20
SKRIPSI MARVIAR DEWI PURNAMASARI BANI AKTIVITAS ANTIOKSIDAN DARI EKSTRAK KULIT BUAH KIWI (Actinidia deliciosa) DENGAN METODE 1,1-DIFENIL-2- PIKRILHIDRAZIL (DPPH) PROGRAM STUDI FARMASI FAKULTAS ILMU KESEHATAN UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH MALANG 2014

SKRIPSI MARVIAR DEWI PURNAMASARI BANI AKTIVITAS ...eprints.umm.ac.id/23437/1/jiptummpp-gdl-marviardew-39567-1-pendahul-n.pdf · 4.4.3.2 Identifikasi Golongan Senyawa Polifenol dan

  • Upload
    others

  • View
    4

  • Download
    0

Embed Size (px)

Citation preview

Page 1: SKRIPSI MARVIAR DEWI PURNAMASARI BANI AKTIVITAS ...eprints.umm.ac.id/23437/1/jiptummpp-gdl-marviardew-39567-1-pendahul-n.pdf · 4.4.3.2 Identifikasi Golongan Senyawa Polifenol dan

SKRIPSI

MARVIAR DEWI PURNAMASARI BANI

AKTIVITAS ANTIOKSIDAN DARI EKSTRAK

KULIT BUAH KIWI (Actinidia deliciosa)

DENGAN METODE 1,1-DIFENIL-2-

PIKRILHIDRAZIL (DPPH)

PROGRAM STUDI FARMASI

FAKULTAS ILMU KESEHATAN

UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH MALANG

2014

Page 2: SKRIPSI MARVIAR DEWI PURNAMASARI BANI AKTIVITAS ...eprints.umm.ac.id/23437/1/jiptummpp-gdl-marviardew-39567-1-pendahul-n.pdf · 4.4.3.2 Identifikasi Golongan Senyawa Polifenol dan

ii

Lembar Pengesahan

AKTIVITAS ANTIOKSIDAN DARI EKSTRAK

KULIT BUAH KIWI (Actinidia deliciosa)

DENGAN METODE 1,1-DIFENIL-2-

PIKRILHIDRAZIL (DPPH)

SKRIPSI

Dibuat Untuk Memenuhi Syarat Mencapai Gelar Sarjana Farmasi Pada

Program Studi Farmasi Fakultas Ilmu Kesehatan

Universitas Muhammadiyah Malang

2014

Oleh:

Marviar Dewi Purnamasari Bani

09040059

Disetujui Oleh:

Pembimbing I Pembimbing II

Siti Rofida, S.Si., M. Farm., Apt. Sovia Aprina Basuki,S.Farm.M.Si.Apt

NIP 11408040453 NIP 11408040452

Page 3: SKRIPSI MARVIAR DEWI PURNAMASARI BANI AKTIVITAS ...eprints.umm.ac.id/23437/1/jiptummpp-gdl-marviardew-39567-1-pendahul-n.pdf · 4.4.3.2 Identifikasi Golongan Senyawa Polifenol dan

iii

Lembar Pengujian

AKTIVITAS ANTIOKSIDAN DARI EKSTRAK

KULIT BUAH KIWI (Actinidia deliciosa)

DENGAN METODE 1,1-DIFENIL-2-

PIKRILHIDRAZIL (DPPH)

SKRIPSI

Telah diuji dan dipertahankan di depan tim penguji Pada tanggal 11 Agustus 2014

Oleh:

Marviar Dewi Purnamasari Bani

09040059

Tim Penguji:

Penguji I Penguji II

Siti Rofida, S.Si., M. Farm., Apt. Sovia Aprina Basuki,S.Farm.M.Si.Apt

NIP 11408040453 NIP 11408040452

Penguji III Penguji IV

Dra. Uswatun Chasanah, M.Kes.Apt Ahmad Shobrun Jamil, S. Si., M.P.

mnx NIP 1140040448 NIP 11309070469

Page 4: SKRIPSI MARVIAR DEWI PURNAMASARI BANI AKTIVITAS ...eprints.umm.ac.id/23437/1/jiptummpp-gdl-marviardew-39567-1-pendahul-n.pdf · 4.4.3.2 Identifikasi Golongan Senyawa Polifenol dan

iv

KATA PENGANTAR

Assalamu’alaikum warohmatullahi wabarokatuh

Syukur Alhamdulillah senantiasa terpanjatkan kehadirat Allah SWT yang

telah melimpahkan rahmat dan hidyah-Nya serta telah memberikan nikmat berupa

petunjuk, kesehatan, serta kesabaran kepada penulis sehingga dapat

menyelesaikan skripsi yang berjudul AKTIVITAS ANTIOKSIDAN DARI

EKSTRAK KULIT BUAH KIWI (Actinidia deliciosa) DENGAN METODE

1,1-DIFENIL-2-2PIKRILHIDRAZIL (DPPH).

Pada kesempatan yang berharga ini, penulis mengucapkan terima kasih

sebesar-besarnya kepada:

1. Allah SWT yang telah memberikan rahmat dan hidayah-Nya kepada umat-

Nya, Rasulullah SAW yang telah menuntun kita menuju jalan yang lurus.

2. Yoyok Bekti Prasetyo, S.Kep, M.Kep., Sp.Kom selaku Dekan Fakultas

Ilmu Kesehatan Universitas Muhammadiyah Malang.

3. Siti Rofida S.Si., M.Farm., Apt selaku dosen pembimbing I dan Sovia

Aprina Basuki, S.Farm., M.Si., Apt selaku dosen pembimbing II atas

saran, bimbingan, dan arahannya yang dengan sabar telah meluangkan

waktu untuk membimbing dan mengarahkan penulis.

4. Dra.Uswatun Chasanah, M.Kes., Apt selaku penguji I dan Ahmad Shobrun

Jamil, S.Si., MP selaku penguji II atas saran dan kritik yang diberikan

sehingga penyusunan skripsi ini menjadi lebih baik.

5. Nailis Syifa’, S.Farm. Apt. M.Sc selaku Ketua Program Studi Farmasi.

6. Laboratorium Sintesa dan Laboratorium Kimia Terpadu II Program Studi

Farmasi, Fakultas Ilmu Kesehatan, Universitas Muhammadiyah Malang.

Kepada Mbak Evy yang telah bersedia meluangkan waktu untuk

mendampingi dan memberikan tempat agar penulis dapat melaksanakan

penelitiannya dengan baik.

7. Dian Ermawati, S.Farm., Apt. selaku dosen wali. Terima kasih atas arahan

ibu baik tentang akademik atau non akademik selama ini.

8. Untuk semua Dosen Farmasi Universitas Muhammadiyah Malang yang

sudah memberikan waktunya untuk mengajarkan ilmu-ilmu yang sangat

bermanfaat. Terutama Ibu Arina Swastika Maulita, S.Farm., Apt., dan Ibu

Page 5: SKRIPSI MARVIAR DEWI PURNAMASARI BANI AKTIVITAS ...eprints.umm.ac.id/23437/1/jiptummpp-gdl-marviardew-39567-1-pendahul-n.pdf · 4.4.3.2 Identifikasi Golongan Senyawa Polifenol dan

v

Sendi Lia Yunita, S. Farm., Apt. yang telah susah payah membantu

jalanya ujian skripsi sehingga kami dapat melaksanakan ujian skripsi

dengan baik.

9. Staff Tata Usaha Program Studi Farmasi Fakultas Ilmu kesehatan

Universitas Muhammadiyah Malang terima kasih karena telah banyak

membantu dalam hal administrasi.

10. Untuk kedua orang tuaku, Bapak (Bani Djahu) dan Bunda (Farida) tercinta

dan tersayang yang selalu dan takkan berhenti memberi kasih sayang,

dukungan, arahan serta DO’a tiada hentinya memotivasi dalam segala hal,

dengan sabar mendoakan untuk kebaikan dan kesuksesan ananda. Terima

kasih banyak atas didikan dan kerja keras untuk membuat ananda bahagia

serta mendapatkan ilmu yang bemanfaat. Ananda tidak pernah bisa

membalas semuanya, hanya rasa hormat dan sayang, serta mewujudkan

impian Bapak dan Bunda yaitu ananda mendapat gelar sarjana.

11. Untuk semua saudara tersayang, terutama kakak Ani, Anto, Echy dan Adik

Bayu yang selalu mendoakan dan memberikan semangat motivasi kepada

penulis dalam proses perampungan skripsi ini.

12. Untuk mas jhey, terima kasih atas semangat, pengertian, perhatian, dan

bantuannya selama ini untuk bisa menyelesaikan skripsi ini, semoga Allah

selalu memberikan kemudahan dan keberkahan untuk kita.

13. Teman–teman seperjuangan bahan alam : Luluk, Desty dan Lia

terimakasih atas kebersamaan, bantuan, motivasi dan semangat serta

kerjasamanya sehingga skripsi ini dapat terwujud.

14. Para sahabat yang tersayang yang setia memberi support saya sampai saat

ini : Bu dwi, Shelvy, Sarah, Dhea, Rezky, Irul, Risa, Iga, Umi, An-an,

Pity, Ines, Atma, Hajar, Isa, terima kasih atas motivasi dan

kebersamaannya selama ini dan juga terima kasih atas pelajaran yang

kalian berikan yang tidak pernah saya dapat di bangku pendidikan.

15. Teman-teman Farmasi 2009, terimakasih atas kebersamaannnya selama

ini, kalian memberikan semangat baru dalam kehidupan ini.

Page 6: SKRIPSI MARVIAR DEWI PURNAMASARI BANI AKTIVITAS ...eprints.umm.ac.id/23437/1/jiptummpp-gdl-marviardew-39567-1-pendahul-n.pdf · 4.4.3.2 Identifikasi Golongan Senyawa Polifenol dan

vi

16. Bapak dan Ibu kos terima kasih atas motivasi dan perhatiannya selama ini

beserta teman-teman kos BS.05 terutama Icha, Indri, Putri, Mbk Ain,

Sundari, Dina terima kasih atas kebersamaannya.

17. Untuk semua pihak yang belum disebutkan namanya, penulis mohon maaf

dan terima kasih yang sebesar-besarnya. Semua keberhasilan ini tak luput

dari bantuan, doa yang telah kalian semua berikan.

Jasa dari semua pihak yang telah membantu dalam penelitian ini, penulis

tidak mampu membalas dengan apapun. Semoga amal baik semua pihak

mendapat imbalan dari Allah SWT. Penulis menyadari bahwa skripsi ini jauh dari

kesempurnaan, oleh karena itu penulis mengharapkan saran dan kritik yang

membangun dari pembaca demi kebaikan skripsi ini. Semoga penulisan skripsi ini

dapat berguna bagi penelitian berikutnya ataupun bagi semua pihak yang

membaca skripsi ini, amiin.

Wassalamu’alaikum warohmatullohi wabarokatuh

Malang, 11 Agustus 2014

Penyusun

Marviar Dewi Purnamasari Bani

Page 7: SKRIPSI MARVIAR DEWI PURNAMASARI BANI AKTIVITAS ...eprints.umm.ac.id/23437/1/jiptummpp-gdl-marviardew-39567-1-pendahul-n.pdf · 4.4.3.2 Identifikasi Golongan Senyawa Polifenol dan

vii

DAFTAR ISI

ISI HALAMAN

HALAMAN JUDUL ...................................................................................... i

LEMBAR PENGESAHAN ........................................................................... ii

LEMBAR PENGUJIAN ................................................................................ iii

KATA PENGANTAR .................................................................................... iv

DAFTAR ISI ................................................................................................... vii

DAFTAR TABEL .......................................................................................... x

DAFTAR GAMBAR ...................................................................................... xi

DAFTAR LAMPIRAN .................................................................................. xii

DAFTAR SINGKATAN ................................................................................ xiii

RINGKASAN ................................................................................................. xiv

ABSTRAK ...................................................................................................... xvi

BAB I PENDAHULUAN1

1.1 Latar Belakang Masalah ............................................................. 1

1.2 Rumusan Masalah ....................................................................... 3

1.3 Tujuan Penelitian ........................................................................ 4

1.4 Manfaat Penelitian ...................................................................... 4

BAB II TINJAUAN PUSTAKA ................................................................... 5

2.1 Tinjauan Tentang Tanaman Kiwi ............................................... 5

2.1.1 Klasifikasi Tanaman .......................................................... 5

2.1.2 Morfologi Kiwi .................................................................. 6

2.1.3 Daerah Asal dan Penyebaran Tanaman ............................. 6

2.1.4 Kandungan Kiwi ................................................................ 6

2.1.5 Kegunaan dan Khasiat Kiwi .............................................. 7

2.2 Ekstraksi ...................................................................................... 8

2.2.1 Maserasi ............................................................................. 9

2.2.2 Pemilihan Solven ............................................................... 10

2.3 Radikal Bebas ............................................................................. 10

2.4 Antioksidan ................................................................................. 12

2.4.1 Sumber Antioksidan .......................................................... 13

2.4.2 Mekanisme Kerja Antioksidan .......................................... 14

2.4.3 Vitamin C ........................................................................... 16

2.5 Tinjauan Kromatografi ............................................................... 17

2.6 Uji Aktivitas Antioksidan ........................................................... 17

2.5.1 Metode DPPH (1,1-Diphenyl-2-Picrylhydrazyil) ............. 18

2.5.2 Metode CUPRAC (Cupric Ion Reducing Antioxidant) .... 19

Page 8: SKRIPSI MARVIAR DEWI PURNAMASARI BANI AKTIVITAS ...eprints.umm.ac.id/23437/1/jiptummpp-gdl-marviardew-39567-1-pendahul-n.pdf · 4.4.3.2 Identifikasi Golongan Senyawa Polifenol dan

viii

2.5.3 Metode FRAP (Ferric Reducing Ability of Plasma) ........ 19

2.7 Spektofotometri............................................................................ 20

BAB III KERANGKA KONSEPTUAL ....................................................... 21

3.1 Skema Kerangka Konseptual ....................................................... 21

3.2 Konsep Teoritis ............................................................................ 22

BAB IV METODE PENELITIAN ............................................................... 23

4.1 Tempat dan Waktu Penelitian .................................................................... 23

4.2 Alat dan Bahan Penelitian ........................................................... 23

4.2.1 Alat Penelitian .................................................................... 23

4.2.2 Bahan Penelitian ................................................................ 24

4.3 Rancangan Penelitian .................................................................. 24

4.3.1 Design Peneliti ................................................................... 24

4.3.2 Variabel Penelitian ............................................................. 25

4.4 Prosedur Kerja ............................................................................ 25

4.4.1 Persiapan Simplisia ............................................................ 25

4.4.2 Pembuatan Ekstrak Etanol Kulit Buah Kiwi ..................... 25

4.4.3 Penapisan Fitokimia ........................................................... 26

4.4.3.1 Identifikasi Golongan Senyawa Flavonoid ........... 26

4.4.3.2 Identifikasi Golongan Senyawa Polifenol

dan Tanin ............................................................... 27

4.4.4 Uji Aktivitas Antioksidan .................................................. 28

4.4.4.1 Pembuatan Larutan Ekstrak Kulit Buah Kiwi

dengan Konsentrasi 1000 ppm ............................. 28

4.4.4.2 Pembuatan Larutan DPPH 0,4 mMol .................... 28

4.4.4.3 Pembuatan Larutan Uji ......................................... 28

4.4.4.4 Pembuatan Larutan Vitamin C .............................. 28

4.4.4.5 Pembuatan Larutan Blanko ................................... 29

4.4.4.6 Proses Inkubasi ...................................................... 29

4.4.4.7 Pengukuran Absorbansi ......................................... 29

4.5 Bagan Alur Kerja ........................................................................ 30

4.5.1 Alur Kerja Pembuatan Ekstrak Etanol Kulit Buah Kiwi ... 30

4.5.2 Penapisan Fitokimia ........................................................... 31

4.5.2.1 Identifikasi Golongan Senyawa Flavonoid ........... 31

4.5.2.2 Identifikasi Golongan Senyawa Polifenol

dan Tanin ............................................................... 32

4.5.3 Pembuatan Larutan Ekstrak Kulit Buah

Kiwi dengan konsentrasi 1000 ppm .................................. 33

4.5.4 Pembuatan Larutan DPPH 0,4 mMol ................................ 33

4.5.5 Pembuatan Larutan Uji ...................................................... 33

4.5.6 Pembuatan Larutan Vitamin C .......................................... 34

4.5.7 Pembuatan Larutan Blanko ................................................ 35

4.6 Analisis Data ................................................................................ 35

4.6.1 Data Absorbansi ................................................................. 35

4.6.2 Perhitungan % Inhibasi ...................................................... 36

4.6.3 Perhitungan IC50 ................................................................................................ 36

Page 9: SKRIPSI MARVIAR DEWI PURNAMASARI BANI AKTIVITAS ...eprints.umm.ac.id/23437/1/jiptummpp-gdl-marviardew-39567-1-pendahul-n.pdf · 4.4.3.2 Identifikasi Golongan Senyawa Polifenol dan

ix

BAB V HASIL PENELITIAN ...................................................................... 37

5.1 Hasil Ekstrak Etanol Kulit Buah Kiwi ......................................... 37

5.2 Skrining Kandungan Fitokimia .................................................... 38

5.2.1 Hasil Uji warna golongan Polifenol, Tanin, dan

Flavonoid .......................................................................... 38

5.22 Identifikasi Senyawa Flavonoid dengan penapisan

Fitokimia .......................................................................... 38

5.3 Hasil Uji KLT Ekstrak Etanol Kulit Buah Kiwi ............................ 39

5.3.1 hasil Uji KLT pada Identifikasi Polifenol dan Tanin ........... 39

5.3.2 Identifikasi Senyawa Flavonoid dengan KLT ...................... 39

5.4 Hasil Pengukuran Aktivitas Antioksidan menggunakan radikal

bebas DPPH secara spektrometri .................................................. 40

5.4.1 Hasil Pengukuran Panjang Gelombang Maksimum

Menggunakan DPPH dan Metanol p.a Secara

Spektrofotometri .................................................................. 40

5.4.2 Hasil Pengukuran Operating Time Aktivitas Antioksidan

Vitamin C Menggunakan Radikal Bebas DPPH Secara

Spektrometri ........................................................................ 40

5.4.3 Hasil Pengukuran Absorbansi Aktivitas Antioksidan

Vitamin C Menggunakan Radikal Bebas DPPH Secara

Spektrofotometri .................................................................. 41

5.4.4 Hasil Pengukuran Aktivitas Vitamin C Menggunakan

Radikal Bebas DPPH Secara Spektrofotometri Serta

Nilai % Inhibisi .................................................................... 41

5.4.5 Hasil Pengukuran Operating Time Aktivitas Antioksidan

Ekstrak Etanol Kulit Buah Kiwi Menggunakan Radikal

Bebas DPPH Secara Spektrofotometri. ............................... 42

5.4.6 Hasil Pengujian Absorbansi Ekstrak Etanol Kulit Buah

Kiwi Secara Spektrofotometri Menggunakan

Metanol p.a .......................................................................... 43

5.4.7 Hasil Pengujian Aktivitas Antioksidan Ekstrak Etanol

Kulit Buah Kiwi Secara Spektrofotometri Menggunakan

DPPH ................................................................................... 43

5.4.8 Hasil Pengukuran Absorbansi Sampel ................................. 44

5.4.9 Hasil Pengujian Aktivitas Antioksidan Ekstrak Etanol

Kulit Buah Kiwi dengan Metode DPPH Menggunakan

Spektrofotometri dan Nilai % Inhibisi ................................. 44

5.5 Analisis Data ............................................................................. 46

BAB VI PEMBAHASAN ............................................................................... 47

BAB VII KESIMPULAN DAN SARAN ...................................................... 51

DAFTAR PUSTAKA ..................................................................................... 52

LAMPIRAN .................................................................................................... 55

Page 10: SKRIPSI MARVIAR DEWI PURNAMASARI BANI AKTIVITAS ...eprints.umm.ac.id/23437/1/jiptummpp-gdl-marviardew-39567-1-pendahul-n.pdf · 4.4.3.2 Identifikasi Golongan Senyawa Polifenol dan

x

DAFTAR TABEL

TABEL HALAMAN

II.1 Sumber Radikal Bebas .................................................................................... 12

II.2 Tingkat Antioksidan dengan Metode DPPH .................................................. 19

V.1 Rendamen Hasil Ekstraksi Kulit Buah Kiwi .................................................. 37

V.2 Hasil Penapisan Fitokimia dari Ekstrak Etanol Kulit Buah Kiwi .................. 39

V.3 Hasil KLT dan Ekstrak Etanol Kulit Buah Kiwi ............................................ 40

V.4 Data Pengukuran Panjang Gelombang Larutan DPPH 0,4 mMol ................. 40

V.5 Data Pengukuran Operating Time Pada Absorbansi Vitamin C Dengan DPPH

pada Panjang Gelombang Maksimum 516 nm .............................................. 41

V.6 Data Pengukuran absorbansi vitamin C dengan spektrofotometri

menggunakan DPPH sebagai radikal bebas pada menit ke-20 lamda maks.

516 nm ........................................................................................................... 41

V.7 Hasil Pengukuran Aktivitas Antioksidan Vitamin C dengan DPPH pada

Panjang Gelombang 516 nm serta nilai 5 inhibasi ......................................... 42

V.8 Data Pengukuran Inkubasi Pada Absorbansi Ekstrak Etanol Kulit Buah Kiwi

denga DPPH pada lamda maks 516 nm ........................................................ 43

V.9 Data Pengujian Absorbansi Ekstrak Etanol Kulit Buah Kiwi dengan

Spektrofotometri Menggunakan Metanol p.a ................................................ 43

V.10 Data Pengujian Absorbansi Ekstrak Etanol Kulit Buah Kiwi dengan

Spektrofotometri menggunakan DPPH pada menit ke-10 pada lamda maks.

516 .................................................................................................................. 44

V.11 Absorbansi Sampel ....................................................................................... 44

V.12 Hasil Perhitungan 5 Inhibasi Ekstrak Etanol Kulit Buah Kiwi dengan

DPPH pada Panjang Gelombang 516 nm ..................................................... 45

Page 11: SKRIPSI MARVIAR DEWI PURNAMASARI BANI AKTIVITAS ...eprints.umm.ac.id/23437/1/jiptummpp-gdl-marviardew-39567-1-pendahul-n.pdf · 4.4.3.2 Identifikasi Golongan Senyawa Polifenol dan

xi

DAFTAR GAMBAR

GAMBAR HALAMAN

2.1 Tanaman Kiwi (Actinidia deliciosa) ................................................................. 5

3.1 Skema Konseptual ........................................................................................... 21

4.1 Bagan Alur Kerja Pembuatan Ekstraksi .......................................................... 30

4.2 Bagan Alur Kerja Identifikasi Golongan Senyawa Flavonoid ........................ 31

4.3 Bagan Alur Kerja Identifikasi Golongan Senyawa Polifenol dan Tanin ........ 31

4.4 Bagan Alur Kerja Pembuatan Ekstrak Kulit Buah Kiwi dengan

Konsentrasi 1000 ppm .................................................................................... 32

4.5 Bagan Alur Kerja Pembuatan Larutan DPPH 0,4 mM ................................... 32

4.6 Bagan Alur Pembuatan Larutan Uji Aktivitas Antioksidan Kulit Buah

Kiwi dengan Metode DPPH ............................................................................ 33

4.7 Bagan alur Kerja Pembuatan Larutan Kontrol Vitamin C .............................. 33

4.8 Bagan Alur Kerja Pembuatan Larutan Blanko ............................................... 33

4.9 Bagan Alur Pembuatan Larutan Uji Aktivitas Antioksidan Kulit Buah

Kiwi (Actinidia deliciosa) dengan Metode DPPH .......................................... 34

4.10 Bagan Alur Kerja Pembuatan Larutan Kontrol Vitamin C ............................ 35

4.11 Bagan Alur Kerja Pembuatan Larutan Blanko .............................................. 35

5.1 Ekstrak Kental Etanol Kulit Buah Kiwi (Actinidia deliciosa) ........................ 37

5.2 Hasil Penampisan Fitokimia Identifikasi golongan Polifenol dan Tanin ........ 38

5.3 Hasil Penampisan Fitokimian Identifikasi golongan Flavonoid ..................... 38

5.4 Hasil Identifikasi golongan Polifenol dengan Kromatografi Lapis Tipis ........ 39

5.5 Hasil Identifikasi golongan Polifenol dengan Kromatografi Lapis Tipis ....... 39

5.6 Hasil Identifikasi golongan Flavonoid dengan Kromatografi Lapis

Tipis Fraksi N-Heksana .................................................................................. 40

5.7 Grafik Hambatan Vitamin C Terhadap Aktivitas Antioksidan ...................... 42

5.8 Grafik Hambatan Ekstrak Etanol Kulit Buah Kiwi Terhadap Aktivitas

Antioksidan .................................................................................................... 46

Page 12: SKRIPSI MARVIAR DEWI PURNAMASARI BANI AKTIVITAS ...eprints.umm.ac.id/23437/1/jiptummpp-gdl-marviardew-39567-1-pendahul-n.pdf · 4.4.3.2 Identifikasi Golongan Senyawa Polifenol dan

xii

DAFTAR LAMPIRAN

LAMPIRAN HALAMAN

1. Daftar Riwayat Hidup ...................................................................................... 55

2. Surat Pernyataan............................................................................................... 56

3. Perhitungan ....................................................................................................... 57

4. Penentuan Panjang Gelombang Maksimum ..................................................... 60

5. Penentuan Waktu Kestabilan Kompleks ( Operating Time ) ............................ 62

6. Pengukuran Absorbansi Kulit Buah Kiwi ......................................................... 63

7. Pengukuran Absorbansi Vitamin C ................................................................... 74

8. Hasil SPSS ........................................................................................................ 82

9. Alat dan Bahan .................................................................................................. 85

Page 13: SKRIPSI MARVIAR DEWI PURNAMASARI BANI AKTIVITAS ...eprints.umm.ac.id/23437/1/jiptummpp-gdl-marviardew-39567-1-pendahul-n.pdf · 4.4.3.2 Identifikasi Golongan Senyawa Polifenol dan

xiii

DAFTAR SINGKATAN

ROS : Reactive Oxygen Spesies

BHA : Butylated Hidroxy Anisol

BHT : Butylated Hidroxy Toluen

TBHQ : Tert-Butylated Hidroxy Quinone

ORAC method : Oxygen Radical Absorbance Capacity method

TRAP method : Total Radical-Trapping Antioxidant Parameter method

TEAC method : Trolox Equivalent Antioxidant Capacity method

FRAP method : Ferric Reducing / Antioxidant Power method

DPPH : 2,2-diphenylpicrylhydrazyl

SOD : Superoksida Dismutase

TE : Trolox Ekuivalen

nm : Nano Meter

LU : Larutan Uji

LKP : Larutan Kontrol Positif

LDH : Larutan DPPH

Page 14: SKRIPSI MARVIAR DEWI PURNAMASARI BANI AKTIVITAS ...eprints.umm.ac.id/23437/1/jiptummpp-gdl-marviardew-39567-1-pendahul-n.pdf · 4.4.3.2 Identifikasi Golongan Senyawa Polifenol dan

xiv

RINGKASAN

Radikal bebas adalah molekul yang pada orbit terluarnya mempunyai satu

atau lebih electron tidak berpasangan, sifatnya sangat labil dan sangat reaktif

sehingga dapat menimbulkan kerusakan pada DNA, lipid, protein dan karbohidrat.

Antioksidan merupakan suatu senyawa yang dapat menunda dan mencegah

kerusakan yang disebabkan oleh proses oksidasi. Antioksidan ini mampu

mengubah sel-sel tubuh menjadi pengaman untuk melawan radikal bebas sebagai

penyebab berbagai penyakit. Salah satu tanaman yang dapat dijadikan alternative

antioksidan alami adalah kulit buah kiwi (Actinidia deliciosa). Tanaman ini

memiliki senyawa metabolit sekunder berupa, flavonoida, tanin, polifenol.

Penelitian ini untuk mengetahui bagaimana aktivitas antioksidan pada

ekstrak kulit buah kiwi (Actinidia deliciosa). Dengan tujuan mengetahui aktivitas

antioksidan pada ekstrak kulit buah kiwi menggunakan uji DPPH. Pengujian

aktivitas antioksidan dari ekstrak kulit buah kiwi dengan metode aktivitas

antiradikal bebas DPPH serta uji penapisan fitokimia dan KLT. Pada ekstark

etanol kulit buah kiwi mempunyai aktivitas antioksidan dengan metode DPPH,

yang diduga memiliki senyawa flavonoid yang berperan sebagai antioksidan.

Pada kulit buah kiwi yang telah dibersihkan dan dikeringkan dengan cara

diangin-anginkan. Diperoleh simplisia sebanyak 100 g dan dilakukan maserasi

menggunakan larutan etanol 96%. maserasi dilakukan 3x24 jam pelarut diganti

dan dilakukan pengadukan sesering mungkin. Kemudian filtrat disaring dan

dipekatkan dengan rotary evaporator hingga kental dan didapatkan % rendemen

sebanyak 18,58%.

Pada uji pendahuluan aktivitas antioksidan ekstrak etanol sebagai

penangkap radikal bebas dilakukan metode DPPH diawali dengan penapisan

fitokimia untuk identifikasi senyawa polifenol menggunakan FeCl3 dan

identifikasi senyawa flavonoid menggunakan HCl pekat. Dan pada uji KLT fase

diam yang digunakan adalah silica gel F254 dengan luas 2 x 10 cm dengan jarak

eluasi 8 cm. Uji flavonoid fase gerak yang digunakan untuk mengeluasi yaitu

kloroform : aseton dengan perbandingan 1 : 1 dengan penampak noda Asam sulfat

10%. Sedangkan pada uji polifenol fase gerak yang digunakan untuk mengeluasi

yaitu kloroform : etil asetat : asam formiat dengan perbandingan 0,5 : 9 : 0,5.

Noda diamati dengan sinar tampak, lampu UV 254 dan 365 nm.

Pada uji aktivitas antioksidan ekstrak etanol kulit buah kiwi dilakukan

dengan metode DPPH. Untuk tahap awal yang dilakukan yaitu pengukuran

panjang gelombang maksimum (λ maks) larutan DPPH. Penentuan operating time

ekstrak etanol kulit buah kiwi dan vitamin C sebagai kontrol positif tiap 5 menit

sejak penambahan DPPH. Operating time ini digunakan sebagai waktu inkubasi.

Selanjutnya pengujian aktivitas antioksidan ekstrak etanol kulit buah kiwi dengan

konsentrasi 10, 50, 100, 200, 300, 400, dan 500 µg/ml ditambahkan kedalam 1,0

ml DPPH 0,4 mMol ad 10,0 ml methanol p.a dikocok sampai homogen kemudian

di inkubasi selama 45 menit pada suhu ruangan ditempat gelap. Larutan ini

selanjutnya diukur absorbansinya pada panjang gelombang maksimum 516 nm.

Perlakuan yang sama juga dilakukan untuk vitamin C sebagai kontrol positif

dengan konsentrasi 0,2; 0,4; 0,6; 0,8; dan 1,0 µg/ml dan di inkubasi selama 20

menit. Data hasil pengukuran absorbansi dianalisa persentase aktivitas

antioksidannya menggunakan persamaan % inhibisi dari hasil nilai absorbansi

Page 15: SKRIPSI MARVIAR DEWI PURNAMASARI BANI AKTIVITAS ...eprints.umm.ac.id/23437/1/jiptummpp-gdl-marviardew-39567-1-pendahul-n.pdf · 4.4.3.2 Identifikasi Golongan Senyawa Polifenol dan

xv

blanko (serapan radikal DPPH 0,4 mMol) dikurangi absorbansi sampel (serapan

sampel dalam radikal bebas DPPH 0,4 mMol) kemudian dibagi dengan absorbansi

blanko dan di kalikan 100% untuk mendapatkan % inhibisi tiap konsentrasi.

Selanjutnya data % inhibisi diolah dengan analisis probit menggunakan SPSS

16.0 For Windows. Hasil analisis data tersebut dihasilkan nilai IC50.

Hasil dari penelitian pada penapisan fitokimia dan KLT menunjukkan

positif mengandung senyawa flavonoid dan polifenol yang berperan sebagai

antioksidan. Serta hasil IC50 pada ekstrak etanol kulit buah kiwi 130,212 µg/ml

dan pada vitamin C didapatkan nilai IC50 sebesar 16,887 µg/ml. sehingga ekstrak

etanol kulit buah kiwi memiliki aktivitas antioksidan yang sama aktifnya dengan

vitamin C karena nilai IC50 kurang dari 50 µg/ml. Penelitian dilanjutkan dengan

percobaan in-vivo sehingga diperoleh data yang lebih lengkap, berkenaan dengan

aktivitas ekstrak etanol kulit buah kiwi sebagai antiradikal bebas dalam

pengembangannya sebagai obat fitofarmaka.

Page 16: SKRIPSI MARVIAR DEWI PURNAMASARI BANI AKTIVITAS ...eprints.umm.ac.id/23437/1/jiptummpp-gdl-marviardew-39567-1-pendahul-n.pdf · 4.4.3.2 Identifikasi Golongan Senyawa Polifenol dan

xvi

ABSTRACT

Antioxidants are of substances inhibiting oxidation reactions caused by

free radicals. Kiwi (Actitinidia deliciosa) is a plant that is supposedly rich in

phytochemical compounds as natural antioxidants, which are beneficial to body.

The advantages of kiwi plants are located on the fruit skin. This plant is

interesting to be searched particularly on the activity of natural antioxidants

contained in them. Research on antioxidant activity towards DPPH (1,1-diphenyl-

2-pikrilhidrazil) that is a free radical. Natural antioxidants have great potential to

be developed, given the synthetic antioxidants are also useful in reducing free

radicals feared to have harmful side effects to human health.

The purpose of this study was to determine the antioxidant activity of in

the skin of a kiwi fruit using that there is DPPH method. Samples were prepared

by means of maceration 3 times using 96% ethanol. Viscous extract obtained

quantitatively analyzed with that there is DPPH reagent 0,4Mm. Tests conducted

on vitamin C and the ethanol extract of the skin of the kiwi fruit showed that there

is DPPH free radical activity of. Then measuring the absorbance using UV-Vis

spectrophotometer at a wavelength of 516 nm. The results of the analysis of the

vitamin C obtained IC50 value of 16,887 ug/ml and the results of the antioxidant

activity of the methanol extract of kiwi fruit skin obtained IC50 value of 130.212

g/ml.

Key Words: Activity of Antioxidants and Skin of Kiwi Fruit, DPPH.

Page 17: SKRIPSI MARVIAR DEWI PURNAMASARI BANI AKTIVITAS ...eprints.umm.ac.id/23437/1/jiptummpp-gdl-marviardew-39567-1-pendahul-n.pdf · 4.4.3.2 Identifikasi Golongan Senyawa Polifenol dan

xvii

ABSTRAK

Antioksidan adalah zat penghambat reaksi oksidasi akibat radikal bebas.

Kiwi (Actitinidia deliciosa) merupakan salah satu tanaman yang diduga kaya akan

senyawa fitokimia sebagai antioksidan alami yang berguna bagi tubuh.

Keunggulan tanaman kiwi terletak pada kulit buahnya. Tanaman ini menarik

untuk diteliti aktivitas antioksidan alami yang terkandung di dalamnya. Penelitian

terhadap aktivitas antioksidan terhadap DPPH (1,1-difenil-2-pikrilhidrazil) yang

merupakan radikal bebas. Antioksidan alami memiliki potensi yang besar untuk

dikembangkan, mengingat antioksidan sintetik yang juga berguna dalam meredam

radikal bebas dikhawatirkan memberi efek samping berbahaya bagi kesehatan

manusia.

Tujuan dari penelitian ini adalah untuk mengetahui aktivitas antioksidan

yang terkandung dalam kulit buah kiwi menggunakan metode DPPH. Sampel

dipreparasi dengan cara melakukan maserasi 3 kali menggunakan etanol 96%.

Ekstrak kental yang diperoleh dilakukan analisis secara kuantitatif dengan

pereaksi DPPH 0,4mMol. Pengujian dilakukan pada vitamin C dan ekstrak etanol

kulit buah kiwi tersebut menunjukkan adanya aktivitas antiradikal bebas DPPH.

Absorbansinya kemudian dilakukan pengukuran menggunakan spektrofotometer

UV-Vis pada panjang gelombang 516 nm. Hasil analisis pada vitamin C diperoleh

nilai IC50 16,887 µg/ml dan hasil aktivitas antioksidan ekstrak methanol kulit buah

kiwi diperoleh nilai IC50 sebesar 130,212 µg/ml.

Kata Kunci :Aktivitas Antioksi dan Kulit Buah Kiwi, DPPH.

Page 18: SKRIPSI MARVIAR DEWI PURNAMASARI BANI AKTIVITAS ...eprints.umm.ac.id/23437/1/jiptummpp-gdl-marviardew-39567-1-pendahul-n.pdf · 4.4.3.2 Identifikasi Golongan Senyawa Polifenol dan

xviii

DAFTAR PUSTAKA

Adnan M. 1997. Teknik Kromatografi Untuk Analisis Bahan Makanan,

Yogyakarta: Andi Yogyakarta

Aji W. 2009.Uji Aktifitas Antioksidan Tablet Effervescent Kombinasi

Ekstrak Ethanol Daun Dewandaru (Eugenia uniflora L) dan Herba

Sambiloto (Andrographis paniculata Ness) dengan Metode DPPH.

Surakarta : Fakultas Farmasi, Universitas Muhammadiyah Surakarta.

Apak R et al. 2007. Comparitive evaluation of various total antioxidant

capacity assay applied to phenolic compounds with the CUPRAC assay.

Molecules12 : 1496-1547.

Astawan M. danLeomitro A. 2008. Khasiat Warna-warni Makanan Jakarta :

PT Gramedia Pustaka Utama, Pp : 154-160, 128-129.

Caldwell CR. 2001.Oxygen radical absorbance capacity of the phenolic

compounds in plant extracts tractioned by high-performance liquid

chromatography.Anal Biochem 293-238.

Cahyadi, W, 2006, Analisis dan Aspek Kesehatan Tambahan Makanan,

Jakarta :Penerbit Bumi Aksara.

Chen, L. H. Yang, L. Wang, C. (2007). Anti-Inflamatory Activity Of

Mangostins From Garciniamangostana. Food and Chemical Toxicology.

Christian GD. 1986. Analytical Chemistry.Ed ke-4.USA :Jhon Willey dan Sons.

Dawn BM, Allan DM, Colleen MS. Metabolisme oksigen dan toksisitas

oksigen. In: Joko S, Vivi S, Lydia IM (editors). Biokimia kedokteran dasar:

sebuah pendekatan klinis. Jakarta: EGC; 2000. Hlm. 321-9.

Departemen Kesehatan Repyblik Indonesia. (2000). Parameter Standar Umum

Ekstrak Tumbuhan Obat. Departemen Kesehatan Republik Indonesia,

Jakarta : 9-12.

Furniss BS, Hannaford AJ. Smith PWG, Tatchell AR, Vogel AI. 1989. Vogel’s

Texbook Of Practical Organic Chemistry 4th

. New York : Willey dan

Sons.

Gandjar, G.H, dan Rohman, A. 2007. Kimia Farmasi Analisis. Yogyakarta:

Pustaka Pelajar

Giorgi. P., (2000), Flavonoid an Antioxidant. Journal National Product. 63.

1035-1045.

Gordon, M.H 1990. The mechanism of antioxidants action in vitro. Di dalam :

B.J.F. Hudson, Editor . Food Antioxidants Elsiver Applited Science, London

Page 19: SKRIPSI MARVIAR DEWI PURNAMASARI BANI AKTIVITAS ...eprints.umm.ac.id/23437/1/jiptummpp-gdl-marviardew-39567-1-pendahul-n.pdf · 4.4.3.2 Identifikasi Golongan Senyawa Polifenol dan

xix

Harbone JB. 1984. Phytochemical Method :A Guide to Modern Technicques of

plant Analysis. Second Edition.London : Chapman and Hall Ltd.

Harliansyah, 2005. Mengunyah Halia Menyah Penyakit. Indonesian Student

Association in Malaysia. Hal 92-96.

Hatanoet al. 1998.Two new flavonoid and other constituent in licoreroots :

Their relative astringency and radical scavenging effect. Chem Pharm Bull

36: 2090-2097.

Hernani dan Rahardjo M. 2005.Tanaman Berkhasiat Antioksidan. Jakarta

:PenebarSwadaya.

Ide P. 2010. Health Secret Of Kiwifruit. Jakarta: PT Elex Media Computindo.

Pp : 9, 11, 15, 16.

Juniarti, Osmeli D., Yuhernita. 2009. Kandungan Senyawa Kimia, Uji

Toksisitas (Brine Shrimp Lethality Test) dan Antioksidan (1,1-diphenyl-

2-picrilhydrazyl) dari ekstrak daun saga (Abrus precatorius L). Makara

Sain 13 (1) : 50 : 54.

Kataren S, 1986. Pengantar Teknologi Minyak dan Lemak Pangan. Jakarta : UI

Press.

Kumalaningsih, 2007.Radikal Bebas. http://www.Antioxidantcentre.com

(Februari 2008).

Lampe, J. W., 1999. Health Effects of Vegetables and Fruit: Assessing

Mechanisms of Action Human Experimental Studies. The American Journal

of Clinical Nutrition. 70 Suppl: 475S-490S.

Liang C. F dan Ferguson A, R. 2010. http://en.wikipedia.org/wiki/kiwifruit (Maret 2010)

Mimić-Oka J, SimicDv, danSimic TB. 1999. Free radicals in cardiovascular

desease. The Scientific Journal Facta Universitatis6: 11-12.

Mohhamadi, A., Rafice S., Emam Z., Keyhani A. 2008.

Kinetcs Models for Colours Changes in Kiwi fruit Slice During Hot Arr

Drying. http://www.idosi.org/wjas/wjas4(3)/15.pdf. (13 Mei 2010).

Molyneux P. 2004.The use of the stable free radical diphenyl picrylhydrazyl

(DPPH) for estimating antioxidant activity. dalam J.Sci Technologi. 26 (2) :

211-219.

Muhilal. 1991. Teori Radikal Bebas dalam Gizi dan Kedokteran Cermin Dunia

Kedokteran73 : 9-11.

Page 20: SKRIPSI MARVIAR DEWI PURNAMASARI BANI AKTIVITAS ...eprints.umm.ac.id/23437/1/jiptummpp-gdl-marviardew-39567-1-pendahul-n.pdf · 4.4.3.2 Identifikasi Golongan Senyawa Polifenol dan

xx

Murrary KR. 2003, Harper’s IlustratedBiochemstry. Ed ke-26.London : Lounge

Medical Pub.

Mursito B, 2002b. Ramuan Tradisional Untuk Pengobatan Jantung. Jakarta

:Penebar Swadaya.

Ou B, et al. 2002. Analysis of antioxidant activities of Common vegetables

employing oxygen radical absorbance (ORAC) and ferric Reducing

antioxidant Power (FRAP) assay : A Comparative Study. J Ayric Food

Chem50 : 3122-3128.

Sandhiutami, D., Rahayu, L., Oktaviani, T., Sari, L.Y. r Uji Aktivitas

Antioksidan Rebusan Daun Sambang Getih (Hemigraphis bicoolar Boerl.)

dan Sambang Solok (Aerva sanguinolenta (L.) Blume) Secara In Vitro.

Fakultas Farmasi, Universitas Pancasila.

Sarastani, D., S.T. Soekarto., T.R. Muchtadi., D. Fardiaz dan A. Apriyanto. 2002.

Aktivitas antioksidan ekstrak dan fraksi ekstrak biji atung., Jurnal

teknologi dan industri pangan., Vol.13 : 149-156.

Sastrohamidjojo, Hardjono, cetakan keempat kromatografi, Yogyakarta Liberty.

Siagian A. 2002. Bahan Tambahan Makanan. Medan : Fakultas Kesehatan

Masyarakat, Universitas Sumatera Utara

Then M, Szentmihalyi K, Sarkozi A, Varg N. 2003. Exmination on antioxidant

activity in greater celadine (Celidoniummajus L) extracts by FRAP Method. Actu Bio Szegediensis47 : 115-117.

Widowati L. 2004. Obat Tradisional.Depkes RI. [4 Mei 2006].

Winarno FG. 2008. Kimia PangandanGizi. Bogor: M-Brio Press.

Winarsi H. 2007. Antioksidan Alami dan radikal Bebas. Yogyakarta : Kanisius.