MEDICINSKA MIKOLOGIJA

u v o d

Laboratorija za parazitologiju i mikologiju

Institut za mikrobiologiju i imunologiju

www.belimantil.info

MYCOLOGY WWW

www.mycology.adelaide.edu.au

www.medicalmycology.org

www.edae.gr/myco2.htm

www.pfdb.net

www.doktorfungus.org/mycoses/index.htm

www.lumen.luc.edu/lumen/DeptWebs/microbio/med/review/mycology.htm

www.belimantil.info

MEDICINSKA MIKOLOGIJA

Mykes = gljiva

Logos = nauka

Poznato je oko 250 000 gljiva – oko 100 vrsta je

značajno za humanu patologiju

• Fungus = gljiva

svrstane su u posebno carstvo Fungi

• Gljive – eukariote

jednoćelijski ili višećelijski mikroorganizmi

• razmnoţavaju se aseksualno i seksualnowww.belimantil.info

MEDICINSKA MIKOLOGIJA

• Osnovna ćelija višećelijskih gljiva je hifa;

izduţena cev širine 1-10µm ispunjena

sadrţajem koji imaju i ostale ćelije

• Bezbojne su ili različitih boja (patogene-u

pravilu bezbojne)

• Septirane ili neseptirane

• Ivice mogu da budu poput češlja, krajevi

kao rogovi jelena, svećnjaci

www.belimantil.info

MEDICINSKA MIKOLOGIJA

• Mnogostruko grananje i preplitanje – micelijum

• Bazalni micelijum – za crpljenje hranljivih

materija iz okoline (sa podloge)

• Vazdušni micelijum – uloga u reprodukciji;

posebne hife (konidiofore)koje nose spore

• Morfologija ovih "rasplodnih organa“ – karakt. i

sluţi u kl. rodova kod Fungi imperfekti

• B i V micelijum = talus

www.belimantil.info

MEDICINSKA MIKOLOGIJA

• Konidiofore mogu imati karakteristično

glavičasto proširenje (vezikula) ili se

granaju dajući izgled metlice na koje se

nastavljaju fialide i lanci okruglih fialoko-

nidija

www.belimantil.info

MEDICINSKA MIKOLOGIJA

• Reproduktivni aparat moţe biti seksualan ili aseksualan (zavisno na koji način dolazi do stvaranja spora)

• Sve spore se znači mogu podeliti na aseksualne i seksualne i egzo- odn.endospore

• Aseksualne spore-blastospore, artrospore, konidiospore (makro- i mikro-), aleuriospore, klamidospore

endospore:sporangiospore(Mucoraceae)u sporangijumu odnosno sferule (Coccidioides immitis)

www.belimantil.info

MEDICINSKA MIKOLOGIJA

• Seksualne spore-spajanjem m i ţ ćelija nastaju bazidijumi, askusi,sporangijumi sa bazidiosporama, askosporama, zigosporama-fungi perfecti – klas. na osnovu morfologije

• Morfologija kvasnica- osnovni tip ćelije je blastospora (okrugla ili ovalna, 4-15µm, razmnoţava se pupljenjem:1-3 pupoljaka, kapsula±),pseudohife(izduţivanje ćelija), prave hife,klamidospore (C. albicans)

• Većina patogenih gljiva razmnoţava se aseksualno,kod mukora i rizopa poznata oba načina

www.belimantil.info

SEKSUALNO RAZMNOŢAVANJE

Ovaj vid razmnoţavanja zahteva posebne uslove:

Postoje tri stadijuma:spajanje + (n) i – (n) ćelija → plazmogamija

nastaje zigot (2n hromozoma)

mejoza → nastaju 4 jedra sa n brojem hromozoma, a stvorene ćelije se nazivaju spore

U povoljnim uslovima spore klijaju → m i c e l i j u m

www.belimantil.info

METABOLIZAM GLJIVA

Gljive ne poseduju hlorofil zbog toga ne koriste

proces fotosinteze. Potrebnu energiju proizvode

hemijskim procesima

Ugljenihidrati su najvaţniji za metabolizam gljiva:

• Asimilacija šećera

• Fermentacija šećera

• Razgradnjom nitrata, amonijaka i aminokiselina

gljive dobijaju azot

www.belimantil.info

Asimilacija i fermentacija šećera, kreatinina, hidroliza ureje, lipida,

ţelatina i dr. se koriste za identifikaciju i klasifikaciju gljiva:

METABOLIČKI PROCESI

• Asimilacija i fermentacija UH

• Hidroliza ureje

• Hidroliza lipida

• Hidroliza ţelatina

• Redukcija nitrara

• Redukcija sulfita

• Redukcija telurita

• Korišćnje glicina

• Korišćenje citrata

• Korišćenje kreatinina

GLJIVE

Kvasnice

Cryptococcus, Candida…

Malassezia, dermatofiti

Candida, Cryptococcus

Cryptococcus

Candida

Candida

Candida, Cryptococcus

Candida

Cryptococcus, S.schenckiiwww.belimantil.info

ENZIMI GLJIVA

Tokom razmnoţavanja gljive stvaraju ENZIME

ENZIMI su značajni za patogenezu gljivičnih infekcija:

• Candida → koagulazu, esterazu, hemolizine,

lipaze, proteinaze, fosfolipaze...

• C.neoformans → proteinaze, fenoloksidazu i

ureazu, fosfolipaze...

• Dermatofiti → elastaze, keratinaze...

• A. fumigatus i H.capsulatum → katalaze ...

www.belimantil.info

ANTIBIOTICI i MIKOTOKSINI

- sekundarni metaboliti gljiva -

• ANTIBIOTICI - značaj u terapiji bakterijskih infekcija:

penicilin (Penicillium notatum)

• MIKOTOKSINE produkuju plesni:

Aflatoksin B1 → veoma kancerogen za ţivotinje

Ohratoksin A → oštećuje bubrege (moguča uloga u

balkanskoj endemskoj nefropatiji)

(Aspergillus, Alternaria, Rhisopus, Penicillium, Fusarium...)

Drugi mikotoksini...

www.belimantil.info

RAST GLJIVA

KISEONIK

Gljive mogu biti aerobne, mikroaerofilne i fakultativno anaerobne.

• Za rast su potrebni makroelementi:

ugljenik, vodonik, kiseonik, fosfor, kalijum, azot, sumpor, kalcijum, magnezijum...

mikroelementi

gvoţĎe, bakar, mangan, cink...

• Krivulja rasta kvasnica

nema izraţenu logaritamsku i eksponencijalnu fazu,

rast je gotovo linearan i traje 7-14 dana

• Krivulja rasta plesni

ne moţe izraziti brojanjem ţivih ćelija → meri se teţina talusa.

pH gljiva

od 2 – 8 (optimalno 5.4 – 5.6)www.belimantil.info

TEMPERATURA

• Gljive mogu biti

psihrofilne (opt.T 10-20˚c)

mezofilne (opt.T 35-37˚c)

termofilne (opt.T 60-65˚)

• Za izolaciju i identifikaciju gljiva iz bolesničkog

materijala o b a v e z n o se koriste dve

temperature (25oC i 37oC).

• Bifazne (dimorfne): na 25oC rastu u vidu plesni

na 37oC u vidu kvasnicawww.belimantil.info

GLJIVIČNE INFEKCIJE

• Gljive se dele na:

apatogene (saprofiti)

uslovno patogene

patogene

• Gljive (mikroorganizmi) uzrokuju 3 grupe oboljenja:Mikoze

Mikoalergoze

Mikotoksikoze

• Gljive (pečurke) koje se koriste u ishrani mogu da uzrokuju:micetizam (trovanje hranom)

www.belimantil.info

M I K O Z E

M i k o z e su bolesti izazvane prisustvom i razmnoţavanjem gljiva na ili u organizmu čoveka

Prema lokalizaciji se dele na:

p o v r š n e (superficijalne, kutane, mukokutane)

To su lokalizovane infekcije: koţa, dlaka, nokat, sluzokoţa

subkutane* (potkoţno tkivo…)

d u b o k e sistemske (lokalizovane/diseminovane)

Klinička slika mikoza:

kod p o v r š n i h – obično je karakteristična

kod d u b o k i h – nije karakterističnawww.belimantil.info

PRINCIPI LABORATORIJSKE DIJAGNOZE MIKOZA

• MIKROSKOPSKI PREGLED BOLESNICKOG

MATERIJALA

• IZOLACIJA GLJIVA IZ BOLESNICKOG MATERIJALA

- m i k o l o š k a k u l t u r a –

“z l a t n i s t a n d a r d”

I D E N T I F I K A C I J A GLJIVA

PLESNI: makroskopski izgled kulture

mikroskopski izgled konidija i hifa

KVASNICE: biohemijska identifikacija

• DETEKCIJA Ag i At (imunoserološkim metodama)

• DETEKCIJA DNK (molekularnim tehnikama)www.belimantil.info

UZROČNICI

P O V R Š N I H M I K O Z A

www.belimantil.info

Superficijelne mikoze uzrokuju:- Malassezia spp.- Exophiala (Cladosporum) werneckii- Trichosporon beigelli- Piedraia hortae

Kutane mikoze (dermatomikoze ili tinea) uzrokuju:- Trichophyton sp.- Microsporum sp.- Epidermophyton sp.- Candida sp. - Aspergillus sp. i dr.

Mukokutane mikoze uzrokuju:- Candida sp.- Geotrichum sp.- Rhinosporidium seeberi i dr.www.belimantil.info

Superficijalne mikoze

Uzročnici Nazivi bolesti

Malassezia spp. Pityriasis

Folliculitis

Dermatitis

Exophiala (Cladosporium) werneckii Tinea nigra

Trichosporon beigelli Piedra alba

Piedraia hortae Piedra nigra

www.belimantil.info

Kožne/kutane mikoze

• Uzročnici

Trichophyton

Microsporum

Epidermophytom

Candida

ReĎe:

Cryptococcus

Aspergillus . . .

Naziv bolesti

Dermatofitoze, tinea, ringworm

Dermatofitoze, tinea, ringworm

Dermatofitoze, tinea, ringworm

Dermatomikoza, tinea

www.belimantil.info

Sluzokožo-kožne /mukokutane mikoze

Uzročnici Naziv bolesti

česti: Candida candidosis, HMK

reĎe: Geotrichum geotrichosis

Rhinosporidium rhinosporidiosis

www.belimantil.info

Piedra alba/Bela piedra/white piedra – sive

nodularne lezije na dlakama uglavnom pubičnog

predela i aksilarnog• Uzročnik je Trichosporon beigelii. Ubikvitarna gljiva, deo NF

Lokalizacija-dlake lica, genitalija,aksila, reĎe kapilicijuma.

• Bolest - endemska, posebno u tropskim krajevima

• Oportunističke sistemske infekcije.

www.belimantil.info

Crna piedra/blak piedra - tamno-braon ili crni čvorići na

distalnim delovima dlaka kosmatog dela glave

• Uzrocnik je Piedraia hortae. Oboljenje prisutno u tropskim krajevima (Centralna i Juţna Amerika)

www.belimantil.info

Tinea nigra - hronično oboljenje dlanova i tabana, braon

do crne boje.Liči na maligni melanom

• Uzročnik je Exophiala weneckii

www.belimantil.info

Malassezia spp

Malassezia (Pityrosporum) - NF koţe nekih osoba:

M. furfur, M. sympodialis i dr… (lipofilne vrste)

M. pahidermatis (nelipofilna vrsta)

Oboljenja: pityriasis versicolor (tinea versicolor)

Malasezzia foliculitis

seboroični dermatitis (pityriasis simplex capitis)

atopijski dermatitis

sistemske infekcije – retke (lipidna th)

LD: d i r e k t n a vide se lučno savijene hife i grupisane blastospore sa tankim zidovima izmeĎu epitelnih ćelija)

k u l t u r a LNA ili mDixon (5-7 dana na 32oC)

kolonije slicne kvasnicama

Th - lokalna (2,5% rastvor selenium sulfida, kreme ili losioni ketokonazola i mikonazola) u toku 4-6 nedelja.

- oralna (ketokonazol)www.belimantil.info

Pytiriasis versicolor (tinea versicolor)

Blago, rekurentno oboljenje površnih slojeva koţe (stratum corneum). Promene kruţne sa sitnim ljuspicama (skvame). Promena boje u vidu hipopigmentacije ili hiperpigmentacije.(cimet, leto-bele)

Etiologija - Malassezia spp.

Predisponirajući faktor: znojenje, pol, genetska osnova i sl.

Predilekciona mesta: grudi, leĎa, ramena, lakatni pregibi,lice retko

Sistemski oblici: neonatusi i odrasli sa CVK.

DDg: eritrasma, vitiligo.

Th 2,5% rastvor selenium sulfida, ketokonazol, mikonazol

www.belimantil.info

www.belimantil.info

DERMATOMIKOZE - DERMATOMYCOSES

Infekcija kože izazvana gljivama:

dematofiti

Candida spp. i dr.

www.belimantil.info

DERMATOPHYTOSIS

TINEA

RINGWORM

Termini koji označavaju infekciju površnih slojeva

koţe, dlake i nokta izazvanu dermatofitima:

Trichophyton, Microsporum i Epidermophyton

Dermatofiti su veoma kontagiozni, imaju keratinofilno i

keratinolitičko svojstvo zbog čega rastu na/u dlakama,

noktima i površnom sloju koţe.

Sistemske infekcije su veoma retke.

Antropofilne, zoofilne i geofilne vrstewww.belimantil.info

D E R M A T O F I T ITrichophyton I grupa (koţa, nokti, dlake - tip ektotriks)

» T. mentagrophytes

» T. rubrum

» T. verrucosum

Trichophyton II grupa (koţa, nokti, dlake - tip endotriks)

» T. tonsurans

» T. schoenleinii

» T. violaceum

LD - makrokonidije (kao olovka 3-8 ćelija)

- mikrokonidije brojne u klasterima

Microsporum

(koţa i dlake) LD - makrokonidije (elipsaste ili vretenaste 3-7 ćelija)

- mikrokonidije uz hifu po jedna

Epidermophyton

(koţa i nokti) LD - makrokonidije (zaobljene sa 2-4 ćelije)

- mikrokonidija nema

www.belimantil.info

koža nokat d l a k a d l a k a

ektotriks endotriks

• Trichophyton + + + -

I grupa

______________________________________________________________

• Trichophyton + + - +

II grupa

______________________________________________________________

• Microsporum + ± + -

______________________________________________________________

• Epidermophyton + + - -

____________________________________________________________

www.belimantil.info

Dermatofiti – MIKROSKOPSKE KARAKTERISTIKE

KULTURA DLAKA

www.belimantil.info

Dermatofit oze - LOKALIZACIJA

www.belimantil.info

Herpes tonsurans

www.belimantil.info

Dermatofitoze

www.belimantil.info

Herpes tonsurans

www.belimantil.info

Mikrosporija

www.belimantil.info

Sycosis barbae

www.belimantil.info

Kerion Celsi

www.belimantil.info

Favus

www.belimantil.info

Tinea pedis

www.belimantil.info

Dermatofiti laboratorijska dijagnoza

www.belimantil.info

Dermatofiti / M. gypseum

www.belimantil.info

Dermatofiti / M. canis

www.belimantil.info

Dermatofiti /T. violaceum

www.belimantil.info

Dermatofiti /T. schönleini

www.belimantil.info

Mikidi

www.belimantil.info

CANDIDOSIS SUPERFICIALIS

infekcija kože, sluzokoža i nokatne ploče - Candida spp.

- Oko 40-80% osoba sa Candida NF

- Kolonizacija nastaje kontaktom novoroĎenčeta sa majkom

- Infekcija nastaje endogenim putem pod odreĎenim uslovima

Kliničke manifestacije: - oralna

- vaginalna

- kutana

- onihomikoza

- paronihija

* Hronična mukokutana kandidoza (HMK) - defekt funkcije CI i Mf

* Osobe sa AIDS-om - kod 80% pacijenata se razvija oralna kandidoza

- kod 20% pacijenata se razvija angulus infectiosus

- ezofagitis

LD - izolacija i kvantitiranje

Th - AM (lokalno)www.belimantil.info

OTOMYCOSIS – gljivična infekcija uva Predisponirajući faktori: kod odraslih, tokom leta, posle bakterijskih infekcija,

kod ekcema i seboroičnog dermatitisa.

Klinička slika: ac ili ch toka, bol, gnojna sekrecija, svrab, bakterijska infekcija

reĎe: pečenje, granulomi, perforacija bubne opne, oštećenje sluha

Česti uzročnici: Aspergillus

Candida

ReĎi uzročnici: Absidia

Penicillium

LD- pravilno uzimanje materijala!!!d i r e k t n a mikroskopski pregled bolesničkog materijala

k u l t u r a (zlatni standard)*

* Isključiti mogućnost kontaminacije!!!•

www.belimantil.info

KERATOMYCOSIS – gljivične infekcija kornee oka Posttraumatskim unos spora gljiva u kornealni epitel

Transplantacije kornee

Teško se leče mogu dovesti do slepila

Klinička slika: keratitis - bol, crvenilo, fotofobija, mrlje u vidnom polju, ulkus

Predisponirajući faktori: primena kortikosteroida, povrede

Česti uzročnici keratomikoza: Aspergillus

Fusarium

ReĎi uzročnici keratomikoza: Acremonium

Culvularia

Penicillium

LD - direktan nalaz gljivicnih elemenata

- izolacija gljiva

Th - hirurška

- AM lokalno (nistatin, AMB)

- AM subkonjunktivalno (AMB, mikonazol)

- AM sistemski (ketokonazol, itrakonazol)

www.belimantil.info

SUBKUTANE MIKOZE I

• Uzročnici subkutanih mikoza se lokalizuju u dubokim slojevima

koţe, mišićima i vezivnom tkivu i obično se ne diseminiraju

preko krvi do dubokih organa i tkiva.

• Najznačajniji uzrocnici su:

Sporothrix schenckii (sporotrichosis)

Cladosporum sp. (chromoblastomycosis)

Phialophora sp. (chromoblastomycosis)

Exophiala sp. (pheohyphomycosis)

Rhinosporidium seeberi (rinosporidiosis)

Pseudoallescheria boydii (eumycetoma)

Madurella mycetomatis (eumycetoma)

www.belimantil.info

SUBKUTANE MIKOZE II

• Posledica posttraumatskog unosa gljivičnih elemenata koji se nalaze kao saprofiti u zemlji ili otpadnim materijama.

• Promene na mestu implantacije infektivnog agensa, ali mogu da se prošire i na susedne organe i tkiva preko krvi i limfe (kod imunodeficijentnih osoba).

• Česte su u tropskim i subtropskim predelima

• Interhumani prenos nije karakterističan.

LD - mikroskopska vizuelizacijagranula ili gljivičnih elemenata

- izolacija gljiva na kulturi

Th hirurška/neosetljivi na AM

www.belimantil.info

MYCETOMA

• Micetomi - hronična, gnojna oboljenja koţe, subkutanog tkiva i kostiju:

• Uzorčnici: gljive, aktinomicete, bakterije.

Gljive (eumicetomi)

Aktinomicete (aktinomicetomi)

Uzročnici zemljište, vegetacija koja truli

Geografska distribucija češće: tropske i subtropske regije

Put infekcije mehanička trauma i implantacije gljivičnih elemenata (noge, ruke, lice, leĎa...), iz fistula se cedi gnoj koji sadrţi granule

Uzročnici eumicetoma: Madurella mycetomatis, Madurella grisea,

Pseudoallesheria boydii, Aspergillus nidulans,

Exophiala, Fusarium sp., Acremonium sp. i dr.LD - direktan makroskopska i mikroskopski nalaz granula

- histopatološki pregled

- izolacija

Th - antimikotici - ketokonazol i itrakonazol - hirurška terapija

www.belimantil.info

Micetom

www.belimantil.info

Sporotrihoza - Sporothrix shenckii

• U saprofitskoj fazi u zemlji, na biljkama (trnje, lišće) širom sveta, endemski u Juţnoj Americi, juţnoj Africi u Evropi najviše u Francuskoj

• Preko povredjene koţe, sluzokoţa, ubodom (ruke) - subkutana infekcija sa karakterističnim širenjem do regionalnih limfnih ţlezda (tumorozne promene – apscesi – ulceracije - oţiljci), duţ limfnih sudova subkutani nodusi

• Deseminacija - hematogeno u kosti, zglobove, pluća, CNS

• In vivo i na 370C (obogaćena podloga MSIA sa dodatkom krvi)-blastospore (1-4mm), okrugle i duguljaste (oblika cigare), mogu da se nadju i u leukocitima

• In vitro i na 260C (SDA) - tanke, hijaline, razgranate, septirane hife na lateralnim grančicama spore u buketićima

• Dg - direktan preparat, kultura (konverzija), serologijawww.belimantil.info

SPOROTRICHOSIS

www.belimantil.info

Sporothrix schenkii

www.belimantil.info

RHINOSPORIDIOSIS

• Rhinosporidium seeberi (biologija nepoznata)Distribucija: Indija, Šri Lanka ali u našoj zemlji (prva epidemija rinosporidioze u Evropi).

• Put širenja infekcije nije poznat (vezan za vodu).

• Rinosporidioza - hronična granulomatozna bolest mukokutanog i subkutanog tkiva (polipi na sluzokoţi nosa u ušnom kanalu, vagini, anusu, konjuktiva kapaka sa sitnim ruţičastim granulomima...).

LD – direktan mikroskopski nalaz

sporangija (sferula) u polipima -endospore

- Izolacija nije nemoguća Th - hirurška

www.belimantil.info

Uzročnici sistemskih mikoiza

Laboratorija za parazitologiju & mikologiju

Instutut za mikrobiologiju & imunologiju

www.belimantil.info

Sistemske mikoze

• Gljivična oboljenja lokalizovana u unutrašnjim organima i tkivima

• Egzogene - spore dospevaju iz spoljne sredine aerogeno (RT), preko povreĎene koţe ili sluzokoţe, per os (DT)

Endogene - gljivama iz sastava normalne flore

• Nisu kontagiozne (izuzetak kandidioza kao STD)

• Rezervoar – čovek, ţivotinje, ptice

• Rasprostranjenost – kosmopolitske ili ograničene distribucije

• Patogenost - uslovno patogene

striktno patogene (bifazne gljive)

www.belimantil.info

Sistemske mikoze

• Laboratorijska dijagnoza

standardne metode (direktna nativni i bojeni

preparat, izolacija, biohemijska identifikacija/API)

brze metode (dokazivanje Ag, PCR), serologija

• Lečenje mikoza - antimikotici, pojava rezistencije

gljiva na AM in vitro i in vivo; antimikogram

• Profilaksa – antimikotici, kod osoba koje su pod

visokim rizikom za razvoj sistemskih mikoza

www.belimantil.info

Uslovno patogene kvasnice

Familija Cryptococcacea /Fungi imperfecti

Rodovi:

• Candida

• Cryptococcus

• Rhodotorula

• Trichosporon

• Malassezia

www.belimantil.info

Candida spp. – Kandidijaza (kandidoza)

• Uslovno patogene (oportunističke) kvasnice

• Deo normalne flore kože i sluzokoža

• C. albicans - najčešći izazivač infekcija

Non albicans vrste: C. tropicalis, C. parapsilosis,

C. glabrata, C. kefyr, C. krusei, C. guillermondii

• endogene (oportunističke mikoze)

egzogene (polnim putem, intrahospitalne mikoze)

• Faktori virulencije Candida spp. - germinativne tube, adherencija, egzoprodukti (proteinaze /IgA proteaza/, fosfolipaze, fosfataze), egzotoksin?

www.belimantil.info

Candida spp.

Germinativne tube →

Hlamidospore →

Kultura kandide

www.belimantil.info

Candida spp.

• Sistemska kandidoza

→ DT (ezofagitis- AIDS!, enteritis, kolitis)

→ RT (faringitis, traheitis, bronhopneumonija-retko primarna već u toku diseminacije ili sekundarno)

→ UGT (kolpitis, uretritis, cistitis, pijelonefritis)

→ KVS (endokariditis - narkomani)

→ CNS (meningitis, retinitis)

→ Apscesi bubrega & jetre, osteomijelitis

• Generalizovana kandidoza - Candida sepsa

• Tranzitorna kandidemija - i.v. kateteri, tubusi, respiratori

• Sindrom hronične mukokutane kandidoze

• HIV+ i drwww.belimantil.info

Candida spp.

Oralna kandidoza Vulvovaginalna kandidoza

www.belimantil.info

Candida spp.Kandida ezofagitis

Onihomikoza i paronihija

www.belimantil.info

Cryptococcus spp. - Kriptokokoza

• C. neoformans var. neoformans (stp A i D)

C. neoformans var. gattii (stp B i C)

• Okrugle blastospore sa voluminoznom kapsulom (galaktoksilomanan)/virulentni sojevi, melanin

• Izolovan iz zemljišta, sasušenog fecesa ptica /golubova; kontaminira namirnice, naĎeni u brisu grla, fecesu zdravih osoba

• Bolest

Plućna - aerogeno

Kožna - primarna retko, per continuitatem apscesi u kostima

Diseminovana - najčešće CNS , posebno kod AIDS, redje na

koţi, sluzokoţama, kostima i drugim tkivimawww.belimantil.info

C. neoformans

↑

Tuš preparat

GACA

Meningoencefalitis

Izgled kolonija na diferencijalnoj

podlozi – produkcija melanina

www.belimantil.info

Rhodotorula spp. & Geotrichum spp.

Rhodotorula rubra

• Ubikvitarna kvasnica - kontaminira namirnice, i.v. katetere, respiratore, koţu, sputum, urin, feces/tranzitorna mikroflora

• Moguć izazivač oportunističkih mikoza kod imunodeficijentnih / Dif dg sa kandidom: biohemijska aktivnost, kolonije R. rubra na SDA roze-oranţ

Geotrichum candidum (geotrichosis)

• Plesan, ali slična kvasnicama: artrokonidije u direktnom i u preparatu sa kulture

• Spoljašnja sredina, NF usne duplje, creva, vagine, koţe

• Oralna, intestinalna, vaginalna, diseminovana geotrihoza

www.belimantil.info

Bifazne (dimorfne) gljive

• KVAŠČEVA (PARAZITSKA) I MICELIJUMSKA

(SAPROFITSKA) FAZA RASTA

• Konverzija micelijumske u kvaščevu fazu in vitro u Dg

• Striktni patogeni, izazivači sistemskih mikoza, često

su fatalne ukoliko se ne leče

• U Evropi sporotrihoza i histoplazmozawww.belimantil.info

Histoplasma capsulatum - Histoplazmoza

Darlingova bolest, “faraonovo prokletstvo”

Epidemiologija. SAD, Azija, Afrika, Italija, Španija, Portugalija

• Spore u zemljištu /unose se inhalacijom, per os, preko koţe, sluzokoţa

Histoplazmoza

• Plućna: akutna (asimptomatska, difuzna), hronična (kavernozna, kalcifikacije)

• Diseminovana: hepatosplenomegalija, anemija, groznica, endokarditis, meningitis

• in vivo IC u ćelijama RES-a blastospore (2-4 μm), na bojenom preparatu artefkati koji podsećaju na kapsulu, u gnoju su ekstracelularno;

• in vitro razgranat micelijum, mikrokonidije lateralno, krupne loptaste spore (hlamidospore), terminalno (debela kapsula sa trnolikim izraštajima)

Dijagnoza

• direktan preparat (Giemsa, PAS, Gomori-Groccot)

• kultura (konverzija), koţni i serološki testovi

www.belimantil.info

Histoplasma capsulatum

www.belimantil.info

Blastomyces dermatitidis

Severno-američka blastomikoza

• Spore u zemljištu (zemljoradnici), inhalacija, preko

koţe i sluzokoţa

• Klinički oblici: plućna (benigna, granulomatozna)

kožna (subkutani nodusi)

generalizovana – iz pluća u kosti, CNS

• Kvaščeva faza - blastospore (8-20 μm) debelih zidova,

po 1 pupoljak vezan širokom bazom za matičnu ćeliju

• Micelijumska faza - nije karakteristična (septirane hife,

konidije) – konverzija

www.belimantil.info

B. dermatitidis

www.belimantil.info

Blastomyces (Paracoccidioides) brasiliensis

Južno-američke blastomikoza

• Spore u zemljištu (zemljoradnici), inhalacija i per os, preko koţe i sluzokoţa (usna duplja)

• Kliničke forme: koţna, mukokutana (usna duplja), visceralna (pluća, DT, jetra, slezina, bubrezi, kosti, CNS)

• Kvaščeva faza - blastospore (20-60 μm), debele opne

sa 3-6 pupoljaka

• Micelijumska faza - septirane hife sa astrosporama,

konidijama

www.belimantil.info

B. brasiliensis

Životni ciklus

www.belimantil.info

B. brasiliensis

www.belimantil.info

Coccidioides immitis - Kokcidioidomikoza

• Jugozapad SAD, Meksiko

• Micelijumsak faza: septirane hife i artrospore sa

disjunktorskim ćelijama, jako infektivne, opasnost

od laboratorijske infekcije !!!

• In vivo: sferule (50-60 μm) sa brojnim endosporama

• Kliničke forme – plućna (asimptomatska, benigna,

bronhopneumonija, kaverne)

kožna (retka)

diseminovana - sva tkiva bez DT

(CNS, koţa, kosti, difuzni granulomi)www.belimantil.info

C. immitis

Životni ciklus

www.belimantil.info

C. immitis

Sferule ispunjene sporamawww.belimantil.info

Pneumocystis carinii – PCP pneumonija

Pneumocistoza• Ekstracelularni parazit, respiratorni trakt, oportunista

• Kosmopolitska distribucija - zdravi nosioci, glodari, psi, mačke (humane infekcije samo humanim tipovima?)

• Ciklus - trofozoit (polimorfni jednoćelijski oblici 1-2.5 μm)

precista (sporocista, 4-5 μm)

cista (spora) 5-8 μm sa 8 intracističnih tela (oktetna)

• Reprodukcija - aseksualna i seksualna

• Patogenost - adherencija za pneumocite u alveolama pluća, pleuritis, retko hematogena diseminacija

• Dijagnoza

Uzorci bronhoalveolarni lavat (ispirak), biopsija pluća

Metode dir. bojeni preparat (Giemsa, PAS, Gomori MS, CFW)

serologija bez većeg značajawww.belimantil.info

Pneumocystis carinii (jirovecii)

Granularni eksudat u plućima

U dijagnostici se koristi bojenje bronhoalveolarnog lavaţa (BAL) metodom Gomori metenamin srebro (GMS). Boji se cistični zid, a ciste podsećaju na “ulubljene” ping-pong loptice. Paraziti unutar ciste se ne uočavaju.

www.belimantil.info

P. carinii

Rö snimak kod PCP Ciste u BAL-u

www.belimantil.info

Plesni izazivači sistemskih mikoza

• Plesni ili buĎi /višećelijske gljive iz grupe

askomiceta i fikomiceta

• Ubikvitarne (u zemljištu, na biljkama),

saprofiti, česti kontaminanti (namirnica,

kliničkih uzoraka, hranljivih podloga)

• Izazivači mikoza imunodeficijentnih osoba

www.belimantil.info

Aspergillus spp.

A. fumigatus, A. flavus, A. niger, A. terreus, A. nidulans…

Aspergillosis

• primarna (pluća –bronhopulmonija)

• sekundarna (aspergilloma/ “fungus ball” u postojećim šupljinama (tbc kaverne, bronhiektazije)

• mikotični keratitis, otomycosis, sinusitis, onychomycosis, mycetoma

• diseminovana (invazivna)

Alergijska aspergiloza

• bronhijalna astma sa plućnom eozinofilijom

• konjunktivitis

Aspergilotoksikoza

• aflatoxin (B1, B2, B2a, G1, G2, G2a) metabolički produkti kontaminanata hrane (A. flavus, A. fumigatus?)

• ochratoxin (A, B) - A. ochraceus

• dokazivanje toksina: dvodimenzionalna tankoslojna hromatografija, ELISA

www.belimantil.info

Aspergillus fumigatus

Kultura Preparat sa kulture

www.belimantil.info

Aspergillus niger na Čapekovom agaru

Preparat sa kulture

www.belimantil.info

Penicillium spp.

• Penicilliosis: plućna (retka diseminacija)

keratitis

otomycosis

onychomycosis

• Mikoalergoza

• Mikotoksikoza rubrotoxin B P. rubrum

P. purpurogenicum

lutoskvrin P. Islandicum

• P. marneffei – Azija, diseminovane inf., AIDS

www.belimantil.info

Penicillium spp.

BuĎava pomorandţa

Čista kultura

Mešana kultura (različite plesni)

www.belimantil.info

Penicillium spp.

Kultura Preparat sa kulture

www.belimantil.info

Mucoraceae (zigomicete, fikomicete)

• Mucor spp., Rhizopus spp., Absidia spp.

Mucormycosis (zygomycosis, phycomycosis)

• rinocerebralna forma (nazalna mukoza-

paranazalni sinusi- kost- orbita-moţdano tkivo)

• torakalna (pluća, diseminacija)

• abodminalna

• primarna koţna forma (opekotine)

www.belimantil.info

Zigomikoza

Rinocerebralna zigomikoza Subkutana zigomikozawww.belimantil.info

Zigomikoza pluća – hife u tkivu

Hyphae in lung tissue, H & E stain.

www.belimantil.info

Mucor spp.

Kultura Preparat sa kulture

(sporangije sa sporangiosporama)www.belimantil.info

ANTIMIKOGRAM – Difuzioni i mikrodilucioni metod

www.belimantil.info