-
8/18/2019 Kuliah VI-Sistem Vektor Dan Inang
1/17
SISTEM VEKTOR – INANG
Plasmid
Pengantar Bio teknologi Per tanian
Dr. Jam sari , Prog. Studi Pemuliaan Tanaman J uru san
BDP-FPUA
-
8/18/2019 Kuliah VI-Sistem Vektor Dan Inang
2/17
-
8/18/2019 Kuliah VI-Sistem Vektor Dan Inang
3/17
SISTEM VEKTOR - INANG
VEKTOR: Media untuk dan memperbanyak dan mentransfor-masi
fragmen DNA
?
Dr. Jam sari , Prog. Studi Pemuliaan Tanaman J uru san
BDP-FPUA
-
8/18/2019 Kuliah VI-Sistem Vektor Dan Inang
4/17
SISTEM VEKTOR - INANG
PERSYARATAN SUATU VEKTOR :
1.REPLIKASI AUTONOM DALAM INANG
2.BERPENANDA UNTUK SELEKSI
3.BERPOSISI KLONING TUNGGAL
4.BERBERAT MOLEKUL KECIL
5.MEMILIKI BEBERAPA KOPI PADA SETIAP SEL
6.TIDAK BERKONJUGASI
Bioteknologi Tanaman
Dr. Jam sari , Prog. Studi Pemuliaan Tanaman J uru san
BDP-FPUA
-
8/18/2019 Kuliah VI-Sistem Vektor Dan Inang
5/17
SISTEM VEKTOR - INANG
JENIS VEKTOR:
1. PLASMID
2. FAG (FAG M13)3. KOSMID
4. P1- (PAC) (Plasmide artificial chrom.)
5. BAC (Bacterial artificial chromosome)
6. YAC (Yeast Artificial Chromosome)
Bioteknologi Tanaman
Dr. Jam sari , Prog. Studi Pemuliaan Tanaman J uru san
BDP-FPUA
-
8/18/2019 Kuliah VI-Sistem Vektor Dan Inang
6/17
SISTEM VEKTOR - INANG
KAPASITAS TAMPUNG BEBERAPA VEKTOR Vektor Inang Kapasitas
kloning
Plasmid Escherichia coli ~ 5000 bp
Plasmid Saccharomyces cerevisiae ~ 5000 bpPlasmid Bacillus
subtilis ~ 5000 bp
-Phage Escherichia coli 9 – 23 kb
Cosmid Escherichia coli 30 – 48 kb
P1-(PAC) Escherichia coli 85 – 110 kbBAC Escherichia coli 30 –
350 kb
YAC Saccharomyces cerevisiae 50 kb – 2 Mb
Bioteknologi Tanaman
Dr. Jam sari , Prog. Studi Pemuliaan Tanaman J uru san
BDP-FPUA
-
8/18/2019 Kuliah VI-Sistem Vektor Dan Inang
7/17
SISTEM VEKTOR - INANG
PLASMID: DNA EKSTRAKROMOSOMAL BERBENTUKSIRKULAR TERTUTUP,
BERPITA GANDA,UKURAN 1 – 200 kb.
KROMOSOMAL DNA
PLASMID
Bioteknologi Tanaman
Dr. Jam sari , Prog. Studi Pemuliaan Tanaman J uru san
BDP-FPUA
-
8/18/2019 Kuliah VI-Sistem Vektor Dan Inang
8/17
SISTEM VEKTOR - INANG
Kendali replikasi plasmid
- Kontrol ketat (stringed control)- Kontrol longgar (relaxed
control) (10-200
kopi)
Bioteknologi Tanaman
Dr. Jam sari , Prog. Studi Pemuliaan Tanaman J uru san
BDP-FPUA
-
8/18/2019 Kuliah VI-Sistem Vektor Dan Inang
9/17
SISTEM VEKTOR - INANG
pBin1910 kb
P O Z
lac
MCS = Multicloning SiteEc o RI K p n I Sma I B am HI Xb a I Sal
I Hind III
Km®
Bioteknologi Tanaman
Dr. Jam sari , Prog. Studi Pemuliaan Tanaman J uru san
BDP-FPUA
-
8/18/2019 Kuliah VI-Sistem Vektor Dan Inang
10/17
SISTEM VEKTOR - INANGKLONING DALAM PLASMID
pBin1910 kb
P O Zlac
MCS = Multicloning Site
Ec o RI K p n I Sm a I B am HI Xb a I Sa l I Hind III
Km®
Bam HI Bam HI Bam HI
DNA Asing
Bioteknologi Tanaman
Dr. Jam sari , Prog. Studi Pemuliaan Tanaman J uru san
BDP-FPUA
-
8/18/2019 Kuliah VI-Sistem Vektor Dan Inang
11/17
SISTEM VEKTOR - INANG
Km®
DNA Ligase
DNA Asing
Bioteknologi Tanaman
Dr. Jam sari , Prog. Studi Pemuliaan Tanaman J uru san
BDP-FPUA
-
8/18/2019 Kuliah VI-Sistem Vektor Dan Inang
12/17
SISTEM VEKTOR - INANG
Km®
DNA Asing
Bioteknologi Tanaman
Dr. Jam sari , Prog. Studi Pemuliaan Tanaman J uru san
BDP-FPUA
-
8/18/2019 Kuliah VI-Sistem Vektor Dan Inang
13/17
SISTEM VEKTOR - INANG
Km®
ABC
DEFGH
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
PENYUSUNAN PUSTAKA DNA
Bioteknologi Tanaman
Dr. Jam sari , Prog. Studi Pemuliaan Tanaman J uru san
BDP-FPUA
-
8/18/2019 Kuliah VI-Sistem Vektor Dan Inang
14/17
SISTEM VEKTOR - INANG
ISOLASI DNA PLASMID
Km®
CENTRIFUSE
PELLET
Tris, Buffer EDTA
NaOH dan SDS+
K m ®
Km®Km®
Km®
Km®
Km®
Km®CENTRIFUSE
Bioteknologi Tanaman
Dr. Jam sari , Prog. Studi Pemuliaan Tanaman J uru san
BDP-FPUA
-
8/18/2019 Kuliah VI-Sistem Vektor Dan Inang
15/17
SISTEM VEKTOR - INANG
Analisis DNA Plasmid dan insersi
Bioteknologi Tanaman
Dr. Jam sari , Prog. Studi Pemuliaan Tanaman J uru san
BDP-FPUA
Sumber: Jamsari
-
8/18/2019 Kuliah VI-Sistem Vektor Dan Inang
16/17
P ENAMPILAN DNA PLASMID STLH DIISOLASI
-
8/18/2019 Kuliah VI-Sistem Vektor Dan Inang
17/17
Dr. Jam sari , Prog. Studi Pemuliaan Tanaman J uru san
BDP-FPUA
Bioteknologi Tanaman
SELESAI
