STERILIZAREA STERILIZAREA SI SI

DEZINFECTIADEZINFECTIA

• Sterilizarea – distrugerea sau Sterilizarea – distrugerea sau indepartarea tuturor indepartarea tuturor microorganismelor, inclusiv a microorganismelor, inclusiv a sporilor.sporilor.

• Dezinfectia – distrugerea formelor Dezinfectia – distrugerea formelor vegetative ale microorganismelor, vegetative ale microorganismelor, dar nu in mod necesar si a sporilor.dar nu in mod necesar si a sporilor.

STERILIZAREASTERILIZAREA

• Agenti fizici:Agenti fizici:- CalduraCaldura

- FrigulFrigul

- UscareaUscarea

- RadiatiileRadiatiile

- UltrasuneteleUltrasunetele

- Presiunea mecanicaPresiunea mecanica

- Presiunea osmoticaPresiunea osmotica

DEZINFECTIA / ANTISEPSIADEZINFECTIA / ANTISEPSIA

• Agenti chimici:Agenti chimici:- Substante chimice elementareSubstante chimice elementare

- Compusi anorganiciCompusi anorganici

- Compusi organiciCompusi organici

STERILIZAREA PRIN STERILIZAREA PRIN CALDURACALDURA • Punctul termic mortalPunctul termic mortal – cea mai – cea mai

scazuta temperatura care distruge in scazuta temperatura care distruge in 10 10 minute toate bacteriile unei specii minute toate bacteriile unei specii in conditii standard (1 – 2 ml. in conditii standard (1 – 2 ml. suspensie bacteriana in concentratie suspensie bacteriana in concentratie de 50.000 UFC/ml., in tampon fosfat, de 50.000 UFC/ml., in tampon fosfat, pH = 7pH = 7

STERILIZAREA PRIN STERILIZAREA PRIN CALDURACALDURA

• Timpul termic mortalTimpul termic mortal – cel mai scurt – cel mai scurt interval de timp necesar pentru ca interval de timp necesar pentru ca toate bacteriile unei populatii toate bacteriile unei populatii microbiene sa fie distruse la o microbiene sa fie distruse la o temperatura datatemperatura data

STERILIZAREA PRIN STERILIZAREA PRIN CALDURACALDURA• Caldura umeda:Caldura umeda:

- AutoclavareaAutoclavarea

- FierbereaFierberea

- TindalizareaTindalizarea

- PasteurizareaPasteurizarea

• Caldura uscata:Caldura uscata:- Cuptoare speciale cu aer cald (pupinele sau etuve)Cuptoare speciale cu aer cald (pupinele sau etuve)

- Aducerea la incandescentaAducerea la incandescenta

- FlambareaFlambarea

- IncinerareaIncinerarea

STERILIZAREA PRIN CALDURA UMEDASTERILIZAREA PRIN CALDURA UMEDAAUTOCLAVAREAAUTOCLAVAREA

• Caldura umeda distruge bacteriile mai Caldura umeda distruge bacteriile mai repede decat caldura uscata la repede decat caldura uscata la aceeasi temperatura deoarece este aceeasi temperatura deoarece este mai penetranta.mai penetranta.

• Sterilizarea prin caldura umeda Sterilizarea prin caldura umeda utilizeaza vaporii de apa sub presiune utilizeaza vaporii de apa sub presiune in autoclav.in autoclav.

• 121 121 °C – 15 min.°C – 15 min.• 134 °C – 3 min.134 °C – 3 min.

STERILIZAREA PRIN CALDURA STERILIZAREA PRIN CALDURA UMEDAUMEDAAUTOCLAVAREAAUTOCLAVAREA• Bacteriile in forma vegetativa sunt Bacteriile in forma vegetativa sunt

distruse la temperaturi cu 10 – 15 distruse la temperaturi cu 10 – 15 °C °C mai mari decat temperatura lor maxima mai mari decat temperatura lor maxima de dezvoltare.de dezvoltare.

• Majoritatea bacteriilor in forma vegetativa Majoritatea bacteriilor in forma vegetativa mor in timp de 10 minute la 50 – 60 °C.mor in timp de 10 minute la 50 – 60 °C.

STERILIZAREA PRIN CALDURA STERILIZAREA PRIN CALDURA UMEDAUMEDAAUTOCLAVAREAAUTOCLAVAREA• Majoritatea sporilor bacterieni sunt distrusi Majoritatea sporilor bacterieni sunt distrusi

in 10 minute la 100 in 10 minute la 100 °C.°C.• Sporii de Sporii de Clostridium botulinum Clostridium botulinum pot rezista 8 ore pot rezista 8 ore

la 100°C.la 100°C.• Cel mai rezistent – sporul de Cel mai rezistent – sporul de Bacillus Bacillus

stearotermophilus, acesta necesstearotermophilus, acesta neces ita pentru ita pentru distrugere 15 – 18 minute la 121°C si 40 minute distrugere 15 – 18 minute la 121°C si 40 minute la 115°C.la 115°C.

• Sporii de Sporii de B. stearotermophilus – indicator in B. stearotermophilus – indicator in aprecierea eficientei sterilizarii prin caldura aprecierea eficientei sterilizarii prin caldura umeda.umeda.

STERILIZAREA PRIN CALDURA STERILIZAREA PRIN CALDURA UMEDAUMEDA

• Ce se poate steriliza prin Ce se poate steriliza prin autoclavare?autoclavare?

- Instrumentar medicalInstrumentar medical

- Material moale (pansamente, campuri Material moale (pansamente, campuri operatorii, halate etc.)operatorii, halate etc.)

- Solutii perfuzabileSolutii perfuzabile

- Materiale de laborator (medii de cultura, Materiale de laborator (medii de cultura, tampoane pentru recoltari prelevate, tampoane pentru recoltari prelevate, materiale infecte). materiale infecte).

STERILIZAREA PRIN CALDURA STERILIZAREA PRIN CALDURA UMEDAUMEDAFIERBEREAFIERBEREA

• Prin fierbere timp de 30 minute se Prin fierbere timp de 30 minute se distrug bacteriile in forma distrug bacteriile in forma vegetativa, virusurile si fungii, dar vegetativa, virusurile si fungii, dar rezista unii spori bacterieni.rezista unii spori bacterieni.

STERILIZAREA PRIN CALDURA STERILIZAREA PRIN CALDURA UMEDAUMEDATINDALIZAREATINDALIZAREA• Sterilizare fractionata prin mentinerea Sterilizare fractionata prin mentinerea

substantelor la temperaturi de maximum substantelor la temperaturi de maximum 100 100 °C timp de 30 – 60 minute succesiv timp de °C timp de 30 – 60 minute succesiv timp de mai multe zile (3 – 8).mai multe zile (3 – 8).

• In intervalele dintre incalziri recipientele se In intervalele dintre incalziri recipientele se mentin la temperatura camerei, timp in care mentin la temperatura camerei, timp in care eventualii spori prezenti in preparat vor trece in eventualii spori prezenti in preparat vor trece in forma vegetativa si astfel vor fi distrusi la forma vegetativa si astfel vor fi distrusi la incalzirea ulterioara.incalzirea ulterioara.

STERILIZAREA PRIN CALDURA STERILIZAREA PRIN CALDURA UMEDAUMEDAPASTEURIZAREAPASTEURIZAREA• Prin incalziri la 62 - 85Prin incalziri la 62 - 85°C pe perioade de timp °C pe perioade de timp

variabile este o metoda de conservare a unor variabile este o metoda de conservare a unor produse alimentare.produse alimentare.

• Sunt distruse formele vegetative ale bacteriilor si Sunt distruse formele vegetative ale bacteriilor si fungii, dar rezista sporii si enterovirusurile.fungii, dar rezista sporii si enterovirusurile.

• In functie de temperatura se disting 3 tipuri de In functie de temperatura se disting 3 tipuri de pasteurizare:pasteurizare:

- Inalta: 8 – 15 sec. la 85°C- Inalta: 8 – 15 sec. la 85°C- Mijlocie: 40 – 45 sec. la 71 – 74 °C- Mijlocie: 40 – 45 sec. la 71 – 74 °C- Joasa: 30 min. la 62 - 65°C- Joasa: 30 min. la 62 - 65°C

STERILIZAREA PRIN CALDURA STERILIZAREA PRIN CALDURA USCATAUSCATACUPTOARE CU AER CALD (ETUVE)CUPTOARE CU AER CALD (ETUVE)

• Formele vegetative ale bacteriilor Formele vegetative ale bacteriilor sunt distruse prin caldura uscata in sunt distruse prin caldura uscata in 10 minute la 60 – 80 10 minute la 60 – 80 °C.°C.

• Sporii cei mai rezistenti de Sporii cei mai rezistenti de B. B. stearotermophilus stearotermophilus in 20 minute la 180 °C.in 20 minute la 180 °C.

• 1 ora – 180 °C1 ora – 180 °C

STERILIZAREA PRIN CALDURA STERILIZAREA PRIN CALDURA USCATAUSCATACUPTOARE CU AER CALD (ETUVE)CUPTOARE CU AER CALD (ETUVE)

• Ce se poate steriliza prin caldura Ce se poate steriliza prin caldura uscata?uscata?

- Sticlarie de laboratorSticlarie de laborator

- Obiecte de portelanObiecte de portelan

- Unele instrumente medicaleUnele instrumente medicale

- Substante sub forma de pulbere Substante sub forma de pulbere

- Solutii neapoaseSolutii neapoase

STERILIZAREA PRIN CALDURA STERILIZAREA PRIN CALDURA USCATAUSCATAADUCEREA LA INCANDESCENTAADUCEREA LA INCANDESCENTA

• Se sterilizeaza ansa bacteriologica si Se sterilizeaza ansa bacteriologica si spatula pentru folosire unica.spatula pentru folosire unica.

• Nu se indica utilizarea acestei Nu se indica utilizarea acestei metode pentru instrumente medicale metode pentru instrumente medicale (foarfeci, pense, ace), deoarece se (foarfeci, pense, ace), deoarece se pot degrada.pot degrada.

STERILIZAREA PRIN CALDURA STERILIZAREA PRIN CALDURA USCATAUSCATAFLAMBAREAFLAMBAREA

• Trecerea prin flacara timp de cateva Trecerea prin flacara timp de cateva secunde a obiectului de sterilizat secunde a obiectului de sterilizat (gura eprubetelor, flacoanelor, (gura eprubetelor, flacoanelor, partea efilata a pipetelor Pasteur partea efilata a pipetelor Pasteur etc.).etc.).

STERILIZAREA PRIN CALDURA STERILIZAREA PRIN CALDURA USCATAUSCATAINCINERAREAINCINERAREA• Se foloseste pentru materialele Se foloseste pentru materialele

infectate care nu se recupereaza:infectate care nu se recupereaza:- Siringi de unica folosintaSiringi de unica folosinta

- PansamentePansamente

- Animale de experienteAnimale de experiente

- Deseuri biologice rezultate din laboratoarele Deseuri biologice rezultate din laboratoarele de microbiologiede microbiologie

- etc.etc.

STERILIZAREA PRIN CALDURA STERILIZAREA PRIN CALDURA USCATAUSCATA

• Mecanismul distrugerii bacteriilor prin Mecanismul distrugerii bacteriilor prin caldura uscata consta in:caldura uscata consta in:

- accelerarea fenomenului de oxido – reducereaccelerarea fenomenului de oxido – reducere

- asfixieasfixie

- coagularecoagulare

- carbonizare.carbonizare.

FRIGULFRIGUL

• Bacteriile suporta, in general, mai Bacteriile suporta, in general, mai bine temperaturile scazute decat pe bine temperaturile scazute decat pe cele ridicate.cele ridicate.

• La temperaturi sub cea minima de La temperaturi sub cea minima de crestere metabolismul si inmultirea crestere metabolismul si inmultirea bacteriilor inceteaza, majoritatea bacteriilor inceteaza, majoritatea trecand in stare de latenta.trecand in stare de latenta.

FRIGULFRIGULREFRIGERAREAREFRIGERAREA

• La +4 - +10 La +4 - +10 ° C majoritatea bacteriilor ° C majoritatea bacteriilor rezista luni si ani de zile cu conditia rezista luni si ani de zile cu conditia eviatarii uscarii.eviatarii uscarii.

• Unele bacterii care se intalnesc numai la Unele bacterii care se intalnesc numai la om (meningococii, gonococii) nu sunt om (meningococii, gonococii) nu sunt rezistente si mor repede la temperaturi rezistente si mor repede la temperaturi sub cea optima.sub cea optima.

FRIGULFRIGULCONGELAREACONGELAREA

• In general, la 0In general, la 0°C efectul temperaturii °C efectul temperaturii este bactericid. este bactericid.

• Moartea bacteriilor se produce prin Moartea bacteriilor se produce prin inghetarea apei de solvire cu formarea de inghetarea apei de solvire cu formarea de pungi cu solutii hiperconcentrate care au pungi cu solutii hiperconcentrate care au efect toxic si/sau producerea de cristale de efect toxic si/sau producerea de cristale de gheata.gheata.

FRIGULFRIGULCONGELAREACONGELAREA

• La temperaturi mult sub 0°C, de -30°C La temperaturi mult sub 0°C, de -30°C pana la - 70°C nu se constata un efect pana la - 70°C nu se constata un efect bactericid deoarece la aceste temperaturi bactericid deoarece la aceste temperaturi nu se formeaza pungi cu slotii nu se formeaza pungi cu slotii hiperconcentrate sau cristale de gheata.hiperconcentrate sau cristale de gheata.

• Efectul bactericid este mai puternic Efectul bactericid este mai puternic prin repetarea operatiunilor de prin repetarea operatiunilor de inghetare si dezghetare.inghetare si dezghetare.

USCAREAUSCAREA

• Actiunea uscarii difera in functie de Actiunea uscarii difera in functie de forma de viata a bacteriilor. forma de viata a bacteriilor.

• Formele vegetative sunt mai Formele vegetative sunt mai sensibile, fiind distruse prin sensibile, fiind distruse prin concentrarea sarurilor si denaturarea concentrarea sarurilor si denaturarea fizico – chimica a proteinelor.fizico – chimica a proteinelor.

USCAREAUSCAREA

• Pentru formele vegetative rezistenta la Pentru formele vegetative rezistenta la uscare depinde de continutul in lipide al uscare depinde de continutul in lipide al invelisurilor celulare: cu cat cantitatea de invelisurilor celulare: cu cat cantitatea de lipide este mai mare, cu atat pierderea de lipide este mai mare, cu atat pierderea de apa se produce mai incet.apa se produce mai incet.

• Ex: Ex: -- micobacteriile care au in compozitia lor 40% micobacteriile care au in compozitia lor 40% lipide rezista timp de 6 – 8 luni in praf, lipide rezista timp de 6 – 8 luni in praf,

- bacilii Gram (-) cu 20% lipide rezista doar 1 – 2 - bacilii Gram (-) cu 20% lipide rezista doar 1 – 2 saptamanisaptamani

- pneumococul moare in cateva ore in conditii de - pneumococul moare in cateva ore in conditii de uscaciuneuscaciune

- gonococul se distruge imediat.- gonococul se distruge imediat.

USCAREAUSCAREA

• Pentru conservarea bacteriilor in Pentru conservarea bacteriilor in laborator se intrebuinteaza liofilizarea, laborator se intrebuinteaza liofilizarea, metoda de uscare in stare de metoda de uscare in stare de congelare sub vid.congelare sub vid.

• Prin liofilizare bacteriile pot Prin liofilizare bacteriile pot supravietui timp indelungat chiar supravietui timp indelungat chiar pastrate la temperatura camerei. pastrate la temperatura camerei.

RADIATIILERADIATIILEU.V. – LUMINA SOLARAU.V. – LUMINA SOLARA• Lumina solara, datorita continutului in U.V. Lumina solara, datorita continutului in U.V.

are efect bactericid, efect influentat de are efect bactericid, efect influentat de permeabilitatea atmosferei.permeabilitatea atmosferei.

• Lumina solara constituie factorul principal Lumina solara constituie factorul principal de reducere a florei microbiene a aerului, de de reducere a florei microbiene a aerului, de pe suprafata solului si in apele limpezi, pe suprafata solului si in apele limpezi, putin adanci.putin adanci.

• Timpul de distrugere este variabil in functie Timpul de distrugere este variabil in functie de specia bacteriana: 1h pentru de specia bacteriana: 1h pentru E.coliE.coli, 2 – 3 , 2 – 3 h pentru h pentru Salmonella typhi Salmonella typhi si 5 – 7 ore si 5 – 7 ore pentru pentru Mycobacterium tuberculosis.Mycobacterium tuberculosis.

RADIATIILERADIATIILEU.V.U.V.

• U.V. (240 – 280 nm.) distrug bacteriile pe de U.V. (240 – 280 nm.) distrug bacteriile pe de o parte direct prin absorbtia lor de catre o parte direct prin absorbtia lor de catre acizii nucleici si proteinele bacteriene, acizii nucleici si proteinele bacteriene, absorbtie urmata de rupturi ale legaturilor absorbtie urmata de rupturi ale legaturilor chimice cu formarea de noi legaturi intre chimice cu formarea de noi legaturi intre pirimidine si pe de alta parte indirect prin pirimidine si pe de alta parte indirect prin modificari ale mediului – producerea de modificari ale mediului – producerea de ozon in aer si peroxizi in ape, compusi care ozon in aer si peroxizi in ape, compusi care nu au actiune antibacteriana.nu au actiune antibacteriana.

RADIATIILERADIATIILEU.V.U.V.• In practica U.V. se folosesc pentru In practica U.V. se folosesc pentru

decontaminarea suprafetelor si a aerului in decontaminarea suprafetelor si a aerului in incaperi de policlinica si spital, in Sali de incaperi de policlinica si spital, in Sali de operatie si laboratoare.operatie si laboratoare.

• Fotoreactivarea – fenomenul prin care Fotoreactivarea – fenomenul prin care bacteriile au fost “distruse” prin U.V. sunt bacteriile au fost “distruse” prin U.V. sunt reactivate prin expunere la lumina reactivate prin expunere la lumina puternica, cu lungimea de unda de 400 nm.puternica, cu lungimea de unda de 400 nm.

• In aceste conditii se activeaza o enzima In aceste conditii se activeaza o enzima care desface dimerii pirimidinici formati sub care desface dimerii pirimidinici formati sub actiunea U.V.actiunea U.V.

RADIATIILERADIATIILERADIATIILE IONIZANTERADIATIILE IONIZANTE

• Radiatiiile X si gamma au efect Radiatiiile X si gamma au efect bactericid prin ionizare cu formare de bactericid prin ionizare cu formare de radicali de oxigen bactericizi.radicali de oxigen bactericizi.

• Radiatiile ionizante se folosesc Radiatiile ionizante se folosesc indeosebi pentru sterilizarea indeosebi pentru sterilizarea produselor termolabile (ex. produselor termolabile (ex. instrumentar medical din material instrumentar medical din material plastic de unica folosinta).plastic de unica folosinta).

ULTRASUNETELEULTRASUNETELE

• Efectul bactericid se exercita datorita Efectul bactericid se exercita datorita fenomenului de cavitatie prin fenomenului de cavitatie prin activarea gazelor dizolvate in activarea gazelor dizolvate in citoplasma, urmata de ruperea citoplasma, urmata de ruperea peretelui celular.peretelui celular.

• In medicina ultrasunetele se folosesc In medicina ultrasunetele se folosesc la sterilizarea unor instrumente la sterilizarea unor instrumente medicale.medicale.

PRESIUNEA MECANICAPRESIUNEA MECANICA

• Majoritatea bacteriilor in forma Majoritatea bacteriilor in forma vegetativa rezista bine la 3.000 atm., vegetativa rezista bine la 3.000 atm., pierderea viabilitatii producandu-se pierderea viabilitatii producandu-se dupa 14 ore la 6.000 atm.dupa 14 ore la 6.000 atm.

• Sporii bacterieni sunt mult mai Sporii bacterieni sunt mult mai rezistenti, necesitand pentru rezistenti, necesitand pentru inactivare 12.000 – 20.000 atm.inactivare 12.000 – 20.000 atm.

PRESIUNEA OSMOTICAPRESIUNEA OSMOTICA

• La o presiune osmotica mai mare, in mediu La o presiune osmotica mai mare, in mediu hipertonic se produce “uscarea osmotica” a hipertonic se produce “uscarea osmotica” a bacteriilor prin trecerea in stare de latenta bacteriilor prin trecerea in stare de latenta sau moartea lor. Apa iese din celula, sau moartea lor. Apa iese din celula, citoplasma se retracta impreuna cu citoplasma se retracta impreuna cu membrana citoplasmatica care se desprinde membrana citoplasmatica care se desprinde de peretele bacterian.de peretele bacterian.

• Hiperosmolaritatea se foloseste in Hiperosmolaritatea se foloseste in conservarea alimentelor prin concentratii conservarea alimentelor prin concentratii mari de sare sau de zahar.mari de sare sau de zahar.

PRESIUNEA OSMOTICAPRESIUNEA OSMOTICA

• In medii hipotone celula bacteriana In medii hipotone celula bacteriana se hidrateaza , devine turgescenta, se hidrateaza , devine turgescenta, se rup invelisurile obtinandu-se se rup invelisurile obtinandu-se moartea celulei.moartea celulei.

DEZINFECTANTEDEZINFECTANTE

• Substante chimice elementare:Substante chimice elementare:- OO22, H, H2, 2,

- metale grele: Ag., Hg., Cu.metale grele: Ag., Hg., Cu.

• Compusi anorganici:Compusi anorganici:- acizi: acid boric, acid salicilic, Hacizi: acid boric, acid salicilic, H22SOSO4, 4, HCl.HCl.

- baze: NaOHbaze: NaOH

- saruri: AgNOsaruri: AgNO3, 3, clorura de Hg., permanganat clorura de Hg., permanganat de potasiu, bicromat de potasiu, sulfat de de potasiu, bicromat de potasiu, sulfat de cuprucupru

DEZINFECTANTEDEZINFECTANTE

• Compusi organici:Compusi organici:- Detergenti – anionici si cationiciDetergenti – anionici si cationici

- Fenoli, alcooli, eteriFenoli, alcooli, eteri

- AldehideAldehide

- ColorantiColoranti

TEMA PENTRU STUDENTITEMA PENTRU STUDENTI

• Continuati prezentarea Power Point cu Continuati prezentarea Power Point cu detalii despre dezinfectante si detalii despre dezinfectante si antisepticeantiseptice

• Clasificarea lorClasificarea lor

• Mecanisme de actiuneMecanisme de actiune

• Cateva notiuni despre fiecare dintre eleCateva notiuni despre fiecare dintre ele

• Trimiteti pe mail la adresa: Trimiteti pe mail la adresa: stanca_lucia_pandrea@yahoo.comstanca_lucia_pandrea@yahoo.com