Informe Nº 6 Bioquimica I.docx

7/23/2019 Informe N 6 Bioquimica I.docx

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INTEGRANTESCastro Buitrn DiegoDIaz Minchan RobertoFernndez Rebaza GustavoFlores Choque PoolGaramendez Castillo dson

!ctividad nzimtica II

Mesa "# $%unes $&'( PM


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INTRODUCCIN

%as enzimas son mol)culas de naturaleza *roteica que act+an como

catalizadores en todas las reacciones del metabolismo, Para que ocurranestas reacciones es generalmente necesaria la *resencia de uncatalizador- que .acilitara la reaccin / de este modo aumenta lavelocidad a la que esta se desarrolla- catalizador que- adems- ha de seres*eci0co *ara determinada reaccin,

%as enzimas- *or tanto- adems de catalizadores- han de ser ca*aces dereconocer sobre que sustrato han de actuar / tambi)n han de serca*aces de *rovocar una trans.ormacin / solo esa de las muchas queserian *osibles,

%as enzimas se unen a sus sustratos teniendo lugar la trans.ormacindel sustrato dando lugar a los *roductos de reaccin, stos se se*arande la enzima- quedando el centro activo de esta libre / la enzima lista*ara volverse a unir a otra mol)cula de sustrato- es decir- lista *aravolver a actuar- es *or eso que a)Determinaremos el e.ecto de laconcentracin de enzima sobre la accin de la enzima .os.atasa alcalina,

!l tratarse de *rote1nas con estructura terciaria globular estnin2uenciados *or las condiciones del medio en el que tiene lugar la

reaccin,

!s1 el *3- *uede alterar la .orma de la mol)cula de la enzima-di0cultando- o incluso im*idiendo- su unin con el sustrato sobre elact+a, Cuanto a.ecta a la enzima es t1*ico de cada una de ellas,

n general- ha/ un valor de *3 o*timo en el cual la actividad es m4ima-es *or eso que b) Determinaremos el e.ecto de la variacin del *3sobre la velocidad de reaccin de la .os.atasa alcalina,

n el caso de la tem*eratura la situacin es di.erente, n las reacciones

catalizadas *or enzimas un aumento de la tem*eratura tambi)nsu*ondr un aumento de la velocidad- *ero un aumento de tem*eratura*uede *rovocar una alteracin en la estructura de enzima- *or ello sec5 Determinara el e.ecto de la variacin de la tem*eratura sobre laactividad enzimtica,

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Por +ltimo- d)Determinaremos el e.ecto del tiem*o de incubacin sobrela actividad de enzimtica de la .os.atasa alcalina / as1 *oder evaluar loscambios que se *uedan en la accin enzimtica de esta enzima,

MARCO TERICO

%as *ro*iedades catal1ticas de las enzimas / *or ende su actividad

reciben la in2uencia de numerosos .actores que deben ser controlados /

o*timizados en su totalidad si se desea que las mediciones de la

actividad enzimtica tenga sentido / sean re*roducibles, ntre estos

.actores 0guran magnitudes .1sicas 8tem*eratura- *resin5- las

*ro*iedades qu1micas de la solucin 8valor del *3- .uerza inica5 / laconcentracin de los sustratos- enzimas / co.actores ms im*ortantes$,

Efecto de la temperatura.

l aumento de la tem*eratura incrementa el movimiento de las cadenasde aminocidos / de los gru*os laterales /- *or lo tanto- aumenta la.uerza / la .recuencia de las colisiones entre las enzimas / las mol)culasque las rodean, ste aumento de las colisiones entre las mol)culas de laenzima / del sustrato .avorece- *or el contacto- la reaccin que estas

catalizan, 7in embargo- a tem*eraturas mu/ elevadas- las colisiones sonca*aces de rom*er los *uentes de hidrogeno / las .uerzas de van der9aals que- desde la *ers*ectiva individual- son relativamente d)biles: amedida que esto ocurre- el re arreglo tridimensional que *osee la enzimase altera / se *ierde su estructura .uncional,n el rango com*rendido entre los & &C / los ;& &C- se aumenta laactividad enzimtica / ocurren cambios mu/ *eque>&

C la actividadenzimtica em*ieza a disminuir hasta que- cerca de los ?& &C- cuando la*rote1na se desnaturaliza- su actividad llega a cero,

Efecto del pH.

%os cambios en el *3 alteran la actividad enzimtica *orque modi0can

las cargas de los aminocidos que no son neutros 8*or e=em*lo- el

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glutamato / la arginina5, !l a.ectarse las uniones electrostticas de los

aminocidos- se *ierde la estructura tridimensional de la *rote1na /- *or

lo tanto- su .uncin, 4iste- al igual que ocurre con la tem*eratura- un

valor de *3 *timo- alrededor- de ?-& 8*3 neutro5- en el que se alcanzala actividad enzimtica m4ima *ara la ma/or1a de las enzimas: sin

embargo- ha/ casos que se salen de ese *atrn,

Por las razones e4*uestas- es im*ortante que el organismo cuente con

los mecanismos necesarios *ara que- en las di.erentes regiones

celulares o cor*orales- los valores de la tem*eratura / del *3 se

encuentren siem*re dentro de cierto mbito *timo(,

Efecto del Tempo.

%a manera ms usual de medir la actividad de una enzima es incubar la

*re*aracin enzimtica- generalmente a @? &C- *or *eriodos variables de

tiem*o- / medir el *roducto de la reaccin enzimtica en un tiem*o

dado, 7i la reaccin es lineal en el tiem*o- hasta un *eriodo

determinado- se *uede e4*resar la actividad enzimtica en t)rminos de

velocidad- o sea la cantidad de *roducto .ormado *or unidad de tiem*o,%a velocidad de la reaccin se e4*resa generalmente como micromoles

de *roducto .ormado *or minuto- aunque cualquier otra e4*resin es

correcta si los valores se toman dentro de la linealidad de la reaccin,

%as razone de que la gra0ca no sea inde0nidamente lineal son varias,

6na es- desde luego- que la reaccin ha/a alcanzado su equilibrio- es

decir- que el sustrato se ha/a agotado *ara .ormar ms *roducto, %a

segunda razn es que la enzima- siendo una *rote1na- em*iece a

desnaturalizarse al cabo de cierto tiem*o- / *or lo tanto *ierda su

actividad, 6na tercera razn es que el *roducto de la reaccin tenga un

e.ecto inhibidor sobre la actividad de la enzima- de modo que )sta

disminu/e cuando el *roducto llega a cierta concentracin@,

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Efecto de la co!ce!trac"! de e!#ma.

n toda reaccin enzimtica- si se incrementa la concentracin de

enzimase .orma ma/or cantidad de *roducto *or unidad de tiem*o,

l incremento en la velocidad de reaccin es directamente *ro*orcional

al incremento en la concentracin de enzima- siem*re / cuando la

cantidad de sustrato no sea limitante- es decir- que el sustrato no llegue

a agotarse;,

7i la concentracin de la enzima se mantiene constante- la velocidad

inicial de reaccin enzimtica es directamente *ro*orcional a la

concentracin del sustrato *resente, n este caso la concentracin del

sustrato es el .actor limitante de la velocidad de reaccin, 7in embargo-

aunque se aumente la concentracin del sustrato la velocidad de

reaccin no aumentara *orque las mol)culas de enzima se saturaran de

)l>,

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$ROCEDIMIENTO E%$ERIMENTA&

6"M7M'FF/B'Bioqu1mica I Pgina >

'. Efecto de laco!ce!trac"! de la

Pre arar una bater1a de >

AuboAubo Aubo AuboAubo

!gregar ( ml solucinbuer glicero.os.ato

!dicionar ! ua

(,> ( ml@ ml@,(> $,>

Pre' incubar > minutos a @? #C


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!dicionar nzima

( ml$,>$ ml&,>&,(>

Incubar @& minutos a @? #C

ATC '* + ,.- ml A

Centri.ug

!gitar / de=aren oscuridad8$& minutos5

ES$ECTROOTMETRO (//* !m)

SO0RENADANTES (1.- ml) 2$ATRN ('.- ml)

A3re3ar4

Molibdato de amonio 8&,>ml5

7ol Ecido !mino "a.tol7ul.nico 8&,> ml5

!gua destilada 8$,> ml asobranadantes- ;ml alblanco /(,> ml al *atrn5

Com*arar con blanco / *atrn

1. Efecto de5arac"! de pH e!

la 5elocdad


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Pre arar una bater1a de @

AuboAuboAubo

Glicero.os.ato en agua ( ml a

Buer *3 >','$&res*ectivamente 8mismo

Pre'incubar > minutos a @? #C

ATC '* + ,.- ml A

!dicionar nzima diluida8&,> ml a todos5

Incubar @& minutos a @? #C

Centri.ug

Doa6e del fofato lberadoco! el procedme!to 3ual


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@, .ecto deltiem*o de

incubacin sobre la

Pre arar una bater1a de ;

AuboAuboAuboAubo


!dicionar ! ua destilada @ml

Pre'incubar > minutos a @? #C


Incubar a @? #C en BM

$& (& @& ;&


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ATC '* + ,.- ml A

Centri.ug


;, ariacin dtem*eratura s

la activida

;, ariacin de latem*eratura sobre la

Aubo Aubo AuboAubo


!dicionar ! ua destilada @ml

Pre'incubar > minutos a C-((#C- @?#C J ;>#C en BM


Incubar @& minutos a & #C- ((#C-@?#C / ;>#C en BM res*ectivamente

ATC '* + ,.- ml A

Centri.ug


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RESU&TADOS

E!a7o N8 '4 Efecto de la co!ce!trac"! de e!#ma (9 ://* !m)

Aubos Blanco

Patrn Aubo $ Aubo ( Aubo @ Aubo ; Aubo >

!bsorbancias

*.*/* *.;'- *.,;< *.-', *.-/* *.-/1 *.-//

!bsorbancias real *.1-- *.;=< *.,-, *.- *.-*1 *.-*/

A partr de la aborba!ca obte!da >allar lo m3 defofato del producto4

Co!ce!trac"! del patr"! de fofato4 &,&$> mgKml

7e midi $,> ml del *atrn- haciendo el siguiente clculo hallaremos losmg de .os.oro contenidos

$ ml &,&$> mg

$,> ml L

L &,&((> mg P

!hora la absorbancia del *atrn .ue de &,(>>- relacionamos esta con lasabsorbancias de los tubos *ara *oder hallar la cantidad de mg de .os.atoen cada tubo

Para el tubo $ 8&,(> m% de enzima5

&,&((> mg P &,(>>

L mg P &,@?

L &,&@@@ mg P

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Para el tubo ( 8&,> m% de enzima5

&,&((> mg P &,(>>

L mg P &,;>;

L &,&;&& mg P

Para el tubo @ 8$ m% de enzima5

&,&((> mg P &,(>>

L mg P &,>

L &,&;;$ mg P

Para el tubo ; 8$,> ml de enzima5

&,&((> mg P &,(>>

L mg P &,>&(

L &,&;;(mg P

Para el tubo > 8( m% de enzima5

&,&((> mg P &,(>>

L mg P &,>&

L &,&;; mg P

E!a7o N8 14 Efecto del pH (9 ://* !m)

Aubos Blanco Patrn Aubo$

Aubo(

Aubo@

!bsorbancias

*.*'/ *.;'< *.';' *.-*, *.1*1

!bsorbancias real

*.;*1 *.''- *.,


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A partr de la aborba!ca obte!da >allar lo m3 defofato del producto4



$ ml &,&$> mg

$,> ml L

L &,&((> mg P

!hora la absorbancia del *atrn .ue de &,@&(- relacionamos esta con lasabsorbancias de los tubos *ara *oder hallar la cantidad de mg de .os.ato

en cada tubo

Para el tubo $ 8*3 ;5

&,&((> mg P &,@&(

L mg P &,$$>

L &,&&> mg P

Para el tubo ( 8*3 ,5

&,&((> mg P &,@&(

L mg P &,;

L &,&@@ mg P

Para el tubo @ 8*3 $&5

&,&((> mg P &,@&(

L mg P &,$

L &,&$@ mg P

E!a7o N8 ;4 Efecto del tempo de !cubac"! (9 ://* !m)

Aubos Patrn Aubo Aubo Aubo Aubo Aubo

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$ ( @ ; >!bsorbancias real

*.;'- *.';; *.;-, *.,1/ *.,-< *.,=allar lo m3 defofato del producto4



$ ml &,&$> mg

$,> ml L

L &,&((> mg P

!hora la absorbancia del *atrn .ue de &,@$>- relacionamos esta con lasabsorbancias de los tubos *ara *oder hallar la cantidad de mg de .os.atoen cada tubo

Para el tubo $ 8Aiem*o & minutos5

&,&((> mg P &,@$>

L mg P &,$@@

L &,&&H> mg P

Para el tubo ( 8Aiem*o $& minutos 5

&,&((> mg P &,@$>

L mg P &,@>;

L &,&(>( mg P

Para el tubo @ 8Aiem*o (& minutos5

&,&((> mg P &,@$>

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L mg P &,;(

L &,&@&; mg P

Para el tubo ; 8Aiem*o @& minutos5

&,&((> mg P &,@$>

L mg P &,;>

L &,&@(? mg P

Para el tubo > 8Aiem*o ;& minutos5

&,&((> mg P &,@$>

L mg P &,;?

L &,&@;$ mg P

E!a7o N8 ,4 Efecto de la temperatura (9 ://* !m)Aubos Blanco Patrn Aubo

$Aubo(

Aubo@

Aubo;

!bsorbancias

*.*,/ *.;,' *.1


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$,> ml L

L &,&((> mg P

!hora la absorbancia del *atrn .ue de &,(H>- relacionamos esta con las

absorbancias de los tubos *ara *oder hallar la cantidad de mg de .os.atoen cada tubo

Para el tubo $ 8Aem*eratura &N C5

&,&((> mg P &,(H>

L mg P &,(@H

L &,&$( mg P

Para el tubo ( 8Aem*eratura $HN C 5

&,&((> mg P &,(H>

L mg P &,@H

L &,&(H? mg P

Para el tubo @ 8Aem*eratura @?N C5

&,&((> mg P &,(H>

L mg P &,;>

L &,&@;H mg P

Para el tubo ; 8Aem*eratura ;>N C5

&,&((> mg P &,(H>

L mg P &,;?

L &,&@> mg P

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DISCUSIN

La cintica enzimtica se preocupa del estudio de la velocidad de las reacciones catalizadaspor enzimas, lo que nos proporciona informacin directa acerca del mecanismo de la

reaccin cataltica y de especificidad de la enzima, en este caso la fosfatasa alcalina,

utilizada en esta prctica.Durante la prctica observamos y cuantificamos la actividad enzimtica en relacin con

algunos factores que van a modificar el curso normal de la reaccin en condiciones

normales en el organismo de la enzima mencionada anteriormente.En una reaccin tpica, la E! puede estar presente en concentraciones de orden nanomolar,mientras que la "! puede ser # o $ rdenes de magnitud mayor. %or lo tanto a medida que

aumentemos la E!, &abr una mayor cantidad de enzima que catalice la reaccin del

sustrato, aumentando as la velocidad de reaccin y por ende el producto obtenido sermayor.'

Esto es lo que se puede apreciar en la primera parte de la prctica realizada, en la cual a una

cantidad igual a (.)# mL de fosfatasa alcalina, el producto obtenido en dic&a reaccin fuede (.(*** mg+ml, a medida que aumentamos la concentracin de la enzima, el producto

tambin aumenta, siendo este igual a (.(--$ mg+ml cuando se le agreg ) mL de enzima.

%ara poder cuantificar este cambio en la actividad enzimtica a medida que aumentamos la

cantidad de enzima, se midi la cantidad total de producto formado, es decir el fosfato/ enrelacin a la E!, luego de &aber sido agregada la enzima a la solucin con su sustrato 01

glicerofosfato, este producto se pudo medir detectando la presencia de fosfato en la

solucin ya que este forma un compuesto azulado al unirse al 2olibdato y la solucin

reductora, leyendo su absorbancia en el espectrofotmetro, a una longitud de onda de

$$(nm.

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"e sabe que la absorbancia es proporcional a la cantidad de fosfato presente en el producto3

por lo que a mayor cantidad de fosfato generado por la reaccin, mayor ser la absorbancia

de la solucin obtenida como producto, tal como se muestra lneas arriba.

La medida de la velocidad de reaccin se realiza siempre en condiciones ptimas para la

enzima fosfatasa alcalina, o sea un p45 6.$ y una temperatura de *789, por lo que fue de

muc&a importancia la preincubacin de la solucin3 ya que solo despus de # minutos en elba:o mara, sistema en el que &ay agua destilada calibrada que mantiene a la ;8 deseada,

gracias a un termostato electrnico3 comprobando que esta necesita un medio ptimo para

poder reaccionar y cumplir su funcin, que es disminuir la energa de activacin, por lo que

se debe continuar con la incubacin &asta el termino del e


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prolongado de catlisis enzimtica, una vez terminada esta, la enzima nuevamente

catalizar otra reaccin, aumentando con esto el producto de la reaccin a medida que eltiempo pase.

Esto se puede comprobar con el e


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CONCLUSIONES

1 "e demostr el efecto de la concentracin de la enzima sobre la accin enzimtica de lafosfatasa alcalina, obteniendo un mayor producto a medida que aumentamos la

concentracin.

1 "e demostr el efecto de la variacin del p4 sobre la velocidad de reaccin de la

fosfatasa alcalina, donde se obtuvo una mayor cantidad de producto al p4 ptimo igual

a 6,$.

1 "e demostr el efecto del tiempo de incubacin sobre la actividad enzimtica, siendo

mayor el producto obtenido en un tiempo mayor >-( min.@.

1 "e demostr el efecto de la variacin de la temperatura sobre la actividad enzimtica

encontrndose una mayor actividad entre *7 F -# 9.

CUESTIONARIO

1. Enzima y su pH ptimo.

ENZIMA pH

Bn&idrasa carbnica $ 1 6

9olinesterasa 7,#

Lactato des&idrogenasa 7,6

Guimiotripsina 6 1 ?

DHB polimerasa I 6,' 1 ?,'

Lisozima #,)

Jibonucleasa 7.6

Bmilasa # F 7

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%epsina '.#

Brginasa ?.7

1. E!#ma co! pH "ptmo e! el ra!3o acdo.

nzima con *3 *timo en el rango cido

Pe*sina $,> O $,

%i*asa 8stomago5 ; O >

Invertasa ;,>

Maltasa ,$ O ,

!milasa 8Pncreas5 ,? O ?

!milasa 8Malta5 ;, O >

;. E!#ma Termoetable.

%as enzimas termoestables *resentan resistencia / ca*acidad de.uncionamiento a elevadas tem*eraturas,

%as enzimas termoestables se *ueden clasi0car en tres gru*os- deacuerdo al rango de tem*eratura de estabilidad termoestablesmoderadas 8;>'>#C5- termoestables 8>'>#C5 / termoestablese4tremas 8>#C5,

Debido a que las reacciones enzimticas son es*ec10cas- las enzimascon caracter1sticas de termoestabilidad *ueden ser utilizadas *arallevar a cabo reacciones que no *od1a ser *osible realizarlas *orenzimas mes0las / *or catlisis qu1mica, %a viabilidad que tienen lasenzimas termoestables les *ro*orciona la caracter1stica *ara *oder serutilizadas en nuevas a*licaciones en el .uturo,

%a im*ortancia que han adquirido las enzimas termoestables es debida aque *ueden ser utilizadas en *rocesos industriales e4igentes tales comola industria de la *iel- lavado de equi*o a tem*eraturas elevadas- laindustria de lcteos- la industria del almidn- .armac)utica- de

6"M7M'FF/B'Bioqu1mica I Pgina (&


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alimentos- te4til- s1ntesis de aminocidos- hidrolizados de *rote1na-s1ntesis orgnica- *etrleo- qu1mica / *a*el, !simismo- la o*eracin aaltas tem*eraturas tiene in2uencia signi0cativa en la viabilidad /solubilidad de com*uestos orgnicos: *or ello las enzimas

termoestables tambi)n son usadas en biorremediacin,

ntre las estrategias desarrolladas *ara obtener enzimas termoestablesse encuentra las t)cnicas de biolog1a molecular- t)cnicas deinmovilizacin- o bien la *roduccin de enzimas a *artir demicroorganismos term0los 8crecimiento *or encima de ;> NC5 / enalgunos casos hi*erterm0los 8*or encima de H& NC5,

%as enzimas *roducidas *or estos microorganismos se caracterizan *or*resentar una elevada estabilidad t)rmica e incluso resistencia a

desnaturalizantes qu1micos 8sales caotr*icas- disolventes orgnicos odetergentes5, stas venta=as .acilitan que *uedan ser utilizadas en*rocesos a tem*eratura elevada con *)rdidas m1nimas de actividad / elconsiguiente incremento en la velocidad de reaccin,

%a *resenta invencin- *or e=em*lo- tiene *or ob=eto el desarrollo de un*rocedimiento industrial *ara la obtencin de enzimas termo.1licas conactividad li*ol1tica de microorganismos term0los del g)nero Ahermus- atrav)s de su crecimiento en un *re*arado de agua termal mineral / la

recu*eracin de la actividad del medio de .ermentacin mediante un*roceso secuencial de descongelacin- congelacin / centri.ugacin dela biomasa,l *rocedimiento es de a*licacin inmediata en la industria de*roduccin de enzimas li*ol1ticas 8li*asas- esterasas5 / sus sectores dea*licacin- como la industria .armac)utica- qu1mica 0na- alimentaria /tratamiento de aguas residuales,

,. &a ecuac"! de Arr>e!u.

%a asombrosa velocidad de las reacciones catalizadas *or enzimas- sedebe *rinci*almente a dos .actores descritos *or !rrhenius,

n *rimer lugar- las enzimas disminu/en considerablemente la energ1ade activacin- necesaria *ara que las mol)culas reaccionen,

6"M7M'FF/B'Bioqu1mica I Pgina ($


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n segundo lugar las enzimas *oseen un sitio catal1tico o sitio activo-donde el sustrato / los co.actores / coenzimas necesarios- comomol)culas reaccionante- se encuentran con la est)reo es*eci0cidadadecuada *ara que interaccionen correctamente- a di.erencia de lo que

ocurre en la reaccin no catalizada- en que las mol)culas chocan al azaren cualquier *osicin,

Aal vez *ueda mencionarse un tercer .actor- las enzimas se hallan-dentro de la c)lula- restringidas en com*artimentos .uncionaleses*ec10cos- n+cleo- membrana- mitocondria- etc, donde deben realizarsu accin- /Ko .ormando grandes com*le=os enzimticos donde lossustratos / *roductos *asan de un com*onente del com*le=o a otro-.acilitando su interaccin,

Como se sabe la ecuacin de !rrhenius es

7e sabe adems que esta e4*resin ! ! 8A5 / varia seg+n A &,>, 7i seconsidera que el termino de la e4*onencial es no nulo / grande- es mu/*robable que la variacin de la constante de velocidad de reaccin conla tem*eratura sea mucho mas sensible a la e4*onencial que el .actor.recuencia 8!5 / *or tanto es *osible asumir que Q! es una constante sinequivocarse demasiado,

Con el 0n de .acilitar el clculo de la energ1a de activacin- se *uedemani*ular la e4*resin de !rrhenius a*licando logaritmo naturalobteniendo

Aomando ln S J- ln ! b / '$KRA L se tiene la recta de ti*o J b TmL con m a, Por tanto- es razonable tomar series de datos detem*eratura vs constante de velocidad, Calculando L e J / realizandouna regresin lineal se obtiene los valores buscados,

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-. Dura!te u! e!a7o de c!etca de u!a reacc"! catal#adae!#m@tcame!te lo 3ue!te dato fuero! re3trado4

E* (3B&) T ( C) I (mmolBm&) S(mmolBm&)

(mmolBm&

m!)'./ @& & &,$ (,@'./ @& & &,&@@ $,H('./ @& & &,&( $,;?'./ @& & &,&$ &,H'./ @& & &,&&> &,>'./ ;H, & &,$ >,$@'./ ;H, & &,&@@ @,?'./ ;H, & &,&$ $,H'./ ;H, & &,&&? $,;@'./ ;H, & &,&&> $,$$

*.?1 @& & &,$ $,;*.?1 @& & &,&( &,H&*.?1 @& & &,&$ &,>*.?1 @& &, &,$ $,@@*.?1 @& &, &,&@@ &,&*.?1 @& &, &,&( &,>?

a) Determ!e la co!ta!te de Mc>aelMe!te! para la reacc"!! !>bdor pree!te e! ;* C 7 e! ,?./ C.

Para @&NC / U $, gK%

6tilizando la recta de %inenVeaver'BurS o de dobles inversos

7:bF a 8a &,@&@;( : b ?,;&& 4 $&'@ 5

!hora la ecuacin de %inenVeaver'BurS

Reem*lazando

6"M7M'FF/B'Bioqu1mica I Pgina (@


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$Kma4 a

ma4 $Ka

ma4 @,(H>8mmolKm%'min5

%uego

WmKma4 b

Wm 8ma458b5

m: *.*1,, mmolBm&

Para @&NC / U &,H( gK%


7:bF a 8a &,;$ : b &,&$(@5


Reem*lazando$Kma4 a

ma4 $Ka

ma4 (,&;?8mmolKm%'min5

%uego

WmKma4 b

Wm 8ma458b5m: *.*1-' mmolBm&

Para ;H,NC / U $, gK%


7:bF a 8a &,$>? : b @,H? 4 $&'@ 5

6"M7M'FF/B'Bioqu1mica I Pgina (;


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Reem*lazando

$Kma4 a

ma4 $Ka

ma4 ,@;>$8mmolKm%'min5

%uego

WmKma4 b

Wm 8ma458b5

m: *.*1;, mmolBm&

b) Determ!e la 5elocdad m@Fma de la reacc"! !o !>bda e!;* C 7 u!a co!ce!trac"! e!#m@tca de './ 3B&.

Para @&NC / U $, gK%


7:bF a 8a &,@&@;( : b ?,;&& 4 $&'@ 5


6"M7M'FF/B'Bioqu1mica I Pgina (>


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Reem*lazando

$Kma4 a

ma4 $Ka

maF : ;.1?-/ mmolBm&m!

c) Determ!e el para el !>bdor e! ;* C 7 decda uJ tpo de!>bdor et@ e!do uado.


6tilizando la recta de %inenVeaver'BurS o de dobles inversos en*resencia de inhibidor

7:bF a 8a &,;H?? : b &,&(>&>5


Reem*lazando

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