i

SKRIPSI

DESTY WIDYA PENTASARI

AKTIVITAS ANTIOKSIDAN PADA BUAH

PAPRIKA MERAH (Capsicum annum) DENGAN

METODE DPPH SECARA IN VITRO

PROGAM STUDI FARMASI

FAKULTAS ILMU KASEHATAN

UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH MALANG

2014

ii

Lembar Pengesahan

iii

Lembar Pengujian

iv

KATA PENGANTAR

Segala puji dan syukur penulis panjatkan kepada Allah SWT, karena atas

berkat dan rahmat-Nya, penulis dapat menyelesaikan penelitian dan penyusunan

skripsi yang berjudul Aktivitas Antioksidan Pada Buah Paprika Merah

(Capsicum annum) Dengan Metode DPPH Secara In Vitro. Penulisan skripsi

ini dilakukan dalam rangka memenuhi salah satu syarat untuk mencapai gelar

Sarjana Farmasi, Fakultas Ilmu Kesehatan, Universitas Muhammadiyah Malang.

Penulisan menyadari bahwa tanpa bantuan, dukungan, dan bimbingan dari

berbagai pihak, sangatlah sulit bagi penulis untuk menyelesaikan skripsi ini. Oleh

karena itu, penulis mengucapkan terima kasih kepada:

1. Siti Rofida, S.Si.M. Farm., Apt selaku dosen pembimbing I dan Sovia

Aprina Basuki, S.Farm. M. Si., Apt selaku dosen pembimbing II yang

telah menyediakan waktu, tenaga, serta arahan dan bimbingan untuk

mengarahkan penulis selama proses penelitian hingga penyusunan skripsi

ini. Atas kesabaran serta motivasinya beliau, sehingga skrisi ini dapat

terselesaikan.

2. Dra. Uswatun Chasanah, M. Kes., Apt selaku dosen penguji I dan Ahmad

Shobrun Jamil, S. Si, MP selaku dosen penguji II atas kritik dan sarannya

sehingga penyusunan skripsi menjadi lebih baik.

3. Yoyok Bekti Prasetyo, S.Kep, M.Kep., Sp.Kom selaku Dekan Fakultas

Ilmu Kesehatan Universitas Muhammadiyah Malang.

4. Nailis Syifa’, S.Farm. Apt. M.Sc selaku Ketua Program Studi Farmasi.

5. Engrid Juni, S.Farm., Apt selaku dosen wali yang membimbing serta

mengarahkan studi akademik selama 4 tahun, serta telah membantu

penulis dalam pelaksanaan penelitian.

6. Untuk kedua orang tua penulis Bapak Widaryono dan Ibu Erni Hartanti

yang telah memberikan dukungan, do’a, dan kasih sayangnya kepada

penulis sehingga dapat menyelesaikan skripsi ini. Atas segala jerih payah

membanting tulang untuk membesarkan dan menyekolahkan penulis

hingga saat ini.

v

7. Kakak tersayang Teddy Andi Pramono, S. T. yang telah memberikan

motivasi, kritik dan saranya kepada penulis. Walaupun keras dan suka

menyela kritik saranmu sangat berarti bagi penulis. Terima kasih kakak’ku

tersayang.

8. Untuk Fia Merta Antaga yang selalu memberikan semangat dan selalu

menemani penulis mengerjakan skripsi, sehingga dapat terselesaikan.

9. Ahmad Firdiansyah, S. Farm, Apt dengan kesabarannya telah membantu

dalam pelaksanaan praktikum.

10. Mbak Evi selaku penanggung jawab laboratorium yang telah menyiapkan

alat dan bahan penelitian serta kesabarannya menemani penulis sampai

penelitian selesai.

11. Sahabat seperjuanganku Rizky Amalia, Luluk Indah, Marviar atas kerja

sama dan motivasi satu sama lain, suka duka bersama, dan perjuangan

bersama yang tak terlupakan bagi penulis.

12. Sahabat seperjuangan DPPH Evi, Ririn, dan Laily Ami atas kritik, saran,

dan semangatnya sehingga dapat menyelesaikan penelitian ini dengan

tepat waktu.

13. Sahabat tersayangku Sofia, Rosely, Evi, Puput, Reva, Karina, Hervita atas

motifasinya kepada penulis dan kebersamaan kalian baik suka maupun

duka pasti tak’kan terlupakan.

14. Teman-teman Farmasi C atas kebersamaan, kekompakkan, dan kenangan

bersama selama 4 tahun ini menjadi pengalaman yang berharga bagi

penulis.Terimakasih banyak kepada kepala suku Farmasi C Randy Teja

yang selalu memberikan tutorial kepada teman-teman farmasi C sehingga

menjadi lebih baik.

15. Terima kasih juga kepada Deddy yang telah membantu mentranslet.

16. Teman kos Bendungan tangga No.9 atas kebersamaan kalian selama ini

yang telah memberikan canda tawa baik senang maupun duka didalam

gubuk kos yang sederhana. Tak lupa penulis ucapkan kepada sesepuh kos

bendungan tangga no.9 kak Susan yang telah memberikan keharmonisan

antar sesama penghuni kos.

vi

Penulis mengucapkan terima kasih banyak atas semua bantuan dan dukungan

yang telah diberikan dan semoga kebaikan semuanya mendapat balasan dari

Tuhan Yang Maha Esa. Akhir kata, penulis berharap semoga skripsi ini membawa

manfaat bagi pengembangan ilmu pengetahuan khususnya di dalam bidang

farmasi.

Malang, 11 Agustus 2014

Penulis

Desty Widya Pentasari

vii

RINGKASAN

AKTIVITAS ANTIOKSIDAN PADA BUAH PAPRIKA MERAH

(Capsicum annum) DENGAN METODE DPPH SECARA IN

VITRO

Radikal bebas adalah molekul yang sangat reaktif karena memiliki

elektron yang tidak berpasangan dalam orbital luarnya sehingga dapat bereaksi

dengan molekul sel tubuh dengan cara mengikat molekul sel tersebut (Wijaya,

1996). Didalam tubuh, radikal bebas berasal dari dua sumber yaitu sumber

endogen dan eksogen, namun jika keberadaannya melebihi daya proteksi endogen,

radikal bebas dan senyawa oksigen reaktif dapat merusak membran sel,

mengoksidasi Low Density Lipoprotein (LDL) yang merupakan faktor utama

penyebab penyakit jantung koroner dan menginisiasi terjadinya kanker dengan

mengoksidasi DNA.(Reynertson, 2007). Antioksidan adalah senyawa kimia yang

dapat menyumbangkan satu atau lebih elektron kepada radikal bebas, sehingga

radikal bebas tersebut dapat diredam (Kuncahyo dan Sunardi, 2007). Tubuh kita

juga mengandung sejumlah enzim antioksidan yang penting seperti, dismutase

superoksia (SOD) yang berfungsi mengubah radikal bebas superoksida yang

berbahaya menjadi hidrogen peroksida yang lebih aman (Susi Purwoko, 2005),

namun dengan antioksidan primer saja tidak cukup kuat meredam radikal bebas

yang dihasilkan setiap harinya oleh tubuh, sehingga tubuh membutuhkan asupan

seyawa dari luar. Tanaman dari genus Capsicum, seperti paprika merah

(Capsicum annum) merupakan tanaman yang berasal dari Amerika. Mempunyai

pigmen antosianin yang berperan sebagai antioksidan sehingga dapat mengurangi

resiko penyakit jantung, resiko stroke, dan lain-lain. Selain itu, mengandungg

vitamin C tertinggi diantara jenis paprika lainnya (Astawan, 2009). Penelitian ini

bertujuan untuk mengetahui bagaimana aktivitas antioksidan pada ekstrak buah

paprika merah menggunakan DPPH.

Radikal bebas dalam jumlah berlebih di dalam tubuh sangat berbahaya

yang dapat menyebabkan penyakit kanker dan jantung koroner. Dengan

antioksidan, radikal bebas dapat dihambat dengan cara mendonorkan elektronnya

(Winarsi, 2007). Senyawa kimia yang termasuk kelompok antioksidan yang dapat

ditemukan pada tanaman berasal dari golongan polifenol, vitamin C,vitamin E, ß-

karoten dan flavonoid (Hernani & Rahardjo, 2005). Paprika merah mengandung

pigmen antosianin dan vitamin C yang berperan sebagai antioksidan.

Buah paprika merah sebanyak 4kg dibersihkan dan dipotong kecil-kecil

selanjutnya dikeringkan menggunakan oven pada suhu 40oC. Pengeringan ini

dilakukan guna mendapatkan simplisia yang tidak mudah rusak dan mencegah

perusakan simplisia dari pembusukan. Selanjutnya dilakukan maserasi dengan

pelarut etanol 96% selama 3 hari, dan filtrat dikumpulkan lalu dipekatkan dengan

rotavapor sampai mendapatkan esktrak yang kental. Setelah didapatkan ekstrak

kental dilakukan uji identifikasi golongan senyawa polifenol dan tanin. Pada

identifikasi polifenol dan tanin hasil positif ditunjukkan dengan terbentuknya

endapan pada penambahan gelatin dan natrium klorida, sedangkan dengan

penambahan FeCl3 ditunjukkan dengan terbentuknya larutan biru kehitaman atau

hijau kehitaman (Farnsworth, 1966). Pada pengujian dengan KLT penampak noda

viii

yang digunakan FeCl3 1% dalam air, yang menimbulkan warna hijau, merah,

ungu, biru, atau hitam yang kuat (Harborne, 1987).

Pada identifikasi flavonoid, dilihat dengan perubahan larutan uji menjadi

warna merah menunjukkan adanya flavon, warna jingga untuk flavanol, dan

warna hijau untuk aglikon dengan penambahan serbuk magnesium dan HCl pekat

(Fransworth, 1966). Identifikasi selanjutnya dengan cara menguji dengan KLT

menggunakan eluen yang sesuai, hasil KLT disemprot menggunakan Asam sulfat

pekat dan memberikan fluorosensi hijau-kuning pada sinar UV dengan panjang

gelombang 366 nm menunjukkan hasil positif flavonoid (Harborne, 1987).

Selanjutnya dilakukan uji aktivitas antioksidan secara kuantitatif dengan

metode DPPH menggunakan spektrofotometri UV-Vis pada panjang gelombang

516 nm dengan vitamin C sebagai kontrol positif. Setelah didapatkan nilai

absorbansi pada ekstrak etanol buah paprika merah dan vitamin C dianalisis

dengan program SPSS yaitu analisis probit. Proses pengolahan data program ini

adalah mengkorelasikan konsentrasi larutan uji dengan hasil absorbansi. Sehingga

didaptkan nilai IC50 yaitu konsentrasi sampel yang meredam radikal DPPH

sebanyak 50%.

Hasil penelitian ini menunjukkan bahwa ekstrak etanol buah paprika

merah mengandung flavonoid dan polifenol. Sedangkan untuk pengujian aktivitas

antioksidnnya secara in vitro menunjukkan nilai IC50 ekstak etanol buah paprika

merah sebesar 94,751 µg/ml dan nilai IC50 vitamin C sebagai kontrol positif

sebesar 16,887 µg/ml. Ini menunjukkan bahwa, ekstrak etanol buah paprika merah

mempunyai aktivitas antioksidan yang aktif. Perlu dilakukan penelitian lebih

lanjut secara in vivo dan isolasi senyawa yang berperan sebagai antioksidan.

ix

ABSTRAK

AKTIVITAS ANTIOKSIDAN PADA BUAH PAPRIKA MERAH

(Capsicum annum) DENGAN METODE DPPH SECARA IN

VITRO

DESTY WIDYA PENTASARI

Latar Belakang: Radikal bebas adalah molekul yang sangat reaktif karena

memiliki elektron yang tidak berpasangan dalam orbital luarnya. Tubuh secara

alami dapat mengatasi peningkatan radikal bebas, namun dengan antioksidan

primer saja tidak cukup kuat untuk meredam radikal bebas yang dihasilkan setiap

harinya oleh tubuh, sehingga membutuhkan asupan antioksidan dari luar.

Antioksidan adalah senyawa kimia yang dapat menyumbangkan satu atau lebih

elektron kepada radikal bebas, sehingga radikal bebas dapat diredam. Paprika

merah (Capsicum annum) mengandung vitamin C tertinggi diantara paprika jenis

lainnya yang berkhasiat sebagai antioksidan.

Tujuan: Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui aktivitas antioksidan pada

ekstrak buah paprika merah menggunakan 1,1-Di Phenyl-2Picryl Hydrazyl

(DPPH).

Metode: Ekstraksi yang digunakan dengan cara maserasi selama 3 hari

menggunakan etanol 96%. Filtrat diupkan dengan Rotary evaporator untuk

mendapatkan ekstrak kental. Ekstrak kental yang diperoleh, kemudian diuji

aktivitas antioksidannya secara kuantitatif dengan metode DPPH menggunakan

spektrofotometri UV-Vis pada panjang gelombang 516 nm dengan vitamin C

sebagai kontrol positif.

Hasil & Kesimpulan: Hasil pengujian aktivitas antioksidan secara in vitro

menunjukkan bahwa nilai IC50 ekstak etanol buah paprika merah sebesar 94,751

µg/ml dan nilai IC50 vitamin C sebagai kontrol positif sebesar 16,887 µg/ml. Ini

menunjukkan bahwa, ekstrak etanol buah paprika merah mempunyai aktivitas

antioksidan yang aktif.

Kata Kunci : antioksidan, paprika merah, Capsicum annum, DPPH

x

ABSTRACT

ANTIOXIDANT ACTIVITY OF RED PAPRICA FRUIT

(Capsicum annum) WITH IN VITRO DPPH METHOD

DESTY WIDYA PENTASARI

Background: Free radical is very reactive molecules because it has unpaired

electron in orbital exosystems. Body naturally can avoid the increasing of free

radical but with the primer antioxidant only is not enough to cover free radical

that have been made by the body every day, so need some antioxidant addition

from outside. Antioxidant is chemical compound that can donate one or more of

this electron to free radical, so free radical can be avoided. The contain of vitamin

C on red paprica (Capsicum annum) is the highest than the others kind of paprica

that used for antioxidant.

Purpose: This research is to know the antioxidant activity on the extract of red

paprica fruit using 1,1-Di Phenyl-2Picryl Hydrazyl (DPPH).

Method: The extraction method is maseration for 3 days using ethanol 96%. The

filtrate will be evaporated by Rotary Evaporator to get the thick extract. The thick

extract will be tested the quantitative of antioxidant activity using DPPH method

on spectrofotometer UV-Vis on the wavelength at 516 nm with vitamin C as

positive control.

Result and Conclusion: The result of the test showed that the IC50 value of the

ethanol extract of Red Paprica fruit is 94,751 µg/ml and the IC50 value of vitamin

C is16,887 µg/ml. This is show that the antioxidant activity of ethanol extract of

red paprica fruit.

Key Words : antioxidant, red paprica, Capsicum annum, DPPH

xi

DAFTAR ISI

HALAMAN JUDUL ......................................................................................... i

LEMBAR PENGESAHAN ............................................................................... ̀ ii

LEMBAR PENGUJIAN .................................................................................... iii

KATA PENGANTAR ........................................................................................ iv

RINGKASAN ...................................................................................................... vii

ABSTRAK .......................................................................................................... ix

ABSTRACT ....................................................................................................... x

DAFTAR ISI ....................................................................................................... xi

DAFTAR TABEL ............................................................................................. xvi

DAFTAR GAMBAR .........................................................................................xvii

DAFTAR LAMPIRAN ....................................................................................... xix

DAFTAR SINGKATAN .................................................................................... xx

BAB I PENDAHULUAN

1.1 Latar Belakang Masalah .......................................................................... 1

1.2 Rumusan Masalah.................................................................................... 3

1.3 Tujuan Penelitian ..................................................................................... 3

1.4 Manfaat Penelitian ................................................................................... 3

1.5 Hipotesis .................................................................................................. 3

BAB II TINJAUAN PUSTAKA

2.1 Tinjauan Paprika ...................................................................................... 4

2.1.1 Klasifikasi Paprika ........................................................................ 4

2.1.2 Deskripsi Paprika .......................................................................... 4

2.1.3 Kandungan Paprika ....................................................................... 5

2.1.4 Kegunaan dan Manfaat Paprika .................................................... 5

2.2 Tinjauan Tentang Ekstraksi ..................................................................... 6

2.2.1 Metode Ekstraksi dengan Menggunakan Pelarut .......................... 7

2.2.1.1 Cara Dingin ....................................................................... 7

xii

2.2.2.2 Cara Panas ......................................................................... 8

2.3 Tinjauan Tentang Oksidasi .................................................................... 8

2.4 Tinjauan Tentang Radikal Bebas ............................................................. 9

2.5 Tinjauan Tentang Antioksidan ............................................................... 10

2.5.1 Pengertian Antioksidan ................................................................ 10

2.5.2 Klasifikasi Antioksidan ................................................................ 11

2.5.3 Mekanisme Kerja Antioksidan ..................................................... 13

2.6 Tinjauan Tentang Vitamin C .................................................................. 14

2.7 Tinjauan Tentang Pengujian Antioksidan .............................................. 15

2.7.1 Tinjauan Tentang ORAC method ................................................ 15

2.7.2 Tinjauan Tentang TRAP method ................................................. 15

2.7.3 Tinjauan Tentang TEAC method ................................................. 16

2.7.4 Tinjauan Tentang FRAP method ................................................. 16

2.7.5 Tinjauan Tentang DPPH method ................................................. 16

2.8 Tinjauan Tentang Spektrofotometri UV-Vis .......................................... 18

BAB III KERANGKA KONSEPTUAL

3.1 Kerangka Konseptual ............................................................................. 20

3.2 Hipotesis ................................................................................................. 21

BAB IV METODE PENELITIAN

4.1 Tempat Penelitian ................................................................................... 22

4.2 Bahan Penelitian ..................................................................................... 22

4.2.1 Bahan Tanaman ............................................................................ 22

4.2.2 Bahan Kimia................................................................................. 22

4.3 Alat Penelitian ........................................................................................ 22

4.4 Rancangan Penelitian ............................................................................. 23

4.4.1 Design Penelitian ......................................................................... 23

4.4.2 Variabel Penelitian ....................................................................... 23

4.5 Prosedur Penelitian ................................................................................. 24

xiii

4.5.1 Ekstraksi Buah Paprika Merah ..................................................... 24

4.5.1.1 Persiapan Serbuk Simplisia .............................................. 24

4.5.1.2 Pembuatan Ekstrak Etanol Etanol Buah Paprika merah .. 24

4.5.2 Penampisan Fitokimia .................................................................. 24

4.5.2.1 Identifikasi Golongan Senyawa Polifenol dan Tanin....... 24

4.5.2.2 Identifikasi Golongan Senyawa Flavonoid ...................... 25

4.5.3 Uji Aktivitas Antioksidan ........................................................... 26

4.5.3.1 Pembuatan Larutan Ekstrak Paprika Merah (LBI)........... 26

4.5.3.2 Pembuatan Larutan DPPH 0,4mMol ............................... 26

4.5.3.3 Pengukuran Absorbansi DPPH ........................................ 26

4.5.3.4 Pembuatan Larutan Uji (LU) ........................................... 26

4.5.3.5 Pembuatan Larutan Vitamin C (kontrol positif) .............. 27

4.5.3.6 Pembuatan Larutan Blanko .............................................. 27

4.5.3.7 Proses Inkubasi ................................................................ 27

4.5.3.8 Pengukuran Absorbansi ................................................... 27

4.6 Bagan Alur Kerja .................................................................................... 28

4.6.1 Alur Kerja Pembuatan Ekstrak Etanol Buah Paprika merah ....... 28

4.6.2 Penapisan Fitokimia ..................................................................... 29

4.6.2.1 Identifikasi Golongan Senyawa Polifenol dan Tanin ...... 29

4.6.2.2 Identifikasi Golongan Senyawa Flavonoid ..................... 30

4.6.3 Pembuatan Larutan Uji Aktivitas Antioksidan ............................ 31

4.6.3.1 Larutan Ekstrak Paprika merah (LBI) ............................. 31

4.6.3.2 Pembuatan Larutan DPPH 0,4mMol ............................... 32

4.6.3.3 Pengukuran Absorbansi DPPH ....................................... 32

4.6.3.4 Pembuatan Larutan Uji .................................................... 33

4.6.3.5 Pembuatan Larutan Vitamin C ........................................ 34

4.6.3.6 Pembuatan Larutan Blanko Serapan DPPH 0,4mMol .... 34

4.7 Analisis Data........................................................................................... 35

xiv

4.7.1 Data Absorbansi ........................................................................... 35

4.7.2 Perhitungan % Inhibisi ................................................................. 35

4.7.3 Perhitungan IC50 ................................................................................. 35

BAB V HASIL PENELITIAN

5.1 Hasil Ekstrak Etanol Buah Paprika Merah (Capsicum annum) ............. 36

5.2 Hasil Uji Penapisan Fitokimia Ekstrak Etanol Buah Paprika Merah ..... 37

5.2.1 Hasil Uji Warna Golongan Polifenol dan Tanin .......................... 37

5.2.2 Hasil Uji Warna Golongan Flavonoid ......................................... 37

5.3 Hasil Uji KLT Ekstrak Etanol Buah Paprika Merah .............................. 38

5.3.1 Hasil Uji KLT pada Golongan Polifenol dan Tanin .................... 38

5.3.2 Hasil Uji KLT pada Golongan Flavonoid .................................... 39

5.4 Hasil Pengukuran Aktivitas Aantioksidan dengan Metode Peredaman

DPPH Menggunakan Spektrofotometri .................................................. 41

5.4.1 Hasil Pengukuran Aktivitas Antioksidan Vitamin C Sebagai

Kontrol Positif dengan Metode Peredaman DPPH ........................ 41

5.4.2 Hasil Pengukuran Absorbansi Aktivitas Antioksidan Vitamin C

dengan Metode DPPH Mengunakan Spektrofotometri ................. 41

5.4.3 Hasil Pengukuran Absorbansi Aktivitas Antioksidan Vitamin C

dengan Metode DPPH Menggunakan Spektrofotometri dan

Nilai % Inhibisi ............................................................................. 42

5.4.4 Hasil Penentuan Panjang Gelombang Maksimum DPPH yang

Digunakaan Pengukuran Pada Ekstrak Etanol Paprika Merah ...... 43

5.4.5 Hasil Pengukuran Operating time Aktivitas Antioksidan Ekstrak

Etanol Buah Paprika Merah dengan Metode DPPH

Menggunakan Spektrofotometri .................................................... 43

5.4.6 Hasil Pengukuran Absorbansi Ekstrak Etanol Buah Paprika

Merah Menggunakan Metanol p.a Secara Spektrofotometri ......... 44

5.4.7 Hasil Pengukuran Aktivitas Antioksidan Ekstrak Etanol Buah

Paprika Merah Secara Spektrofotometri Menggunakan DPPH .... 45

xv

5.4.8 Hasil Pengukuran Larutan Sampel ................................................ 45

5.4.9 Hasil Pengukuran aktivitas Antioksidan Ekstrak Etanol Buah

Paprika Merah dengan Metode DPPH Menggunakan

Spektrofotometri dan Nilai % Inhibisi ........................................... 46

5.5 Analisis Data........................................................................................... 47

BAB VI PEMBAHASAN

Pembahasan .................................................................................................. 48

BAB VII KESIMPULAN DAN SARAN

7.1 Kesimpulan ............................................................................................. 54

7.2 Saran ....................................................................................................... 54

DAFTAR PUSTAKA ............................................................................................... 55

xvi

DAFTAR TABEL

Tabel

2.1 Tingkat Kerusakan Antioksidan dengan Metode DPPH ..................................... 18

5.1 Hasil Penapisan fitokimia dari Ekstrak Etanol Buah Paprika Merah ................. 38

5.2 Hasil KLT dari Ekstrak Etanol Buah Paprika Merah.......................................... 40

5.3 Data Pengukuran Operating time Pada Absorbansi Vitamin C dengan DPPH

Pada Lamda Maksimum 516 nm ....................................................................... 41

5.4 Data Pengukuran Absorbansi Vitamin C dengan Spektrofotometri

Menggunakan DPPH Pada Menit ke-20 dan Lamda Maks. 516 nm ................. 42

5.5 Hasil Pengukuran Aktivitas Antioksidan Vitamin C dengan DPPH Pada

Lamda 516 nm Serta Nilai % Inhibisi ................................................................. 42

5.6 Data Pengukuran Lamda Maksimum Larutan DPPH 0,4mMol ......................... 43

5.7 Data Pengukuran Operating time Pada Absorbansi Ekstrak Etanol Buah

Paprika Merah dengan DPPH Pada Lamda Maksimum 516 nm ........................ 44

5.8 Data Pengukuran Absorbansi Ekstrak Etanol Buah Paprika Merah dengan

Spektrofotometri Menggunakan Metanol p.a ..................................................... 44

5.9 Data Pengukuran Absorbansi Ekstrak Etanol Buah Paprika Merah dengan

Spektrofotometri Menggunakan DPPH Pada Menit ke-65 dan Lamda Maks.

516nm .................................................................................................................. 45

5.10 Kontrol Warna ................................................................................................... 46

5.11 Hasil Pengukuran Aktivitas Antioksidan Ekstrak Etanol Buah Paprika

Merah dengan DPPH Pada Lamda 516 nm Serta Nilai % Inhibisi ................... 46

xvii

DAFTAR GAMBAR

Gambar

2.1 Paprika Merah (Capsicum annum)...................................................................... 4

2.2 Mekanisme Pembentukan Radikal Bebas ........................................................... 10

2.3 Reaksi Penghambatan Antioksidan Primer Terhadap Radikal Lipida ................ 13

2.4 Rumus Bangun Vitamin C .................................................................................. 14

2.5 Reaksi Radikal DPPH dengan Antioksidan ........................................................ 17

3.1 Kerangka Konseptual .......................................................................................... 21

4.1 Bagan Alur Kerja Ekstraksi Etanol Paprika Merah dengan Metode Maserasi ... 28

4.2 Bagan Alur Kerja Identifikasi Golongan Senyawa Polifenol dan Tanin ............ 29

4.3 Bagan Alur Kerja Identifikasi Golongan Senyawa Flavonoid ............................ 31

4.4 Bagan Alur Kerja Pembuatan Larutan Ekstrak Paprika Merah (LBI) ................ 31

4.5 Bagan Alur Kerja Pembuatan Larutan DPPH 0,4mMol ..................................... 32

4.6 Bagan Alur Kerja Pengukuran Absorbansi Larutan DPPH 0,4mMol................. 32

4.7 Bagan Alur Pembuatan Larutan Uji (LU) Aktivitas Antioksidan Buah

Paprika Merah dengan Metode DPPH .............................................................. 33

4.8 Bagan Alur Kerja Pembuatan Larutan Kontrol Vitamin C ................................. 34

4.9 Bagan Alur Kerja Pembuatan Larutan Blanko.................................................... 34

5.1 Ekstrak Kental Buah Paprika Merah (Capsicum annum) ................................... 36

5.2 Hasil Penapisan Fitokimia Identifikasi Golongan Senyawa Polifenol dan

Tanin .................................................................................................................. 37

5.3 Hasil Penapisan Fitokimia Identifikasi Golongan Senyawa Flavonoid .............. 38

5.4 Hasil KLT Senyawa Polifenol dan Tanin ........................................................... 39

xviii

5.5 Hasil KLT Senyawa Flavonoid Dari Ekstrak Etanol Buah Paprika Merah

dengan Fraksi Etanol ......................................................................................... 39

5.6 Hasil KLT Senyawa Flavonoid Dari Ekstrak Etanol Buah Paprika Merah

dengan Fraksi N-heksana ................................................................................... 40

5.7 Grafik Kadar vs % Inhibisi Vitamin C ................................................................ 43

5.8 Grafik Kadar vs % Inhibisi Ekstrak Etanol Buah Paprika Merah ....................... 47

xix

DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran

1 Daftar Riwayat Hidup ............................................................................................ 60

2 Surat Pernyataan..................................................................................................... 61

3 Perhitungan ............................................................................................................ 62

4 Alat dan Bahan ....................................................................................................... 65

5 Penentuan Panjang Gelombang Maksimum DPPH ............................................... 71

6 Penentuan Waktu Kestabilan Kompleks (Operating time) .................................... 73

7 Pengukuran Absorbansi Vitamin C ........................................................................ 75

8 Pengukuran Ekstrak Tanpa DPPH ......................................................................... 83

9 Pengukuran Absorbansi Ekstrak Dengan Penambahan DPPH .............................. 86

10 Hasil Analisis Probit Vitamin c............................................................................ 97

11 Hasil Analisis Probit Ekstrak Etanol Buah Paprika Merah .................................. 99

xx

DAFTAR SINGKATAN

LDL : Low Density Lipoprotein

ROS : Reactive Oxygen Species

BHA : Butylated Hidroxy Anisol

BHT : Butylated Hidroxy Toluen

TBHQ : Tert-Butylated Hidroxy Quinone

ORAC method : Oxygen Radical Absorbance Capacity method

TRAP method : Total Radical-Trapping Antioxidant Parameter method

TEAC method : Trolox Equivalent Antioxidant Capacity method

FRAP method : Ferric Reducing/ Antioxidant Power method

DPPH : 2,2-diphenylpicrylhydrazyl

xxi

DAFTAR PUSTAKA

Almatsier, S., 2004. Prinsip Dasar Ilmu Gizi. Jakarta: Gramedia

Arifin, A., Anggraini, N., Handayani, D., Rasyid, R., 2006. Standarisasi ekstrak

etanol daun Eugenia cumini Mert, Jurnal Sains Teknik Farmasi. 11 (2), pp.

88-93

Astawan, M., 2009, Paprika Bikin Agresif Sperma. KOMPAS. Senin, 21

Desember 2009. http://www.www.CBN.com. Diakses tanggal 20 November

2013.

Bast, A., 1991. “Oxidants and Antioxidants: State of The Art.” The American

Journal of Medicina, Proceeding of A Symposium Oxidants and

Antioxidants: Pathophislologic Determinant and Therapeutic Agent

Belleiye, Nabet, F., 1996. Zat Gizi Antioksidan Penangkal Senyawa Radikal

Pangan dalam Sistem Biologis. Prosiding Seminar Senyawa Radikal dan

Sistem Pangan: Reaksi Biomolekuler, Dampak terhadap Kesehatan dan

Penangkalan. CFNS-IPB dan Kedutaan Besar Prancis-Jakarta

Buck, D. F., 1991. Antioxidants. In:Food Additives User’s Handbook (J.

Smith, ed). Blackie & Son, London, p.1.

Cahyono, B., 2003. Teknik Budi Daya dan Analisis Usaha Tani. Yogyakarta:

Kanisius.

Chanda, S. dan Dave, R., 2009. In Vitro Models for Antioxidant Activity

Evaluation and Some Medicinal Plants Antioxidant Properties : An Overview.

African Journal of Microbiology Research, 3(13), 981-996.

Cronin, J. R., 2004. Comaparing Antioxidant Values with The ORAC Method.

Alternative and Complementary Therapies., Vol. 10 (3): 167-170

Dalimartha, dan Soedibyo, 1999, Awet Muda dengan Tumbuhan Obat dan

Suplemen. Semarang: Trubus Agriwidya, Halaman 1-8.

Demple, B. dan L. Harrison., 1994. Annual Review Biochemistry. 63: 915-948.

Depkes. RI., 1979. Farmakope Indonesia Edisi III. Jakarta: Departemen

Kesehatan Republik Indonesia

Depkes. RI., 1985. Cara Pembuatan Simplisia. Jakarta: Ditjen POM

Depkes. RI., 1995. Farmakope Indonesia Edisi IV. Jakarta: Departemen

Kesehatan Republik Indonesia.

xxii

Depkes. RI., 2000. Parameter Standar Umum Ekstrak Tumbuhan Obat.

Jakarta: Ditjen POM

Edawati, Z., 2012. Uji Aktivitas Antioksidan Ekstrak Metanol Ascidia Didemnum

sp. Dari Kepulauan Seribu Dengan Metode 1,1-Difenil-2-Pikrilhidrazil

(DPPH) dan Identifikasi Golongan Senyawa Dari Fraksi Teraktif. Depok:

Skripsi Sarjana Farmasi.

Farnsworth, N.R., 1966. Biologial and Phytoemial Sreening of Plants. Journal of

Pharmaeutical Sciences, Vol. 55 No. 3: 255-276

Febriani, K., 2012. Uji Aktivitas Antioksidan Ekstrak Dan Fraksi Daun Cocculus

orbiculatus (L.) DC. Dengan Metode DPPH dan Identifikasi Golongan

Senyawa Kimia Dari Fraksi Yang Aktif. Depok: Skripsi Program Studi

Farmasi.

Fessender, R. J. And Fessenden, J.S., 1991. Kimia Organik (terjemahan). Edisi

ke-3 Jilid 1, Surabaya: Penerbit Erlangga, hal 223, 227, 238

Fransworth, N.R., 1966. Biologial and Phytoemial Sreening of Plants. Journal of

Pharmaeutical Sciences, Vol. 55 No. 3: 255-276

Friedberg, E.C., G.C. Walker, dan W. Siede., 1995. DNA Repair and

Mutagenesis. American Society and Microbiology. Washington DC.

Gandjar, G.I., Rohman. A., 2007. Kimia Farmasi Analisis. Yogyakarta: Pustaka

Pelajar.

Gordon, M., 1990. The Mechanism of Antioxidant Action in Vitro. Di dalam:

Hudson, B. J. F. (Ed.) Food Antioxidant. Elsevier Applied Science. New

York. Hal: 1-18

Guntarti, A., Warsi, 2013. Aktivitas Antioksidan Ekstrak Metanol Buah Paprika

Hijau (Capsicum annum L.). Jurnal Ilmiah Kefarmasian, Vol. 3, No. I,

2013: 9-19

Harborne, J.B., 1987. Metode Fitokimia, Penuntun Cara Modern

Mengekstraksi Tumbuhan ( Kosasih Padmawinata & Iwang Soediro,

Penerjemah). Bandung: penerbit ITB.

Hart, H., 1983. Kimia Organik Suatu Kuliah Singkat. Ed-11. Achmadi, S.,

penerjemah, Jakarta: Erlangga. Terjemahan dari: Organic Chemistry.

Hattenschwiller, S., dan Vitousek, P. M., 2000. The Role Of Polyphenols

Interrestrial Ecosystem Nutrient Cycling. Review PII: S0169-

5347(00)01861-9.

Hernani, R., 2005, Tanaman Berkhasiat Antioksidan, dalam Penebar Swadaya

Wisma Hijau, halaman 9–15.

xxiii

Husnah, M., Barroroh, H., Hayati, E. K., 2009. Identifikasi dan Uji Aktivitas

Golongan Senyawa Antioksidan Ekstrak Kasar Buah Pepino (Solanum

muricatum Aiton) Berdasarkan Variasi Pelarut. Malang: Laporan Penelitian.

Universitas Islam Negeri Maulana Malik Ibrahim.

Kuncahyo, I. S., 2007. Uji aktivitas ekstrak belimbing wuluh (Averrhoa

bilimbi, L) terhadap 1,1-Diphenyl-2-Picrylhidrazyl (DPPH). Yogyakarta:

Fakultas Teknik, Universitas Setia Budi.

Lampe, J. W., 1999. Health Effects of Vegetables and Fruit: Assessing

Mechanisms of Action Human Experimental Studies. The American Journal

of Clinical Nutrition. 70 Suppl: 475S-490S.

Langseth, L., 1995. Oxidant, Antioxidant, and Disease Prevention. Belgium:

International Life Science Institute press.

Levine, M., Dhariwal, K. R., Welch, R. W., Wang, Y., and Park, J. B., 1995.

Determination of optimal vitamin C requirements in humans. The American

Journal of Clinical Nutrition. 62 (suppl): 1347S- 1356S.

Lingga, L., 2010. Cerdas Memilih Sayuran. Jakarta: Agromedia.

Ma’mun, Suhirman, S., Manoi, F., Sembiring, B. S., Tritianingsih, Sukmasari, M.,

Gani, A., Tjiitjah, Kustiwa, D., 2006. Teknik Pembuatan Simplisia dan

Ekstrak Purwoceng. Laporan Pelaksanaan Penelitian Tanaman Obat dan

Aromatik Tahun 2006

Markham, K.R., 1988. Cara Mengidentifikasi Flavonoid, Bandung: penerbit

ITB.

Marx, J. L., 1985. “Oxygen Free Radical Linked to Many Diseases.” Science, Ed.

235, hal 529-531.

Meydani, S.N., D. Wu, M.S. Santos, dam M.G. Hayek, 1995. Antioxidant and

Immune Response in Aged Persons: Overview of Present Evidence, The

American Journal of Clinical Nutrition. 62: 1462S-1476S.

Mimic-Oka J., Simic D.V., Simic T.P., 1991. Free radical in cardiovascular

disease. Sci J Fac Univ 6: 11-12

Molyneux, P., 2004. The use of the stable free radical diphenylpicryl-hydrazyl

(DPPH) for estimating antioxidant activity. Journal of Science and

Technology, 26: 211-219.

Muchtadi, D., 2013. Antioksidan dan Kiat Sehat di Usia Produktif. Bandung:

Alfabeta

xxiv

Murray, R. K., 1995. “Oksidasi Biologi,” Biokimia Harper (terjemahan). Edisi

ke-22, Jakarta: Penerbit Buku Kedokteran EKG, hal 125-135

Parwata, O. A., Ratnayani, K., Listya, A., 2010. Aktivitas Antiradikal Bebas Serta

Kadar Beta Karoten Pada Madu Randu (Cerba pentandia) dan Madu

Kelengkeng (Nephelium Longata L.). Jurnal Kimia 4 (1), Januari 2010: 54-

62 Passamonti, S., Vrhovsek, U., Vanzo, A., dan Mattivi, F., 2003. The stomach as a

site for anthocyanins absorption from food. FEBS Letters, 544, 210-213

Prakash, A., Rigelhof, F., Miller, E., 2001. Antioxidant activity, Medallion

Laboratories Analytical Progress, Vol. 19: 1-4.

Pramono, S., 2006. Penanganan Pasca Panen dan Pengaruhnya Terhadap Efek

Terapi Obat Alami. Prosiding Seminar Nasional Tumbuhan Obat

Indonesia XXVIII, Bogor, 15-18 Sept. 2005. Hal 1-6.

Pratt, D. E., 1992. Natural Antioxidant from plant material. In: Huang M.T., C.T.

Ho, C.Y. Lee (Eds). Phenolic Compound in Food and Their Effect on

Health. Washington DC. American Society.

Purwaningsih, S., 2012. Aktivitas Antioksidan dan Komposisi Kimia Matah

Merah (Cerithldea obtusa). Bogor: Ilmu Kelautan, Vol. 17 (1) 39-48.

Purwoko, S., 2005. Manfaat Vitamin C dan E Bagi Kesehatan. Jakarta: Arcan,

2005. VII, 131 hal; 14 X 21 cm.

Putri, I.J., Fauziyah, Elfita, 2013. Aktivitas Antioksidan Daun dan Biji Buah

Nipah (Nypa fruticans) Asal Pesisir Banyuasin Sumatera Selatan dengan

Metode DPPH. Sumatera Selatan: Jurnal Maspari, Vol. 15 (1) 16-21.

Reynertson, K.A., 2007. Phytochemical analysis of bioactive constituens from

edible Myrtaceae fruit. Dissertation. New York: The City University of New

York.

Sumardika, W., Jawi, M., 2012. Ekstrak Air Daun Ubijalar Ungu Memperbaiki

Profil Lipid dan Meningkatkan Kadar Sod Darah Tikus yang Diberi Makanan

Tinggi Kolesterol. Medicina, Vol. 43 No. 2: 67-41

Sandhiutami, D., Rahayu, L., Oktaviani, T., Sari, L.Y. Uji Aktivitas

Antioksidan Rebusan Daun Sambang Getih (Hemigraphis bicoolar Boerl.)

dan Sambang Solok (Aerva sanguinolenta (L.) Blume) Secara In Vitro.

Fakultas Farmasi, Universitas Pancasila.

Shivaprasad, H.N., S. Mohan., M.D. Kharya. 2005. In-vitro Models for

Antioxidant Ativity Evaluation. A Review. http://www.phamainfo.net.

Diakses tanggal 17 Juli 2014.

xxv

Syukur, R., Alam, G., Mufidah, Rahim, A., Tayeb, R., 2011. Aktivitas Antiradikal

Bebas Beberapa Ekstrak Tanaman Familia Fabaceae. JST Kesehatan, Vol.1

No.1 : 61-67

Teow, C. C., Truong, V., McFeeters, R. F., Thompson, R. L., Pecota, K. V.,

Yencho, G. C., 2007. Antioxidant Activities, Phenolics, and β–Carotene

Contents of Sweet Potato Genotypes with Vaying Flesh Colours, Journal of

Food Chemistry, 103: 829-838

Trilaksani, W., 2003. Antioksidan: Jenis, Sumber, Mekanisme Kerja dan

Peran Terhadap Kesehatan, Institute Pertanian Bogor, Bogor, hal 1-12

Tuminah, S., 2000. Pencegahan kanker dengan antioksidan. Cermin Dunia

Kedokteran 122:21-23.

Waji. R.A., Sugrani. A., 2009. Flavonoid (Quercetin). Makasar: Makalah Kimia

Organik Bahan Alam. Program S2 Kimia Universitas Hasanuddin.

Wang, C. C., Chu, C. Y., Chu, K. O., Choy, K. W., Khaw, K. S., Rogers, M. S.,

Pang, C. P., 2004. Trolox-Equivalent Antioxidant Capacity Assay Versus

Oxygen Radical Absorbance Capacity Assay in Plasma, Clinical Chemistry

Vol. 50 (5): 952-954.

Wijaya, A., 1996. Radikal bebas dan parameter status antioksidan. Forum

Diagnosticum, Prodia Diagnostic Educational Services, No. 1: 1-12

Winarsi, H., 2007. Antioksidan Alami dan Radikal Bebas. Yogyakarta: IKPI.

Wirakusumah, E. S., 2007. 202 Jus Buah da Sayuran. Jakarta: Penebar

Swadaya.

Wrolstad, R. E., 2004. Anthocyanin Pigments Bioactivity and Coloring

Properties. Journal of Food Science Vol. 69, Nr. 5, C419-C42.

Yenny, 2013. Uji Aktivitas Antioksidan Ekstrak Etanol Buah Cabai Rawit Hijau

(Capsicum frutescens L.) Dengan Metode DPPH dan Penetapan Kadar

Kapsaisin Secara Kromatografi lapis tipis (KLT) – densitometri. Yogyakarta:

Skripsi Sarjana Farmasi.

Yuniastuti, A., 2008. Gizi dan Kesehatan. Yogyakarta: Cetakan I. Graha Ilmu