Securite Laboratoires

Sécurité biologique dans les laboratoires de

microbiologie

D.S. Blanc

Médecine Préventive Hospitalière

CHUV

Buts

• protection du personnel

• protection des personnes en dehors du laboratoire

• protection de l'environnement

Cadre légal• Ordonnances

– Ordonnance sur l'utilisation d’organisme en milieu confiné– Ordonance sur la protection des travailleurs contre les risques

liés aux microorganismes– Ordonnance sur la protection de la maternité

• Recommandations SUVA:– Prévention des maladies professionnelles dans les laboratoires

de microbiologie diagnostique. 2003. 2869/27.f– Prévention des infections transmises par voie sanguine dans les

laboratoires médicaux. 2003. 2869/19.f– Prévention des atteintes à la santé lors des opérations de

désinfection. 1993. 2869/23.f– Prévention des maladies infectieuses transmises par voie

sanguine dans le secteur sanitaire. 2003. 2869/30.f– Tuberculose dans le cadre professionnel: Risques et prévention – Vaccination du personnel de santé– Allergie au latex

4 Niveaux de Sécurité Biologique (BSL): fonction (entre autres!) de la pathogénicité

des microorganismes utilisés

1: non pathogènes (ex. Bacillus subtilis)2: modérément pathogènes 3: causant des maladies sévères ou potentiellement

létales (HIV, B.anthracis)4: risque élevé de transmission par aérosol et

causant des infections léthales (FVH)Laboratoires de diagnostic microbiologique: BSL-2

Mesures de sécurités biologiques:

1. Infrastructures2. Pratiques microbiologiques3. Elimination des déchets4. Hygiène du lieu de travail5. Hygiène et prévention personnelle

1. Infrastructures

• L'accès au laboratoire est limité

• Un panneau de risque biologique doit être suspendu sur chaque porte d'accès des laboratoires

• Portes et fenêtres des lieux de travail doivent être fermées pendant le travail

2. Pratiques microbiologiques standards

• Pas de pipetage à la bouche

• Utilisation de matériel jetable de préférenceMatériel réutilisable doit être pré-désinfecté chimiquement ou thermiquement avant le nettoyage manuel (ex. pipettes en verres)

• Aiguilles hypodermiques et seringues:ne doivent être utilisées que si cela est absolument nécessaire et doivent être éliminées de manière sûre;le recapuchonage des aiguilles est proscrit

Pratiques microbiologiques standards

• Minimiser la production d’aérosols!Lorsqu'il y a possibilité de production d'aérosols entraînant un risque d'infection aérogène, la manipulation d'échantillons doit s'effectuer sous un flux de sécurité de classe II

• Port de gants obligatoire:

⇒ risque de contact cutané avec du matériel infectieux, une surface ou un équipement contaminés

⇒ travaille avec un récipient ouvert contenant du sang ou un autre liquide biologique

Pratiques microbiologiques standards

• Désinfection des récipients d'échantillons dont l'extérieur est souillé avant toute manipulation

• Contrôle de l'identité des micro-organismes de référence utilisés

Pratiques microbiologiques spécialesManipulation sous un flux laminaire de classe 2

Prélèvements respiratoires ou de tissus:

Production d'aérosol potentiellement infectieux

Hottes de sécurité biologique

Classe 1Classe 2

Classe 3

3. Classification et élimination des déchets du secteur de la santé

A. Déchets médicaux ne posant pas de problème, composition similaire à celle des déchets urbains

B. Déchets spéciaux

1. Danger de contamination (contenant du sang, des excrétions et des sécessions)

2. Danger de blessures

3. Médicaments périmés

4. Cytostatiques

C. Infectieux

D. Autres déchets spéciaux (chimiques, radioactifs…)

OUC: inactivation des déchets contaminés avant de les sortir des laboratoires

IMU-DAM: Élimination des déchets

Cultures de micro-organismes ou de cellulesÉchantillons de patients, reste d'analyseObjets ayant touchés des échantillons (tips de pipetage de sérum, …)

Déchets infectieux solidesFermeture du sac avec une attache zip

Autoclavage(IMU ou BH-03)

Dépôt dans les chariots prévus à cet effet


Tubes de cultures

Déchets infectieux liquides

Flacons de cultures Inactivation chimique(eau de Javel)

Evier

B2. Objets tranchants


Aiguilles, lames, pipette Pasteur

Déchets présentant un danger de blessure

B2. Objets tranchants


Bromure d'éthidiumRadiactivitéEtc…

Déchets toxiques

D. Pharmacie

Emballage adhoc


Emballages échantillonsEmballages de kitsRécipients de réactifs videsEssuie-mainssagex.Etc…

Déchets urbains

A. Déchets urbains

Sac gris

Liquide corporels et excrétions de personnes infectées: peuvent en principe être déversées dans les canalisations

Déchets ne présentant pas de risque (urbains): peu souillés de sang et peu contaminé (sparadraps, pansements, couches…)

CHUV: Recyclage des déchets

Papier Plastique AluminiumAttention: tous les documents contenant une identification de patient doivent être détruit de façon "sécurisée" (par exemple avec une déchiqueteuse).

4. Hygiène du lieu de travail

• Les lieux de travail doivent être parfaitement propres et en ordre; seuls les matériaux et appareils absolument nécessaires doivent s’y trouver; les réserves doivent être rangées dans les locaux et armoires prévus à cet effet

• Place de travail: responsable: personnel technique- maintient de l'ordre- nettoyage et désinfection après chaque travail ou à la fin de chaque journée, et après chaque souillure par du matériel viable

Hygiène du lieu de travail• Equipements: responsable: personnel technique

- Désinfection selon fiche techniqueUn équipement devra être désinfecté avant de le

sortir du laboratoire (changement de laboratoire, réparation, mise à la casse)

• Surfaces (sols et murs): responsable: service de maison- Selon le plan d'hygiène

• En cas de présence d'insectes ou de rongeurs, faire appel au Service de maison pour leur élimination

• Les animaux de compagnie sont interdits d'accès

5. Hygiène personnelle• Port de la blouse fermée (ou autres vêtements de

protection):

– obligatoire dans les lieux de travail!

– La blouse reste dans le laboratoire!!!

Hygiène personnelle

• Il est interdit de manger, de boire, de fumer, de priser, de manipuler des verres de contact, d’utiliser des produits cosmétiques ou d’entreposer de la nourriture dans les lieux de travail

Hygiène personnelle

Lavage/désinfection des mains

Il convient de se désinfecter (solution alcoolique) ou de se laver (savon désinfectant) soigneusement les mains:

• à la fin de chaque opération de travail

• après le port de gant

• avant de quitter le laboratoire

Prévention personnelle

• Vaccination contre les hépatites A et B:hautement recommandée pour tout le personnel

• Vaccination contre le méningocoque: recommandé pour le personnel des laboratoires de diagnostique

• Vaccin contre la grippe: recommandé

• Test à la tuberculine (Mantoux): à l'engagement, puis à rythme annuel s'il est négatif(chaque année pour le personnel du labo TB)

• Mise à jours des vaccins généraux (diTE, ROR, etc.): contrôle par la Médecine du Personnel lors de l'engagement

Prévention personnelle

•Grossesse suspectée ou confirmée:

Informer le médecin du personnel ou/et le supérieur responsable, afin que soient appréciés et discutés les risques éventuels du poste de travail actuel.

Vdoc: 6.4.2A Directives généralesDIR CHUV: Protection des collaboratrices enceintes ou qui allaitent

Ne sont pas autorisées pour les femmes enceintes(*: + 3 premiers mois d’allaitement)

•les manipulations du virus HIV, herpès simplex ou varicelle

•*les manipulations de sang ou autres liquides biologiques HIV ouHBV ou HCV positifs ou suspects de l’être

•les manipulations de prélèvements déclarés infectieux (point jaune)

•les manipulations d’agents bactériens* (tuberculose, listeria, gonocoque), viraux (en l’absence d’immunité démontrée : CMV, virus varicelle-zona, herpès, rougeole, rubéole, parvovirus B19) ou parasitaire (toxoplasmose): évaluation rigoureuse

•*Les activités avec des agents infectieux dans le cadre des laboratoires de recherches doivent dans tous les cas être évalués avec la Médecine du personnel.

Pour le général, voire le document « Application de l’ordonnance sur la protection de la maternité dans les Institutions Hospices-CHUV ».

Mesures de sécurité supplémentaires pour le laboratoire des mycobactéries

•Port des gants obligatoire pour toutes les manipulations de cultures

•Port d'une blouse à usage unique obligatoireCette blouse ne doit pas quitter le laboratoire de tuberculose.Les blouses à usage unique doivent être jetées dans les poubelles biologiques réservées à cet effet (sacs rayés rouge et blanc)

•Entrée du laboratoire restreinte au personnel autorisé

Mesures en cas de contamination

Contamination par du liquide(tube de bouillon de culture ou récipient contenant un liquide biologique cassé, etc.)

Contamination par contact(plaques de milieux de cultures qui tombent par terre, échantillon clinique qui tombe sur la surface de travail, etc...)

Mesures en cas de contamination

• Recouvrir de papier absorbant imbibé de désinfectant. Eviter desprayer ou de verser le désinfectant de haut, ce qui peut engendrer des aérosols

• Laisser agir

• Éponger et jeter le matériel souillé dans conteneur adéquat (Ne jamais manipuler du verre cassé directement avec les mains, même gantées, mais utiliser une brosse et ramassoire, un pincette …)

• Porter des gants

Mesures en cas d'accident• Mesures d'urgences

– Piqûre et blessures: laver immédiatement la partie lésée à l'eauet au savon, la rincer abondamment et la désinfecter (alcool ou Betadine)

– Projections sur les muqueuses (bouche, yeux): rincer abondamment avec du sérum physiologique ou à défaut de l'eau du robinet

• Conseil médical rapide

– Semaine, nuit, week-end et fériés: tél. 40 275• Déclarer l'accident

– Déclaration avec le responsable du service adressée à la Médecine du personnel (obligation légale)

Les désinfectants utilisés au CHUV

• Stérilium (alcool, ammonium quaternaire):désinfection des mains

• SeptoCHUV2000 (alcool, ammonium quaternaire):désinfection des surfaces

• Lysetol AF (amines)désinfection des instruments (trempage)

Les désinfectants utilisés au CHUV

Stérilium Septochuv Lysetol

Bactéries végétatives +++ +++ +++

Micobactéries ++ +++ +++

Virus +++ +++ +++

Champignons +++ +++ +++

Spores - - ±

DocumentsM:/IMU/COMMUN/ ACCREDITATION/Biosécurité/Documents/SécuriteLabo4_DBlanc.pdf