PHÂN TÍCH PHÂN TỬ TRONG CHẨN ĐÓAN LÂM SÀNG

PHÂN TÍCH PHÂN TỬ TRONG CHẨN ĐÓAN LÂM SÀNG

ĐẠI HỌC BÁCH KHOA TP.HCM

KHOA KHOA HỌC ỨNG DUNG

NGÀNH VẬT LÝ KỸ THUẬT

NHÓM THỰC HIỆN

ĐẶNG NGUYỄN NGỌC AN

NGUYỄN LÊ Ấn

NGUYỂN LÊ HÒANG ANH

NGUYỄN XUÂN HÒA

NGUYỄN QUỐC PHONG

PHẠM NGUYỄN MẠNH CƯỜNG


NỘI DUNG:

1. Nhắc lại một số khái niệm

2. Các phương pháp đo

3. Các lọai máy dùng trong phân tích lâm sàng

4. Một số vấn đề cần quan tâm


1.khái niệm: Trạng thái bão hòa của oxy Bilirubin Lactate Creatine ure Glucose


Trạng thái bão hòa của oxy (SO2) là tỷ số giữa lượng oxy cấp cho máu với lượng oxy cấp vào

Bilirubin:C3H36N4O6 có trong mật ,máu ,nước tiểu,nó là chất được tạo thành khi hồng cấu được thay thế.

Lactate :Lactate là một lạoi ion được tạo ra do axit lactic có trong máu.Axít lactic là chất trung gian được chuyển hóa có liên quan đến nhiều phản ứng hóa sinh

Creatine: là sản phẩm của phản ứng thủy phân Phosphocreatine

Phosphocreatine->ADP->ATP+creatine->phosphocreatine

Ure : là một hợp chất chứa Nitơ,là sản phẩm tạo thành trong phản ứng phá vỡ protêin

Glucoselà nguồn gốc của sự họat động của tất cà các cơ quang



2. Các phương pháp phân tích : Phương pháp điện hóa Phương pháp điện cực để đo độ PH và CO2

Phương pháp điện trắc quang Đo [O2] bằng phổ hồng ngọai Đo [N] bằng máy đo phổ háp thụ Bằng máy đo hùynh quang và máy đơn sắc Hiện tượng điện chuyển


Phương pháp điện hóaPhöông phaùp naøy ñeå ño doøng ñieän chaïy

trong pin ñieän hoùa khi ñaët moät ñieän theá ôû moät ñieän cöïc.Ñieän cöïc clark laø moät caûm bieán ñieän ñeå ño aùp suaát rieâng phaàn cuûa oxi coù trong hôïp chaát PO2 .Ñieän cöïc clark thöïc chaát laø moät pin ñieän hoùa bao goàm 2 ñieän cöïc ,catot ñöôïc bao phuû bôûi platin coøn anot thì ñöôïc bao phuû baèng AgCl .Anot AgCl ñöôïc nhuùng vaøo trong dung dòch ñeäm phosphate chöùa KCl ñeå laøm chatá ñeäm cho ion H+ ñöôïc taïo ra ôû catot .


Phương pháp điện cực để đo độ PH và CO2

Điện cực chọn lọc ion được sử dụng để đo độ hoạt động của ion đặc trưng trong một nuồn hoặc DD.Một điện cực chọn lọc ion có chứa một màn có khả năng thẩm thấu các cation hay các anion đặc trưng .Với sự có mặt của các ion đặc trưng,màn sẽ tạo ra một hiệu điện thế tỷ lệ với độ hoạt độngcủa ion.

Việc đo pH sẽ sử dụng điện cực chọn lọc ion(ISE)với màn thủy tinh. Để ngăn cản những sai sót trong quá trình đo pH do ảnh hưởng của các ion khác gây ra,thì lượng ion chọn lọc qua màng thủy phải lớn.Một loại màn hay sử dụng là màn thuỷ tinh composite gồm các thành phần : silicon dioxide, liti oxide,và canxi oxide với các tỷ lệ tương ứng 68:25:7(Burtis and Ashwood,1994).


_ Màn thuỷ tinh phân tách DD kiểm tra ở mặt 2 với DD tham khảo (thường là DD HCl đã biết độ pH) ở mặt 2.Khi pH của DD1 và DD 2 khác nhau ,thì một hiệu điện thế thong qua màn sẽ hình thành V=V1 -V2 . Điện thế của DD1(HCl) được ghi nhận lại bởi một điện cụưc tham khảo như là Ag/AgCl. Điện thế của DD2 có thể được ghi nhận lại với một điện cực calomel.Thực tế , điện cực pH tuân theo phương trình của Nernst

Với E : điện thế R: hằng số khí phổ biến F: hằng số Faraday(=96487 C/mol) T: nhiệt độ tuyệt đối Z: điện tích của ion ai : độ hoạt động của ion K :hằng số ,phụ thuộc các nguồn khác nhau


Phương pháp điện trắc quang_Lửa trắc quang,một phần của việc kiểm tra sự phản xạ ánh sáng ,là một

kỹ thuật phổ biến dùng để định lượng nồng độ Na, K, và Liti trong máu. Đó là một kỹ thuật phù hợp để định lượng những nguyên tố này,bởi vì so với Ca và Mg,chúng có năng lượng kích thích thấp hơn .

_Mụch đích của lửa là cung cấp năng lượng cho các nguyên tố này để những điện tử ở lớp vỏ ngoài cùng bị kích thích từ mức cơ bản nhảy lên mức năng lượng cao hơn.Các điện tử ở mức năng lượng kích thích này có trạng thái không bền nên sẽ chuyển về mức năng lượng cơ bản đồng thời phát ra một phát xạ photon có bước sóng đặc trưng . Bước sóng của ánh sáng phát xạ của một nguyên tố sẽ đặc trưng cho nguyên tố đó. Khi K, Na, Liti ở trong dung dịch (có nước) sẽ tồn tại dưới dạng cation và được rọi sáng bởi đèn ,thì Na sẽ phát ra ánh sáng màu vàng,K phát ra ánh sáng màu tím,và Liti là màu đỏ.Cường độ của ánh sáng phát ra sẽ tỷ lệ với lượng photon phát xạ.


Đo [O2] bằng phổ hồng ngọai


Đo [N] bằng máy đo phổ háp thụ

Gas Chromatography-Mass Spectrometry (GC-MS)

Liquid Chromatography-Mass Spectrometry (GC-MS)


Bằng máy đo hùynh quang và máy đơn sắc _Söï phaùt huyønh quang laø keát quaû

cuûa quaù trình chuyeån möùc naêng löôïng töø traïng thaùi kích thích veà traïng thaùi ban ñaàu.

Maùy ño huyønh quang laø thieát bò ño cöôøng ñoä aùnh saùng phaùt ra khi ñieän töû töø traïng thaùi kích thích veà traïng thaùi ban ñaàu (traïng thaùi cô baûn).


Caáu taïo:

3.15 Sô ñoà maùy ño huøynh quang

1. Nguoàn kích thích

2. Taám loïc sô caáp

3.Taám loïc thöù caáp

4.Mẫu vật5.Ñaàu thu 6.Boä ñoïc vaø xöû

lyù


ÖÙng duïng : maùy ñöôïc söû duïng ñeå ño löôøng caùc thuoác söû duïng trong chöõa beänh nhö:

Phenobarbital (thuoác chöõa beänh Ñoäng Kinh),

Caùc loïai Enzym: Proteases duøng ñeå phaù vôõ caùc Protein ñeå giaûi phoùng naêng löôïng,

caùc Hormon: Cortisol, caùc Ananly: Cathecholamin (ephinepherin

vaø nonephinepherin), bilirubin (moät loïai saéc toá trong maät)


Maùy phaân tích phoå khí (GC-gas chromatography)_ Maùy phaân tích phoå khí laø laø moät loïai cuûa maùy saéc kyù ,söû duïng khí trô ở phase ñoäng.GC söû duïng vieäc taùch rôøi caùc thaønh phaàn cuûa hôïp chaát khí baèng caùch cho bay hôi nhieät ñoä.Trong coät cuûa maùy saéc kyù,caùc hoãn hôïp khí trô thöôøng laø nhöõng phaân töû höõu co nhoû nhöu caùc loïai hôïp chaát coù trong caùc thuoác chöõa beänh,hay töø moät maãu nöôùc tieåu hoaëc maùu.

Hình 3.16 Maùy saéc kyù khí .Bao goàm bình chöùa khí-boä phaän kieåm soùat aùp suaát bình-thieát bò bôm-oáng traïng thaùi-maùy ño aùp suaát khi qua coät-ñaàu thu.

Máy GC



Gas Chromatography-Mass Spectrometry (GC-MS)

KEÁT HÔÏP GIUÕA GC VAØ MS_ GC taùch caùc hôïp chaát höõu cô deã bay hôi,keát hôïp vôùi maùy phaân tích khí vôùi maùy phaân tích phoå khoái (MS) taïo thaønh moät maùy phaân tích phoå


Ưu điểm_ Nhöõng loïai maùy phaùt haàu heát laø öùng

duïng döïa treân söï keát hôïp 2 phöông phaùp GC/MS,noù coù theå cho ra 90% cöôøng ñoä aùnh saùng khí (heli) ñi qua

Khuyết:_ Caû 2 phöông phaùp ñieàu döïa treân kyõ

thuaät phaân tích micro ñoái vôùi chaát khí,maùy phaân tích phoå khoái hoïat ñoäng ôû aùp suaát khí quyeån.Phoå cuûa maùy quang phoå khoái thì phuï thuoäc vaøo ñoä chaân khoâng.


Liquid Chromatography-Mass Spectrometry (LC-MS)

MAÙY PHAÂN TÍCH CHAÁT LOÛNGMaùy phaân tích chaát loûng laø loïai maùy quang phoå söû duïng tính nhôùt cuûa dung dòch(lôùp phase ñoäng).

Hình 3.18 giải thích cấu tạo của máy phân tích chất lỏng dưới dạng HPLC, chất lỏng được máy bơm áp suất cao bơm vào ống,sau đó mẫu cần phân tích đưa vào bộ trộn, được đưa lên cột bởi hệ thống bơm với áp suất cao.Máy thu ghi lại sự có mặt của vật chất có trong dung dịch ,và có thể thay đổi góc khúc xạ, hấp thụ ánh sáng cực tím UV,và ánh sáng hùynh quang .Giống như máy phổ khí ,thì HPLC giúp ta phân tích các hợp chất được trộn lẫn vào nhau.


Maùy phaân tích chaát loûng


Hiện tượng điện chuyển

_ Hieän töôïng ñieän chuyeån laø kyõ thuaät söû duïng nhöõng phaân töû tích ñieän rieâng bieät trong chaát loûng trung gian trong tröôøng ñieän. Noù ñöôïc söû duïng roäng raõi trong vieäc taùch nhöõng protein trong huyeát thanh,trong nöôùc tieãu,xaùc ñònh troïng löôïng protein, chuoãi DNA, chuaån ñoaùn beänh di truyeàn, vaø söï so saùnh chuoãi DNA trong ñieàu tra.

Hình 3.19: Trong heä thoáng ñieän chuyeån , nhöõng phaân töû tích ñieän di chuyeån xuyeân qua chaát ñeäm döôùi taùc duïng cuûa

löïc ñieän tröôøng

CẢM ƠN CÁC BẠN VÀ THẦY ĐÃ QUAN TÂM THEO DÕI

----o0o----

Documents

PHÂN TÍCH PHÂN TỬ TRONG CHẨN ĐÓAN LÂM SÀNG