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Pruebas de Sensibilidad a los Antimicrobianos
(Antibiograma por difusión con discos - CIM/CBM –
Curvas de muerte - PIS/PBS- VBS – Dosaje de Antimicrobianos)
Mirta G. Quinteros
• Influencian decisiones sobre el tratamiento específico individual.
• Orientan tratamiento empírico inicial
• Desarrollo del vademecum hospitalario.
• Estudio de la actividad de nuevos agentes antimicrobianos.
a) Aportes desde la sensibilidad
Pruebas de Sensibilidad a los Antimicrobianos
• Resistencias intrínseca: una herramienta útil en laidentificación bacteriana.
• Vigilancia de patrones de resistencia ATB enmicroorganismos patógenos nosocomiales o no, paradetectar emergencia de resistencia
• Aplicación de políticas de control de infecciones.
b) Aportes desde la resistencia
Pruebas de Sensibilidad a los Antimicrobianos
Pruebas de Sensibilidad a los
AntimicrobianosINTERPRETACIÓN E INFORME
•Los halos de sensibilidad medidos en mm, se interpretan de acuerdo a
las Normas del CLS o EUCAST, que nos permiten determinar si esa
bacteria es sensible o no a determinado antimicrobiano ensayado.
•Los puntos de corte serán establecidos en las curvas de correlación ,
entre la CIM (ug/ml) y los mm de halo de inhibición observado en la
prueba de difusión en agar con discos, de una determinada bacteria
frente al antimicrobiano ensayado.
INTERPRETACIÓN E INFORME64 –
32 –
16 –
8 –
4 –
2 –
1.0 –
0.5 –
I6
I10
I15
I20
I25
I30
I35
(mm)
MIC
(µ
g/m
l)
Resistante Intermedio Susceptible
Pruebas de Sensibilidad a los
Antimicrobianos
HISTOGRAMAS: Distribución de microorganismos Vs CIM
Pruebas de Sensibilidad a los
Antimicrobianos
El antibiograma Vs Mecanismos de Resistencia
1. Métodos fenotípicos: – Antibiograma por Dilución
– Antibiograma por Difusión
2. Métodos bioquímicos:– Detección de β-lactamasas: resistencia a ampicilina
– Detección de la PBP2a: resistencia a oxacilina
3. Métodos genéticos: – Detección de genes de resistencia, generalmente
mediante técnicas de PCR.
Pruebas de Sensibilidad a los Antimicrobianos
Clasificación
Pruebas de Sensibilidad a los Antimicrobianos
Antibiograma por difusión
Detección fenotípica:
Resistencia a cefoxitina
1.-Métodos fenotípicos
oxacilina
Antibiograma por dilución:
2.- Métodos bioquímicos
PRODUCCIÓN DE β-LACTAMASAS
Método microbiológico
Método: nitrocefin
Neisseria
gonorrhoeae
Haemohphilus
influenzae
Enterococcus faecalis
Pruebas de Sensibilidad a los Antimicrobianos
Meticilino resistencia (latex)
•PLP (+)
2.- Métodos bioquímicos
Pruebas de Sensibilidad a los Antimicrobianos
Meticilino resistencia
(PCR)
•mec A (+)
2.- Métodos genéticos
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13
1. COL
2. PER34
3. BK2464
4. ANS46
5. HU25
6. HDE288
7. 6588 / 3068 - LP
8. 6592 / 2258 - LP
9. 6595 / 2296 – LP †
10. 6598 / 2502 - TQ
11. 6599 / 2520 – BAL †
12. 6600 / 29948- Hemo
13. Control negativo -
342 bp
162 bp
(mecA)
Pruebas de Sensibilidad a los Antimicrobianos
RESISTENCIA INTRINSECA Y NATURAL
NATURAL: GRAM (+) : R a polimixina
INTRINSECA:
Bacilos GRAM (-): R a glucopéptidos,eritromicina
Proteae: R a nitrofuranos-polimixina.
Serratia spp: R a polimixina
Enterobacter spp: R a cefalotina
Klebsiella spp: R a ampicilina
Enterococcus spp: R a Cef.1ºG- R de bajo nivel AG.
R a imipenem: S. malthopilia, E.faecium, E.raffinosus
R a vancomicina: E.gallinarum, E.casseliflavus
MLS
(+)
(-)
S. aureus S. epidermidis
E. coli: Comportamiento frente a
IBL
ß-LACTAMASAS PLASMIDICAS
•ß-lactamasas de espectro
extendido (BLEE):
TEMderiv
SHVderiv
PER1-2
CTXMderiv
Citrobacter freundii (AmpC + BLEE)
Curva de muerte
1:4 1:8 1:16 1:32 1:64 1:1281:2suero caldo
Microorganismo patógeno
1:4 1:8 1:16 1:32 1:64 1:1281:2suero Caldo
valle
Pico
24°C
PIS
48°C
PBS
PODER INHIBITORIO / BACTERICIDA DEL SUERO
Microorganismo patógeno
Resistencia a los antibióticos Amenaza vigente para la Salud pública
