24
Matriks Metaloproteinase -1 Dan -8 Dalam Cairan Krevikular Gingival Selama Pergerakan Gigi Orthodontic : Suatu Penelitian Pendahuluan Selama 1 Bulan Follow-Up Setelah Aktivasi Alat Fixed RINGKASAN Peran Matriks Metaloproteinase (MMPs) sebagai respon terhadap gaya mekanik dalam pergerakan gigi ortodontik, hanya sebagian yang telah dilaporkan. Pada penelitian pendahuluan in vivo ini, keberadaan, level dan derajat aktivasi MMP -1 dan -8 diukur setiap hari selama 1 bulan dalam cairan krevikular gingiva (GCF) pada pasien dirawat dengan alat orthodontik cekat. Sampel GCF yang diambil dari lima pasien ortodontik dan tiga kontrol dari I1 atas atau I1 bawah atau dari salah satu gigi caninus rahang atas sebelum aktivasi alat cekat dan setiap 24 jam selama 1 bulan berikutnya. Bentuk-bentuk molekul dan derajat aktivasi MMP-1 dan -8 di GCF dianalisis dengan Western blotting, dan tingkat MMP-8 ditentukan melalui immunofluorometric assay (IFMA). Selama masa penelitian IFMA memperlihatkan rata-rata level 12 kali lipat lebih tinggi (56 ± 50 vs 4,6 ± 4 µg / l) pada MMP-8 dalam GCF ortodonti dari pada GCF kontrol. Level MMP-8 dalam GCF ortodontik lebih rendah dari pada yang terdeteksi dalam GCF gingivitis dan periodontitis, tetapi secara signifikan lebih tinggi dari pada GCF kontrol. Analisis IFMA diperkuat dengan analisis Western blot yang menunjukkan peningkatan level MMP-8 GCF ortodonsi terhadap GCF kontrol. 41% dari total MMP-8 immunoreactivitas memiliki kompleks berat molekul yang 1

RINGKASAN Peran Metaloproteinase Matriks

Embed Size (px)

Citation preview

Page 1: RINGKASAN Peran Metaloproteinase Matriks

Matriks Metaloproteinase -1 Dan -8 Dalam Cairan Krevikular Gingival Selama Pergerakan Gigi Orthodontic : Suatu Penelitian Pendahuluan Selama 1 Bulan Follow-Up Setelah Aktivasi Alat Fixed

RINGKASAN Peran Matriks Metaloproteinase (MMPs) sebagai respon terhadap gaya

mekanik dalam pergerakan gigi ortodontik, hanya sebagian yang telah dilaporkan. Pada penelitian pendahuluan in vivo ini, keberadaan, level dan derajat aktivasi MMP -1 dan -8 diukur setiap hari selama 1 bulan dalam cairan krevikular gingiva (GCF) pada pasien dirawat dengan alat orthodontik cekat. Sampel GCF yang diambil dari lima pasien ortodontik dan tiga kontrol dari I1 atas atau I1 bawah atau dari salah satu gigi caninus rahang atas sebelum aktivasi alat cekat dan setiap 24 jam selama 1 bulan berikutnya. Bentuk-bentuk molekul dan derajat aktivasi MMP-1 dan -8 di GCF dianalisis dengan Western blotting, dan tingkat MMP-8 ditentukan melalui immunofluorometric assay (IFMA).

Selama masa penelitian IFMA memperlihatkan rata-rata level 12 kali lipat lebih tinggi (56 ± 50 vs 4,6 ± 4 µg / l) pada MMP-8 dalam GCF ortodonti dari pada GCF kontrol. Level MMP-8 dalam GCF ortodontik lebih rendah dari pada yang terdeteksi dalam GCF gingivitis dan periodontitis, tetapi secara signifikan lebih tinggi dari pada GCF kontrol. Analisis IFMA diperkuat dengan analisis Western blot yang menunjukkan peningkatan level MMP-8 GCF ortodonsi terhadap GCF kontrol. 41% dari total MMP-8 immunoreactivitas memiliki kompleks berat molekul yang tinggi (> 100 kDa), 32 % dalam bentuk pro-polymorphonuclear(PMN) MMP-8 75 kDa, 14% dalam bentuk aktif PMN-MMP-8 60 kDa, dan 13 % dalam bentuk fibroblast tipe pro-MMP-8 55 kDa. Dalam GCF pasien ortodotik tidak dideteksi MMP-1 immunoreactivitas. Kadar MMP-8 dan -1 pada GCF kontrol rendah dan tidak terdeteksi.

Hasil ini menunjukkan bahwa secara in vivo GCF pada manusia, elevasi dan aktivasi parsial multiple spesies PMN dan MMP-8 tipe fibroblast mencerminkan perbaikan periodontal selama pergerakan gigi ortodontik.

1

Page 2: RINGKASAN Peran Metaloproteinase Matriks

PENDAHULUAN

Tahap awal pergerakan gigi secara ortodonti biasanya melibatkan reaksi yang

menyerupai inflamasi yang ditandai oleh perubahan vaskuler dan migrasi leukosit

keluar pembuluh kapiler dari ligamentum periodontal (PDL) (Rygh et al, 1986.).

Perubahan ini memicu aktivasi seluler dan ekspresi biologis zat aktif, seperti enzim

dan sitokin, dalam periodonsium (Sandy et al, 1993; Iwasaki et al, 2001;. Redlich et

al, 2001.). Penelitian terbaru menunjukkan bahwa keseimbangan molekul antara

sintesis kolagen dan degradasi dalam periodonsium terganggu setelah aplikasi

tekanan (Kyrkanides et al, 2000.). Namun, mekanisme yang mengubah stres mekanik

menjadi respon selular dan akhirnya menggerakkan gigi masih kurang dimengerti.

Dalam upaya memonitor pergerakan gigi ortodontik yang non-invasif pada

manusia, perubahan dalam profil dan level berbagai macam sitokin, faktor

pertumbuhan, proteoglikan, dan enzim dalam cairan krevikular gingiva (GCF) telah

diteliti. Jumlah prostaglandin, interleukin, tumor necrosis factor-α, transforming

growth faktor β, dan epidermal growth faktor dalam GCF telah menunjukan

bertanggungjawab terhadap tekanan ortodonti pada manusia (Grieve et al, 1994;.

Uematsu et al, 1996. ). Jumlah sitokin dalam GCF juga telah terbukti kurang

responsif terhadap tekanan ortodonti pada orang dewasa dibandingkan dengan remaja

(Ren et al, 2002.). Perbedaan rasio reseptor antagonis pada interleukin-1β dan

interleukin-1 individu dalam GCF menunjukan korelasi perbedaan individual sebesar

pergerakan gigi (Iwasaki et al, 2001.). Peningkatan kadar proteoglikan, seperti

kondroitin sulfat, dalam GCF manusia selama pergerakan gigi ortodontik dinyatakan

2

Page 3: RINGKASAN Peran Metaloproteinase Matriks

mengindikasikan tulang alveolar yang aktif dan perubahan bentuk PDL (Baldwin et

al, 1999;. Waddington dan Embery, 2001). Aktivitas kolagenase secara keseluruhan

yaitu collagenolysis tipe1, dalam GCF pasien orthodontic yang menjalani perawatan

dengan alat fixed menunjukkan 10 kali lipat dari GCF kontrol (Sorsa et al, 1992.).

Baru-baru ini, peningkatan kadar B cathepsin dalam GCF manusia selama pergerakan

gigi orthodontic telah dibuktikan (Sugiyama dkk,2003.).

Metaloproteinase Matrix (MMPs) adalah family gen yang paling sedikit 25

enzim proteolitik yang berperan pada degradasi dan perubahan bentuk matriks

ekstraseluler (et al Kyrkanides, 2000.). MMP-8 (kolagenase neutrofil manusia,

kolagenase-2) diproduksi tidak hanya oleh polymorphonuclear (PMN) leukosit, tetapi

juga oleh sel-sel tertentu keturunan non-PMN, seperti fibroblas gingiva, tulang dan

sel-sel plasma (Hanemaaijer et al, 1997.; Wahlgren et al, 2001;. Sasano et al, 2002)..

MMP-8 merupakan yang paling efektif dalam hydrolysa kolagen tipe I (Hasty dkk,

1987.) dan merupakan kolagenase interstisial utama dalam peradangan gingiva

manusia (al Kiili et, 2002.). MMP-1 (kolagenase interstisial, kolagenase-1), disintesis

dan disekresi dimana-mana oleh sel-sel jaringan penghubung (fibroblast) dan

makrofag, lebih sering dikaitkan dengan perubahan bentuk normal jaringan, dan

hydrolysa terutama kolagen tipe III (Welgus et al, 1981.).

Sementara perubahan morfologi dan histokimia dalam sel PDL telah banyak

diteliti (Bolcato-Bellemin et al., 2000), beberapa penelitian telah difokuskan pada in

vivo dan in vitro ekspresi MMPs dalam periodonsium sebagai respon terhadap

tekanan mekanik. Total aktivitas kolagenase dalam GCF pasien yang menggunakan

3

Page 4: RINGKASAN Peran Metaloproteinase Matriks

ortodonsi fixed telah terbukti 10 kali lipat dari GCF kontrol (Sorsa et al, 1992.).

Fibroblast gingival dan periodontal manusia telah menunjukkan peningkatan produksi

MMP-1 dan -2 di bawah peregangan yang kontinu dan siklus in vitro, sedangkan

tampakan MMP-9 dan MT1-MMP dalam sel-sel ini tidak diinduksi oleh tekanan

mekanis (Carano dan Siciliani, 1996; Bolcato-Bellemin et al, 2000). Pengaruh

tekanan ortodonsi pada produksi MMP-1 mRNA dan MMP-1 telah dianalisis pada

anjing selama penelitian pergerakan gigi: tekanan ortodonti meningkat secara

signifikan baik pada MMP-1 mRNA maupun aktivitas protein dalam jaringan gingiva

(Redlich et al, 2001.). Baru-baru ini, meningkatnya tampakan baik pada MMP 8 dan

-13 mRNA dalam PDL tikus selama pergerakan gigi aktif telah dibuktikan

(Takahashi dkk, 2003.). Selain itu, pergerakan gigi ortodonti telah terbukti dihambat

dengan penggunaan inhibitor MMP pada tikus (Holliday et al, 2003.).

penelitian pendahuluan in vivo ini mengukur keberadaan, bentuk molekul,

level, dan derajat aktivasi MMP-1 (kolagenase-1) dan MMP-8 (kolagenase-2) setiap

hari selama 1 bulan dalam GCF pasien yang menjalani perawatan ortodonti dengan

alat fixed.

Bahan dan metode

Pasien dan sampel GCF sampel dikumpulkan dari lima pasien ortodontik (tiga

wanita dan dua pria, berusia 11, 12, 13, 13, dan 36 tahun). Semua pasien sedang

menjalani perawatan fixed (Mini-tikar kurung, slot 0,018 inci; Ormco, Orange,

California, USA) di kantor gigi swasta di Helsinki, Finlandia. Sebuah archwire

4

Page 5: RINGKASAN Peran Metaloproteinase Matriks

pelurus awal (Respond, Ormco) ditempatkan pada kunjungan yang sama, ketika

pengambilan sampel GCF dimulai. Sampel berasal dari gigi I1 atas atau bawah atau

dari caninus atas sebelum dan setiap 24 jam setelah aktivasi alat fixed selama 1 bulan.

Semua pasien itu sehat, kecuali satu dengan diabetes tipe I yang terkontrol. Pasien

dengan diabetes terkontrol telah ditemukan menggunakan aktifitas collagen atau

MMP-8 dalam GCF mereka dibandingkan dengan GCF control yang normal (Ryan et

al, 1999.). Sampel GCF kontrol diperoleh dari insisivus tengah atas dari masing-

masing tiga orang wanita sehat (usia rata-rata 36 tahun) yang tidak menjalani

perawatan ortodonti. Kedua pasien ortodontik dan kontrol mempunyai jaringan

periodontal yang secara klinis sehat, sebagaimana dinilai dengan pemeriksaan pada

perawatan klinis, mikroba, dan radiologis periodonsium. Sebagai perbandingan,

sampel GCF juga dikumpulkan dari pasien dengan gingivitis dan periodontitis,

seperti yang telah digambarkan oleh Mäntylä dkk. (2003). Tata cara untuk

mengumpulkan sampel GCF telah disetujui oleh komite etika dari Institut Kedokteran

Gigi, University of Helsinki, Finlandia. Semua subjek memberikan informed consent.

Pengumpulan GCF

Setelah pemeriksaan awal, sampel GCF dikumpulkan dari sulkus periodontal.

Permukaan setiap gigi dikeringkan dengan lembut dengan udara dan dijaga agar tetap

kering dengan gulungan kapas. Dua strip kertas saring ditempatkan ke dalam sulkus

selama 3 menit. Volume aliran GCF diukur dengan menimbang strip dalam tabung

polypropylene (Mettler AJ 100/GWB scale, Mettler, Greifensee, Swiss). Cairan yang

5

Page 6: RINGKASAN Peran Metaloproteinase Matriks

telah diserap terelusi dari tiap strip menjadi 25 ml sebesar 0,2 M NaCl, 10 mM

CaCl2, 50 mM Tris-HCl, pH 7,5. Sampel tersebut kemudian dibekukan dan disimpan

pada suhu -20 ° C sampai waktu uji.

MMP-8 immunofluorometric assay (IFMA)

Konsentrasi MMP-8 pada sampel GCF dikumpulkan ditentukan dengan

menggunakan waktu IFMA. Antibodi spesifik 8708 dan 8706 monoklonal MMP-8

berturut-turut berfungsi sebagai penangkapan dan pelacakan antibodi. Antibodi

pelacak ini ditandai dengan europium chelate. Assay buffer berisi 20 mM Tris-HCl,

pH 7,5, 0,5 M NaCl, 5 mM CaCl2, 50 pM ZnCl 2, 0,5% per albumin serum sapi,

0,05% asam sodium, dan 20 mg / l asam diethylaminetriaminepentaacetic (DTPA) .

Sampel dilarutkan dalam buffer uji dan diinkubasi selama 1 jam, diikuti dengan

inkubasi selama 1 jam dengan antibodi pelacak. Peningkatan larutan ditambahkan,

dan setelah 5 menit fluoresensi diukur dengan 1234 Delfia Research fluorometer

(Wallac, Turku, Finlandia). Hasilnya dinyatakan dalam µg/l. Spesifikasi antibodi

monoklonal yang melawan MMP-8 sesuai dengan poliklonal MMP-8 (Hanemaaijer

dkk,1997;.Sorsadkk,1999;.Mäntylädkk,2003.).

6

Page 7: RINGKASAN Peran Metaloproteinase Matriks

Analisa Western blot

Bentuk molekul MMP-1 dan -8 dalam GCF pasien ortodontik dan kontrol

dianalisis dengan Western blotting. Sampel yang diberikan perlakuan dengan buffer

Laemmli pada pH 6,8, dan dipanaskan selama 5 menit pada 100 ° C. Kisaran rendah

standar Sodium dodesil elektroforesis gel-poliakrilamid sulfat (SDS-PAGE) yang

telah diwarnai sebelumnya (Bio-Rad, Richmond, California, USA) berfungsi sebagai

penanda berat molekul. Sampel dipisahkan pada 8-10% SDS-PAGE dan

elektroforesis dipindahkan ke membran nitroselulosa. Untuk membatasi bagian ikatan

non spesifik pada membran nitroselulosa, bagian tersebut diencerkan dalam 3 %

gelatin dalam 10 mM Tris-HCl, pH 7,5, 0,05 persen Triton X-100, 22 mM NaCl

(TTBS) selama 1 jam pada suhu 37 ° C, setelah itu membran dicuci empat kali

dengan TTBS, masing-masing selama 15 menit. Membran diinkubasi dengan

monoclonal tikus anti- MMP-1 manusia (pengenceran 1:250 dalam TTBS; Onkogen,

Boston, Massachusetts, USA) dan poliklonal kelinci anti MMP-8 manusia

(Hanemaaijer dkk, 1997.) (1:500 dilusi di TTBS), pada 20 ° C selama 24 jam. Setelah

empat pencuci dengan TTBS selama 15 menit, membran diinkubasi dengan IgG

kambing anti-tikus untuk MMP-1 dan IgG kambing anti-kelinci untuk MMP-8

konjugasi alkalin fosfatase (berturut-turut 1:1000 dan 1:500 dilusi dalam TTBS;

Sigma , St Louis, Missouri, USA) selama 1 jam. Setelah empat pencucian dengan

TTBS selama 15 menit, salah satu dicuci selama 15 menit dengan 10 mM Tris-HCl,

pH 7,5, 22 mM NaCl, dan satu dicuci selama 15 menit dengan buffer fosfatase alkali

(100 mM NaCl, 5 mM MgCl2, 100 mM Tris, pH 9,5), yang immunoblots

7

Page 8: RINGKASAN Peran Metaloproteinase Matriks

divisualisasikan dengan menambahkan tetrazolium blue nitro dan fosfat 5-bromo-4-

kloro-3-indolyl yang diencerkan dalam formamida NN-dimetil (Sigma) dalam 100

mM Tris-HCl, 5 mM MgCl2, 100 mM NaCl, pH 9,5 (Ingman et al, 1994.). Jika

diperlukan, analis molekul / program PC dari gambar densitometer (model GS-700,

Bio-Rad) digunakan untuk analisa kuantitatif dari Western Blot (Kiili et al, 2002.).

Media kultur sinovial PMN dan rematik manusia secara berturut-turut digunakan

sebagai kontrol positif untuk MMP-8 dan -1(Hanemaaijer et al, 1997;. Kiili et al,

2002.).

Hasil

Parameter klinis dan aliran GCF

Untuk semua bagian yang diteliti, akumulasi plak sangat minim selama

penelitian dan kesehatan gingiva sangat bagus. Kedalaman Probing kurang dari 2 mm

sepanjang waktu selama percobaan. Aliran GCF secara signifikan tidak berubah

karena perawatan ortodontik (data tidak ditampilkan).

Jumlah dan bentuk molekul MMP-8 (kolagenase-2) dalam GCF pasien ortodontik

dan kontrol selama periode follow-up 1 bulan

Rata-rata IFMA memperlihatkan jumlah MMP-8 12 kali lebih tinggi (56 ± 50

vs 4,6 ± 4 µg / l) dalam GCF ortodontik dari pada dalam GCF kontrol selama 1 bulan

uji follow-up (Gambar 1). Jumlah MMP-8 dalam GCF ortodontik lebih tinggi

dibandingkan dengan GCF kontrol yang sehat, tetapi lebih rendah dari jumlah MMP8

8

Page 9: RINGKASAN Peran Metaloproteinase Matriks

dalam GCF gingivitis dan periodontitis (Mäntylä et al, 2003.). Analisis IFMA

diperkuat oleh Western blotting, yang juga menunjukkan immunoreactivity MMP-8

yang lebih dalam GCF pasien ortodonti dari pada GCF kontrol selama sebulan penuh

(Gambar 2A). Sampel penelitian menunjukkan bahwa 41 persen dari total

immunoreactivity MMP-8 merupakan suatu kompleks berat molekul yang tinggi (>

100 kDa). Pro-PMN-MMP-8 75 kDa, yaitu PMN non-aktivasi leukosit MMP-8,

mewakili 32 persen dari total immunoreactivity MMP-8. Dari total MMP-8, 14

persen PMN-MMP-8 60 kDa- dalam bentuk aktif dan 13 persen dalam spesies pro-

MMP-8 55 kDa tipe fibroblast (Tabel 1). The immunoreactivitas dari PMN-MMP-8

60 kDa yang aktif lebih kecil daripada berat molekul kompleks yang tinggi (> 100

kDa) selama masa penelitian. Hanya pada 12 dan 22 hari dari aktivasi alat fixed

jumlah PMN-MMP-8 aktif 60 kDa lebih tinggi dibandingkan dengan berat molekul

kompleks yang tinggi (> 100 kDa) (Gambar 2A). Jumlah MMP-8 dalam sampel

kontrol hampir tidak terdeteksi melalui Western blotting (Gambar 2C).

Jumlah MMP-1 (kolagenase-1) dalam GCF pasien ortodonti selama 1 bulan

follow-up-1 tingkat MMP di ortodontik (Gambar 2B) dan kontrol (Gambar 2D) GCF

sampel tidak terdeteksi melalui Western blotting.

9

Page 10: RINGKASAN Peran Metaloproteinase Matriks

Gambar 1. Mean konsentrasi (µg/l) matriks metalloproteinase – (MMP-8) dalam cairan krevikular gingival (GCF) pada pasien orthodontic (n=5) dan control (n=3) yang dipilih dengan menggunakan analisa immunofluorometrik. (A) sampel orthodontic yang dikumpulkan dari gigi incisivus sentralis rahang atas, atau kaninus rahang atas, atau incisivus sentralis rahang bawah sesaat setelah aktivasi alat fixed, dan setiap 24 jam selama 28 hari. (B) sampel GCF control yang dikumpulkan dari incisivus sentralis rahang atas dari pasien control yang tidak menggunakan orthodontik

10

Page 11: RINGKASAN Peran Metaloproteinase Matriks

Gambar 2. Bentuk molecular dari matrik metalloproteinase -1 (MMP-1) dan -8 dalam cairan krevikular gingival (GCF) dari pasien ortodontik dan control, dideteksi dengan menggunakan metode Western Blot. (A) Western Blot menggunakan antibody spesifik MMP-8. Sampel GCF dikumpulkan dari incisivus sentralis atas atau bawah atau dari salah satu kaninus atas sebelum (1 hari) dan setiap 24 jam setelah aktivasi alat fixed, selama 28 hari. Ikatan dalam kisaran 25-80 kDa sesuai pada tipe polimorfonuklear (PMN) pro MMP-8, dimana ikatan sekitar 60 kDa sesuai untuk enzim aktif PMN. Ikatan pada 40-55 kDa mewakili tipe fibroblast MMP-8. PMN mengindikasikan penggunaan kultur neutrofil manusia sebagai control positif, bentuk MMp-1 dari mendia kultur fibroblast synovial rheumatoid manusia digunakan (F). (C,D) tidak ada immunoreaktivitas MMP-1 atau MMP-8 yang terdeteksi dalam GCF control.

11

Page 12: RINGKASAN Peran Metaloproteinase Matriks

Tabel 1. Persentase ikatan yang berbeda untuk immunoreaktivitas total matrik metalloproteinase-8 (MMP-8) dalam cairan krevikular gingival (GCF) pasien orthodontic, dideteksi dengan metode Western Blot.

Diskusi

Penelitian sebelumnya telah menyatakan bahwa mediator lokal, seperti

prostaglandin, interleukin dan faktor pertumbuhan, memainkan peran penting dalam

perubahan bentuk tulang yang dipicu oleh tekanan ortodonsi. Jumlah mediator ini

dalam GCF telah terbukti bertanggungjawab untuk tekanan ortodonti pada manusia.

Namun, hanya beberapa penelitian yang focus pada perubahan yang tergantung pada

MMP dari jaringan periodontal manusia selama pergerakan gigi ortodontik (Sorsa et

al, 1992;. Redlich et al, 2001.). Penelitian pendahuluan secara in vivo menunjukkan

jumlah MMP-8 jauh lebih tinggi dalam GCF pasien ortodonsi bila dibandingkan

dengan kontrol GCF selama periode waktu 1 bulan.

Temuan pada immunoreactivity MMP ini sesuai dengan hasil sebelumnya

yang telah menunjukkan peningkatan secara signifikan aktivitas kolagenase total

12

Page 13: RINGKASAN Peran Metaloproteinase Matriks

dalam GCF pasien ortodonti pada 24 jam setelah aktivasi retraktor (Sorsa et al,

1992.). Dalam penelitian ini, perawatan ortodonsi tidak mempengaruhi aliran GCF.

Demikian pula, dalam penelitian in vivo pada anjing selama penelitian pergerakan

gigi menunjukkan peningkatan jumlah mRNA MMP-1 secara signifikan dalam

jaringan gingiva (Redlich et al, 2001.). Selain itu, uji in vitro pada PDL dan fibroblast

gingiva manusia menunjukkan peningkatan yang signifikan pada jumlah MMP-1 dan

-2 (Bolcato-Bellemin et al, 2000.). Baru-baru ini, peningkatan ekspresi baik pada

MMP 8 dan -13 mRNA dalam PDL tikus selama pergerakan gigi aktif ditemukan

secara in vivo (Takahashi et al, 2003.). Hasil aktivitas MMP-1 dan -8 ini sesuai

dengan temuan ini yang menunjukkan immunoreactivities yang rendah untuk MMP-1

dalam GCF beberapa pasien, meskipun peran MMP-8 pada manusia tampaknya lebih

penting daripada MMP-1 selama pergerakan gigi ortodontik. Selain itu, pergerakan

gigi ortodonti ditunda atau dihambat dengan menggunakan inhibitor MMP (Holliday

et al, 2003.).

Selama perawatan ortodonti dengan alat fixed, periodonsium yang sehat

secara klinis tanpa akumulasi plak merupakan hal yang penting. Dalam penelitian ini,

pasien yang menerima tekanan ortodontik dan control semuanya memiliki

periodonsium yang secara klinis sehat. Berbagai bentuk isoenzyme MMP-8 berasal

dari berbagai sumber sel host; degranulasi PMN glikosilasi 75-80 kDa MMP yang

tinggi, dan berbagai sel mesenchymal, epitel, plasma, dan tulang semua

menampakkan de novo 40-55 kDa glikosilasi MMP-8 spesies yang kurang (Weiss,

1989;. Hanemaaijer et al, 1997; Sasano et al, 2002.). Pola spesies MMP-8 dalam GCF

13

Page 14: RINGKASAN Peran Metaloproteinase Matriks

ortodontik juga berbeda dari immunoreactivitas MMP-8 yang terdeteksi dalam GCF

dan ekstrak plak gigi dari pasien periodontitis kronis dewasa (Kiili et al, 2002.). GCF

ortodonsi menunjukkan tingkat immunoreactivitas yang rendah untuk pro-PMN 80

kDa, pro-MMP-8 55 kDa tipe fibroblast- atau fragmen yang <30 kDa, seperti pada

orang GCF periodontitis dewasa (Kiili et al, 2002.). Sebagian besar

immunoreactivities MMP-8 dalam GCF ortodonti berada pada berat molekul

kompleks yang tinggi >100 kDa: 41 versus 5,6 persen terdeteksi pada GCF

periodontitis orang dewasa. Persentase PMN-MMP-8 60 kDa- yang aktif juga lebih

rendah pada GCF ortodonti daripada dalam GCF periodontitis dewasa (14 versus 43,9

persen) (Kiili et al, 2002.). MMP-8 assay IFMA menunjukkan jumlah total

immunoreactivitas MMP-8 yang lebih rendah daripada yang terdeteksi pada GCF

periodontitis kronis dan gingivitis dewasa (Mäntylä et al., 2003), tetapi lebih tinggi

daripada dalam GCF kontrol yang sehat. Secara keseluruhan, data ini mungkin

mencerminkan kerusakan matriks ekstraseluler periodontitis yang lebih agresif dalam

kaitannya dengan resorpsi jaringan / peristiwa aposisi yang menandakan pergerakan

gigi ortodonti. Hal ini masih harus dilihat apakah immunoreactivities relatif tinggi

untuk kompleks berat molekul yang tinggi > 100 kDa dalam GCF ortodontik

dibandingkan dengan pada GCF periodontitis dewasa yang mungkin karena

ketidakseimbangan yang lebih besar antara aktivasi MMPs dan inhibitor alami

endogennya (inhibitor jaringan matriks metaloproteinase, TIMP-1 dan -2 atau α2-

macroglobulin) dalam hubungannya dengan GCF periodontitis dewasa (et Ingman,

1996;. Kiili et al, 2002).. Peningkatan pengaturan MMPs oleh TIMPs selama

14

Page 15: RINGKASAN Peran Metaloproteinase Matriks

pergerakan gigi ortodonti daripada di periodontitis (setidaknya sebagian) dapat

menjelaskan perbedaan ini (Ryan dan Golub, 2000; Kiili et al, 2002.).

Kesimpulan

Hasil dari penelitian pendahuluan ini menunjukkan, bahwa dalam follow-up 1 bulan,

beberapa spesies dari kedua-MMP 8 isoform jelas mengambil bagian dalam

kerusakan / perubahan bentuk jaringan selama pergerakan ortodontik gigi manusia

secara in vivo. Kedua, perubahan dalam jumlah MMP-8 secara jelas tercermin dalam

GCF pasien ortodonsi.

15