Técnicas de Investigación en Neurobiología

Juan Alberto Sigüenza

Escuela Politécnica Superior

Contenido

• Introducción general

• Técnicas morfológicas

• Técnicas neurofisológicas

• Técnicas psicofisiológica

Técnicas morfológicas

• Estructura

• Ultraestructura

• Conectividad

• Funcionalidad

Estructura

• Poder de resolución del microscopio.

• Tipos de microscopia:– Óptica– Contraste de fase y campo oscuro– Fluorescencia– Polarización e interferencia– Electrónica

Microscopia óptica

Contraste de fase

Potencia las diferencias de contraste entre las zonas que absorben laLuz y las que no la absorben.

Fluorescencia

Polarización e Interferencia

Electrónica

Técnicas de preparación

• Fijación– Química– Congelación

• Corte– micrótomo

• Tinción

Tinción de Nissl I

Tinción de Nissl II

Tinción de Golgi

Método de Golgi y los descubrimientos de Cajal

Microscopia electrónica I

Microscopia electrónica II

Ramificación dendríticaSegmento inicial de un axón

Densidadessinápticas

Estudio de la conectividad desde el punto de vista morfológico

• Fundamentos del transporte axonal.• Transporte anterógrado• Transporte retrógrado

Conectividad

Marcaje retrógrado

Marcaje anterógrado

Tinción intracelular

FuncionalidadInmunocitoquímica

Confocal projection of estrogen-induced Mu-opioid receptor internalization, in situ

Oligo-specific protein (OSP) and GFAP immunocytochemistry, in vitro

FuncionalidadDesoxiglucosa

Corteza Visual primaria humana

FuncionalidadTécnicas de imagen (RMN)

1. Se pide que recuerde una cara2. Se pide que piense en la cara3. Se pide que compare la cara

con otra cara4. Igual que en 3

FuncionalidadTécnicas de imagen (RMN)

FuncionalidadTécnicas de imagen (PET)

FuncionalidadCultivos y aislamientos neuronales

1. Células médula ósea en cultivo 2. Neuroblastos diferenciados apartir de 1

3. Células de glía a partir de 1 4. Células piramidales a partir de 1