LAPORAN PRAKTIKUM BIOKIMIADARAHOLEH :

• WIDIYANTI (4301410001)•PRITA SRI SULASTRI (4301410017)•FRANSISCA DITAWATI N.P (4301410034)

JURUSAN KIMIAFAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN

ALAMUNIVERSITAS NEGERI SEMARANG

Memahami komponen utama yang terdapat dalam darah

Terampil membuat plasma darah dan serum darah

Terampil melakukan uji terhadap plasma darah, uji Fe dalam hemoglobin, uji albumin dan globulin dalam serum darah dan uji zat-zat non protein dalam serum darah

TUJUAN

Darah adalah jaringan yang beredar dalam pembuluh darah yang tertutup

Darah tersusun dari 55% bagian cair (plasma darah) dan 45% bagian padat (eritrosit dan leukosit)

Darah pada umumnya bersifat: bersifat agak alkalis dengan pH = 7,36 Bersifat sebagai alat transport oksigen Mengatur adanya reaksi yang konstan Regulasi pada tubuh Pelindung kemungkinan terjadinya infeksi

DASAR TEORI

Komponen darah yang bertugas mengangkut oksigen adalah sebuah pigmen dengan struktur kimia kromoproteida, berkomponen protein globin, dan zat warna hem.

hem adalah derivat protoforfin yang di tengahnya terdapat ion Fe(II) termasuk gugus prostetik.

Hemoglobin adalah zat warna darah tersusun dari gugus prostetik protohem dan protein globin.

Protohem mudah terkoagulasi, untuk mencegahnya di tambah zat anti koagulan seperti oksalat, sulfat, atau EDTA

LANJUTANN. . .

Alat 1. Mikroskop2.Gelas objek3.Pamanas spiritus4.Kaki tiga5.kasa6. Tabung reaksi7.Cawan porselin8.Pengaduk gelas

ALAT DAN BAHAN

Bahan1. darah2.Asam asetat glasial3.NaCl encer (0,9%)4.Zn(OH)2 5%5.Kalsium klorida 20 %6.Asam klorida encer7.Kalium ferosianida8.Kalium rodanida9.Asam nitrat pekat10.Amonium sulfat jenuh11.Amonium sulfat padat12.Gliserol

13.Natrium karbonat padat

14.Asam cuka 2 %15. asam nitrat encer16.Perak nitrat encer17.Cupri sulfat encer18.Barium klorida19.Amonium oksalat

encer 10%20. Indikator klor phenol

merah

Uji Plasma Darah1.Uji Kristal Darah (Teichman)

1. Diletakkan di atas 1. Ditutup dengan gelas penutup gelas objek 2. Dipanaskan sampai mendidih 2. Ditetesi setetes asam asetat 3. Dibiarkan sampai dingin glasial dan NaCl encer

1. Diamati kristal haemin di bawah mikroskop2. Digambar kristal yang diamati

CARA KERJA

DarahDarah di atas gelas objek

Darah di atas gelas objek dingin

2. Uji Fe dalam Hemoglobin

1. Diletakkan dalam cawan porselin 1. Dicampurkan dalam tabung reaksi 2. Dipanaskan hingga terbakar 2. Dituangkan dalam cawan porselin

Dipanaskan hingga abu larut

Ditambah kalium ferosianida Ditambah Kalium rodanida

Tabung 1

HCl encer dan HNO3

Larutan Darah

Cairan

Darah

Tabung 2

Uji Senyawa dalam Serum Darah1.Uji Albumin dan Globulin

i.Uji Albumin

1. Dituangkan ke dalam tabung reaksi Disaring 2. Ditambah amonium sulfat jenuh 3. Dikocok kuat-kuat hingga terbentuk endapan

1. Dimasukkan dalam Dicuci dengan amonium tabung reaksi sulfat setengah jenuh

2. Ditambah aquades dan dikocok

Serum Darah

Serum darah yang ada endapan

EndapanEndapan

ii. Uji Globulin

Dimasukkan ke dalam Ditambah amonium sulfat padat

Tabung reaksi hingga berlebihan

1. Dimasukkan dalam Disaring

2. Ditambah aquades dan dikocok

Filtrat yang diperoleh dalam

uji albuminFiltrat dalam

tabung

Filtrat dalam tabung

Endapan

2.Uji Zat-zat Non Protein

Dimasukkan ke dalam Ditambahkan 10tabung reaksi tetes aquades

Ditambah asam cuka 2% tetes

demi tetes. Hingga Terbentuk

suspensi

Diatur pHnya = 5,4 Disaring

Serum Darah

Serum Darah dalam tabung

Serum Darah dalam tabung

Serum Darah dalam tabung

Filtrat

Ditambah amonium Ditambah perak nitrat 2 tetes gliserol Barium Klorida Oksalat dan asam nitrat natrium karbonat panat encer

cupri sulfat encer

Filtrat

Uji Ion Kalsium

Uji Ion Klorida

Uji Glukosa

Uji Ion Sulfat

Filtrat Filtrat Filtrat Filtrat

No Percobaan Sampel Perlakuan Hasil pengamatn

1 Uji kristal darah Darah + asam cuka glasial,+ Nacl encer, dipanaskan,Didinginkan,Diamati dengan mikroskop

Uji Fe dalam hemoglobin darah Dipanaskan,+HCl, + HNO3 Dipanaskan, Disaring,Filtrat + Kalium ferosianida

Filtrat + KSCN

Filtrat berwarna kuning kecoklatan

Fliltrat berwarna hijau pekat

Filtrat berwarna merah keclokatan

2 Uji Albunin Serum darah +amonium sulfat jenuh,Dikocok dan disaring,Endapan dicuci dengan amonium sulfat jenuh.Endapan + aquades

Terbentuk endapan

Endapan larut

Uji globulin Filtrat yang dihasilkan dari uji albumin

+amonium sulfat padatDikocok dan disaringEndapan + aquades =

Terbentuk endapan putih

Endapan larut dan terbentuk larutan keruh

3 Uji Zat non protein Serum darah + aquades,+ asam cuka

Keruh, terbentuk suspensi

Uji Ion Kalsium Filtrat + ammoium oksalat Terbentuk endapan putih.Larutan keruh.

Uji Ion Klorida Filtrat + perak nitrat encer+ asam nitrat encer

Terbentuk endapan putih.Larutan keruh.

Uji Glukosa filtrat + gliserol, + natrium karbonat, + cupri sulfat Terbentuk endapan merah bata, dan larutan biru

Uji ion sulfat filtrat + barium klorida encer Terbentuk endapan putih.Larutan keruh.

HASIL PERCOBAAN

Uji Plasma Darah1. Uji kristal darah

Dari hasil pengamatan yang dilakukan di bawah mikroskop didapatkan kristal yang agak memanjang seperti jarum-jarum kecil.Reaksi yang terjadi :Hb + HCl → globin + ferohemeFeroheme+½O2+2HCl→ 2 feriheme klorida(haemin)Hb + alkali (basa) → globin + ferohemeFeroheme + ½O2 +2HCl → 2feriheme hidroksida(alkali hematin)

PEMBAHASAN

2. Uji Fe dalam Hemoglobin Hem adalah suatu kandungan yang terdapat di dalam hemoglobin

dan merupakan derivat dari protein yang mengandung besi.Besi yang terkandung dalam Hb adalah dalam bentuk Fe(II)

Dalam percobaan ini, sampel darah dipanaskan hingga terbakar semua, dengan tujuan untuk mengoksidasi Fe(II) menjadi Fe(III)Fe2+ → Fe3+ + e

Penambahan aquaregia (HCl dan HNO3) berfungsi untuk mengikat Fe dalam reaksiFe3+ + 3Cl- → FeCl3

Filtrat ditambah larutan K4[Fe(CN)4] menghasilkan larutan berwarna hijau Fe3+ + K4[Fe(CN)4] → FeK[Fe(CN)6] + 3K+

Filtrat ditambah larutan KSCN menghasilkan larutan berwarna merah kecoklatanFe3+ + 3KSCN → Fe(SCN)3 + 3K+

Uji senyawa dalam serum darahDalam uji albumin dan globulin menggunakan teknik salting out dengan teknik utama yaitu pengendapan.

1. Uji albuminDari hasil pengamatan didapatkan bahwa

endapan larut dalam aquades. Hal ini menunjukkan uji albumin dalam serum darah positif (+)

2. Uji globulinDari hasil pengamatan didapatkan bahwa

endapan larut dalam aquades dan terbentuk larutan keruh. Hal ini menunjukkan uji globulin dalam serum darah positif (+)

3. Uji zat-zat non proteina. Uji ion kalsium

Dari hasi pengamatan, filtrat ditambahkan larutan (NH4)2C2O4 didapatkan endapan putih CaC2O4 dengan larutan keruh. Hal ini menunjukkan uji adanya ion kalsium dalam darah hasilnya positif (+)Reaksi yang terjadi:Ca2+ + (NH4)2C2O4 → CaC2O4 + 2NH+

b. Uji ion kloridaDari hasi pengamatan, filtrat yang

ditambah larutan AgNO3 encer dan HNO3 didapatkan endapan putih AgCl dengan larutan keruh. Hal ini menunjukkan uji adanya ion klorida dalam darah hasilnya positif (+)Reaksi yang terjadi:Cl- + AgNO3 → AgCl + NO3

-

c. Uji glukosaDari hasi pengamatan, filtrat yang

ditambah larutan gliserol, natrium karbonat padat, dan larutan cupri sulfat menghasilkan endapan merah bata Cu2O. Hal ini menunjukkan uji adanya glukosa dalam darah hasilnya positif (+)Reaksi yang terjadi:

o +2Cu2+ + 4OH- → + Cu2O + 2H2O

d. Uji ion sulfatDari hasi pengamatan, filtrat yang

ditambah larutan BaCl2 didapatkan endapan putih BaSO4 dengan larutan keruh. Hal ini menunjukkan uji adanya ion sulfat dalam darah hasilnya positif (+)Reaksi yang terjadi: SO4

2- + BaCl2 → BaSO4 + 2Cl-

a. Uji Fe dalam hemoglobin memberi hasil positif.b. Kristal darah berbentuk seperti jarum-jarum kecil yang

memanjangc. Serum darah mengandung protein yaitu albumin dan

globulin.d. Albumin larut dalam air.e. Globulin tidak larut dalam air.f. Uji adanya ion kalsium memberi hasil positif, dengan

terbentuknya endapan putih kalsium oksalat.g. Uji adanya ion klorida memberi hasil positif, dengan

terbentuknya endapan putih perak klorida.h. Uji adanya glikosa memberi hasil positif, dengan

terbentuknya endapan merah bata i. Uji adanya ion sulfat memberi hasil positif, dengan

terbentuknya endapan putih barium sulfat

KESIMPULAN

a. Berhati-hati dalam menggunakan alat dan bahan laboratorium

b. Dalam melaksanakan praktikum, setiap kelompok harus dapat bekerjasama dengan baik, serta dapat membagi tugas

c. Teliti dalam mengamati perubahan warna yang terjadi

SARAN

Sawaldi dan Titik Agus. 2008. Buku Ajar Biologi. Solo: CV Sindhunata

Tim Dosen Biokimia. 2012. Petunjuk Praktikum Biokimia. Semarang: Laboratorium Kimia Bioorganik Kimia FMIPA UNNES

DAFTAR PUSTAKA

TERIMA KASIH