Nuevas herramientasDIAGNÓSTICAS

TUBERCULOSISMycobacterium tuberculosis

Act

ualiz

ado

a N

ov-2

014

Nuevas herramientasDIAGNÓSTICAS

La tuberculosis es la enfermedad que mayor número de muertes causa en la humanidad. El bacilo de Koch (BK) es el microorganismo responsable de ésta y encuentra en la pobreza, hacinamiento y exclusión social los determinantes que facilitan su desarrollo.

El Perú es el país del continente americano con el mayor número de casos reportados de tuberculosis multidrogo resistente (MDR), una versión más agresiva de la tuberculosis. Pero también de la extra-drogo resistente (XDR), cepa aún más violenta que la anterior. Durante el 2012, se registraron 1.216 casos de tuberculosis MDR (26 más que en el 2011) y 84 de tuberculosis XDR (3 más que el año anterior). Casi un 90% de estos pacientes procedían de Lima Metropolitana y Callao.

Mycobacterium tuberculosis (Bacilo de Koch). La tos Seca es uno de los sintomas mas comunes.

MEDLAB ofrece un sistema completamente automático que integra una detección rápida por PCR-RT y el cultivo con�rmatorio (BACTEC-MGIT) con los procedimientos de baciloscopía y cultivos clásicos.

El método más antiguo utilizado en los países endémicos para detectar BK en forma directa y rápida, es la baciloscopía del esputo, siendo éste de muy poca sensibilidad y especi�cidad (especialmente en pacientes inmunodeprimidos, VIH). Otra herramienta diagnóstica clásica es el cultivo convencional en medios especí�cos (Lowestein Jensen), que cumple un rol de diagnóstico con�rmatorio, pero también sufre de una baja sensibilidad y de ser muy lento (45 días).

El estudio de sensibilidad y de farmacorresistencia depende del aislamiento por cultivo, proceso lento y engorroso que desgraciadamente, y con frecuencia llega tarde e inoportuno, invitando a una terapia empírica y muchas veces inadecuada Esto podría explicar la alta tasa de farmacorresistencia observada en el Perú.

El Ministerio de Salud del Perú conscientes de esta realidad ha dado exigentes dispositivos técnicos para utilizar la nueva tecnología molecular (PCR-RT) y de cultivo en sistemas líquidos automáticos (BACTEC MGIT), que además de acortar signi�cativamente los tiempos de procesos, nos brinda la oportunidad, en el mismo estudio, de detectar niveles de resistencia antibiótica.

Mycobacterium tuberculosis

Laboratorio Clínico MEDLAB

QUANTIFERON

CULTIVO LIQUIDO

Bioseguridad Nivel III

Mycobacterium tuberculosis

Han aparecido una nueva generación de técnicas para el diagnóstico de la infección por tuberculosis conocidas como IGRAs (Interferon-Gamma Release Assays), basadas en la liberación de una citoquina, el interferón gamma, por los linfocitos T (CD4+, CD8+ y NK) del paciente infectado.No obstante la especi�cidad de la técnica quantiFERON-TB es superior a la de la tuberculina, al disminuir la tasa de falsos positivos, producido básicamente por la vacunación con BCG.

El método de cultivo bacteriológico automatizado BACTEC MGIT permite obtener resultados de cultivo y de susceptibilidad a drogas antituberculosas en un menor tiempo que el método de diluciones clásicas, además tiene la ventaja de ser un método no radioactivo lo cual lo hace más seguro para el personal de laboratorio.

El BACTEC MGIT, contiene el medio de cultivo Middlebrook 7H9, detectando consumo de O2 mediante unos sensores �uorométricos. Un aspecto relevante del medio MGIT es que los tubos poseen tapones tipo rosca, evitando el uso de agujas y jeringuillas. Los resultados se reportan como positivos o negativos. La tasa de

El diagnóstico de la Tuberculosis de basa principalmente en el aislamiento de la bacteria (cultivo en medios solidos o líquidos). La tecnología del PCR acorta el tiempo de respuesta en el resultado de dicho diagnostico.

cultivos aislados por el BACTEC MGIT es mejor que en el medio L-J (80-100% contra 59.7-87.2%).

En relación a la capacidad del BACTEC MGIT 960® para dar resultados de sensibilidad a drogas de primera línea, se ha encontrado una sensibilidad de 100% para las cuatro drogas (isoniazida, rifampicina, etambutol y estreptomicina) y un rango de especi�cidad de 89,8% para estreptomicina hasta 100% para rifampicina.

Medlab cumple las normas técnicas de Bioseguridad Nacional e Internacional para el manejo de muestras biológicas potencialmente infecciosas.

La cabina de seguridad biológica Bio II A ha sido diseñada para minimizar los riesgos inherentes al trabajo con agentes biológicos de Clase 1, 2 y 3, proporcionando protección tanto al producto, como al operador y al entorno.

Tipos de muestras procesadasEsputoLavado BronquialLCROrina

Aspirado gástricoFluidos corporalesEtc.

INDICACIONES:•Individuos con sospecha clínica de enfermedad tuberculosa.•Individuos con alto riesgo de progresión debido a sus condiciones clínicas.•Individuos con riesgo social si desarrollan tuberculosis: personal sanitario, educadores, inmigrantes procedentes de países con altas tasas de infección.

•Individuos con lesiones no evolutivas en radiología de torax.•Estudios epidemiológicos.

TIEMPO PROMEDIO DE RESULTADOS PARA M. tuberculosis

PCR - RT: 2-3 horasCultivo - Medio Liquido: 7-15 días

Cultivo - Medio Solido: 42 días

Mycobacterium tuberculosis

PCR en MEDLAB

Principio

Ventajas

El método Xpert MTB/RIF es una prueba de ampli�cación del ácido nucleico totalmente automatizada que emplea un sistema de biología molecular para diagnosticar el bacilo de la tuberculosis y su resistencia a la rifampicina.

Este método puri�ca, concentra, ampli�ca (mediante una prueba de Reacción en Cadena de Polimerasa rápida en tiempo real) e identi�ca secuencias de ácido nucleico especí�cas del genoma de tuberculosis; los resultados se obtienen a partir de muestras de esputo directos y su proceso toma menos de 2 horas, siendo un sistema cerrado que expone lo mínimo al personal técnico del laboratorio.

El sistema GeneXpert se basa en cartuchos de uso único donde se carga la muestra del material biológico sin procesar; el cartucho se inserta en el instrumento y este se encarga de realizar el proceso completo de extracción/puri�cación del material genético total, ampli�cación del fragmento de interés y detección del mismo. El cartucho incluye los reactivos necesarios para llevar a cabo todas las reacciones necesarias.

REPORTE YVALIDACIÓN

CONFIRMACIÓNDE ESPECIE

RESISTENCIA ARIFAMPICINA

NEGATIVO POSITIVO

MUESTRA CLÍNICA

Alta sensibilidad y especi�cad.Rápido y preciso.Mínimo y fácil manejo de la muestra.Pruebas a partir de muestra original, no requiere cultivo previo.Automatización en la extracción de los ácidos nucleicos.Controles internos asegura el QC de la prueba.

Pruebas ofrecidasBaciloscopía directa

Quantiferon TB Gold

Microarray + Resistencia Rifampicina/Estreptomicina (Pronto)

Cultivo en medio solido (L–J)

Cultivo en medio liquido (Nuevo)

PCR-RT + Resistencia Rifampicina ( Nuevo)

Laboratorio Clínico MEDLAB