1

MODUL

Pemeriksaan GRAM & GIEMSA

JURUSAN KEDOKTERAN

FAKULTAS KEDOKTERAN

UNIVERSITAS BRAWIJAYA MALANG

2015

2

DAFTAR ISI

Hal.

1. Prosedur dan Evaluasi pemeriksaan Gram ............................................ . 3

2. Prosedur dan Evaluasi pemeriksaan Giemsa .......................................... . 7

3

Modul

PEMERIKSAAN MIKROBIOLOGI KULIT

TUJUAN UMUM

Pembelajaran modul ini dirancang untuk menyiapkan peserta didik agar mampu

melakukan prosedur dan interpretasi pemeriksaan gram dan giemsa.

TUJUAN KHUSUS PEMBELAJARAN

1. Mampu melakukan dan menginterpretasi pemeriksaan Gram;

2. Mampu melakukan dan menginterpretasi pemeriksaan Giemsa;

STRATEGI / METODA PEMBELAJARAN

Introduksi

Pelatih memperkenalkan diri (jabatan dan tanggung jawabnya dalam proses

pembelajaran dan pelatihan) serta mengemukakan cara mencapai tujuan

pembelajaran dengan partisipasi penuh peserta didik.

Tujuan 1:

1. Melakukan pemeriksaan Gram;

2. Menginterpretasi hasil pemeriksaan Gram.

Tujuan 2:

1. Melakukan pemeriksaan Giemsa;

2. Menginterpretasi hasil pemeriksaan Giemsa.

KOMPETENSI YANG DIHARAPKAN

Mampu melakukan prosedur pemeriksaan mikrobiologi kulit dan mampu

menginterpretasi hasil pemeriksaan.

REFERENSI BUKU WAJIB

1. Fitzpatrick TB, Freedberg IM, Eisen AZ, Austen KF, Wolff K. Dermatology in

general medicine. 6th ed. New York: McGraw-Hill, 2003

2. Trozak JD, et al. Dermatology Skill for Primary Care. Humana Press. New

Jersey. 2006

4

PROSEDUR DAN INTERPRETASI

PEMERIKSAAN GRAM & GIEMSA

1. Prosedur dan Evaluasi Pemeriksaan Gram

Pendahuluan Pemeriksaan Gram dilakukan sebagai penunjang diagnosis kelainan lesi

kulit dan genital dengan penyebab bakteri.

Peralatan

dan Bahan

1. Lampu periksa

2. Gelas obyek dan penutup

3. Lidi kapas

4. Larutan Crystal violet (Gram A)

5. Larutan Lugol (gram B)

6. Larutan alcohol (gram C)

7. Larutan counter stain Safranin (gram D)

8. Lampu Bunsen

Teknis

Pemeriksaan

1. Daerah lesi yang telah dipilih dibersihkan dengan alkohol;

2. Pengambilan sediaan dilakukan dengan menggunakan lidi kapas steril;

3. Sediaan didapat dengan mengusap pada dasar lesi yang terdapat

cairan atau discharge. Jika lesi sudah tertutup krusta, maka krusta

dibersihkan terlebih dahulu;

4. Sediaan yang telah diambil diletakkan pada gelas obyek dengan cara mengoleskan lidi kapas pada gelas obyek secara satu arah;

5. Fiksasi spesimen melalui penghangatan/pemanasan dengan lampu Bunsen;

6. Gelas obyek digenangi dengan Crystal violet (Gram A), diamkan 1 menit kemudian bilas dengan air mengalir;

7. Gelas obyek digenangi dengan Lugol (Gram B), diamkan 1 menit

kemudian bilas dengan air mengalir;

8. Dekolorisasi dengan tetesan alkohol atau ether-aceton (Gram C)

sampai tepat luntur, hentikan penetesan kemudian bilas dengan air mengalir;

9. Gelas obyek digenangi dengan counter stain Safranin (Gram D), diamkan 30 detik kemudian bilas dengan air mengalir

10. Biarkan sediaan mengering;

11. Periksa dibawah mikroskop, identifikasi dimulai dengan pembesaran 100 kali sampai 400 kali.

Interpretasi Bakteri gram negatif

Pada pewarnaan gram, bakteri gram negatif akan terwarna merah

5

Bakteri gram positif

Pada pewarnaan gram, bakteri gram positif akan terwarna ungu

Clue cell pada Vaginosis Bakterial

Clue cell pada Vaginosis bakterial merupakan gambaran sel epitel

vagina yang tertutup oleh bakteri dengan pewarnaan gram yang

bervariasi.

6

Rubrik Penilaian

No Item Skor

0 1 2

PENGAMBILAN SEDIAAN

1 Memberikan salam dan memperkenalkan diri kepada pasien

2 Menjelaskan prosedur dan tujuan pemeriksaan serta meminta

persetujuan dan kerjasama selama pemeriksaan

3 Mencuci tangan dan memakai sarung tangan

4 Mengambil sediaan duh dari urethra dengan lidi kapas

5 Menghapuskan sediaan dengan tipis searah di gelas obyek

PEWARNAAN GRAM

6 Fiksasi dengan memanaskan gelas obyek di atas bunsen

7 Meneteskan cat kristal violet

8 Meneteskan larutan lugol

9 Meneteskan alkohol 95% (alkohol saja)

10 Membilas gelas obyek dengan air

11 Meneteskan cat safranin

12 Membilas gelas obyek dengan air

13 Menyebutkan kegiatan no 6 12 dengan lengkap dan urut 14 Melepas sarung tangan dan mencuci tangan

7

2. Prosedur dan Evaluasi Pemeriksaan Giemsa (Tzanck Test)

Pendahuluan Pemeriksaan Giemsa dilakukan sebagai penunjang diagnosis

kelainan kulit berupa vesikel maupun bula.

Peralatan dan

Bahan

1. Lampu periksa

2. Gelas obyek dan penutup

3. Gunting kecil berujung runcing

4. Scalpel no. 13-15

5. Kassa steril

6. Larutan Giemsa atau Wright atau Toluidin blue

Teknik

pemeriksaan

1. Pilihlah bulla atau vesikel yang utuh. Bila tidak dijumpai bulla

atau vesikel yang utuh, gunakan daerah erosi yang bersih atau membuat lesi baru dengan menggosok-gosok epidermis;

2. Dengan menggunakan scalpel atau gunting kecil berujung runcing, angkat dinding bulla atau vesikel;

3. Hisap air/serum yang terdapat didalamnya dengan hapusan

hasil kerokan diatas gelas obyek;

4. Kerok dasar erosi bulla atau vesikel dengan menggunakan scalpel;

5. Sediaan yang telah diambil diletakkan pada gelas obyek dengan cara membuat hapusan pada gelas obyek;

6. Fiksasi dengan alkohol 95% selama 5 menit;

7. Gelas obyek digenangi dengan larutan Giemsa atau Wright

atau Toluidin blue, diamkan 20-30 menit, kemudian bilas dengan air mengalir;

8. Biarkan sediaan mengering;

9. Periksa dibawah mikroskop, identifikasi dimulai dengan

pembesaran 100 kali sampai 400 kali.

Interpretasi Multinucleated giant cell

Sel ini jauh lebih besar dibandingkan dengan sel epidermis dan

mengandung inti yang banyak didalam satu sel.

8

Sel acantholytic (Tzanck)

Sel ini adalah sel epidermis yang berbentuk bulat, dengan

pengecatan warna gelap dan sitoplasma dibagian tepi yang

tampak padat. Sel ini hampir tidak pernah dijumpai

berkelompok, biasanya soliter. Intinya gelap dibagian tepi dan intinya relatif berukuran besar dibandingkan sitoplasma.

Rubrik Penilaian

No Item Skor

0 1 2

PROSEDUR PEMERIKSAAN TZANCK

1 Memberikan salam kepada pasien dan menjelaskan tujuan

pemeriksaan

2 Meminta persetujuan dan kerjasama selama pemeriksaan

3 Mencuci tangan dan memakai sarung tangan

4 Melakukan desinfeksi pada ruam kulit yang akan dilakukan

pengambilan sediaan dengan alkohol 70%

5 Mengambil sediaan dari vesikel dengan memecah atap vesikel

menggunakan ujung skalpel

6 Mengerok dasar erosi bula/vesikel dengan skalpel

7 Menghapuskan sediaan dengan tipis searah di gelas obyek

8 Mengeringkan sediaan

9 Melepas sarung tangan dan mencuci tangan

10 Meneteskan cat Giemsa

11 Membilas gelas obyek dengan air

12 Mengeringkan sediaan

13 Melakukan identifikasi sediaan pada mikroskop mulai dari

pembesaran terkecil

14 Mencatat hasil pemeriksaan