HPLC sistemleri

  • View
    11.456

  • Download
    4

Embed Size (px)

Text of HPLC sistemleri

Sreyya ZCANHacettepe niversitesi Gda Mh. Bl.

Hacettepe niversitesi

erik

HPLCnin Tarihesi HPLCde Ayrma Ayrmada Rol Alan Unsurlar HPLC Sistemleri HPLCde Kullanlan Dedektrler Floresans Dedektr HPLCnin Kullanm Alanlar

HPLC Tarihesi

M.S. Tswett. Ber. Dtsch. Bot. Ges. 24: 384-393 (1906)

1906 - Mikhail Semenovich Tswett

HPLC Tarihesi1906 - Mikhail Semenovich Tswett (1872-1919) Calcium Carbonate, Petroleum Ether 1931- Kuhn ve Lederer 1938 - Ismailov ve Schraiber 1940's Consden, Gordon ve Martin Partisyon ve Kat Kromatografisi 1950's Stahl Gaz, nce-Tabaka, Jel-Szme ve Gradient Elution Kromatografisi 1960's - Ticari HPLCye giri

Ayrma

ABsorpsiyon

ADsorpsiyon

AyrmaAyrma, durgun faz ile hareketli faz arasndaki ge baldr. Durgun Faz Kolon ierisinde sabit duran faz r. C18, SilicaEnjektr

Kartrc

Hareketli Faz Numuneyi durgun faz zerinde tayan fazdr.

Pompalar

Kolon

Detektr

Solvan

Atk

Yksek Performansl Sv Kromatograf

AyrmamAUAfl G2 Afl G1

Afl B1

Afl B2

Enjektr

EnjeksiyonKartrc

zaman

Pompalar

Kolon

Detektr

Solvan

AyrmamAU

Kromatogram

Afl B1

Afl G2

Afl B2 Afl G1

Enjektr

EnjeksiyonKartrc

zaman

Pompalar

Kolon

Detektr

Solvan

Ayrmada Rol Alan Unsurlar

Kolon Seimi Durgun faz, partikl bykl, vs.. Kolon Uzunluu Hareketli Faz Bileimi Kolon Scakl Ak Hz

HPLC Sistemleri

zc Kabini Vakum degasser Pompa

Kontrol Modl Otornekleyici

Kolon kompartman Dedektr

Genel HPLC DedektrleriRayoaktivite letkenlik LC/IR

MS FLD 8% Elektro 10% RI 10% LS UV-VIS 65%

Performans zellikleri

Detektr performans zellikleri: Hassasiyet (LOD, LOQ) Seicilik Lineerlik Kalitatif Bilgi Gvenilirlik Kullanm kolayl niversal olmas

Floresans Dedektr

Excitation Light Source

Flow Cell

Variable Excitation and Emission Wavelengths

Emission

Photomultiplier Tube

Floresans Dedektr zellikleri Floresans sadece seyreltik zeltiler iin lineerdir. Emisyon lm sadece 900 de yaplmakta ve a ile bir tek dalga boyu seimi yaplmaktadr. Bu sebeple lm ok hassastr. Baz kimyasallar floresans yok ederek hassasiyeti azaltr (i.e., O2). Eksitasyon dalga boyunda absorbsiyon yapan zcler kullanlmamaldr. FLD detektrleri ak hz ve s deiikliinden fazla etkilenmemektedir. Seici detektrlerdir.

FLD UygulamalarMikotoksin Analizleri

HPLC Uygulamalar

Biyolojik Bilimler Kimyasalpolistirenl er boyalar fitalatlar proteinler peptidler nucleotidler

tetrasiklinler lalar hormonlar antidepressantlar barbituratlar

Tketici rnleriyalar Antioksidan bileikler ekerler

evrepoliaromatik hidrokarbonlar Inorganik iyonlar herbisitler

Klinikamino asitler vitaminler

Teekkrler...