TecnologTecnologíía a CoulterCoulter CVSCVS

FlowFlow CellCell La muestra una vez tratada es dirigida a una La muestra una vez tratada es dirigida a una

celda de flujo (celda de flujo (FlowFlow cellcell) en la cual por el ) en la cual por el disediseñño hidrodino hidrodináámico, los leucocitos se alinean mico, los leucocitos se alinean y pasan formados uno a uno y en donde se y pasan formados uno a uno y en donde se realizan las siguientes mediciones realizan las siguientes mediciones

VolumenVolumen Mediante impedancia de baja frecuencia Mediante impedancia de baja frecuencia

se determina el volumen de la cse determina el volumen de la céélulalula

ConductividadConductividad La conductividad de alta frecuencia de La conductividad de alta frecuencia de

Radiofrecuencia (RF) determina la Radiofrecuencia (RF) determina la conductividad interna de la cconductividad interna de la céélula lula

ScatterScatter La dispersiLa dispersióón (n (scatterscatter) de luz l) de luz lááser ser

indica la estructura y forma de la cindica la estructura y forma de la céélula lula

De esta manera son De esta manera son realizadas las 3 realizadas las 3 determinaciones de determinaciones de manera simultmanera simultááneanea

Las lecturas de estas Las lecturas de estas 3 se3 seññales anales anáálogas es logas es enviadas al analizador enviadas al analizador para su amplificacipara su amplificacióón y n y proceso, luego el proceso, luego el sistema genera 3 sistema genera 3 grgrááficosficos

DF1: Volumen vs. DF1: Volumen vs. ScatterScatter

DF2: Volumen vs. DF2: Volumen vs. Conductividad Conductividad

DF3: Volumen vs. DF3: Volumen vs. Conductividad Conductividad extrayendo las seextrayendo las seññales ales de de NeutrNeutróófilosfilos y y EosinEosinóófilosfilos

DF1: Volumen vs. DF1: Volumen vs. ScatterScatter

DFADFA

DF2DF2

El sistema caracteriza cada célula que pasa hasta completar un conteo de 8.132 células o partículas que sobrepasen un cierto volumen o bien hasta que transcurran 20 segundos, cualquiera de las 2 situaciones que ocurra primero.

Informe del Informe del coultercoulter maximmaxim

Informe del Informe del CellCell DynDyn 35003500

SysmexSysmex XSXS--10001000ii

SysmexSysmex XSXS--10001000iiCaracterCaracteríísticassticas PrincipalesPrincipales

21 Par21 Paráámetros, Diferencial metros, Diferencial LeucocitarioLeucocitario de 5 de 5 partespartes

Manejo de Datos sobre Windows XPManejo de Datos sobre Windows XP®® Professional Professional

Registro de 10.000 resultados de pacientes (numRegistro de 10.000 resultados de pacientes (numééricos y ricos y grgrááficos)ficos)

Control de Calidad Interno y ExternoControl de Calidad Interno y Externo

AnAnáálisis de WBC por lisis de WBC por CitometrCitometrííaa de Flujo Fluorescentede Flujo Fluorescente

Enfoque HidrodinEnfoque Hidrodináámico para recuento de RBC y PLTmico para recuento de RBC y PLT

AnAnáálisis de Hemoglobina libre de cianurolisis de Hemoglobina libre de cianuro

MMíínimo Volumen de aspiracinimo Volumen de aspiracióónn 20 20 ulul en tubos con EDTA * en tubos con EDTA *

MMíínimo volumen de muestra requeridonimo volumen de muestra requerido Volumen muertoVolumen muerto

•• Modo manual Modo manual –– 500 500 µµLL•• Modo Modo automuestreadorautomuestreador –– 1ml1ml•• Modo capilar Modo capilar –– 140140µµLL

Sysmex XSSysmex XS--10001000iiBeneficiosBeneficios para para elel Usuario Usuario

Con sCon sóólo un lo un ““clicclic”” pueden pueden verse los verse los resultados y resultados y validarvalidar

Validación de los resultados de las muestras

ParParáámetrosmetros WBC, RBC, WBC, RBC, HgbHgb, , HctHct, MCV, MCH, , MCV, MCH,

MCHC, PLTMCHC, PLT RDWRDW--CV, RDWCV, RDW--SD, HDWSD, HDW NeutNeut%, Lymph%, Mono%, %, Lymph%, Mono%, EoEo%, %, BasoBaso%, %,

NRBC%NRBC% MPVMPV ReticRetic%, %, ReticRetic#, IRF#, IRF IG%, IG# IG%, IG#

Linealidad extendidaLinealidad extendida

0 – 400 x 103/ µL

0 – 8,00 x 106/ µL

HGB

HCT

0 – 25,0 g/ dL

0 – 60%

0 – 5.000 x 106/ µL

TecnologTecnologíía para Gla para Glóóbulos rojos y Plaquetasbulos rojos y PlaquetasMMéétodotodo de de ElectroenfoqueElectroenfoque HidrodinHidrodináámicomico

Es el Es el standardstandard usadousado por por SysmexSysmexen en loslos instrumentosinstrumentos de la de la serieserieX X parapara la la determinacideterminacióónn de de conteosconteos precisosprecisos de de plaquetasplaquetasy y glglóóbulosbulos rojosrojos

LLas as ccéélulaslulas son son rodeadasrodeadas porpor unaunacapacapa de de flufluíídodo queque laslas guguííaa unaunaporpor unauna a a travtravééss del del centrocentro de de la la aperturaapertura

CadaCada ccéélulalula eses contadacontada y y medidamedidaindividualmenteindividualmente

Un Un segundosegundo flujoflujo de de flufluíídodo en la en la parteparte posterior de la posterior de la aperturaaperturaaseguraasegura queque laslas ccéélulaslulas no no recirculenrecirculen

TecnologTecnologíía para Hemoglobinaa para HemoglobinaReactivoReactivo librelibre de de cianurocianuro

GrupoGrupo hidrofhidrofíílicolico del SLS del SLS queque se se uneune a la a la molmolééculacula de la de la globulinaglobulina OcurreOcurre un un cambiocambio de de configuraciconfiguracióónn OxidaciOxidacióónn de Fe de Fe 2+2+ ----> Fe > Fe 3+3+

GruposGrupos HidrofHidrofíílicoslicos de SLS se de SLS se unenunen a Fe a Fe ----> SLS> SLS--HbHb

Fe 2+ Fe 3+Fe 3+

SLS

Sysmex XSSysmex XS--10001000iiTecnologTecnologííaa

El XS utiliza el mismo El XS utiliza el mismo mméétodo para la medicitodo para la medicióón n exacta de RBC/HTO que exacta de RBC/HTO que los otros analizadores los otros analizadores de la familia Xde la familia X

El hematocrito es El hematocrito es medido basado en el medido basado en el volumen de las cvolumen de las céélulas lulas rojas determinado por rojas determinado por deteccideteccióón de CDn de CD

Principios de mediciPrincipios de medicióónn

CitometrCitometrííaa de flujo de flujo usando un lusando un lááser ser semiconductor para semiconductor para medir:medir:

luz dispersa frontalluz dispersa frontal volumen celularvolumen celular

luz dispersa lateralluz dispersa lateral estructura interna de estructura interna de

la cla céélulalula fluorescencia lateralfluorescencia lateral

((TinciTincióón de ADN y n de ADN y ARNARN))

Side scater

Fluorescencia

Foward scater

Sysmex XSSysmex XS--10001000iiTecnologTecnologííaa CitometrCitometrííaa de Flujo Fluorescente de Flujo Fluorescente

Diferencial completa de los leucocitosDiferencial completa de los leucocitos

Por Citometría de Flujo se obtiene información acerca de la composición y madurez celular

Dispersión lateral

Información del contenido de RNA y DNA

Información de la estructura interna

Tamaño de la célula

Dispersión frontal

Fluorescencia

Láser

SysmexSysmex XSXS--10001000iiTecnologTecnologííaa

Sysmex XSSysmex XS--10001000iiBeneficiosBeneficios para para elel usuariousuario

OpciOpcióón de seleccin de seleccióón de ann de anáálisis para maximizar el flujo de anlisis para maximizar el flujo de anáálisis y los lisis y los costos operacionalescostos operacionales

Modo CBC

Análisis de luz desviada frontal

Modo CBC + DIFF

Análisis de luz desviada lateral y de la fluorescencia lateral

+ +

Desarrollo de nuevos Desarrollo de nuevos softwaressoftwares MastersMasters

La tecnología que se utiliza es muy potente y brinda más y más posibilidades de medición. Las aplicaciones se desarrollan para cuantificar lo que aparece en los gráficos a partir de utilizar fluorescencia.

X PRO Es el soft básico, sobre el que se montan las aplicaciones

Informe a medida del usuario

Rangos para Control de Calidad

Medidor para reactivos y seguimiento de trazabilidad

IG Master Para cuantificar gránulos inmaduros

RET Master Para cuantificar Hb en Reticulocitos

Cuantificación de Gránulos InmadurosInformación útil sobre el diferencial extendido de leucocitos

IG:promielocitosmielocitosmetamielocitos

promielo mielo metamieloBlastos bandas segmentos

maduración de neutrófilos

IG

CuantificaciCuantificacióón de Grn de Gráánulos nulos InmadurosInmadurosIG MasterIG Master

Canal del diferencialCanal del diferencial

IG % , #Normal

fluor

esce

ncia

Dispersión lateral

High angle detector(5o - 15o)

Low angle detector (2o-3o)

670nmLaserDiode

RBC RBC 분석분석

RBC RBC CytogramCytogram and Histogramsand Histograms

0 28 41 50 g/dLHgb Concentration (HC)

0 60 120 200 fLRBC Volume (V)

0 100 pgHgb Content (CH)

RB

C V

olum

e (fL

)

Hgb Concentration (g/dL)

Micro

Hypo Hyper

Macro

120fL

60fL

28g/dL 41g/dL

Medida de los Medida de los eritroblastoseritroblastos

Recuentos de ReticulocitosRecuentos de Reticulocitos

MMéétodo de Referencia: Azul de Metilenotodo de Referencia: Azul de MetilenoVariaciVariacióón entre observadoresn entre observadoresAltos coeficientes de variaciAltos coeficientes de variacióónnLaboriososLaboriosos

MMéétodos automatizadostodos automatizadosAzul de metilenoAzul de metilenoFluorescentes Fluorescentes

Canal Canal reticulocitos reticulocitos -- FluorescenteFluorescente

Fl alta

Fl baja

Fl muy alta

Tinción: Polimetino: ARNOxazina: ADN

RET

WBC

RBC

RETSEARCH II (Diluyente + Colorante)

Canal de los Canal de los reticulocitosreticulocitos

Utilidad Clínica - FIR.Confirmación de Anemia Aplástica.Permite la clasificación de anemias por su capacidad eritropoyética.Talasemia vs. deficiencia de Hierro.Anemia de los procesos crónicos.Hipoproducción vs. respuesta eritroide

temprana.Detección de implante correcto luego de transplante

Utilidad Clínica. Monitoreo de tratamientos inmunosupresores. Monitoreo terapéutico de:. tratamientos con Eritropoyetina. Corrección de anemias nutricionales. Tratamiento de Mielodisplasias. Definición de necesidad de transfusión en neonatos

Evolución post-tte

0

20

40

60

-10 -4 -2 2 5 8 15

días post-tte

GBReti (%)

IRF (%)HPC (%)

Nuevos parNuevos paráámetrosmetros

Recuento automatizado de Recuento automatizado de granulocitosgranulocitosinmaduros IGinmaduros IG

Recuento de plaquetas inmaduras IPFRecuento de plaquetas inmaduras IPF Contenido de Contenido de HbHb de los de los reticulocitosreticulocitos

Plaquetas ReticuladasPlaquetas Reticuladas

Son mas densas y Son mas densas y reactivas que las reactivas que las plqplqmadurasmaduras

El contenido de RNA El contenido de RNA estestáá relacionado con relacionado con la la megacariopoyesismegacariopoyesis

Reflejan la actividad Reflejan la actividad de la de la trombopoyesistrombopoyesis

DeterminacionDeterminacion de las plaquetas de las plaquetas inmadurasinmaduras

Contenido de Contenido de HbHb de los de los reticulocitosreticulocitosRetRet--HeHe

ReticulocitosReticulocitos con contenido con contenido de de HbHb <28pg :<28pg :HipocrHipocróómicosmicos

Son identificados con Son identificados con colorantes fluorescentes por colorantes fluorescentes por la posicila posicióón en el n en el dispersogramadispersograma de acuerdo con de acuerdo con la fluorescencia y la luz la fluorescencia y la luz dispersada frontalmentedispersada frontalmente

Contenido de Contenido de HbHb de los de los reticulocitosreticulocitosRetRet--HeHe

Contenido de Contenido de HbHb de los de los reticulocitosreticulocitosRetRet--He AplicaciHe Aplicacióón n clinicaclinica

Cantidad real de Fe para la Cantidad real de Fe para la sintesissintesis de de HbHb

DetecciDeteccióón precoz de la deficiencia de Fe n precoz de la deficiencia de Fe (cuando los marcadores (cuando los marcadores bioquimicosbioquimicos pueden pueden sufrir interferencia)sufrir interferencia)

Monitorea la terapia con Monitorea la terapia con EpoEpo en pacientes con en pacientes con anemias cranemias cróónicasnicas

XEXE--21002100

Sysmex XSSysmex XS--10001000iiBeneficiosBeneficios para para elel Usuario Usuario

20 archivos para 20 archivos para CBC + DIFFCBC + DIFF

1 archivo para 1 archivo para Control InternoControl Interno

Control de Control de CalidadCalidad