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DESARROLLO DE UNA LECHE DE CABRA FERMENTADA EMPLEANDO L. Acidophilus EN CO-CULTIVO CON LAS BAL DEL YOGUR Carmen Llerena Ramirez 1 , Carolyn Loor González 2, , Natasha Suéscum Quiroz 3 , Grace Molina Bravo 4, 1,2,3,4 Universidad de Guayaquil. Facultad de Ingeniería Química, Guayaquil- Ecuador [email protected], [email protected] Resumen La leche de cabra por su composición química tiene el potencial de sustituir en la dieta los lácteos de origen bovino y presenta la oportunidad de desarrollo de leches fermentadas especiales con microorganismos probióticos que se encuentran habitualmente en el intestino que presentan efectos beneficiosos porque mantienen el equilibro existente en la microbiota intestinal, donde compiten con bacterias putrefactivas y patógenos oportunistas, frenando así su metabolismo perjudicial e interviniendo positivamente en la homeostasis intestinal. Teniendo en cuenta estos antecedentes este trabajo tuvo como objetivo desarrollar una leche fermentada de cabra con características probióticas, buena aceptabilidad y estabilidad de 21 días. Se empleó los cultivos L. acidophilus en co cultivo con las BAL del yogur. Se realizó una mezcla de cultivo de yogur: cultivo probiótico 1:7 a 1:9. Como variables respuestas después de las 24 horas de preparación se tomaron: viabilidad, la acidez, la aceptación sensorial, la barrera gástrica y el antagonismo. La formulación seleccionada con las mejores características fue conservada a 0ºC para la evaluación de la vida de almacenamiento. La mejor mezcla se la obtuvo en una relación de 1:9. La leche fermentada fue evaluada sensorialmente y calificada como “me gusta” y su viabilidad estuvo por encima de la norma ecuatoriana para leche fermentada hasta los 21 días (log.(ufc/mL) de 9). Palabras clave: leche de cabra, cultivos probióticos, fermentada, L. acidophilus, yogurt. Abstract Goat milk by its chemical composition has the potential to substitute dairy products of bovine origin in the diet and presents the opportunity to develop special fermented milks with probiotic microorganisms usually found in the intestine that have beneficial effects because they maintain the existing balance In the intestinal microbiota, where they compete with putrefactive bacteria and opportunistic pathogens, thus curbing their harmful metabolism and intervening positively in intestinal homeostasis. Taking into account this background, this work had the objective of developing a fermented goat milk with probiotic characteristics, good acceptability and stability of 21 days, L. acidophilus cultures were used in co- cultivation with BAL of yogurt. A yogurt culture mixture was made: probiotic culture 1: 7 to 1: 9. As response variables after 24 hours of preparation were taken: viability, acidity, sensory acceptance, gastric barrier and antagonism. The formulation Vol 25, No 41 (2017), Revista Alimentos Hoy -77

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DESARROLLO DE UNA LECHE DE CABRA FERMENTADA EMPLEANDO L.

Acidophilus EN CO-CULTIVO CON LAS BAL DEL YOGUR

Carmen Llerena Ramirez1, Carolyn Loor González2,, Natasha Suéscum Quiroz3, Grace Molina Bravo4,

1,2,3,4 Universidad de Guayaquil. Facultad de Ingeniería Química, Guayaquil- Ecuador

[email protected], [email protected]

Resumen

La leche de cabra por su composición química tiene el potencial de sustituir en la dieta los lácteos de origen bovino y presenta la oportunidad de desarrollo de leches fermentadas especiales con microorganismos probióticos que se encuentran habitualmente en el intestino que presentan efectos beneficiosos porque mantienen el equilibro existente en la microbiota intestinal, donde compiten con bacterias putrefactivas y patógenos oportunistas, frenando así su metabolismo perjudicial e interviniendo positivamente en la homeostasis intestinal. Teniendo en cuenta estos antecedentes este trabajo tuvo como objetivo desarrollar una leche fermentada de cabra con características probióticas, buena aceptabilidad y estabilidad de 21 días. Se empleó los cultivos L. acidophilus en co cultivo con las BAL del yogur. Se realizó una mezcla de cultivo de yogur: cultivo probiótico 1:7 a 1:9. Como variables respuestas después de las 24 horas de preparación se tomaron: viabilidad, la acidez, la aceptación sensorial, la barrera gástrica y el antagonismo. La formulación seleccionada con las mejores características fue conservada a 0ºC para la evaluación de la vida de almacenamiento. La mejor mezcla se la obtuvo en una relación de 1:9. La leche fermentada fue evaluada sensorialmente y calificada como “me gusta” y su viabilidad estuvo por encima de la norma ecuatoriana para leche fermentada hasta los 21 días (log.(ufc/mL) de 9).

Palabras clave: leche de cabra, cultivos probióticos, fermentada, L. acidophilus,

yogurt.

Abstract

Goat milk by its chemical composition has the potential to substitute dairy products of bovine origin in the diet and presents the opportunity to develop special fermented milks with probiotic microorganisms usually found in the intestine that have beneficial effects because they maintain the existing balance In the intestinal microbiota, where they compete with putrefactive bacteria and opportunistic pathogens, thus curbing their harmful metabolism and intervening positively in intestinal homeostasis. Taking into account this background, this work had the objective of developing a fermented goat milk with probiotic characteristics, good acceptability and stability of 21 days, L. acidophilus cultures were used in co-cultivation with BAL of yogurt. A yogurt culture mixture was made: probiotic culture 1: 7 to 1: 9. As response variables after 24 hours of preparation were taken: viability, acidity, sensory acceptance, gastric barrier and antagonism. The formulation

Vol 25, No 41 (2017), Revista Alimentos Hoy -77

YURI
Texto tecleado
Recibido 27/06/2017, Aceptado 15/08/2017, Disponible online 31/08/2017
Page 2: DESARROLLO DE UNA LECHE DE CABRA FERMENTADA …

selected with the best characteristics was preserved at 0 ° C for evaluation of storage life. The best mixture was obtained in a ratio of 1: 9. Fermented milk was evaluated as "I like" and its viability was above the Ecuadorian norm for fermented milk until 21 days (log. (Cfu / mL) of 9). Key words: goat's milk, probiotic cultures, fermented, L. acidophilus, yogurt. I.- INTRODUCCIÓN

Actualmente en el Ecuador el

Gobierno Nacional en el Art 281 de la

Constitución del Estado establece que

para cumplir con el plan del buen vivir,

es necesario fomentar la producción

sostenible y sustentable de alimentos,

reorientando el modelo agrícola, que

en el enfoque multisectorial de esta

ley hace referencia a los recursos

alimentarios de varios sectores en los

cuales la actividad pecuaria se

encuentra incluida. Por este motivo la

Universidad de Guayaquil, ha

desarrollado el programa “Leche de

cabra”, el cual incluye la raza Anglo

Nubia a la producción lechera y el

desarrollo de valores agregados como

lo constituyen las leches fermentadas

probióticas.

El desarrollo de este tipo de

ganado caprino en el Ecuador tiene

ventajas de manejo y facilita promover

la participación social de poblaciones

de áreas áridas rurales de la costa en

la crianza y manejo cabras (Frau,

Pece, Front, & Paz, 2007), lo cual

podría mejorar las condiciones de vida

de estas familias, no solo por el

consumo diario de leche y permite el

desarrollo de micro empresas

enfocadas al cambio de la matriz

productiva.

La producción a nivel del

Ecuador es baja, existen cuatro zonas

principales de producción de leche de

cabra: Ibarra, Puembo, Chongón y

Morona Santiago.

La leche de cabra es una buena

fuente de proteínas están compuestas

por un 8% de caseínas y por un 20 %

de proteínas en el suero lácteo. Entre

ellas las principales son alfa – lacto

albúmina y beta – lactoglobulina,

aunque el contenido de ésta última es

inferior (Rivas, Jimenez, & Diaz,

2005). El tamaño de las micelas de

caseína de la leche de cabra es más

pequeña (50 nm) en comparación con

la leche de vaca (75 nm), esta caseína

se caracteriza por contener más

glicina, así como menos arginina y

Vol 25, No 41 (2017), Revista Alimentos Hoy -78

Page 3: DESARROLLO DE UNA LECHE DE CABRA FERMENTADA …

aminoácidos sulfurados

especialmente metionina. Las

fracciones mayoritarias la constituyen

la tirosina, la lisina y la serina para las

caseínas; la prolina y la cisteína para

la kappa- caseína. La mayor fracción

de proteína en esta leche es la β –

caseína y la α – s2 caseína, posee

menos α – s1 caseína, la cual es

responsable de la mayoría de alergias

asociadas a la leche de vaca (Chacón,

2005). Tiene lípidos con pequeño

tamaño de los glóbulos grasos

comparados con los glóbulos en la

leche de vaca (2 µm en la leche de

cabra contra 3 a 5 µm en la vaca), lo

cual se ha asociado a una mejor

digestibilidad (Chacón, 2005), por lo

que reduce el tiempo de residencia en

el estómago, así como el tránsito

intestinal (Guerrero & Gamarra,

2006). Es además rica en calcio,

magnesio, fósforo, potasio, en mayor

proporción que la leche de vaca.

Los productos lácteos

constituyen un excelente vehículo

para los microorganismos probióticos,

debido a que los protegen de los

elevados niveles de ácido que tiene el

estómago y de la concentración de

bilis del intestino, que pueden dañar o

eliminar los probióticos que se

ingieren (Cortez, Chiralt, & Puente,

2005).

El término “probiótico” data de 1965

(Lilly & Stillwell, 1995), cuando se usó

para referirse a cualquier sustancia u

organismo que contribuyera al

balance microbiano intestinal. Entre

los principales probióticos empleados

en la industria se tienen las bacterias

ácido lácticas (Reyes & Rodriguez,

2011). Los beneficios que ofrecen los

probióticos, se pueden categorizar en

nutricionales y beneficios

terapéuticos. Dentro de lo nutricional

se encuentra su papel para aumentar

la biodisponibilidad de calcio, zinc,

hierro, manganeso, cobre y fósforo. A

nivel terapéutico, se pueden utilizar

para tratamientos de desórdenes

intestinales, hipercolesterolemia,

supresión de enzima pro-

carcinogénicas e inmunomodulación

(Mozzi, Raya, & Vignolo, 2010), esto

aumenta la producción de antígenos e

incrementan la producción de IgA,

localmente. A nivel sistémico actúan

como adyuvantes aumentado la

producción de algunas citosinas (IFN-

gamma) (Reyes & Rodriguez, 2011).

Vol 25, No 41 (2017), Revista Alimentos Hoy -79

Page 4: DESARROLLO DE UNA LECHE DE CABRA FERMENTADA …

Los productos lácteos

presentan condiciones de pH y sales

que ayudan a que las BAL sobrevivan

a su paso por el intestino (Santillan,

M.A., & Velez, 2014). Su contenido de

aminoácidos y péptidos permiten el

crecimiento de las bacterias

probióticas (Mozzi, Raya, & Vignolo,

2010). Las bacterias de los géneros

Lactobacillus y Bifidobacterium son

los microorganismos más empleados

con fines probióticos. Dentro de este

grupo tenemos Lactobacillus

(delbrueckii, vulgarices, acidophilus,

ramosas, Reuter, plantaron,

helvéticos), Bifidobacterium (bífida,

Long un, breve, infantes),

Estreptococos (termopilas, di acetilos,

crémores), Levaduras

(Saccharomyces bolardo) (De Angelis

& Gobbetty, 2011).

Lactobacillus acidophilus

L. acidophilus es una bacteria

Gram positiva, homofermentativas, se

caracteriza porque resisten la acidez

gástrica y sales biliares. Su tasa de

supervivencia en el tracto

gastrointestinal se estima entre un 2 y

5 % y logran concentraciones

suficientes en el colon de 106 a 108

ufc/mL. La temperatura óptima de

crecimiento está alrededor de los 37

°C, y a una temperatura máxima de

unos 43 a 48°C (Gopa, 2011).

Entre los beneficios que esta bacteria

presenta son el equilibrio de la flora

intestinal, efecto en sistema

inmunitarios, reducción de actividad

enzimática pro cancerígenas, control

de diarrea (Bourgeois & Larpent,

2005). Tiene acción antagonista sobre

el crecimiento de distintos tipos de

bacterias patógenas como el S.

aureus, S. tiphimurium, E. coli.

Produce dos bacteriocitas la lacticínea

B y lactancia F. (Mozzi, Raya, &

Vignolo, 2010)

II. METODOLOGÌA

2.1. Materiales y métodos

2.1.1. Materiales

Se utilizó leche de cabras cruza

Anglo-nubian con la criolla

proveniente de la hacienda del Dr.

Young Living ubicada en Chongón –

Guayaquil - Ecuador. Se obtuvo de

hembras sanas y es entregada por

lotes aplicando el método de

muestreo (NTE INEN 4, 2012),

durante tres meses. Y debe cumplir

con los parámetros descritos por la

Vol 25, No 41 (2017), Revista Alimentos Hoy -80

Page 5: DESARROLLO DE UNA LECHE DE CABRA FERMENTADA …

normas para leche cruda de cabra

(NTE-INEN-2624, 2012), y de leche

pasteurizada de cabra (NTE-INEN-

2623, 2012).

Se utilizaron los Cultivos

Lactobacillus acidophilus LA – 5, L.

bulgaricus YC-380, y Streptococus

thermophilus YC-380, de la marca

CHR Hansen.

2.1.2. Métodos

El proceso de elaboración de la leche

fermentada se puede apreciar en el

diagrama 1.

Vol 25, No 41 (2017), Revista Alimentos Hoy -81

Page 6: DESARROLLO DE UNA LECHE DE CABRA FERMENTADA …

Diagrama 1: Diagrama de flujo del proceso de elaboración de la leche

fermentada

Se aplicó el método de control para

leche de cabra estandarizada y

pasteurizada (NTE-INEN-2624, 2012)

- (NTE-INEN-2623, 2012). A la leche

cruda de cabra se la estandarizó al

3% , se le controló la densidad relativa

a 20 ºC (NTE-INEN-11, 1973), pH

(NTE-INEN, 1973), acidez titulable

Vol 25, No 41 (2017), Revista Alimentos Hoy -82

Page 7: DESARROLLO DE UNA LECHE DE CABRA FERMENTADA …

(NTE-INEN-13, 1973), grasa (NTE-

INEN-12, 1973), sólidos totales (NTE-

INEN-14, 1973), proteína (NTE-INEN-

16, 1973), punto de congelación

(NTE-INEN-15, 1973), ensayo de

reductasa (horas) (NTE-INEN-18,

1973), prueba de Brucelosis,

mediante prueba de anillo Pal (Ring

test). Residuos de medicamentos

veterinarios MRL establecidos en el

Codex Alimentarios CAC/MRL 2

(CODEX-STAN-243, 2003). Se

efectuó la prueba de la fosfatasa

(NTE-INEN-19, 1993). Los controles

microbiológicos de recuento de

microorganismos aerobios mesófilos

(ufc/mL) (NTE-INEN-1529-5, 2006),

recuento de Coliformes (ufc/mL)

(NTE-INEN-1529-7, 1990), detección

de Listeria monocytogenes/ 25 g (ISO-

11290-1, 2008), detección de

Salmonella/25 g (NTE-INEN-1529-15,

2006), recuento de Escherichia coli

(ufc/mL) (NTE-INEN-1529-8, 1990).

• Control de fermentación

(NTE-INEN- 2395, 2011)

En el proceso de fermentación se

evaluó el pH (NTE-INEN, 1973) y

acidez titulable (NTE-INEN-13, 1973),

coliformes totales (NTE-INEN-1529-7,

1990), recuento de E. coli (NTE-INEN-

1529-8, 1990), Levaduras: (NTE-

INEN-1529-10, 1990), recuento de

microorganismos probióticos en agar

MRS para el género Lactobacillus,

M17 para el género Streptococcus.

• Control de características

probióticas en mezcla de

cultivo y leche fermentada

Barrera gástrica

Para la barrera de acidez se

realizaron pruebas a diferentes

valores de pH (3, 2,5 y 2) con una

exposición de 2 h, el ajuste del pH se

hizo con HCl 6 M. Se realizaron 2

repeticiones: en la primera prueba se

construyó estándares de McFarland 9

y 10 con un equivalente a 108 – 109

ufc/g.

Para el análisis de resistencia a las

sales biliares las concentraciones de

bilis utilizadas fueron 0,3 y 1 % con

una exposición de 2 h.

Pruebas de antagonismo por

inhibición de patógenos

Esta prueba mejor conocida como

el método de difusión en disco o agar

(Kirby-Bauer), es un método muy

utilizado y consiste en una prueba de

Vol 25, No 41 (2017), Revista Alimentos Hoy -83

Page 8: DESARROLLO DE UNA LECHE DE CABRA FERMENTADA …

inhibición o resistencia a los

microorganismos patógenos como

Staphylococcus aureus ATCC 36862,

Escherichia coli ATCC 10536 y

Salmonella enteritidis ATCC 13076,

en el cual se enfrenta a estos contra el

producto inhibidor, en este caso las

bacterias probióticas de acuerdo a la

Tabla 1.

Tabla 1. Interpretación del método Kirby Bauer. Diámetro de la zona de inhibición en mm

(Cintas, y col., 2010).

Resistente

≤ Intermedio

Sensible

11 12 – 13 14

Consiste en sembrar una bacteria

patógena en una concentración de

acuerdo al estándar de McFarland 5,

en agar Muller Hinton y se realizan

pocillos de 6 mm de diámetro en los

cuales se coloca las bacterias

probióticas. Se incuba por 24 horas a

37±1 ºC, y se observan los halos

alrededor de los pocillos, se mide el

diámetro completo incluido el pocillo,

la longitud obtenida después se

comparará con los estándares.

• Control del producto final y

vida de almacenamiento

Las formulaciones finales fueron

evaluadas después de 24 horas,

posteriormente los controles se

efectuaron a 7, 14, 21 y 28 días. En

las muestras se determinó el pH

(NTE-INEN, 1973), acidez titulable

(NTE-INEN-13, 1973), la composición

nutricional: grasa (NTE-INEN-12,

1973), perfil lipídico, proteína (NTE-

INEN-16, 1973), fibra y minerales.

Evaluación sensorial

La evaluación sensorial se

efectuó empleando el método de

Análisis Descriptivo Cuantitativo

(ADC) que es un método normalizado

por ABNT-NBR 14140 (1998). Este

método califica y cuantifica las

propiedades sensoriales (atributos) en

todos los aspectos (apariencia, color,

olor, sabor y textura) que compone el

producto, permitiendo una descripción

con precisión. El grupo (10 personas)

Vol 25, No 41 (2017), Revista Alimentos Hoy -84

Page 9: DESARROLLO DE UNA LECHE DE CABRA FERMENTADA …

es previamente entrenado, emplean

una escala que indica la intensidad del

atributo que está siendo evaluado.

(Hernández, 2005). La ficha de

evaluación se describe en la Tabla 2.

Diseño de mezclas de cultivos

probióticos

Unidad experimental: Cada

unidad experimental fue de 2 L de

leche de cabra descremada

pasteurizada a 85oC por 30 min para

cada uno de los tratamientos. La

incubación se realizó a 43oC. Se

emplearon mezclas de cultivos

probióticos de Lactobacillus

acidophilus.

Se aplicó el programa Statgraphics

para obtener la matriz del diseño de

mezcla con la L. acidophilus. Las

variables respuestas en este

experimento fueron la viabilidad y la

aceptabilidad, la barrera gástrica y el

antagonismo.

III. - RESULTADOS

3.1. Control para leche de cabra

estandarizada y pasteurizada

La materia prima fue evaluada

según la normativa vigente (NTE-

INEN-2623, 2012) para leche de

cabra pasteurizada en la Tabla 2 se

describe el promedio de los valores

obtenidos durante 3 meses.

Vol 25, No 41 (2017), Revista Alimentos Hoy -85

Page 10: DESARROLLO DE UNA LECHE DE CABRA FERMENTADA …

Tabla 2. Leche estandarizada y pasteurizada

Parámetro de control Requisitos

de la norma

Resultado promedio Desviación

estándar

Densidad a 20 ºC 1,028 - 1,040 1,037 2,66

pH 6,5 - 6,8 6,57 0,04

Acidez titulable 1,3 -1,6 1,5 0,04

Contenido de grasa MIN. 3,5 3,3 0,37

Sólidos totales % (fracción

de masa)

12 – 13 10,34 0,23

Proteína % (fracción de

masa)

3,4 – 3,7 4,29 0,16

Punto de congelación ºC MAX. - 0,53 -0,53 8,91

Fosfatasa Negativo Negativo 0

Residuos de

medicamentos veterinarios

Codex Negativo para

antibióticos

betalactámico,

tetraciclínico y sulfas

0

Presencia de conservantes Negativo Negativo 0

Presencia de neutralizante Negativo Negativo 0

Presencia de adulterantes Negativo Negativo 0

Elaborado por: Los autores

Se puede observar que el

proceso de pasteurización de la leche

permite que la materia prima cumpla

con la normativa vigente, estando

incluso por encima de los valores de

la norma en el parámetro proteína.

Vol 25, No 41 (2017), Revista Alimentos Hoy -86

Page 11: DESARROLLO DE UNA LECHE DE CABRA FERMENTADA …

Tabla 3: Controles microbiológicos de leche estandarizada y pasteurizada

Parámetro de control Requisitos de la norma

n=5

Promedio Desviación

estándar

Recuento de microorganismos

mesófilos (ufc/mL)

30.000-50.000 0 0

Recuento de coliformes (ufc/mL) MAX 10 0 0

Detección de Listeria

monocytogenes/25 g

(ufc/mL),

Ausencia

Ausencia 0

Detección de Salmonella/25 g Ausencia Ausencia 0

Recuento de Escherichia coli

(ufc/mL)

Menor de 1 0 0

Elaborado por: Los autores

Esto resultados nos permiten

observar que el proceso térmico

disminuyó en el 100% los

microorganismos patógenos

presentes en la leche.

3.2. Desarrollo y control del

proceso de fermentación

Para este proceso la leche

descremada y pasteurizada se

emplea inicialmente para activar los

cultivos iniciadores. Se inoculó el

0,8% de las BAL del yogur y del

L.acidophilus. La temperatura de

incubación es de 43ºC y el tiempo de

fermentación depende del

microorganismo a activar.

Generalmente las BAL de yogur

alcanzan el pH óptimo en 3 horas y el

probiótico entre 5 a 6 horas.

Entre los controles que se

emplearon para evaluar el proceso de

fermentación del L. acidophilus y las

BAL del yogur está el descenso del

pH, acidez, crecimiento microbiano

durante la fermentación. Inicialmente

los microorganismos fueron activados

por separado. En la Fig. 1 y 2, se

puede observar como las BAL del

yogur alcanzaron el pH 4,5 y una

acidez de 0,6 en 60 min mientras que

el L. acidophilus requiere 125 min.

Una vez obtenida la viabilidad de las

cepas se inoculan en la leche de cabra

fermentada y pasteurizada en

concentraciones 1:9 a temperatura de

43 ºC hasta alcanzar el pH 4,8 y la

acidez de 0,6.

Vol 25, No 41 (2017), Revista Alimentos Hoy -87

Page 12: DESARROLLO DE UNA LECHE DE CABRA FERMENTADA …

Figura 2: Variación de pH durante la fermentación

Se evaluó la viabilidad de las

mezclas mediante el conteo de

microorganismos probióticos a las 24

horas de elaborada la leche

fermentada teniendo como referencia

un yogur sin probiótico el cual

constituye el valor del blanco. En la

Tabla 4 se presenta la leche

fermentada con L.acidophilus en las

dos concentraciones el análisis

microbiológico fue efectuado por un

laboratorio acreditado (Laboratorio

AVVE), el resultado permitió observar

que solo los cultivos de las mezclas

cumplen con la normativa ecuatoriana

vigente para leche fermentada (NTE-

INEN-2395, 2012).

Tabla 4. Conteo de probióticos en leche fermentada de cabra

Relación de co- cultivo Resultado promedio

UFC/g

INEN

2395

Yogur sin probiótico 3,7 x 104

1 x 106 1:7 2,1 x 108

1:9 1,8 x 1010

Fuente: Laboratorios AVVE.

pH

pH

Vol 25, No 41 (2017), Revista Alimentos Hoy -88

Page 13: DESARROLLO DE UNA LECHE DE CABRA FERMENTADA …

Barrera Gástrica.

Las mezclas evaluadas en las

dos concentraciones fueron

sometidas a la prueba de la barrera

gástrica para lo cual se ajustó el pH a

2 y 3 con ácido clorhídrico simulando

las condiciones gástricas de forma in

vitro. Se pudo observar que la mezcla

1:9 presenta mayor viabilidad inicial y

resistencia como se puede ver en la

Tabla 5.

Tabla 5. Resistencia al ácido

Concentraciones

Promedio M.O iniciales

UFC/g

Lactobacillus

pH 2

UFC/g

Lactobacillus

pH 3

UFC/g

1:7 2,1 X 108 <10 3,6x105

1:9 1,8 X 1010 1750 1,6X 107

Fuente: Laboratorio de bioquímica de la Universidad del Azuay.

Elaborado por: Los autores

Tabla 6. Tolerancia a la bilis.

Relación de cocultivo Promedio de

M.O iniciales

Recuento

3% de bilis

% supervivencia

1:7 2,1 X 108 6.5x105 69.8%

1:9 1,8 X 1010 331x105 73.3%

Fuente: Laboratorio de bioquímica de la Universidad del Azuay.

Elaborado por: Los autores

En la Tabla 6 se pudo observar

que los microorganismo probióticos

tiene una buena resistencia a

concentraciones de bilis del 3%,

siendo mayor el porcentaje de

supervivencia a valores de mayor

viabilidad como el de la muestra 1:9.

En la tabla 7 se puede observar

la capacidad antagónica en las

mezclas 1:7 y 1:9, la cual fue evaluada

frente las bacterias patógenas, S.

aureus, E. coli, Listeria spp.,

Salmonella spp. En esta prueba se

observó que los probióticos formaban

Vol 25, No 41 (2017), Revista Alimentos Hoy -89

Page 14: DESARROLLO DE UNA LECHE DE CABRA FERMENTADA …

halos de inhibición de hasta 10 cm. El

signo + indica que tiene efecto de

inhibición frente a los patógenos.

Tabla 7. Prueba de antagonismo

Muestra S. aureus E. Coli Listeria M. Salmonella

1:7 + + + +

1:9 + + + +

Fuente: Laboratorio de bioquímica de la Universidad del Azuay.

Elaborado por: Los autores.

3.3. Evaluación sensorial

La prueba se efectuó con la

mejor mezcla de la cual se obtuvo

mejor resistencia a la barrera

gástrica, con conteos microbiológicos

que cumplen la norma INEN para

productos fermentados (mezcla 1:9) a

las 24 horas de elaboración del

producto con 65 estudiantes que

compran yogur. Se entregaron éstas

muestras: una de yogur sin azúcar de

marca comercial y la de leche de

cabra estandarizada, pasteurizada y

fermentada. Según los datos

obtenidos en el test hedónico se

produjo una respuesta promedio de

4,9 que indica en la escala de “Me

gusta” para la leche de cabra y 4,2

para el yogur natural sin azúcar como

se puede observar en la Tabla 6.

Promedio de resultados de evaluación

sensorial

.

Tabla 8: Evaluación sensorial

Muestras Número de

muestras

Media Desv. típ.

Leche

Fermentada

65 4,908 1,015

Yogur 65 4,246 1,371

Software empleado: PASW Statistics 18.

Elaborado por: Loor Carolyn, Suéscum Natasha

Vol 25, No 41 (2017), Revista Alimentos Hoy -90

Page 15: DESARROLLO DE UNA LECHE DE CABRA FERMENTADA …

La prueba de estabilidad del

producto final (mezcla 1:9) durante 21

días en almacenamiento refrigerado

(5ºC) se efectuó mediante la

evaluación sensorial y recuentos

microbiológicos los cuales fueron

evaluados en laboratorios AVVE. En

la Tabla 9 se describen los resultados

obtenidos de control de pH,

evaluación sensorial de olor, controles

microbiológicos de patógenos y en la

Tabla 10 se observan los conteos de

probióticos del producto terminado a

los 21 días.

Tabla 9. Control durante almacenamiento a temperatura de 5ºC

Elaborado por: Los autores

Estos resultados indican que el producto cerrado permanece en buenas

condiciones a una temperatura de 5ºC.

Tabla 10. Recuento de probióticos a los 21 días mezcla 1:9

Día

Recuento en placas MRS agar

en UFC/ml

1 1,8 X 1010

14 1.1 X 1010

21 1,7 X 109

Fuente: Los autores

Día pH Olor E.Coli Coli. Totales Mohos y Levaduras

1 4.68 característico Ausencia Ausencia Ausencia

5 4.64 característico Ausencia Ausencia Ausencia

10 4.58 característico Ausencia Ausencia Ausencia

15 4.52 característico Ausencia Ausencia Ausencia

21 4.45 característico Ausencia Ausencia Ausencia

Vol 25, No 41 (2017), Revista Alimentos Hoy -91

Page 16: DESARROLLO DE UNA LECHE DE CABRA FERMENTADA …

IV.- CONCLUSIONES

La leche de cabra es un

alimento que tiene la característica

que puede ser consumido por la

población de todas las edades, ya que

en sí mismo es un alimento

nutracéutico (Sanz, 2007)

Si además le podemos añadir

las BAL del yogur y el L. acidophilus

esto hace que la leche sea probiótica.

Esta característica ayuda a los

procesos digestivos pero

principalmente a nivel del cólon donde

compite con las bacterias patógenas,

como pudo evaluarse mediante

pruebas in vitro en placas en las

cuales la leche de cabra probiótica

tuvo poder antagónico contra los

patógenos como lo son: Salmonella

spp., Listeria spp, Stafilococos

aureus, E. coli. Además, el producto

exhibió buenos niveles de viabilidad y

una buena resistencia a la barrera

gástrica en las dos mezclas

propuestas 1:7 y 1:9 que se

analizaron, aunque la mezcla 1:9

siempre ofreció mayores viabilidades.

Con base en los análisis

microbiológicos de la leche de cabra

estandarizada y pasteurizada se pudo

concluir que un buen tratamiento

térmico permite que la materia prima

cumpla con todas las especificaciones

detalladas por la norma Inen

ecuatoriana para leches fermentadas.

probiótico adicionado aumenta

la resistencia al ácido clorhídrico en

concentraciones de pH 2 y pH 3 y

también ofrece resistencia a la bilis,

por tal motivo se ha podido comprobar

que resiste a la barrera gástrica en las

dos mezclas propuestas 1:7 y 1: 8. En

el caso de la mezcla 1:9, la

estabilidad del producto evaluada por

laboratorios externos tanto en sus

características físicas como las

sensoriales, permitieron demostrar

que el producto cumple las

características de una leche

fermentada durante los 21días que

duró la prueba.

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ANEXOS

Figura 3

Figura 3. Variación de pH durante la fermentación

pH

Vol 25, No 41 (2017), Revista Alimentos Hoy -94

Page 19: DESARROLLO DE UNA LECHE DE CABRA FERMENTADA …

Figura 4.

Figura 4. Variación de pH durante la fermentación

Vol 25, No 41 (2017), Revista Alimentos Hoy -95