Haltoxicitási teszt: prolongált 14 napos OECD No. 204

Haltoxicitási teszt: Haltoxicitási teszt: prolongált 14 napos prolongált 14 napos

OECD No. 204 OECD No. 204

Készítette: Nagy RenátaA Környezettoxikológia c.

tárgyhoz

Vegyészmérnöki és Biomérnöki Kar

Környezetmérnök Szak

11

A tesztA teszt

Feladat: vízhez adott vegyianyag toxicitásának vizsgálata. A teszthez édesvízi halfajokat kell alkalmazni. A mérés végpontja a halak pusztulása.

NOEC értéket kell meghatározni.

A teszt időtartama: 14 nap (meghosszabbítható: 1-2 héttel)

22Hal, prolongált 14 napos Hal, prolongált 14 napos

toxicitási teszttoxicitási teszt

A vizsgált vegyianyag tulajdonságaiA vizsgált vegyianyag tulajdonságaiTulajdonságok: vízben való oldhatóság gőznyomás kémia szerkezet anyag tisztaság mennyiségi meghatározásra szolgáló elemzés módszer kémiai stabilitás oktanol-víz megoszlási hányados

Ezek a használt módszer kiválasztásához szükséges információk. Módszer lehet: fél-statikus vagy átfolyásos módszer.

Vizsgálat időtartama alatt biztosítani kell a vegyi anyag állandó koncentrációját.



A teszthez ajánlott fajokA teszthez ajánlott fajokajánlott fajok

ajánlott tesztelési hőmérséklet (°C)

teszteléshez használt halak ajánlott teljes testhossza

(cm)név latin név

zebrahal Brachydanio rerio 21 - 25 2,0 + 1,0

amerikai ponty félePimephales promelas 21 - 25 2,0 + 1,0

közönséges ponty Cyprinus carpio 20 - 24 3,0 + 1,0

japán rizshal Oryzias latipes 21 - 25 2,0 + 1,0

szivárványos guppi Poecilia reticulata 21 - 25 2,0 + 1,0

kékkopoltyús naphalLepomis macrochirus 21 - 25 2,0 + 1,0

szivárványos pisztrángOncorhynchus mykiss 13 - 17 5,0 + 1,0

A teszthez ajánlott néhány faj (1)A teszthez ajánlott néhány faj (1)

Hal, prolongált 14 napos Hal, prolongált 14 napos toxicitási teszttoxicitási teszt 55

Pimephales promelas Cyprinus carpio

A teszthez ajánlott néhány faj (2)A teszthez ajánlott néhány faj (2)

Hal, prolongált 14 napos Hal, prolongált 14 napos toxicitási teszttoxicitási teszt 66

Oryzias latipes Poecilia reticulata

Alkalmazott halakAlkalmazott halak

Laboratóriumban vagy halgazdaságban tenyésztett halakat kell használni. Fontos a származás ismerete. Betegség- és parazita-mentes körülmények között kell nevelni őket, annak érdekében, hogy a kísérleti állat egészséges legyen. Ezt folyamatosan ellenőrizni kell. A teszthez alkalmazott halaknak a világ minden részén rendelkezésre kell állni.

A teszthez egy vagy több faj is használható.



Alkalmazott halakAlkalmazott halak

Kiválasztás szempontjai: egész évben könnyen beszerezhető könnyen fenntartható kedvező gazdasági, biológiai,

ökológiai tényezők jó egészségi állapot rendellenességtől mentes



Állatok előkészítése a tesztreÁllatok előkészítése a tesztre

A halakat 12-15 nappal a vizsgálat megkezdése előtt be kell szerezni.

A teszt előtt legalább 7 napig a teszthez használt minőségű vízben kell tartani. Bármilyen zavaró tényezőt, ami megváltoztathatja a halak viselkedését,meg kell szüntetni.

Használhatunk ivóvizet ( ha szükséges klórmentes), jó minőségű természetes vizet vagy művizet. A vízkeménységnek 50-250 CaCO3 mg/ liter között kell leni, pH esetében 6,0-8,5 közötti érték ajánlott.



Előkészítés körülményeiElőkészítés körülményei fény: 12-16 óra naponta hőmérséklet: az adott fajnak megfelelő oxigén koncentráció: legalább a levegő

telítettségi értékének a 80%-a etetés: naponta egyszer halálozás:több, mint 10%: a teljes tétel elutasítása5 és 10% közötti: akklimatizációt

folytatni kell még hét napigkevesebb, mint 5%: tétel elfogadása



Teszt típusokTeszt típusok

Fél-statikus vizsgálat (semi-static test): az oldat áramlása nélküli vizsgálat. A vizsgálat során a hosszabb időszakok (pl.: 24 óra) után ki kell cserélni az oldatokat.Átfolyásos vizsgálat (flow-through test): A vizsgálat során a vizet folyamatosan cseréljük a vizsgálati kamrákban.



Teszthez használt berendezésekTeszthez használt berendezésekFontosabb eszközök: hőmérséklet mérő pH mérő oxigén-koncentráció mérő vízkeménység meghatározására szolgáló berendezés megfelelő készülék a hőmérséklet szabályozásához

A berendezések és a használt eszközök kémiailag semleges anyagból készülnek.

A teszt során a pH-t, oldott oxigént és a hőmérséklet legalább hetente kétszer kell mérni.



Hígítási sor készítése Hígítási sor készítése Megfelelő töménységű törzsoldat készítünk. Ebből hígítással elkészítjük a méréshez szükséges koncentrációkat.

Vízben rosszul oldódó vegyi anyag esetén az oldódást segíthetjük mechanikai diszperzióval, szerves oldószerrel, emulgeálószerrel vagy diszpergálószerrel. A segédanyagok koncentrációja a vizsgálati oldatban nem haladhatja meg a 100 mg/l-t.

Bármilyen segédanyag használata esetén, a kontroll halakat is ki kell tenni a segédanyag ugyanolyan koncentrációjának, mint amelyet a vizsgálati sorozatokban alkalmaztunk.

A vizsgálatok során nem szüksége a pH-érték beállítása. Azonban ha bizonyítani lehet, hogy a pH-nak jelentős hatása van a teszt eredményére, akkor ajánlatos a pH beállítása után megismételni a mérést.



Teszt körülményekTeszt körülmények időtartam: 14 nap (növelhető 1-2 héttel) kapacitás: fél-statikus vizsgálatok maximális terhelés 1,0 g hal / liter átfolyásos rendszer esetében magasabb terhelés is elfogadható állatok száma: legalább 10 etetés: naponta többször: (a takarmánygabona mennyisége nem

haladhatja meg a halak által azonnal elfogyasztott mennyiséget) naponta: állandó mennyiséggel tisztítás: átfolyásos vizsgálatot: tartály belső felületét legalább hetente

kétszer fél-statikus vizsgálat: a vizsgálati tartály cseréje meghatározott

időközönként



Teszt körülmények (2)Teszt körülmények (2) víz: használhatunk ivóvizet ( ha szükséges

klórmentes), jó minőségű természetes vizet vagy kezelt vizet. A vízkeménység 50-250 CaCO3 mg/ liter között, pH 6,0-8,5 között ajánlott. A hígításhoz analitikai tisztaságú ionmentes vagy desztillált vizet kell használni, aminek a vezetőképessége maximum 10 μS/cm.

fény: napi 12-16 óra hőmérséklet: az adott fajnak megfelelő állandó

hőmérséklet ± 2 ° C oxigén koncentráció: legalább a levegő telítettségi

értékének a 60%-a



Vizsgálat érvényességének Vizsgálat érvényességének feltételei:feltételei:

A kontrollcsoportban a halálozás nem haladhatja meg a 10%-t a vizsgálat végéig.Állandó feltételeket kell biztosítani a vizsgálat végéig.Bizonyíték kell, hogy a vegyi anyag koncentrációja kielégítően fenntartható a vizsgálat végéig. A vegyi anyag koncentrációja a kezdeti koncentráció 80%-án belüli értéken kell tartani. Az oldott oxigén koncentrációja nagyobbnak kell lenni, mint a levegőtelítettségi érték 60%-a. Fél-statikus teszt esetében lehet levegőztetést is alkalmazni, ha ez nem befolyásolja a teszt eredményét.



MegfigyelésekMegfigyelésekMegfigyelt adatok: pusztulás: a hal élettelen, ha érintésre nem reagál

(naponta ellenőrizni kell) egyéb elváltozások: méretbeli elváltozás (tömeg, méret) eltérő úszó mozgás eltérő válaszreakció a külső ingerekre táplálékfelvétel csökkenése/megszűnése

Vizsgálat kezdete előtt fel kell jegyezni a halak méretét és tömegét.

A teszt befejezésekor kell mérni a túlélők hosszát és tömegét, a mérés során nem szükséges.



KiértékelésKiértékelésVizsgálat során feljegyzésre kerülő adatok:a)halált vagy egyéb hatást okozó koncentrációk

grafikus ábrázolása az idő függvényébenb)halak viselkedés változásac)vizsgálat során bekövetkezett események, amik

befolyásolhatják az eredménytd)bármilyen eltérés az vizsgálati útmutatótólKiértékelés:NOEC (No Observed Effects Concentration): az

a legnagyobb vegyianyag koncentráció, amelynek még nincs megfigyelhető hatása egy élőlény (tesztorganizmus) hosszú távú kitettsége esetén



Köszönöm a figyelmet!Köszönöm a figyelmet!

IrodalomjegyzékIrodalomjegyzék

http://puck.sourceoecd.org/vl=2443331/cl=13/nw=1/rpsv/ij/oecdjournals/1607310x/v1n2/s5/p1

http://oberon.sourceoecd.org/vl=19145829/cl=19/nw=1/rpsv/ij/oecdjournals/1607310x/v1n2/s4/p1









Képek hivatkozásai:Képek hivatkozásai: http://www.aquarium-fish.info/speciesProfile/Brachydanio/rerio http://www.florida-bass-fishing.com/cart-fish%20drunk.gif http://dragon.unideb.hu/~kltegimn/kepek/tanar/bio/hal.gif http://blog.glennz.com/wp-content/uploads/2008/05/endangered_spec

ies.jpg http://www.haziallat.hu/egyedi-esetek/hal-izu-viz-cicaknak-/1754/1/http://www.haziallat.hu/egyedi-esetek/hal-izu-viz-cicaknak-/1754/1/

hal-izu-viz-cicaknak-_1.jpghal-izu-viz-cicaknak-_1.jpg http://www.nwkniterati.com/movabletype/archives/MossyCottage/http://www.nwkniterati.com/movabletype/archives/MossyCottage/

fish.giffish.gif http://www.mblaquaculture.com/assets/images/content/http://www.mblaquaculture.com/assets/images/content/

photo_Pimephales_promelas_Fathead_minnow_510px.jpgphoto_Pimephales_promelas_Fathead_minnow_510px.jpg http://www.naturephoto-cz.eu/pic/ceteri/cyprinus-carpio-20524.jpghttp://www.naturephoto-cz.eu/pic/ceteri/cyprinus-carpio-20524.jpg http://www.fbas.co.uk/Oryzias%20latipes%20%28female%29.jpghttp://www.fbas.co.uk/Oryzias%20latipes%20%28female%29.jpg http://www.vustah.cz/en/laboratories/zlatelab/images/http://www.vustah.cz/en/laboratories/zlatelab/images/

poecilia_reticulata.jpgpoecilia_reticulata.jpgHal, prolongált 14 napos Hal, prolongált 14 napos

toxicitási teszttoxicitási teszt 2121

http://www.aquarium-fish.info/speciesProfile/Brachydanio/rerio

http://www.florida-bass-fishing.com/cart-fish%20drunk.gif

http://dragon.unideb.hu/~kltegimn/kepek/tanar/bio/hal.gif

http://blog.glennz.com/wp-content/uploads/2008/05/endangered_species.jpg

http://blog.glennz.com/wp-content/uploads/2008/05/endangered_species.jpg

Documents

Haltoxicitási teszt: prolongált 14 napos OECD No. 204