Pro64-B-13-Hemograma Completo Con Formula Diferencial

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ANGLOLAB S.A. CLINICA ANGLOAMERICANA SOP: Hemograma completo con frmula diferencial.Author: See BelowDocument Origin: Anglo Lab Document Number: Effective (or Post) Date: Company: SMILE Approved by: Pro64-B-13 17-Jan-09 NA Heidi Hanes

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Lic. Tecnlogo Mdico: Manuel Anicama Espino. Autor(es), Titulo y Nombre Lic. Tecnlogo Mdico: Rommy Cceres Rey.

Titulo y Nombre

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Aprobado por:

Lic. Tecnlogo Mdico: Norma Noda Kuboyama Dr: Eduardo Luna Campodnico

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Revisin Histrica

Fecha de Revisin [ddmmaa]

Descripcion .

1.1

07/07/2006 Hemograma completo con frmula diferencial

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Servicio de Hematologa File SOPs

1 1

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Revisin SOPANGLOLAB SOP# G-3.2.1 Versin# 2.1 Fecha: 25 Nov, 2008 Pagina 1 de 32

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ANGLOLAB S.A. CLINICA ANGLOAMERICANA SOP: Hemograma completo con frmula diferencial.Yo he ledo, comprendido y estoy de acuerdo con el siguiente SOP:

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ANGLOLAB S.A. CLINICA ANGLOAMERICANA SOP: Hemograma completo con frmula diferencial. PRINCIPIO:El Equipo Cell-Dyn 3700 es un autoanalizador hematolgico automatizado y multiparamtrico, provisto de un mdulo con un muestreador automtico (Modelo SL). El sistema Cell-Dyn utiliza los siguientes canales de medicin: ptica de lser para WOC (recuento ptico de leucocitos). Un canal de impedancia para WIC (recuento de leucocitos por impedancia). Un canal de impedancia para el recuento de eritrocitos y plaquetas. Absorbancia de la hemoglobina.

OBJETIVO:El presente SOP tiene como objetivo el de normar los procedimientos, Hemogramas, est dirigido a todo el personal involucrado en los procedimientos del Servicio de Hematologa y aplica cuando se deba procesar muestras que sern analizadas con el Cell Dyn 3700.

AUTORIDAD Y RESPONSABILIDAD:1.- El director del laboratorio, la supervisora del Laboratorio, tienen la autoridad para establecer este procedimiento. 2.- El director del laboratorio, la supervisora del Laboratorio, son responsables para la implementacin de este procedimiento y de asegurar que todo el personal este apropiadamente entrenado. 3.- Todos los Tecnlogos y Tcnicos de Laboratorio que trabajan en el laboratorio, son responsables de leer y comprender este SOP antes de la ejecucin del procedimiento.

MUESTRA: Preparacin del paciente:(Ver SOP Preanalticos.)

Tipo de muestra:Sangre total con EDTA k3 (recogidos en tubo de 13 x 75 mm) Sangre total con EDTA K3 (peditricos 1 ml). Sangre capilar. Lminas con frotis sanguneos.

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ANGLOLAB S.A. CLINICA ANGLOAMERICANA SOP: Hemograma completo con frmula diferencial. Volumen mnimo u ptimo de muestra:Volumen mnimo: 1 ml Volumen mximo: 3 ml (cantidades adicionales pueden obtenerse resultados errneos, debido a una mezcla y muestreo deficiente por el analizador Cell Dyn 3700). Para la sangre capilar se requiere como mnimo 180l, para el analizador Cell-Dyn 3700.

Condiciones de almacenamiento:Los tubos con sangre total para hematologa son almacenados a temperatura ambiente por una semana, existen cajas para cada da de la semana. Se debe almacenar 1 lmina con frotis sanguneo como respaldo por cada paciente, durante un mes. Las lminas coloreadas sern almacenadas y descartadas despus de una semana. Se debe trabajar con muestras recientes de sangre (primeras 4 horas desde su extraccin). Los parmetros RBC, HGB, HCT, MCV, MCH, MCHC, RDW, PLT y MPV se mantienen estables hasta 24 horas desde su recogida. El recuento total de WBC se mantiene estable hasta las 12 horas desde su recogida, su estabilidad disminuye hasta un 7% hasta las 24 horas de extrada. La forma leucocitaria (diferencial), se mantiene estable hasta las 12 horas de extrada la muestra. Cuando la muestra es procesada antes de 30 minutos de extrada la muestra o despus de 4 horas, se incrementar el nmero de alarmas en el equipo. En sangre mantenida a temperatura ambiente, el inflamiento de los eritrocitos entre 6 horas y 24 horas aumenta el hematocrito y VCM.

Estabilidad:

Muestras inaceptables:Muestras coaguladas. Muestras hemolizadas. Muestras obtenidas con otro tipo de anticoagulante.

EQUIPOS:Cell Dyn 3700. Rotador de muestras. Microcentrfuga para capilares. Microscopio con objetivos de 40x y 100x Secador de lminas. Bao mara 37CFecha: 25 Nov, 2008 Pagina 5 de 32

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ANGLOLAB S.A. CLINICA ANGLOAMERICANA SOP: Hemograma completo con frmula diferencial.Micropipeta 100 1000 ul. Micropipeta 10 100 ul.

PRECAUCIONES:Seguir las precauciones de bioseguridad adecuadas (Ver SOP Bioseguridad)

MATERIALES / DESCARTABLES:Tubos al vaco con EDTA K3 (3ml, 1 ml). Laminas portaobjetos Cmara de Neubauer Tips 10, 100 y 1000 ul. Capilares rojos y azules ( con y sin heparina) Material de bioseguridad para la manipulacin de las muestras.

REACTIVOS:Cell - Dyn diluyente Cell - Dyn HGB/WIC lyse. Cell Dyn detergent. Colorante Wright (solucin en alcohol metlico de eosina y una mezcla compleja de tiaminas , que incluyen el azul de metileno, azur B y otros derivados) Agua tamponada (Fosfato potsico primario, fosfato sdico secundario, dibsico, y agua destilada. Aceite de Immersin Turk

Estabilidad: Todos los reactivos del equipo son estables hasta la fecha de caducidad y almacenados a temperatura ambiente, evitando el calor. El colorante y agua tamponada, se almacenan a temperatura ambiente.

CALIBRACIN:(Ver SOP Operaciones Cell-Dyn 3700).

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CONTROL DE CALIDAD:- (Ver SOP Operaciones Cell-Dyn 3700) - Coloracin Wright: Se realiza un control semanal de la coloracin.( Ver anexo Log de control de coloracin). Las extensiones bien teidas tienen un color rosa cuando se miran a simple vista, los hemates son de color rosa, no se color amarillo ni rojas. Debe haber un precipitado mnimo. El color de la extensin debe ser uniforme. Las clulas deben estar libres de artefactos, como vacuolas. Los ncleos de los leucocitos son de color prpura, la cromatina y la paracromatina se diferencian claramente. Los grnulos citoplasmticos de los neutrfilos son ligeramente oscuros, los grnulos eosinofilos son de color naranja y los grnulos de los basfilos son de color prpura oscuro. Las bacterias si estn presentes son de color azul. El citoplasma de los linfocitos es generalmente azul claro, el de los monocitos es azul grisceo. Los parsitos de la malaria tienen el citoplasma azul celeste y la cromatina rojo prpura. Anotar si los resultados fueron ptimos o no en el Log de control de la coloracin Wright, anotar las acciones correctivas si las hubiera. Se realiza un mantenimiento preventivo peridicamente a la microcentrfuga, realizado por el servicio tcnico encargado.

- Microcentrfuga: -

PROCEDIMIENTO:Operacin Automatizada:1. Las muestras no deben ser procesadas hasta que no se haya realizado el mantenimiento diario y control de calidad al equipo (Ver SOP operaciones Cell-Dyn 3700). 2. Antes de comenzar el anlisis, el equipo debe estar en la pantalla de estado: PREPARADO (READY). 3. Las muestras deben estar bien mezcladas, para los dos modos de anlisis abierto y cerrado utilizando el rotador automtico o puede homogenizarse manualmente. El muestreador automtico de tubos cerrados, mezcla las muestras antes de su aspiracin, sin embargo las muestras deben ser homogenizadas previamente. Modo Automtico ( cerrado):ANGLOLAB SOP# G-3.2.1 Versin# 2.1 Fecha: 25 Nov, 2008 Pagina 7 de 32

ANGLOLAB S.A. CLINICA ANGLOAMERICANA SOP: Hemograma completo con frmula diferencial.1. Identificacin del usuario, colocando en operator ID las 3 iniciales del operador. 2. Asegrese que el muestreador automtico se encuentre encendido, ON. 3. Asegrese que el equipo se encuentre en el modo cerrado ( automatizado), presione en la pantalla principal la tecla [CHANGE SAMPLER], comenzar la iniciacin del muestreador automtico, se realizar un BACKGROUND 4. Verifique que se encuentren presentes en la bandeja del muestreador automtico de tubos cerrados, las 10 gradillas y coloque la cubierta de seguridad. 5. Coloque las muestras en las gradillas dejando un espacio entre tubos de muestra cuando se utilicen tapas de goma (esto garantiza una adecuada mezcla, ya que si se colocan los tubos seguidos puede existir rozamiento entre las tapas de goma y no se realice una mezcla adecuada).

6. Revise los tubos de muestra, que no se encuentren hemolizados, ni existan cogulos. 7. Coloque los ltimos tubos de la corrida en la gradilla N 10, el equipo automticamente reconocer que son las ultimas muestras a procesar. 8. Pulse START, el equipo comenzar a realizar el procesamiento, los tubos contarn con un cdigo de barras, que darn toda la informacin al equipo (N de muestra, Nombre del paciente), si el cdigo de barras no es ledo por el lector, la muestra ser analizada de igual forma y se identificara por el nmero de posicin y gradilla de la muestra (Ejm. R6 T5 Rack 6 Tubo 5). 9. Los resultados sern impresos y transmitidos al software del laboratorio 10. Archivar todos los resultados en file correspondiente. Modo Manual ( abierto): 1. Identificacin del usuario, colocando en operator ID las 3 iniciales del operador. 2. El analizador debe estar en estado listo ( READY) 3. Asegrese que el sistema se encuentre en el modo abierto, pulsar [CHANGE SAMPLER]. 4. Colocar el tipo de muestra a procesar, pulsar [RUN] [SPECIMEN TYPE] [PATIENT]. 5. Colocar la identificacin del paciente en NEXT ID: 6. Coloque el nombre del paciente en PATIENT: 7. Revise los tubos de muestra, que no se encuentren hemolizados, ni existan cogulos. 8. Saque la tapa del tubo (previamente homogenizado), colquelo dentro de la sonda de aspiracin de muestras y presione la placa de contacto, la sonda aspirar la muestra y el tubo ser retirado ayudado por el bloque de lavado. 9. El bloque de lavado lavar la sonda de muestra. 10. El equipo iniciar el procedimiento y los resultados sern mostrados en la pantalla. Nunca procese otro paciente hasta que no se tenga el resultado previo en pantalla. 11. Los resultados sern impresos y transmitidos al software del laboratorio.ANGLOLAB SOP# G-3.2.1 Versin# 2.1 Fecha: 25 Nov, 2008 Pagina 8 de 32

ANGLOLAB S.A. CLINICA ANGLOAMERICANA SOP: Hemograma completo con frmula diferencial.12. Firmar y archivar todos los resultados al file correspondiente.

Operacin Manual: Frotis sanguneo:1. Las extensiones de sangre deberan de prepararse inmediatamente tomada la muestra. 2. Colocar una gota de 2 mm a 3mm de dimetro a 1 cm del final de la lmina, limpia y sin polvo, que se coloca sobre una superficie plana. 3. Con el pulgar y el ndice de la mano derecha sujetar el final de la lmina extensora en un ngulo de 30 a 45grados y deslizarlo hacia atrs para que haga contacto con la gota, permitir que la gota se extienda y cubra el ngulo entre las 2 lminas, empujar a velocidad moderada hacia delante y se obtendr una capa de espesor moderadamente fino. 4. Secar al aire. 5. Las lminas con los frotices sanguneos para cada paciente son coloreados con Wright y agua tamponada por 7 minutos. 6. Colocar las lminas horizontalmente y se agrega el colorante, se aade cuidadosamente una cantidad igual o mayor de tampn y se mezcla soplando suavemente. 7. Dejar colorear por 7 minutos ( el tiempo variar de acuerdo a la calidad del colorante) 8. Lavar las lminas con agua, el lavado durante ms de 30 segundos reduce la coloracin azul, la parte posterior de la preparacin se limpia con una gasa. 9. Secar las lminas con el secador. 10. Observar las lminas al microscopio con objetivo de 100x y realizar el conteo diferencial de los leucocitos, observar las caractersticas de las clulas e identificar ( Ver tabla anexa) 11. Observar en el frotis sanguneo la morfologa de los hemates e informar cualquier observacin que pueda existir. 12. Observar en el frotis las plaquetas y realizar el recuento manual. 13. Informar la frmula diferencial manual complementariamente con los otros resultados realizados por el Cell-Dyn 3700. 14. La frmula diferencial que realiza el analizador, slo servir como informacin, mas no se tomar en cuenta para el reporte de los resultados. 15. Cualquier alarma producida por el analizador ser chequeado de forma manual: (Hematocrito, recuento de leucocitos, recuento de hemates, recuento de plaquetas).

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CELULAS SANGRE PERIFERICA SISTEMA MIELOCITICOCARACTERISTICAS TAMAO MIELOBLASTO 15 20 u PROMIELOCITO 20 -25 u MIELOCITO 10 18 u

NUCLEO

Perifrico, color rojo, Largo u oval y Largo, redondo, oval cromatina laxa. cromatina relativamente laxa. 2 o ms nucleolos Nucleolo puede ser visible, no necesariamente. Azul intenso, no tiene Presencia de grnulos, Azul-rosado, grnulos grnulos. el citoplasma tie prpura. azulado- prpura. Halo claro perinuclear.

CITOPLASMA

CARACTERISTICAS TAMAO NUCLEO

METAMIELOCITO 10 -16 u En forma de rion. Cromatina condensada. Nucleolo ausente.

ABASTONADO 10 15 u Forma de bastn Cromatina condensada. compacta

SEGMENTADOS 10 15 u 2 a 5 Lbulos con finos filamentos. Filamentos. Cromatina compacta. Ausencia de nucleolo. Rosado Grnulos prpuras. finos,

Ausencia de nucleolo. CITOPLASMA INTENSO. Grnulo rosado a Prpura . prpura, son los Grnulos finos prpura. grnulos secundarios.

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CELULAS SANGRE PERIFERICA SISTEMA MIELOCITICO

CITOPLASMA TAMAO NUCLEO

EOSINOFILO 10 15 u 2 3 lbulos Cromatina compacta. Nucleolo ausente.

BASOFILO 10 - 15 u 2 3 Lbulos Cromatina compacta. Nucleolo ausente. Grnulos azul oscuro.

LINFOCITO 7 15 u Redondo. Cromatina completa. Nucleolo ausente. Cantidad variable. grnulos

CITOPLASMA

Abundante Grnulos naranja.

Grnulos a menudo Azulado. cubren el ncleo. Presencia de (escasos).

CITOPLASMA TAMAO NUCLEO

MONOCITO 12 2 4 u Ovalado, irregular escotadura plegamientos. Azul-grisceo En ocasiones presentan pseudpodos. con grande con o

Forma arrionada. CITOPLASMA

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FROTIS DE SANGRE PERIFERICA CELULAS NORMALES.

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ALTERACIONES DE SERIE BLANCA

ELEMENTO

CARACTERISTICAS

PRESENCIA En caso de infecciones agudas.

GRANULACIONES Aumento de grnulos TOXICAS oscuros. HIPERSEGMENTACION DE NEUTROFILOS. Neutrfilos con 5 o ms segmentaciones nucleares.

Paciente con anemia. Deficiencia de Vit.B12 Acido Flico. Anomala de Pelger Huet.

HIPOSEGMENTACION DE NEUTROFILOS.

Neutrfilos con 2 lbulos

GRANULACIONES TOXICAS

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HIPERSEGMENTACION

HIPOSEGMENTACION

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ALTERACIONES DE SERIE BLANCA

ELEMENTO VACUOLAS CUERPOS DOHLE DE

CARACTERISTICA Redonda, espacios claros.

PRESENCIA Infecciones severas. bacterianas bacterianas

Inclusin celeste claro en citoplasma de Infecciones Neutrfilos. severas.

LINFOCITO Linfocito con abundante citoplasma a Asociado a cuadros ATIPICO menudo bordea al glbulo rojo. virales. CELULAS .Citoplasma azul, ncleo excntrico, halo Rara vez aparece en PLASMATICAS claro perinuclear. sangre perifrica, casos severos de inflamacin, o estado final de Mieloma Mltiple.

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VACUOLAS

CUERPOS DE DOHLE

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LINFOCITOS ATIPICOS

CELULA PLASMATICAANGLOLAB SOP# G-3.2.1 Versin# 2.1 Fecha: 25 Nov, 2008 Pagina 19 de 32

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CELULAS SANGRE PERIFERICA SISTEMA ERITROCITICO

CARACTERISTICAS TAMAO NUCLEO

PRONORMOBLASTO 14 24 u Grande, laxa

NORMOBLASTO BASOFILO 10 17 u

NORMOBLASTO POLICROMATOFILO 10 15 u Grande,redondo,Oval

Oval,Cromatina Grande,Oval,Cromatin a Laxa. Ausencia nucleolo. Azul .

Presencia de nucleolo. CITOPLASMA Azul oscuro, con halo claro perinuclear.

Cromatina Moderadamente de Laxa. Azul grisceo

CARACTERISTICAS TAMAO

NORMOBLASTO ORTOCROMATICO 8 12 u

GLOBULO ROJO 8 10 u

HEMATIE 68u Disco Biconcavo, con anillo central plido.

POLICROMATOFILO MADURO

NUCLEO

Redondo pequeo, Ausente cromatina densa. ausencia de nucleolo. Rosado grisceo Azul rosado

Ausente

CITOPLASMA

Rosado

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CELULAS SANGRE PERIFERICA SISTEMA ERITROCITICO

Hematocrito manual ( Micromtodo): 1. Se usa un tubo de hematocrito capilar de unos 7 cm con un orificio de 1 mm.

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ANGLOLAB S.A. CLINICA ANGLOAMERICANA SOP: Hemograma completo con frmula diferencial.2. El tubo de microhematocrito se llena por atraccin capilar por el punto de puncin de flujo libre o por una muestra venosa bien mezclada. 3. El tubo debe ser llenado hasta por lo menos 5 cm, el extremo vaco se sella con plastilina. 4. El tubo se coloca en los huecos radiales de la microcentrfuga, con el extremo sellado lejos del centro. 5. Colocar un tubo al lado opuesto para evitar roturas (contrapeso). 6. Poner a centrifugar 5 minutos de 10.000 a 12.000 g. 7. Para hematocritos mayores de 50% una centrifugacin adicional es necesaria. 8. Calcular los resultados interpolando el capilar a la tabla para sacar el porcentaje de Hematocrito. Recuento de leucocitos Manual: 1. La sangre bien homogenizada se diluye 1:20 con Turk , el tubo donde se realiza la dilucin debe de homogenizarse por lo menos 5 minutos, ( chequear el estado del turk, filtrar de ser necesario) 2. Llenar la cmara de neubauer, lo suficiente para llenar el espacio bajo el cubre objetos. 3. Dejar reposar unos minutos para que las clulas reposen. 4. Observar la cmara con el objetivo de bajo aumento 10x, para verificar la distribucin celular. 5. Cerrar el diafragma del condensador ligeramente para que los leucocitos resalten. 6. Contar los cuadrados grandes de la cmara (4 esquinas), cada uno con 16 cuadrados contar ambos lados de la cmara, en total se contarn 8 cuadrados grandes, con un total de 128 cuadrados pequeos. 7. Cada cuadrado grande incluye un volumen de 1/10 mm3, y la dilucin es 1:20. cc Leucocitos (clulas/mm3) = ------- x d x 10 cgc cc: Total de clulas contadas. d: es el factor de dilucin ( 20) 10: es el factor que transforma el valor de uno de los cuadrados (1/10mm3) al volumen en mm3 cgc: numero de cuadrados grandes contados. En la leucopenia con una cantidad de leucocitos menor a 2,500, se puede realizar una dilucin 1:10. En la leucocitosis la dilucin puede ser 1:100 o incluso 1:200.

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ANGLOLAB S.A. CLINICA ANGLOAMERICANA SOP: Hemograma completo con frmula diferencial.Correccin de Leucocitos por presencia de hemates nucleados (>10%): Los hemates nucleados pueden contarse y no distinguirse de los leucocitos, si su nmero supera ms del 10% de clulas contadas en el diferencial. Cmputo total x 100 Leucocitos verdaderos: ---------------------------------------100 + N de NRBC

CALCULOEl analizador har el clculo de todos los parmetros establecidos (Ver SOP Operaciones Cell-Dyn 3700).

ndices de RBC:VCM (Volumen Corpuscular Medio): Es el volumen medio de todos los eritrocitos. Se obtiene a partir de los datos de distribucin por tamao de los eritrocitos y se expresa en femtolitros (fl). La media de dimetro de los eritrocitos es aprox. 7.3 7.5 micrones, obteniendo se una curva normal, cuando hay microcitosis o macrocitosis, la distribucin de la curva se desplaza a un lado o al otro, cuando hay una marcada diferencia en el tamao de los eritrocitos se encontrarn 2 picos indicando la presencia de poblaciones dismrficos de hemates.

Hto (%) x 1000 VCM: ------------------------------------------ x 10000 Rcto Eritrocitos (millones /mm3) Hemoglobina Corpuscular Media (MCH): Es el promedio de peso de hemoglobina contenida en un eritrocito y se expresa en picogramos. La lmina perifrica, para confirmar la hipocroma. Hemoglobina x 1000 MCH: ----------------------------------------- x 10000 pg. Rcto eritrocitos (millones /mm3). Concentracin de Hemoglobina Corpuscular Media (MCHC): Es la relacin entre el peso de hemoglobina y el volumen medio de los eritrocitos, expresa en g/dl. Expresa la concentracin promedio de hemoglobina en cada eritrocito. Hemoglobina MCHC: ------------------------ x 100 HematocritoANGLOLAB SOP# G-3.2.1 Versin# 2.1 Fecha: 25 Nov, 2008 Pagina 23 de 32

fl.

g/dl.

ANGLOLAB S.A. CLINICA ANGLOAMERICANA SOP: Hemograma completo con frmula diferencial.Hematocrito: Es el cociente del volumen de los eritrocitos y el de la sangre total. Es expresado tanto como porcentaje o como una fraccin decimal. El hematocrito se puede medir por centrifugacin de macromtodos y micromtodos, o indirectamente como el producto del VCM por el cmputo de eritrocitos del instrumento.

REPORTE DE RESULTADOS: Interpretacin de resultados:El analizador pondr de color amarillo los resultados que se encuentre debajo de los parmetros establecidos. El analizador pondr de color prpura los valores por encima de los parmetros establecidos. VCM: < 80 fl microcitosis > 97 fl macrocitosis. MCH: < 27 pg hipocroma > 33 pg policromasia. RDW: > 14.8 anisocitosis. Todo resultado sospechoso o que tenga alguna alarma deber ser confirmado de manera manual o por revisin de la lmina en el microscopio.

Formato de reporte:Los resultados impresos son almacenados en el file correspondiente (pacientes, controles, curvas de levey-jenings). El sistema de Laboratorio, posee un formato de reporte con valores normales establecidos.

Procedimiento para resultados anormales / resultados inesperados:Todos los resultados anormales, sern chequeados de manera manual y revisin de la lmina perifrica por el personal encargado, cualquier resultado dentro de los valores crticos, se reportarn inmediatamente a los doctores del laboratorio. Alarmas: Alarmas WBC: WIC ( White Blood Cell Impedance Count): Existe una diferencia significativa entre WIC y WOC, WIC fue elegido como el valor ms exacto. Revise el frotis sanguneo y realice el recuento manual, para confirmar el conteo WIC.

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ANGLOLAB S.A. CLINICA ANGLOAMERICANA SOP: Hemograma completo con frmula diferencial. WOC ( White Blood Cell Optical Count): Existe una diferencia significativa entre los valores de WIC y WOC, WOC fue elegido como el valor mas exacto por el equipo. Revise el frotis sanguneo y realice el recuento manual, para confirmar el conteo WOC. KWOC ( Kinetically corrected WOC): Existe una diferencia significativa entre WIC y WOC y se detecto una cada cintica en la tasa de recuento WOC. Revise el frotis sanguneo y realice un conteo manual para leucocitos. WBC: Resultado sospechoso. Existe una diferencia entre WIC y WOC, el algoritmo selecciona el recuento de leucocitos que estima como ptimo y se visualiza esta alarma. Si se visualiza las alarmas NRBC (eritrocitos nucleados) y/o RRBC (eritrocitos resistentes), repetir el anlisis usando el modo de eritrocitos resistentes, si persiste la alarma, revise si existen NRBC y realice el conteo manual de leucocitos. Para correr en modo resistente, cambiar a modo abierto [SPECIMEN TYPE] [RESISTANT RBC], luego de correr, regresar al modo normal. No ejecute la correccin para glbulos blancos cuando haya alarma para NRBC. DFLT: Se utilizaron criterios pre-programados para establecer la diferenciacin de las poblaciones de los leucocitos. Realizar la formula diferencial de forma manual y no comparar con los resultados obtenidos en el equipo. BAND: El recuento en la regin donde se localizan los abastonados, es 12.5% del recuento tal de leucocitos. Revise el frotis la presencia de abastonados. IG: El recuento en la regin es mayor del 3% del recuento total de leucocitos. Revise la presencia de granulocitos inmaduros. BLAST: El recuento en la regin de dispersin donde se localizan los blastos, es 1% del recuento total de leucocitos. Revise en el frotis la presencia de de clulas inmaduras. VAR LYM: El recuento en la regin es >10% del recuento total e leucocitos. El recuento absoluto de linfocitos o de mononucleares excede los criterios esperados. La relacin entre neutrfilos y linfocitos resulta inferior a los criterios esperados. La comparacin WIC/WOC indica la presencia sospechosa de linfocitos modificados, indicando la presencia de linfocitos frgiles. Revise la presencia de linfocitos atpicos, o de clulas rotas en el frotis. NWBC (Non White Blood Cell): Existe una poblacin no leucocitaria en la regin N1 situada debajo del umbral de leucocitos. El recuento en la regin N1 supera el 2.9% del recuento total de leucocitos, Los tipos de clulas que pueden encontrarse: Niveles reducidos de hemates nucleados, hemates no hemolizados, plaquetas agregadas, plaquetas gigantes. Revisar la presencia de hemates nucleados, corregir si es necesario los leucocitos, revisar plaquetas y realizar el conteo manual. FWBC (Fragile White Blood Cells) : Se sospecha la presencia de leucocitos frgiles. Revisar el frotis sanguneo, si no se detectan alarmas, se puede notificar el recuento. Nunca procese en el modo de hemates resistentes. Alarmas en RBC:ANGLOLAB SOP# G-3.2.1 Versin# 2.1 Fecha: 25 Nov, 2008 Pagina 25 de 32

ANGLOLAB S.A. CLINICA ANGLOAMERICANA SOP: Hemograma completo con frmula diferencial. NRBC: Se sospecha la presencia de eritrocitos nucleados. El recuento en la regin N1 supera el 2.9%. Se puede encontrar eritrocitos nucleados, plaquetas agregadas, plaquetas gigantes. Repita el procediendo en el modo de eritrocitos resistentes, de persistir la alarma revise el frotis para ver presencia de hemates nucleados, NO ES NECESARIO CORREGIR LOS LEUCOCITOS CUANDO SE OBSERVA ESTA ALARMA. RRBC ( Resistant Red Blood Cells): Se sospecha la presencia de eritrocitos resistentes a la lisis. Repita el anlisis utilizando el modo de eritrocitos resistentes. Este modo slo se puede procesar en el modo abierto. Si se visualiza la alarma WBC revise un frotis. RBC MORPH: Uno o ms parmetros de las constantes corpusculares o RDW, sale fuera de rango. Revisar la morfologa de los hemates en el frotis sanguneo.

Alarmas en Plaquetas: LRI (Lower Region Interference: Interferencia en la regin inferior puede ser causada por: Restos (abertura sucia), reactivo contaminado, ruido elctrico, microburbujas). Realice un background y verifique los resultados, si se haya dentro de los lmites repita la muestra, si persiste la alarma revise el frotis para determinar la causa, realice el recuento manual de plaquetas. URI (Upper Region Interferente): La interferencia en la regin umbral superior supera el lmite predeterminado. La alarma puede ser causada por: Eritrocitos microcticos, esquistocitos, plaquetas gigantes, clulas falciformes, plaquetas agregadas. Revise el histograma de plaquetas. Si el MCV es bajo y/o el histograma muestra una superposicin entre las poblaciones eritrocitarias y plaquetarias, revise el frotis para establecer la causa de la alarma y realice el recuento de plaquetas manual. Un histograma lleno de baches puede indicar la presencia de plaquetas agregadas. LURI (Lower and Upper Region Interferente): La interferencia se detecta en las regiones superior e inferior del histograma de plaquetas. Siga las instrucciones de las alarmas LRI y URI. PLTR (Platelet Recount): El recuento de plaquetas result >>>). 2. En un tubo limpio, adicionar 1 ml de Cell-Dyn diluyente y 1 ml de muestra (sangre total con EDTA). 3. Mezclar la muestra por 5 minutos.ANGLOLAB SOP# G-3.2.1 Versin# 2.1 Fecha: 25 Nov, 2008 Pagina 27 de 32

LINEALIDAD 0 99.9 k/uL 0 250 K/uL 0 8 M/uL 0 24 g/dl 50 200 fl 0 2000 Ku/L 5- 18 fl

RANGOS ACEPTABLES ( Se aplica el valor ms alto) +/- 0.4 3.0% +/- 0.4 4.0% +/- 0.1 2.5% +/- 0.3 2.0% +/- 3.0 3.0% +/- 10.0 7% +/- 1.0 6.0%

ANGLOLAB S.A. CLINICA ANGLOAMERICANA SOP: Hemograma completo con frmula diferencial.4. Procesar la muestra dentro de la primera hora de realizada la dilucin. 5. Multiplicar los resultados de la dilucin por el factor 2.

Valores crticos:El laboratorio ha establecido los valores crticos para lo siguiente: Hemoglobina: < 7.5 g/dl > 18 g/dl Leucocitos: < 1500 / mm3 > 30000 / mm3

Todo valor dentro de los valores crticos sern reportados de inmediato al doctor de laboratorio e informados al mdico tratante.

NOTAS DEL PROCEDIMIENTO:N/A

LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO:Existen sustancias o elementos en la muestra que pueden interferir con el procedimiento. WBC: Presencia de NRBCs (Hemates nucleados), plaquetas agrupadas, glbulos blancos frgiles. RBC: Elevado conteo de WBC, incremento nmero de plaquetas gigantes, autoaglutinacin y hemlisis. HGB: Elevado conteo de WBC, incremento de protenas plasmticas, lipemia, ictericia y RBCs resistentes a la lisis. MCV: Elevado conteo de WBC, hiperglicemia, hemlisis, incremento en el nmero de plaquetas gigantes, si hay aglutininas fras, habr un incremento del MCV con resultados falsos de HGB, MCH y MCHC. PLT: WBC fragmentos, hemlisis, RBCs microcticos, plaquetas agrupadas e incremento en el nmero de plaquetas gigantes. Muestras con ms de 24 horas de extraccin, pueden causar muchas alarmas, no ejecutar el conteo diferencial, a menos que la lmina haya sido hecha el da de la toma de muestra.

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REFERENCIAS:Manual de Operaciones del Sistema Cell Dyn 3700 (Versin 1.1) SOP Procedimiento de operacin Cell Dyn 3500 Cell-Dyn 3500 / 3700 Analyzer preventive maintenance SMILE Cell Dyn 3700 Blood analyzer SMILE. El laboratorio en el diagnostico clnico, Todd sanford Davidsohn.

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Fecha: 25 Nov, 2008

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ANGLOLAB S.A. CLINICA ANGLOAMERICANA SOP: Hemograma completo con frmula diferencial. ANEXOSLog de control coloracin Wright. Log Alarmas Cell - Dyn

CONTROL DE COLORACION WRIGTHCOLORANTEPreparado por Numero de lote : Fecha de preparacin

: WRIGTH:

: NEUTROFILO

Fecha de control:

CITOPLASMAGRANULO VINO. ROJO

EOSINOFILO

BASOFILO

GRANULO NARANJA. GRANULOAZUL INTENSO.

VERIFICADO POR : COLORANTEPreparado por Numero de lote : Fecha de preparacin : Fecha de control:

: WRIGTH:

CITOPLASMAGRANULO VINO. ROJO

NEUTROFILO

EOSINOFILO

BASOFILO

GRANULO NARANJA. GRANULOAZUL INTENSO.ANGLOLAB SOP# G-3.2.1 Versin# 2.1 Fecha: 25 Nov, 2008 Pagina 29 de 32

ANGLOLAB S.A. CLINICA ANGLOAMERICANA SOP: Hemograma completo con frmula diferencial.VERIFICADO POR: COLORANTEPreparado por Nmero de lote : Fecha de preparacin

: WRIGTH:

: NEUTROFILO

Fecha de control:

CITOPLASMAGRANULO VINO. ROJO

EOSINOFILO

BASOFILO

GRANULO NARANJA. GRANULOAZUL INTENSO.

VERIFICADO:

ANGLOLAB SOP# G-3.2.1 Versin# 2.1

Fecha: 25 Nov, 2008

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ANGLOLAB S.A. CLINICA ANGLOAMERICANA SOP: Hemograma completo con frmula diferencial.ALARMAS CELL- DYN 3700

ALARMASWIC WOC KWOC WBC DFLT BAND IG BLAST VAR LYM NWBC FWBC

ALARMAS EN LEUCOCITOS (WBC) SIGNIFICADO ACCION CORRECTIVA Existe diferencia entre WIC y WOC, WIC elegido como ms exacto Revisar el frotis, realizar recuento manual de WBC Existe diferencia entre WIC y WOC,WOC elegido como ms exacto Revisar el frotis, realizar recuento manual de WBC Existe diferencia entre WIC y WOC, cada cintica de rcto. WOC Revisar el frotis, realizar recuento manual de WBC Diferencia entre WIC y WOC, resultado sospechoso Realice el conteo manual de WBC, revise presencia de hemates nucleados Criterios pre-programados para la diferenciacin de los leucocitos. Formula diferencial manual, no guiarse de resultados de Cell-Dyn Rcto >12.5% , en la regin de abastonados. Revise en el frotis la presencia de Abastonados. Rcto >3% en la region de granulocitos inmaduros, del total de WBC Revise en el frotis la presencia de granulocitos inmaduros. El rcto en la region donde se localizan los blastos es 1% o ms. Revise en el frotis la presencia de clulas inmaduras. Rcto en la regin >10% del total de leucocitos, Rcto de monocitos Revise la presencia de linfocitos atpicos o la presencia de clulas rotas en y linfocitos excede criterios esperados, relacion neutrof/linfoc inferior. el frotis. Existe una poblacin no leucocitaria debajo del umbral de leucocitos. Sospecha de leucocitos frgiles Revisar presencia de hematies nucleados, plaquetas agregadas o plaquetas gigantes. Realizar el recuento de plaquetas manual. Revisar el frotis sanguneo, si no se detecta la alarma , se puede reportar el recuento. Nunca procese en el modo de hemates resistentes.

NRBC RRBC RBC MORPH

ALARMAS EN HEMATIES (RBC) Sospecha de eritrocitos nucleados, plaquetas gigantes o agregadas. Repita en modo hematies resistentes. Si persiste la alarma , revise si hay hemates nucleados, no es necesario corregir WBC al observar la alarma. Sospecha de de eritrocitos resistentes a la lisis. Uno a ms parmetros de las constantes corpusculares o RDW sale fuera de rango. Repita el anlisis en el modo eritrocitos resistentes ( modo abierto). Si luego se ve la alarma WBC, revise el frotis. Revisar la morfologa de los hemates en el frotis sanguneo.

LRI URI

ALARMAS EN PLAQUETAS Interferencia debido a restos ( abertura sucia), reactivo contaminado, Realice un background, repita la muestra, si persite la alarma , revise el ruido electrico, microburbujas. frotis, realice el recuento manual de plaquetas. Interferencia en la regin umbral superior supera el lmite predeter. Sospecha eritrocitos microcticos, esquistocistos, plaq. Gigantes clulas falciformes, plaquetas agregadas. Interferencia en la regin inferior y superior del histograma de plaq. El recuento result