Microbiologie Curs Neisseria

Genul Neisseria

Genul Neisseria diplococi Gram negativi, cu fete adiacente aplatizate

(aspect de boabe de cafea) Imobili, nesporulati Strict aerobi Oxidazo - pozitivi, catalazo pozitivi Specii

Patogene pretentioase nutritiv N. gonorrhoeae N. meningitidis

Comensale (mucoasa orofaringiana, urogenitala, conjunctivala) nepretenioase nutritiv

Neisseria gonorrhoeae

Patogen strict uman poate determina infectii asimptomatice la nivelul

mucoasei uretrale, endocolului uterin, mucoasei faringiene

Sensibila la uscaciune si temperaturi diferite de 37C Pretentioasa nutritiv cultiva pe medii imbogatite

complexe, la 37 C, in atmosfera umeda cu 5-10% CO2

Neisseria gonorrhoeaeFactori de virulenta Pili

Realizeaza atasarea initiala la celulele epiteliale ale mucoaselor

Pilina - constituita dintr-o regiune constanta (N terminal) si una hipervariabila (C-terminal), imunodominanta

variatia antigenica a pilinei si variatia de expresie a pilinei (variante cu pili si variante fara pili) mecanisme de eludare a efectorilor imunitari


Factori de virulenta Proteine ale membranei externe

Por (proteina I) porine; induc endocitoza si inhiba formarea fagolizozomilor in fagocite (permite supravietuirea intracelulara)

Opa (proteina II) atasarea ferma pe suprafata celulelor epiteliale si inducerea endocitozei; exista variatie antigenica

Rmp (proteina III) protejeaza Por de actiunea Ac: Rmp este intens imunogena pentru Ac care nu activeaza complementul. Ac anti Rmp se fixeaza pe complexul Rmp-Por, blocand fixarea Ac anti Por, fixatori de complement

Neisseria gonorrhoeae Proteina de legare a transferinei Proteina de legare a lactoferinei Proteina de legare a hemoglobinei


Factori de virulenta Lipooligozaharid (LOS)

Comparabil LPS, fara Ag O Rol in aderenta si invazie Inhiba sinteza LT B4 (inhiba activarea PMN) Activeaza complementul pe cale alterna si stimuleaza

raspunsul inflamator si eliberarea de TNF IgA1 proteaza

La acestia se pot adauga factori de rezistenta la Atb.


Patogenie Atasarea pe suprafata celulelor mucoasei Penetrare intracelulara Proliferare intracelulara Rasp inflamator local si diseminare


Infectii genitale la barbati - manifeste clinic in 95% cazuri Uretrita acuta scurgere uretrala purulenta si disurie aparute

la 1-9 zile de la contactul infectant complicatii rare: epididimita, orhita

Infectii genitale la femei frecvent asimptomatice Cervicite scurgere vaginala, disurie, dureri abdominale Bartholinite Vulvovaginite la fetite Complicatii (10-20% cazuri): salpingita, boala inflamatorie

pelvina; sarcina extrauterina, sterilitate


Infectii diseminate - in 1-3% cazuri la femei infectate Septicemie Artrita septica Eruptii maculo-papuloase

Alte infectii Conjunctivita purulenta la n.n. (ophtalmia neonatorum) la 2-

5 zile dupa nastere Faringita Gonoree ano-rectala


Imunitate IgG anti pilina, proteina Opa, LOS IgA1 anti Rmp Variatia antigenica explica lipsa imunitatii protectoare si

dificultatea obtinerii unui vaccin Deficiente ale sist. complement risc crescut de infectii

diseminate

Diagnostic de laborator

Recoltare Produse patologice

exsudat uretral la barbat (la minim 4 ore de la ultima mictiune)

secretie endocervicala la femeie 2 tampoane

a. doua frotiuri realizate extemporaneub. Insamantare pe medii selective si neselective, preincalzite

la 37C si transportate in atmosfera cu CO2 ; alternativ medii de transport (Amies, Stuart)

Diagnostic de laborator

Ex microscopic frotiu colorat Gram si frotiu colorat cu albastru de metilen Celule inflamatorii (PMN) si diplococi (Gram negativi)

intracelulari, aspect de boabe de cafea Sensibilitate si specificitate bune pentru dgn. uretritei

gonococice doar relativ util pentru dgn infectiei gonococice la barbati

asimptomatici sau femei: necesita confirmare prin alte metode

Neisseria gonorrhoeae Cultivare

Imediat dupa recoltare - insamantare pe medii preincalzite; alternativ medii de transport

N. gonorrhoeae - pretentioasa nutritiv cultiva pe medii complexe (HYL, Thayer Martin)

Probele genitale, faringiene, rectale insamantare pe m selective (Thayer Martin cu adaos de vancomicina, nistatin, polimixina) si pe m neselective (geloza ciocolat);

hemoculturi (in primele zile ale infectiei diseminate) incubare la 37 C, in atmosfera umeda cu 5% CO2

Neisseria gonorrhoeae Caractere cultivare

Colonii mici, S, stralucitoare, translucide

Neisseria gonorrhoeae Teste genotipice rapide, sensibile si specifice

Hibridizare cu sonde de acizi nucleici Real-time PCR

Identificare preliminara Caractere microscopice, cultivare Testul oxidazei pozitiv

Identificare definitiva Caractere biochimice

Testarea sensibilitatii la antibiotice Macrolide Fluorochinolone Cefalosporine gen a IIIa

Neisseria meningitidis

Colonizare la nivelul nasofaringelui (purtatori sanatosi)

Fragila (moare la variatii de temperatura sau pH, uscaciune)


Structura antigenica Ag polizaharidice capsulare

definesc 13 serogrupe (cele mai frecvent implicate in infectii la om: A, B, C, X, Y, Z , W135)

Proteine ale membranei externe (Opa, Opc) LOS


Factori de virulenta Capsula polizaharidica

Protectie impotriva fagocitozei si a lizei mediate de complement Expresie redusa dupa atasarea pe celule epiteliale

Pili Pilina variabilitate genica PilC rol in aderenta la celule epiteliale

Proteinele membranei externe (Opa, Opc) rol in aderarea ferma la diverse suprafete

LOS IgA proteaza


Patogenitate Atasare prin pili la receptori specifici de pe suprafata celulelor

epiteliale Fixarea prin Opa, Opc induce modificari conformationale ale

citoscheletului ; oprirea sintezei capsulei Endocitoza si incorporarea in vacuole; stimularea sintezei

capsulei Multiplicare intracelulara si migrare in spatiul subepitelial Hiperproductia de LOS activeaza citokine proinflamatorii si

induce leziunile vasculare (vasculita, tromboza) Rolul factorilor imunitari


Infectii la 1%0 din purtatori; factori favorizanti

Virulenta tulpinii (>90% cu serogrupele A, B, C, X, Y, W135) Deficiente ale apararii imune ale gazdei

manifestari clinice variate, de la bacteriemii la forme severe, cu evolutie rapida spre deces (in ore de la debutul simptomelor) in absenta tratamentului


Infectii Meningita Septicemie (meningococcemie) cu /fara meningita Alte infectii (rare): rinofaringita, otita medie,

pneumonie, artrita, pericardita


Meningita principala cauza de meningita bacteriana la copil si a doua

cauza la adult Febra, greturi, varsaturi, cefalee, mialgii, sdr meningian Evolutie rapid nefavorabila (ore) in absenta tratamentului Risc de sechele neurologice


Meningococcemia Eruptie petesiala, ulterior purpurica , hemoragii la nivelul

mucoaselor, trombocitopenie poate evolua spre soc , coagulare intravasculara diseminata

Diagn de laborator in meningita cu N. meningitidis

URGENTA! Obiective

Initierea terapiei antibiotice la pacient (mortalitate mare in absenta terapiei, sechele neurologice in cazul initierii tardive)

Profilaxie la contacti Produse patologice

LCR sange

Diagn de laborator in meningita cu N. meningitidis

Ex microscopic al frotiului colorat Gram din sedimentul LCR

Cultivare Agar socolat incubare la 37 C, in atmosfera umeda cu 5% CO2

Teste rapide Latex aglutinare (detecteaza grupele capsulare A, B, C , Y,

W135) - sensibilitate redusa pentru grupul B PCR detecteaza ADN bacterian, cu sensibilitate si

specificitate >96%; poate fi util si la pacienti pretratati si pentru detectarea unor markeri epidemiologici

Alte teste: hipoglicorahie, hiperalbuminorahie s.a.


Identificare Caractere microscopice Cultivare colonii transparente sau opace Caractere biochimice oxidaza pozitiv; metabolizarea

glucozei si maltozei Caractere genotipice

Testarea sensibilitatii la Atb


Identificare antigenica (markeri epidemiologici) pe baza unor Ag polizaharidice capsulare (definesc serogrupe) Proteine ale membranei externe (definesc serotipuri) LOS (serotipuri)


Tratament De prima intentie (dupa recoltarea LCR) cefalosporine

gen III conf rezultatelor testarii sensibilitatii la Atb

Profilaxie Chimioprofilaxie la copii si tineri care au avut contact cu

pacienti Vaccinare vaccin purificat, polizaharide capsulare ale

grupelor A, C, Y, W135

Neisseria N lactamica, N sicca, N flava, N mucosa Neisserii nepretentioase nutritiv Comensale ale oro si nasofaringelui Pot determina infectii la imunodeprimati Sensibile la penicilina

Moraxella 2 subgenuri: Moraxella si Branchamella Comensale ale mucoasei respiratorii la om si animale Moraxella

Cocobacili Gram negativi, asezati in perechi sau scurte lanturi Pretentiosi nutritiv, strict aerobi, oxidaza si catalaza pozitivi Sensibili la penicilina, cefalosporine, aminoglicozide

Branchamella B catarrhalis- conditionat patogen Diplococi Gram negativi Nepretentiosi nutritiv, cultiva la temperatura camerei Rezistente la penicilina

Slide 1Genul NeisseriaNeisseria gonorrhoeaeNeisseria gonorrhoeaeNeisseria gonorrhoeaeNeisseria gonorrhoeaeNeisseria gonorrhoeaeNeisseria gonorrhoeaeNeisseria gonorrhoeaeNeisseria gonorrhoeaeNeisseria gonorrhoeaeDiagnostic de laboratorDiagnostic de laboratorNeisseria gonorrhoeaeNeisseria gonorrhoeaeNeisseria gonorrhoeaeNeisseria meningitidisNeisseria meningitidisNeisseria meningitidisNeisseria meningitidisNeisseria meningitidisNeisseria meningitidisNeisseria meningitidisNeisseria meningitidisDiagn de laborator in meningita cu N. meningitidisDiagn de laborator in meningita cu N. meningitidisNeisseria meningitidisNeisseria meningitidisNeisseria meningitidisNeisseriaMoraxella

Documents

Microbiologie Curs Neisseria