Citologie şi Histologie Practică

Curs 5

Efuziile seroase• Seroasele:

– Pleurală, peritoneală, pericardică– Prezintă două foiţe: viscerală şi parietală

• Foiţele sunt constituite dintr-un strat de ţesut conjunctiv lax acoperit spre cavitate de celule mezoteliale

– Cavitate

• Acumularea de aer: pneumopericard, pneumoperitoneu, pneumotorax

• Acumulare de sânge: hemopericard, hemoperitoneu, hemotorax

• Acumularea de lichid (altul decât sânge) în cavităţile seroase - reflecţie a unor afecţiuni locale sau sistemice, poartă denumirea de efuzie

• Analiza citologiei:– afectiune benigna sau malignă; – inflamatorie sau reactivă.

Foiţa viscerală ( pericardică)

Celulă mezotelială pericardică (săgeţi – vezicule de pinocitoză)

Seroasa pleurală

Celulă mezotelială pleurală (săgeţi – microvili)

Efuziile seroase• În condiţii normale în cavităţile

seroase se găseşte o cantitate mică de lichid.

• Datorită cantităţii reduse lichidul nu poate fi aspirat (la normal).

• Celulele mezoteliale realizează o barieră selectivă pentru fluide şi celule.

• Mişcările lichidului prin seroase sunt determinate de:

– Presiunea coloid osmotică– Presiunea hidrostatică din capilare– Permeabilitatea capilară– Drenajul limfatic

• Controlul este la nivel vascular • Turnover-ul : 500ml/oră• Majoritatea celulelor prezente în

fluidul normal:– Celule mezoteliale degenerate– Rare limfocite

Realizarea preparatelor• Lichidele se colectează în

containere sterile şi transferate în laborator cât mai repede posibil

• Se poate menţine până la 4 zile prin plasarea la 4 C

• Cantitatea minimă necesară pentru a obţine rezultate satisfăcătoare este de 10 ml.

• Se adaugă soluţie anticoagulantă (pentru 20 ml de lichid):

– 2 ml de citrat de sodiu 3,8%– 20 mg EDTA (acid

etilendiaminotetraacetic)– 2 mg (200 uităţi) heparină

• Centrifugare 600 rpm (10 minute)• Preparate:

– uscate la aer (utile pentru evidenţierea microvililor) pentru colorarea cu Giemsa

– fixate (alcool) pentru colorarea cu Papanicolaou

Tipuri de efuzii seroase• Clasificate în funcţie de

greutatea specifică şi conţinutul proteic, în transudate şi exudate

• Clasic se face pe baza conţinutului proteic:– >3g/100 ml în exudat 3g/100 ml în transudat

• Transudatele implică o cauză sistemică:– Peretele vascular este intact– Presiune venoasă crescută

(insuf cardiacă)– Reducerea presiunii osmotice

intravasculare, dată de hipoproteinemie (insuficienţă renală)

• Exudatele sugerează o cauză inflamatorie locală– Peretele vascular este lezat

Tipuri de efuzii seroaseTransudatele

• Lichid clar, de culoare galben pai• Conţinut celular scăzut:

– Celule mezoteliale (în general degenerate)

– Macrofage • Prezente în:

– ascitele secundare insuficienţei renale

– Ciroză• Transudatele se întâlnesc rar în

fluidele din pleură– Insuficienţa cardiacă congestivă

se asociază adesea de transudat pleural dar cu nivel proteic crescut datorat unor complicaţii locale (congestie pulmonară, infarct)

– În aceste cazuri celularitatea se aseamănă cu cea din exudat

Exudatele• Lichid opac, de culori variate

– Culoare roşietică poate sugera prezenţa unei tumori (primare sau metastatice) sau a tuberculozei

• Conţinut celular crescut:– Leucocite– Macrofage– Celule mezoteliale– Celule tumorale

• Prezente în:– Afecţiuni inflamatorii– Infiltrare malignă

• Aproape 50% sunt pe fondul proliferărilor maligne

• Restul sunt datorate proceselor inflamatorii acute sau cronice ale organelor aflate în legătură cu aceste cavităţi.

Celularitatea efuziilor leucocitele

• Sunt celulele predominante în majoritatea afecţiunilor benigne.– Limfocitele predomină în

efuzii cronice

• Sunt numeroase în fluidele maligne.

• Morfologie asemănătoare cu a celor de pe frotiul sanguin, însă în proporţii diferite.

Limfocit (frotiu sanguin)

Granulocit neutrofil (frotiu sanguin)

Monocit (frotiu sanguin)

Granulocit eozinofil (frotiu sanguin)

Limfocite în efuzie pleurală

Granulocite eozinofile (lichid pleural)

Granulocite neutrofile (lichid pleural)

Celularitatea efuziilor macrofagele

• Sunt uneori dificil de diferenţiat de celulele mezoteliale, în special pe coloraţia Papanicolaou.

• Este utilă coloraţia MGG• Uneori sunt cu morfologie

asemănătoare monocitelor de pe frotiul sanguin.

• Uzual au aspect vacuolat al citoplasmei, cu dimensiuni mai mari decât monocitele.

• Originea macrofagelor din efuzii:– din sânge;– ţesutul conjunctiv

submezotelial.

Macrofag

Celularitatea efuziilor macrofagele

• Sunt uneori dificil de diferenţiat de celulele mezoteliale, în special pe coloraţia Papanicolaou.

• Utilă coloraţia MGG• Uneori sunt cu morfologie

asemănătoare monocitelor de pe frotiul sanguin.

• Uzual au aspect vacuolat al citoplasmei, cu dimensiuni mai mari decât monocitele.

• Originea macrofagelor din efuzii:– din sânge;– ţesutul conjunctiv

submezotelial.

Macrofage

Celule gigante multinucleate

• Acoperă seroasele pleurală, pericardică şi peritoneală.

• Scuamoasă sau cubică pe secţiuni.

• Dimensiuni de 15-45 µm.• Pot exista forme binucleate sau

multinucleate.• Este bine reprezentată pe

preparatele citologice:– Citoplasma clară, abundentă;– Nuclei mici cu pattern

cromatinian omogen;– Uzual fără nucleol.

Celularitatea efuziilor celula mezotelială

Celule mezoteliale

Celule mezoteliale în lichid de ascită

• În efuziile seroase:• Celulele sunt dispuse izolat sau în

grupuri• Celulele mezoteliale au

aproximativ 20 microni• Celulele sunt separate una de

cealaltă prin intermediul unor zone cromofobe (intercelular)

• Citoplasma este bine delimitată• Nucleul celulei este situat central,

bine delimitat si poate conţine nucleoli (uneori greu evidenţiabil)

• Camd sunt izolate pot fi confundate cu macrofagele

Celule mezoteliale în lichid pleural

Macrofage

• Într-o varietate de procese suferă modificări reactive:– Limita celulară nu mai este

la fel de bine delimitată;– Nucleul este mărit (relativ şi

absolut), – Nucleolii adesea sunt

prezenţi.

Celularitatea efuziilor celula mezotelială

Celule mezoteliale reactive

Atipii celulare marcate

Afecţiuni specifice nonmaligne asociate cu prezenţa efuziilor

• Hipoproteinemia– Acumulare de lichid în toate

cavităţile (anasarcă)• Afecţiuni renale• Nutriţie inadecvată

– Clasic: transudat• Insuficienţa cardiacă

congestivă:– Cea mai comună cauză pentru

efuziile pleurale cronice– Se poate asocia şi cu

acumularea de lichid pericardic şi peritoneal (ascitic)

– Clasic: transudat cu celularitate bogată

– Când asociază boală reumatismală sau pneumonie, efuzia conţine numeroase granulocite neutrofile

• Procesele inflamatorii acute:– Granulocite neutrofile– Material necrotic

• Procese inflamatorii cronice:– În tbc predomină limfocitele

Procese inflamatorii acute bacteriene şi non-bacteriene

• Bacterian• Caracterizate de prezenţa exudatului

purulent• Conţine

– detritus celular, – granulocite neutrofile (multe

degenerate) – macrofage.– germeni patogeni (evidenţiaţi prin

reacţia Gram)– celulele mezoteliale sunt rar prezente.

• Poate să apară şi pe fondul unui proces tumoral

• Non-bacterian• Exudatul este steril• Celule: neutrofile, limfocite, macrofage,

celule mezoteliale• Apare în: pneumonii virale, infarct

pulmonar, insuficienţă cardiacă

Pleurită cu exudat fibrinos

Celule maligne

• Nuclei măriţi, cu creşterea raportului nucleu/citoplasmă

• Contur neregulat, hipercromi

• Prezenţa microvililor la suprafaţa celulelor vizibile mai ales pe preparatele uscate la temperatura camerei şi nu pe cele fixate în alcool.

Fără fixare în alcool

Preparat fixat în alcool