Permasalahan pelestarian pemanfaatan tumbuhanobat pada saat ini antara lain belum adanya potensisumber daya tumbuhan obat yang akurat. Kebijakanmasih terfokus pada pemanfaatan dan belum banyakmenyentuh upaya pelestariannya. Program pemanfaatantidak seimbang dengan upaya pelestarian dan

pengkajian sehingga dikhawatirkan terjadinyaancaman kepunahan pada berbagai spesies tanamanobat (Zuhud, 1995). Kegentingan masalahnya lebihdiperberat oleh kenyataan bahwa kebanyakan habitatalaminya juga mengalami gangguan mengarah padaperubahan menyeluruh ataupun perusakan yang tidakterpulihkan lagi. Salah satu tumbuhan obat tersebutadalah inggu (Ruta angustifolia Pers.). Tumbuhan nitermasuk salah satu tumbuhan obat langka yang banyakdigunakan sebagai obat tradisional untukmenyembuhkan kejang, demam, penenang, emenoga,trachoma, keguguran dan peluruh keringat (Wahid,'

1990; Siswoyo dkk, 1994).Tumbuhan ini pada umumnya diperbanyak secara

konvensional melalui perbanyakan vegetatif (setek),karena pada ketinggian kurang dari 1.000 m dari

permukaan laut (dpi.) tidak berbunga, sehingga tidakbisa diperbanyak secara generatif (biji). Selain ituperbanyakan secara konvensional memerlukan bahantanaman yang banyak. Perbanyakan melalui kulturjaringan telah terbukti dapat memenuhi kebutuhan bibitpada tanaman yang akan dieksploitasi secara besar-besaran dan selalu siap untuk diperbanyak bila sewaktu-

waktu dibutuhkan.Pelestariannya dapat dilakukan melaui koleksi

hidup atau di kebun petani. Pelestarian dengan caratersebut memerlukan biaya pemeliharaan yang tinggi,sistem monitor cukup sulit'dan kestabilan plasma nutfahsulit dijamin karena setiap tahun perlu dibongkar untukdiperbaharui, agar tidak mati karena sifatnya yangtahunan (Sastrapradja, 1990 dan 1994).

Pada saat ini teknik kultur jaringan telah banyakdimanfaatkan dalam usaha pelestarian plasma nutfahtanaman. Keuntungap-, yang dapat diambil daripenggunaan kultur jaringan untuk pelestarian tanamanantara lain: 1). efesiensi untuk tanaman yang tidakberbiji atau tanaman berbiji rekalsitran 2). tidakmemerlukan ruang/lahan yang luas 3). resiko kegagalankarena iklim atau penyakit dapat dihindari 4). Tukarmenukar plasma nutfah mudah dilakukan 5). dapatdiperbanyak dengan cepat bila diperlukan 6). dapat

disimpan 5-20 tahun.

PENDAHULUAN

Pada saat ini tumbuhan obat di Indonesiamerupakan salah satu komoditas yang erosi genetiknyatergolong cepat dan merisaukan. Kepesatan pelangkaan

ini terjadi karena titik tumbuh bahan baku industri jamudi Indonesia masih tergantung pada tumbuhan liar danbukannya tanaman yang dibudidayakan semata-mata.

ABSTRAK

Perbanyakan dan Penyimpanan Tanaman Inggu Melalui KulturJaringan. Inggu (Ruta angustifolia Pers.) merupakan saiah satutumbuhan obat langka yang perlu dilestarikan agar tidak punah.Salah satu cara untuk melestarikannya adalah melalui teknik kulturjaringan. Penyelamatan dengan metoda tersebut dilakukan melauitahap-tahap; seleksi pohon induk, perbanyakan, penyimpanan danpengujian. Jaringan tunas aksilar 1 buku dan potongan jaringanbatang dapat digunakan sebagai eksplan dalam tahap perbanyakan.Media terbaik untuk perbanyakan dengan menggunakan tunas aksilar1 buku sebagai eksplan adalah MS3/4 + BA 2.0 mg/1 dengan rata-ratajumlah tunas 18.4 dan untuk eksplan jaringan batang adalah MS3/4 +2,4-D 0.3 mg/1 + BA 1.5 mg/1 dengan rata-rata jumlah tunas 13.Media untuk perakaran adalah MS + IAA 1.0 mg/1 dan MS + IBA 1.5mg/1. Penyimpanan biakan jaringan pada media MS + Manitol 1500mg/1 dapat menekan pertumbuhan tunas. Dengan perlakuan tersebut,biakan dapat disimpan selama 9 bulan tanpa mengalami kemundurankemampuan beregenerasi.

Kata kunci: Ruta angustifolia Pers., Perbanyakan, penyimpanan invitro pengujian beregeneras/'.

ABSTRACT

Propagation and Conservation of Ruta angustifolia Through invitro Culture. Angustifolia is an dangerous species wich need to beconcervated to freevent it is extinction. One of methode of it isconcervation is by tissue culture. By this method concervation shootbe carried out in the followed steps, selection of eksplant,multiplication and storage and the testing of regeneration ability. Asand eksplant shoot can be use one noded short or stem. The bestmedium for multiplication is MS3/4 + BA 2.0 mg/1 for nooded shootand MS3/4 + 2,4-D 0.3 mg/1 + BA 1.5 mg/1 for stemp with thosetreatments 18.4 and 13 new shoot was projust resfectively. The bestrooting media for one noded shoot and stem was resfectively MS +IAA 1.0 mg/1 and MS + IBA 1.5 mg/1. Storage of tissue culture onMS + Manitol 1500 mg/1 was able to inhibitor the shoot formation ofthe culture for with out rejust the regeneration ability for 9 month.

Key words: Ruta angustifolia Pers., multiplication, storage invitro, testing of ability.

PERBANYAKAN DAN PENYIMPANAN TANAMAN INGGUMELALUI KULTUR JARINGAN

Ali HusniBalai Penelitian Tanaman Rempah dan Obat Bogor

10

Sumber: Gati dan Husni, 1994

Untuk aklimatisasi yang terbaik digunakan mediatanah + pupuk kandang dengan perbandingan 1:1.Keberhasilan aklimatisasi pada media tersebut dapat

mencapai 100% (Kristina dkk., 1995) (Gambar 3).

PENYIMPANAN DENGAN KONDISI MINIMAL

Untuk penyimpanan biak jaringan secarasederhana pada umumnya digunakan media dengankomposisi yang sederhana atau penambahan senyawayang dapat mengurangi aktivitas metabolisme selaeperti ABA dan gula alkohol (sorbitol dan manitol).

Pada penelitian Mariska dan Seswita (1994)penambahan ABA 1.0 mg/1 dapat menekan pertumbuhan pule pandak dan tidak menurunkan daya regenerasidan pertumbuhan setelah disimpan selama 5 bulan.

Penyimpanan tanaman inggu pada media MS3/4yang mengandung ABA dapat menekan pertumbuhantunas. Pemakaian ABA 5 mg/1 nyata dapat menekanpembentukan tunas selama penyimpanan biakanberumur 9 bulan. Jumlah tunasnya selama penyimpanantetap berjumlah satu. Namun demikian tangkai dauntunas banyak yang layu. Untuk menga- tasi hal tersebutdicoba gula alkohol yaitu manitol. Penambahan manitol1.500 mg/1 temyata tidak menimbulkan gejala kelayuanpada biakan setelah penyimpanan 9 bulan (Kristina

dkk., 1995) (Tabel 3). Penampakan visual biakanselama penyimpanan dapat dilihat pada Gambar 4.

normalnormalnormalnormal

06.48.0

13.0

BA0.1BA0.5BA 1.0BA1.5

Sumber: Husni dkk. 1994

Tabel 2. Pertumbuhan dan penampakan biakan asal eksplanjaringan batang pada media MS3/4+2.4-D 0.3 mg/l+BA,umur 10 bulan

Perlakuan (mg/1) Rata-rata Jumlah tunas Visual Biakan

normalnormalnormalnormal

Visual

1.441.502.102.64

BiakanTinggi

24.826.636.636.6

tunas (cm)Jumlah

Rata-rata

18.417.213.89.8

tunas daunJumlah

BA2.0BA 1.5BA 1.0BA0.5

(mg/1)

mg/1 dapat membentuk akar rata-rata sebanyak 1.6(Gambar 2).

Tabel 1. Pertumbuhan dan penatnpakan biakan asal eksplan tunasaksilar pada media MS3/4 + BA, umur 4 minggu

Secara umum prosedur pelestarian plasma nutfahtanaman melalui kultur jaringan dilakukan dengantahap-tahap: seleksi pohon induk, perbanyakan,penyimpanan dan pengujian. Melalui tahapan ini telahberhasil dilakukan upaya penyelamatan tumbuhan obatlangka pada tanaman purwoceng (Mariska dkk., 1990),pulasari (Gati dan Mariska, 1992), pule pandak (Seswita

dkk., 1993) dan temu putri (Yelnititis dkk., 1995).

PERBANYAKAN MELALUI KULTUR JARINGAN

Bahan tanaman (eksplan) yang digunakan dalamperbanyakan melaui kultur jaringan tergantung kepadaarah dan tujuannya. Eksplan yang digunakan untukperbanyakan tumbuhan obat inggu berupa tunas aksilar

dan jaringan batang.Media tumbuh yang digunakan dalam kultur

jaringan mengandung unsur hara makro dan mikro,vitamin dan sukrosa. Selain itu zpt umumnya selaludiberikan dalam media untuk mengarahkanperkembangan eksplan. Zat pengatur tumbuh yangdigunakan dalam perbanyakan adalah dari golonganauksin dan sitokinin atau senyawa organik lainnya yangmempunyai aktivitas yang sama dengan zpt.

Untuk perbanyakan klonal, pada umumnyadipakai media dasar Murashige dan Skoog. Mediatersebut mempunyai konsentrasi garam anorganik yngtinggi dibandingkan medium lainnya terutama ion NH4dan NO3. Banyak hasil penelitian yang menyatakan

bahwa pengurangan komponen senyawa penyusunmedia berpengaruh baik terhadap pertumbuhan biakantanaman dalam botol. Kandungan ion yang terlalutinggi terutama NH4 dapat menyebabkan gejalanekrotik (Margara, 1984). Pengenceran senyawa makro(MS3/4) dalam perbanyakan tumbuhan inggu denganmenggunakan eksplan tunas aksilar 1 (satu) buku danpotongan jaringan batang dapat menginduksi tunas yang

normal (Gambar 1).Penambahan BA 2.0 mg/1 dapat menghasilkan

jumlah rata-rata tunas sebanyak 18.4, rata-rata jumlahdaun 24.8 dengan tinggi rata-rata 1.44 cm setelahbiakan berumur 4 minggu (Husni dkk., 1995). Denganmenggunakan eksplan jaringan batang pada media dasarMS3/4 yang diperkaya dengan 2,4-D 0.3 mg/1 + BA 1.5mg/1 dapat menginduksi tunas adventif rata-ratasebanyak 13 setelah biakan berumur 10 minggu ( Gati

dan Husni, 1994) (Tabel 1& 2).Untuk aplikasi penanaman di lapang, banyaknya

jumlah akar sangat mempengaruhi terhadap keberhasil-an tumbuh pada saat aklimatisasi. Media dasar yangdigunakan untuk pembentukan akar adalah MS.

penambahan auksin (IBA dan IAA) dapat menginduksipembentukan akar. Penambahan auksin IAA 1.0 mg/1dapat membentuk akar rata-rata sebanyak 3.1 setelahbiakan berumur 2 bulan. Dengan penambahan IBA 1.5

12

kannya kembali pada media multiplikasi yaitu MS3/4 +BA 1.0 mg/1. Penyimpanan dengan menggunakanmedia dasar MS dengan penambahan ABA dan manitoltidak menurunkan daya tumbuh biakan (Gambar 5).Jumlah tunas dapat dihasilkan rata-rata sebanyak 6.8walaupun sudah disimpan selama 6 bulan denganpenambahan ABA 5 mg/1.

KESIMPULANPerbanyakan tumbuhan inggu melalui kultur

jaringan kemampuan multiplikasinya cukup tinggi darieksplan tunas aksilar nodus tunggal dalam 4 minggudihasilkan tunas rata-rata 18.4.

Upaya pelestarian tumbuhan obat langka ingguperlu dilakukan agar dapat dimanfaatkan secaraberkelanjutan. Untuk pelestarian dilakukan antara lain

Pengujian Setelah Penyimpanan

Biakan yang disimpan dalam kondisi minimalperlu diuji daya tumbuhnya dengan meregenerasi-

Sumber: Krislina dkk., 1995

1.01.64.6

9 bulan

1.01.42.8

6 bulan

Penyimpanan

1.02.21.4

3 bulan

Jumlah Tunas Pada

50010001500

Manitol

Perlakaun(mg/1)

Tabel 3. Jumlah tunas biakan pada media MS3/4+manitol selamapenyimpanan 3, 6 dan 9 bulan.

Gambar 4. Penampakan visual biakan selama penyimpanan

Gambar 3. Aklimatisasi tunas hasil perbanyakan

13

Mariska, I., E. Gati dan D. Sukmadjaja. 1991. Uapayapelestarian tumbuhan obat langka purwoceng.Proseding Pelestarian dan Pemanfaatan TumbuhanObat Dari Hutan Tropis. Fak. Kehutanan, Bogor. 31Mei h. 243-247.

Mariska, I dan D. Seswita. 1994. Pengaruh lamapenyimpanan dan zat penghambat terhadap dayaregenerasi biakan pule pandak. Proseding SeminarHasil Penelitian Bioteknologi II. Puslitbang BioteknologiLIPI, Bogor. 6-7 September, h. 78-83.

Sastraparadja, S. 1990. Bioteknologi untuk pelestarianpemanfaatan plasmanutfah. Maklah dalam SeminarBioteknologi Tanaman. BPPT dan PT. Fitotek Unggul.12-13 Desember. Jakarta.

Sastraparadja, S. 1994. Peran petani pada pelestarianplasmanutfah tanaman. Makalah dalam SarasehanSehari Mengenai Peran petani Pada Pelestarian PlasmaNutfah Tanaman. Bogor, 31 Maret. 3 h.

Seswita, D., I. Mariska dan D. Sukmadjaja. 1993.Penyelamatantanaman obat langka Rouvolviaserpentina melalui kultur jaringan. Bui. Littri.6: h. 5-9.

Siswoyo, E.A.M. Zuhud dan D. Sitepu. 1994. Perkembangandan program penelitian tumbuhan obat di Indonesia.Proseding Pelestarian Pemanfaatan KeanekaragamanTumbuhan Obat Hutan Tropika Indonesia, h. 161-270.

Yeinititis dan E. Gati. 1994. Upaya pelestarian tanaman obatlangka temu putri melalui kultur jaringan. ProsedingSeminar Hasil Penelitian Bioteknologi II. PuslitbangBioteknologigi LIPI, Bogor. 6-7 September, h. 108-114.

Gati, E dan I. Mariska. 1992. Mikropropagasi tanaman obatlangka Alyxia stelata. Proseding Seminar HasilPenelitian dan Pengembangan Bioteknologi I.Puslitbang Bioteknologi LIPI, Bogor. 11-12 Mei. h.310-316.

Gati, E dan A. Husni. 1994. Regenerasi tunas adventif darijari-ngan batang dan kalus pada tanaman inggu.Makalah dalam Seminar Evaluasi Hasil PenelitianTanaman Industri. Puslitbangtri, Bogor. 10 h.

Husni, A., E. Gati dan I. Mariska. 1994. Perbanyakan klonaltanaman obat langka inggu melalui kultur jaringan.Proseding Seminar Hasil Penelitian Bioteknologi II.Puslitbang Bioteknologi LIPI, Bogor. 6-7 September, h.115-121.

Kristina, N., D. Seswita dan A. Husni. 1995. Penyimpanandan regenerasi tanaman obat inggu melalui kultur invitro. Proseding Evaluasi Hasil Penelitian TanamanIndustri. Puslitbangtri, Bogor. h. 25-33.

Margara, J. 1984. Boses dela Multiplication Vegetative.INRA, Paris Cedex.

Obat.

DAFTAR PUSTAKA

Anonimus 1990. Seminar Nasional TumbuhanBalittro, Bogor. h. 5-9.

melalui teknik kultur jaringan dengan cara pertumbuhanminimal. Pelestarian dengan cara tersebut tidakmenurunkan daya tumbuh biakan setelah ditanamkembali pada media yang terbaik untuk perbanyakan

(multiplikasi).