C-BPenggunaan metode C secara khusus direkomendasikan untuk ATS sampel yang mengandung efedrindan / atau pseudoefedrin, yang sering tidak diselesaikan dari analit lain dan menghasilkanpuncak luas. Untuk rincian lebih lanjut tentang derivatisasi lihat lampiran VII.Pembuatan larutan baku internal (IS): Phenylbenzylamine (PBA)Sama seperti untuk metode B, di atas.Pembuatan larutan standar ATS (solusi kalibrasi GC)Untuk titik kalibrasi beberapa menggunakan BSTFA, mempersiapkan berbagai tingkat analog denganMetode B, di atas, sebagai berikut: mengambil 20, 40, 60, 80 dan 100 _L dari ATS larutan stok standar,untuk setiap tingkat kalibrasi, tambahkan 100 _L larutan baku internal, dan 50 _L dariBSTFA. Tambahkan kloroform untuk membuat sampai 1ml.Pembuatan larutan sampel (sample diketahui ATS)(A) Timbang dengan akurat sampel ke dalam labu 25 ml volumetrik untuk mendapatkan konsentrasi akhirsekitar 0,2-1 mg / ml analit. Buat tanda dengan air. (Catatan:Jumlah sampel yang akan ditimbang akan tergantung pada kemurnian diantisipasi seperti yang ditunjukkan)dengan metode skrining awal. Sebagai contoh, jika kemurnian diantisipasi adalah tentang40%, jumlah sampel yang digunakan harus approx. 60 mg.)

(B) akurat pipet 5 ml larutan ini ke dalam 20 ml gelas tutup tabung. Basifyuntuk lakmus dengan menambahkan beberapa tetes larutan amonia pekat. Akurat menambahkan5 ml kloroform.68 Metode untuk identifikasi dan analisis amfetamin, metamfetamin(C) Stopper dan kocok dengan baik, kemudian diamkan sampai lapisan terpisah. Dengan menggunakan pipet tetes,mentransfer sekitar 1 ml larutan sampel ini melalui natrium sulfat anhidratke dalam gelas kecil. Ukur 100 _L larutan sampel, 100 _L internallarutan standar, 750 _L kloroform dan 50 _L dari BSTFA menjadi sampel GC botol.(D) Inject ke dalam kromatografi gas.Kondisi operasi GCKolom: HP-5, 0,32 mm x 30m x 0,5 _mGas pembawa: Helium di sekitar. 1,2 ml / menit (tekanan kepala 12 psi)Suhu oven:. 100 ° C selama 4 menit, kemudian 5 ° C / menit sampai 200 ° C, kemudian 10 ° C / menit untuk270 ° C, dan tahan selama 1 menitVolume Injeksi: 1 _LSuhu injektor: 190 ° CDetector (FID): 270 ° CWaktu retensi perkiraanPseudoefedrin-TMS 14.99 min.Ephedrine-TMS 15.16 min.Phenylbenzylamine-TMS (lS) 23.49 min.Kafein 26.22 min.Ketamine-TMS 26,75 min.2C-B-TMS 27.91 min.PerhitunganUntuk analisis rutin, perangkat lunak komputer akan melakukan perhitungan setelah selesaidari jangka analitis. Hasilnya akan otomatis dicetak pada laporan dan dinyatakan sebagai% B / b dari suatu analit sebagai dasar (yaitu, berat analit, relatif terhadap sampel berat).69Lampiran V. metode HPLC untuk divalidasikuantisasi yang dipilih ATSDi bawah ini adalah metode divalidasi untuk kuantisasi HPLC yang dipilih zat terlarut ATS termasukamfetamin, metamfetamin, phentermine dan MDMA.Metode HPLC untuk kuantisasi ATSPersiapan standar ATS dan solusi sampelATS larutan standarTimbang jumlah yang tepat dari standar ATS (s) ke dalam labu volumetrik untuk mendapatkan akhirkonsentrasi sekitar 0,50 mg / ml. Encerkan dengan volume dengan metanol.ATS larutan sampelTimbang jumlah yang tepat dari sampel ke dalam labu volumetrik sehingga phenethlamine akhirKonsentrasi adalah sekitar bahwa larutan standar. Encerkan dengan volumemetanol.Kondisi operasi HPLCKolom: 5 _m Luna C18 (Phenomenex, Torrance, CA, USA) 150 x3,0 mmSuhu kolom: 35 ° C

Injeksi: 5 _LFase gerak: 10% asetonitril, 90% (50 mM fosfat + 50 mM trietanolamin,pH 2.2), laju alir 1,0 ml / menitPanjang gelombang UV: 210 nmpenyangga aThe dibuat dengan melarutkan 22,5 ml asam fosfat terkonsentrasi menjadi 4 liter HPLCair kelas. Sekitar 25 ml trietanolamin ditambahkan perlahan untuk menyesuaikan solusi untuk pH2.2.Kali migrasi relatif perkiraanNicotinimide 0,28Phenethylamine 0.55Fenilpropanolamin 0.56Doksilamin 0.56Prokain 0.62Ephedrine 0.64Pseudoefedrin 0.65Amphetamine 0.82Acetominiphen 0.9370 Metode untuk identifikasi dan analisis amfetamin, metamfetaminKali migrasi relatif perkiraan (lanjutan)Methamphetamine 1.00 (2,7 min)MDA 1.00Kina 1.04Chloroquine 1.09Dimethylamphetamine 1.12MDMA 1.18Kafein 1.48Lidocaine 1.50MDEA 1.55Ketamine 1.95Klorfeniramin 1.99P2P 3.17Safrol 3.50Quaifenesin 3.61Aspirin 5.09PerhitunganPersentase konten ATS sampel dihitung dari luas puncak ATS, dandaerah puncak dan konsentrasi standar ATS relevan.Bacaan lebih lanjutMalone, J.V. (1998). Campuran HPLC Kuantifikasi secara sembunyi-sembunyi Diproduksi dariAmphetamine dan Methamphetamine, mikrogram, vol. 31, hlm 304-30771Lampiran VI. Metode CE divalidasi untuk kuantisasiterpilih ATSDi bawah ini adalah metode divalidasi untuk kuantisasi CE yang dipilih zat terlarut ATS termasukamfetamin, metamfetamin, MDA, MDMA dan MDEA pada instrumen Agilent HP3D CE.Perhatikan bahwa kondisi seperti panjang kapiler, suhu kapiler, tegangan, siramkali dan tekanan dan parameter injeksi bisa berubah dengan instrumen lainprodusen.

Metode kapiler Dinamis dilapisi untuk kuantisasi ATSPersiapan standar ATS dan solusi sampelPelarut InjectionTimbang 1.034 mg natrium fosfat monobasa menjadi 100 ml labu ukur. Encerkan denganVolume air kelas HPLC (menyesuaikan pH sekitar 2,6 menggunakan asam fosfatdan menambahkan setetes demi setetes). Mentransfer isinya ke dalam labu 2000 ml volumetrik dengan bantuan HPLCair kelas. Encerkan dengan volume air HPLC grade. Solusi akhir ini mengandung 3,75 mMfosfat, pH 3,2. Atau, mentransfer seluruh isi (dengan bantuan air HPLC grade)botol ml 250 injeksi konsentrat pelarut (MicroSolv, Eatontown, NJ, USA) menjadi 5liter labu. Encerkan dengan volume air HPLC grade.ATS larutan standar internal yangTimbang jumlah yang tepat dari N-butylamphetamine HCl (atau internal yang sesuaistandar) ke dalam labu volumetrik untuk mendapatkan konsentrasi akhir sekitar 1,0 mg / ml.Encerkan dengan volume pelarut injeksi.ATS larutan standarTimbang jumlah yang tepat dari standar ATS (s) ke dalam labu volumetrik untuk mendapatkan akhirkonsentrasi sekitar 0,08 mg / ml. Pipet jumlah yang tepat dari standar internal yangsolusi untuk mendapatkan konsentrasi akhir 0,1 mg / ml. Encerkan dengan volume injeksipelarut.ATS larutan sampelTimbang jumlah yang tepat dari sampel ke dalam labu volumetrik sehingga phenethylamine akhirKonsentrasi adalah sekitar bahwa larutan standar. Pipet jumlah yang tepatlarutan standar internal untuk mendapatkan konsentrasi akhir 0,1 mg / ml. Encerkan denganVolume dengan pelarut injeksi.72 Metode untuk identifikasi dan analisis amfetamin, metamfetaminKondisi operasi CE (akiral)Kapiler: silika Bare 32 cm (23,5 cm untuk detektor window) sebesar 50 _m idSuhu kapiler: 15 ° CConditioning: 1 menit 0,1 N natrium hidroksida; Air 1 menit; 1 menitCElixir A (MicroSolv); 2 menit CElixir B, pH 2.5(MicroSolv).Injeksi: 50 milibar x 2 kedua sampel diikuti oleh 35 milibar x1 detik airJalankan penyangga: CElixir B, pH 2.5Voltage: 10 kVPanjang gelombang UV: 195 nmKali migrasi relatif perkiraanDoksilamin 0.76Klorfeniramin 0.78Kina 0.80Beta-phenethylamine 0.81Chloroquine 0.81Nicotinimide 0.84Amphetamine 0.87Metamfetamin 0.88Prokain 0.88MDA 0.90

Norpseudoephedrine 0.91MDMA 0.91Norephedrine 0.92Pseudoefedrin 0.92Tetracaine 0.93Ephedrine 0.93Fenilefrin 0.95MDEA 0.96Ketamine 0.96Phenyltoxylamine 0.97N-Butylamphetamine (IS) 1,00 (4,6 min)Methorphan 1.00Lidocaine 1.03Benzokain 1.25Acetominophen 2.11Kafein 2.14Quaifenesin 2.14P2P 2.24DMSO (penanda netral) 2.40Aspirin 2.71PerhitunganIsi (%) yang tidak diketahui ATS dihitung dari luas puncak nya, dan daerah puncakdan konsentrasi standar ATS, relatif luas puncak standar internal(Standar dan sampel).Lampiran VI. Metode CE divalidasi untuk kuantisasi dipilih ATS 73Kondisi operasi CE (kiral)Kapiler: silika Bare 32 cm (23,5 cm untuk detektor window) sebesar 50 _m idSuhu kapiler: 15 ° CConditioning: 1 menit 0,1 N natrium hidroksida; Air 1 menit; 1 menitCElixir A (MicroSolv); 2 menit CElixir B, pH 2.5 + 50 mM2-hidroksipropil-_-Cyclodextrin (MicroSolv).Injeksi: 50 milibar x 2 kedua sampel diikuti oleh 35 milibar x1 detik airVoltage: 20kVPanjang gelombang UV: 195 nm (bandwidth 10 nm)Kali migrasi relatif perkiraanl-Norpseudoephedrine 0.81d-Norephedrine 0.83l-Norephedrine 0.83l-Pseudoephedrine 0.83l-Amphetamine 0.85d-Ephedrine 0.86d-Amphetamine 0.86l-Ephedrine 0.87l-Metamfetamin 0.87d-Norpseudoepherine 0.88d-Metamfetamin 0.89d-Pseudoephedrine 0,90

N-Butylamphetaminea 1.00 (3.75 min)N-Butylamphetaminea 1.02MDAa 1.03MDAa 1.04MDMAa 1.05MDMAa 1.07MDEAa 1.10MDEAa 1.12iklan atau l-enansiomerBacaan lebih lanjutLurie, IS, Hays, PA dan Parker, KP (2004). Kapiler Elektroforesis Analisa terhadapLuas Ragam Obat sitaan Menggunakan kapiler Sama dengan Dynamic Coatings,Elektroforesis., Vol. 25, hlm 1580-1591.Lurie, IS, Bethea, MJ, McKibben, TD, Hays, PA, Pellegrini, P., Sahai, R., Garcia,A. G. dan Weinberger R. (2001). Penggunaan dinamis Kapiler Coated untuk Rutin yangAnalisis Methamphetamine, Amphetamine, MDA, MDMA, MDEA dan Kokain menggunakanKapiler Elektroforesis, J. Forensik Sci., Vol. 46, hlm 1025-1032.

75Lampiran VII. DerivatizationsDerivatisasi dari ATS tidak wajib, karena mayoritas ATS adalah setuju untuk GCanalisis dan termal stabil. Namun, derivatisasi dari ATS (primer atau sekunderamina) meningkatkan sifat kromatografi mereka dengan mengurangi yang tidak diinginkan dan tidak spesifikadsorpsi kolom serta gangguan matriks.Metode derivatisasi direkomendasikan di bawah ini bekerja berhasil untuk sebagian besarsering ditemui ATS, namun, dalam kesempatan langka, kondisi reaksi sepertiwaktu reaksi atau suhu harus disesuaikan.Catatan analitisJika derivatisasi dipilih sebagai metode persiapan sampel, ekstraksi sampelharus dilakukan seperti yang dijelaskan dalam bagian yang relevan di atas. Setelahekstraksi, pelarut harus diuapkan sampai kering di bawah aliran lembutnitrogen pada suhu kamar, atau alternatif pada 30 º C. Untuk menghindari hilangnya analitoleh penguapan, langkah ini harus dilakukan sangat hati-hati, terutama untuk kuantitatifATS analisis. Cara yang paling efisien untuk mencegah penguapan analitadalah untuk menguapkan pelarut sekitar 1 ml dan kemudian menambahkan beberapa tetes (50 _L)pelarut dengan titik didih tinggi (kiper pelarut), misalnya, dimetilformamida.Setelah penambahan penjaga pelarut, penguapan lebih lanjut harus melanjutkanhati-hati sampai hanya film tipis pelarut tetap. Sampel sekarang siap untukderivatisasi menggunakan salah satu metode yang dianjurkan.Prosedur derivatisasiAcetylationsAnhydride Heptafluorobutyric (HFBA)Prosedur A (asetilasi dengan anhidrida)Tambahkan 50 _L dari HFBA dengan residu kering diekstraksi ATS dalam reacti-botol. * Cap botol, kocokselama 30 detik dan menetaskan selama 20 menit pada 75 º C. Menguap kelebihan reagen. Menyusun kembali

residu kering dalam 50 _L etil asetat, dan menyuntikkan 1-2 _L ke dalam kolom GC.Prosedur B (asetilasi dengan anhidrida dalam adanya katalis dasar)Tambahkan 50 _L dari 0,5 M kalium hidroksida dengan residu kering diekstraksi ATS diikuti oleh500 _L toluena. Setelah pencampuran dan sentrifugasi, mentransfer lapisan organik menjadi bersih* Reacti-botol adalah botol sekrup-topi terbuat dari tebal, tahan suhu kaca, biasanya dengan sebuah conicallyberbentuk bagian bawah di dalam botol. Dengan tidak adanya botol khusus, derivatisasi dapat dilakukandalam Teflon berlapis tabung sekrup-topi.76 Metode untuk identifikasi dan analisis amfetamin, metamfetamintabung reaksi, dan menambahkan 50 _L dari HFBA. Aduk dan segera menambah 500 _L dari 10%w / v natrium bikarbonat dengan pencampuran kontinu. Centrifuge tabung reaksi sampai ataslapisan toluena dipisahkan. Inject 1-2 _L lapisan toluena ke dalam kolom GC.Anhydride Pentafluoroacetic (PFAA)Tambahkan 50 _L dari PFAA dengan residu kering diekstraksi ATS dalam reacti-botol. Cap botol, kocokselama 30 detik dan menetaskan selama 20 menit pada 75 º C. Menguap kelebihan reagen. Menyusun kembaliresidu kering dalam 50 _L etil asetat, dan menyuntikkan 1-2 _L ke dalam kolom GCTrifluoroacetic anhydride (TFAA)Tambahkan 100 _L etil asetat dan 50 _L dari TFAA dengan residu kering diekstraksi ATS dia reacti-botol. Cap botol, kocok selama 30 detik dan menetaskan selama 20 menit pada 60 º C. Menguapkelebihan reagen. Menyusun kembali residu kering dalam 50 _L etil asetat, dan menyuntikkan 1-2 _Lke dalam kolom GC.N-Methylbis-trifluoroacetamide (MBTFA)Tambahkan 500 _L MBTFA dengan residu kering diekstraksi ATS dalam reacti-botol. Cap botol, kocokselama 30 detik dan menetaskan selama 30 menit pada suhu kamar. Menguap kelebihan reagen.Menyusun kembali residu kering dalam 50 _L etil asetat, dan menyuntikkan 1-2 _L ke GCkolom.Sejak MBTFA elutes awal dalam analisis GC, penguapan kelebihan reagen mungkin tidakdiperlukan jika konsentrasi analit diantisipasi akan cukup besar untuk injeksi langsungdari campuran derivatizaion.Bacaan lebih lanjutM. Doneke, J. Chromatography, vol. 78, p. 273, (1973)SililasiN-Methyl-N-ters-butil-dimetilsilil trifluoroacetamide (MTBSTFA)Tambahkan 100 _L asetonitril dan 150 _L dari MTBSTFA dengan residu kering diekstraksi ATS.Tutup botol dan panas selama 15 menit pada 90 º C. Tinggalkan sampel pada suhu ambien untuklain 2 jam, atau lebih, terutama jika gugus amino sekunder terhalang harus silylized.Tambahkan 500 _L asetonitril, aduk, dan menyuntikkan 1-2 _L ke dalam kolom GC (jika analit rendahkonsentrasi diantisipasi, sampel dapat disuntikkan langsung tanpa pengencerandengan asetonitril).Atau, untuk menghindari puncak MTBSTFA awal kromatogram GC, menggabungkan keringresidu diekstraksi ATS dengan 100 _L asetonitril dan 100 _L MTBSTFA dalam 3 mlvial. Seal vial dan memungkinkan campuran untuk berdiri selama 2 jam. Tambahkan 100 _L air untuk menghidrolisis setiaptidak bereaksi MTBSTFA. Tambahkan 250 _L dari n-heksana, campuran dengan penuh semangat dan centrifuge. Menuangkan

lapisan heksana atas dan menyuntikkan 1-2 _L ke dalam kolom GC.Lampiran VII. Derivatizations 77Bacaan lebih lanjutR. Melgar, R. Kelly C., J. Anal. Toxicol., Vol. 17 (November / Desember, 1993), p. 399.N, O-bis-[(trimethylsilyl) trifluoroacetamide] (BSTFA)Tambahkan 50 _L dari BSTFA dan 100 _L asetonitril dengan residu kering diekstraksi ATS dia reacti-botol. Cap botol, kocok dan menetaskan selama 15 menit pada 70 ° C. Inject 1-2 _L ke GCkolom.Derivatisasi kiralATS substrat diastereoisomer dapat dibuat dengan menggunakan berbagai reagen yang berbeda sepertiacylchlorides, alkylsulphonates, isothiocyanates, chloroformates, tetapi dua tercantum di bawah inipaling populer.R (+) / S (-)-_-metoksi-_-(trifluoromethyl)-asam fenilasetat (Mosher acid), atauR (+) / S (-)-_-metoksi-_-(trifluoromethyl)-asam fenilasetat klorida (asam klorida Mosher)Larutkan sampel residu kering diekstraksi ATS dalam 1 ml THF dan campuran dengan 0,5 ml0,2 M larutan asam Mosher dalam THF dalam reacti-botol dengan tutup sekrup Teflon berlapis.Tambahkan 0,5 ml dari 10% b / v larutan natrium bikarbonat, tutup botol dan panas pada 65 ° Cselama 1 jam. Ekstrak fase air dengan kloroform, kering dengan magnesium sulfat, danmenguap sampai kering. Menyusun kembali residu dalam pelarut yang cocok untuk analisis GC(Misalnya, kloroform, lihat bagian analisis GC kualitatif, di atas).Alih-alih asam Mosher, para klorida yang sesuai dapat digunakan. Ini tersedia secara komersial,atau dapat dibuat dengan refluks asam dengan tionil klorida. Asam klorida adalahbiasanya lebih reaktif, meskipun asam Mosher itu sendiri menghasilkan derivatisasi kuantitatifsebagian besar amina, dengan pengecualian efedrin dan pseudoefedrin. Mosher yang asam atauturunannya dapat digunakan sebagai reagen untuk kedua GC dan analisis HPLC.N-trifluoroasetil-L-prolyl klorida (TPC, atau TFAP-Cl)Larutkan sampel residu kering diekstraksi ATS dalam 2 ml kloroform kering. Tambahkan 4 mlTPC reagen. Aduk atau kocok campuran, dan kemudian menambahkan 40 mg trietilamina kering.Terus aduk selama 15 menit. Cuci dengan 3 ml dari 6 N HCl dan kemudian dengan air. MenambahkanMgSO4 dan memungkinkan campuran untuk berdiri selama 15 menit. Inject 1-2 _L ke dalam kolom GC.TPC dikenal untuk menghasilkan turunan stabil hampir semua ATS termasuk Kelompok efedrin. Sekaranglebih setuju untuk analisis GC