Click here to load reader

Dinamica Dezvoltarii Fitoparazitului

  • View
    38

  • Download
    9

Embed Size (px)

DESCRIPTION

floarea soarelui

Text of Dinamica Dezvoltarii Fitoparazitului

Dinamica Dezvoltarii Fitoparazitului

SUMAR

INTRODUCERECAPITOLUL I. ASPECTE PRIVIND INTERACIUNEA GAZD-PARAZIT: Helianthus annuus L.- Orobanche cumana Wallr.

1.1. Floarea-soarelui cultur oleaginoas i plant gazd

1.2. Lupoaia parazit al florii-soarelui 1.2.1. Taxonomia, rspndirea i impactul economic al speciilor de Orobanche

1.2.2. Biologia parazitului Orobanche cumana

1.2.3. Ciclul de via i etapele parazitismului la speciile de Orobanche

1.2.4. Efectul parazitismului Orobanche asupra plantei-gazd 1.2.5. Metode de control a lupoaiei

1.3. Tipurile de rezisten i mecanismele reaciei de rspuns a plantelor fa de agentul patogen

1.3.1. Rezistena nespecific i indus 1.3.2. Rezistena specific gazdei.

1.3.3. Mecanisme fiziologo-biochimice de rezisten a florii-soarelui la lupoaie

1.4. Aspecte genetice ale rezistenei plantelor fa de agentul patogen

1.4.1. Rezistena plantelor mediat de genele R- i reacia de hipersensibilitate 1.4.2. Genetica rezistenei florii-soarelui fa de lupoaieCAPITOLUL II. OBIECTUL I METODELE DE CERCETARE

2.1. Obiectul de studiu i condiiile de cultivare

2.2. Metodele de cercetare

2.2.1. Determinarea indicilor morfo-fiziologici2.2.2. Determinarea prezenei peroxidului de hidrogen

2.2.3. Metoda gazometric de determinare a activitii catalazei

2.2.4. Izolarea proteinelor sumare

2.2.5. Determinarea calitativ a proteinelor prin SDS-PAGE

2.2.6. Metoda spectrofotometric de determinare a acizilor nucleici

2.2.7. Izolarea ADN-lui2.2.8. Tehnica PCR de identificare a unor gene de rezisten2.2.9. Analiza statistic a datelor

CAPITOLUL III. REZULTATE I DISCUII

VARIAIA PARAMETRILOR MORFO-FIZIOLOGICI LA PLANTELE DE FLOAREA-SOARELUI LA INTERACIUNE CU PARAZITUL LUPOAIA3.1. Studiul parametrilor morfo-fiziologici, acumularea pigmenilor asimilatori i evaluarea gradului de infecie n procesul de interaciune a florii-soarelui cu lupoaia din regiuni geografice diferite

3.2. Influena temperaturii asupra gradului de infecie al lupoaie la unele genotipuri de floarea-soarelui

3.3. Dinamica dezvoltrii parazitului pe sistemul radicular a plantei-gazd

3.4. Evidenierea gradului de infecie la unele genotipuri din colecia laboratorului

CAPITOLUL IV. ASPECTE BIOCHIMICE ALE INTERACIUNII DIFERITOR GENOTIPURI DE FLOAREA-SOARELUI CU OROBANCHE CUMANA WALLR

4.1. Aspecte ale statutului oxido-reductor la unele genotipuri de floarea-soarelui atacate de lupoaie

4.2. Aspecte moleculare ale metabolismului proteic n patosistemul Helianthus annuus l. Orobanche cumana wallr4.2.1. Analiza proteinelor la nivelul sistemului radicular4.2.1.1. Varietatea spectrului polipeptidic la diverse genotipuri de floarea soarelui n cadrul familiei Xenia la nivelul rdcinilor

4.2.1.2 Impactul patogenului Orobanche cumana asupra metabolismului proteic la nivelul sistemului radicular a genotipurilor familiei Xenia

4.2.1.3. Varietatea spectrului polipeptidic la diverse genotipuri de floarea soarelui n cadrul familiei Valentino la nivelul sistemului radicular

4.2.1.4. Impactul patogenului Orobanche cumana asupra metabolismului proteic la nivelul sistemului radicular a genotipurilor care formeaz hibridul Valentino

4.2.1.5. Identificarea proteinelor asociate cu patogenez la diverse genotipuri de floarea-soarelui4.2.2. Modificarea spectrului polipeptidic la nivelul sistemului foliar la diverse genotipuri de floarea soarelui sub aciunea stresului biotic

4.2.2.1Varietatea spectrului polipeptidic a genotipurilor hibridului Xenia i liniilor parentale ale acestuia la nivelul sistemului foliar

4.2.2.2. Impactul patogenului Orobanche cumana asupra metabolismului proteic la nivelul sistemului foliar a genotipurilor hibridului Xenia i liniilor parentale ale acestuia

4.2.2.3. Varietatea spectrului polipeptidic la diverse genotipuri de floarea soarelui n cadrul familiei Valentino la nivelul sistemului foliar

4.2.2.4. Impactul patogenului Orobanche cumana asupra metabolismului proteic la nivelul sistemului foliar a genotipurilor familiei Valentino

CAPITOLUL V. DETERMINISMUL GENETIC A REZISTENII UNOR GENOTIPURI DE FLOAREA-SOARELUI LA LUPOAIE5.1. Analiza cantitativ a acizilor nucleici

5.2. Evidenierea marcherului genetic asociat cu genei Or5 ce confer rezisten la rasa E de lupoaie la unele genotipuri de floarea-soarelui

CONCLUZII

INTRODUCERE

Actualitatea temei. Floarea-soarelui reprezint una din principalele plante oleaginoase cultivate n Republica Moldova, avnd o importan major la nivel att naional, ct i mondial. Aceast cultur are un spectru larg de utilizare, rezolvnd problema aprovizionrii cu ulei vegetal i aducnd o mare contribuie n obinerea produselor alimentare vitaminizate, a substanelor fosfo-organice i minerale. ns, recolta culturilor agricole n agrocenozelor din Republica Moldova, inlusiv cea a florii-soarelui, sufer pierderi considerabile din cauza aciunii nefaste a unor factori de natur abiotici i biotici. Floarea-soarelui este atacat de diferii ageni patogeni, ceea ce actualizeaz problema crerii i selectrii hibrizilor rezisteni la factorii biotici. Pierderi anuale cauzate de boli, pe plan mondial se ridic la circa 33% din volumul produciei poteniale (Burzo I. Toma S., 1999).

Unul din factorii limitativi ai produciei de floarea-soarelui n Republica Moldova este parazitul lupoaia (Orobanche cumana Wallr.), n special zonele centrale i de sud-est (Siminel V. 1998), ct i n regiunea Mediteranean i Europa de Est (Alonso, L. C. 1996, Blbl, A.,1991, Dominguez, J., 1996, Shindrova, P. 1994). Deoarece lupoaia este un parazit angiosperm, lipsit de clorofil, care depinde n totalitate de planta gazd, utiliznd apa, substanele minerale i organice ale florii-soarelui i absorbia acestor substane reduc nu doar producia de semine, dar de asemenea i coninutul uleiului (Szoko G., 1973), atacurile creia sunt deseori devastatoare i pagubele produse de ctre parazit pot duce la scderea produciei cu peste 50% (Aimovi M., 1988, Bucuceanu M. 1998, Dominguez, J., 1996). Controlul acestui parazit este destul de dificil, fiind studiate i implementate diverse metode de combatere a lupoaiei, inclusiv mecanice, biologice i chimice, unde selecia i ameliorarea culturilor de floarea-soarelui cu rezisten genetic se consider cea mai efectiv, economic i fiind o soluie ecologic n acelai timp. Totui, utilizarea formelor rezistente genetic este urmat de apariia de rase noi de lupoaie, mai virulente, care nving barierele existente de rezisten (Dominguez J 1999). Elucidarea mecanismelor fiziologo-biochimice i genetice legate de relaiile existente dintre planta-gazd i parazit, ar contribui la facilitarea procesului de selecie a formelor rezistente, ce reprezint la momentul actual una din preocuprile de baz a cercettorilor din domeniul culturii florii-soarelui. Reieind din aceste considerente scopul prezentei lucrri const n elucidarea particularitilor morfo-fiziologice, biochimice i genetice care caracterizeaz interaciunea dintre planta-gazd i parazit n baza modelului floarea-soarelui i lupoaie.Obiectivele de cercetare

studiul indicilor morfo-fiziologici i biochimici ai genotipurilor de floarea-soarelui n norm i afectate de lupoaie;

evaluarea gradului de infecie la unele genotipuri de floarea-soarelui cultivate pe teritoriul Republicii Moldova, sub influena diferitor regimuri de temperatur;

analiza spectrului polipeptidic a proteinelor sumare solubile la diverse genotipuri homo- i heterozigote de floarea-soarelui infectate cu lupoaie;

identificarea markerului genetic de tip SCAR asociat cu prezena genei Or5 ce confer rezisten la rasa E de lupoaie la 53 genotipuri de floarea-soarelui (linii materne, paterne i hibrizi).CAPITOLUL I. ASPECTE PRIVIND INTERACIUNEA GAZD-PARAZIT: Helianthus annuus L.- Orobanche cumana Wallr.

Problema originii i a evoluiei parazitismului n general, ct i n cazuri particulare constituie obiectul multor cercetri. Interaciunea florii-soarelui i lupoaiei reprezint o form de interrelaii aprut pe parcursul evoluiei acestor dou specii, reprezentnd un important model de studiu de tipul gazd-parazit. Elucidarea mecanismelor care stau la baza acestei interaciuni poart att un caracter fundamental, ct i unul aplicativ.

1.1. Floarea-soarelui cultur oleaginoas i plant gazd

Floarea-soarelui (Helianthus annuus L., 2n=34) este o plant anual a familiei Asteraceae (Schilling & Heiser, 1981), originar din America de Nord. Alogam, entomofil i alloploid (2n=34) aprut n urma ncrucirii a unei specii din genului Vigniera (n=8) cu o specie a genului Helianthus (n=9) nc neindentificat (Heiser, 1961).

De menionat c floarea-soarelui este o plant oleaginoas de mare importan economic i alimentar. Prin coninutul seminelor n substane grase (33-56 %) i calitatea deosebit a uleiului rezultat n urma extraciei, aceasta reprezint una dintre principalele productoare de grsimi vegetale, utilizate n alimentaiei. Ca surs de ulei vegetal, pe plan mondial, floarea-soarelui ocup locul al patrulea, dup soia, palmier i rapi (Roman Gh., 2006). Valoarea alimentar ridicat a uleiului de floarea-soarelui, se datoreaz coninutului bogat n acizi grai nesaturai, reprezentai preponderent de acidul linoleic (44-75%) i acidul oleic (14-43%), ct i prezenei reduse a acidului linolenic (0,2%), componente care-i confer stabilitate i capacitate ndelungat de pstrare, superioare altor uleiuri vegetale. Funcia nutritiv a uleiului de floarea-soarelui este sporit de prezena unor provitamine a vitaminelor liposolubile A, D, E, a vitaminelor B4, B8, K i fosfatidelor. Uleiul mai conine steroli, aproximativ 0,04%, precum i tocoferoli - fraciune antioxidant a