Centro de Investigacin y de Estudios Avanzados del Instituto Politcnico NacionalMaestra en Recursos MarinosDr. Miguel ngel Olvera NovoaIBQ M. Aracelly Rosado Sols.Seminario de AcuaculturaCultivo de Pepino de Mar

Introduccin

Los pepino de mar pertenecen a la clase holoturoideos (Holothuroidea), del griego (holothurion), conocidos vulgarmente como pepinos de mar, son una clase del filo Equinodermos compuesta por animales de cuerpo alargado que vive en los fondos de los mares de todo el mundo. (Kerr, 2005).

Pertenece al mismo grupo (Echinodermata) que los erizos de mar o las estrellas de mar aunque aparentemente no tienen la simetra pentarradial caracterstica de los dems representantes de este grupo. Se consideran animales con una simetra bilateral secundaria, ya que internamente sus rganos y sistemas aparecen en un nmero mltiplo de 5, como en el resto de equinodermos, pero externamente su cuerpo alargado da la sensacin de tener un solo eje de simetra. El cuerpo es musculoso, en forma de cilindro, y tiene una apertura bucal por un extremo que es rodeada por tentculos. En el otro extremo se halla la abertura anal. Algunas de sus caractersticas son de aspecto vermiforme, adaptados a la reptacin y con el cuerpo de forma prismtica pentagonal (Kerr, 2005).

Se alimentan de detritos, algas, en algunos casos de plancton. Los animales se reproducen por va sexual. Las larvas de vida planctnica son denominadas auricularia. En estado adulto la vida del pepino del mar se desarrolla en el fondo marino; son por tanto bentnicos.

Los sexos son separados, sin embargo, ocasionalmente se han registrado individuos hermafroditas. No hay dimorfismo sexual externo. La proporcin sexual es 1:1 (Herrero, 1994). La gnada presenta cinco estadios de desarrollo: indiferenciado, gametognesis, madurez, desove y postdesove. El ciclo reproductor es anual, con un desove en verano. El peso de primera madurez en esta especie es a partir de los 167 g (peso del msculo). El desarrollo gondico y el ndice gonadosomtico, estn relacionados con variaciones en la temperatura; sta juega un papel importante como sincronizador del ciclo reproductor pero no como activador del desove (Herrero, 1994).

Cuando algn depredador intenta atacar a las holoturias, estos animales logran sobrevivir expulsando sus vsceras para que el depredador se distraiga comiendo tales rganos, los cuales despus regeneran. Como defensas contra los parsitos los pepinos de mar sintetizan una protena, llamada lectina, la cual inhibe el desarrollo de posibles parsitos. (Barnes, 1987).

Muchas pesqueras de pepino de mar de todo el mundo estn sufriendo de la sobrepesca (Purcell 2010). Esto puede atribuirse a la insuficiente capacidad para gestionar la pesquera (Muthiga et al. 2010), la falta de conocimiento ecolgico desde la forma de gestin (Uthicke et al. 2004), el reclutamiento estocstico (Uthicke et al. 2009), fuerte demanda del mercado (Anderson et al. 2011), pesca ilegal (Price et al. 2010) y la presencia limitada de las instituciones (Eriksson et al., 2010). Mientras la pesca local se est agotando, todava hay una necesidad de mantener las oportunidades de ingreso en las comunidades y las naciones. En este contexto, la acuicultura tropical de pepino de mar est ganando impulso.

La sustentabilidad de los recursos pesqueros es un objetivo prioritario para nuestro pas. Es deseable que el manejo y las alternativas de las pesqueras estn fundamentadas en ms y mejores conocimientos sobre las poblaciones naturales (composicin, distribucin, abundancia, biologa: desarrollo y reproduccin), as como de los sistemas de produccin, que incluyen aspectos tecnolgicos, econmicos, sociales y culturales. Es tal su aceptacin, que puede alcanzar precios que resultan atractivos para nuestra economa. Su demanda se ve incrementada por las propiedades afrodisacas que se le atribuyen, no slo al namako (tradicional platillo) sino tambin al trepang (Caso, 1972).

El pepino de mar se incluy dentro de la lista de especies en peligro de extincin el 22 de marzo de 2000 en el Diario Oficial de la Federacin y a la especie del Golfo de California (Isostichopus fuscus) como bajo proteccin especial. Es por ello que en la Carta Nacional Pesquera publicada el 28 de agosto del 2000, se dispone que ya no se otorgaran permisos de pesca comercial para ninguna especie de pepino de mar distribuida en aguas de jurisdiccin Nacional. La nica manera de acceder a estas especies ser en forma precautoria mediante permisos de pesca de fomento, bajo los trminos y condiciones que marca la Ley de Pesca y su Reglamento. Su alto valor comercial y demanda lo ha colocado en los ltimos aos como un recurso atractivo para la pesca (FAO, 1995).

Muchos productores en nuestro pas han solicitado permisos para su explotacin. En varios estados como Baja California llegaron a presentarse alrededor de 20 solicitudes para obtener permisos de pesca de fomento. En tanto que para el Estado de Yucatn se solicitaron y otorgaron 9 permisos para pesca de fomento del 2007 al 2011. Estos permisos en Yucatn se otorgaron sin contar con suficiente informacin del estado actual del recurso y sin considerar que la pesca de fomento se define como captura de organismos con fines de estudio o investigacin y no para extraccin comercial de grandes volmenes. Estos permisos slo han servido para justificar la extraccin de cantidades importantes de pepino que han llegado a ser decomisadas cuando se exportan en forma seca (30 Tn/mes).

Dadas a las anteriores circunstancias y a la poca informacin que se tiene, se comenz con el estudio del pepino de mar, que se distribuye en las costas de Yucatn. Recientemente Zetina-Moguel y cols. (2002) han destacado la importancia comercial del pepino de mar para el Estado de Yucatn, un estudio muy breve que proporciona las tres especies ms importantes: Astichopus multifidus (43 cm), Isostichopus badionotus (28 cm) Holothuria floridana (13 cm).

Estado del arte del Cultivo (Battaglene, 2002)

El presente seminario se basa en el cultivo pepino de mar del gnero I. fuscus hasta su estado larvario como producto final, en Sinaloa.

El laboratorio en el que se llev a cabo el cultivo constaba de 14 tanques de cultivo larvario, ocho tanques con capacidad de 8.0 m3, seis tanques de 17.0 m3 y una laguna de oxidacin: una fosa de oxidacin para el tratamiento de las aguas residuales con capacidad para albergar y/o contener 1430.75 m3.

Setenta y dos das fueron destinados para la maduracin y desarrollo larvario hasta juvenil. 44 das son el tiempo lmite de mantenimiento de juveniles de I. fuscus en el laboratorio para su comercializacin.

Para llevar a cabo el cultivo (Gutierrez-Garcia, 1995) fueron necesarios dos estanques blancos de capacidad de 17 m3; se pintaron de blanco y se le colocaron 2 lmparas de luz blanca por estanque. Del mismo modo, se pintaron de negro dos estanques negros de capacidad de 8 m3 cada uno situados en el cuarto obscuro, se pondrn lmparas con un foco de luz blanca y otro de luz negra en los estanques en orden de adecuar la ambientacin y adaptacin de los pepinos de mar. Del mismo modo, se requiere el mantenimiento preventivo de los blowers deteriorados (de de Hp) para la aireacin de los estanques para todo el laboratorio. Adicional a lo anterior, se requiere dar mantenimiento a los 6 filtros existentes en el laboratorio, sustituyendo el cartucho de los mismos. Se necesita dar mantenimiento proveyendo de arena nueva para mejorar el proceso del filtrado del agua procedente del canal contiguo que abastece al laboratorio.

Personal requerido para la operacin y mantenimiento del proyecto: El personal que laborar en el cultivo de I. fuscus en laboratorio requiere de 8 personas, como se expresa en la siguiente tabla:

Tabla1. Personal requerido y el tipo de mano de obra que realizar.

El agua es extrada del Estero Teacapn, a travs de tubera de PVC de 2 pulgadas con una longitud de 50 metros aprox., para llevar a cabo el proceso correspondiente a la reproduccin del pepino de mar en laboratorio. El agua dulce necesaria para procesos como el lavado de huevos y la desinfeccin del laboratorio en etapa de juveniles, se obtuvo del agua potable con la que contaba el laboratorio. Una vez tomada el agua del canal de llamada, sta caer a un primer reservorio de 90 toneladas de capacidad, el cual se llenar al nivel mximo, hasta que el agua limpia por gravedad, se desborde y caiga al segundo reservorio de 90 toneladas, una vez en ste, se pasar el agua por medio de una bomba al tercer reservorio de capacidad de 280 toneladas, donde se le agrega reactivos como cloro saturado para limpiarla. Posteriormente se le agrega vitamina C para eliminar el Cloro mencionado anteriormente, cabe mencionar que tambin es factible el uso de tiosulfato de sodio como sustituto de vitamina C para eliminar el Cloro. Esta agua abastecer todo el laboratorio.

En cuanto a la aireacin y temperatura, se adecuaron tubos de PVC a los tanques con una adaptacin de acero inoxidable para el intercambio de calor, estos tubos van conectados a las calderas del laboratorio, se colocaron blower de de HP en los tanques para la aireacin.

En la operacin y mantenimiento de este proyecto fue necesario el recambio de agua de los estanques del laboratorio; ste consiste en el recambio de agua en las piletas o estanques. La frecuencia y cantidad de agua en el recambio depender del estadio del organismo de I. fuscus, como se presenta a continuacin (Toral, 1996):

Reproductores en aislamiento: Previo al proceso de maduracin de los I. fuscus, se pondrn en aislamiento por 2 das los organismos reproductores recolectados en estado natural, estos estarn dispuestos en 2 estanques de 17 m3 de capacidad, llenados a 3 toneladas cada uno. Estos estanques tendrn un recambio total diario de 3 toneladas de agua. Dado lo anterior, el volumen de agua residual generado en el proceso de aislamiento de reproductores por da ser de 6 toneladas, es decir, se generarn 12 toneladas de agua residual entre los dos estanques, en los dos das que dura este proceso. Posterior al aislamiento de los reproductores de I. fuscus, se tiene el proceso de maduracin de los mismos, el cual incluye la eclosin de los huevos. Del mismo modo se tienen los 4 estadios larvarios siguientes hasta juveniles como producto final. Este proceso y estadios requerirn de los recambios detallados en la siguiente tabla:

Tabla2. Volmenes de agua correspondientes al recambio diario en el proceso de reproduccin de I. fuscus, desde la maduracin hasta el estadio de juvenil.

Para la retencin de gametos, huevos, larvas, juveniles y reproductores de I. fuscus se utilizaron mallas de micraje de 5 a 35 m en los estanques para evitar las fugas de gametos, huevos, larvas, juveniles y/o reproductores de pepino de mar al drenaje o a cuerpos de agua contiguos al laboratorio. Cabe sealar que los gametos, huevos, larvas, reproductores que no fueron viables, frtiles, o en el caso de juveniles, que no fueron vendidos despus de 44 das (posteriores a su conversin en juvenil); fueron retenidos por la malla mencionada en un inicio, y se incineraron.

Adquisicin de los Reproductores: Previo al cultivo del pepino de mar en laboratorio, se requiere de la adquisicin de los organismos reproductores (mediante un permiso de extraccin). Para este fin se capturaron 60 ejemplares de Isostichopus fuscus los cuales fueron extrados manualmente en la zona submareal somera (2 a 6 m de profundidad), en las pozas intermareales y mediante buceo autnomo, fueron puestos en bolsas y posteriormente en recipientes de plstico. Al terminar la colecta los organismos fueron llevados a la zona costera en donde el trasporte terrestre llevara a los organismos al laboratorio de acuacultura situado en el Dorado, Culiacn Sinaloa, al llegar se pusieron en aislamiento durante 48 horas sin alimento y con limpieza continua del tanque de asilamiento.

Descripcin de los Reproductores: En lo referente a peso, los reproductores debern cumplir con el reglamento de colecta de pepinos de mar, el primer paso para escoger a un reproductor es tomar en cuenta el peso individual de cada ejemplar, el organismo deber tener un peso de 450 gramos para asegurar que el organismos hayan desovado por lo menos una vez en su vida para evitar perturbar o desequilibrar su ambiente natural al extraer los reproductores. En referencia a la longitud, los reproductores debern cumplir con el reglamento de colecta de los pepinos de mar, diversos estudios establecen que los ejemplares debern medir individualmente 28 cm de largo medidos por la parte dorsal de la boca hasta el ano, nuevamente para asegurar que haya desovado al menos una vez en el medio natural. El estado fsico de los reproductores fue examinado por el bilogo responsable del trasporte, que consider a los reproductores valorando el estado de la piel, gnadas expuestas o vsceras, yagas, estos factores son importantes asegurar que los reproductores sean de calidad y al mismo tiempo asegurar el buen futuro de los desoves programados y desoves no programados.

El sexo de los reproductores de los pepinos de mar est provisto en las hembras por la forma de las papilas sensoriales comnmente llamadas chichillas provistas por la parte superior y en los costados de los pepinos de mar son de forma semicilndrica en la parte superior, su forma es una punta delgada y flexible. En los machos las papilas sensoriales son redondeadas, a los costados tienen una banda liza, en esta banda no tienen papilas, si acaso una al inicio y 2 a 3 al final. Con esta identificacin de sexos hay un error de 10: 2 por cada diez ejemplares tienes un error del 20%.

Se capturaron 3 ejemplares por sumergida ya que si se toman ms ejemplares podra daar los reproductores, al tomar los ejemplares el buzo hizo una media aproximada de longitud y peso aproximado y si los organismos no cumplen con las normas establecidas no se colectaron. Los ejemplares que pasaron las normas fueron puestos en bolsas individuales llenas con agua de mar a temperatura ambiente, que se colocaron en hieleras de plstico con capacidad para 25 ejemplares aproximadamente, la hielera estuvo siempre tapada impidiendo la luz del sol esto para prevenir estrs y el evisceramiento de los organismos.

Para transportar a los pepinos, el bilogo responsable analiz a los ejemplares y los acomod en 50 tinas de plstico color negro con medidas de 1 X .40 X .40 metros, las cuales contaban con dos lneas de distribucin: una de oxgeno y otra de aireacin, la que ser provista por dos blower de de Hp y el oxgeno por dos taques de O2. Los organismos fueron dispuestos al azar, en cada tina se colocaron de 5 a 6 ejemplares de reproductores, tomando en cuenta que cada ejemplar deber pesar 450 grs. y medir 28 cm de longitud aproximadamente, para sedar a los organismos se agreg 0.05g de cloruro de Magnesio a cada tina, este sedante durar a lo mximo 6 horas.

Durante los traslados largos, si el bilogo desea volver a sedar tendr que alimentar a los ejemplares con algas y alimento balanceado por 2 horas, al paso de dos horas se deber limpiar las tinas y rellenar stas a su nivel mximo manejable y posteriormente volver a sedar a la misma concentracin de Cloruro de Magnesio. Para saber las condiciones ptimas de transporte revis la tabla 3.

Tabla3. Las condiciones ptimas de transporte dadas por los siguientes factores fsicos qumicos.

Se dispuso de os reproductores de I. fuscus en dos estanques de capacidad de 20 toneladas cada uno, llenados a 3 toneladas de agua cada uno, 30 organismos por estanque. Los reproductores se examinaron individualmente, y se observ su estado fsico, principalmente si los organismos estaban en disposicin de ser aclimatados, se realiza el cambio de temperatura a 29C y a una salinidad de 35 ppm; si los ejemplares no se encuentran en buen estado fsico se les administrar vitaminas y minerales con el fin de mejorar el estado de estrs provocado por el trasporte y su estado fsico. La alimentacin de los reproductores est dada por una serie de alimentos constituidos en mayor parte por macroalgas de la especie Ulva expansa y alimento peletizado camaronina a un 35% de protena. Se presenta la lista de alimentos que ser suministrada al 5% de la biomasa obtenida de los reproductores.

Tabla4. Lista de alimentos suministrado a los reproductores de I. fuscus al 5% de la biomasa obtenida.

Tabla 5. Condiciones ptimas para el mantenimiento de reproductores de I. fuscus

Para mantener el medio de los organismos, diariamente se realiz la limpieza de las tinas solamente en el fondo para retirar alimento excedente y heces fecales de los reproductores, el recambio de agua era realizado diario al 5% del tanque aproximadamente; La limpieza total del tanque solo se realiz cada 20 das (recambio de agua del 100%), el agua deber tener una salinidad de 35 ppm y una temperatura de 29 C estas condiciones nunca debern cambiar, ya que si llegaran a cambiar puede llegar a producir desoves no esperado o no programados.

El desove de los ejemplares reproductores se program una vez por mes en las fechas de luna encuartada. Los mtodos de desove a utilizados en el trabajo fueron tres, el de choque trmico (a menor temperatura), inyeccin de espermas y factores ambientales. El empleo de ellos depender de la madurez de los ejemplares.

Protocolo de choque trmico:El choque trmico como se mencion anteriormente, estar dado a menor temperatura, se baja la temperatura 5 C cada 30 minutos hasta llegar a los 15 C, al llegar a los 1 5 C se dejaran reposar a los ejemplares por 30 min. Despus se sube rpidamente la temperatura a 30 C, los ejemplares sern pasados de una temperatura baja a una alta temperatura, esto es un choque trmico que hace que los ejemplares desoven al sufrir este cambio de temperatura. En este procedimiento el encargado deber estar muy pendiente, si los ejemplares desovan antes de hacer el choque trmico se deber detener el procedimiento y esperar a que todos los ejemplares desoven.

Protocolo de Inyeccin de espermas (Hamel, 1995b): Para llevar a cabo la inyeccin de espermas no es necesario hacer cambios en la temperatura y salinidad del agua de mar, se escogen alrededor de 10 machos maduros en donde se les diseccionar y se les sacar las vsceras, y a stas se les separara de las gnadas a las cuales se limpiarn cuidadosamente para no romperlas. Una vez separadas las gnadas se metern a un tubo de ensayo donde sern molidas finamente. Posteriormente la mezcla de las 10 gnadas se diluir en 1 litro de agua de mar a temperatura de 29 C y a una salinidad de 35 ppm, despus la dilucin del agua se aplicar al tanque donde se encuentran los ejemplares. En este procedimiento se deber monitorear el desove de los ejemplares por lapsos de 30 minutos hasta que desoven.

El protocolo de Factores ambientales, est determinado por temperatura, estados de madurez, luz, desoves no programados (estrs).

Una vez que se halla llevado a cabo el desove, los huevos fecundados y no fecundados se recolectaron por medio de un tamiz de 35 m. El tamiz de 35 m es colocado en la salida del agua del tanque en donde se encuentran los reproductores, debe estar sumergido en una cubeta de 20 litros la cual deber estar sumergida en una tara de 50 kg en donde el agua va a caer primeramente en el tamiz donde se colectaran los huevos, despus el agua saldr libre de huevos del tamiz y pasara a la cubeta, y de esta a la tara y al drenaje por ltimo. Es muy importante no colectar excesivamente los huevos, es decir, se deber colectar en partes para no daar los huevos fecundados. Posteriormente los huevos fecundados se limpian y desinfectan, colocndolos en diferentes cubetas con un tamiz de 35 m los huevos se diluirn a 15 litros con aireacin fuerte posteriormente se realiza la limpieza de los huevos fecundados, aplicndoles 1 ml de iodo diluido en 1 litro de agua por 30 segundos posteriormente se lavar con agua dulce los huevos fecundados. Los fecundados se pasan a un rotoplast de 500 litros, despus a los huevos se les tomarn 5 muestras independientes de 25 ml en donde se contarn uno a uno de las muestras tomadas, esto para realizar un conteo aproximado para saber cuntos huevos fecundados se sembrarn en la sala de maduracin, 4 millones de huevos de inicio a final se obtendr el 70 % de sobrevivencia. Adems se introducirn alrededor de 2.8 millones de huevos en cada una de las tinas utilizadas, estas tinas (de la salas de maduracin) estarn llenas a 3 toneladas de agua y contarn con una temperatura a 29C y una salinidad de 35 ppm se mantendrn as por el lapso mientras que los huevos eclosionen. Antes que los huevos eclosionen, se les aplica una solucin de treflam de 0.05 gr por tonelada de agua existente en el tanque, esto es para prevenir hongos y bacterias (antes y despus de la eclosin).

Primera Fase Larvaria Auricularia: Esta fase larval dura alrededor de 3 a 15 das; en esta etapa se alimentan principalmente de microalgas en las cuales se alimentaran principalmente del genero Talasiosira y Chaetoseros spp (Tabla 6). La alimentacin estar dada principalmente por microalgas las cuales se les adicionar a 100000 cel./ml, con un monitoreo de cada 6 horas para determinar la cantidad de clulas de microalgas que se deban suministrar en este lapso, consecuentemente tambin se alimentar con alimentos peletizados con el fin de mejorar el cultivo de la cra de los pepinos de mar. La alimentacin artificial est compuesta de MicroMad 30, Spirulina, Oxido de cromo y Vitamina C y ser dada en la proporcin del 0.001% a la cantidad de larvas existentes en los tanques. La limpieza de los estanques se realiza en dos partes cada 12 horas, un cambio de fondo mediante una percha con malla de 250 m y un recambio de superficie del agua del tanque. Al paso de 8 das se aplicar treflam al 0.05 gramos por tonelada de agua para prevenir bacterias y hongos. Las larvas se contarn tomando muestras de agua de 25 ml; se tomaran 5 muestras de agua a lo largo del tanque, posteriormente se realizar un promedio y se harn los clculos pertinentes para saber la cantidad de Auricularia de I. fuscus, esto se realizar diariamente. Estos clculos nos indicarn la cantidad de alimento a suministrar y la cantidad de organismos existentes en cada uno de los tanques.

Tabla 6. Condiciones ptimas para el mantenimiento de Auricularia de I. fuscus (Hamel, 1995;Hammel,1996)

Segunda etapa larval Dololaria de I. fuscus: Esta etapa larvaria dura de 19 a 24 das.En esta etapa la alimentacin de las larvas seguir siendo mayor en tanto a microalgas, y tambin tendr alimentacin artificial con el fin de mejorar el cultivo. Estas larvas se encuentran en la columna de agua. Las condiciones ptimas para el mantenimiento de Doliolaria en las tinas estarn dadas por los siguientes factores fsicos qumicos expresados en la tabla 7. La alimentacin para Doliolaria de I. fuscus estar dada principalmente por microalgas (150000 cel./ml), la cantidad de algas se estar monitoreando cada 6 horas para determinar la cantidad de clulas de microalgas que se deban suministrar cada 6 horas como se hizo anteriormente con Auricularia, tambin se les dar alimento paletizado con el fin de mejorar el cultivo de la cra de los pepinos de mar. La alimentacin artificial estar dada de la siguiente manera: MicroMad30, Spirulina Oxido de cromo, Vitamina C, Algamac 3000, Flake, Micro mad 70, Levadura, Macroalgas, ABM 50, ABM 125, ABM 250, lodo, esta alimentacin estar dada en la proporcin del 0.05% a la cantidad de larvas existentes en los tanques. La limpieza de los tanques se realiza en dos partes cada 12 horas; primero se debe realizar un cambio de fondo mediante una percha con malla de 250 m y un cambio de superficie del agua del tanque. Al paso de los 3 das se aplica treflam al 0.05 gramos por tonelada de agua para prevenir bacterias y hongos. Las larvas se cuentan tomando muestras de agua de 25 ml, se toman 5 muestras de agua a lo largo del tanque, posteriormente se calcula un promedio y se harn los clculos pertinentes para saber la cantidad de Doliolaria de I. fuscus; esto se realizar diariamente, estos clculos nos indicaran la cantidad de alimento a suministrar y la cantidad de organismo existentes en cada uno de los tanques.

Tabla 7. Condiciones ptimas para el mantenimiento de etapa larval Dololaria de I. fuscus (Hamel, 1995; Hamel 1996)

La tercera etapa larval del pepino I. fuscus es Pentactula, esta etapa larvaria dura de 21 a 26 das. La alimentacin de las larvas seguir siendo mayor en microalgas y en proporcin menor de alimento artificial. La alimentacin artificial es nuevamente con el fin de mejorar el cultivo, estas larvas se encuentran en la columna de agua y la duracin de esta etapa es variable. Las condiciones ptimas para el mantenimiento Pentactula de I. fuscus en las tinas estan dadas por los factores fsicos qumicos expresados en la tabla 8.En cuanto a su alimentacin, est dada principalmente por microalgas (200000 cel./ml), la cantidad de algas se estar monitoreando cada 6 horas para determinar la cantidad de clulas de microalgas que se deban suministrar despus. Tambin se alimenta con alimentos peletizados con el fin de mejorar el cultivo de la cra de los pepinos de mar. La alimentacin artificial est dada en la proporcin del 0.5% a la cantidad de larvas existentes en los tanques, y se describe en la tabla 9. La limpieza se realizar en dos partes; cada 12 horas se realizar un cambio de fondo mediante una percha con malla de 250 m y un cambio de superficie del agua del tanque. Al paso de los 3 das se aplicar treflam al 0.05 gramos por tonelada de agua para prevenir bacterias y hongos. Posteriormente se cuentas las larvas de la siguiente manera: dado que las larvas ya estn pegadas a las paredes de los tanques se contaran por m2, se har un cuadro de plstico que mida 1 m2 y se tomarn 10 muestras de la pared de las tinas, cada una se registrar y se realizar los anlisis determinados para saber la densidad, biomasa y cantidad de larvas de Pentacula de I. fuscus esto se realizar diariamente, por tina individual.

Tabla 8: Condiciones ptimas para el mantenimiento Pentactula de I. fuscus en las tinas de pepino.

Tabla 9: Alimentacin suministrada al estado larvario Pentacula de I. fuscus.

En la cuarta etapa larval (Hamel, 2003), Juveniles de I. fuscus la cual dura desde los 28 hasta los 72 das del ciclo reproductivo, la alimentacin de las larvas ser equitativa o en partes iguales de microalgas y en alimento artificial (50-50). Este ltimo ser nuevamente con el propsito de mejorar el cultivo, estas larvas se encuentran en la columna de agua. Las condiciones ptimas para el mantenimiento de Juveniles en las tinas estarn dadas por los factores fsicos-qumicos expresados en la tabla 10. La alimentacin estar dada principalmente por microalgas las cuales se les adicionar a 200000 cel./ml, la cantidad de algas se estar monitoreando cada 6 horas para determinar la cantidad de clulas de microalgas que se deban suministrar cada 6 horas, consecuentemente tambin se alimentar con alimentos peletizados para mejorar el cultivo de la cra de los pepinos de mar. La alimentacin artificial estar dada en la proporcin del 0.5% a la cantidad de larvas existentes en los tanques, y se expresa en la siguiente tabla 11.

Tabla 10. Factores fsicos-qumicos ptimos para el mantenimiento de Juveniles en las tinas de pepino de mar.

Tabla 11. Alimentacin suministrada a la etapa de Juveniles de I. fuscus.

La limpieza de los dos tanques, tambin se lleva a cabo en dos partes, cada 12 horas se hace cambio de fondo mediante una percha con malla de 250 m y un cambio de superficie del agua del tanque. Al paso de los 3 das se aplica treflam al 0.05 gramos por tonelada de agua para prevenir bacterias y hongos. Dado que las larvas ya estn pegadas a las paredes de los tanques se contarn por m2, se har un cuadro de plstico que mida 1 m2 y se tomarn 10 muestras de la pared de las tinas, cada una se registrar y se realizarn los anlisis determinados para saber la densidad, biomasa y cantidad de larvas de Juveniles de I. fuscus. Esto se realizar diariamente y por tina individual.

Despus de pasada esta etapa los Juveniles ya deberan de haber alcanzado en promedio 2 pulgadas o 7 gramos de peso. Estos organismos debern tener las caractersticas igual a un pepino de mar adulto en forma y color. A partir de que la larva se convierte en juvenil durar 44 das mximos en el laboratorio.

Conclusin:

Uno de los aspectos, ms relevantes en cuanto al cultivo de pepino, es la obtencin de huevos, ya que en muchos pases, los huevos slo pueden ser obtenidos durante una temporada de desove relativamente corto. Esto limita las posibilidades de la agricultura y la ganadera del pepino de mar, por tanto se necesitaran desarrollar mtodos para extender la temporada de desove por meses.

En cuanto al tamao de la crianza de los tanques, los tanques de cra de larvas pequeas requieren considerable mano de obra y son propensos a la variacin de la temperatura. El uso de tanques de larvas ms grandes que requieran slo cambios parciales diarios de agua mejorar la eficiencia de la cra de larvas y dar lugar a una mayor supervivencia de estas mediante la reduccin de la tensin inducida por la temperatura. El uso de la luz del da en lugar de la luz artificial tambin sera una ventaja.

El tercer aspecto sera la alimentacin del cultivo, la produccin de grandes volmenes de algas se puede aumentar mediante el uso de grandes cultivos al aire libre. Sin embargo, mantener estos cultivos libres de contaminacin por los coppodos requiere sistemas de filtracin adecuada, tratamiento UV y esterilizacin por cloracin-descloracin.

El problema que pueda resultar en costos sustanciales estara dado por el espacio para los tanques de cra: Como se requieren tanques de cra ms grandes para la primera etapa de vivero, esto a menudo puede resultar en costos sustanciales. Sin embargo, el espacio se puede ahorrar mediante el uso de placas adicionales y por la clasificacin para eliminar animales ms grandes para la segunda fase de vivero. Para la segunda etapa del cultivo, pueden ser usadas redes de bolsa en estanques o jaulas de los fondos para reemplazar los tanques de cra.

Para posibles temas de investigacin, estos organismos contienen condroitina y glucosamina, as como otras sustancias bioactivas que tienen propiedades antiinflamatorias y anti-tumorales, se les atribuyen propiedades afrodisacas. Se conoce que son inhibidores de algunos tipos de cncer como el de pulmn y de mama.

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