KortizolKortizol, , ACTHACTH

Olga Olga BBáálkovlkovááRoche s.r.o., Roche s.r.o., DiagnosticsDiagnostics DivisionDivision

ACTH: ACTH: biochemiebiochemie a a fyziologiefyziologie

• Hormon peptidové povahy, 39 AMK• Produkován předním lalokem hypofýzy• Cirkadiánní rytmus

nejvyšší koncentrace v 8:00 hod., nejnižší kolem půlnoci

• Přímý vliv na produkci hormonů kůry nadledvin• Sekrece ACTH řízena CRH hypothalamu

Zdroj: Atlas fyziologie člověka, Grada, 2001

ŘŘíízenzeníí produkceprodukce hormonhormonůů kkůůryry nadledvinnadledvin

Zdroj: Atlas fyziologie člověka, Grada, 2001

DDůůsledkysledky a a ppřřííznakyznakynadbytkunadbytkukortikosteroidkortikosteroidůů

Zdroj: Atlas patofyziologie člověka, Grada, 2001

Cushingův syndromCushingova choroba

DDůůsledkysledky a a ppřřííznakyznakynedostatkunedostatkukortikosteroidkortikosteroidůů

Zdroj: Atlas patofyziologie člověka, Grada, 2001

KlinickKlinickéé vyuvyužžititíí stanovenstanovenííkortizolukortizolu a a ACTHACTH

Nemoc Kortizol ACTH

Cushingova choroba vysoký vysoký(nádor hypofýzy produkující ACTH)

Tumor nadledvin vysoký nízký

Ektopická produkce ACTH vysoký vysoký(ACTH produkovaný tumorem mimohypofýzu, obv. v plicích)

Addisonova choroba nízký vysoký(poškození nadledvin)

Hypopituitarizmy nízký nízký

FunkFunkččnníí testy testy osyosyhypothalamushypothalamus –– hypofýza hypofýza -- nadledvinynadledviny

Funkční testy Testovaný parametr

Cirkadiánní rytmus Cirkadiánní rytmus sekrece kortizolu.

ACTH stimulační test Reakce kůry nadledvin na sekreční podnět.

Dexamethasonový supresivnítest

Normální potlačení sekrece ACTH hypofýzou cestou negativní zpětnévazby při použití dexamenthasonu(2 nebo 8 mg /den).

CRH test Zvýšení sekrece ACTH hypofýzou při stimulaci odpovídajícím releasing hormonem hypothalamu.

Test inzulínem navozenéhypoglykémie

Stimulace osy hypothalamus-hypofýza-nadledviny stresem; normálníreakce je dosaženo za podmínky, že všechny složky systému fungujífyziologicky.

Metyraponový stimulační test Zvýšení sekrece ACTH hypofýzou snížením negativní zpětnovazebnékontroly kortizolu.

ElecsysElecsys®®ACTHACTH

• ECLIA

• Krevní vzorek: 50 µl, K3-EDTA-plazma, předchlazené zkumavkyTAT: 18 min.

• Funkční senzitivita: < 2,0 pg/ml (< 0,440 pmol/l)

• Analytická senzitivita: 1,0 pg/ml (0,220 pmol/)

• Rozmezí: 1,0-2000 pg/ml (0,220-440 pmol/l) nižší výskyt nutnosti ředění, rerunů, vysoká přesnost výsledků

• Reprodukovatelnost (CV): E2010: 1,8-5,4 %; E170 1,8-5,4 %

• Očekávané hodnoty: ranní koncentrace: 7,18-63,3 pg/mlodběr krve 7-10 hod.

OpakovatelnostOpakovatelnost a a reprodukovatelnostreprodukovatelnost

Intra-Assay Precision(PreciControls + Plasma-Pools; n=21)

0

1

2

3

4

5

6

7

0 200 400 600 800 1000 1200

ACTH [pg/mL]

[CV

%]

PreciControlACTH

EDTA-PlasmaPool

Spec 100 - 1000 pg/mL

Spec > 1000 pg/mL

Inter-Assay Precision(Controls + HS; n=10)

0

2

4

6

8

10

12

14

0,0 200,0 400,0 600,0 800,0 1000,0 1200,0

ACTH [pg/mL]

[CV

%]

Control EDTA-Plasma Specification

Zdroj: Multicentrické hodnocení Elecsys®ACTHPřístroj: MODULAR ANALYTICS <E>

AutomatizovanýAutomatizovaný test, test, SWASWA platformaplatforma optimalizaceoptimalizace nnáákladkladůů laboratolaboratořřeeCV < 5 % CV < 5 % spolehlivostspolehlivost výsledkvýsledkůů

FunkFunkččnníí sensenzzitivitaitivitaElecsysElecsys®®ACTHACTH < 2 pg/ml< 2 pg/ml

Lower concentration range

0

5

10

15

20

25

0 2 4 6 8 10

ACTH [pg/mL]

[CV

%]

ACTH Spec Potenziell (ACTH)

Zdroj: Multicentrické hodnocení Elecsys®ACTHPřístroj: MODULAR ANALYTICS <E>

Plot_MC

0

50

100

150

200

250

0 50 100 150 200 250

Elecsys® ACTH _ E170 [pg/mL]

Elec

sys®

AC

TH _

Ele

csys

201

0 [p

g/m

L]

ElecsysElecsys®®ACTHACTH / E170:/ E170:shodnshodnéé výsledkyvýsledky mměřěřeneníí

Zdroj: Multicentrické hodnocení Elecsys®ACTH

ElecsysElecsys®®ACTHACTH: : NabNabíídkadka a a výhodyvýhody

Nabídka Benefit zákazníkaAutomatizovaná metoda(pouze ROCHE a DPC)

Efektivita nákladůnení třeba provádět RIA, MTP

Plná konsolidace na vlastní platformě SWA -pouze ROCHE! Efektivní chod laboratoře, úspora nákladů

Vysoká přesnost metody Spolehlivost výsledků

Nejširší rozmezí měření Nižší náklady na ředění vzorkůa reruny, vysoká přesnost výsledků

ROCHE: Kompletní endokrinologické menu Efektivní chod laboratoře, úspora nákladů

ACTH a kortizol dostupné na jedné platformě

Spolehlivé a rychlé výsledky pro dif. dg. hypo/hyperkortizolismu z jedné zkumavky, bez potřeby dělení vzorků nebo tvorbyaliquotů

KortizolKortizol: : biochemiebiochemie a a fyziologiefyziologie

• Hormon kůry nadledvin (glukokortikoid), sekrece řízena CRH → ACTH• Transport v krvi ve vazbě na transkortin (cortisol-binding-globulin, CBG), receptory

pro kortizol – prakticky ve všech tkáních• Cirkadiánní rytmus, max. v ranních hodinách• Účinky:

- ↑ glykémie, katabolismus bílkovin- vazokonstrikce, pozitivně inotropní efekt, zesílení účinku katecholaminů- potlačení zánětlivé a alergické reakce- zpomalení vylučování vody v ledvinách- ↓ ochrany žaludeční sliznice

• Klinické využití: dg. poruch funkce kůry nadledvin, poruch osyhypothalamus – hypofýzy – kůra nadledvin, dif. dg. hypo/hyperkortizolismuBiologický materiál: sérum, plazma, moč, sliny

• Stanovení volného kortizolu v séru/plazmě – nákladné a náročné → výhodnějšístanovení v moči nebo slinách

• V moči: 24 hod. sběr, nutná extrakce kortizolu (přítomny i metabolity)

KortizolKortizol veve slinslinááchch

• Neinvazivní a rychlý odběr biologického materiálu (výhodné u dětí) Spolehlivé výsledky měření(bez ohledu na slinotok, bez ohledu na koncentraci CBG)

• Možné opakované vyšetření pro dynamické sledování hladiny během dne, využitelné i pro funkční dg. testy

•• NenNeníí nutnnutnáá ppřřededúúpravaprava vzorkuvzorku

• Metody měření volného kortizolu ve slinách: imunochemické metody

• Prokázána silná korelace výsledků mezi hladinou volného kortizolu ve slinácha v plazmě, bez ohledu na koncentrace CBG

• Požadované množství slin: 0,025 - 2 ml

ElecsysElecsys®®KortizolKortizol veve slinslinááchch

• ECLIA

• Kortizol uvolněn z vazby na bílkoviny danazolem

• Opakovaně bylo prokázáno, že samostatné stanovení kortizolu ve slinách v nočních hodináchje v dg. Cushingova sy nadnadřřazenoazeno stanovení volného kortizolu v moči. Stanovení kortizolu ve slinách v nočních hodinách je zvl. přínosné pro děti, psychiatricképacienty a osoby, u kterých rozličné stresové faktory mohou ovlivnit kůru nadledvin a způsobitnárůst koncentrací adrenálních steroidů. (Zdroj: van Aken, 2003, Raff H, 2003, Groeschl M, 2003)

ElecsysElecsys®®KortizolKortizol veve slinslinááchch

• Klinická studie: 27 zdravých dobrovolníků (11 mužů, 16 žen, 10-65 let, prům. věk 23 let), měření volného kortizolu ve slinách na přístroji Elecsys. 5 odběrů ranních vzorků během 2 týdnů, vzorky zmražena na -20°C, po 2 týdnech vzorky donešeny do laboratoře.

• Naměřené rozmezí: 6,4 - 39,1 nmol/střední koncentrace: 12,7 - 28,8 nmol/lstřední hodnota: 20,4 nmol/l, bez rozdílu pohlaví

• Analytická variabilita: 3,8 %intraindividuální variabilita: 6,3 %interindividuální variabilita: 20,5 %(sérový kortizol 20,9 %, resp. 45,6 %)

Zdroj: Roche Data

VýsledkyVýsledky