Leveduras Filamentosos

Grupo heterogêneo

Unicelulares

Diversidade

• Cor das colônias

• Textura

Reprodução

Assexuada

• Estado anamorfo

• Por brotamento ou gemulação

• Formação blastoconídios e pseudo-hifas

Diagnóstico laboratorial

• Exame direto: levedura ou fungo filamentoso ?

• Cultura: isolamento e identificação

Condições adequadas de incubação

• Meio de cultivo

• Temperatura

• Tempo

Agar Sabouraud com cloranfenicol (leveduras e fungos filamentosos)

Agar PDA (batata-dextrose) (fungos filamentosos)

Agar Mycobiotic=Mycosel= agar seletivo para fungos patogênicos (uso restrito=inibe vários fungos sensíveis à cicloheximida, inclusive leveduras)

Exame direto - Leveduras

Identificação Laboratorial

Fonte: Laboratório de Micologia – IMT – LIM – HC/FMUSP

Fonte: Laboratório de Micologia – IMT – LIM – HC/FMUSP

Pureza das colônias

• Detecção por exame direto

• Sub-cultivo

• Técnica de esgotamento

• Meios seletivos

• Cloranfenicol: inibir bactérias

• Cicloheximida: inibir fungos

Características macroscópicas

Características microscópicas

CHROMagar Candida

Sugere espécie conforme

cor da colônia:

Verde = C. albicans

Azul = C. tropicalis

Rosa = C. krusei

Branco = outras espécies

e outros gêneros

Alternativa: meios cromogênicos

Métodos clássicos

• Análise morfológica

• Assimilação de fontes de carbono e nitrogênio

• Fermentação de carboidratos

• Hidrólise da uréia (teste da urease)

Métodos comerciais

Análise morfológica

• presença de cápsula

• produção de tubo germinativo, em geral leitura às 2h

• cultivo em lâmina (micromorfologia, filamentação e presença de clamidosporos)

Espécies de

Candida spp

Baixa tensão de oxigênio

Fermentação

Utilização de fontes de Carbono

• a partir de açúcares

• produção de CO2

Meio líquido ou semi-sólido gelosadoa 0,6%

Cultura positiva

Exame direto

Bactéria Levedura

Cultura Pura

Sim Não

Obter Colônia Pura

por isolamento

Cápsula

+

Macromorfologia

Colônia bege:

Criptococcus sp

Colônia

salmão/laranja:

Rhodothorula sp

-

Tubo Germinativo

- +

C. albicans

Provas Bioquímicas e Cultivo em Lâmina (continua)

www.botany.utoronto.ca

www.mycology.adelaide.edu.au

Sidrim et al., 1999

Diversos métodos

Diferentes níveis de sensibilidade, especificidade e acurácia em cada sistema

Necessidade de estudo morfológico e/ou a complementação com testes tradicionais

Escolha do(s) método(s)

• Realidade de cada laboratório

• Freqüência de isolamento

• Custo do teste

• Eficácia do teste

Exatidão de

uma

operação ou

de uma tabela

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