Genul Neisseria

Caractere generale coci ovalari cu aspect reniform, dispui n diplo(boab de cafea), gram-negativi; imobili; strict aerobi; n raport cu exigenele nutritive sunt difereniate dou grupe - specii pretenioase nutritiv: N. gonorrhoeae, N. meningitidis - specii nepretenioase: N.lactamica, N.mucosa, N. sicca, N. subflava, N.cinerea etc; catalaz i oxidaz pozitivi; spectrul zaharolitic permite diferenierea speciilor.

Neisseria gonorrhoeaeImportana medical agent etiologic al uneia din cele mai frecvente infecii cu transmitere sexual; evoluie asimptomatic, mai ales la femei, cu dou consecine- infecii ascendente, cauz de sterilitate sau sarcin ectopic; - important rezervor de transmitere a infeciei;

posibile co-infecii cu Chlamydia trachomatis sau ali ageni cu transmitere sexual (Treponema pallidum, HIV etc); rezisten dobndit la penicilin, tetraciclin, spectinomicin sau fluorochinolone, cu diferene importante regionale.

Habitat omul singura gazd natural; prezena pe mucoase (uretral, endocervical, rectal, faringian) ntotdeauna cu semnificaie patologic. Caractere morfo-tinctoriale aspect caracteristic n uretrite acute la brbat: diplococi gram-negativi n numr important n citoplasma PMN (celule burate). Caractere de cultur i metabolice cultiv numai pe medii complexe, n atmosfer umed cu prezena CO2; dezvolt colonii S mici, transparente sau opace, nepigmentate, oxidazo-pozitive; descompune oxidativ numai glucoza (nu maltoza,zaharoza i fructoza).

Diplococi gram-negativi n numr important n citoplasma PMN (celule burate)

Neisseria frotiu albastru de metilen

Neisseria gonorrhoeae fermenteaza glucoza

Rezistena n mediul extern specie extrem de fragil, afectat de - temperaturi sczute;

de izolare Factori de patogenitate pili

- desicaie; - prezena de acizi grai; - antiseptice i dezinfectante uzuale; - consecine: transmiterea prin contact sexual, dificultile

-

formaiuni filamentoase, de natur proteic, fine, localizate pe suprafaa celulei bacteriene; constituii dintr-o regiune constant i o regiune hipervariabil antigenic; consecine legate de variabilitatea antigenic i cronicizarea infeciei; mediaz ataarea lax a gonococilor la suprafaa celulelor;

Factori de patogenitate proteina Opa (opacity proteine) (proteina II) - faciliteaz aderena ferm, n al doilea stadiu de legare, la celule; proteina Por (porin) (proteina I) - formeaz canale n membrana extren; - mediaz penetrarea n celule; - asigur supravieuirea n PMN; proteina Rmp (reduction-modifiable protein proteina modificabil prin reducere) (proteina III) - protejeaz alte antigene de suprafa (proteina Por, LOS) de aciunea bactericid a anticorpilor, prin stimularea apariiei unor Ac, care blocheaz rspunsul imun fa de Por sau LOS; proteine de legare a transferinei, lactoferinei i hemoglobinei - asigur achiziia direct de fier;

Factori de patogenitate (continuare) lipooligozaharid (LOS)- compus cu structur asemantoare LPS; - are proprieti endotoxinice;

IgA1-proteaza- cliveaz IgA secretor, facilitnd colonizarea.

Ataarea de celule epiteliale columnare neciliate

Patogenie Dup ptrunderea n organismul receptiv, gonococul se ataseaz de mucoasa genitourinar sau ocular, penetreaz n celule i se multiplic, traverseaz celulele spre spaiul subepitelial unde produce local o supuraie acut. Ataarea gonococului de celul se relizeaz prin intermediul pililor (tulpinile fr pili sunt avirulente).

Atasarea strns de celul si apoi ptrunderea n celul este mediat de proteina Opa. Proteina Por protejeaz gonococul fagocitat de omorrea intracelular inhibnd formarea fagolizozomului. LOS stimuleaz rspunsul inflamator si eliberarea de interferon , responsabil de majoritatea simptomelor asociate cu infecia gonococic. n timp, se poate produce o invazie tisular care poate conduce la instalarea unor fenomene inflamatorii cronice si la apariia fibrozei, n special n cazurile netratate.

Manifestri clinice A.Infecii la locul de ptrundere brbat: uretrite

-

femeie: endocervicite

> 90% au o evoluie simptomatic (secreie uretral purulent, disurie); frecvena maxim la tineri; 30-50% coinfecii cu C.trachomatis, posibil i cu ali ageni cu transmitere sexual; complicaii locale rare (abcese periuretrale, stricturi uretrale); aprox. 50% evolueaz asimptomatic; complicaii de vecintate: uretrite, bartolinite; frecvena maxim i coinfecii asemanator cu infecia la barbat; particularitatea infeciei la fetie: vulvo-vaginite.

Manifestri clinice (continuare) comune la cele dou sexe proctite- dup contact sexual anal; - la femeie, prin autoinoculare; - frecvent asimptomatice;

faringite- dup raporturi sexuale orale sau autoinoculare; - rar singurul sediu al infeciei; - frecvent asimptomatice;

conjunctivite- la nou-nscut prin contaminare la natere; - netratate, pot determina orbire; - la aduli posibil prin autoinoculare.

Manifestri clinice (continuare) B. Infecii ascendente brbat- rar prostatite, epididimite, epididimo-orhite;

femeie- boal inflamatorie pelvin (10-20%); - pelviperitonite, perihepatite.

C. Infecii diseminate- mai ales la femei (1-3%); - evolueaz cu localizri articulare (tenosinovite) i cutanate (erupii cutanate), mai rar meningite, endocardite (grave); - factori de risc* persoane cu deficit de C seric; * infecii cu tulpini rezistente la aciunea bactericid a serului.

Tenosinovit(tumefacie, durere, febr)

Imunitate- lipsa efectului protector, n parte explicat prin variaia antigenic; - Ac anti-Rmp blocheaz rspunsul imun fa de Por i LOS.

Anticorpii formai ca rspuns la infecia gonococic sunt predominant IgG3. Se formeaz anticorpi fa de pilin, proteina Opa si LOS, si n cantitate foarte mic fa de proteina Por. Anticorpii anti-LOS activeaz complementul, elibereaz componenta C5a a acestuia care are efect chemotactic pentru neutrofile. Fa de proteina Rmp se formeaz anticorpi IgG si anticorpi IgA1 secretori.

Diagnostic bacteriologic recoltarea i transportul produselor patologice(uretr, endocol, rect, faringe, conjunctiv) - prelevare pe tampon din vat atoxic; - nsmnare extemporanee pe medii speciale, selective i neselective, cu asigurarea atmosferei umede cu CO2 i posibil temporizare a incubrii la 360C (5-6 ore); - alternativ: mediul de transport Amies; - dou frotiuri efectuate extemporaneu (Gram i albastru de metilen);

Diagnostic bacteriologic (continuare) diagnostic prezumtiv- examen microscopic direct; - exigene de cultivare i aspectul coloniiilor; - testul oxidazei;

diagnostic definitiv- identificarea la nivel de specie prin teste biochimice;

diferenierea tulpinilor n scop epidemiologic- auxotipare; - serotipare cu Ac monoclonali fa de proteina I.

Principii de trtament etiotrop administrare de antibiotice de preferat ntr-o singur doz, pe cale oral; alegerea antibioticului - n raport cu sensibilitatea tulpinii izolate* antibiotice active: peniciline, cefalosporine, fluorochinolone, spectinomicin, tetracicline, cotrimoxazol; * rezisten dobndit la toate antibioticele, cu excepia cefalosporinelor cu spectru extins;

- pe baza protocoalelor terapeutice standard; tratament asociat pentru o posibil coinfecie cu C.trachomatis- azitromicin, doz unic; - doxiciclin, doze multiple.

Epidemiologie rezervorul de infecie reprezentat de pacieni cu infecii asimptomatice (mai frecvent femei); transmiterea este predominent sexual, la nou-nscut n timpul trecerii prin canalul de natere; receptivitate general. Profilaxie n exclusivitate, msuri nespecifice- depistarea i tratarea infeciilor simptomatice i asimptomatice; - tratarea contacilor sexuali ai cazului index; - educaie sexual, dublat de educaie moral i religioas; - instilaii cu soluie de azotat de Ag (1%) pentru profilaxia conjunctivitei gonococice la nou-nscut.

Neisseria meningitidisImportana medical unul din agenii etiologici majori ai meningitelor purulente, unele cazuri evolund epidemic n colectiviti de copii i tineri; rare cazuri de meningococcemie fulminant (Waterhouse Friderichsen) cu mortalitate ridicat; penicilina este nc antibioticul de ales n tratamentul infeciilor meningococice. Habitat prezent exclusiv la om; poate coloniza asimptomatic mucoasa nazo-faringian; portaj mai ridicat n colectiviti nchise de copii i tineri.

Particulariti morfo-tinctoriale- n frotiul din l.c.r. apar diplococi gram-negativi extra- i intracelulari;

Particulariti de cultivare i biochimice- mai puin exigent dect N.gonorrhoeae, cultiv pe medii mbogite (geloz snge, geloz ocolat); fiind favorizat de prezena CO2; - dezvolt colonii S, nehemolitice i nepigmentate; - degradeaz pe cale oxidativ glucoza i maltoza.

Sensibilitatea la factori de mediu- ca i N.gonorrhoeae, deosebit de sensibil la condiii de desicaie, temperaturi joase, variaii de pH, antiseptice i dezinfectante.

Ag de specificitate Ag cu specificitate de grup- Ag polizaharidic capsular difereniaz specia n 13 serogrupe; - grupele A, B, C, Y, W135 sunt cele mai frecvent izolate din infecii; - Ag capsular B este identic cu Ag K1 de E.coli;

Ag cu specificitate de tip- proteine din membrana extern, LOS.

Factori de patogenitate fimbrii i IgA-proteaza cu rol n colonizare; capsula polizaharidic cu rol antifagocitar; endotoxina, sintetizat n exces i eliberat n mediul extracelular este responsabil de manifestri clinice grave.

Manifestri clinice meningite purulente, cu evoluie endemic sau epidemic- consecutiv unei infecii faringiene fr expresie clinic (survine la 1/1000 infectai); - evoluie bacteriemic cu localizare la nivelul meningelui, dar posibil la nivelul tegumentului; - poate evolua recidivant la cei cu deficiene n unele componente ale C seric (C6-C8);

meningococcemia- manifestrile de meningit lipsesc sau trec pe plan secundar; - evoluie uneori fatal cu purpur hemoragic , hemoragii n glandele suprarenale, hipotensiune, CID, oc septic;

alte sindroame- otite medii, pneumonie lobar (dup viroze respiratorii); - uretrite acute (dup sex oral); - conjunctivite purulente, artrite septice.

Imunitate- asigurat de Ac anticapsulari, cu excepia meningococului de grup B; - imunizare dup colonizarea nazo-faringian cu meningococ; - Ac materni transplacentari protejeaz sugarul n primele luni de via.

Diagnostic bacteriologic prelevate: l.c.r., snge, aspirat din peteii; metode rapide de diagnostic:- examen microscopic direct (cu excepia sngelui); - evidenierea Ag capsular solubil prin latex-aglutinare (sensibilitate redus n meningitele cu meningococ grup B);

izolare i identificare- nsmnare pe medii mbogite cu snge (l.c.r.) sau medii pentru hemoculturi, fr inhibitori; - identificarea coloniilor prin testul oxidazei, spectrul zaharolitic, antigenic.

Principii de tratament etiotrop penicilina constiuie nc un antibiotic activ; (trece bariera hemato-meningee numai in meningite acute!) recent au fost semnalate tulpini cu sensibilitate modificat la penicilin (CMI 0,1-1g/ml); se impune o supraveghere epidemiologic a fenomenului; alternative terapeutice: ceftriaxona, cefotaxima, cloramfenicol. Epidemiologie sursa de infecie: omul bolnav sau purttor; risc crescut (500-800 ori) de transmitere in familie (chemoprofilaxie cu rifampin) transmitere respiratorie (contact apropiat i prelungit); persoane receptive: cei lipsii de Ac specifici anticapsulari; evoluie endemic sau epidemic (frecvena maxim la grupele devrst 6 luni-4 ani i 15-24 ani);

n Europa predomin tulpinile de grup B i C.

Profilaxie nespecific- msuri generale care previn infeciile cu transmitere respiratorie;

specific- vaccin antimeningococic bivalent (A+C) sau tetravalent (A+C+Y+W135) administrat numai la persoane cu risc; - chimioprofilaxie cu rifampicin la copii i tineri din colectiviti unde a aprut un caz de meningit meningococic.

PorA

More than 10% of the population may be carrying the bacterium at any one time on the mucosal surfaces of the nose and throat. The majority of these carriers will not have any symptoms of the disease, but this continual exposure to the immune system puts pressure on the bacterium to mutate its surface components in order to survive. Thus, natural selection is the driving force for the emergence of new antigenic variants.

Image of the antibody (Fab) molecular surface, with the PorA antigen superimposed. The dark colored groove on the surface of the antibody matches precisely the shape of the PorA antigen; hence any changes in the sequence of PorA in this region can disrupt antibody binding.Jeremy Derrick, UMIST. SRS Annual Report.

Among the class 2 and 3 outer membrane proteins of N. meningitidis, Por A has been considered a primary target for a vaccine-induced antibody. PorA is a major component of the outer membrane of N. meningitidis, and anti-PorA antibodies are thought to be a critical component in immunity. Interactions between antibodies and PorA have been studied. Different strains of the bacterium have different PorA amino acid sequences within the region of the protein that specifically binds to antibody molecules. PorA has several large amino acid "loop" regions that protrude from the surface, and it is these loops that are targets for antibody binding.

In the laboratory, the antigen-binding fragment (Fab) of anti-PorA antibodies can be crystallized and reacted with the antigenic loop regions of PorA in order to determine the specificity of binding between antigen and antibody. Slight changes in PorA amino acid sequence have been shown to cause loss in the ability to bind to antibody molecules. In nature, the bacterium mutates to insert new amino acid residues into the tip of the loop, which alters or eliminates many of the interactions with antibody and allows the bacterium to bypass previous immune responses.

Moraxella (Branhamella) catarrhalis

singura specie a genului prezent la om; prezint caractere asemntoare morfo-tinctoriale (diplococi gram-negativi) i metabolice (catalaz i oxidaz pozitiv) cu specii Neisseria; azaharolitic; comensal pe mucoasa tractusului respirator superior;

Moraxella (Branhamella) catarrhalis poate detertmina:- infecii traheobronhice la cei cu afeciuni cronice respiratorii; - infecii ORL (este al 3-lea agent etiologic ca frecven n otite medii i sinuzite acute, dup S.pneumoniae i H.influenzae); - rar izolat de la cazuri cu meningit, endocardit, pericardit; - peste 90% din tulpini rezistente la peniciline prin betalactamaz, fiind active asocierea cu inhibitori, cefalosporine, macrolide, tetracicline, fluorochinolone.