22
I. Preformulasi 1. Tinjauan Farmakologi Bahan Obat a. Efek Utama Mencegah atau mengobati hipokalemia/kekurangan kalium dan biasanya digunakan sebagai tonicity agent( HPE, 572 ). Kalium merupakan kation yang terpenting dalam cairan intraseluler dan sangat essensial untuk mengatur keseimbangan asam basa serta isotonisitas sel. Glukosa yang ada dalam infus berfungsi sebagai pengganti kehilangan cairan tubuh sehingga tubuh mempunyai energi kembali untuk melakukan metabolismenya dan juga sebagai sumber kalori. b. Efek Samping Terjadi hiperkalemia apabila jumlah yang digunakan melebihi yang dibutuhkan, kelemahan otot, paralisis, aritmia, heart block, dan cardiac arest. c. Kontraindikasi Obat-obat yang dapat meningkatkan kadar kalium dalam darah seperti ACE Inhibitor, ciclosporin, kerusakan ginjal yang berat, kadar plasma kalium diatas 5 mmol/L, alergi terhadap obat, dehidrasi akut, kadar serum kalium dalam darah tinggidan obat yang mengandung kalium ( garam kalium dari penisilin ) 2. Tinjauan Sifat Fisika Kimia Bahan Obat a. Kelarutan

Laporan Praktikum Sediaan Steril Infus Kcl

Embed Size (px)

DESCRIPTION

infus KCL sediaan steril

Citation preview

I. Preformulasi1. Tinjauan Farmakologi Bahan Obata. Efek UtamaMencegah atau mengobati hipokalemia/kekurangan kalium dan biasanya digunakan sebagai tonicity agent( HPE, 572 ). Kalium merupakan kation yang terpenting dalam cairan intraseluler dan sangat essensial untuk mengatur keseimbangan asam basa serta isotonisitas sel. Glukosa yang ada dalam infus berfungsi sebagai pengganti kehilangan cairan tubuh sehingga tubuh mempunyai energi kembali untuk melakukan metabolismenya dan juga sebagai sumber kalori. b. Efek SampingTerjadi hiperkalemia apabila jumlah yang digunakan melebihi yang dibutuhkan, kelemahan otot, paralisis, aritmia, heart block, dan cardiac arest.c. KontraindikasiObat-obat yang dapat meningkatkan kadar kalium dalam darah seperti ACE Inhibitor, ciclosporin, kerusakan ginjal yang berat, kadar plasma kalium diatas 5 mmol/L, alergi terhadap obat, dehidrasi akut, kadar serum kalium dalam darah tinggidan obat yang mengandung kalium ( garam kalium dari penisilin )2. Tinjauan Sifat Fisika Kimia Bahan Obata. Kelarutan Larut dalam 2,8 bagian air, larut dalam 250 bagian etanol 95%, larut dalam 14 bagian gliserin, dan praktis tidak larut dalam bagian aseton atau eter.

(HPE, 572)b. Stabilitas-Terhadap suhu : Stabil pada suhu ruangan -Terhadap pH : pH 7 untuk larutan saturated pada suhu 15oC-Terhadap Oksigen : StabilStabil, disimpan di tempat tertutup dan tempat kering (HPE, 572)c. Cara Sterilisasi BahanSterilisasi panas basah (autoklave) atau filtarasiDengan autoklaf dilakukan pada suhu 115oC selama 30 menit.d. InkompatibilitasKCl bereaksi kuat dengan bromine triflourida dan dengan campuran asam sulfurat dan kalium permanganat. Adanya asam hidroklorit, NaCl dan MgCl2 menurunkan KCl di dalam air. Larutan Intravena KCl inkompatibel dengan protein hidrolisat (HPE, 573)e. Cara Penggunaan dan DosisInfus dimasukkan ke vena yang besar dengan kecepatan 10-20 mEg/jamII. Formulasi1. Permasalahan dan Penyelesaian Permasalahan1. Sediaan tidak boleh mengandung pirogen2. Pemberian Carbo absorben dapat menyerap bahan organik3. Sediaan harus dibebaskan dari Carbo absorben4. Perhitungan isotonis dengan menggunakan glukosa sebagai pengganti NaCl Penyelesaiana) Menggunakan air bebas pirogen dan ditambahkan norit sebagai pengabsorbsi pirogenikb) Penambahan glukosa sebanyak yang diserap noritc) Sebelum dikemas, sediaan disaring terlebih dahulu agar bebas dari noritd) Menggunakan metode NaCl ekivalen2. Formulasi yang akan dibuatR/KCl0,38%Glucoseq.sHCl 0,1 Nad Ph 5-6Norit0,1%Aqua steril bebas pirogenad 100 ml3. Perhitungan Berat dan Volume KCl= x 150 ml= 0,57 g Norit= x 150 ml = 0,15 g Glucose1 g KCl setara dengan 0,76 NaCl = NaCl = 0,4332 gIsotonis 0,9 % NaCl = 0,9 g dalam 100 mlJika dalam 150 maka : x 0,9 g = 1,35 gJadi NaCl yang dibutuhkan = 1,35 g 0,4332 g = 0,9168 g1 glukosa setara dengan 0,16 NaCl = Glukosa yang dibutuhkan = 5,73 gGlukosa yang ditambahkan yaitu glukosa yang dibutuhkan + glukosa yang diserap norit = 5,73 + x 0,15 = 5,73g + 0,0525 g = 5,7825 g Volume Infus = V + 50 ml= 100 ml + 50 ml = 150 ml4. Cara sterilisasi Bahan Sediaan yang Akan DibuatMenggunakan metode filtrasi dan metode panas basah ( autoklave) pada suhu 115oC selama 30 menit

1. Cara Kerja

Ditimbang Glukosa 5,783gramDitimbang Kcl 0, 57 gram

Dilarutkan dalam beker glas menggunaan aqua steril bebas piorgenDilarutkan dalam beker glas menggunakan aqua steril bebas pirogen

Larutan glukosa dan Kcl

Infus Steril, beri kemasan, label, dan etiketSterilisasi dengan autoclaf 115oC selama 10 menitFiltrat Masukkan dalam botol infus yang sudah dikalibrasi sebelumnya (102 ml) tutup botol dengan tutup karetDisaring dengan menggunakan membran filter 0,45mFiltratFiltratDisaring menggunakan kertas saring rangkap duaDipanaskan pada hot plate suhu 70oC selama 10 menitDipanaskan pada 70oC 10 menit, disaring kembali dengan saringan yang samaLarutan mengandung norit aktifDitimbang norit 0,15 gram masukkan kedalam larutan (a)Larutan pH 7,4 150 ml (a)Dicek pH nya sampai diperoleh pH 6 jika terlalu asam di adjust dengan NaOh Di cek pH nya sampai 7,4 . jika terlalu asam di adjust dengan NaOh

Hasil Pengamatan1. pH sediaan:61. Penimbangan bahan:1. KCl:0,57 g1. Norit:0,15 g1. Glukosa:5,783 g1. Waktu sterilisasi panas basah dengan autoklaf suhu 115oC selama 30 menitWaktu pemanasan20 menit29 detikWaktu pengeluaran udara2 menit30 detikWaktu menaik51 menit20 detikWaktu kesetimbangan10 menitWaktu pembinasaan30 menitWaktu tambahan jaminan sterilitas5 menitWaktu penurunan11 menit30 detikWaktu pendinginan5 menit13 detikTOTAL WAKTU137 menit13 detikPada pembuatan sediaan steril ini dikemas dalam bentuk vial yang mengandung larutan steril infuse KCL 0,38% cum glukosa. Larutan KCL cum glukosa digunakan secara intravena untuk memperbaiki kandungan elektrolit didalam tubuh. Bahan aktif yang digunakan adalah KCL. KCL merupaan senyawa yan dgnakan unuk terapi kekurangan kalium. Bahan ini dipilih kaena ion klorida yang ada dapat mengatasi hipochloracmic alkalosis yang sering terjadi pada pasien kekragan kalium. Infuse merupakan sediaan larutan yang disterilkan dan biasanya dikemas dalam dalam volume 0,5 1L.Pada praktikum kali ini dibuat infuse KCL 0,38% cum glukosa dengan volume 100 ml,namun yang dimasukkan kedalam wadah adalah 102 ml. hal ini sesuai dengan persyaratan FI IV untuk sediaan cairan encer dengan volume lebih dri 50 ml adalah ditambah 2% dari sediaan yang tertera pada etiket.hal ini dilakukan untuk memerikan toleransi kehilangan volume selamaproses pemindahan sediaan kedalam kemasan. Yang dilakukan pertama yakni menimbang KCL 0,57 g dalam kaca arloji kemudian larutkan dengan aqua steril dalam beaker glass. Kemudian menimbang glukosa sebanyak 5,78 g kemudian artkan dengan aqua steril dalam beaker glass. Campurkan keduanya ad homogeny. Diukur pH, bila terllalu basa dapat ditambah HCL ad pH 6.Tambahkan norit lalu tambahkan aqua steril ad 150 adukad homogen. Panaskan pada suhu 70-80C selama 10 menit.kemudian saring dengan kertas saring rangkap 2. Kemudian filtrate dipanaskan pada suhu yang sama selama 10 menit. Saring dengan ketas saring yang sama.filrat di saring kembali dengan membrane filter 0,45m, filtrate diambil 102 ml. masukkan dalam wadah,kemudiaan sterilisasi dengan autoklaf pada suhu 115C selama 137 menit 17 detik.Infus sebagai sediaan parenteral harus memenuhi persyaratan antara lain steril, dan bebas dari partikel asing, bebas pirogen, stabil, tonisitas, jernih(berarti tidak ada partikel padat) , sedapat mungkin isohidris( agar bila diinjeksikan ke badan tidak terasa sakit dan penyerapannya obat dapat optimal, isohidris artinya pH larutan injeksi sama dengan darah dan cairan tubuh lain),dan mempunyai pH yang sesuai. Tonisitas larutan perlu dihitung dahulu sebelum pembuatan sediaan. Tonisitas perlu dihitung dengan tujuan agar dapat diketahui apakah larutan tersebut sudah isotonis atau belum atau hipertonis, karena ini berhubungan dengan tekanan osmose larutan terhadap cairan tubuh yang akan diberi larutan infus. Larutan yang isotonis adalah larutan yang memiliki tekanan osmose sama dengan tubuh, dan keadaan isotonis inilah yang diharapkan, karena dalam keadaan ini, larutan yang diinjeksikan tidak akan menimbulkan rasa sakit. Sedangkan larutan yang hipotonis,akan menimbulkan sel cairan tubuh akan pecah atau lisis, karena tekanan diluar sel lebih rendah, maka cairan dalam sel akan menggembung dan pecah, mengingat tekanan osmose merupakan tekanan yang berjalan dari konsentrasi rendah ke konsentrasi tinggi. Sebaliknya pada larutan hipertonis akan mengakibatkan keadaan di luar sel lebih tinggi dibanding didalam sel, sehingga keadaan sel mengkerut. Keadaan hipotonis lebih berbahaya dibanding keadaan hipertonis, karena sifat larutan hipotonis irreversibel (sel sudah pecah ),sedangkan sifat hipertonis reversibel ( sel dapat kembali normal ). kelarutan dari bahan bahan obatnya, kondisi panas juga dapat mensterilkan bahan dari mikroba. Setelah semua bahan dilarutkan, maka pH dicek 6, hal ini dikarenakan agar larutan yang akan digunakan sebagai sediaan injeksi parenteral memiliki pH yang mendekati dengan pH tubuh manusia. Tujuan utama pengaturan pH dalam sediaan infus ini adalah untuk mempertinggi stabilitas obat, misalnya efek terapi optimal obat, menghindari kemungkinan terjadinya reaksi dari obat tersebut, sehingga obat tersebut mempunyai aktivitas dan potensi. Selain itu, untuk mencegah terjadinya rangsangan atau rasa sakit sewaktu disuntikkan. pH yang terlalu tinggi akan menyebabkan nekrosis jaringan sedangkan pH yang terlalu rendah menyebabkan rasa sakit jika disuntikkan.Pirogen adalah senyawa kompleks polisakarida yang mengandung radikal dengan unsur N.P, selama radikal tersebut masih terikat, maka selama itu pula akan menimbulkan demam dan bersifat termostabil, jika terlalu banyak dapat membahayakan pasien. Untuk mengatasi hal tersebut, digunakan metode sterilisasi filtrasi dimana dilakukan 3 kali penyaringan. Dua kali penyaringan dilakukan menggunakan kertas saring rangkap dua dan satu kali penyaringan dengan membrane filter 0,45 m. penyaringan dengan kertas saring rangkap dua menggunakan kertas saring yang sama dengan tujuan untuk menahan norit yang mengabsorbsi pirogen sehingga sediaan berkurang jumlah pirogennya.tujuan penyaringan yang ketiga dengan menggunakan membrane filter 0,45 m adalah untuk menghilangkan norit total sehingga sediaan terbebas dari norit. Oleh karena mengalami proses penyaringan , volume sediaan dibuat dilebihkan 50 ml yang sesuai dengan persyaratansediaan infuse yaitu volume dibuat lebih (ditambahkan 50 ml).Selain itu juga dilakukan sterilisasi dengan autoclave pada suhu 115C selama 137 menit 17 detik. Sterilisasi yang efektif dan dilakukan dalam percobaan ini adalah sterilisasi dengan uap bertekanan menggunakan autoclave dengan suhu 115C selama 137 menit 17 detik. Jadi harus diusahakan agar pembuatan larutan injeksi dan infus harus dikondisikan bebas pirogen dan harus dipastikan pula bahwa kondisi ini dapat dipertahankan sampai saat pemakaiannya. Pemilihan wadah pada formula ini menggunakan vial, karena dapat digunakan untuk berulang kali dan tutup terbuat dari karet yang bersifat elastis dan dapat ditutup kembali.Glukosatidak stabil pada pemanasan suhu tinggi dalam waktu yang lama karena terjadi penurunan pH dan karamelisasi sehingga sterilisasi tidak dilakukan pada suhu yang tinggi dan dalam waktu yang lama. Hal lain yang juga perlu diperhatikan adalah hasil degradasi pada pemanasan glukosayaitu 5-hidroksi metil furfural ( 5-HMF ) harus tidak melebihi batas tertentu seperti yang tertera dalam Farmakope Indonesia karena bersifat alergenik. Beberapa hal yang perlu diperhatikan untuk membatasi produksi 5-hidroksi metil furfural adalah suhu karena semakin tinggi suhu maka semakin banyak produksi 5-HMF, pH karena semakin tinggi pH maka semakin mudah terbentuk 5-HMF, serta konsentrasi glukosakarena semakin besar konsentrasi maka pembentukan 5-HMF semakin mudah.Berdasarkan FI IV sejumlah volume yang diukur seksama setara dengan 1,0 g glucose yang diencerkan dengan air hingga 250 ml. Ukur serapan pada panjang gelombang maksimum lebih kurang 284 nm menggunakan air sebagai blanko : serapan tidak lebih dari 0,25.

Infus sebagai sediaan parenteral harus memenuhi persyaratan antara lain steril, dan bebas dari partikel asing, bebas pirogen, stabil, tonisitas, jernih, sedapat mungkin isohidris,dan mempunyai pH yang sesuai. Larutan yang isotonis adalah larutan yang memiliki tekanan osmose sama dengan tubuh, dan keadaan isotonis inilah yang diharapkan, karena dalam keadaan ini, larutan yang diinjeksikan tidak akan menimbulkan rasa sakit Untuk menghilangkan pirogen, digunakan metode sterilisasi filtrasi dimana dilakukan 3 kali penyaringan. Dua kali penyaringan dilakukan menggunakan kertas saring rangkap dua dan satu kali penyaringan dengan membrane filter 0,45 m. Glukosatidak stabil pada pemanasan suhu tinggi dalam waktu yang lama karena terjadi penurunan pH dan karamelisasi, hasil degradasi pada pemanasan glukosayaitu 5-hidroksi metil furfural ( 5-HMF ).

Departemen Kesehatan Republik Indonesia, 1995.Farmakope Indonesia. Edisi IV.Jakarta: Direktorat Jenderal Pengawasan Obat dan Makanan.

LAL test dan Rabbit test merupakan suatu uji yang dilakukan dengan tujuan untuk mengetahui ada tidaknya kandungan pirogen dalam suatu sediaan, khususnya sediaan steril.1. LAL TestUji LAL (Limulus Amebocyte Lysate)adalahuji in vitro yang digunakan untuk mendeteksi atau mengukur keberadaan dan konsentrasi bakteri endotoksin dalam produk obat dan biologi dengan menggunakan Limulus Amebocyte Lysate yang diperoleh dari ekstrak air amebocytes kepiting tapal kuda (Limulus Polyphemus atau Tachypleus tridentatus) sebai reagen LAL (USP 32 - NF 27, 2009).Endotoksin merupakan jenis pirogen, tetapi tidak semua senyawa pirogen merupakan endotoksin. Sedangkan uji LAL merupakan metode spesifik untuk bakteri endotoksingram negatif, hanya untuk pirogen yang signifikan pada kebanyakan pabrik farmasetikal dan peralatan medis.Prosedur ini lebih akurat dan praktis dibanding menggunakan metode kelinci.Ada dua metode pada tes ini yaitu metode gel-clot yang didasarkan pada pembentukan gel dan metode fotometri.Ada pula metode turbidimetri yang didasarkan pada kekeruhan yang terjadi setelah pembelahan substrat endogen dan metode kromogenik yang didasarkan pada timbulnya warna setelah pembelahan kompleks kromogen-peptida sintetis. Hasil akhir didasarkan pada teknik gel-clot, kecuali dinyatakan lain dalam monografi (USP 32 - NF 27, 2009).Karena reagen LAL telah diformulasi untuk digunakan dalam metode turbidimetri atau kolorimetri, maka metode tersebut dapat digunakan untuk memenuhi persyaratan. Dibutuhkan kurva regresi standart untuk menentukan kandungan endotoksin dengan cara mengintrapolasi kurva. Prosedur yang dilakukan mencakup inkubasi dengan waktu yang sesuai untuk bereaksinya endotoksin dan larutan kontrol dengan reagen LAL dan absorbansi dibaca dengan teknik spektrofotometri pada panjang gelombang tertentu. Titik akhir dari metode turbidimetri adalah setelah proses inkubasi. Sedangkan titik akhir metode kolorimetri adalah setelah penambahan enzim pada saat proses reaksi hingga proses terminasi. Pada metode turbidimetri dan kolorimetri kinetic, absorbansi diukur selama proses reaksi dan lajunya ditentukan berdasarkan hasil pembacaan (USP 32 - NF 27, 2009).

1. Metode gel-clotMetode ini digunakan untuk mendeteksi atau mengukur endotoksin berdasarkan pembekuan reagen LAL dengan endotoksin.Konsentrasi endotoksin yang diperlukan untuk menggumpalkan lisat dalam kondisi standar menunjukkan sensitifitas reagen LAL (USP 32 - NF 27, 2009).LAL test didasarkan pada observasi pembentukan gel beku sewaktu endotoksin bersentuhan dengan protein pembeku dari amoebocytes Limulus yang bersikulasi. Perangkat uji ini terdiri dari kalsium, enzim propembekuan (proclotting) dan senyawa propenggumpalan/prokoagulan (procoagulan) (Blechova, 2001).Enzim proclotting akan teraktivasi oleh endotoksin dan kalsium untuk membentuk enzim pembeku (clotting enzyme) yang akan memotong prokoagulan menjadi subunit polipeptida (koagulogen). Subunit-subunit tersebut akan bergabung membentuk ikatan disulfida membentuk gel beku.Jika diperlukan, bisa dilakukan metode spektrofotometri untuk mengukur jumlah protein yang tergumpalkan pada lisat tersebut yang mana bisa terdeteksi hingga 10pg/ml lipopolisakarida (Blechova, 2001).Endotoksin bakteri gram negatif mengkatalisis aktivasi proenzim pada lisat LA.Laju aktivasi awal ditentukan oleh konsentrasi endotoksin.Enzim coagolase menghidrolisis ikatan spesifik pada suatu protein penggumpal (coagulogen) yang juga terdapat pada lisat LA menghasilkan koagulin untuk pembekuan protein.Endapan dan gel yang terbentuk dapat terjadi setelah mencampurkan endotoksin bakteri dengan lisat LA, namun hanya pembentukan gel yang dianggap sebagai titik akhir (Blechova, 2001).

1. Metode FotometriMetode turbidimetri mengukur peningkatan turbiditas.Berdasarkan prinsip uji, metode ini diklasifikasikan kedalam endpoint-turbidimetri atau kinetic-turbidimetri.Endpoint-turbidimetri didasarkan pada hubungan kuantitatif antara konsentrasi endotoksin dan turbiditas (absorbansi atau transmisi) dari reaksi campuran pada akhir inkubasi.Kinetic-turbidimetri merupakan metode yang digunakan untuk mengukur waktu onset yang dibutuhkan untuk mencapai absorbansi dari campuran reaksi atau laju turbiditas.Metode kromogenik digunakan untuk mengukur pelepasan kromofor dari peptide kromogenik pada reaksi endotoksin dengan reagen LAL.Berdasarkan prinsipnya, metode ini diklasifikasikan kedalam endpoint-kromogenik atau kinetic-kromogenik.Endpoint-kromogenik berdasarkan pada hubungan kuantitatif antara konsentrasi endotoksin dan pelepasan kromofor pada akhir inkubasi.Kinetic-kromogenik digunakan untuk mengukur waktu onset yang dibutuhkan untuk mencapai absorbansi dari campuran reaksi atau laju timbulnya warna.Proses inkubasi pada semua metode fotometri dilakukan pada suhu 371C (USP 32 - NF 27, 2009).1. Rabbit TestUji pirogen dimaksudkan untuk membatasi resiko reaksi demam pada tingkat yang dapat diterima oleh pasien pada pemberian sediaan injeksi. Pengujian meliputi pengukran kenaikan suhu kelinci setelah penyuntikan larutan uji secara i.v dan ditunjukkan untuk sediaan yang perlu penyiapan pendahuluan atau cara pemberiannya perlu kondisi khusus ikuti petunjuk tambahan yang tertera pada masing-masing monografi (Departemen Kesehatan, 1995).Uji pirogen menggunakan kelinci sehat yang telah dijaga dalam keadaan lingkungan dan makanan yang tepat sebelum dilakukan uji. Temperatur normal atau temperatur kontrol diukur untuk tiap hewan yang akan digunakan(Musdalifah, 2014).Gunakan alat pengukur suhu yang teliti seperti termometer klinik atau termistor atau alat sejenis yang telah dikalibrasi. Tempatkan satu ekor kelinci dalam kandang dalam ruang dengan suhu yang seragam antara 20-23C, dengan perbedaan suhu kurang lebih 3C dari suhu yang telah ditetapkan (Departemen Kesehatan, 1995). Temperatur ini digunakan sebagai dasar penentuan setiap kenaikan temperatur yang ditimbulkan akibat dari penyuntikan larutan yang akan diuji(Musdalifah, 2014).Adapun prosedur yang dilakukan adalah sebagai berikut.Lakukan pengujian dalam ruang terpisah yang khusus untuk uji pirogen dan dengan kondisi lingkungan yang sama dengan ruang pemeliharaan, bebas dari keributan yang menyebabkan kegelisahan. Kelinci tidak diberi makan selama waktu pengujian. Minum dibolehkan pada tiap saat, tetapi dibatasi pada saat pengujian. Apabila pengujian menggunakan termistor, masukkan kelinci kedalam kotak penyekap sedemikian rupa sehingga kelinci tertahan dengan letak leher yang longgar sehingga dapat duduk dengan bebas. Tidak lebih dari 30 menit sebelum penyuntikan larutan uji, tentukan suhu awal masing-masing kelinci yang merupakan dasar untuk menentukan kenaikan suhu. Beda suhu tiap kelinci dalam satu kelompok tidak boleh lebih 1o dan suhu awal setiap kelinci tidak boleh lebih dari 39,8oKecuali dinyatakan lain pada masing-masing monografi, suntikkan 10 ml/kg bb, melalui vena tepi telinga 3 ekor kelinci dan penyuntikan dilakukan waktu 10 menit. Larutan uji berupa sediaan yang bila perlu yang dikonstitusi seperti yang tertera pada masing-masing monografi dan disuntikkan dengan dosis seperti yang tertera. Untuk uji pirogen alat atau perangkat injeksi, gunakan sebagai larutan uji hasil cucian atau bilsan dari permukaan alat yang berhubungan langsung dengan sediaan parenteral, tempat penyuntikan atau jaringan tubuh pasien. Semua larutan harus bebas dari kontaminasi. Hangatkan larutan pada suhu 37o + 2o sebelum penyuntikan. Rekam suhu berturut-turut antara jam ke-1 dan jam ke-3 setelah penyuntikan dengan selang waktu.Interpretasi hasilSetiap penurunan suhu dengan nol. Sediaan memenuhi syarat apabila tak seekor kelinci pun menunjukkan kenaikan suhu 0,5o atau lebih. Jika ada kelinci yang menunjukkan kenaikan suhu 0,5o atau lebih. Lanjutkan pengujian dengan menggunakan lima ekor kelinci. Jika tidak lebih dari tiga ekor dari 8 ekor kelinci masing-masing menunjukkan kenaikan suhu 0,5o atau lebih dan jumlah kenaikan suhu maksimal 8 ekor kelinci tidak lebih dari 3,3o sediaan dinyatakan memenuhi syarat bebas pirogen (Departemen Kesehatan, 1995).

Pirogen jauh lebih baik dicegah pembentukannya daripada penghancurannya. Namun, pirogen dapat dihilangkan dengan beberapa cara. Salah satunya adalah dengan adsorbsi pada penyaring asbestos aktif atau pada arang aktif. Kedua metode ini digunakan, khususnya bila diperkirakan bahwa bahan kimia terkontaminasi dengan pirogen. Metode penyaring asbes aktif terdiri dari sediaan larutan yang dilewatkan melalui penyaring asbes kompresi dari serum seitz no 3. Pirogen diabsorbsi pada permukaan dari asbes dan dihilangkan dari larutan.Arang aktif juga dapat menghilangkan pirogen dari larutan dengan absorbsi. Arang aktif atau karbon aktif merupakan bahan kimia yang saat ini banyak digunakan dalam industri yang menggunakan proses absorbsi dan purifikasi. Karbon aktif berdasarkan pada pola strukturnya adalah suatu bahan yang berupa karbon amorf yang sebagian besar terdiri dari karbon bebas serta memiliki permukaan dalam, sehingga memiliki daya serap yang tinggi.Larutan dikocok dengan 0,1 % arang aktif serbuk halus selama 5-10 menit. Arang dibiarkan mengendap dan cairan supernatan didekantasiatau arang dapat dihilangkan dengan penyaringan kertas saring yang keras karena serbuk halus arang sulit dihilangkan dengan kertas saring. Arang yang tergranulasi tidak efektif menghilangkan pirogen. Arang umumnya mempunyai daya adsorbsi yang rendah dan daya adsorbsi itu dapat diperbesar dengan cara mengaktifkan arang menggunakan uap atau bahan kimia. Aktivasi karbon bertujuan untuk memperbesar luas permukaan arang dengan membuka pori-pori yang tertutup tar, hidrokarbon, dan zat-zat organic lainnya, sehingga memperbesar kapasitas adsorbsi.Arang aktif dapat digunakan sebagai adsorben untuk memucatkan minyak, dapat juga menyerap suspensi koloid.Pengaktifan arang dapat dilakukan secara fisika maupun secara kimia. Pengaktifan secara fisika dilakukan dengan cara memanaskan bahan baku pada suhu yang cukup tinggi (600-900C) pada kondisi miskin udara (oksigen), kemudian pada suhu tinggi tersebut dialirkan media pengaktif seperti uap air dan CO2. Sedangkan pengaktifan secara kimia, bahan baku sebelum dipanaskan, dicampur terlebih dahulu dengan bahan kimia tertentu seperti KOH, NaOH, K2CO3 dan lain sebagainya. Biasanya pengaktifan secara kimia tidakmembutuhkan suhu tinggi seperti pengaktifan secara fisika, namun diperlukan tahap pencucian setelah diaktifkan untuk membuang sisa-sisa bahan kimia yang dipakai.Selain dengan karbon aktif, pirogen juga dapat dihilangkan dengan cara destilasi.Hal ini didasarkan pada salah satu sifat pirogen yaitu tidak menguap. Oleh karena itu dengan dilakukan pemanasan sediaan pada suhu tertentu, diharapkan pirogen akan tertinggal didasar labu dan akan terpisah dari sediaan. Sehingga diperoleh sediaan yang bebas pirogen.Wadah sediaan parenteral termasuk tutupnya harus tidak berinteraksi dengan sediaan, baik secara fisik maupun kimia sehingga akan mengubah kekuatan dan efektifitasnya. Bila wadah terbuat dari gelas, maka gelas harus jernih dan tidak berwarna atau berwarna kekuningan untuk memungkinkan pemeriksaan isinya.Jenis gelas yang sesuai dan dipilih tiap sediaan parenteral biasanya dinyatakan dalam masing-masing monograf.Sediaan infus KCl dibuat dalam larutan hipertonis, Hal ini dikarenakan apabila larutan hipotonik mengalami kontak dengan sel maka cairan akan masuk kedalam sel karena perbedaan tekanan larutan. Pada sisi lain membran plasma sel merupakan unit yang tertutup sehingga pemasukan air dalam jumlah yang banyak kedalam sel akan menghasilkan pembengkakan dan selanjutnya dapat menimbulkan rasa sakit. Sebagai tambahan, hal ini sangat mungkin menghasilkan atau menyebabkan terjadinya pemisahan sel (hemolisis) yang menyebabkan kerusakan permanen. Jika larutan hipertonik yang digunakan, cairan akan tertarik dari sel dan sel akan menjadi berkerut atau keriput dan tidak berfungsi secara normal. Ketika menimbulkan rasa nyeri, kerusakannya tidak permanen. Sel akan kembali normal dengan segera setelah larutan hipertonis masuk kedalam cairan tubuh.

DAFTAR PUSTAKABlechova, R., dan D. Pivodova. 2001. Limulus Amoebocyte Lysate (LAL) Test An Alternative Methode for Detection of Bacterial Endotoxins.Acta Vet. Brno. Czesh Republic: Department of Pharmacology and Toxicology, Faculty of Pharmacy. (70) : 291-296.Departemen Kesehatan RI. 1995. Farmakope Indonesia Edisi IV. Jakarta : Departemen Kesehatan RI.Musdalifah, dkk. 2014. Makalah Kelompok Farmasetika Sediaan Steril Pirogen.Makassar : Fakultas Farmasi Universitas Islam Negeri Alauddin Makassar.USP 32 NF 27. 2009. United States Pharmacopeia and The National Formulatory. Rockville (MD): The United States Pharmacopeial Convention.