Embed Size (px)
Citation preview
73
Lampiran 1. Peremajaan Trichoderma sp.
Potato Dextrose Agar (PDA) dilarutkan
dengan aquades dan dipanaskan sampai
homogen, kemudian disterilisasi suhu 121 oC
selama 15 menit
Dituang ke dalam tabung reaksi sebanyak 3
ml, diletakkan dengan posisi miring hingga
memadat
Digores 1 ose isolat Trichoderma sp. secara
aseptis dengan metode gores secara zig-zag
Diinkubasi dalam inkubator selama 7 hari
pada suhu 35 oC.
74
Lampiran 2. Peremajaan Bakteri Bacillus mycoides
Nutrient Agar dilarutkan dengan aquades
dan dipanaskan sampai homogen, kemudian
disterilisasi suhu 121 oC selama 15 menit
Dituang ke dalam tabung reaksi sebanyak 3
ml, diletakkan dengan posisi miring hingga
memadat
Digores 1 ose isolat Bacillus mycoides
secara aseptis dengan metode gores secara
zig-zag
Diinkubasi dalam inkubator selama 24 jam
pada suhu 35 oC.
75
Lampiran 3. Pembuatan inokulum Trichoderma sp.
1 ose isolat Trichoderma sp. yang berumur 7
hari secara aseptis diinokulasikan ke dalam 10
ml Potato Dextrose Broth dan disuspensikan
Diambil 6 ml suspensi Trichoderma sp.
dimasukkan kedalam 60 ml Potato Dextrose
Agar dilakukan secara aseptis
diinkubasi pada shaker inkubator pada suhu
35oC 120 rpm selama 7 hari
76
Lampiran 4. Pembuatan inokulum Bacillus mycoides
1 ose isolat Bacillus mycoides. Secara aseptis
diinokulasikan ke dalam 10 ml Nutrient Broth
dan disuspensikan
Diambil 6 ml suspensi Bacillus mycoides
dimasukkan kedalam 60 ml Nutrient Broth
dilakukan secara aseptis
Diinkubasi pada shaker inkubator pada suhu
35oC 120 rpm selama 10 jam
77
Lampiran 5. Pembuatan media fermentasi
1,5 kg onggok kering yang telah digiling
dicampur secara merata dengan air 1500 ml
dikukus diatas air mendidih selama 30 menit
kemudian didinginkan pada suhu ruang
kemudian dicampur secara merata dengan
medium (pepton 15 g, yeast extract 10 g, Nacl
15 g, (NH4)2SO4 3, K2HPO4 4,5 g,
MgSO4.7H2O 0,75 g) dalam 1500 ml aquades
78
Lampiran 6. Fermentasi onggok dengan Trichoderma sp.
9 buah toples gelas steril diisi 50 gr substrat
onggok yang telah dikukus dan dicampur
mineral
Ditambahkan inokulum cair Trichoderma sp.
sebanyak 6%, diaduk sampai homogen,
ditutup rapat dengan menggunakan plastik
diinkubasi dalam inkubator dengan suhu 35oC
selama 3 hari, 6 hari dan 9 hari
dikeringkan menggunakan oven pada suhu 35-
45oC selama 1 hari, dianalisis kadar serat
kasar dan protein kasar.
79
Lampiran 7. Fermentasi onggok dengan Bacillus mycoides
9 buah toples gelas steril diisi 50 gr substrat
onggok yang telah dikukus dan dicampur
mineral
ditambahkan inokulum cair Bacillus mycoides
sebanyak 6%, diaduk sampai homogen,
ditutup rapat dengan menggunakan plastik
diinkubasi dalam inkubator dengan suhu 35oC
selama 3 hari, 6 hari dan 9 hari
Diinkubasi dalam inkubator selama 7 hari
pada suhu 35 oC.
80
Lampiran 8. Fermentasi onggok dengan Trichoderma sp. dan Bacillus mycoides
9 buah toples gelas steril diisi 50 gr substrat
onggok yang telah dikukus dan dicampur
mineral
ditambahkan inokulum cair Bacillus mycoides
sebanyak 3% dan Trichoderma sp. sebanyak
3%, diaduk sampai homogen, ditutup rapat
dengan menggunakan plastik
diinkubasi dalam inkubator dengan suhu 35oC
selama 3 hari, 6 hari dan 9 hari
Diinkubasi dalam inkubator selama 7 hari
pada suhu 35 oC.
81
Lampiran 9. Tabel data hasil analisa kadar serat kasar onggok
sampel ulangan m krts m sampel m akhir Serat (%)
a0b0 u1
1 1.148 2.012 1.421 13.569
2 1.147 2.009 1.414 13.290
a0b0 u2
1 1.145 2.003 1.423 13.678
2 1.146 2.005 1.419 13.403
a0b0 u3
1 1.146 2.005 1.419 13.403
2 1.147 2.009 1.414 13.219
a1b1 u1
1 1.144 2.007 1.366 11.061
2 1.146 2.012 1.369 11.083
a1b1 u2
1 1.145 2.005 1.365 10.973
2 1.144 2.016 1.367 11.062
a1b1 u3
1 1.145 2.004 1.363 10.878
2 1.144 2.009 1.364 10.951
a2b1 u1
1 1.146 2.013 1.359 10.581
2 1.144 2.005 1.357 10.623
a2b1 u2
1 1.145 2.003 1.356 10.534
2 1.144 2.012 1.359 10.686
a2b1 u3
1 1.145 2.002 1.362 10.839
2 1.144 2.017 1.359 10.659
a3b1 u1
1 1.146 2.005 1.338 9.576
2 1.145 2.003 1.336 9.536
a3b1 u2
1 1.144 2.011 1.346 10.045
2 1.145 2.006 1.345 9.970
a3b1 u3
1 1.144 2.009 1.342 9.856
2 1.145 2.003 1.343 9.885
a1b2 u1
1 1.146 2.012 1.327 8.996
2 1.144 2.006 1.329 9.222
a1b2 u2
1 1.144 2.008 1.332 9.363
2 1.145 2.003 1.335 9.486
a1b2 u3
1 1.145 2.014 1.331 9.235
2 1.144 2.007 1.328 9.168
a2 b2 u1
1 1.144 2.009 1.324 8.960
2 1.145 2.012 1.321 8.748
a2b2 u2
1 1.146 2.006 1.313 8.325
2 1.145 2.004 1.311 8.283
a2b2 1 1.145 2.006 1.309 8.175
82
u3 2 1.144 2.01 1.319 8.706
a3b2 u1
1 1.145 2.009 1.302 7.815
2 1.146 2.003 1.309 8.138
a3b2 u2
1 1.144 2.012 1.299 7.704
2 1.145 2.006 1.298 7.627
a3b2 u3
1 1.144 2.009 1.303 7.914
2 1.145 2.003 1.301 7.788
a1b3 u1
1 1.144 2.013 1.317 8.594
2 1.145 2.005 1.315 8.479
a1b3 u2
1 1.146 2.006 1.309 8.126
2 1.145 2.008 1.308 8.118
a1b3 u3
1 1.145 2.003 1.298 7.639
2 1.146 2.014 1.299 7.597
a2b3 u1
1 1.144 2.006 1.274 6.481
2 1.145 2.007 1.276 6.527
a2b3 u2
1 1.146 2.003 1.275 6.440
2 1.144 2.012 1.277 6.610
a2b3 u3
1 1.145 2.009 1.266 6.023
2 1.146 2.005 1.281 6.733
a3b3 u1
1 1.144 2.007 1.251 5.331
2 1.145 2.012 1.252 5.318
a3b3 u2
1 1.146 2.008 1.256 5.478
2 1.144 2.004 1.259 5.739
a3b3 u3
1 1.145 2.003 1.263 5.891
2 1.144 2.012 1.261 5.815
83
Lampiran 10. Tabel data hasil analisa kadar protein kasar onggok
Sampel ulangan m smpl titrasi Prot (%)
a0b0 u1
1 5.008 3 1.049
2 5.011 2.8 0.978
a0b0 u2
1 5.004 3.1 1.067
2 5.005 3 1.047
a0b0 u3
1 5.011 2.8 0.978
2 5.008 3 1.049
a1b1 u1
1 5.007 6 2.098
2 5.002 6.4 2.240
a1b1 u2
1 5.018 6.5 2.268
2 5.003 6.6 2.310
a1b1 u3
1 5.012 6 2.096
2 5.009 6.4 2.237
a2b1 u1
1 5.007 5.8 2.028
2 5.013 5.9 2.061
a2b1 u2
1 5.002 5.4 1.890
2 5.016 5.7 1.990
a2b1 u3
1 5.009 5.8 2.028
2 5.011 6 2.097
a3b1 u1
1 5.012 11.6 4.053
2 5.007 11.6 4.057
a3b1 u2
1 5.012 11.3 3.948
2 5.008 11.5 4.021
a3b1 u3
1 5.003 11.5 4.025
2 5.012 11.3 3.948
a1b2 u1
1 5.008 10 3.496
2 5.016 10.4 3.630
a1b2 u2
1 5.002 10.6 3.711
2 5.012 10.8 3.773
a1b2 u3
1 5.008 10.4 3.636
2 5.003 10.5 3.675
a2 b2 u1
1 5.012 13.5 4.716
2 5.009 13.7 4.789
a2b2 u2
1 5.003 13.6 4.760
2 5.012 13.4 4.681
a2b2 1 5.007 13.5 4.721
84
u3 2 5.004 13.4 4.689
a3b2 u1
1 5.012 14 4.891
2 5.003 14.2 4.970
a3b2 u2
1 5.012 14 4.891
2 5.007 14.1 4.931
a3b2 u3
1 5.009 14.2 4.964
2 5.018 14 4.885
a1b3 u1
1 5.007 13.7 4.791
2 5.011 13.6 4.752
a1b3 u2
1 5.003 13.7 4.795
2 5.008 13.6 4.755
a1b3 u3
1 5.003 13.5 4.725
2 5.016 13.9 4.852
a2b3 u1
1 5.003 13.9 4.865
2 5.007 13.8 4.826
a2b3 u2
1 5.012 14 4.891
2 5.008 14.2 4.965
a2b3 u3
1 5.003 14.3 5.005
2 5.012 14.2 4.961
a3b3 u1
1 5.008 15.9 5.559
2 5.007 15.5 5.421
a3b3 u2
1 5.012 15.8 5.520
2 5.009 15.7 5.488
a3b3 u3
1 5.016 15.7 5.481
2 5.004 15.8 5.529
85
Lampiran 11. Data rata-rata kadar serat kasar onggok
Perlakuan kadar serat kasar onggok (%) Rata-
rata Jenis inokulum
Lama
fermentasi
Ulangan
1
Ulangan
2
Ulangan
3
a1
b1 11.072 11.017 10.914 11.001
b2 9.109 9.424 9.202 9.245
b3 8.536 8.122 7.618 8.092
a2
b1 10.602 10.61 10.749 10.654
b2 8.854 8.304 8.441 8.533
b3 6.054 6.525 6.378 6.319
a3
b1 9.556 10.007 9.87 9.811
b2 7.976 7.665 7.851 7.830
b3 5.325 5.608 5.853 5.595
a0b0 13.401 13.32 13.569 13.43
86
Lampiran 12. Data rata-rata kadar protein kasar onggok
Perlakuan kadar protein kasar onggok
(%) Rata-rata
Jenis inokulum lama
fermentasi
Ulangan
1
Ulangan
2
Ulangan
3
a1
b1 2.169 2.289 2.045 2.168
b2 3.563 3.742 3.656 3.654
b3 4.772 4.775 4.789 4.779
a2
b1 2.045 1.94 2.062 2.016
b2 4.753 4.721 4.705 4.726
b3 4.845 4.928 4.983 4.919
a3
b1 4.055 3.984 3.986 4.008
b2 4.93 4.911 4.925 4.922
b3 5.49 5.504 5.505 5.499
a0b0 1.014 1.003 0.987 1.01
87
Lampiran 13. Analisis hasil Analysis of Variance (ANOVA)
kadar serat kasar onggok setelah fermentasi
a. Uji Anova
Dependent Variable:data
Source
Type III Sum
of Squares df Mean Square F Sig.
Model 2061.293a 9 229.033 3.827E3 .000
jenis inokulum 13.063 2 6.532 109.136 .000
lama fermentasi 65.669 2 32.834 548.637 .000
jenis inokulum *
lama fermentasi 2.085 4 .521 8.709 .000
Error 1.077 18 .060
Total 2062.371 27
a. R Squared = .999 (Adjusted R Squared = .999)
b. Uji DMRT pengaruh jenis inokulum terhadap kadar serat kasar onggok
Duncan
jenis
inokulum N
Subset
1 2 3
a3 9 7.7457
a2 9 8.5019
a1 9 9.4460
Sig. 1.000 1.000 1.000
88
c. Uji DMRT pengaruh lama fermentasi terhadap kadar serat kasar onggok
Duncan
lama
fermentasi N
Subset
1 2 3
b3 9 6.6688
b2 9 8.5362
b1 9 10.4886
Sig. 1.000 1.000 1.000
d. Uji DMRT interaksi jenis inokulum dan lama fermentasi terhadap kadar serat
kasar onggok
Duncan
perlakuan N
Subset for alpha = 0.05
1 2 3 4 5 6 7
a3b3 3 5.5953
a2b3 3 6.3190
a3b2 3 7.8307
a1b3 3 8.0920
a2b2 3 8.5330
a1b2 3 9.2450
a3b1 3 9.8110
a2b1 3 10.6537
a1b1 3 11.0010
Sig. 1.000 1.000 .207 1.000 1.000 1.000 .099
89
Lampiran 14. Analisis hasil Analysis of Variance (ANOVA)
kadar protein kasar onggok setelah fermentasi
a. Uji Anova
Tests of Between-Subjects Effects
Dependent Variable:data
Source
Type III Sum of
Squares df Mean Square F Sig.
Model 486.052a 9 54.006 1.406E4 .000
jenisinokulum 7.821 2 3.911 1.018E3 .000
lamafermentasi 26.260 2 13.130 3.418E3 .000
jenisinokulum
*
lamafermentasi
3.235 4 .809 210.555 .000
Error .069 18 .004
Total 486.121 27
a. R Squared = 1.000 (Adjusted R Squared = 1.000)
b. Uji DMRT pengaruh jenis inokulum terhadap kadar protein kasar
Duncan
jenis
inokulum N
Subset
1 2 3
a1 9 3.5333
a2 9 3.8869
a3 9 4.8100
Sig. 1.000 1.000 1.000
90
c. Uji DMRT pengaruh lama fermentasi terhadap kadar protein kasar
Duncan
lama
fermentasi N
Subset
1 2 3
b1 9 2.7306
b2 9 4.4340
b3 9 5.0657
Sig. 1.000 1.000 1.000
d. Uji DMRT interaksi jenis inokulum dan lama fermentasi terhadap kadar
protein kasar onggok
Duncan
perlaku
an N
Subset for alpha = 0.05
1 2 3 4 5 6 7
a2b1 3 2.0157
a1b1 3 2.1677
a1b2 3 3.6537
a3b1 3 4.0083
a2b2 3 4.7263
a1b3 3 4.7787
a2b3 3 4.9187
a3b2 3 4.9220
a3b3 3 5.4997
Sig. 1.000 1.000 1.000 1.000 .315 .948 1.000
91
Lampiran 15. Gambar onggok setelah fermentasi
Onggok setelah fermentasi 3 hari, suhu 35oC dengan Bacillus mycoides
Onggok setelah fermentasi 3 hari, suhu 35oC dengan Trichoderma sp.
Onggok setelah fermentasi 3 hari, suhu 35oC dengan Bacillus mycoides dan
Trichoderma sp
92
Onggok setelah fermentasi 6 hari, suhu 35oC dengan Bacillus mycoides
Onggok setelah fermentasi 6 hari, suhu 35oC dengan Trichoderma sp.
Onggok setelah fermentasi 6 hari, suhu 35oC dengan Bacillus mycoides dan
Trichoderma sp
93
Onggok setelah fermentasi 9 hari, suhu 35oC dengan Bacillus mycoides
Onggok setelah fermentasi 9 hari, suhu 35oC dengan Trichoderma sp.
Onggok setelah fermentasi 9 hari, suhu 35oC dengan Bacillus mycoides dan
Trichoderma sp
94
Lampiran 16. Onggok Hasil Fermentasi yang telah dioven dan digiling
jenis inokulum Bacillus mycoides ; Lama fermentasi 3 hari
jenis inokulum Trichoderma sp. ; Lama fermentasi 3 hari
jenis inokulum Bacillus mycoides dan Trichoderma sp. ; Lama fermentasi 3 hari
95
jenis inokulum Bacillus mycoides ; Lama fermentasi 6 hari
jenis inokulum Trichoderma sp. ; Lama fermentasi 6 hari
jenis inokulum Bacillus mycoides dan Trichoderma sp. ; Lama fermentasi 6 hari
96
jenis inokulum Bacillus mycoides ; Lama fermentasi 9 hari
jenis inokulum Trichoderma sp. ; Lama fermentasi 9 hari
jenis inokulum Bacillus mycoides dan Trichoderma sp. ; Lama fermentasi 9 hari
97
Lampiran17. Gambar Alat Penelitian
Timbangan
Timbangan Anlitik
Laminar Air Flow
Autkolaf
98
Shaker Inkubator
Inkubator
Oven
Hot Plate
Lemari Es
Blender
99
Alat kukus
Toples Gelas
Mikro pipet dan Blu Tip
100
Lampiran 18. Gambar Bahan Penelitian
Onggok Onggok setelah dikukus
Mineral untuk Fermentasi Inokulum Trichoderma sp. pada media
PDB
101
Inokulum Bacillus mycoides, pada
media NB
Aquades PH 7
