8/20/2019 Conservación de Cepas Microbianas

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CONSERVACIÓN DE CEPASMICROBIANAS

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Objetivos que hay que alcana! "a!a conse!va! co!!ecta#ente las ce#ic!obianas en los labo!ato!ios $e #ic!obiolo%&a'

•

(ue el cultivo a conse!va! sea "u!o) evitan$o que se "!o$ucanconta#inaciones $u!ante el "!oceso $e conse!vaci*n'

• (ue $u!ante el tie#"o $e conse!vaci*n sob!evivan al #enos el +,-

las c0lulas'

• (ue estas c0lulas "e!#anecan %en0tica#ente estables'

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MÉTODOS DE ELECCIÓN O DECONSERVACIÓN A LARGO PLAZO.

• 1os #0to$os $e conse!vaci*n "e!tenecientes a

este %!u"o son $os2 congelación y liofliación.

• Son los #ejo!es "o!que en ellos se"a!alia el c!eci#iento $e lasc0lulas #ic!obianas) "e!o 0stas nohan #ue!to'

• Se %a!antia al #34estabili$a$ %en0ticaa"a!ici*n $e %ene!asucesivas'

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a5 Conse!vaci*n "o! con%elaci*n'

Se con%elan las c0lulas en sus"ensi*n en un l&qui$o con un a%ente c!io"!otecto! y se %ua!$anin6e!io!es a , 7C) con lo que el a%ua se con%ela

Al no $is"one! las c0lulas $e a%ua en 6o!#al&qui$a) no hay c!eci#iento'

Este es el #ejo! #0to$o $e conse!vaci*n $es$e to$os los "untos $e vista) "e!o tieinconveniente $e !eque!i! a"a!atos es"eciales

Cuan$o se quie!e t!abaja! con lconse!va$as) se !ecu"e!an subite#"e!atu!a'

 8a#bi0n !esulta se! el #0to$o #3s #olesto "a!a !ealia! el env&o $e lasce"as'

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9' E$a$ $e las c0lulas2En la #ayo!&a $e los casosconviene utilia! c0lulas#a$u!as $el inicio $e la6ase estaciona!ia $e lacu!va $e c!eci#iento' :' Vel

con%e

$escoque late#"!3"i$acon%e$escoque "convic0lula

;' 8e#"e!atu!a $e al#acena#iento2 Dese! lo #3s baja "osible' 1o #ejo! es%ua!$a! tubos ce!!a$os o sella$os) queconten%an las c0lulas #ic!obianas)su#e!%i$os en nit!*%eno l&qui$o) que tiuna te#"e!atu!a $e =9>?

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1a lioliaci*n se consi%ue"o! subli#aci*n $el hielo $elas c0lulas'

 8a#"oco sen las c0lu"o! este #que se lesa%ua #e$lioliaci*"!oceso su

!"Con#e$%ación

&o$liofliación.

Es un #0to$o #uy!eco#en$able "o! su co#o$i$a$"a!a el al#acena#iento y "a!ael env&o $e las ce"as) "ues unave conse%ui$os los li*los"ue$en al#acena!se ate#"e!atu!a a#biente 9.

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 8i"o $e #ic!oo!%anis#o'

acto!es que inuyenes"ec&ca#ente en la

ecacia $e lalioliaci*n co#o

#e$io $e conse!vaci*n'

Concent

 8e#"e!asub

F!a$o $e $eshi$!ataci*nalcana$o'

Con$iciones $eal#acena#iento'

At#*s6e!a $e o4&%enoen el tubo'

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MÉTODOS ALTERNATIVOS.

• Son los que se utilian cuan$o no se "ue$en e#"lea! los #0to$os $e elec

"o! ca!ece! $e los equi"os necesa!ios) o bien "o!que la ce"a #ic!obiana n

t!ata#ientos $e la conse!vaci*n "o! estos #0to$os'

a5 Conse!vaci*n "o! t!ans6e!encia "e!i*$ica'

b5 Conse!vaci*n "o! sus"ensi*n en a%ua $estila$a o en a%ua $e #a!

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a5 Conse!vaci*n "o! t!ans6e!encia "e!i*$ica'

• 1a ce"a #ic!obianase %ua!$a en 6o!#a$e cultivo activo enel #e$io $e cultivo

en el que hac!eci$o'

• Estas c0lulas no "ue$en"e!#anece!in$eni$a#ente en el#is#o tubo) "o!que alse%ui! activas e4c!etan"!o$uctos t*4icos $el#etabolis#o que seacu#ulan) "!ovocan$o elenvejeci#iento y #ue!tecelula!es) "o! lo que esnecesa!io t!ans6e!i!las aot!o tubo con #e$io $ecultivo 6!esco'

• Este es "a!a conestabili$"uesto qc0lulas cuna alte%ene!ac$el tie#

que se ese!3n $elejanas inicialesya no co$e sus c

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b5 Conse!vaci*n "o! sus"ensi*n en a%ua $estila$a o en a#a! est0!il'

Es un #0to$o alte!nativo #uy utilia$o y que $a altos "o!centajes $eviabili$a$ en $ive!sos ti"os $e #ic!oo!%anis#os) tanto hon%os la#enco#o leva$u!as y al%unas bacte!ias'

Consiste en sus"en$e! en a%ua est0!il unas cuantas c0lulas $elcultivo que se quie!e conse!va!'

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MÉTODOS RESTRINGIDOS.• En este %!u"o se en%loban #0to$os no e#"lea$os habitual#ente) "e!o a los que es ne

!ecu!!i! a la ho!a $e conse!va! %!u"os $e #ic!oo!%anis#os #uy $ete!#ina$os que no la lioliaci*n o la con%elaci*n) co#o "o! eje#"lo los %0ne!os bacte!ianos spirillum) rh

etc'

• Estos #eto$os se basan en la "a!aliaci*n $el c!eci#iento "o! eli#inaci*n $el a%ua $ilas c0lulas'

a5 Desecaci*n en "a"el $e lt!o'

b5 Desecaci*n en suelo) a!ena) silica%el) etc'

c5 Desecaci*n en bolitas $e al%inato$5 Desecaci*n en sal %o!$a "a!a halobacte!ias'

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a5 Desecaci*n en "a"el $e lt!o'

• Se utilia un "a"el bastante abso!bente Ghat#ann n< ;5 que se i#"!e%na

soluci*n #uy $ensa $e c0lulas y se $eja seca! al ai!e en con$iciones est0

•  8a#bi0n es "osible $eseca!los "o! el "!oce$i#iento que se lla#a $esecaci$!y5 "o!que se utilia "a!a ello el liolia$o!) "e!o sin que haya habi$o con"!evia $e las c0lulas'

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b5 Desecaci*n en suelo) a!ena) silica%el)

• Se aa$en las c0lulas a estos sust!atos que las "!ote%e!3n al $ese

#ic!oo!%anis#os "!o$ucto!es $e es"o!as se "ue$en conse!va! $u!

bastante tie#"o "o! este #0to$o'

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c5 Desecaci*n enbolitas $e al%inato

Hste es un "!oce$i#ientobastante eca'

1as c0lulas se encuent!an en una#at!i $e al%inato y la eli#inaci*n$el a%ua se hace "o! t!ata#ientocon soluciones hi"e!t*nicassucesivas y "oste!io! $esecaci*n alai!e hasta que se "ie!$e un +,/ $esu conteni$o en a%ua'

Este es un #0to$oque se est3utilian$o incluso"a!a la conse!vaci*$e al%as y c0lulasve%etales'

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$5 Desecaci*n en sal %o!$a "a!a halobacte

• Pa!a su conse!vaci*n "o! este #0to$o se #eclan lasc0lulas con sal y se $ejan $eseca! es"ont3nea#ente'

• Debi$o a la hi%!osco"ici$a$ $e la sal) la $esecaci*n no es total) "e!o lc0lulas $ejan $e #ulti"lica!se "o! se! insuciente el nivel $e a%ua$is"onible'