Laporan Kjt Fz

7/29/2019 Laporan Kjt Fz

1/21

BAB I

PENDAHULUAN

1.1 Latar Belakang

Tanaman memiliki daya regenerasi yang kuat, hal ini telah lama di sadari

dan ini merupakan titik tolak berkembangnya industri kultur jaringan tanaman.

Beberapa peneliti mengembangkan hasil peneliti sebelumnya bahwa sel/jaringan

dapat di tanam secara terpisah dalam media/kultur tertentu. Usaha pengembangan

tanaman dengan metoda kultur jaringan tanaman merupakan usaha pebanyakan

varietas tanaman/spesies tanaman secara vegetatif. Spesies tanaman yang sering

dikembangkan adalah tanaman hias,bunga,tanaman pertanian seperti sayur-

sayuran,buah-buahan. Selain untuk perbanyakan varietas tanaman, saat ini kultur

jaringan diarahkan untuk beberapa tujuan, antara lain untuk memproduksi

metabolit sekunder.

Perbanyakan tanaman secara vegetatif merupakan alternatif untuk

mendapatkan tanaman baru yang mempunyai sifat sama dengan tanaman

induknya dalam jumlah yang besar. Perbanyakan secara vegetatif dengan sifat

konvensional umumnya masih memerlukan waktu yang cukup lama. Oleh karena

itu, saat ini di beberapa Negara maju telah banyak dikembangkan suatu sistem

perbanyakan tanaman secara vegetatif yang lebih cepat dengan hasil yang lebih

banyak lagi, yakni dengan sistem kultur jaringan atau budidaya jaringan.

Pada awalnya mahkota dewa dipandang sebagai tumbuhan yang sangat

menarik, karena memiliki buah berwarna merah marun. Penampilan mahkota

dewa yang sangat menarik ini, kemudian menyebabkan banyak orang

memeliharanya sebagai tanaman hias, terutama apabila buahnya sudah mulai tua.

Buah tua tumbuhan ini sesungguhnya dapat dimakan, meskipun harus

diperhatikan bahwa bijinya mengandung racun. Selain itu pembudidayaannya

tidak terlalu sulit, karena dapat diperbanyak dengan cara mencangkok (vegetatif)

maupun menggunakan biji (generatif).


2/21

Belakangan ini muncul beberapa penyakit baru yang semakin mengancam

kehidupan manusia. Banyak peneliti yang terus mencari sumber-sumber bahan

baku obat dari alam tumbuhan Indonesia yang sangat kaya akan sumberdaya

plasma nutfah. Beberapa diantaranya menjadi sangat populer dikalangan

masyarakat, karena dianggap dapat menyembuhkan berbagai macam penyakit dan

sudah diperdagangkan dalam bentuk kemasan. Salah satu diantaranya berasal dari

tumbuhan mahkota dewa (Phaleria macrocarpa [Scheff.] Boerl.) suku

Thymelaceae, yaitu sejenis tumbuhan perdu yang tumbuh dari dataran

rendah hingga ketinggian 1200 meter di atas permukaan laut. Salah satu jenis

penyakityang dapat di obati dengan Mahkota Dewa ini adalah penyakit kanker.

Pengobatan terhadap kanker dapat dilakukan melalui operasi, radiasi atau dengan

memberikan kemoterapi. Penggunaan antikanker yang ideal adalah antikanker

yang memliliki toksisitas selektif artinya menghancurkan sel kanker tanpa

merusak sel jaringan normal. Antikanker yang ada sekarang pada umumnya

menekan pertumbuhan atau proliferasi sel dan menimbulkan toksisitas karena

menghambat pembelahan sel normal yang proliferasinya cepat antara lain sumsum

tulang, mukosa saluran cerna, folikel rambut dan jaringan limfosit.

Saat ini, kultur jaringan telah berkembang menjadi suatu teknologi

bioteknologi yang bermanfaat untuk memproduksi bibit-bibit unggul, pemuliaan

tanaman, pelestarian plasma nutfah, dan kreasi varietas baru untuk perbaikan

kualitas tanaman. Perbanyakan tanaman dengan system kultur

jaringan dilaksanakan di suatu laboratorium yang aseptis dengan peralatan seperti

pada laboratorium mikrobiologi. Oleh karena manfaat dari kultur jaringan

tersebut, maka diperlukan praktikum penanaman biji mahkota dewa dengan kultur

jarimgan agar pengembangan tanaman-tanaman obat untuk kesehatan dapat lebih

meningkat dan menghasilkan lebih banyak.


3/21

1.2. Tujuan Praktikum

Adapun tujuan dari praktikum ini adalah agar mahasiswa mampu

mempraktekkan proses penanaman eksplan untuk kultur kalus dan dapat

menganilisa respon pertumbuhan yang terjadi.

1.3 Manfaat Praktikum

Adapun manfaat dari percobaan ini adalah agar dapat menambah

pengetahuan dalam mengembangkan tanaman melalui proses kultur jaringan dan

dapat mengembangkan tanaman yang berkualitas baik khususnya yang

bermanfaat dalam bidang kesehatan.


4/21

BAB II

TINJAUAN PUSTAKA

2.1 Definisi Kultur Jaringan

Perbanyakan tanaman secara vegetatif merupakan alternatif untuk

mendapatkan tanaman baru yang mempunyai sifat sama dengan tanaman

induknya dalam jumlah yang besar. Perbanyakan secara vegetatif dengan sifat

konvensional umumnya masih memerlukan waktu yang cukup lama. Oleh karena

itu, saat ini di beberapa Negara maju telah banyak dikembangkan suatu system

perbanyakan tanaman secara vegetatif yang lebih cepat dengan hasil yang lebih

banyak lagi, yakni dengan system kultur jaringan atau budidaya jaringan

(Gotama,dkk.,1999).

Kultur jaringan tanaman adalah teknik perbanyakan tanaman secara

bioteknologi. Perbanyakan bibit secara kultur jaringan menggunakan bahan

vegetatif atau organ tanaman lalu di biakkan secara in vitro, dan menghasilkan

bibit-bibit tanaman dalam jumlah banyak pada waktu singkat, serta sifat dan

kualitas sama dengan induknya (Gunawan,1988).

Kultur jaringan dalam bahasa asing disebut sebagai tissue culture, weefsel

cultuus, atau gewebe kultur. Kultur adalah budidaya dan jaringan adalah

sekelompok sel yang mempunyai bentuk dan fungsi yang sama. Maka, kultur

jaringan berarti membudidayakan suatu jaringan tanaman menjadi tanaman kecil

yang mempunyai sifat seperti induknya (George dan Sherrington,1984).

Kultur jaringan akan lebih besar persentase keberhasilannya bila

menggunakan jaringan meristem. Jaringan meristem adalah jaringan muda, yaitu

jaringan yang terdiri dari sel-sel yang selalu membelah, dindingnya tipis, belum

mempunyai penebalan dari zat pectin, plasmanya penuh, dan vakuolanya kecil-

kecil. Kebanyakan orang menggunakan jaringan ini untuk tissue culture. Sebab,

jaringan meristem keadaannya selalu membelah, sehingga diperkirakan

mempunyai zat hormone yang mengatur pembelahan (Daisy dan Ari,1994).


5/21

Usaha pengembangan tanaman dengaan kultur jaringan merupakan usaha

perbanyak vegetatif tanaman yang dapat dikatakan masih baru. Namun saat ini

sudah banyak sekali penemuan-penemuan tentang ilmu pengetahuan kultur

jaringan dalam bidang pertanian, biologi, farmasi, kedokteran, dan sebagainya. Di

bidang farmasi, teknik kulttur jaringan sangat menguntungkan karena dapat

menghasilkan senyawa metabolit sekunder untuk keperluan obat-obatan dalam

jumlah yang besar dan dalam waktu yang singkat. Untuk mengetahui keuntungan

pelaksannan kultur jaringan lebih lanjut, maka perlu dikemukakan perbedaan

perbanyak secara vegetatif dan generatif (Mariska dan Purmaningsih,2001).

Perbanyakan tanaman dapat digolongkan menjadi dua, yaitu perbanyakan

tanaman secara generatif dan perbanyakan tanaman secara vegetatif. Perbanyakan

tanaman secara generatif adalah dengan menanam biji, sedangkan perbanyakan

tanaman secara vegetatif adalah dapat dilakukan dengan cara setek, okulasi,

cangkok, penyambungan, dan yang paling mutakhir adalah kultur jaringan.

Metode perbanyakan dengan cara ini dapat menghasilkan tanaman baru dalam

jumlah banyak, dalam waktu yang relatif singkat (Rahardja,1995).

Pengembangan tanaman dalam jumlah besar berarti pula memperbanyak

tanaman secara besar-besaran untuk menghasilkan klon. Klon adalah sekumpulan

tanaman atau individu atau jaringan yang mempunyai sifat keturunan atau sifat

genetic yang sama . Bila tanaman-tanaman yang dihasilkan berasal dari

pengembangan suatu jaringan meristem maka disebut mericlone. Sifat-sifat dari

meriklone ini sama persis dengan tanaman induknya (Gotama,dkk., 1999).

2.2 Manfaat Kultur Jaringan

Kegunaan utama dari kultur jaringan adalah untuk mendapatkan tanaman

baru dalam jumlah banyak dan dalam waktu yang relative singkat, yang

mempunyai sifat fisiologi dan morfologi sama persis dengan tanaman induk. Dari

teknik kultur jaringan ini diharapkan pula memperoleh tanaman baru yang bersifat

lebih unggul (Gunawan,1988).


6/21

Kultur jaringan telah dikenal banyak orang sebagai usaha mendapatkan

varietas baru yang unggul, dari suatu jenis tanaman dalam waktu yang relatif lebih

singkat daripada dengan cara pemuliaan tanaman yang harus dilakukan

penanaman secara berulang-ulang sampai beberapa generasi. Untuk mendapatkan

varietas baru melalui kultur jaringan, dapat dilakukan dengan cara isolasi

protoplas dari dua macam varietas yang difusikan (Rahardja,1995).

Kultur jaringan mempunyai manfaat yang besar dibidang farmasi, karena

dari usaha ini dapat menghasilkan metabolit sekunder untuk upaya pembuatan

obat-obatan, yaitu dengan memisahkan unsure-unsur yang terdapat didalam kalus

maupun protokormus. Kultur jaringan juga memberikan manfaat dibidang

fisiologi tanaman. Pada tanaman anggrek, misalnya telah berhasil diketahui bahwa

jika ujung akarnya diiris melintang akan memperlihatkan warna tertentu. Warna

ini yang nantinya akan sama dengan warna bunganya. Hal ini sangat jelas

bermanfaat di dunia perdagangan tanaman hias, sebab walaupun tanaman nya

belum berbung, orang sudah dapat mengetahui warna bunga yang akan muncul

(Mariska,dkk.,1992).

Teknik kultur jaringan sampai saat ini memang belum biasa dilaksanakan

oleh para petani, baru beberapa kalangan pengusaha swasta saja yang sudah

mencoba melaksanakannya, karena pelaksanaan teknik kultur jaringan ini

memang memerlukan keterampilan khusus dan harus dilatarbelakangi dengan

ilmu pengetahuan dasar tentang fisiologi tumbuhan, anatomi tumbuhan, biologi,

kimia, dan pertanian. Dengan demikian akan sangat sulit untuk diterima oleh

kalangan petani biasa. Namun, lepas dari semua kendala tersebut, kita harus

mengetahui bahwa teknik kultur jaringan sangat bermanfaat bagi ilmu

pengetahuan terutama untuk pengembangan bioteknologi (Sriyanti,dkk.,2002).

2.3 Kultur Kalus

2.3.1 Pengertian Kultur Kalus

Kultur kalus merupakan pemeliharaan kecil tanaman dalam

lingkungan buatanyang steril dan kondisi yang terkontrol (Pauls, 1995). Kalus


7/21

adalah jaringan yang berpoliferasi secara terus menerus dan tidak terorganisasi

sehingga memberikan penampilan sebagai massa sel yang bentuknya tidak teratur.

Berpoliferasi jaringan ini dapat dilakukan secara melakukan sub kultur sepotong

kecil jaringan kalus pada medium yang segar dan interval waktu yang teratur

(George dan sheriagton, 1984). Kalus diinduksi dengan melukai tanaman.

Menurut George dan sheriagton, pelukaan atau pemotongan tanaman dapat

merangsang pembelahan sel yang berperan dalam inisiasi pembentukan kalus

kultur ini merupakan materi penting dalam kultur suspensi sel tanaman (Allan,

1996).

Kemampuan bagian tanamn untuk membentuk kalus tergantung pada

(Zulkarnain. 2009) :

a. Umur fisiologi bahan tanm waktu diisolasi, untuk pengambilan bahan

tanam dari umur fisiologi juvenil lebih baik dibanding umur fisiologi yang

mendekati mature.

b. Musim pada waktu bahan tanam diisolasi

c. Bagian tanaman yang digunakan sebagi eksplan

d. Jenis tanaman

e. Faktor Luar

Ada beberapa tujuan yang bisa dicapai dengan menguasai kultur kalus

misalnya (Zulkarnain. 2009) :

a. Dapat menjamin kesinambungan kerja kultur

b. Dapat menjadi sarana bank plasma nutfah yang efisien.

2.3.2. Pengaruh Pemberian ZPT Terhadap kultur Kalus

Zat pengatur tumbuhan auksin yang sering digunakan dalam media kultur

adalah asam 2,4-D diklonofenoksiasetat (2,4-D). Zat pengatur tumbuh ini bersifat


8/21

stabil karena tidak mudah mengalami kerusakan oleh cahaya maupun pemanasan

pada pada waktu sterilisasi. Penambahan 2,4-D dalam media akan merangsang

pembelahan dan pembesaran sel pada eksplan sehingga dapat memacu

pembentukan dan pertumbuhan kalus dan meningkatkan senyawa kimia alami

flavoid (Hendaryono dan Wijayani, 1994).

2.4 Kultur Mahkota Dewa

Mahkota dewa merupakan tumbuhan berbentuk pohon, berumur panjang

(perenial), tinggi 1 - 2,5 m. Akar tunggang. Batang berkayu, silindris, tegak,

warna cokelat, permukaan kasar, percabangan simpodial, arah cabang miring ke

atas. Daun tunggal, bertangkai pendek, tersusun berhadapan (folia oposita),

warna hijau tua, bentuk jorong hingga lanset, panjang 7 - 10 cm, lebar 2 - 2,5 cm,

helaian daun tipis, ujung dan pangkal runcing, tepi rata, pertulangan menyirip

(pinnate), permukaan licin, tidak pernah meluruh Bunga tunggal, muncul di

sepanjang batang dan ketiak daun, bertangkai pendek, mahkota berbentuk tabung

(tubulosus) - berwarna putih Buah bulat, panjang 3 - 5 cm, buah muda berwarna

hijau - setelah tua menjadi merah, bentuk dengan biji bulat, keras - berwarna

cokelat, daging buah berwarna putih - berserat dan berair perbanyakan generatif

(biji). Adapun klasifikasi dari mahkota dewa adalah (Tjitrosoepomo, 1993).

Kingdom: Plantae (Tumbuhan)

Subkingdom : Tracheobionta (Tumbuhan berpembuluh)

Super Divisi : Spermatophyta (Menghasilkan biji)

Divisi : Magnoliophyta (Tumbuhan berbunga)

Kelas : Magnoliopsida (berkeping dua / dikotil)

Sub Kelas : Rosidae

Ordo : Myrtales

Famili : Thymelaeaceae

Genus : Phaleria

Spesies :Phaleria macrocarpa (Scheff) Boerl.
http://www.plantamor.com/index.php?plantsearch=Thymelaeaceaehttp://www.plantamor.com/index.php?plantsearch=Phaleriahttp://www.plantamor.com/index.php?plantsearch=Thymelaeaceaehttp://www.plantamor.com/index.php?plantsearch=Phaleria


9/21

Metoda kultur jaringan ini apabila digunakan dapat menhasilkan

keuntungan diantaranya dapat menghasilkan suatu metabolit sekunder yang

berguna untuk pengobatan dan menjaga kesehatan dalam jumlah besar, serta

tumbuh di dalam waktu yang cepat pada lahan yang terbatas. Awalnya, mahkota

dewa (Phaleria macrocarpa) di budidayakan sebagai tanaman hias dan digunakan

untuk tanaman peneduh, tetapi saat ini tanaman mahkota dewa berguna untuk

salah satu tanaman obat tradisional yang dikenal merupakan obat asli indonesia

(Rahardja,1995).

Sampai saat ini telah banyak penyakit yang berhasil disembuhkan

tergantung pada bagian tanaman yang digunakan biasanya memberikan efek yang

berbeda terhadap jenis penyakit yang dapat di obati/disembuhkan. Bagian yang

digunakan atau yang paling sering digunakan adalah daunnya, daunnya biasa di

gunakan dengan cara merebusnya. Penyakit yang dapat di obati yaitu disentri,

alergi dan tumor. Kulit dan daging buah juga digunakan untuk pengobatan

flu,rematik dan kanker rahim. Beberapa keunggulan dari mahkota dewa ini

menjadikannya salah satu tanaman obat yang mendapatkan perhatian cukup besaruntuk terus di kembangkan (Lisdawati,2002).

Beberapa keunggulan yang dimiliki oleh mahkota dewa menyebabkan

mahkota dewa mendapatkan perhatian yang besar dari beberapa negara. Saat ini

mahkota dewa sedang diteliti dan dikembangkan secara serius sebagai obat untuk

penyembuhan beberapa penyakit. Negara yang sedang mengembangkan penelitian

ini antara lain Belanda,Taiwan,Singapura dan Malaysia (Perry,1980).

Tumbuhan ini akan mengeluarkan bunga dan diikuti dengan munculnya

buah setelah 9 12 bulan kemudian. Buahnya berwarna hijau saat muda dan

menjadi merah marun setelah berumur 2 bulan. Buahnya berbentuk bulat dengan

ukuran bervariasi mulai dari sebesar bola pingpong sampai sebesar buah apel,

dengan ketebalan kulit antara 0,1 0,5 mm. Buah mahkota dewa ini biasanya

digunakan untuk mengobati berbagai penyakit dari mulai flu, rematik, paru-paru,

sirosis hati sampai kanker (Hartwel,1987).


10/21

Di dalam kulit buah mahkota dewa terkandung senyawa alkaloid, saponin,

dan flavonoid. Batang mahkota dewa yang bergetah dapat digunakan untuk

mengobati penyakit kanker tulang, bahkan bijinya yang dianggap sangat beracun,

masih digunakan sebagai obat luar untuk mengobati penyakit kulit. Mungkin

hanya akar dan bunganya saja yang jarang dipergunakan sebagai obat. Selain itu

mahkota dewa dapat tumbuh hingga puluhan tahun dengan tinggi mencapai 5

meter dan masa produktifnya berkisar antara 10 sampai 20 tahun. Selain itu

didalam buah mahkota dewa memiliki efek sebagai anti oksidan (Lisdawati,

2002).

BAB III

METODOLOGI


11/21

3.1 Waktu dan Tempat Praktikum

Praktikum Penanaman Eksplan biji mahkota dewa ini dilakukan di

Laboratorium Kultur Jaringan Tumbuhan, Universitas Tanjungpura, pada

hari jumat, 30 November 2012 pukul 16.00 21.30 WIB.

3.2 Alat dan Bahan

Adapun alat-alat yang digunakan dalam Penanaman Eksplan biji mahkota

dewa adalah gelas piala, gelas ukur, mata pisau scalpel, pinset dan pisau scalpel.

Bahan-bahan yang digunakan dalam praktikum ini adalah akuades

steril,bayclin, eksplan berupa biji mahkota dewa dan tween.

3.3 Prosedur Kerja

3.3.1 Sterlisasi Eksplan

Eksplan dicuci dengan sunlight sebanyak 2 tetes untuk menghilangkan

kotoran yang melekat selama 15 menit. Kemudian, dibilas dengan air mengalir

selama 30 menit. Selanjutnya dilakukan proses sterlisasi didalam Laminar AirFlow Cabinet. Ekspan dimasukkan kedalam larutan bayclin yang telah ditambah

tween 20, yang konsentrasi bayclin masing-masing 10% dan 15 %, didalam

konsentrasi 10% eksplan direndam selama 10 menit dan 15% selama 5 menit.

Selanjutnya, ekspan dibilas dengan akuades steril 3x masing-masing 3 menit.

3.2.2 Penanaman Eksplan

Eksplan yang telah disterilkan, diletakkan diatas cawan petri yang sudah

ada diberi kertas saring diatasnya. Kemudian, eksplan biji dipotong menjadi 2

bagian. Selanjutnya eksplan biji ditanam pada medium, ditutup rapat dengan

alumunium foil.

3.2.3 Pemeliharaan Kultur dan Pengaamatan


12/21

Kultur diletakkan diatas rak pada ruang kultur dengan suhu ruang 25-28c.

Dilakukan pencahayaan secara terus-menerus. Kemudian kultur tadi diamati

selama 2 minggu, diamati dan dicatat respon yang terjadi pada eksplan.

BAB IV


13/21

HASIL DAN PEMBAHASAN

4.1 Hasil Pengamatan

4.1.1 Sterilisasi Eksplan

No Perlakuan Pengamatan

1. Eksplan dicuci dengan sunlight

sebanyak 2 tetes untuk

menghilangkan kotoran yang

melekat selama 15 menit.

Eksplan : biji mahkota dewa

Eksplan bersih

2. dibilas dengan air mengalir

selama 30 menit

Eksplan bersih

3. dilakukan proses sterlisasi

didalam Laminar Air Flow

Cabinet

-

4. Ekspan dimasukkan kedalam

larutan bayclin yang telah

ditambah tween 20, yang

konsentrasi bayclin masing-

masing 10% dan 15 %, didalam

konsentrasi 10% eksplan

direndam selama 10 menit dan

15% selama 5 menit.

Eksplan menjadi lebih bersih tanpa

ada sisa sunlight

5. Ekspan dibilas dengan akuades

steril 3x masing-masing 3 menit

Eksplan menjadi lebih bersih tanpa

ada sisa bayclin

4.1.2 Penanaman Eksplan

No Perlakuan Pengamatan

1. Eksplan yang telah disterilkan, -


14/21

diletakkan diatas cawan petri yang

sudah ada diberi kertas saring

diatasnya

2. Eksplan biji dipotong menjadi 2

bagian

Dipotong pada bagian tengah biji

3. Eksplan biji ditanam pada medium,

ditutup rapat dengan alumunium foil.

Bagian yang terbelah pada biji

kontak langsung dengan media

4.1.3 Pemeliharaan Kultur dan Pengaamatan

Konsentrasi

NAA,BAP

Botol

Hari ke-

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14

0,0

1 X X X X X X X X

2 X X X X X X X X

3 X X X X X X X X X X X X X X

0,10-6

1 X X X X X X X X X X X X

2 * *


0,10-7


2 * * * * * *


10-6,0

1 X X X X X X X

2


10-6,10-6

1




15/21

10-6,10-7

1

2 X


10-7,0

1

2 X

3 X X X X X X X X X

10-7,10-6

1 * *

2

* X


10-7,10-7

1 X X X X X X X

2 *


Keterangan :

X : Terkontaminasi

: Belum tumbuh/berkecambah

: Berkecambah

* : Bertunas

4.2 Pembahasan

Percobaan ini dibahas mengenai kultur kalus. Dalam pembuatan kultur

kalus ini, dilakukan tahapan seperti sterilisasi eksplan, penanaman eksplan dan

pemeliharaan serta pengamatan kalus. Eskplan yang digunkana pada percobaan


16/21

ini adalah bji mahkota dewa. Biji mahkota dewa dapat berkhasiat sebagai anti

oksidan,anti kanker, flu dan rematik.

Pada tahap sterlisasi eksplan, sterilisasi ini dilakukan dengan tujuan untuk

mengilangkan adanya kontaminasi baik mikroba maupun jamur pada eksplan

sehingga pada saat pertumbuhannya, eskplan akan tumbuh dengan baik. Langkah-

langkah yang dilakukan antara lain eksplan dicuci dengan sunlight sebanyak 2

tetes untuk menghilangkan kotoran yang melekat selama 15 menit, pencucian

dengan sunlight ini dilakukan tidak dalam waktu yang lama, hal ini dikarenakan

menjaga agar hanya kotoran dari eksplan yang hilang tanpa adanya zat

pertumbuhan yang hilang pada eksplan. Kemudian, dibilas dengan air mengalir

selama 30 menit, tujuan dibilas lagi dengan air mengalir adalah untuk

menghilangkan sisa sunlight yang ada pada eksplan. Selanjutnya dilakukan proses

sterlisasi didalam Laminar Air Flow Cabinet, dilakukan dalam LAFC dikarenakan

laminar ini mengandung pergerakan udara yang steril, sehingga memungkinkan

bekerja melakukan proses penanaman selanjutnya dalam kondisi yang steril.

Kemudian, ekspan dimasukkan kedalam larutan bayclin yang telah ditambahtween 20, yang konsentrasi bayclin masing-masing 10% dan 15 %, didalam

konsentrasi 10% eksplan direndam selama 10 menit dan 15% selama 5 menit.

Bayclin mengandung adanya chlorine, sehingga dapat menghindari terjadinya

kontaminasi pada eksplan, penambahan tween 20 digunakan untuk meningkatkan

kerja dari bayclin sehingga eksplan akan lebih bersih tanpa adanya kontaminasi

dan tanpa ada sia sunlight yang tersisa. Selanjutnya, ekspan dibilas dengan

akuades steril 3x masing-masing 3 menit, pembilasan dengan akuadest steril ini

bertujuan untuk membersihkan eksplan. Hasil dari proses sterilisasi ini adalah

eksplan biji mahkota dewa tampak lebih putih dan bersih.

Selanjutnya pada proses penanaman eksplan. Langkah-langkah yang

dilakukan adalah eksplan yang telah disterilkan, diletakkan diatas cawan petri

yang sudah ada diberi kertas saring diatasnya, tujuan diletakkanya eksplan diatas

cawan petri yang diberi kertas saring adalah agar mempermudah eksplan biji

untuk dipotong. Kemudian, eksplan biji dipotong menjadi 2 bagian, pemotongan


17/21

ini dilakukan pada bagian tengah biji dimana pada bagian ini terdapat kandungan

lembaga yang dapat mempermudah tumbuh dan berkembanganya eksplan biji ini.

Selanjutnya eksplan biji ditanam pada medium, ditutup rapat dengan alumunium

foil, posisi yang digunakan untuk penanaman eksplan kedalam media adalah

posisi dimana bagian dalam biji kontak langsung dengan media, hal ini

dikarenakan kandungan zat tumbuh pada biji terletak pada bagian dalamnya

sehingga dengan adanya media yang mengandung banyak nutrisi sehinggan

eksplan biji akan tumbuh dengan baik. Hasil yand didapat yaitu eksplan biji

ditanam pada 24 botol kultur, dengan masing-masing botol berisi 1 eksplan biji

yang telah dipotong menjadi dua kecuali satu botol yang hanya mengandung 1

potong eksplan biji, dikarenakan kurangnya eksplan biji yang disiapkan.

Pada proses pemeliharaan kultur dan pengaamatan. Langkah-langkah yang

dilakukan adalah kultur diletakkan diatas rak pada ruang kultur dengan suhu

ruang 25-28c., digunakan suhu tersebut dikarenakan suhu tersebut adalah suhu

efektif untuk eksplan dapat tumbuh. Kemudian, dilakukan pencahayaan secara

terus-menerus. Kemudian kultur tadi diamati selama 2 minggu, diamati dan

dicatat respon yang terjadi pada eksplan. Hasil yang didapat pada percobaan ini

adalah dari 24 botol eksplan yang ditanam yang tersisa hingga hari ke-14 hanya 8

botol eksplan. Pada 16 botol yang terkontaminasi itu disebabkan karena adanya

berbagai mikrooganisme seperti jamur, bakteri, serangga atau virus. Organisme

organisme tersebut secara universal terdapat pada jaringan tanaman. Banyak yang

bersifat non-patogenik, artinya mereka tidak menyebabkan bahaya bagi tanaman

inang pada kondisi normal. Kondisi kering dan adanya organisme competitor

menyebabkan mereka dalam kondisi terkontrol. Tapi, kondisi in vitro yang

disukai eksplan, yaitu mengandung sukrosa dan hara dalam konsentrasi tinggi,

kelembaban tinggi dan suhu yang hangat, juga disukai mikroorganisme yang

seringkali tumbuh dan berkembang sangat cepat, mengalahkan eksplan. Meskipun

usaha sterilisasi untuk menciptakan lingkungan yang aseptic sudah sering

dilakukan, namun kontaminasi masih sering terjadi. Kontaminasi yang terjadi

diperkirakan disebabkan oleh mikrobia golongan protista. Yaitu Kapang lendir

seluler genus Dictyostelium. Hal ini ditentukan berdasarkan morfologi koloni


18/21

yaitu adanya plasmodium yang tersebar di seluruh permukaan medium kultur

yang terkontaminasi. Plasmodium ini lama kelamaan membentuk agregrat berupa

benang miselium yang sangat halus dan menjadi pusat koloni. Selain itu

dikarenakan adanya beberapa faktor yang akan mempengaruhi pertumbuhan

kalus, seperti musim pada saat pengambilan bahan tanam untuk diisolasi yang

dimana pada percobaan ini dilakukan pada musim hujan, bagian tanaman yang

dilakukan adalah biji, sehingga terkadang ada biji yang sudah busuk , umur atau

fisiologi pada tanaman yang digunakan, umur tanaman yang digunakan

kebanyakan yang sudah masak, tetapi juga ada yang masih muda. Pada 8 botol

yang tersisa, diantaranya sudah ada yang berkecambah dan ada yang sudah

berkecambah maupun bertunas, hal ini menunjukka bahwa biji mahkota dewa

dapat ditumbuhkan melalui kultur jaringan.

BAB V

PENUTUP

5.1 Kesimpulan

a. Proses penanaman eksplan yang dilakukan adalag dengan menggunakan

eksplan biji ahkota dewa yang ditumbuhkan secra in vitro didalam media

MS yang diberikan kedalamnya larutan stok hara serta ZPT (NAA,BAP)

dengan variasi konsentrasi

b. Respon pertumbuhan yang didapat yaitu selama pengamatan 14 hari,

terdapat 8 boltor kultur yang menunjukkan pertumbuhan eksplan, dimana

eksplan sudah ada yang berkecambah dan ada yang berkecambah serta


19/21

bertunas. Namun terdapat 16 botol yang tidak mengalami pertumbuhan

akibat adanya kontaminasi.

5.2 Saran

a. Pemilihan biji dilakukan dengan sebaik-baiknya, dipilih bji yang ridak

mendekati mature

b. Sebaiknya musim pada saat pengambilan bahan tanaman diisolasi

diperhatikan, karena pada saat musim hujan akan cenderung terjadinya

kontaminasi

DAFTAR PUSTAKA

Allan. 1995.kultur kalus dan kultur suspensi sel. Konisius. Yokyakarta.

Daisy, S.H. dan Ari Wijayani, 1994. Teknik Kultur Jaringan. Kanisius,

Yogyakarta.

George dan Sherington. 1984. Kultur Kalus. Penebon swadaya. Jakarta.

George, E.F. and Sherrington. 1984.Plant propagation by tissue culture. Eastern

Press, Reading Berks. 709 p.

Gunawan, L.W. 1988. TeknikKultur Jaringan. Laboratorium Kultur Jaringan,

PAU Bioteknologi, IPB.Bogor.

Gotama, I. B. I., Sugiarto, S., Nurhadi, M., Widiyastuti, Y. Wahyono, S. dan

Prapti, I. J. 1999. Inventaris Tanaman Obat Indonesia. Jilid V.


20/21

Departemen Kes. Badan Penelitian dan Pengembangan Kesehatan, 147-

148. Jakarta.

Hartwel, J.L. 1987. Plants used Against Cancer. Quarterman Publications, Inc.,

Lawrence, Massachusetts.

Hendaryono, D.P dan A. Wijayani. 1994. Teknik Kultur Jaringan. Yogyakarta:

Kanisius.

Lisdawati. 2002. Buah Mahkota Dewa, Toksisitas, Efek antiokasidan bedsarkan

uji penapisan Farmakologi. Universitas Gajah Mada. Nootter, K. , Burger,

H, Schenk, P and Stoter G. 1999. Moleculer mechanisms of drug

resistence and sensitivity, in Oncological Research at the Erasmus

University Rotterdam- University Hospital Rotterdam.

Mariska, I., Hobir, dan D. Sukmadjaja. 1992. Usaha pengadaan bahan tanaman

melalui bioteknologi kultur jaringan. Prosiding Temu Usaha

Pengembangan Hasil Penelitian Tanaman Rempah dan Obat.

Puslitbangtri dan Pusat Pengkajian dan Pengembangan Agribisnis. Jakarta.

Mariska, I. dan R. Purnamaningsih. 2001.Perbanyakan vegetative tanaman

tahunan melalui kultur in vitro. Jurnal Litbang Pertanian 20(1):1-7.

Perry, L.M. 1980.Medicinal Plant of East and Southeast Asia Atribute Properties

and Uses. MIT Press. London. Rang, H.P., Dale, M.M and Ritter, J.M.

1995. Pharmakology, 3nd edition, Churchil Livingstone, New York and

Tokyo.

Rahardja, P. C. 1995. Kultur Jaringan : Teknik Perbanyakan Tanaman Secara

Modern. Penerbit Swadaya, Jakarta.

Sriyanti, Daisy P. dan Ari Wijayani. 2002. Teknik Kultur Jaringan : Pengenalan

dan Petunjuk Perbanyakan Tanaman Secara Vegetatif-Modern. Kanisius.

Yogyakarta.

Tjitrosoepomo, Gembong. 1993. Taksonomi Umum. Gajah Mada University

Press. Yogyakarta.


21/21

Zulkarnain. 2009.Kultur Jaringan Tanaman. Bumi Aksara.Jakarta.

Documents

Laporan Kjt Fz