PENGARUH PROPOLIS TOPIKAL TERHADAP · PDF filedr. SpPD KEMD FINASIM, Supriyanto Muktiatmojo, dr. SpPD FINASIM, Dhani Redhono, dr. SpPD KPTI FINASIM, Wachid Putranto, dr. SpPD FINASIM,

perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id

i

PENGARUH PROPOLIS TOPIKAL TERHADAP PERBAIKAN LUKA, EKSPRESI

TRANS FORMING GROWTH FACTOR- DAN MATRIX METALOPROTEINASE-9

PADA MENCIT MODEL ULKUS KAKI DIABETIK

TESIS

Disusun untuk Memenuhi Sebagian Persyaratan Mencapai Derajat

Magister KesehatanProgram Studi Magister Kedokteran Keluarga

Minat Utama Ilmu Biomedik

Oleh:

Mukhlis

S501008047

PROGRAM PASCASARJANA

UNIVERSITAS SEBELAS MARETSURAKARTA

2016


ii

PENGARUH PROPOLIS TOPIKAL TERHADAP PERBAIKAN LUKA, EKSPRESI

TRANSFORMING GROWTH FACTOR- DAN MATRIX METALOPROTEINASE-9

PADA MENCIT MODEL ULKUS KAKI DIABETIK

TESIS

Disusun untuk Memenuhi Sebagian Persyaratan Mencapai Derajat

Magister Kesehatan Program Studi Magister Kedokteran Keluarga

Minat Utama Ilmu Biomedik

Oleh:

Mukhlis

S501008047

PEMBIMBING:

Dr. dr. Sugiarto, SpPD-KEMD, FINASIM

Prof. Dr. dr. H Zainal Arifin Adnan, SpPD-KR, FINASIM

Drs. Sumardi, MM

PROGRAM PASCASARJANA

UNIVERSITAS SEBELAS MARETSURAKARTA

2016


iii


iv

MOTTO

Cukuplah Allah sebagai penolong kami dan Allah sebaik-baik pelindung

(Ali Imran:173)

Sebaik-baik manusia diantaramu adalah yang paling banyak manfaatnya bagi orang

lain


v


vi


vii

KATA PENGANTAR

sayang, rahmat dan hidayahNya sehingga penyusunan tesis yang berjudul Pengaruh Propolis

Topikal terhadap Perbaikan Luka, Ekspresi Transforming Growth Factor- Matrix

Metaloproteinase-9pada mencit model ulkus kaki diabetik dapat terselesaikan. Penelitian

ini disusun untuk kualifikasi mencapai derajat Magister Kesehatan pada Program Studi

Magister Kedokteran Keluarga minat utama Ilmu Biomedik.Pada kesempatan ini penyusun

mengucapkan terima kasih yang tulus dan penghargaan yang tinggi kepada:

1. Prof. Dr. Ravik Karsidi, M.S., selaku Rektor Universitas Sebelas Maret Surakarta yang

telah memberikan kemudahan penulis dalam melaksanakan pendidikan Pasca Sarjana

Program studi Magister Kedokteran Keluarga minat utama Biomedik.

2. Prof. Dr. M. Furqon Hidayatullah, M.Pd, sebagai Direktur Program Pasca Sarjana UNS

beserta staf atas kebijakannya yang telah mendukung dalam penulisan penelitian tesis ini.

3. Prof. Dr. A. A. Subiyanto, dr.,MS. sebagai Kepala Program Studi Magister Kedokteran

Keluarga yang telah memberikan dorongan dan arahan kepada penulis untuk pelaksanaan

dan penulisantesis ini.

4. Dr. Hari Wujoso, dr.SpF,MM. sebagai tim penguji Magister Kedokteran Keluarga yang

telah memberikan dorongan dan arahan kepada penulis untuk penulisan tesis ini.

5. Prof. Dr. H.M. Bambang Purwanto, dr. SpPD KGH, FINASIM selaku Kepala Bagian

Ilmu Penyakit Dalam FK UNS/RSUD Dr Moewardi dan Pembimbing Iyang telah

membimbing dan memberikan pengarahan dalam penyusunan tesis ini,serta memberikan

kemudahan penulis dalam melaksanakan pendidikan PPDS I Ilmu Penyakit Dalam.

6. Dr. Sugiarto, dr.SpPD KEMD, FINASIM sebagai Kepala Program Studi PPDS I Ilmu

Penyakit Dalam yang telah memberikan arahan dan dukungan dalam penyusunan tesis.

7. dr. Tatar Sumandjar. SpPD KPTI, FINASIM sebagai pembimbing II, yang telah

membimbing dan memberikan pengarahan dalam penyusunan tesis ini,serta memberikan

kemudahan penulis dalam melaksanakan pendidikan PPDS I Ilmu Penyakit Dalam.

8. Drs. Sumardi, M.Si selaku pembimbing statistik penelitian, yang dengan kesabaran telah

membimbing dan memberikan pengarahan dalam penyusunan tesis.

9. Endang Agustinar, dr. M.Kes sebagai Direktur RSUD Dr. Moewardi beserta seluruh

jajaran staf direksi yang telah berkenan dan mengijinkan untuk menjalani program

pendidikan PPDS Ilmu Penyakit Dalam.


viii

10. Seluruh Staf Pengajar Ilmu Penyakit Dalam FK UNS/ RSUD Dr Moewardi

Surakarta.Prof. Dr. H A Guntur Hermawan dr. SpPD KPTI FINASIM (alm), Prof. Dr.

Zainal Arifin Adnan, dr. SpPD KR FINASIM, Prof. Dr. Djoko Hardiman, dr. SpPD

KEMD FINASIM, Prof. Dr. Bambang Purwanto, dr. SpPD KGH FINASIM, Suradi

Maryono, dr. SpPD KHOM FINASIM, Sumarmi Soewoto dr. SpPD KGER FINASIM,

Tatar Sumandjar, dr. SpPD KPTI FINASIM, Tantoro Harmono, dr. SpPD KGEH

FINASIM, Trianta Yuli Pramana, dr. SpPD KGEH FINASIM, P Kusnanto, dr. SpPD

KGEH FINASIM, Dr. Sugiarto, dr. SpPD KEMD FINASIM, Supriyanto Kartodarsono,

dr. SpPD KEMD FINASIM, Supriyanto Muktiatmojo, dr. SpPD FINASIM, Dhani

Redhono, dr. SpPD KPTI FINASIM, Wachid Putranto, dr. SpPD FINASIM, Arifin, dr.

SpPD KIC FINASIM, Fatichati Budiningsih, dr. SpPD KGer FINASIM, Agung Susanto,

dr. SpPD, Arief Nurudin, dr. SpPD, Agus Joko Susanto, dr. SpPD, Yulyani

Werdiningsih, dr. SpPD, Marwanta, dr. SpPD, dan Aritantri, dr. SpPD, Bayu Basuki W,

SpPD MKes, R. Satriyo, dr.SpPD MKes, Evi Nurhayatun, dr. SpPD Mkes, Eva Nia, dr.

SpPD MKes, Yudhi Hajianto N,dr.SpPD Mkes, Diding Heri P, dr. SpPD MKes, SpPD

MKes, Ratih Tri KD, dr. SpPD, Agus Jati SpPD, yang telah memberi dorongan dan

bimbingan dalam segala bentuk sehingga penulis bisa menyelesaikan penyusunan tesis.

11. Kedua orangtuaku tercinta, Muhammad Yazid (Alm) dan Ibunda Ambun Sani yang

telah memberikan dorongan baik moril maupun materil dalam menjalani pendidikan

PPDS I Interna maupun sebelumnya

12. Istriku tercinta Nurleli Novida, anakku tersayang Zata Amini Nazma, yang selalum

emberikan doa, semangat, keceriaan dan inspirasi dalam menjalani pendidikan PPDS I

Interna.

13. Seluruh teman sejawat Residen Penyakit Dalam yang telah memberikan dukungan dan

bantuan kepada penulis baik dalam penelitian ini maupun selama menjalani pendidikan.

14. Semua pihak yang tidak dapat penulis sebutkan satu-persatu, yang telah membantu

penulis baik dalam menjalani pendidikan maupun dalam penelitian ini.

Penyusun menyadari bahwa dalam penyusunan dan penulisan tesis ini masih banyak

terdapat kekurangan, untuk itu penyusun mohon maaf dan sangat mengharapkan saran serta

kritikyang membangun dalam rangka perbaikan penulisan penelitian tesis ini.

Surakarta, Mei 2016

PenyusunMukhlis /Nim S501008047


ix

Mukhlis.S501008047 . 2016.Pengaruh Propolis Topikal Terhadap Perbaikan luka, EkspresiTransforming Growth Factor- Dan Matrix Metaloproteinase-9 Pada Mencit Model Ulkus KakiDiabetik. Pembimbing I :Dr. Sugiarto, dr.SpPD-KEMD, FINASIM, Pembimbing II: Prof. Dr. H.Zainal Arifin Adnan, dr. SpPD-KR FINASIM. Program Pendidikan Spesialis I Ilmu Penyakit DalamFakultas Kedokteran, Universitas Sebelas Maret Surakarta.

ABSTRAK

Latar BelakangUlkus Kaki diabetik merupakan salah satu komplikasi kronis diabetes melitus . Proses

perbaikan ulkus melibatkankeseimbangan antara TGF- dan MMP-9. TGF- memiliki efekpleiotropik salah satunya meningkatkan extra celullar matrix, sedangkan MMP-9 berkontribusi padadegradasi Extra Celullar Matrix. Propolis menghambat aktifitas sitokin proinflamatori danmeningkatkan ekspresi TGF- -9 sehingga dapat membantumempercepat perbaikan ulkus kaki diabetik. Kurangnya bukti ilmiah peranan propolis topikal dalammeningkatkan ekspresi TGF- -9 mendorong dilakukan penelitianini.

Tujuan PenelitianMenganalisis pengaruh propolis topikal 2,5%, 5% dan 10% dan menentukan dosis efektif

propolis topikal 2,5%, 5% dan 10% terhadap perbaikan luka, ekspresi TGF- dan MMP-9 padamencit dengan luka kaki diabetik.

Metode PenelitianPenelitian eksperimental dengan tikus sebagai hewan uji. Data disajikan dalam bentuk mean ±

SD dengan nilai p < 0,05 dianggap signifikan.

Hasil PenelitianPersentase Luas Ukuran Luka akhir : Kelompok DM : - 2,60 ± 10,33, DM + Propolis

2,5% : - 4,00 ± 14,97, DM + Propolis 5% : -11,33 ± 9,61dan DM + propolis 10% : -25,33 ±13,06. Perbedaan dua rata rata: KelompokDM DM + Propolis 2,5% : 1,333± 10,32 (p <1,000) ,Kelompok DM DM + Propolis 5% :8,667 ± 14,96 (p <1,000) dan Kelompok DM DM + ropolis10% : 22,667 ± 9,6 (p <0,018).

Persentase Ekspresi TGF- per 100 sel makrofag , pada kelompok Kontrol : 12,00± 2,61,kelompok DM : 44,50±8,36, Kelompok DM + Propolis 2,5% : 53,33± 2,73, Kelompok DM +Propolis 5% : 61,83± 3,87 dan kelompok DM + propolis 10% : 64,67± 2,42 l. Perbedaan dua ratarata: Kelompok DM Kontrol : -32,50 ± 2,54 (p <0,001), kelompok DM DM+Propolis 2,5% : -8,83± 2,54 (p <0,002), Kelompok DM DM+Propolis 5% : -17,33± 2,54 (p <0,001) dan Kelompok DMDM+Propolis 10% : -20,17 ± 2,54 (p <0,001).

Persentase Ekspresi MMP-9 per 100 sel PMN, pada Kelompok Kontrol: 26,00± 4,43,Kelompok DM : 56,50± 4,04, Kelompok DM + Propolis 2,5% :51,17± 3,71 , kelompok DM +Propolis 5% : 47,17± 3,19 dan DM + propolis 10% : 44,67± 5,61. Perbedaan beda dua rata rata :Kelompok DM Kontrol : -30,50± 2,62 (p <0,001), Kelompok DM DM+Propolis 2,5% : -5,33 ±2,62 ( p <0,051 ), kelompok DM DM+Propolis 5% : 9,33± 2,62 (p <0,001) dan Kelompok DMDM+Propolis 10% : 11,83 ± 2,62 (p <0,001).

KesimpulanPemberian propolis topikal memperbaiki ukuran luka , meningkatkan ekspresi TGF-

menurunkan ekspresi MMP-9. Propolis topikal efektif memperbaiki ukuran luka pada konsentrasi10%. Propolis topikal efektif meningkatkanekspresi TGF- pada konsentrasi5% .Propolis topikalefektif menurunkan ekspresi MMP-9 konsentrasi 5% .

Kata kunci: Ulkus kaki diabetik, Diabetes mellitus, TGF- -9, Resin propolis


x

Mukhlis.S501008047 . 2016.Effect of Topical Against Propolis wound repair, Expression oftransforming growth factor- -9 in Mice Model Diabetic Foot Ulcers.Thesis. Supervisor I :Dr. Sugiarto, dr. SpPD-KEMD,FINASIM, Supervisor II: Prof. Dr. H.ZainalArifin Adnan, dr. SpPD KR FINASIM. Study Program of Internal Medicine, Graduate School,University of Sebelas Maret Surakarta.

ABSTRACT

BackgroundDiabetic foot ulcers is one of the chronic complications of diabetes mellitus. Ulcer repair

process involves a balance between TGF- -9. TGF-boost celullar matrix, whereas MMP-9 contribute to the degradation Extra Celullar Matrix. Propolisinhibits the activity of proinflammatory cytokines and increased expression of TGF- d decreasedthe expression of MMP-9 so as to help accelerate the improvement of diabetic foot ulcers. Lack ofscientific evidence topical propolis role in increasing the expression of TGF-expression of MMP-9 pushed to do this research.

Research purposesAnalyze the effects of propolis topical 2.5%, 5% and 10% and determine the effective dose of

propolis topical 2.5%, 5% and 10% of the repair of injury, the expression of TGF- -9 inmice with diabetic foot wounds.

Research methodsExperimental studies with mice as test animals. Data is presented in the form of mean ± SD

with p value <0.05 was considered significant.

Research resultThe percentage of the final Size: DM Group: - 2.60 ± 10.33, DM + Propolis 2.5%: -

4.00 ± 14.97, DM + Propolis 5%: -11.33 ± 9.61 and DM + propolis 10%: -25.33 ± 13.06. Thedifference of two average: Group DM - DM + Propolis 2.5%: 10.32 ± 1.333 (p <1.000),Group DM - DM + Propolis 5%: 14.96 ± 8.667 (p <1.000) and Group DM - DM + Propolis10%: 22.667 ± 9.6 (p <0.018).

Percentage Expression of TGF-DM group: 44.50 ± 8.36, group DM + Propolis 2.5%: 53.33 ± 2.73, group DM + propolis 5%: 61.83 ±3.87 and group DM + propolis 10%: 64.67 ± 2.42 l. Search average difference of two shows: DMGroup - Control: -32.50 ± 2.54 (p <0.001), the group DM - DM + Propolis 2.5%: -8.83 ± 2.54 (p<0.002) Group DM - DM + Propolis 5%: -17.33 ± 2.54 (p <0.001) and Group DM - DM + Propolis10%: -20.17 ± 2.54 (p <0.001).

Percentage Expression of MMP-9 per 100 PMN cells, the control group: 26.00 ± 4.43, DMgroup: 56.50 ± 4.04, group DM + Propolis 2.5%: 51.17 ± 3.71, group DM + propolis 5%: 47.17 ±3.19 and DM + propolis 10%: 44.67 ± 5.61. Search average difference two different shows: DMGroup - Control: -30.50 ± 2.62 (p <0.001), Group DM - DM + Propolis 2.5%: -5.33 ± 2.62 (p <0.051), the group DM - DM + Propolis 5%: 9.33 ± 2.62 (p <0.001) and group DM - DM + Propolis 10%:11.83 ± 2.62 (p <0.001).

ConclusionTopical propolis Award fix the size of the wound, increasing the expression of TGF-

decreased the expression of MMP-9. Propolis topical effectively improve wound size at aconcentration of 10%. Propolis topical increasing the expression of TGF- tionsof 5% topical .Propolis lowered expression of MMP-9 is effective at concentrations of 5%.

Keywords: diabetic foot ulcers, diabetes mellitus, TGF- -9, Propolis resin


xi

DAFTAR ISI

.... i

PERNYATAAN KEASLIAN DAN PERSYARATAN PUBLIKASI................ iii

MOTTO............................................................................................................... iv

.... v

PANITIA .... vi

KATA PENGANTAR ............ vii

x

xii

DAFTAR GAMBAR xiv

xv

.... xvi

BAB I ..... 1A. ....... 1B. ..................... 4C. ....... 4D. Manfaat ....... 4

BAB II.LANDASAN TEORI................................................................... ..... 6A. Tinjauan Pustaka............................................................................. ...... 6

1. Kaki diabetik................................................................. .......... 6a. Definisi kaki Diabetik.............................................................. 6b. Epidemiologi kaki Diabetik......................................................c. patofisiologi kaki Diabetik......................................................

67

2. Propolis lebah................................................................................. 10a. Antimikrobial........................................................ ................... 11b. Antiinflamasi............................................................................ 12c. Antioksidan............................................................................... 13d. Imunomodulator....................................................................... 13

B. Kerangka Pikir................................................................................ 141. Kerangka konseptual.................................................................... 142. Penjelasan (narasi) kerangka konseptual penelitian....................... 15

BAB III. METODE PENELITIAN..................................................................... 17A. Jenis Penelitian........................................................................................ 17B. Hewan Uji............................................................................................... 17C. Rancangan penelitian.............................................................................. 18D. Bagan rancang penelitian........................................................................ 18


xii

E. Kerangka Operasional Penelitian............................................................ 19F. Variabel Penelitian................................................................................. 19G. Batasan Operasional............................................................................... 20H. Prosedur pelaksanaan.............................................................................. 24I. Tempat Penelitian.................................................................................... 24J. Waktu.....................................................................................................K. Biaya......................................................................................................L. Analisis Data.................................................................................... ......

242525

BAB IV. HASIL PENELITIAN.......................................................................... 26A. Hasil Penelitian........................................................................................ 26

1. Proses analisi penelitian .................................................................... 262. Diskripsi Variabel penelitian............................................................3. Analisis pengaruh propolis topikal terhadap ukuran luka.................4. Analisis pengaruh propolis topikal terhadap ekspresi TGF-5. Analisis pengaruh propolis topikal terhadap ekspresi MMP-9..........

27303337

B. Pembahasan............................................................................................. 411. Pendekatan prinsip ontologi.............................................................. 412. Pendekatan prinsip epistomologi....................................................... 423. Pendekatan prinsip aksiologi...................................................... ....... 474. Nilai Kebaruan Penelitian.................................................................. 475. Keterbatasan Penelitian..................................................................... 48

BAB V. KESIMPULAN DAN SARAN............................................................. 49A. Kesimpulan........................................................................................ 49B. Saran.................................................................................................. 49

DAFTAR PUSTAKA.......................................................................................... 50LAMPIRAN


xiii

DAFTAR GAMBAR

Halaman

Gambar 1 Patogenesis ulkus diabetik.............................................. 8

Gambar 2 Kerangka konseptual................................................ 14

Gambar 3 Bagan rancang penelitian............................................... 18

Gambar 4 Kerangka operasional penelitian................................... 19

Gambar 5 Perbandingan gambaran protein TGF-

diekspresikan sel makrofag masing masing

kelompok..................................................................... 36

Gambar 6

Gambar 7

Gambar 8

Perbandingan gambaran protein MMP-9 yang

diekspresikan sel PMN masing masing

kelompok.....................................................................

Mean blood glucose measurements of mice receiving

STZ with standard deviation..................................

Aspek aspek nilai kebaruan........................................

40

44

47


xiv

DAFTAR TABEL

Halaman

Tabe 1 Senyawa utama dari propolis.............................................. 11

Tabel 2

Tabel 3

Tabel 4

Tabel 5.

Tabel 6

Tabel 7

Tabel 8

Tabel 9

Tabel 10

Tabel 11

Tabel 12

Tabel 13

Tabel 14

.

Parameter dan definisi alat ukur penelitian.........................

Jadwal penelitian................................................................

Diskripsi dan uji normalitas data variabel ukuran luka, ekspresi

TGF- -9 berdasarkan kelompok

sampel..................................................................................

Luas Luka Awal Tiap Kelompok........................................

Luas Luka akhir Tiap kelompok.........................................

Persentase rata rata perubahan ukuran luka sesudah perlakuan

sebelum perlakuan...........................................

Variasi atau perbedaan empat rata-rata persentase ukuran luka

menurut kelompok sampel..........................................

Penelusuran beda dua rata-rata perbaikan ukuran luka antar

kelompok sampel.......................................................

Variasi atau perbedaan lima rata-rata ekspresi TGF-

kelompok sampel..................................................

Penelusuran beda dua rata-rata ekspresi TGF-

sampel per 100 sel makrofag..............................

Variasi atau perbedaan lima rata-rata ekspresi MMP-9 menurut

kelompok sampel..................................................

Penelusuran beda dua rata-rata ekspresi MMP-9 antar kelompok

sampel per 100 sel PMN....................................

Example doses reported in studies involving STZ-

induceddiabetes..............................................................................

22

25

29

30

31

31

32

33

34

34

37

38

45


xv

DAFTAR SINGKATAN

ACCP : american collage of chest physicians

ADAM10 : a disintegrin and metalloproteinase domain-containing protein 10

AGEs : advanced glycation end products

APC : antigen presenting cell

CARS : compensatory anti-inflammatory response syndrome

CLP : cecal ligation and puncture

CNS : central nervous system

COX2 : cyclooxygenase

cRAGE : cleaved RAGE

CSF : coloni stimulating factor

DAMPs : damage-associated molecular patterns

DN-RAGE : dominant negative RAGE

ELISA : enzyme-linked immunosorbent assay

esRAGE : endogenous secretory RAGE

FGF-R : fibroblast growth factor receptor

GM-CSF : granulocyte-macrophage colony-stimulating factor

HLA : human leucocyte antigen

HMGB1 : high-mobility group box 1

HPA : hipotalamus-pituitari-adrenal

Hsp : heat shock factor

IKB : inhibitor of NF-

ICAM-1 : inter-cellular adhesion molecule-1

IFN : interferon-

iNOS : inducible nitric oxide synthase

LPS : lipopolysaccharide

MAPKs : mitogen-activated protein kinases

MARS : mixed antagonist response syndrome

MHC : major histocompability complex

MMP : matrix metalloproteinase

MODS : multiple organ dysfunction syndrome

MOF : multiple organ failure

mRNA : messenger RNA


xvi

NADPH : nicotinamide adenin dinucleotide phosphate

Nf -B : nuclear factor -B

NICU : neonatal intensive-care unit

NO : nitric oxide

OST : oligosaccharide transporter

PAMPs : pathogen-associated molecular patterns

PICU : pediatric intensive care unit

PRRs : pattern recognition receptors

RAGE : receptor for advanced glycation end products

ROS : reactive oxygen species

SCCM : society of critial care medicine

SIRS : systemic inflammatory response syndrome

TGF : tumor growth factor-

TLR : toll-like reseptor

TNF- : tumor necrosis factor-

VCAM-1 : vascular cell adhesion molecule-1

Documents

PENGARUH PROPOLIS TOPIKAL TERHADAP · PDF filedr. SpPD KEMD FINASIM, Supriyanto Muktiatmojo, dr. SpPD FINASIM, Dhani Redhono, dr. SpPD KPTI FINASIM, Wachid Putranto, dr. SpPD FINASIM,