LAPORAN PRAKTIKUM

MIKOLOGI

UJI ANTAGONIS

Disusun oleh :

Nama : Yekti Agus S

NIM : 125040200111017

Kelompok : Rabu, 13.20

Asisten : Tadzkiroh

JURUSAN HAMA DAN PENYAKIT TUMBUHAN

PROGRAM STUDI AGROEKOTEKNOLOGI

FAKULTAS PERTANIAN

UNIVERSITAS BRAWIJAYA

MALANG

2015

BAB I

PENDAHULUAN

1.1 Latar Belakang

Dalam dunia ini terdapat berbagai macam organisme yang merupakan penyusun bumi.

Dan setiap organisme memiliki peranan masing-masing, organisme yang ada dialam ini

memiliki dua sifat dimana dapat merugikan dan juga dapat dimanfaatkan salah satunya

adalah berperan dalam ilmu pengetahuan sehingga dapat membantu perkembangan ilmu

pengetahuan, salah satunya adalah fungi (jamur).Jamur merupakan organisme yang tidak

memiliki klorofil sehingga tidak dapat melakukan fotosintesis untuk menghasilkan makanan

sendiri. Jamur hidup dengan cara mengambil zat-zat makanan seperti selulosa, glukosa,

lignin, protein dan senyawa pati dari organisme lain. Oleh karena itu jamur digolongkan

tumbuhan yang heterofrotik yaitu tanaman yang hidupnya tergantung pada organisme lain.

Salah satu spesies jamur yang paling terkenal adalah jamur Aspergillus sp.. Setiap spesies

jamur ini mempunyai karakteristik morfologi dan peran yang berbeda-beda. Meskipun

demikian habitat pertumbuhan setiap spesies hampir sama. Seperti halnya manusia, jamur ini

juga dapat berkompetisi untuk memenuhi kebutuhannya agar tetap melangsungkan

kehidupannya. Salah satunya adalah Trichoderma sp. yang merupakan sejenis cendawan

atau fungi termasuk kelas ascomycetes. Trichoderma sp. memiliki aktivitas antifungal. Di

alam Trichoderma sp. banyak ditemukan di tanah hutan maupun tanah pertanian atau pada

substrat berkayu. Apabila dua jenis jamur Aspergillus sp. Dan Trichoderma sp. ditumbuhkan

bersama dalam suatu medium maka akan mencerminkan kompetisi di antara keduanya.Oleh

karena itu perlu untuk memahami dan mempelajari mengenai kompetisi antara dua spesies

jamurAspergillus sp. dan Trichoderma sp. serta mengidentifikasi spesies kedua jamur

tersebut.

1.2 Tujuan

a. Untuk mengetahui morfologi jamur Trichoderma sp.

b. Untuk mengetahui tingkat efektifitas Trichoderma sp

1.3 Manfaat

Dapat mengetahui interaksi yang terjadi antara jamur antagonis dengan jamur patogen

serta dapat mengetahui keefektifitasan jamur antagonis yang digunakan

BAB II

TINJAUAN PUSTAKA

2.1 Mekanisme Antagonis

Mekanisme antagonistik cendawan antagonis meliputi hiperparasitisme (mikoparasit),

antibiosis dan kompetisi. Sastrahidayat (1992) dalam Supriati (2010), menyatakan bahwa

Trichoderma sp. bertindak sebagai mikoparasit bagi cendawan lain dengan tumbuh

mengelilingi miselium patogen. Baker dan Scher (1987), berpendapat bahwa mikoparasitisme

dari Trichoderma spp. merupakan suatu proses yang kompleks dan terdiri dari beberapa tahap

dalam menyerang inangnya. Interaksi awal dari Trichoderma spp. yaitu dengan cara hifanya

membelok ke arah cendawan inang yang diserangnya. Ini menunjukkan adanya fenomena

respons kemotropik pada Trichoderma spp. karena adanya rangsangan dari hifa inang

ataupun senyawa kimia yang dikeluarkan oleh cendawan inang. Ketika mikoparasit itu

mencapai inangnya, hifanya kemudian membelit atau menghimpit hifa inang tersebut dengan

membentuk struktur seperti kait (hook-like structure), mikoparasit ini juga terkadang

memenetrasi miselium inang dengan mendegradasi sebagian dinding sel inang. Trichoderma

sp. Menghasilkan enzim dan senyawa antibiosis yang mampu menghambat bahkan

membunuh patogen. Senyawa antibiosis tersebut yaitu gliotoxin, glyoviridin dan

Trichodermin yang sangat berat menghambat pertumbuhan patogen. Banyak juga dilaporkan

Trichoderma sp. mampu memproduksi senyawa volatil dan non-volatil antibiotik (Sharma

dan Dohroo, 1991 dalam Arya dan Parello, 2010). Senyawa ini mempengaruhi dan

menghambat banyak sistem fungsional dan membuat patogen rentan. (Vey et al., 2001).

Mekanisme antagonisme Mekanisme antagonism diidentifikasi menurut Farida (1992)

yang meliputi :

a. Kompetisi ruang, nutrisi, dan oksigen.

Kompetisi antara jamur uji dengan jamur patogen dalam memperebutkan ruang,

nutrisi, dan oksigen diamati dengan cara melihat jenis jamur yang lebih cepat memenuhi

cawan petri.

b. Antibiosis.

Pengamatan antibiosis dilakukan dengan mengukur lebar zona kosong (hambatan)

dan melihat ada atau tidaknya perubahan warna pada medium akibat senyawa antibiotik

yang dihasilkan jamur uji.

c. Lisis dan parasitisme.

Pengamatan mekanisme lisis dan parasitisme dilakukan dengan mengamati hifa jamur

antagonis uji yang tumbuh di atas jamur patogen dengan cara mengambil dan

menumbuhkan hifa jamur antagonis dan jamur patogen menggunakan jarum ose, lalu

diletakkan di atas gelas objek untuk diamati secara mikroskopis.

2.2 Klasifikasi Jamur yang digunakan dalam Uji Antagonis

a. Trichoderma. sp

Kerajaan: Fungi

Divisi: Ascomycota

Upadivisi: Pezizomycotina

Kelas: Sordariomycetes

Ordo: Hypocreales

Famili: Hypocreaceae

Genus: Trichoderma ( Alexopaulus, 1979)

2.3 Morfologi Jamur Antagonis yang digunakan (Trichoderma spp.)

2.3.1 Mikroskopis

Terdapat konidia, selain itu konidifor dapat bercabang menyerupai piramida, yaitu

pada bagian bawah cabang lateral yang berulang-ulang, sedangkan kearah ujung percabangan

menjadi bertambah pendek. Fialid tampak langsing dan panjang terutama apeks dari cabang,

dan berukuran (2,8-3,2) m x (2,5-2,8) m, dan berdinding halus. Klamidospora umumnya

ditemukan dalam miselia dari koloni yang sudah tua, terletak interkalar kadang terminal,

umumnya bulat, berwarna hialin, dan berdinding halus (Gandjar,dkk., 1999 dalam Tindaon,

2008).

2.3.2 Makroskopis

b. Colletotricum capsici

Kerajaan : Fungi

Filum : Ascomycota

Kelas : Ascomycetes

Bangsa : Melanconiales

Suku : Melanconiaceae

Marga : Colletotrichum

Jenis : Colletotrichum capsici Butl & Bisby (Blackwell,1996)

Koloni Trichoderma spp. pada media agar pada awalnya terlihat berwarna putih

selanjutnya miselium akan berubah menjadi kehijau-hijauan lalu terlihat sebagian besar

berwarna hijau ada ditengah koloni dikelilingi miselium yang masih berwarna putih dan

pada akhirnya seluruh medium akan berwarna hijau (Umrah, 1995 dalam Nurhayati, 2001).

Koloni pada medium OA (20oC) mencapai diameter lebih dari 5 cm dalam waktu 9 hari,

semula berwarna hialin, kemudian menjadi putih kehijauan dan selanjutnya hijau redup

terutama pada bagian yang menunjukkan banyak terdapat konidia

2.4 Perhitungan Daya Antagonis dan Penjelasannya

P = r1-r2/r1 x 100%

P = Persentase penghambatan

r1 = Jari-jari koloni patogen yang berlawanan arah dengan cendawan antagonis

r2 = Jari-jari koloni cendawan patogen menuju ke arah cendawan antagonis.

Persentase hambatan dihitung dari umur 3 HSI sampai 7 HSI. Dengan menggunakan rumus

menurut Nugroho et al., (2001) dalam Supriati et al., (2010)

BAB III

METODOLOGI

3.1 Alat dan Bahan

a. Alat

Spidol Permanen : Untuk memberikan garis dalam mempermudahkan

pengukuran diameter

Bunsen : Untuk sterilisasi alat

Kamera : Untuk mengambil gambar isolate jamur antagonis dan

jamur patogen

Cork Borrer : Untuk melubangi isolate jamur antagonis dan jamur

pathogen

Cawan petri : Sebagai tempat media PDA

Jarum ose : Digunakan untuk mengambil/memindahkan koloni

isolate patogen.

Penggaris : Untuk mengukur diameter dari isolate jamur antagonis

dan jamur patogen

b. Bahan

Alkohol : Untuk sterilisasi alat

Media PDA : Untuk media penanaman spesimen pengamatan

Plastik wrap : Untuk membungkus media PDA dicawan petri

Isolat jamur antagonis : Sebagai specimen dalam pengamatan

Isolat jamur pathogen : Sebagai specimen dalam pengamatan

3.2 Diagram Alir Langkah Kerja

menyiapkan alat dan bahan yang akan digunakan

Kemudian memberi tanda pada permukaan bawah media cawan petri , beri titik 3 cm pada 2 titik

Sterililkan alat dan bahan yang akan digunakan

Tanam isolat jamur antagonis dan jamur patogen pada media PDA (pada titik yng disediakan tepat ditengah-tengah)

Tutup dengan plastik wrapping, beri label

Inkubasi,amati selama 7 hari , hitung diameter dan dokumentasikan

3.3 Analisis Perlakuan

Pertama yang harus dilakukan pada praktikum kali ini adalah menyiapkan alat dan

bahan yang akan digunakan,lalu memberi tanda pada permukaan bawah cawan petri yang

telah berisi media PDA dengan menggaris tengah cawan dan diberi tanda titik setiap 3 cm

sebanyak 2 titik dari tepi cawan. Kemudian sterilkan semua alat yang digunakan dengan

alkohol. Isolat jamur antagonis dan jamur patogen dibuka dan diambil menggunakan cork

borer dan diletakkan tepat di tanda bawah cawan (media baru). Setelah itu cawan ditutup

dengan plastic wrapping dan beri label. Isolat uji antagonis diinkubasikan dan diamati

selama 7 hari, hitung diameter dan dokumentasikan.

BAB IV

HASIL DAN PEMBAHASAN

4.1 Hasil

4.1.1 Tabel Isolat yang digunakan untuk uji antagonisme

No. Nama Jamur Kenampakan Jamur di

Media PDA

Keterangan

1.

Trichoderma

spp.

Pertumbuhan jamur antagonis

Trichoderma spp. pada 7 HSI

terlihat bahwa pertumbuhannya

hamper memenuhi cawan petri

dan menghambat pertumbuhan

dari jamur C. capsici.

2.

C. capsici

Pertumbuhan jamur pathogen C.

capsici pada 7 HSI terlihat bahwa

pertumbuhannya optimal dan

terhambat oleh jamur antagonis

Trichoderma spp.

4.1.2 Tabel Pengamatan

Hari Setelah

Isolasi

(HSI)

Patogen C. capsici

Tampak atas Tampak bawah

1 2 1 2

1

2

3

4

5

6

7

4.1.3 Presentase daya hambat

Hari Setelah Isolasi

(HSI)

Patogen C.capsici

Ulangan 1 Ulangan 2

r1 r2 r1 r2

1 0.6 0.5 1 0.8

2 1.3 0.8 1.3 0.9

3 1.5 0.9 1.5 1

4 1.6 0.9 1.8 1.1

5 1.8 1 2.1 1.2

6 2 1 2.5 1.4

7 2.5 1.2 2.8 1.5

Perhitungan Persentase Penghambatan :

1 HSI

a. Pp =

=

= 16.6 %

b. Pp =

=

= 20 %

2 HSI

a. Pp =

=

= 38 %

b. Pp =

=

= 30.7 %

3 HSI

a. Pp =

=

= 40 %

b. Pp =

=

= 33.3%

4 HSI

a. Pp =

=

= 43.7 %

b. Pp =

=

= 38.8 %

5 HSI

a. Pp =

=

= 44.4 %

b. Pp =

=

= 42.8 %

6 HSI

a. Pp =

=

= 50 %

b. Pp =

=

= 44.4 %

7 HSI

a. Pp =

=

= 52 %

b. Pp =

=

= 46.4 %

4.2 Pembahasan

4.2.1 Hasil Uji Antagonis tiap patogen

Berdasarkan pengamatan praktikum yang telah dilakukan selama 7 hari diperoleh

hasil penghambatan 52% dan 46,4%. Penghambatan pada C. capsici diduga pula karena

komposisi dinding luar hifa C. capsici yang menyebabkan patogen ini mudah di degradasi

oleh enzim kitinase. Dinding hifa Colletotrichum sp. memiliki tekstur mikrofibril yang

terbuat dari kitin (- 1,4 N asetilglukosamin) (Azarkan, 1997 dan Adikaram, 1998 dalam

Purnomo, 2008), merupakan komponen utama pada dinding sel hifa dan merupakan struktur

penting dari cendawan (Moore et al., 2011). Enzim kitinase yang dihasilkan oleh

Trichoderma sp. mampu melarutkan dinding hifa patogen C. capsici sehingga pertumbuhan

patogen terhambat bahkan dapat menyebabkan kematian cendawan.

4.2.2 Hasil Mekanisme Antagonisme

Mekanisme yang dilakukan oleh Trichoderma sp. sendiri adalah parasitisme, dapat

dilihat dari persentasi daya hambat bahwa kedua ulangan jamur hampi semua bagiannya

tertutupi oleh Trichoderma sp. Trichoderma sp. bertindak sebagai mikoparasit bagi cendawan

lain dengan tumbuh mengelilingi miselium patogen. Mikoparasitisme dari Trichoderma spp.

merupakan suatu proses yang kompleks dan terdiri dari beberapa tahap dalam menyerang

inangnya. Interaksi awal dari Trichoderma spp. yaitu dengan cara hifanya membelok ke arah

cendawan inang yang diserangnya. Ini menunjukkan adanya fenomena respons kemotropik

pada Trichoderma spp. karena adanya rangsangan dari hifa inang ataupun senyawa kimia

yang dikeluarkan oleh cendawan inang. Ketika mikoparasit itu mencapai inangnya, hifanya

kemudian membelit atau menghimpit hifa inang tersebut dengan membentuk struktur seperti

kait (hook-like structure), mikoparasit ini juga terkadang memenetrasi miselium inang

dengan mendegradasi sebagian dinding sel inang. Trichoderma sp. Menghasilkan enzim dan

senyawa antibiosis yang mampu menghambat bahkan membunuh patogen (Baker dan Scher,

1987). Senyawa antibiosis tersebut yaitu gliotoxin, glyoviridin dan Trichodermin yang sangat

berat menghambat pertumbuhan patogen. Banyak juga dilaporkan Trichoderma sp. mampu

memproduksi senyawa volatil dan non-volatil antibiotik (Sharma dan Dohroo, 1991 dalam

Arya dan Parello, 2010). Senyawa ini mempengaruhi dan menghambat banyak sistem

fungsional dan membuat patogen rentan. (Vey et al., 2001).

Penggunaan agensia antagonis yang secara alami ada dan terdapat di lokasi atau

daerah tersebut merupakan cara terbaik untuk dijadikan agensia hayati, mengingat agensia

antagonis tersebut tidak membutuhkan waktu untuk menyesuaikan diri dengan lingkungan

barunya. C. capsici merupakan patogen tular udara yang sering menimbulkan penyakit busuk

buah cabai (filosfer) di lapangan (Soesanto, 2008). Dari hasil pengamatan dan perhitungan

diperoleh presentase hambatan patogen oleh Trichoderma dari hari ke hari menunjukkan

kecenderungan semakin tinggi, Hal ini diduga karena isolat Trichoderma sp. cocok untuk

mengendalikan patogen filosfer.

4.2.3 Efektivitas dari Trichoderma spp.

Trichoderma sp. mampu mengendalikan berbagai jenis cendawan patogen, namun

banyak strain Trichoderma sp. yang lebih efisien dalam menghambat beberapa patogen

dibandingkan patogen yang lain Harman (2012). Berdasarkan pengamatan yang telah

dilakukan Trichoderma terbukti efektif untuk menghambat daya tumbuh patogen filosfer.

Hal ini dapat dilihat dari mekanisme parasit yang terjadi antara Trichoderma sp dan

C.capsici. Untuk efektivitas Trichoderma pada patogen lain, masih perlu diujikan lagi.

BAB V

PENUTUP

5.1 Kesimpulan

Berdasarkan hasil praktikum yang telah dilaksanakan dapat disimpulkan bahwa

Trichoderma melakukan mekanisme parasit pada C.capsici, dengan persentase daya

penghambat 52% dan 46,6%. Hal ini sesuai dengan literatur bahwa Trichoderma dapat sangat

efektif ketika menyerang patogen filosfer atau patogen tular tanah. Pemanfaatan Trichoderma

dapat dilakukan dalam membantu ketahanan tanaman dari serangan pathogen.

5.2 Saran

Praktikum kurang efektif, karena hanya satu sampel yang diujikan. Untuk praktikum

kedepan uji antagonis dilakukan pada beberapa isolat patogen untuk mengetahui mekanisme

antagonis yang lebih beragam.

DAFTAR PUSTAKA

Alexopoulos, C. J., M. Blackwell, & C. W. Mims. 1996. Introductory Mycology. 4th

Ed. John Wiley & Sons, Inc., New York

Arya, A and A. E. Perello. 2010 Management of Fungal Plan Pathogen. Publised

by CABInternational. London.

Farida, S. 1992. Penggunaan Jamur Saprob Tanah Untuk Mengendalikan Fusarium

oxysporum Pada Tanaman Tomat (Lycopersicum esculenta). J. IPM

2(1):24-29

Supriati, L., R. B. Mulyani. dan Y. Lambang. 2010. Kemampuan antagonisme beberapa

isolat Trichoderma sp., indigenous terhadap Sclerotium rolfsii secara in

vitro. J. Agroscientic. 17(3): 119-122.

Tindaon H. 2008. Pengaruh Jamur Antagonis Trchoderma harzianum dan Pupuk Organik

Untuk Mengendalikan Patoden Tular Tanah Sclerotium rolfsii Sacc. Pada

Tanaman Kedelai (Glycine max L.) Di Rumah Kaca. USU Repository. Medan

Vey, A., R. E. Hoagland dan T. M. Butt. 2001. Fungi as Biocontrol Agents: progress

problems and potential. In Butt, T. M., C. Jackson and N. Magan (Ed).

Toxic metabolite of fungal biocontrol agents. Publishing CAB International.

London.