Pada laporan ini akan dibahas mengenai kinetika mikroorganisme selama proses fermentasi berlangsung. Sampel yang digunakan untuk analisa adalah cider apel dengan penambahan yeast Saccharomyces cereviceae. Pengujian yang dilakukan adalah pengukuran biomassa dengan Haemocytometer, penentuan total asam selama fermentasi, pengukuran pH minuman vinegar, dan penentuan hubungan absorbansi dengan kepadatan sel.
KINETIKA: FERMENTASI DALAM PRODUKSI MINUMAN VINEGAR
LAPORAN RESMI PRAKTIKUM TEKNOLOGI FERMENTASI
`Disusun oleh:Nama: Ivan Septian PNIM: 11.70.0129Kelompok:
A4
PROGRAM STUDI TEKNOLOGI PANGANFAKULTAS TEKNOLOGI
PERTANIANUNIVERSITAS KATOLIK SOEGIJAPRANATASEMARANG
Acara I20141. HASIL PENGAMATAN
Hasil pengamatan rata-rata jumlah mikroba/cc, optical density
(OD), pH, dan total asam dapat dilihat pada Tabel 1.
Tabel 1.Hasil Pengamatan Rata-rata Jumlah Mikroba/cc, Optical
Density (OD), pH, dan Total Asam
KelPerlakuanWaktu mo tiap petakRata-rata mo tiap petakRata-rata/
mo tiap ccODpHTotal asam
1234
A1Sari apel + S. cereviceaeN0119151011,254,5 x
1070,52952,9025,344
N244125182226,510,6 x 1070,26832,8823,808
N485357625155,7522,3 x 1070,55542,9723,424
N72608682928032 x 1071,04763,1819,2
N9620817224418020180,4 x 1071,47082,9119,584
A2Sari apel + S. cereviceaeN02623222824,759,9 x
1071,04172,9525,436
N242624222519,257,7 x 1070,67792,8821,312
N482940398247,51,9 x 1080,84743,0121,696
N7224118106104105,54,22 x 1080,87233,1622,08
N961401891451181485,92 x 1081,41373,0720,16
A3Sari apel + S. cereviceaeN014171514156 x
1070,82412,9025,152
N242250505644,51,78 x 1080,22172,8723,616
N481101221191171174,68 x 1081,00592,9919,2
N72112103112104107,754,31 x 1081,28913,1220,16
N9684626874722,88 x 1080,93423,1120,16
A4Sari apel + S. cereviceaeN0810201212,55 x 1070,77782,9613
N244350503243,751,75 x 1080,79772,8811
N4899829810094,753,79 x 1081,09843,0415
N72108101929899,753,99 x 1080,96303,2115,5
N96115117111112113,754,55 x 1080,91693,2410
1
A5Sari apel + S. cereviceaeN02320211920,758,3 x
1070,91692,9323,424
N2442465256491,96 x 1080,71962,8822,08
N487178827476,253,05 x 1080,61733,0430,72
N7282103106115101,54,06 x 1081,45403,2622,08
N96131207125154154,256,17 x 1081,24873,2120,16
2
Pada praktikum ini dilakukan pengukuran jumlah biomassa sel pada
vinegar hasil fermentasi. Pengukuran jumlah biomassa sel dilakukan
selama 5 hari yaitu pada jam ke-0, jam ke-24, jam ke-48, jam ke-96
dan jam ke-120. Berdasarkan hasil pengujian, dapat dilihat bahwa
hasil yang diperoleh setiap kelompok menunjukkan hasil yang
berbeda-beda meskipun jenis perlakuan yang dilakukan sama, yaitu
sari apel + Saccharomyces cereviceae. Pada kelompok A1, dapat
dilihat bahwa nilai rata-rata/ mo tiap cc dan OD dari waktu N0
hingga N96 mengalami peningkatan; sedangkan nilai pH dari waktu N0
hingga N96 berkisar antara 2,88-3,18 dan menunjukkan hasil yang
fluktuatif; lalu nilai total asam yang dihasilkan mengalami
penurunan. Pada kelompok A2, dapat dilihat bahwa nilai rata-rata/
mo tiap cc dari waktu N0 hingga N96 mengalami peningkatan;
sedangkan nilai pH dari waktu N0 hingga N96 berkisar antara
2,88-3,16 dan menunjukkan hasil yang fluktuatif; begitu pula dengan
nilai OD dan total asam yang diperoleh juga menghasilkan nilai yang
fluktuatif. Pada kelompok A3, dapat dilihat bahwa baik nilai
rata-rata/ mo tiap cc, OD, pH, dan total asam yang diperoleh dari
waktu N0 hingga N96 menunjukkan hasil yang fluktuatif. Pada
kelompok A4, dapat dilihat bahwa nilai rata-rata/ mo tiap cc dari
waktu N0 hingga N96 mengalami peningkatan; sedangkan nilai pH dari
waktu N0 hingga N96 berkisar antara 2,88-3,24 dan menunjukkan hasil
yang fluktuatif; begitu pula dengan nilai OD dan total asam yang
diperoleh juga menghasilkan nilai yang fluktuatif. Pada kelompok
A5, dapat dilihat bahwa nilai rata-rata/ mo tiap cc dari waktu N0
hingga N96 mengalami peningkatan; sedangkan nilai pH dari waktu N0
hingga N96 berkisar antara 2,88-3,26 dan menunjukkan hasil yang
fluktuatif; begitu pula dengan nilai OD dan total asam yang
diperoleh juga menghasilkan nilai yang fluktuatif.
Grafik 1. Hubungan Optical Density (OD) dengan Waktu
Berdasarkan grafik, dapat dilihat bahwa hubungan optical density
(OD) dengan waktu untuk setiap kelompok memiliki hasil yang
berbeda-beda. Untuk kelompok A1 dan A2, nilai OD akan mengalami
penurunan pada N24, lalu mengalami peningkatan hingga N96. Untuk
kelompok A3, nilai OD mengalami penurunan pada N24 lalu meningkat
hingga N72, lalu mengalami penurunan kembali pada N96. Untuk
kelompok A4, nilai OD mengalami peningkatan hingga N48, lalu
mengalami penurunan hingga N96. Untuk kelompok A5, nilai OD
mengalami penurunan hingga N48, lalu meningkat pada N72 dan
mengalami penurunan kembali pada N96.
Grafik 2. Hubungan Jumlah Sel dengan Waktu
Berdasarkan grafik, dapat dilihat bahwa hubungan jumlah sel
dengan waktu untuk setiap kelompok memiliki hasil yang
berbeda-beda. Untuk kelompok A1, jumlah sel yang diperoleh
mengalami peningkatan dari N0 hingga mencapai N96. Untuk kelompok
A2, jumlah sel mengalami penurunan pada N24, lalu mengalami
peningkatan hingga N96. Untuk kelompok A3, jumlah sel mangalami
peningkatan hingga N48, lalu mengalami penurunan hingga N96. Untuk
kelompok A4 dan A5, jumlah sel juga mengalami meningkatan mulai
dari N0 hingga N96.
Grafik 3. Hubungan Jumlah Sel dengan pH
Berdasarkan grafik, dapat dilihat bahwa hubungan jumlah sel
dengan pH untuk setiap kelompok menghasilkan nilai yang fluktuatif.
Untuk kelompok A1, jumlah sel terbanyak diperoleh pada nilai pH
2,91; sedangkan jumlah sel paling sedikit diperoleh pada nilai pH
2,90. Untuk kelompok A2, jumlah sel terbanyak diperoleh pada nilai
pH 3,07; sedangkan jumlah sel paling sedikit diperoleh pada nilai
pH 2,88. Untuk kelompok A3, jumlah sel terbanyak diperoleh pada
nilai pH 2,99; sedangkan jumlah sel paling sedikit diperoleh pada
nilai pH 2,90. Untuk kelompok A4, jumlah sel terbanyak diperoleh
pada nilai pH 3,24; sedangkan jumlah sel paling sedikit diperoleh
pada nilai pH 2,96. Untuk kelompok A5, jumlah sel terbanyak
diperoleh pada nilai pH 3,21; sedangkan jumlah sel paling sedikit
diperoleh pada nilai pH 2,93.
Grafik 4. Hubungan Jumlah Sel dengan Optical Density (OD)
Berdasarkan grafik, dapat dilihat bahwa hubungan jumlah sel
dengan optical density (OD) untuk setiap kelompok menghasilkan
nilai yang fluktuatif. Untuk kelompok A1, jumlah sel terbanyak
diperoleh pada nilai OD 1,4708; sedangkan jumlah sel paling sedikit
diperoleh pada nilai OD 0,5295. Untuk kelompok A2, jumlah sel
terbanyak diperoleh pada nilai OD 1,4137; sedangkan jumlah sel
paling sedikit diperoleh pada nilai OD 0,6779. Untuk kelompok A3,
jumlah sel terbanyak diperoleh pada nilai OD 1,0059; sedangkan
jumlah sel paling sedikit diperoleh pada nilai OD 0,8241. Untuk
kelompok A4, jumlah sel terbanyak diperoleh pada nilai OD 0,9169;
sedangkan jumlah sel paling sedikit diperoleh pada nilai OD 0,7778.
Untuk kelompok A5, jumlah sel terbanyak diperoleh pada nilai OD
1,2487; sedangkan jumlah sel paling sedikit diperoleh pada nilai OD
0,9169.
Grafik 5. Hubungan Jumlah Sel dengan Total Asam
Berdasarkan grafik, dapat dilihat bahwa hubungan jumlah sel
dengan total asam untuk setiap kelompok menghasilkan nilai yang
fluktuatif. Untuk kelompok A1, jumlah sel terbanyak diperoleh pada
nilai total asam 19,584; sedangkan jumlah sel paling sedikit
diperoleh pada nilai total asam 25,344. Untuk kelompok A2, jumlah
sel terbanyak diperoleh pada nilai total asam 20,16; sedangkan
jumlah sel paling sedikit diperoleh pada nilai total asam 21,312.
Untuk kelompok A3, jumlah sel terbanyak diperoleh pada nilai total
asam 19,2; sedangkan jumlah sel paling sedikit diperoleh pada nilai
total asam 25,152. Untuk kelompok A4, jumlah sel terbanyak
diperoleh pada nilai total asam 10; sedangkan jumlah sel paling
sedikit diperoleh pada nilai total asam 13. Untuk kelompok A5,
jumlah sel terbanyak diperoleh pada nilai total asam 20,16;
sedangkan jumlah sel paling sedikit diperoleh pada nilai total asam
23,424.6
2. PEMBAHASAN
Pada praktikum ini, dilakukan percobaan mengenai kinetika
fermentasi dalam produksi minuman vinegar. Kinetika ini sangat
penting untuk dipelajari karena menjadi dasar bagi proses
fermentasi yang terjadi. Hal ini diungkapkan oleh Utami et al
(2009) dalam jurnalnya yang berjudul Kinetika Fermentasi Yoghurt
Yang Diperkaya Ubi Jalar (Ipomea Batatas) bahwa studi kinetika
pertumbuhan dan fermentasi ini perlu untuk lebih memahami setiap
proses fermentasi. Kinetika dalam proses fermentasi ini
menggambarkan mengenai pertumbuhan dan pembentukan produk oleh
suatu mikroorganisme, yang mana mempengaruhi kemampuan respon sel
dari mikroorganisme tersebut. Disinilah letak perlunya studi
kinetika pertumbuhan dalam proses fermentasi secara rasional.
Fermentasi sendiri merupakan proses pemecahan senyawa gula
menjadi karbon dioksida (CO2) dan alkohol yang disebabkan oleh
adanya aktivitas mikroorganisme. Hasil dari fermentasi ini akan
bergantung pada jenis substrat (bahan pangan) yang digunakan, jenis
mikroorganisme, serta proses metabolisme yang terjadi. Pada
prinsipnya, semua mikroorganisme akan menggunakan unsur karbon (C)
sebagai substrat utama, disusul dengan nitrogen (N). Oleh karena
itu hampir seluruh bahan pangan yang mengandung karbon dan nitrogen
dapat digunakan sebagai substrat dalam proses fermentasi (Winarno
et al, 1980).
Pada praktikum ini, sampel yang digunakan untuk percobaan adalah
sari apel (cider apel) yang diberi penambahan yeast Saccharomyces
cereviceae. Cider sendiri merupakan minuman hasil fermentasi sari
buah atau bahan lain yang mengandung pati, dengan atau tanpa
penambahan gula oleh sel yeast atau khamir. Cider ini memiliki
kadar alkohol yang tidak terlalu tinggi (Ranganna, 1978). Secara
umum, hampir semua jenis buat dapat dijadikan cider, asal jumlah
gula yang terkandung mencukupi. Pada praktikum ini sari apel
mengalami proses fermentasi dimana ragi (yeast) yang ditambahkan
ini mengubah gula yang terkandung di dalam apel menjadi etil
alkohol dan karbon dioksida. Proses pemecahan gula ini terjadi
dalam 2 tahap. Pertama, yeast akan mengubah gula menjadi alkohol,
lalu yang kedua bakteri asam laktat akan mengubah 7
asam malat menjadi karbon dioksida (Realita & Debby, 2010).
Reaksi yang terjadi selama proses fermentasi adalah:C6H12O62 C2H5OH
+ 2 CO2(karbohidrat)(yeast)(alkohol) (gas) (Rahman, 1992).
Cider apel yang digunakan kemudian ditambahkan dengan yeast
untuk memfermentasi cider apel. Yeast merupakan organisme
eukariotik yang tidak membentuk spora aseksual dan bersifat sebagai
sel tunggal selama terjadi siklus pertumbuhan vegetatif.
Pertumbuhan dari yeast berawal dari periode ekspansi, yaitu
peningkatan volume (Cooney et al, 1981). Yeast memperbanyak diri
dengan cara budding (memecah diri menjadi sel baru) dan tumbuh
dengan mengkonsumsi gula dan mengubahnya menjadi energi. Proses
konsumsi gula oleh yeast ini akan memberikan hasil samping berupa
CO2 serta alkohol (Chu, 2007). Yeast ini memilki enzim yang dapat
menghidrolisa sukrosa dan maltosa, namun tidak dapat memecah pati
menjadi residu glukosanya (Matz, 1992). Yeast sendiri memiliki
banyak kelebihan dalam proses fermentasi, misalnya dapat memberikan
rasa dan aroma yang khas, serta mampu menahan pelepasan gas agar
berlangsung dalam jangka waktu yang lebih lama (Bennion &
Hughes, 1970).
Jenis yeast yang digunakan dalam praktikum ini adalah
Saccharomyces cereviceae. Saccharomyces cereviceae ini memiliki
karakteristik hidup bergerombol, menghasilkan budding, tumbuh
dengan cepat pada suhu 20C, memiliki diameter 5-10 m, serta selnya
mengapung pada permukaan (Fardiaz, 1992). Menurut Rehm & Reed
(1983), Saccharomyces cereviceae biasa ditumbuhkan dalam suatu
fermentasi aerobik dengan metode fed batch dan dengan pH lingkungan
berkisar antara 4-5. Saccharomyces cereviceae ini juga sering
dikomersialkan dan dikenal sebagai bakers yeast. Campelo &
Isabel (2004) menambahkan bahwa Saccharomyces cereviceae ini dalam
kondisi yang sangat aerob dapat memaksimalkan pertumbuhan sel.
Faktor yang mempengaruhi kapasitas fermentasi dari Saccharomyces
cereviceae adalah tekanan osmotik dan kandungan karbon dan
nitrogen. Bhusan & Joshi (2006) dalam jurnalnya yang berjudul
Bakers Yeast Production Under Fed Batch Culture from Apple Pomace
menambahkan bahwa proses fermentasi dari bakers yeast akan sangat
dipengaruhi oleh tipe dan konsentrasi sumber karbon, oksigen
terlarut saat proses agitasi, pH dan suhu.
2.1. Cara Kerja2.1.1. Pengukuran Biomassa dengan
HaemocytometerProses pengukuran biomassa pada praktikum ini
menggunakan alat yang disebut dengan Haemocytometer. Haemocytometer
ini merupakan suatu alat yang berfungsi untuk menghitung sel secara
cepat dengan konsentrasi sel yang rendah. Haemocytometer ini
memiliki 2 bagian ruang dimana setiap ruangnya terdapat garis
mikroskopis yang sudah tergores pada permukaan kacanya. Lebar dan
kedalaman garis mikroskopis tersebut sudah diketahui dengan pasti
sehingga alat ini cukup teliti untuk mengukur jumlah biomassa.
Apabila dilihat dengan menggunakan mikroskop, Haemocytometer
terbagi menjadi 9 kotak besar yang dibatasi dengan 3 garis di
setiap sisinya. Di dalam masing-masing 9 kotak tersebut terdapat 16
kotak kecil. Jumlah sel yang dihitung adalah sel yang terdapat pada
4 kotak besar yang saling berdekatan (Chen & Pei, 2011).
21
43
Gambar 1. Kotak pada Haemocytometer
Langkah kerja yang dilakukan pada pengukuran ini adalah
pertama-tama sebanyak 250 ml media pertumbuhan yang telah
disterilisasi disiapkan, lalu 30 ml biakan yeast yang telah
tersedia diambil (pengambilan secara akurat menggunakan pipet ukur)
dan dimasukkan ke dalam media pertumbuhan secara aseptis. Setelah
itu dilakukan inkubasi dengan perlakuan shaker atau dengan
penggoyangan. Inkubasi ini dilakukan pada suhu ruang (25-30C)
selama 5 hari, dan setiap 24 jam dilakukan pengambilan sampel
sebanyak 10 ml secara aseptis untuk mengetahui tingkat pertumbuhan
sel yeast. Selanjutnya dilakukan pengujian tingkat kepadatan
Saccharomyces cereviceae (N0) dengan menggunakan Haemocytometer.
Apabila sampel terlalu keruh, dapat dilakukan pengenceran.
Pengamatan dan nilai dari N0, N24, N48, N72, dan N96 ditentukan
dengan menggunakan teknik kepadatan sel. Faktor pengenceran yang
digunakan juga diperhatikan dan diperhitungkan. Terakhir, dibuat
suatu grafik yang menggambarkan pertumbuhan yeast selama fermentasi
berjalan.
Pada percobaan ini dilakukan perlakuan shaker yang bertujuan
untuk membantu proses fermentasi, terutama dalam memberikan supply
oksigen pada media dan mikroba yang ditumbuhkan. Hal ini sesuai
dengan teori dari Said (1987) yang menyatakan bahwa proses shaker
akan mensuplai oksigen pada media dan membantu pertumbuhan mikroba
secara aerobik. Dengan adanya proses shaker yang meningkatkan
pasokan oksigen, jumlah sel mikroba di dalam kultur akan semakin
meningkat. Adanya supply oksigen ini juga sangat tepat untuk
menunjang pertumbuhan yeast yang digunakan, seperti diungkapkan
oleh Winarno et al (1980) bahwa Saccharomyces cereviceae akan
tumbuh baik pada kondisi aerob.
Stanburry & Whittaker (1984) menambahkan bahwa proses
pengadukan atau shaker ini memiliki tujuan untuk memperkecil ukuran
dari gelembung udara sehingga diperoleh area yang lebih besar untuk
transfer oksigen dan mengurangi terjadinya difusi. Kecepatan
putaran selama proses shaker berlangsung perlu dijaga karena
gerakan berputar ini akan menyebabkan media bergerak sehingga
terjadi aerasi. Kecepatan putaran perlu diatur agar kondisi
lingkungan yang terbentuk dalam media dapat stabil. Selama proses
shaker berlangsung juga erlenmeyer ditutup dengan menggunakan
aluminium foil yang bertujuan agar proses berlangsung dengan
steril. Hal ini sesuai dengan teori dari Rahman (1992) yang
menyatakan bahwa labu yang diletakkan di atas alat shaker harus
ditutup agar udara dari luar tidak masuk ke dalam labu sehingga
sterilitas media dapat terjaga.
Inkubasi dengan shaker pada saat praktikum dilakukan pada suhu
ruang (25-30C) karena suhu ruang merupakan suhu yang baik untuk
yeast dapat tumbuh. Hal ini sesuai dengan teori dari Fardiaz (1992)
yang menyatakan bahwa suhu pertumbuhan pada kebanyakan khamir
(yeast) pada umumnya hampir sama dengan kapang, yaitu 25-30C, yang
mana merupakan suhu optimum untuk tumbuh. Sedangkan suhu maksimum
yeast masih dapat tumbuh adalah pada suhu 37-47C.
Pada pengukuran dengan Haemocytometer juga dapat dilakukan
pengenceran apabila sari apel yang dihasilkan terlalu keruh. Hal
ini bertujuan untuk memudahkan pengamatan, seperti yang diungkapkan
oleh Fardiaz (1992) proses pengenceran dilakukan untuk mempermudah
penghitungan jumlah mikroorganisme. Pengenceran dilakukan dengan
mengambil sampel sebanyak 1 ml yang kemudian ditambahkan dengan 9
ml aquades, lalu di-vortex. Jumlah sel yang terhitung kemudian
dikalikan dengan bilangan 10.
2.1.2. Penentuan Hubungan Absorbansi Dengan Kepadatan SelLangkah
kerja yang dilakukan pada pengukuran absorbansi adalah pertama-tama
kultur yeast yang telah dibiakan diambil sebanyak 30 ml. Kemudian
dilakukan penentuan Optical Density (OD) dengan menggunakan
spektrofotometer pada panjang gelombang 660 nm. Pengamatan
dilakukan selama 5 hari, dan nilai OD yang dihasilkan ini dicatat
lalu dibandingkan dengan hasil pengamatan kepadatan sel. Terakhir
dibuat grafik yang menunjukkan hubungan OD dengan kepadatan
sel.
Penentuan panjang gelombang untuk mengukur absorbansi tidak
boleh sembarangan. Ewing (1976) mengatakan bahwa dalam analisa
dengan spektrofotometer, panjang gelombang yang digunakan perlu
disesuaikan dengan kemampuan larutan yang diujikan dalam
mengabsorbsi energi radiasi pada panjang gelombang yang ditentukan.
Pada praktikum ini, panjang gelombang yang digunakan adalah 660 nm.
Hal ini sudah sesuai dengan teori dari Sevda & Rodrigues (2011)
dalam jurnalnya yang berjudul Fermentative Behavior of
Saccharomyces Strains During Guava (Psidium Guajava L) Must
Fermentation and Optimization of Guava Wine Production. menyatakan
bahwa pengukuran absorbansi (optical density) untuk Saccharomyces
cereviceae dilakukan pada panjang gelombang 660 nm.
2.1.3. Pengukuran pH Minuman VinegarPada pengukuran pH cider
apel, langkah yang dilakukan adalah larutan sampel diambil sebanyak
10 ml. Setelah itu sampel diukur dengan menggunakan pH meter.
Terakhir hasil pH yang terukur dicatat.
2.1.4. Pengukuran Total Asam Selama FermentasiPada pengukuran
total asam pada cider apel, langkah yang dilakukan adalah dengan
menggunakan metode titrasi. Pertama-tama, sebanyak 10 ml sampel
ditetesi dengan 3 tetes PP, lalu dititrasi dengan NaOH 0,1 N.
Titrasi dihentikan apabila larutan sampel berubah menjadi warna
merah muda. Setelah itu, kadar total titrasi ditentukan dengan
rumus:
Pengukuran asam ini dilakukan bersamaan waktunya dengan
pengukuran biomassa. Selanjutnya dibuat analisis kadar total asam
sitrat selama fermentasi, dan analisis hubungan total biomassa dan
kadar asam.
Pada proses titrasi ini digunakan NaOH sebagai titran. Hal ini
didukung oleh teori dari Petrucci & Suminar (1987) yang
menyatakan bahwa titrasi yang dilakukan dengan menggunakan larutan
standar dapat dipakai untuk mengetahui kadar zat terlarut maupun
proses netralisasi. Titrasi ini biasanya menggunakan larutan asam
kuat atau basa kuat. Pada titrasi ini dilakukan penambahan 3 tetes
PP yang berperan sebagai indikator. Hal ini sesuai dengan teori
dari Chang (1991) yang menyatakan bahwa penggunaan PP sebagai
indikator juga disebabkan karena titran yang digunakan adalah NaOH
yang bersifat basa, sebab PP tidak berwarna dalam asam dan larutan
netral. Namun akan berwarna merah muda pada larutan basa.
2.2. Pembahasan HasilBerdasarkan hasil pengujian, dapat dilihat
bahwa hasil yang diperoleh setiap kelompok menunjukkan hasil yang
berbeda-beda meskipun jenis perlakuan yang dilakukan sama, yaitu
sari apel + Saccharomyces cereviceae. Pada kelompok A1, dapat
dilihat bahwa nilai rata-rata/ mo tiap cc dan OD dari waktu N0
hingga N96 mengalami peningkatan; sedangkan nilai pH dari waktu N0
hingga N96 berkisar antara 2,88-3,18 dan menunjukkan hasil yang
fluktuatif; lalu nilai total asam yang dihasilkan mengalami
penurunan. Pada kelompok A2, dapat dilihat bahwa nilai rata-rata/
mo tiap cc dari waktu N0 hingga N96 mengalami peningkatan;
sedangkan nilai pH dari waktu N0 hingga N96 berkisar antara
2,88-3,16 dan menunjukkan hasil yang fluktuatif; begitu pula dengan
nilai OD dan total asam yang diperoleh juga menghasilkan nilai yang
fluktuatif. Pada kelompok A3, dapat dilihat bahwa baik nilai
rata-rata/ mo tiap cc, OD, pH, dan total asam yang diperoleh dari
waktu N0 hingga N96 menunjukkan hasil yang fluktuatif. Pada
kelompok A4, dapat dilihat bahwa nilai rata-rata/ mo tiap cc dari
waktu N0 hingga N96 mengalami peningkatan; sedangkan nilai pH dari
waktu N0 hingga N96 berkisar antara 2,88-3,24 dan menunjukkan hasil
yang fluktuatif; begitu pula dengan nilai OD dan total asam yang
diperoleh juga menghasilkan nilai yang fluktuatif. Pada kelompok
A5, dapat dilihat bahwa nilai rata-rata/ mo tiap cc dari waktu N0
hingga N96 mengalami peningkatan; sedangkan nilai pH dari waktu N0
hingga N96 berkisar antara 2,88-3,26 dan menunjukkan hasil yang
fluktuatif; begitu pula dengan nilai OD dan total asam yang
diperoleh juga menghasilkan nilai yang fluktuatif.
2.2.1. Optical Density (OD) dengan WaktuBerdasarkan hasil
pengamatan, diperoleh hasil hubungan optical density (OD) dengan
waktu untuk setiap kelompok memiliki hasil yang berbeda-beda. Untuk
kelompok A1 dan A2, nilai OD akan mengalami penurunan pada N24,
lalu mengalami peningkatan hingga N96. Untuk kelompok A3, nilai OD
mengalami penurunan pada N24 lalu meningkat hingga N72, lalu
mengalami penurunan kembali pada N96. Untuk kelompok A4, nilai OD
mengalami peningkatan hingga N48, lalu mengalami penurunan hingga
N96. Untuk kelompok A5, nilai OD mengalami penurunan hingga N48,
lalu meningkat pada N72 dan mengalami penurunan kembali pada
N96.
2.2.2. Jumlah Sel dengan WaktuBerdasarkan hasil pengamatan,
diperoleh hasil bahwa hubungan jumlah sel dengan waktu untuk setiap
kelompok memiliki hasil yang berbeda-beda. Untuk kelompok A1,
jumlah sel yang diperoleh mengalami peningkatan dari N0 hingga
mencapai N96. Untuk kelompok A2, jumlah sel mengalami penurunan
pada N24, lalu mengalami peningkatan hingga N96. Untuk kelompok A3,
jumlah sel mangalami peningkatan hingga N48, lalu mengalami
penurunan hingga N96. Untuk kelompok A4 dan A5, jumlah sel juga
mengalami meningkatan mulai dari N0 hingga N96.
2.2.3. Jumlah Sel dengan Optical Density (OD) (Foto
Terlampir)Berdasarkan hasil pengamatan, diperoleh hasil bahwa
hubungan jumlah sel dengan optical density (OD) untuk setiap
kelompok menghasilkan nilai yang fluktuatif. Untuk kelompok A1,
jumlah sel terbanyak diperoleh pada nilai OD 1,4708; sedangkan
jumlah sel paling sedikit diperoleh pada nilai OD 0,5295. Untuk
kelompok A2, jumlah sel terbanyak diperoleh pada nilai OD 1,4137;
sedangkan jumlah sel paling sedikit diperoleh pada nilai OD 0,6779.
Untuk kelompok A3, jumlah sel terbanyak diperoleh pada nilai OD
1,0059; sedangkan jumlah sel paling sedikit diperoleh pada nilai OD
0,8241. Untuk kelompok A4, jumlah sel terbanyak diperoleh pada
nilai OD 0,9169; sedangkan jumlah sel paling sedikit diperoleh pada
nilai OD 0,7778. Untuk kelompok A5, jumlah sel terbanyak diperoleh
pada nilai OD 1,2487; sedangkan jumlah sel paling sedikit diperoleh
pada nilai OD 0,9169.
2.2.4. Hubungan Antara Jumlah Sel, Waktu, dan Optical Density
(OD)Berdasarkan ketiga hasil diatas, dapat kita lihat bahwa
rata-rata terjadi fluktuasi hasil dan hasil yang diperoleh setiap
kelompok tidak menentu. Hal ini kurang sesuai dengan teori yang
ada. Sebenarnya, apabila kita ingin menganalisis hubungan antara
jumlah sel, waktu, dan Optical Density (OD), kita tidak dapat
memisahkan ketiganya karena saling berkaitan satu sama lain.
Dalam pengujian dengan spektrofotometer, jumlah sel
mikroorganisme tersebut ditunjukkan dengan adanya kekeruhan pada
larutan. Semakin banyak jumlah sel mikroorganisme dalam larutan
yang diuji, maka larutan akan semakin keruh dan nilai Optical
Density (OD)-nya akan semakin tinggi. Hal ini sesuai dengan teori
dari Hadioetomo (1993) yang menyatakan bahwa kekeruhan pada larutan
mengindikasikan adanya mikroorganisme yang tumbuh. Apabila jumlah
mikroorganisme meningkat akant menyebabkan tingkat kekeruhan
larutan meningkat yang mana akan menyebabkan nilai OD-nya juga
meningkat. Hal itu juga didukung oleh Anagnostopoulos et al (2010)
dalam jurnalnya yang berjudul Effect of Growth Conditions on
Biosorption of Cadmium and Copper by Yeast Cells, menyatakan bahwa
semakin tinggi jumlah sel/cc maka kekeruhannya akan meningkat.
Pelezar & Chan (1986) juga menambahkan bahwa semakin banyak
massa sel yang ada dalam suspensi maka sinar yang dihamburkan akan
semakin banyak sehingga nilai OD semakin tinggi.
Kemudian sel mikroorganisme tersebut memiliki beberapa fase di
dalam pertumbuhannya, yaitu fase lag, log, stasioner, dan death.
Mikroorganisme tertentu apabila berada di dalam fase yang berbeda
tentu saja jumlah sel yang dihasilkan akan berbeda, misalnya pada
fase log, jumlah sel mikroorganisme akan meningkat secara drastis.
Seiring terjadinya peningkatan sel mikroorganisme tersebut, maka
nilai OD yang diperoleh semakin tinggi pula. Permisalan kedua
adalah apabila fase pertumbuhan mikroorganisme mencapai fase
stasioner, maka jumlah sel mikroorganisme akan mengalami penurunan
sehingga nilai OD yang diperoleh juga akan semakin kecil. Hal ini
sesuai dengan teori dari Mahreni & Sri (2011) yang mengatakan
bahwa fase pertumbuhan suatu sel mikroorganisme dapat dibagi
menjadi fase lag (pertubuhan sama dengan nol), fase percepatan
pertumbuhan atau log (pertumbuhan cepat mengikuti kurva
eksponensial), fase stagnan (kecepatan pertumbuhan tetap), dan fase
kematian (pertumbuhan semakin lambat dan sebagian sel mati).
Analisis hubungan diatas juga didukung oleh Laily et al (2004)
yang berkata bahwa hubungan antara OD dengan pengukuran kepadatan
sel adalah nilai OD dapat menunjukkan terjadinya suatu fase
pertumbuhan bakteri dengan sangat jelas. Nilai OD akan stabil
ketika fase pertumbuhan berada pada fase adaptasi. Ketika fase
pertumbuhan memasuki fase eksponensial, maka akan terjadi
peningkatan kekeruhan karena adanya penambahan jumlah sel bakteri.
Apabila fase pertumbuhan memasuki fase stasioner, maka nilai
kekeruhan akan menurun drastis karena adanya penurunan bobot
biomassa.Waktu fermentasi juga tidak serta merta menentukan fase
pertumbuhan yang terjadi pada mikroorganisme. Tidak semua
mikroorganisme memiliki periode yang sama dalam setiap fase
pertumbuhannya. Ada mikroorganisme yang memiliki periode fase lag
yang lama, atau fase log yang lama. Terdapat banyak faktor yang
akan mempengaruhi lama atau tidaknya suatu fase terjadi dalam
pertumbuhan mikroorganisme, misalnya menurut Arroyo-Lopez et al
(2009) dalam jurnalnya yang berjudul Effects of Temperature, pH,
and Sugar Concentration on The Growth Parameters of Saccharomyces
cereviceae, S. kudriavzevii and Their Interspecific Hybrid
mengatakan bahwa untuk pertumbuhan Saccharomyces cereviceae sendiri
akan dipengaruhi oleh suhu, pH, dan nutrient, terutama gula.
Nutrient disini menjadi salah satu faktor yang paling penting
ketika menentukan suatu fase pertumbuhan karena apabila nutrient
dalam media habis, maka fase pertumbuhan akan langsung memasuki
fase stasioner karena nutrisinya sudah habis terpakai. Hal ini
didukung oleh Stanburry & Whittaker (1984) yang menyatakan
bahwa apabila media sudah tidak tersedia, maka yeast akan mengalami
kematian dan jumlahnya akan mengalami penurunan. Yeast yang mati
ini kemudian dapat menjadi sumber nutrisi yang baru bagi yeast yang
masih bertahan sehingga jumlahnya kembali mengalami peningkatan.
Terjadinya penurunan jumlah sel yang terukur juga dapat disebabkan
yeast baru mencapai tahan adaptasi.
Diperolehnya hasil yang berfluktuasi ini dapat disebabkan
terjadinya kesalahan-kesalahan dalam melakukan percobaan atau
pengukuran dengan Haemocytometer, atau kurang aseptisnya percobaan
yang dilakukan sehingga jumlah sel yang terukur dalam
Haemocytometer tidak hanya sel Saccharomyces cerevieae saja, tetapi
ada bakteri kontaminan lain. Hal ini didukung oleh Atlas (1984)
yang menyatakan bahwa keakuratan penghitungan secara manual dengan
menggunakan Haemocytometer akan bergantung pada keakuratan
pencampuran sampel (tanpa gelembung), jumlah atau bilik yang
dihitung, dan jumlah sel yang dihitung (200-500/0,1 mm3). Selain
itu juga dapat disebabkan terjadinya kesalahan dalam pengukuran
absorbansi.
2.2.5. Hubungan Jumlah Sel dengan pHBerdasarkan hasil
pengamatan, diperoleh hasil bahwa hubungan jumlah sel dengan pH
untuk setiap kelompok menghasilkan nilai yang fluktuatif. Untuk
kelompok A1, jumlah sel terbanyak diperoleh pada nilai pH 2,91;
sedangkan jumlah sel paling sedikit diperoleh pada nilai pH 2,90.
Untuk kelompok A2, jumlah sel terbanyak diperoleh pada nilai pH
3,07; sedangkan jumlah sel paling sedikit diperoleh pada nilai pH
2,88. Untuk kelompok A3, jumlah sel terbanyak diperoleh pada nilai
pH 2,99; sedangkan jumlah sel paling sedikit diperoleh pada nilai
pH 2,90. Untuk kelompok A4, jumlah sel terbanyak diperoleh pada
nilai pH 3,24; sedangkan jumlah sel paling sedikit diperoleh pada
nilai pH 2,96. Untuk kelompok A5, jumlah sel terbanyak diperoleh
pada nilai pH 3,21; sedangkan jumlah sel paling sedikit diperoleh
pada nilai pH 2,93.
Hasil pengamatan yang mengenai hubungan pH dan jumlah sel ini
menghasilkan hasil pH yang berkisar diantara 2,86-3,26. Nilai pH
yang terukur pada cider apel ini bukan merupakan range pH yang
optimum bagi Saccharomyces cereviceae untuk tumbuh, sehingga jumlah
sel mikroorganisme yang dihasilkan akan bergantung pada nilai
pH-nya juga. Hal ini didukung oleh teori dari Roukas (1994) yang
mengatakan bahwa kisaran pertumbuhan Saccharomyces cereviceae
adalah pada pH 3,5-6,5. Hasil pengamatan yang mengenai hubungan pH
dengan jumlah sel juga memberikan hasil yang fluktuatif, padahal
seharusnya semakin banyak jumlah sel mikroorganisme dan semakin
lama waktu fermentasi, maka pH-nya akan semakin rendah. Hal ini
disebabkan karena selama fermentasi akan dihasilkan alkohol dimana
semakin banyak alkohol, maka pH yang dihasilkan akan semakin
rendah. Semakin banyak jumlah sel Saccharomyces cereviceae, maka
alkohol yang dihasilkan juga akan semakin banyak
Hal ini didukung oleh Azizah (2012) melalui jurnalnya yang
berjudul Pengaruh Lama Fermentasi Terhadap Kadar Alkohol, pH, dan
Produksi Gas Pada Proses Fermentasi Bioetanol dari Whey dengan
Substrat Kulit Nanas yang menyatakan bahwa Saccharomyces cereviceae
bersifat homofermentatif, sehingga proses fermentasi akan
menghasilkan alkohol. Alkohol ini bersifat asam sehingga ketika
waktu fermentasi ditambah, maka akan semakin banyak alkohol yang
terbentuk. Kondisi ini menyebabkan pH substrat semakin rendah. Di
dalam proses fermentasi yeast juga tidak hanya dihasilkan alkohol
saja, tetapi menghasilkan hasil samping (by product) berupa gas
CO2. Seiring meningkatnya waktu fermentasi, maka produksi gas CO2
juga semakin bertambah meskipun tidak signifikan. Peningkatan
produksi gas ini diikuti dengan penurunan nilai pH. Kartohardjono
et al (2007) dalam jurnalnya yang berjudul Absorbsi CO2 dari
campurannya dengan CH4 atau N2 melalui kontaktor membran serat
berongga menggunakan pelarut air menambahkan bahwa gas CO2 sering
disebut gas asam (acid whey) karena memiliki sifat yang asam. Oleh
karena itu gas CO2 juga berkontribusi terhadap nilai pH.
2.2.6. Hubungan Jumlah Sel dengan Total AsamBerdasarkan hasil
pengamatan, diperoleh hasil bahwa hubungan jumlah sel dengan total
asam untuk setiap kelompok menghasilkan nilai yang fluktuatif.
Untuk kelompok A1, jumlah sel terbanyak diperoleh pada nilai total
asam 19,584; sedangkan jumlah sel paling sedikit diperoleh pada
nilai total asam 25,344. Untuk kelompok A2, jumlah sel terbanyak
diperoleh pada nilai total asam 20,16; sedangkan jumlah sel paling
sedikit diperoleh pada nilai total asam 21,312. Untuk kelompok A3,
jumlah sel terbanyak diperoleh pada nilai total asam 19,2;
sedangkan jumlah sel paling sedikit diperoleh pada nilai total asam
25,152. Untuk kelompok A4, jumlah sel terbanyak diperoleh pada
nilai total asam 10; sedangkan jumlah sel paling sedikit diperoleh
pada nilai total asam 13. Untuk kelompok A5, jumlah sel terbanyak
diperoleh pada nilai total asam 20,16; sedangkan jumlah sel paling
sedikit diperoleh pada nilai total asam 23,424.
Hasil penelitian mengenai jumlah total asam pada praktikum ini
juga memberikan hasil yang fluktuatif, padahal seharusnya semakin
lama waktu fermentasi berlangsung, maka total asam yang dihasilkan
akan semakin tinggi. Hal ini didukung oleh teori dari Sreeramulu et
al (2000) yang menyatakan bahwa semakin lama waktu fermentasi, maka
nilai pH yang dihasilkan akan semakin rendah karena selama
fermentasi akan dihasilkan asam-asam organik. Asam-asam organik
yang terlarut akan melepaskan proton (H+) sehingga akan menurunkan
pH. Selama proses fermentasi, yeast akan melakukan metabolism
terhadap gula dan mengasilkan sejumlah asam-asam organik.
Diperolehnya beberapa hasil pengamatan yang kurang sesuai dengan
teori ini dapat disebabkan selama melakukan percobaan, terjadi
beberapa kesalahan atau prosedur percobaan yang dilakukan tidak
sesuai, misalnya kesalahan dalam pengukuran pH menggunakan pH
meter, atau terjadinya perbedaan praktikan yang melakukan titrasi
sehingga definisi penentuan apakah titik akhir titrasi sudah
tercapai atau belum akan berbeda-beda. Hal ini menyebabkan jumlah
total asam yang dihasilkan juga berbeda. Hal ini didukung oleh
teori dari Girindra (1986) yang menyatakan bahwa ketika dilakukan
titrasi, bagian bawah erlenmeyer tidak dialasi oleh kertas putih,
sehingga terjadinya perubahan warna tidak terlihat dengan
jelas.18
3. KESIMPULAN
Kinetika dalam proses fermentasi menggambarkan pertumbuhan dan
pembentukan produk oleh suatu mikroorganisme. Fermentasi merupakan
proses pemecahan senyawa gula menjadi karbon dioksida (CO2) dan
alkohol yang disebabkan oleh adanya aktivitas mikroorganisme.
Sampel yang digunakan pada praktikum ini adalah cider apel. Jenis
yeast yang digunakan pada praktikum ini adalah Saccharomyces
cereviceae. Pengukuran biomassa menggunakan alat Haemocytometer.
Perlakuan shaker bertujuan untuk meningkatkan supply oksigen,
sehingga jumlah sel mikroba di dalam kultur akan semakin meningkat.
Inkubasi dengan shaker dilakukan pada suhu ruang (25-30C) karena
suhu ruang merupakan suhu yang baik untuk yeast dapat tumbuh.
Pengenceran bertujuan untuk mempermudah penghitungan jumlah
mikroorganisme. Pengukuran Optical Density (OD) menggunakan panjang
gelombang 660 nm. Pengukuran pH dilakukan menggunakan alat pH
meter. Pengukuran total asam dilakukan adalah dengan menggunakan
metode titrasi. Fase pertumbuhan suatu sel mikroorganisme dibagi
menjadi fase lag, fase log, fase stagnan, dan fase kematian.
Mikroorganisme apabila berada di dalam fase yang berbeda akan
memiliki jumlah sel yang berbeda. Hubungan antara OD dengan
pengukuran kepadatan sel adalah nilai OD dapat menunjukkan
terjadinya suatu fase pertumbuhan bakteri dengan sangat jelas.
Semakin banyak jumlah sel mikroorganisme dalam larutan yang diuji,
maka larutan akan semakin keruh dan nilai Optical Density (OD)-nya
akan semakin tinggi. pH optimum untuk pertumbuhan Saccharomyces
cereviceae adalah 3,5-6,5. Semakin banyak jumlah sel mikroorganisme
dan semakin lama waktu fermentasi, maka pH-nya akan semakin rendah
karena ada pembentukan alkohol. Semakin banyak jumlah sel
Saccharomyces cereviceae, maka alkohol yang dihasilkan akan semakin
banyak.
19
Semakin lama waktu fermentasi, maka nilai total asam akan
semakin tinggi karena selama fermentasi akan dihasilkan asam-asam
organik.
Semarang, 30 Mei 2014Asisten dosen: Stella Mariss Meilisa
Lelyana Katharina Nerissa Chrysentia Archinitta Andriani CintyaIvan
Septian P20
11.70.0129
4. DAFTAR PUSTAKA
Anagnostopoulos, V.A.; Symeopoulos, B.D. and Soupioni, M.J.
2010. Effect of Growth Conditions on Biosorption of Cadmium and
Copper by Yeast Cells. Global NEST Journal, Vol 12 (3) pp
288-295.
Arroyo-Lopez, F.N.; Orlic, S.; Querol, A.; and Barrio, E. 2009.
Effects of Temperature, pH, and Sugar Concentration on The Growth
Parameters of Saccharomyces cereviceae, S. kudriavzevii and Their
Interspecific Hybrid. International Journal of Food Microbiology
131: 120-127.
Atlas, R.M. 1984. Microbiology Fundamental and Applications. Mac
Millard Publishing Company. New York.
Azizah, N.; Al-Baarri, N. dan Mulyani, S. 2012. Pengaruh Lama
Fermentasi Terhadap Kadar Alkohol, pH, dan Produksi Gas Pada Proses
Fermentasi Bioetanol dari Whey dengan Substrat Kulit Nanas. Jurnal
Aplikasi Teknologi Pangan 1 (2): 72-77.
Bennion, M & O, Hughes. 1970. Introductory Foods 6th
Edition. Collier Macmillan Publisher. London.
Bhushan, S. and Joshi, V.K. 2006. Bakers Yeast Production under
Fed Batch Culture from Apple Pomace. Journal of Scientific &
Industrial Research. Vol 65, pp 72-76.
Campelo, A.F. and Isabel, B. 2004. Fermentative Capacity of
Bakers Yeast Exposed to Hyperbaric Stress.
Chang, R. 1991. Chemistry. MC Graw Hill. USA.
Chen, Y.W. and Pei, J.C. 2011. Automatic Cell Counting for
Hemocytometers through Image Processing. World Academy of Science,
Engineering and Technology.
Chu, M. 2007. Kitchen Notes: Bakers.
http://www.cookingforengineers.com/article_ 2004.php?id=213.
Diakses tanggal 26 Mei 2014.
Cooney, C.L.; Rehm, H.J. and Reed, G. 1981. Biotechnology volume
1. VCH. Weinheim
Ewing, G.W. 1976. Instrumental Methods of Chemical Analysis. Mc
Growhill Book Company. USA.
21
Fardiaz, S. 1992. Mikrobiologi Pangan I. PT Gramedia Pustaka
Utama. Jakarta.
Girindra, A. 1986. Biokimia 1. PT. Gramedia Pustaka Utama.
Jakarta.
Hadioetomo, R. S. 1993. Mikobiologi Dasar dalam Praktek, Teknik
dan Prosedur Dasar Laboratorium. PT Gramedia Pustaka Utama.
Jakarta.
Kartohardjono, S.; Anggara; Subihi; dan Yuliusman. 2007.
Absorbsi CO2 dari campurannya dengan CH4 atau N2 melalui kontaktor
membran serat berongga menggunakan pelarut air. Jurnal Teknologi 11
(2): 97-102.
Laily, N.; Atariansah, D.; Nuraini, S.; Istini, I.; Susanti, dan
Hartono, L. 2004. Kinetika Fermentasi Produksi Selulosa Bakteri
oleh Acetobacter pasterianum pada Kultur Kocok.
Mahreni dan Sri, S. 2011. Kinetika Pertumbuhan Sel Sacharomyces
cerevisiae dalam Media Tepung Kulit Pisang. Seminar Rekayasa Kimia
dan Proses. ISSN:1411-4216.
Matz, S.A. 1992. Bakery Technology and Engineering, 3th edition.
Van Nostrand Reinhold. New York.
Pelezar, M.J. and Chan, E.C.S. 1976. Turbidimetric Measurement
of Plant Cell Culture Growth. Massachussets : MIT.Petrucci, R.H.
dan Suminar. 1987. Kimia Dasar Prinsip dan Terapan Modern Edisi
Keempat Jilid 1. Erlangga. Jakarta.
Rahman, A. 1992. Teknologi Fermentasi. Penerbit Arcan.
Jakarta.
Ranganna. 1978. Analysis of Fruit and Vegetable Product. The AVI
Publ. Co. Inc.
Realita, T. dan Debby, M.S. 2010. Teknologi Fermentasi.
Penerbit: Widya Padjajaran. Bandung.
Rehm and Reed, G. 1983. Food and Feed Production with
Microorganisms Volume 5. Weinheim Deerfield Beach. Florida.
Roukas, T. 1994. Continous ethanol productions from carob pod
extract by immobilized Saccharomyces cereviseae in a packed bed
reactor. Journal Chemical Technology Biotech. 59: 387-393.
Said, E.G. 1987. Bioindustri: Penerapan Teknologi Fermentasi.
PT. Mediyatama Sarana Perkasa. Jakarta.
Sevda, S. and Rodrigues, L. 2011. Fermentative Behavior of
Saccharomyces Strains During Guava (Psidium Guajava L) Must
Fermentation and Optimization of Guava Wine Production. Journal
Food Process Technology 2:4.
Sreeramulu, G.; Zhu, Y.; and Knol, W. 2000. Kombucha
Fermentation and Its Antimikrobial Activity. Journal Agriculture
Food Chemistry. 886 (2000) 6573.
Stanburry, P.F. and Whittaker. 1984. Principles of Fermentation
Technology. Pergamon Press. New York.
Utami, R.; Andriani, M.A.M.; dan Putri, Z.A. 2009. Kinetika
Fermentasi Yoghurt Yang Diperkaya Ubi Jalar (Ipomea Batatas).
fp.uns.ac.id/jurnal/caraka%20XXV_1-51-55.pdf
Winarno, F.G.; Fardiaz, S. dan Fardiaz, D. 1980. Pengantar
Teknologi Pangan. PT.Gramedia Pustaka Utama. Jakarta.23
5. LAMPIRAN
5.1. Perhitungan Kelompok A45.1.1. Jumlah Sel
= 0,00025 mm= 0,00000025 cc
N0
= 5 x 107 N24
= 175 x 106 N48
= 379 x 106 N96
= 399 x 106 N120
= 455 x 106
5.1.2. Total Asam
N0 Total Asam = = 24,96 mg/ml N24Total Asam = = 21,12 mg/ml
24
N48Total Asam = = 28,8 mg/ml N72Total Asam = = 29,76 mg/ml
N96Total Asam = = 19,2 mg/ml
5.2. Foto25
N0
N24
N48
N72
N96
5.3. Laporan Sementara5.4. Abstrak Jurnal5.5. Report Viper
