IDENTIFIKASI SENYAWA GOLONGAN ALKALOID DAN BASA NITROGEN,SULFONAMIDA DAN BARBITURAT, SERTA ANTIBIOTIKA

I. Tujuan1. Mengidentifikasi senyawa golongan alkaloid dan basa nitrogen2. Mengidentifikasi senyawa golongan sulfonamida dan barbituratII. PrinsipAlkaloid1. Golongan alkaloid dapat bereaksi dengan reagensia dragendorf, dapat diamati dari terbentuknya endapanSulfonamida 1. Pengkopelan senyawa golongan sulfonamida dengan reagensia p-DAB menghasilkan endapan dengan spektrum warna kuning hingga merahIII. Reaksi Reaksi kini dengan asam sulfat

Reaksi papaverin dengan asam sulfat

(kelly,2009) Reaksi efedrin dengan CuSO4 dan NaOH

Reaksi heksamin dengan Liebermann

Reaksi sulfamerazin dengan vanilin sulfat pekat

Reaksi sulfonamida dengan pDAB

IV. Data PengamatanAlkaloid dan basa nitrogen Kinin HClNOPERLAKUANHASILFOTO

1.Larutan zat dalam airMenghasilkan warna biru muda

Zat dalam asam sulfatMenghasilkan fluoresensi warna tosca yang kuat

Zat dalam NaOHMenghasilkan fluoresensi kuning lemah

Zat kininTidak berfluoresensi

2.Pembuatan kristal dengan HgCl2Terdapat kristal

PapaverinNOPERLAKUANHASILFOTO

1.Sampel + reagensia liebermanBerwarna putih bening

2.Sampel + reagensia MandelimMenghasilkan warna hijau kehitaman, dan berbuih

3.10 mg zat + 1 mL anhidrida asam asetat + 3 tts asam sulfat pekatMenghasilkan fluoresensi hijau lemah

4.Pembentukan kristal dengan HgCl2Terdapat kristal

EfedrinNOPERLAKUANHASILFOTO

1.Sampel + reagensia liebermanMenghasilkan warna jingga kemerahan dan endapan jingga

2.Sampel + larutan CuSO4 + NaOH encerMenghasilkan warna biru muda terang

3.Pembentukan kristal dengan HgCl2Terdapat kristal

HeksaminNOPERLAKUANHASILFOTO

1.100 mg zat +100 mg asam salisilat + 1 mL H2SO4 + panaskanMenghasilkan larutan putih keruh

2.Sampel + asam sulfat encer + itts formaldehid + kertas lakmusLakmus merah tidak berubah warna

3.Pembuatan kristal dengan cara sublimasiTerdapat kristal

Sulfonamida dan Barbiturat Sulfanilamid NOPERLAKUANHASILFOTO

1.Sampel+HCl encer + reagensia p-DABMenghasilkan larutan berwarna kuning kejinggaan

2.Sampel + CuSO4Menghasilkan warna biru pucat

3.Sampel + vanilin + asam sulfatMenghasilkan warna kuning bening

4.Pembentukan kristal dengan aseton airTerdapat kristal

Sulfamerazin NOPERLAKUANHASILFOTO

1.Sampel + reagensia p-DABMengahasilkan warna jingga kemerahan

2.Sampel + q.s NaOH 0,1 M + reagensia CuSO4Menghasilkan warna biru muda

3.Sampel + vanilin + asam sulfatMengahasilkan warna kuning hingga jingga

V. Pembahasan Pada praktikum kali ini dilakukan reaksi reaksi pendahuluan terhadap senyawa golongan alkaloid dan basa nitrogen serta senyawa golongan sulfonamida dan barbiturat. Pada praktikum ini dilakukan banyak reaksi warna untuk uji identifikasi dengan sampel yang digunakan adalah kinin, papaverin, efedrin, heksamin,sulfanilamid, dan sulfamerazin.Prinsip identifikasi untuk golongan alkaloid sendiri yaitu dapat bereaksi dengan reagensia dragendorf yaitu dengan menghasilkan endapan jingga. Pada identifikasi alkaloid dengan pereaksi dragendorf, nitrogen digunakan untuk membentuk ikatan kovalen koordinat dengan bismut menghasilkan endapan jingga sampai merah (marliana,2005).Sampel yang pertama dari golongan alkaloid yang di identifikasi adalah Kinin HCl. Sejumlah zat ditaruh kedalam beberapa lubangg diatas pelat tetes kemudian ditambahkan berbagai macam pelarut yaitu air, asam sulfat, NaOH ,dan tanpa perlakuan. Pelat tetes yang berisi zat tadi diletakkan dibawah lampu UV dengan panjang gelombang 254nm untuk diamati fluoresensinya. Sampel yang dilarutkan dalam air menghasilkan biru muda , sedangkan untuk sampel yang ditambahkan asam sulfat menghasilkan fluoresensi berwarna biru tosca yang kuat. Sampel yang dilarutkan dalam natrium hidroksida menghasilkan fluoresensi warna kuning lemah dan sampel yang tidak diberi perlakuan apapun tidak terlihat warna fluoresensinya. Intensitas fluoresensi senyawa heterosiklis yang mengandung gugus NH karena gugus N mengalami protonasi yang menghasilkan warna lebih terang dibandingkan dengan penambahan larutan ber pH basa. Adanya oksigen dalam asam sulfat juga menyebabkan penurunan intensitas fuoresensi atau yang sering disebut dengan quenchin. Hal ini tejadi karena terjadinya oksidasi senyawa oleh molekul oksigen karena pengaruh cahaya. Uji identifikasi selanjutnya yang dilakukan terhadap kinin HCl yaitu pembentukan kristal dengan HgCl2. Adapn langkah yang dilakukan yaitu dengan melarutkan sampel kedalam sejumlah HCl encer diatas kaca preparat. Setelah itu ditaburkan serbuk HgCl2 menggunakan spatel karena sifat HgCl2 yang korosif. Setelah itu preparat diamati dibawah objek. Kristal yang terbentuk yaitu bulat lonjong dan seperti terdapat lingkaran berbentuk lonjong lagi didalamnya.Sampel alkaloid yang akan diidentifikasi selanjutnya adalah papaverin HCl. Uji identifikasi yang pertama kali dilakukan yaitu identifikasi dengan reagensia liebermann. Reagen ini terdiri dari NaNO2 dan asam sulfat. Sejumlah zat diletakkan dalam tabung reaksi kemudian diteteskan reagensia lieberman sebanyak 2 sampai 3 tetes kemudian dilakukan pemanasan. Hasil dari identifikasi ini adalah perubahan warna zat yang tadinya putih menjadi larutan berwarna putih bening. Perubahan warna ini bisa terjadi karena adanya reaksi antara cincin benzen dengan pereaksi lieberman sehingga mengakibatkan susunan struktur papaverin HCl berubah dan menimbulkan perubahan warna. Identifikasi selanjutnya yaitu menggunakan pereaksi mandellin. Sejumlah sampel ditempatkan diatas pelat tetes kemudian ditambahkan sebanyak 2 sampai 3 tetes pereaksi mandellin. Warna yang ditimbulkan adalah hijau botol atau hijau tua yang disertai dengan buih. Buih yang dihasilkan merupakan salah satu karakteristik dari golongan alkaloid yaitu dapat menghidrolisis senyawa yang berikatan dengannya. Uji identifikasi yang ketiga dari papaverin HCl adalah uji fluoresensi dengan cara sejumlah 10 mg zat ditambahkan dengan 1 mL anhidrida asam asetat dan 3 tetes asam sulfat pekat. Penambahan reagen tersebut sudah merubah warna sampel menjadi jingga. Setelah itu sampel diletakkan dibawah UV 254 nm yang menghasilkan warna fluoresensi hijau. Warna tersebut mengindikasikan adanya papaverin HCl dalam sampel. Identifikasi terakhir yang dilakukan untuk papaverin HCl adalah uji pembentukan kristal dengan HgCl. Prosedur yang dilakukan sama seperti sebelumnya yaitu melarutkan sedikit zat dengan HCl diatas preparat kaca , kemudian dengan menggunakan spatel ditaburkan serbuk HgCl2. Kristal yang teramati mirip bentul hexagonal.Sampel alkaloid selanjutnya yang akan diidentifikasi adalah efedrin. Uji identifikasi yang pertama dilakukan adalah identifikasi dengan reagensia lieberman. Sejumlah zat diletakkan diatas pelat tetes kemudian ditambahkan 2 sampai 3 tetes pereaksi lieberman. Perubahan yang dihasilkan dari identifikasi ini yaitu terbentuknya gelembung putih dan larutan putih keruh. Hal ini disebabkan oleh adanya reaksi antara reagensia liebermann dengan cincin benzen yang dimiliki oleh struktur efedrin. Gelembung yang terbentuk juga merupakan reaksi khas dari golongan alkaloid yang mampu menghidrolisis senyawa yang berikatan dengannya. Hasil positif dari identifikasi dengan reagensia lieberman ini adalah menghasilkan larutan berwarna jingga dan endapan jingga. Untuk mencapai hasil tersebut maka dibutuhkan pemanasan. Setelah pemanasan parameter positif telah dipenuhi yaitu terdapatnya larutan berwarna jingga kemerahan dengan sedikit endapan jingga. Identifikasi kedua yang dilakukan terhadap sampel papaverin yaitu dengan CuSO4 dan natrium hidroksida. Sejumlah sampel diletakkan diatas pelat tetes kemudian tambahkan larutan CuSO4 dan natrium hidroksida. Tembaga membentuk senyawa dengan tingkat oksidasi +1 dan +2, potensial oksidasinya bertanda negatif sehingga tembaga otomatis lebih sukar teroksidasi dibandingkan dengan hidrogen. Larutan tembaga sulfat dalam asam akan mengakibtakan terjadinya hidrolisis dan segera menyerap asam sehingga manghasilkan warna kuning. Selanjutnya dilakukan penambahan NaOH dimana tembaga juga mengakibatkan hidrolisis dan menyerap basa sehingga menghasilkan larutan yang berwarna biru. Identifikasi terakhir yang dilakukan pada efedrin yaitu dengan pembentukan kristal menggunakan HgCl2. Kristal yang terbentuk adalah kristal yang padat seperti yang dapat dilihat pada data pengamatan.Selanjutnya dilakukan identifikasi terhadap heksamin yang merupakan bagian dari senyawa golongan alkaloid dan basa nitrogen. Heksamin adalah senyawa organik heterosiklik dengan rumus (CH2)6N4 yang merupakan senyawa kristal putih sangat larut dalam air dan pelarut organik polar. memiliki struktur mirip dengan adamantane yang berguna dalam sintesis senyawa kimia lainnya, misalnya plastik, farmasi, karet aditif, atau dalam proses penyubliman dalam vakum pada 280C.Hexamethylenetetramine berasal dari reaksi formaldehida dan amonia. Reaksi ini dapat dilakukan dalam fase gas dan dalam larutan. Molekul ini memiliki struktur tetrahedral simetris, mirip dengan adamantane yang empat sudutnya adalah atom nitrogen dan pinggirnya adalah jembatan metilen serta tidak memiliki ruang kosong untuk mengikat atom atau molekul lain. Identifikasi pertama yang dilakukan untuk heksamin yaitu dengan mencampurkan 100 mg sampel dengan 100 mg asam salisilat. Molekul heksamin bersifat sebagai basis amina dan dilakukan penambahan asam salisilat sehingga mengalami protonasi yaitu penerimaan sebuahproton(kationhidrogenH+) dari asam salisilat lalu membentuk konjugat asam. Kemampuan relatif sebuah molekul untuk melepaskan sebuah proton diukur dengan menggunakan nilaipKa. Nilai pKa yang rendah mengindikasikan bahwa senyawa tersebut asam dan akan dengan mudah melepaskan protonnya kepadabasa. pKa sebuah senyawa ditentukan oleh banyak faktor, namun yang paling signifikan adalah diakibatkan oleh stabilitas konjugat asam, yaitu kemampuan sebuah konjugat asam untuk menstabilkan muatan negatif. Muatan negatif tersebut akan distabilisasi ketika terdistribusi ke permukaan yang luas atau rantai yang panjang. Salah satu mekanisme yang mendistribusi muatan negatif pada rantai panjang atau sebuah cincin adalahresonansi. Pelarut juga dapat membantu stabilisasi muatan negatif dari konjugat asam. Asam yang digunakan untuk melakukan protonasi tergantung pada pKasebuah senyawa. Ketika proton tidak begituasam, sehingga molekul tersebut tidak akan melepaskan proton dengan mudah, asam yang lebih kuat daripadahidroksidadiperlukan.Hidridaadalah salah satu dari banyak agen protonasi yang kuat yang membentukgashidrogenketika proton dari molekul lain dilepaskan. Namun hasil produk hidrogen juga berarti bahwa protonasi yang menggunakan agen-agen tersebut akan berbahaya dan harus dilakukan padaatmosferinert(misalnyanitrogen) karena air, yang merupakan sumber proton, berada di udara bebas dan hidrida akan bereaksi dengan air ketimbang dengan molekul yang kita inginkan dan akan meledak. Lalu terjadi proses N-alkilasi, Alkilasi merupakan penambahan jumlah atom dalam molekul menjadi molekul yang lebih panjang dan bercabang sehingga didapatkan warna menjadi larutan putih keruh. Uji identifikasi selanjutnya yaitu dengan uji lakmus. Sejumlah zat dimasukkan kedalam tabung reaksi , kemudian kedalam tabung tersebut ditambahkan asam sulfat encer dan satu tetes formaldehid. Ujung tabung reaksi tadi kemudian ditutup kapas dan kertas lakmus merah yang sudah dibasahi. Seperti yang telah dibahas sebelumnya bahwa heksamin merupakan senyawa basis amina yang memiliki pH basa. Tetapi terdapat asam sulfat yang memungkinkan terjadinya protonasi sehingga heksamin menjadi cenderung asam dan kertas lakmus yang ditaruh pada ujung tabung yang pada awalnya berwarna merah akan tetap menjadi merah meskipun melaui perlakuan tersebut. Uji identifikasi terakhir yang dilakukan terhadap heksamin yaitu dengan pembentukan kristal menggunakan ring sublimasi. Adapun langkah yang dilakukan yaitu diatas kaca preparat diletakkan ring sublimasi. Kemudian kedalam ring tersebut dimasukkan sedikit sampel. Preparat kaca yang telah dilapisi vaselin diletakkan diatas ring sublimasi dengan bagian yang diberi vaselin menempel dengan ring sublimasi. Tujuan penambahan vaselin ini yaitu agar saat terjadi proses sublimasi tidak ada zat yang keluar dari ring yang akan memperkecil hasil kristal yang didapat. Kemudian diatas kaca preparat terakhir, diletakkan kapas basah. Fungsi kapas basah ini seolah-olah shock freezing sehingga kristal dapat segera terbentuk karena adanya perbedaan suhu yang drastis. Kristal yang terbentuk mirip dengan bentuk trapesium yang dapat dilihat pada data pengamatan.Selanjutnya akan dilakukan identifikasi dengan senyawa golongan sulfanilamid. Pada prinsipnya ,untuk identifikasi golongan sulfanilamid dengan menggunakan reagensia p-DAB yang akan membentuk senyawa kompleks berwarna kuning hingga merah.Sulfanilamid merupakan bagian dari senyawa golongan sulfonamida. Uji identifikasi pertama yang dilakukan terhadap sulfanilamid yaitu mereaksikan sampel dengan reagensia p-DAB. Dari identifikasi ini menghasilkan warna orange dan endapan orange. Hal ini disebabkan oleh adanya reaksi antara reagensia p-DAB dengan gugus NH2 pada sulfonamida sehingga dihasilkannya perubahan warna menjadi oranye. Uji identifikasi yang kedua terhadap sulfanilamid yaitu dengan penambahan CuSO4 seperti yang telah dibahas sebelumnya bahwa atom tembaga membentuk senyawa dengan tingkat oksidasi +1 dan +2, potensial oksidasinya bertanda negatif sehingga tembaga otomatis lebih sukar teroksidasi dibandingkan dengan hidrogen. Larutan tembaga sulfat dalam asam akan mengakibtakan terjadinya hidrolisis dan segera menyerap asam sehingga manghasilkan warna kuning. Selanjutnya dilakukan penambahan NaOH dimana tembaga juga mengakibatkan hidrolisis dan menyerap basa sehingga menghasilkan larutan yang berwarna biru. Identifikasi selanjutnya yang dilakukan yaitu dengan penambahan reagensia vanilin sulfat. Sejumlah sampel diletakkan diatas pelat tetes kemudian ditambahkan sejumlah serbuk vanilin lalu diteteskan larutan asam sulfat. Dari hasil identifikasi ini didapatkan perubahan warna menjadi warna kuning. Identifikasi untuk sulfanilamid yang terakhir yaitu pembentukkan kristal dengan menggunakan aseton air . sejumlah sampel dilarutkan dalam air, kemudian larutan tersebut dipipet dan dipindahkan keatas kaca preparat, setelah itu larutan tersebut ditetesi dengan sedikit aseton. Aseton dibiarkan menguap dan diamati bentuk kristal yang terjadi. Dari hasil pengamatan bentuk kristal yang didapatkan yaitu berbentuk jarum.Sampel kedua yang merupakan bagian dari senyawa golongan sulfonamida adalah sulfamerazin. Uji identifikasi pertama yang dilakukan terhadap sulfamerazin adalah dengan reagensia p-DAB. Sejumlah sampel tertentu diletakkan diatas pelat tetes kemudian ditambahakn 2 sampai 3 tetes reagen p-DAB. Dari identifikasi ini dihasilkan warna jingga kemerahan. Perubahan warna ini disebabkan oleh pada percobaan ini gugus pDAB akan bertubrukan dengan gugus dari masing-masing sampel dimana pada reaksi ini akan terjadi perpindahan dari gugus karbon, hidrogen dan oksigen dari senyawa pDAB kedalam gugus sampel yang sedang diuji sehingga menghasilkan gugus benzen yang telah berikatan dengan gugus amin dan gugus karbon, hidrogen dan oksigen yang berasal dari pereaksi tersebut dan menghasilkan produk samping yaitu asam sulfat. Identifikasi yang dilakukan selanjutnya yaitu penambhan CuSO4 kedalam sampel diatas pelat tetes. Dari hasil identifikasi ini didapatkan perubahan warna zat menjadi biru pucat. Penambahan NaOH ke dalam sampel tidak merubah warna sampel (warna putih) sehingga saat ditambahkan CuSO4 warnanya berubah menjadi warna biru tua dengan endapan hitam, penambahan NaOH hanya bertindak sebagai katalisator dan induktor yang akan memulai reaksi antara sampel dengan CuSO4 dimana yang akan melakukan hal tersebut adalah gugus OH pada NaOH, induktor dan katalisator yang digunakan pada reaksi ini merupakan induktor dan katalisator basa dimana selain indikator dan katalisator basa terdapat juga indikator dan katalisator asam yang biasanya digunakan asam sulfat atau asam klorida. Identifikasi terakhir yang dilakukan terhadap sulfamerazin yaitu dengan penambahan reagensia vanilin sulfat. Sejumlah sampel diletakkan diatas pelat tetes kemudian kedalam pelat tersebut ditambahakan serbuk vanilin dan beberapa tetes asam sulfat. Hasil dari identifikasi tersebut adalah adanya perubahan warna yaitu larutan kuning dan endapan oranye.

VI. Kesimpulan 1. Senyawa alkaloid dan basa nitrogen dapat diidentifikasi menggunakan pereaksi dragendorf sebagai reaksi penggolongan umum. Untuk penggolongan lebih lanjut dapat digunakan pereaksi liebermann, mandellin, CuSO4, asam sulfat serta pembentukkan kristal.2. Senyawa sulfonamida dapat diidentifikasi dengan reaksi pengkopelan menggunakan p-DAB sebagai identifikasi umum. Untuk identifikasi lebih lanjut dapat digunakan CuSO4 , vanillin sulfat,p-DAB dan pembentukkan kristal.

DAFTAR PUSTAKA

Roth,Herman,J. 1985.Analisis Farmasi. Yogyakarta : UGM PressSvehla. 1985. Textbook of Practical Organic Chemistry. London : Longman Kelly,W.N. 2009. Pharmacy:What It Is and How It Works. New york: CRC press.Lide. 2002. Handbook of Chemistry and Physics. New york : CRC Press

LAPORAN AKHIR PRAKTIKUM ANALISIS FISIKOKIMIA

Identifikasi Senyawa-Senyawa Golongan Alkohol, Fenol, dan Asam Karboksilat

Disusun Oleh :Dewi Permatasari260110120166

LABORATORIUM ANALISIS FISIKOKIMIA 2FAKULTAS FARMASIUNIVERSITAS PADJADJARAN2014