Kecepatan Regenerasi Kalus Somatik Embriogenik Terung ...126 Kecepatan Regenerasi Kalus Somatik … (Ha rtati, dkk) terung di Indonesia. Pemberantasan penyakit ini biasanya dilakukan

Jurnal ILMU DASAR, Vol.19 No. 2, Juli 2018 :125-134 125

Journal homepage: https://jurnal.unej.ac.id/index.php/JID

Kecepatan Regenerasi Kalus Somatik Embriogenik TerungPada Beberapa Media Maturasi

Regeneration Rate of Eggplant Somatic Embryogenic In VariousMaturation Media

Hartati*), Hanifah Agani, N. Sri Hartati, Enny SudarmonowatiPuslit Bioteknologi LIPI, Jl. Raya Bogor KM 46 Cibinong, 16911

*E-mail: [email protected]

ABSTRACTRalstonia solanacearum is one of the most important pathogen that causes bacterial wilt disease ineggplant and inhibits eggplant production. Improvement of eggplant varieties resistant to bacterialwilt can be accomplished through genetic manipulation. Regeneration of in vitro plants isone ofthe important tools to supports plant improvementthrough biotechnology. This study was aimed todetermine the rate of eggplant regeneration in various maturation media, and to find the bestmedium for eggplant regeneration based on maturation rate and the number of cotyledonproduced. We used resistant eggplant (accession 032)as the material to produce somaticembryogenic.There were 7 types of regeneration media used in this research. MS medium wassupplemented with a certain concentration of plant growt regulators , such as: 1 mg / L + BAP 1mg / L, NAA 4mg / L, TDZ 0.005 mg / L, TDZ 0.001 mg / L, CuSO4 2mM + BAP 1 mg / L,CuSO4 2mM + BAP 2 mg / L and Kinetin 1 mg / L + CuSO4 2mM. Three clumps of callus perplate with three replications were transferred to MS suplemented medium. The parametersobserved were the color of callus before and after they were transfered to regeneration medium,the day of formation of globular, heart-shaped, tubular and cotyledonary phase, and the number ofcotyledons formed. The results obtained showed the somatic embryogenic color of the 032genotype was white with friable structure before being transferred to regeneration medium andwas turned to yellowish white after being transferred to the regeneration medium. On the daysixth, friable embryogenic somatic of eggplant was developed into nodule on medium MS + NAA4 mg / L, MS + CuSO4 2mM + BAP medium 1 mg / L, and MS + CuSO4 2mM + BAP 2 mg / L.Somatic embryogenic callus of accession 032 were able to pass complete globular, heart-shaped,tubular and cotyledonary phase. The most responsive medium for somatic embryogenic callusregeneration, based on the days of the callus phases formation and the number of early-phasecotyledons obtained, were MS medium suplemented with CuSO4 2mM + BAP,and CuSO4 2 mM+ BAP 2 mg / L.

Keywords: eggplant, Ralstonia solanacearum, regeneration, cotyledonary, clump, BAP

PENDAHULUAN

Terung merupakan salah satu sayuran yangmemiliki potensi yang baik untukdikembangkan di Indonesia.Produksi terungnasional menurut Badan Pusat Statistik (2017)mencapai 514.332 ton/tahun.Angka produksiini menempatkan Indonesia pada posisikeenam negara penghasil terung terbesar didunia.Walaupun, jika dibandingkan denganChina yang berada pada posisi nomor satudunia dengan produksi 28.800.000 ton pertahun (FAO 2015), nilai produksi Indonesiamasih rendah.

Terung (Solanum melongena L.)merupakan salah satu sayuran yang biasadikonsumsi mentah sebagai lalapan ataupundengan diolah terlebih dahulu. Terung kayaakan serat pangan, vitamin (B1, B6, niacin,

folate, K) dan mineral seperti Cu, Mn, danKalium (National Nutrient Database forStandard Reference 2016). Beberapa literaturmenyebutkan bahwa terung, berdasarkan daripengobatan Aryuveda India, dapat digunakansebagai obat. Akan tetapi Rao (2011)melaporkan bahwa hal ini hanyamitos.Beberapa komponen phytonutrien dalamterung seperti nasunin dan clorogenic aciddapat menurunkan gula darah, bersifatantioksidan, antibakteri, menghambatperkembangan sel kanker, mengatasi gangguanlambung dan saluran pernapasan (Plazas et al.2014, Zaro et al. 2015). Meski demikian,terung bukanlah obat.

Penyakit layu bakteri yang disebabkan olehRalstonia solanacearum merupakan salah satufaktor penghambat dalam peningkatan produksi

126 Kecepatan Regenerasi Kalus Somatik … (Hartati, dkk)

terung di Indonesia. Pemberantasan penyakitini biasanya dilakukan secara biologis dankimiawi, namun cara ini kurang efektif. Salahsatu upaya yang dapat dilakukan adalah denganmenciptakan tanaman terung yang tahan layubakteri Ralstonia solanacearum.Perakitantanaman tahan penyakit dapat dilakukan secarakonvensional atau melalui aplikasibioteknologi. Sumber ketahanan terhadapRalstonia dapat diperoleh dari spesies terungyang sama ataupun kerabatnya dari speciesyang berbeda. Solanum torvum dan S.aethiopicum merupakan salah satu sumberketahanan yang dapat digunakan untukperakitan terung tahan Ralstonia (Daunay et al.1991, Rizza et al. 2002).Tetapi, persilanganantar spesies atau yang memiliki kekerabatanyang jauh sulit dilakukan karena kendalagenetik (Gleba & Shlumukov 1990), selain itubiji yang dihasilkan biasanya steril (Tamura etal. 2002).

Kemajuan di bidang bioteknologi membukapeluang untuk mentransformasikan sifat-sifatunggul ke tanaman target, termasuk terung.Perakitan varietas atau kultivar terung yangtahan penyakit dapat diperoleh melaluimanipulasi genetik seperti embrio rescue, fusiprotoplas, keragaman somaklonal (kulturprotoplas, kultur sel) dan transformasi.Keberhasilan regenerasi tanaman secara invitro merupakan salah satu alat penentukeberhasilan pemuliaan tanaman secarabioteknologi (Husni et al. 2003).

Terung termasuk tanaman yang mudahdikultur secara in vitrosehingga dapatdijadikan model untuk genus Solanum dalammempelajari fisiologi tanaman secara in vitro,serta mempelajari kestabilan genetiksomaklonal hasil dari proses morfogenetikyang berbeda (Magnioli et al. 2001). Respontanaman pada berbagai media regenerasi sangatberbeda.Proliferasi tanaman secara in vitrodapat dilakukan melalui jalur organogenesisdan embriogenesis somatik.Proliferasi melaluipembentukan embriogenesis somatik lebihdisukai karena jumlah propagula yangdihasilkan tidak terbatas serta dapat diperolehdalam waktu yang lebih singkat.

Selain itu, penggunaan embrio somatikpada rekayasa genetik tanaman dapatmeningkatkan keberhasilan dengan peluangtransformasi yang tinggi karena karena embriosomatik berasal dari satu sel somatik. Jikadibutuhkan, embrio somatik dapatdiregenerasikan membentuk tanaman utuh

(Purnamaningsih 2002). Ada beberapa faktoryang mepengaruhi keberhasilan regenerasiembriogenik somatik, diantaranya genotiptanaman, sumber eksplan tanaman (Mir et al.2011), serta media dan hormon (Slater et al.2003).

Keberhasilan pembentukan embriogenesissomatik pada terung pertama kali dilaporkanoleh Yamada (1967) dengan menggunakaneksplan tanaman dari embrio biji muda padamedia MS dengan tambahan Indole Acetic Acid(IAA).Hormon pertumbuhan seperti auksin,sitokinin, giberelin dan asam absisat berperanpenting dalam regenerasi tanaman.Auksin dansitokinin dilaporkan merupakan hormon yangpaling berpengaruh dalam pembentukan kalus,pembentukan akar dan regenerasi. Diantaraauksin, Naphthalene Acetic Acid (NAA), 2,4Dichlorophenoxyacetic Acid (2,4-D) danIndole Acetic Acid (IAA) memicupembentukkan kalus, sedangkan Indole ButyricAcid (IBA) memicu pembentukkan akar padaterung (Kamat & Rao 1978, Fobert & Webb1988 dalam Sidhu et al. 2014). Sementara itu,konsentrasi NAA yang berbeda dibutuhkanuntuk pembentukkan kalus (0,8 mg/L),pembentukan akar (0,016 mg/L), pembentukanembrio (8,0 mg/L) dan pembentukkan tunas(NAA 0 mg/L) (Swamynathan et al. 2010dalam Sidhu et al. 2014).

Media pertumbuhan yang diberipenambahan IBA menghasilkan kalus putihberbentuk remah (friable) dengan pertumbuhanlambat, NAA menghasilkan kalus berwarnahijau dengan pertumbuhan cepat; 2,4-Dmengiduksi kalus secara cepat (Anwar et al.2002). Diantara berbagai sitokinin, Kinetinefektif untuk regenerasi tunas (Kamat & Rao1978, Alicchio et al. 1982).Sitokinin lainnyaseperti Benzyl Amino Purin (BAP) atauThidiazuron (TDZ) juga menghasilkan embriosomatik dengan presentasi tinggi pada eksplanyang berbeda dari terung. Sitokinin berperansecara sinergis dalam mendukungperkembangan kalus (Gleddie et al. 1983).

Penelitian ini bertujuan untuk mengetahuikecepatan regenerasi terung pada berbagaimedia maturasi serta mencari media terbaikuntuk regenerasi terung berdasarkan kecepatanmaturasi dan jumlah pembentukan kotiledon.

METODE

BahanUntuk kegiatan penelitian ini digunakan kalussomatik embriogenik terung dari nomor koleksiterung aksesi 032.Aksesi ini telah diidentifikasi



tahan penyakit layu bakteri yang disebabkan olehRalstonia.Komposisi Media PerlakuanMedia regenerasi yang digunakan adalah mediaMurashige dan Skoog (MS) yang ditambah denganbeberapa jenis hormon dengan konsentrasi yangberbeda sesuai perlakuan (Tabel 1).Sebagai bahanpemadat digunakan mikro agar sebanyak 2 mg/l.

Tabel 1. Komposisi Media Perlakuan

Media KomposisiKontrol MS 0M1 MS + Kinetin 1 mg/L + BAP

1 mg/LM2 MS + NAA 4mg/LM3 MS + TDZ 0,005 mg/LM4 MS + TDZ 0,001 mg/LM5 MS + CuSO4 2mM + BAP 1 mg/LM6 MS + CuSO4 2mM + BAP 2 mg/LM7 MS + Kinetin 1 mg/L + CuSO4 2mM

Regenerasi Kalus Somatik EmbriogenikKalus somatik embriogenik terung ditransfer kemedia regenerasi sesuai perlakuan dengan ukuranclump (bulatan) 1x1 cm menggunakan pinset danscalpel. Jumlah ulangan tiap perlakuan adalahsebanyak 3 petri, dan pada setiap petri terdapatmasing-masing 3 bulatan/clump kalus somatikembriogenik terung. Setelah ditanam dan petri diseal, kalus dalam petri ditempatkan pada rak terangdi ruang kultur dengan suhu ruangan 20o C.Pengamatan proses maturasi dan regenerasi kalusterung dilakukan setiap 3 hari sekali denganmikroskop stereo dan perangkat komputer yangsudah terinstal aplikasi Leica Aplication Suite didalamnya, dan didokumentasi. Parameter yangdiamati adalah warna kalus sebelum dan sesudahditransfer ke media maturasi dan regenerasi, laludiamati hari pembentukan pembentukan faseglobular, fase heart-shaped atau fase hati, fasetubular dan kotiledon, serta jumlah kotiledon yangterbentuk.

HASIL DAN PEMBAHASAN

Pengamatan kalus somatik embriogenikdilakukan sebelum dan sesudah dipindahkan kemedia regenerasi.Warna kalus somatikembriogenik terung genotip 032 dalam mediaproliferasi dan sebelum dipindahkan ke mediaregenerasi berwarna putih dengan strukturremah, dan setelah dipindahkan ke mediaregenerasi berubah warna menjadi putihkekuningan. Pada pengamatan hari ke 6,struktur kalus embriogenik masih berbentukremah pada media MS + Kinetin 1 mg/L,media MS + TDZ 0,005 mg/L, media MS +

TDZ 0,01 mg/L, media MS + Kinetin 1 mg/L,dan media kontrol. Berbeda denganpengamatan pada media regenerasi tersebut,pada pada media MS + NAA 4 mg/L, mediaMS + CuSO4 2mM + BAP 1 mg/L, media MS+ CuSO4 2mM + BAP 2 mg/L, struktur remahsomatik embriogenik terung mulai berubahmenjadi berbentuk nodul-nodul. Gambarberikut menunjukkan perubahan warna kalus032 (Gambar 1) sebelum dan sesudahdipindahkan ke media regenerasi.

Menurut Purnamaningsih (2002), strukturkalus menggambarkan daya regenerasinyamembentuk tunas dan akar. Kalus yangberbentuk globular (nodul-nodul) dan berwarnabening biasanya mempunyai kemampuan lebihtinggi untuk membentuk tunas daripada kalusyang bersifat kompak dan berwarna coklatkehitaman. Dalam hal ini media yangdigunakan untuk memacu regenerasi kalusakan sangat menentukan. Keseimbangan nutrisidalam media tumbuh sangat mempengaruhipertumbuhan kalus maupun diferensiasinyamembentuk tunas.

Morfogenesis eksplan tergantung kepadakeseimbangan auksin dan sitokinin didalammedia dan interaksi antara zat pengatur tumbuhendogen di dalam tanaman dan zat pengaturtumbuh eksogen yang diserap dari mediatumbuh. Berdasarkan penelitian yangdilakukan oleh Husni (2005), penampakankalus yang dapat beregenerasi membentuktunas berasal dari kalus embriogenik yangditandai dengan adanya nodul yang mengkilapberwarna hijau kekuningan dan kemudianmembentuk bakal tunas dan tunas. Sedangkankalus yang tidak dapat beregenerasi umumnyaberbentuk kompak dan kering dengan warnakeputihan atau berwarna kuning kecoklatan.

Embrio somatik dapat dicirikan daristrukturnya yang bipolar, yaitu mempunyai duacalon meristem, yaitu meristem akar danmeristem tunas.Secara spesifik tahapregenerasi embrio somatik dimulai dari faseglobular, fase heart-shaped atau fase hati, fasetorpedo, dan planlet (Gaj 2001).Hasilpengamatan perkembangan kalus somatikembriogenik terung genotip 032 di mediamaturasi dan regenerasi melalui beberapa fase,yaitu fase globular (Gambar 2), heart-shaped(Gambar 3), tubular (Gambar 4) dan kotiledon(Gambar 5).


Gambar 1. Warna dan Struktur Kalus SomatikEmbriogenik Terung Genotipe 032,(a) Sebelum dan (b) Sesudah diMedia Regenerasi MS + Kinetin 1mg/L + BAP 1 mg/L (c) MS +NAA 4 mg/L (d) MS + TDZ 0,005mg/L (e) MS + TDZ 0,01 mg/L (f)MS + CuSO4 2mM + BAP 1 mg/L(g) MS + Cu SO4 2mM + BAP 2mg/L (h) MS + Kinetin 1 mg/L +CuSO4 2mM (i) Kontrol MS0

Gambar 2. Fase Globular

Gambar 3. Fase Heart-shape

Gambar 4. Fase Tubular

Gambar 5. Fase Kotiledon

a

cb

d e

f g

h i







a

cb

d e

f g

h i







a

cb

d e

f g

h i



Fase globular adalah fase dimana sel-selberkumpul dan membentuk massa sel denganstruktur bulat. Fase heart-shaped atau fase hatiadalah fase dimana terlihat adanya pendatarandan penonjolan pada kedua sisi daerahterminal, sehingga massa sel membentukstruktur seperti jantung. Penonjolan pada sisikanan dan kiri terjadi akibat pembelahan selyang lebih cepat pada daerah tersebut. Daerahpenonjolan disusun oleh sel yang memiliki sifatmeristematik, ditandai dengan selbersitoplasma pekat dan inti yang jelas denganpenyerapan warna yang cukup banyak.

Fase tubular adalah fase dimana massa seltampak seperti tabung. Fase kotiledon ditandaidengan terbentuknya dua buah kotiledon.Daerah diantara kotiledon padanya terlihatkelompok sel yang ukurannya lebih kecildibandingkan dengan ukuran sel parenkimdisekitarnya, intinya cukup besar, selain itusitoplasmanya pun cukup pekat denganpenyerapan warna yang cukup banyak,kelompok sel tersebut adalah sel meristemapeks pucuk (Bhojwani & Soh 1999). Kalusterung genotip 032 yang menunjukkanperkembangan tersebut yaitu pada mediaregenerasi dengan formulasi MS + NAA 4mg/L (M2), MS + TDZ 0,005 mg/L (M3), MS+ CuSO4 2mM +BAP 1 mg/L (M5) dan MS +CuSO4 2mM + BAP 2 mg/L (M6).

Sel-sel kalus yang mengikuti polaembriogenesis somatik dapat berkembangmembentuk kalus embriogenik dan selanjutnyamenjadi embrio somatik mulai dari faseglobular sampai fase kotiledon. Penggunaanperlakuan yang berbeda memberikan pengaruhyangberbeda terhadap kalus yang ditumbuhkankarena adanya kompetisi antara selembriogenik dalam pertumbuhan maupunperkembangannya. Perbedaan dari masing-masing perlakuan tersebut dapat dilihat padatekstur maupun warna kalus yang diperoleh.Jaringan yang menyentuh media lebih mudahmenyerap hara dan zat pengatur tumbuhsehingga pertumbuhannya juga berbedadibandingkan dengan kalus yang berada dibagian permukaan. Adanya persaingan dalampenyerapan hara dari media yang digunakanmenentukan arah dan kemampuan tumbuhyang berbeda, sehingga dihasilkan embriosomatik dengan fase dan jumlah yang jugaberbeda (Yelnititis 2013).

Secara keseluruhan, tahap-tahapperkembangan kalus terung genotip 032 dapatdiikuti dan dilihat melalui gambar

berikut.Pengamatan dilakukan dari mulaiketika kalus masih dalam media proliferasi atausejak sebelum di media regenerasi dan maturasi(Gambar 6) hingga setelah dipindahkan kemedia maturasi dan regenerasi MS +CuSO42mM + BAP, yaitu pada hari ke-3(Gambar 7), hari ke-6 (Gambar 8), hari ke-9(Gambar 9), hari ke-12 (Gambar 10), hari ke-15 (Gambar 11) dan hari ke-18 (Gambar 12).Proses regenerasi tanaman secara in vitrodipengaruhi oleh dua faktor utama yaitukomponen media dan sumber eksplan (Rai etal. 2009). Komponen media yangmemengaruhi proses regenerasi tanaman secarain vitro salah satunya adalah komposisi zatpengatur tumbuh (Taji et al. 2002).Morfogenesis kalus tergantung padakeseimbangan auksin dan sitokinin di dalammedia. Interaksi antara zat pengatur tumbuhendogen tanaman dan zat pengatur tumbuheksogen yang diserap dalam media akanmenentukan arah perkembangan kalus(Asnawati et al. 2002).

Genotip 032 memiliki kemampuanregenerasi yang baik, dan mengalamiperubahan fase kalus (globular, tubular,torpedo, kotiledon) pada media M2, M3, M5dan M6 (Tabel 2). Hal ini sesuai denganpernyataan Sidhu (2014) bahwa genotip daneksplan merupakan faktor paling penting yangmempengaruhi embriogenesis somatik danregenerasi lebih lanjut. Tahap perkembanganembrio somatik terung genotip 032 sesuaidengan teori yang telah dilaporkansebelumnya, yaitu dimulai dari fase globular,fase hati, fase torpedo, kotiledon dan planlet(Gaj 2001).

Berdasarkan pengamatan, kalus pada mediaMS + NAA 4 mg/L ulangan 2 memasuki faseglobular pada hari ke-3, fase hati pada hari ke-6, fase tubular pada hari ke-9 dan fasekotiledon awal pada hari ke-12. Kalus padamedia MS + TDZ 0,005 mg/L ulangan 1memasuki fase globular pada hari ke-12, fasehati pada hari ke-14, fase tubular pada hari ke-15 dan fase kotiledon pada hari ke-18. Kaluspada media MS + TDZ 0,005 mg/L ulangan 3memasuki fase globular pada hari ke-6, fasehati pada hari ke-12, fase tubular pada hari ke-18 dan fase kotiledon pada hari ke-18. Kaluspada media MS + CuSO4 2mM +BAP 1 mg/Lulangan 2 memasuki fase globular pada harike-3, fase hati pada hari ke-5, fase tubular padahari ke-6 dan fase kotiledon pada hari ke-9.Kalus pada media MS + CuSO4 2mM + BAP 2


mg/L ulangan 1 memasuki fase globular padahari ke-9, fase hati pada hari ke-11, fase tubularpada hari ke-12 dan fase kotiledon awal padahari ke-12.

Kalus pada media MS + CuSO4 2mM +BAP 2 mg/L ulangan 2 memasuki fase globularpada hari ke-3, fase hati pada hari ke-6, fasetubular pada hari ke-9 dan fase kotiledon padahari ke-15. Kalus pada media MS + CuSO42mM + BAP 2 mg/L ulangan 3 memasuki faseglobular pada hari ke-13, fase hati pada hari le-13, fase tubular pada hari ke-15 dan fasekotiledon awal pada hari ke-18. Hasilperhitungan jumlah kalus pada media MS +NAA 4 mg/L ulangan 2 sebanyak 5 buah perclump, media MS + TDZ 0,005 mg/L ulangan1 sebanyak 3 buah per clump, media MS +TDZ 0,005 mg/L ulangan 3 sebanyak 1 buahper clump, media MS + CuSO4 2mM +BAP 1mg/L ulangan 2 sebanyak 14 buah, media MS+ CuSO4 2mM + BAP 2 mg/L ulangan 1sebanyak 14 buah, media MS + CuSO4 2mM +BAP 2 mg/L ulangan 2 sebanyak 3 buah danmedia MS + CuSO4 2mM + BAP 2 mg/Lulangan 3 sebanyak 2 buah (Tabel 2). MenurutPurnamaningsih (2002), pemilihan zat pengaturtumbuh merupakan salah satu faktor yangsangat menentukan diferensiasi jaringantanaman yang dikulturkan.

Gambar 6. Kalus somatik embriogenik 032sebelum di media regenerasi

Gambar 7. Kondisis kalus 032 hari ke-3(globular)

Gambar 8. Kondisis kalus 032 hari ke 6(globular, tubular)

Gambar 9. Kondisis kalus 032 hari ke-9(globular, tubular, torpedo,kotiledon)

Gambar 10. Kondisis kalus 032 hari ke-12(tubular, torpedo, kotiledon)























Tabel 2. Fase regenerasi terung dan kecepatanpembentukan kotiledon pada berbagaimedia maturasi

Media Ul

Hari terbentuknya Jumlah

Koti-Ledon

FaseGlobular

FaseHeartshaped

FaseTubular

FaseKoti-Ledon

Kontrol1 - - - - -2 - - - - -3 - - - - -

M11 - - - - -2 - - - - -3 - - - - -

M21 - - - - -2 3 6 9 12 53 - - - - -

M31 12 14 15 18 32 - - - - -3 6 12 18 18 1

M41 - - - - -2 - - - - -3 - - - - -

M51 - - - - -2 3 5 6 9 273 - - - - -

M61 9 11 12 12 142 3 6 9 15 33 12 13 15 18 2

M71 - - - - -2 - - - - -3 - - - - -

Keterangan: Ul=ulanganPenggunaan media yang tepat dapat

menginduksi terjadinya seluruh tahapperkembangan embrio, sebaliknya pada mediayang kurang sesuai tidak terlihatperkembangan embrio (Purnamaningsih 2002).Kalus somatik embriogenik yang telahditransfer ke media maturasi dan regenerasikontrol (MS 0) tidak menunjukkanperkembangan kalus, sama halnya pada mediaM1 (MS + Kinetin 1 mg/L + BAP 1 mg/L),media M4 (MS + TDZ 0,001 mg/L) dan mediaM7 (MS + Kinetin 1 mg/L + CuSO4 2mM)tidak menunjukkan perkembangan fase kalus.Sementara itu pada media M2 (MS + NAA4mg/L) dan M3 (MS + TDZ 0,005 mg/L) kalusmengalami perkembangan namun lebih lambatdibandingkan perkembangan kalus pada mediaM5 dan M6. Berdasarkan hasil pengamatanhari terbentuknya fase globular, hati, tubulardan kotiledon fase awal serta perhitungan

jumlah kotiledon fase awal diperoleh hasilpaling baik yaitu pada media M5 denganformulasi MS + CuSO4 2mM+ BAP 1 mg/L.Kalus pada media ini mengalamiperkembangan fase paling cepat. Fasekotiledon terlihat 9 hari setelah transfer dandengan jumlah terbanyak dibandingkan padamedia lain, yaitu 27 buah per petri. Penelitianlain yang dilakukan oleh Gleddie (1983) jugamembuktikan bahwa BAP menghasilkanembrio somatik dengan presentasi tinggi padaeksplan yang berbeda dari terung.

Media yang menempati urutan keduaterbaik untuk maturasi dan regenerasi kalusterung yaitu media M6 (MS + CuSO4 2mM +BAP 2 mg/L) dimana fase kotiledon mulaiterlihat 12 hari setelah transfer dengan jumlahrata-rata 6 buah per petri.Hasil jauh lebih baikkarena BAP dikombinasikan dengan CuSO42mM. Menurut Danso & Lloyd (2002),penambahan CuSO4 pada media dapatmeningkatkan induksi embrio primer danmeningkatkan produksi embrio sekunder sertadapat mempersingkat waktu pematanganembrio somatik menjadi 25 hari sejak inisiasiembrio

KESIMPULAN

Dari penelitian yang dilakukan dapatdisimpulkan bahwa media yang palingresponsif untuk regenerasi kalus somatikembriogenik terung dilihat dari hariterbentuknya fase-fase kalus dan jumlahkotiledon fase awal adalah media denganformulasi MS + CuSO4 2mM + BAP 1 mg/Ldan MS + CuSO4 2mM+ BAP 2 mg/L.

DAFTAR PUSTAKA

Alicchio R, Grosso ED & Boschieri E. 1982.Tissue Culture and Plant Regenerationfrom Different Explants in Six Cultivarsof Solanummelongena. Experimentia.38:449-450.

Anwar S, Sabana D, Siddiqui SA, Shahzad A& Din S. 2002. Clonal Propagation ofBrinjal, Solanum Melongena ThroughYoung Petiolated Leaf Culture.Bionotes.4.

Asnawati, Wattimena GA, Machmud M&Purwito A. 2002. Studi Regenerasi danProduksi Protoplas Mesofil DaunBeberapa Llon Tanaman Kentang(Solanum Tuberosum L.).BuletinAgronomi. 30: 87-91.

Badan Pusat Statistik. 2015. Produksi Sayuran





Media Ul


Koti-Ledon

FaseGlobular

FaseHeartshaped

FaseTubular

FaseKoti-Ledon

Kontrol1 - - - - -2 - - - - -3 - - - - -

M11 - - - - -2 - - - - -3 - - - - -

M21 - - - - -2 3 6 9 12 53 - - - - -

M31 12 14 15 18 32 - - - - -3 6 12 18 18 1

M41 - - - - -2 - - - - -3 - - - - -

M51 - - - - -2 3 5 6 9 273 - - - - -

M61 9 11 12 12 142 3 6 9 15 33 12 13 15 18 2

M71 - - - - -2 - - - - -3 - - - - -





KESIMPULAN


DAFTAR PUSTAKA









Media Ul


Koti-Ledon

FaseGlobular

FaseHeartshaped

FaseTubular

FaseKoti-Ledon

Kontrol1 - - - - -2 - - - - -3 - - - - -

M11 - - - - -2 - - - - -3 - - - - -

M21 - - - - -2 3 6 9 12 53 - - - - -

M31 12 14 15 18 32 - - - - -3 6 12 18 18 1

M41 - - - - -2 - - - - -3 - - - - -

M51 - - - - -2 3 5 6 9 273 - - - - -

M61 9 11 12 12 142 3 6 9 15 33 12 13 15 18 2

M71 - - - - -2 - - - - -3 - - - - -





KESIMPULAN


DAFTAR PUSTAKA






di Indonesia 1997-2014.http://www.bps.go.id. Diakses pada 3November 2017.

Bhojwani SS & Soh WY. 1999.Morphogenesis in Plant Tissue Cultures.Netherlands: Kluwer AcademicPublishers.

Danso KE & Ford-Lloyd BV. 2002. Inductionof High Frequency Somatic Embryos inCassava for Cryopreservation. Plant CellReproduction. 21: 226-236.

Daunay MC, Lester RN & Laterrot H. 1991.The Use of Wild Species for The GeneticImprovement of Brinjal Eggplant(Solanum Melongena) and Tomato(Lycopersicon esculentum).In Hawkes JH,Lester RN, Nee M & Estrada N(Eds.).Solanaceae III: Taxonomy,Chemistry, Evolution, vol. 7. London:Royal Botanic Gardens Kew and LinneanSociety.

FAO. 2015. http://www.fao.org/faostat/en/Fobert PR & Webb DT. 1988. Effect of

Polyamines, Polyamine Precursors, andPolyamine Biosythethic Inhibitors onSomatic Embryogenesis from Eggplant(Solanum melongena L.) Cotyledons.Canadian Journal of Botany.66: 1734-1742.

Gaj MD. 2001. Direct Somatic Embryogenesisas A Rapid and Efficient System for InVitro Regeneration of Arabidopsisthaliana. Plant Cell, Tissue and OrganCulture. 64: 39-46.

Gleba YY &Shlumukov LR. 1990. SomaticHybridization and Cybridization. In S.S.Bhojwani (Ed.). Plant Tissue Culture:Application and limitation, Developmentin Crop Science. Amsterdam: Elsevier.

Gleddie S, Keller W & Setterfield G. 1983.Somatic Embryogenesis and PlantRegeneration from Leaf Explants and CellSuspensions of Solanum Melongena(Eggplant). Canadian Journal of Botany.61: 656-666.

Husni A. 2005. Regenerasi Protoplas TanamanTerung dan Ketahanan RegeneranTerhadap Penyakit Bakteri Layu. BeritaBiologi. 7: 285-292.

Husni A, Wattimena GA, Mariska I &PurwitoA. 2003. Keragaman Genetik TanamanTerung Hasil Regenerasi Protoplas.Jurnal Bioteknologi Pertanian. 8: 52-59.

Kamat MG & Rao PS. 1978. VegetativeMultiplication of Eggplants (Solanum

Melongena L.) Using Tissue CultureTechniques. Plant Sciences Letter.13: 57-65.

Magnioli C, Barroco RM, Rocha CAB, TarreE, Fernandes LDS, MansurE, Engler G, Margis PM & Sachetto MG.2001. Somatic Embryo Formation inArabidopsis and Eggplant in Asassociatedwith The Expression of Glycine RichProtein Gene (Atgrp-5). Plant Science.161:559-567.

Mir KA, Dhatt AS, Sandhu JS & Sidhu AS.2011. Effect of Genotype, Explant andCulture Medium on Organogenesis inBrinjal. Indian Journal ofHorticulture.68: 332-335.

Plazas M, Andujar I, Vilanova S, Hurtado M,Gramazio P, Herraiz FJ & Prohens J.2014. Breeding for Chlorogenic AcidContent in Eggplant : Interest andProspect. Not Bot Horti Agrobo. 41: 26-35.

Purnamaningsih R. 2002. Regenerasi TanamanMelalui Embriogenesis Somatik danBeberapa Gen yang Mengendalikannya.Buletin AgroBio. 5: 51-58.

Rai MK., Jaiswal VS & Jaiswal U. 2009. ShootMultiplication and Plant Regeneration ofGuava (Psidium Guajava L.) from NodalExplants of In Vitro Raised Plantlets.Journal Fruit Ornamental Plants Rescue.17: 29-38.

Rao CK. 2011. Use of Brinjal (SolanumMelongena L.) in Alternative Systems ofMedicine in India. FBAE.Bangalore.

Rizza F, Mennella G, Collonnier C, ShiachakrD, Kashyap V, Rajam MV, Prestera M&Rotino GL. 2002. Androgenic Dihaploidsfrom Somatic Hybrids Between SolanumMelongena and S. aethiopicum GroupGilo as A Source of Resistance toFusarium Oxysporum f. sp. Melongenae.Plant Cell Reports. 20: .1022-1032.

Sidhu MK, Dhatt AS &Sidhu GS. 2014. PlantRegeneration in Eggplant (SolanumMelongena L.): A Review. AfricanJournal of Biotechnology. 13: 714-722.

Slater A, Scott N& Fowler M. 2003.PlantBiotechnology: The Genetic Manipulationof Plants. New York: Oxford UniversityPress Inc.

Swamynathan B, Nadanakunjidam S,Ramamourti A, Sindhu K &Ramamoorthy D. 2010. In VitroplantletRegeneration Through Somatic



Embryogenesis in Solanum Melongena(Thengaithittu Variety). AcademicJournal of Plant Science.3: 64-70.

Taji A, Kumar PP& Lakshmanan P. 2002. InVitro Plant Breeding. New York: FoodProducts Pr.

Tamura N, Murata Y& Mukaihara T. 2002. ASomatic Hybrid Between SolanumIntegrifolium and Solanum ViolaceumThat is Resistant to Bacterial Wilt Causedby Ralstonia Solanacearum. Plant CellReports. 21: 353-358.

Wattimena GA. 1992. Bioteknologi Tanaman.Bogor: Departemen Pendidikan danKebudayaan, Direktorat JenderalPendidikan Tinggi, Pusat AntarUniversitas IPB.

Yamada T, Nakagawa H & Sinto Y. 1967.

Studies on Differentiation in CulturedCells. Embryogenesis in Three Dtrains ofSolanum callus. Botanical Magazine. 80:68-74.

Yelnititis 2013.Induksi Embrio SomatikShorea Pinanga Scheff. pada KondisiFisik Media berbeda. Jurnal PemuliaanTanaman Hutan. 7: 73-84.

National Nutrient Database for StandardReference.2016.https://ndb.nal.usda.gov/ndb/foods/show/2962

Zaro MJ, Ortiz LC, Keunchkarian S, ChavesAR, Vicente AR&Concellon A. 2015.Chlorogenic Acid Retention in White andPurple Eggplant After Processing andCooking. Food Science and Technology.64: 802-808.


Documents

Kecepatan Regenerasi Kalus Somatik Embriogenik Terung ...126 Kecepatan Regenerasi Kalus Somatik … (Ha rtati, dkk) terung di Indonesia. Pemberantasan penyakit ini biasanya dilakukan