CEDIA® amfetamin-/ecstasytest För användning vid in-vitro diagnostik

10016417 (3 x 17 ml Indiko Kit) 100104 (kit om 3 x 17 ml) 100103 (kit om 65 ml) 100040 (kit om 495 ml)

Avsedd användningCEDIA® amfetamin-/ecstasytest är en in-vitro diagnostisk medicinsk anordning avsedd för kvalitativ och semikvantitativ testning av amfetamin och ecstasy i humant urin.

Testet ger endast ett preliminärt analytiskt testresultat. En specifikare alternativ kemisk metod måste användas för att få ett bekräftat analytiskt resultat. Gaskromatografi/masspektrometri (GC/MS) är den bekräftande metod som rekommenderas.1 Kliniska överväganden och yrkesmässig bedömning bör tillämpas för alla resultat från drogmissbrukstester, särskilt när preliminära positiva resultat används.

Sammanfattning och förklaring av testetAmfetaminer, amfetaminderivat och ecstasy klassificeras som sympatomimetiska aminer med centralstimulerande aktivitet.2-4 De är psykologiskt och fysiologiskt beroendeframkallande, och de kan bl.a. framkalla effekterna upphetsning, pigghet, eufori, minskad aptit och trötthetskänsla.3,4 Biverkningar vid låga doser är irritabilitet, oro, sömnlöshet, otydlig syn, förhöjt blodtryck och hjärtklappning.3,4 Hos kroniska användare av höga doser kan en psykos, som kan vara omöjlig att skilja från akut schizofreni, utvecklas.3,4

Amfetaminer absorberas snabbt av mag-tarmkanalen och sprids allmänt i kroppen.2,4 Cirka 70  % av en dos elimineras i urin under de första 24 timmarna efter administrering, och, beroende på urinens pH, utsöndras ungefär 30 % av dosen oförändrad och resten som metaboliter. Cirka 62 % av en metamfetamindos elimineras i urin under de första 24 timmarna efter administrering, varav ungefär 43 % av dosen utsöndras oförändrad och resten som metaboliter, inklusive amfetamin.2,4-6 Amfetamin kan fortfarande spåras i urin 3-4 dagar efter administrering.5 MDMA (3,4-metylendioximetamfetamin) är känt för att metaboliseras genom N-demetylation till metylendioximetamfetamin (MDA). Mänsklig metabolism av MDA har inte studerats. Urinkoncentrationer vid dödsfall på upp till 160 mg/l har registrerats och är tecken på att avsevärda mängder av oförändrad drog utsöndras.6

CEDIA amfetamin-/ecstasytest använder rekombinant-DNA-teknik (USA-patent nr 4708929) för att producera ett unikt homogent enzymimmunanalyssystem.7 Testet är baserat på bakterieenzymet -galaktosidas, som genom genteknik har omvandlats till två inaktiva fragment. Dessa fragment återförenas spontant och bildar fullt aktiva enzym som i testformatet klyver ett substrat och genererar en färgförändring som kan mätas spektrofotometriskt.

I testet konkurrerar drog i provet med drog som konjugerats med ett inaktivt fragment av -galaktosidas om antikroppsbindningsplatser. Om drogen finns i provet binder det till antikroppen, och lämnar fragment från det inaktiva enzymet fria att bilda aktivt enzym. Om drogen inte finns i provet binder antikroppen till drogen som konjugerats med det inaktiva fragmentet, vilket förhindrar återförening av inaktiva -galaktosidasfragment och därmed bildas inget aktivt enzym. Mängden aktivt enzym som bildas och den resulterande absorbansförändringen är proportionella mot mängden drog i provet.

Reagenser1 EA-rekonstitutionsbuffert: Innehåller piperazin-N, N-bis [2-etansulfonsyra],

buffertsalter, stabiliseringsmedel och konserveringsmedel. 4,5 mg/l monoklonal antikropp mot MDMA.

1a EA-reagens: Innehåller 0,156 g/l enzymacceptor, 7,081 mg/l monoklonala antikroppar mot d-amfetamin och 7,081 mg/l musmonoklonala antikroppar reaktiva mot d-metamfetamin, buffertsalter, rengöringsmedel och konserveringsmedel.

2 ED-rekonstitutionsbuffert: Innehåller piperazin-N, N-bis [2-etansulfonsyra], buffert, buffertsalter och konserveringsmedel.

2a ED-reagens: Innehåller 7,12 µg/l enzymdonator förenad med d-amfetamin, 11,3  µg/l enzymdonator förenad med d-metamfetamin, 6,0 µg/l enzymdonator förenad med MDMA, 1,67 g/l klorofenol röd- -D-galaktopyranosid, stabiliseringsmedel och konserveringsmedel.

Extra material: Alternativa streckkodsetiketter (endast katalognr. 100104 och 100103. Se analysatorspecifikt tillämpningsblad för bruksanvisning). Tom analysatorflaska för överhällning av EA/ED-lösning (katalognr. 100103). Tom analysatorflaska för överhällning av ED-lösning (endast katalognrnr. 100040).

Extra material som krävs (säljs separat):CEDIA Negativ kalibratorCEDIA Multidrogskalibrator, primära brytpunkter (1 000 ng/ml)CEDIA Multidrogskalibrator, sekundära brytpunkter (500 ng/ml)CEDIA Multidrogskalibrator, medelCEDIA Multidrogskalibrator, högCEDIA Multidrogskontrollset (för brytpunkt 1 000 ng/ml)CEDIA Kontrollset för specialitet (för brytpunkt 500 ng/ml)

Försiktighetsanvisningar och varningar

Reagenserna innehåller natriumazid. Undvik kontakt med hud och slemhinnor. Spola berörda områden med stora mängder vatten. Uppsök omedelbart läkare vid kontakt med ögon eller om produkten förtärts. Natriumazid kan reagera med bly- eller kopparrör och bilda potentiellt explosiva metallazider. Vid kassering av sådan reagens spolas alltid med stora mängder vatten så att inte azid ansamlas. Rengör exponerade metallytor med 10-procentig natriumhydroxid.

Förberedelse och förvaring av reagensSe nedan för förberedelse av lösningar för Hitachi-analysatorer. För alla andra analysatorer hänvisas till analysatorspecifikt tillämpningsblad. Ta ur kitet från kyld förvaring alldeles innan lösningarna ska förberedas.

Förbered lösningarna i följande ordning så att risken för eventuell kontamination minimeras.

R2 Enzymdonorlösning: Anslut flaska 2a (ED-reagens) till flaska 2 (ED-rekonstitutionsbuffert) med hjälp av en av de bifogade adaptrarna. Blanda genom att försiktigt vända upp och ned, och se till att allt frystorkat material från flaska 2a förs över till flaska 2. Undvik skumbildning. Ta loss flaska 2a och adaptern från flaska 2 och kassera. Förslut flaska 2 och låt stå ca 5 minuter i rumstemperatur (15–25 °C). Blanda igen. Anteckna rekonstitutionsdatum på flasketiketten.R1 Enzymacceptorlösning: Anslut flaska 1a (EA-reagens) till flaska 1 (EA-rekonstitutionsbuffert) med hjälp av en av de bifogade adaptrarna. Blanda genom att försiktigt vända upp och ned, och se till att allt frystorkat material från flaska 1a förs över till flaska 1. Undvik skumbildning. Ta loss flaska 1a och adaptern från flaska 1 och kassera. Förslut flaska 1 och låt stå ca 5 minuter i rumstemperatur (15–25 °C). Blanda igen. Anteckna rekonstitutionsdatum på flasketiketten.

Katalognr. 100103 - Hitachi-analysator 717, 911, 912 eller 914: Överför de rekonstituerade reagenserna till motsvarande tom 100 ml flaska R1 eller R2 som levererades med kitet. Hitachi 917 modulärt analytiskt P-system: Använd de rekonstituerade reagenserna utan överföring till flaska. Kassera de tomma 100 ml flaskorna. Katalognr. 100040 - Hitachi-analysator 747/modulärt analytiskt D-system: Använd medföljande tratt för att föra över en del av R2-lösningen till lämpligen märkt tom flaska för R2-lösning som medföljer.

ANMÄRKNING 1: De komponenter som levereras i detta kit är avsedda att användas som en odelad enhet. Blanda inte komponenter från olika partier.ANMÄRKNING 2: Undvik korskontamination av reagenser genom att matcha reagenskorkar med rätt reagensflaska. R2-lösningen ska vara orangegul till färgen. En mörkröd eller purpurröd färg visar att reagensen har kontaminerats och den måste därför kasseras.ANMÄRKNING 3: R1- och R2-lösningarna måste hålla samma temperatur som analysatorns förvaringsfack för reagens innan testet utförs. Se analysatorspecifikt tillämpningsblad för ytterligare upplysningar.ANMÄRKNING 4: För att säkerställa rekonstituerad EA-reagens stabilitet ska den skyddas från utdragen, kontinuerlig, exponering för starkt ljus.

Förvara reagenser vid 2-8 °C. FÅR EJ FRYSAS. För oöppnade komponenters stabilitet hänvisas till lådans eller flaskans etikett för uppgifter om utgångsdatum.

R1-lösning: 45 dagar kyld i analysator eller vid 2-8 °C.R2-lösning: 45 dagar kyld i analysator eller vid 2-8 °C.

Insamling och hantering av preparatSamla in urinprov i rena behållare av glas eller plast. Centrifugera preparat med hög turbiditet före testning. Behandla humant urin som potentiellt infektiöst material. Ta ett nytt prov för testning om utspädning av provet misstänks. Utspädning av urinprov kan påverka testresultaten.

I The Mandatory Guidelines for Federal Workplace Drug Testing Programs; Final Guidelines; Notice rekommenderas det att preparat som inte genomgår ett första test inom 7 dagar från ankomst till laboratoriet placeras i säkra kylenheter.8

TestförfarandeKemiska analysatorer som kan upprätthålla en konstant temperatur, pipettera prover, blanda reagenser, mäta enzymatiska hastigheter och tidsberäkna reaktionen exakt, kan användas för att göra detta test. Tillämpningsblad med specifika instrumentparametrar finns att få från Microgenics, en del av Thermo Fisher Scientific.

Extra streckkodsetiketter för semikvantitativ bestämning medföljer endast kiten om 17 ml och 65 ml. Används för att klistra över varje flasketikett med rätt etikett.

Kvalitetskontroll och kalibrering9

Kvalitativ analysFör kvalitativ analys av prover används multidrogskalibrator, primära brytpunkter eller sekundära brytpunkter (beroende på vald brytpunkt) för att analysera resultaten. Se analysatorspecifikt tillämpningskort.

2

Semikvantitativ analysBrytpunktsprotokoll 500 ng/ml: För semikvantitativ analys av prover används multidrogskalibrator, sekundära brytpunkter, primära brytpunkter, negativ kalibrator och multidrogskalibrator mellan.Brytpunktsprotokoll 1000 ng/ml: För semikvantitativ analys av prover används multidrogskalibrator, primära brytpunkter, negativ kalibrator och multidrogskalibratorer, mellan och hög.

Enligt god laboratoriepraxis bör kontroller köras varje dag patientprover testas och varje gång kalibrering görs. Det rekommenderas att två nivåer av kontroller körs, en 25 % över vald brytpunkt och den andra 25 % under vald brytpunkt. Omkalibrera testet om reagenserna ändrats eller om kontrollresultaten är utanför fastställda gränser. Basera bedömningen av kvalitetskontrollen på erhållna värden för kontrollerna, vilka ska falla inom angivna gränser. Om någon trend eller plötsliga skiftningar i värden upptäcks ska alla driftparametrar ses över. Kontakta teknisk kundtjänst för vidare hjälp. Alla kvalitetskontrollkrav ska utföras i enlighet med lokala, regionala och/eller nationella föreskrifter eller ackrediteringskrav.

Resultat och förväntade värdenKvalitativa resultatMultidrogskalibratorn, de primära eller sekundära brytpunkterna, (innehållande respektive 1 000 ng/ml och 500 ng/ml d-metamfetamin) används som referens vid särskiljandet mellan positiva och negativa prover. Prover som ger ett svarsvärde lika med eller större än kalibratorns svarsvärde betraktas som positiva. Prover som ger ett svarsvärde mindre än kalibratorns svarsvärde betraktas som negativa. Se analysatorspecifikt tillämpningsblad för ytterligare upplysningar.

Semikvantitativa resultatBrytpunktsprotokoll 500 ng/ml: Multidrogskalibratorn, de sekundära brytpunkterna, använda tillsammans med den negativa kalibratorn och multidrogskalibratorn, primära brytpunkter och multidrogskalibrator mellan, kan användas för att uppskatta relativ koncentration av amfetaminer. Se analysatorspecifikt tillämpningsblad för detaljerade upplysningar.

Brytpunktsprotokoll 1000 ng/ml: Multidrogskalibratorn, primära brytpunkter, använda tillsammans med den negativa kalibratorn och multidrogskalibratorer, mellan och höga, kan användas för att uppskatta relativ koncentration av amfetaminer. Se analysatorspecifikt tillämpningsblad för detaljerade upplysningar.

Försiktighet måste iakttas när koncentrationsresultat rapporteras eftersom det finns många andra faktorer som kan påverka resultat för urintest som t.ex. vätskeintag och andra biologiska faktorer.

Begränsningar1. Ett positivt testresultat visar förekomst av amfetaminer; det varken visar eller mäter

intoxikation.2. Andra ämnen och/eller faktorer som inte är listade kan störa testet och orsaka felaktiga

resultat (t.ex. tekniska eller procedurmässiga fel).

Specifika prestandaegenskaperTypiska prestandauppgifter erhållna från Hitachi-analysator 717 visas nedan.10 De resultat som erhålls i ditt laboratorium kan avvika från dessa uppgifter.

PrecisionStudier över uppmätt precision, med färdiga reagenser, kalibratorer och kontroller gav följande resultat med en Hitachi-analysator 717 när riktlinjer för NCCLS-modifierat replikationsexperiment användes.

Kvalitativ (mA/min):

Precision inom körning Total precision

ng/ml 500* 750** 1 000** 1 250** 500* 750** 1 000** 1 250**

n 120 120 120 120 120 120 120 120

x ̄ 353,0 336,1 360,0 385,9 353,0 336,1 360,0 385,9

Standard-avvikelse (SD)

3,0 4,2 4,1 5,2 5,7 6,5 7,0 7,6

% variations-koefficient (CV)

0,9 1,3 1,1 1,4 1,6 1,9 2,0 2,0

* Bestämd med hjälp av brytpunktsprotokoll 500 ng/ml.** Bestämd med hjälp av brytpunktsprotokoll 1 000 ng/ml.

Semikvantitativ (ng/ml):

Precision inom körning Total precision

ng/ml 500* 750** 1 000** 1 250** 500* 750** 1 000** 1 250**

n 120 120 120 120 120 120 120 120

x ̄ 496,5 808,5 1 057,6 1 403,6 496,5 808,6 1 057,6 1 403,6

Standard-avvikelse (SD)

27,0 29,9 51,2 68,7 38,6 52,6 77,3 115,1

% variations-koefficient (CV)

5,4 3,7 4,8 4,9 7,8 6,5 7,3 8,2

* Bestämd med hjälp av brytpunktsprotokoll 500 ng/ml.** Bestämd med hjälp av brytpunktsprotokoll 1 000 ng/ml.

ExakthetUrinprover testades med CEDIA amfetamin-/ecstasytest på Hitachi-analysator 717 med hjälp av GC/MS och kommersiellt tillgängliga CEDIA DAU amfetamintest som referens. Resultaten blev följande:

A. Brytpunkt 500 ng/mlCEDIA (amfetamin/ecstasy)

B. Brytpunkt 1 000 ng/ml CEDIA (amfetamin)

+ - + -

GC/MS+ 158 1 CEDIA

(Amfetamin/ ecstasy)

+ 144 18

- 8 17 - 0 87

GC/MS (ng/ml)* CEDIA test (ng/ml)*%

Överens-stämmelse

Intervall Min Max Positiv Negativ n %

0 0 0 0 5 5 100 %

0 till -50 % CO* 40 207 1 5 6 83 %

-50 % CO till -25 % CO 277 351 3 2 5 40 %

-25 % CO till CO 392 495 4 5 9 56 %

Test av CO 500 500 2 0 2 100 %

CO till +25 % CO 502 575 7 1 8 88 %

+25 % CO till +50 % CO 635 693 3 0 3 100 %

> 50 % CO > 750 - 146 0 146 100 %

* CO = brytpunkt (500 ng/ml som brytpunkt)

SpecificitetNär följande föreningar testades med CEDIA amfetamin-/ecstasytest, brytpunktsprotokoll 1 000 ng/ml, gav de följande resultat för procentuell korsreaktivitet:

Förening KoncentrationTestad (ng/ml)

% Kors-Reaktivitet

d-amfetamin 1 000 104

l-amfetamin 40 000 1,0

d- och l-amfetamin 1 250 88

d- och l-metamfetamin 1 000 77

d-metamfetamin 1 000 100

l-metamfetamin 8 000 18

3,4-metylendioxyamfetamin (MDA) 1 000 116

3,4-metamfetamin (MDMA) 500 196

3,4-metylendioxyetylamfetamin (MDEA) 300 172

N-metylbenzodioxan-zolylbutanamin (MBDB) 900 121

Benzodioxanzolybutanamin (BDB) 1 000 76

Fentermin 25 000 3,3

d- och l-fenylpropanolamin 500 000 0,3

d-pseudoefedrin 160 000 0,9

l-efedrin 250 000 0,5

p-metoxiamfetamin (PMA) 2 000 24

p-metoxi-metamfetamin (PMMA) 500 100

Thermo Fisher Scientific Oy Ratastie 2, P.O. Box 100 01621 Vantaa, Finland Tel: +358-9-329100 Fax: +358-9-32910300

3

CEDIA är ett varumärke registrerat av Roche Diagnostics.

För uppdateringar av bipacksedel gå till:www.thermoscientific.com/diagnostics

Microgenics Corporation46360 Fremont Blvd.Fremont, CA 94538-6406 USAKundtjänst ochteknisk support i USA:1-800-232-3342

Övriga länder:Kontakta din lokala Thermo Fisher Scientific-representant.

Strukturellt orelaterade föreningar testades med CEDIA amfetamin-/ecstasytest, brytpunkts-protokoll 500 ng/ml, och gav ett negativt svar när de testades vid koncentrationerna nedan.

Förening ng/ml Förening ng/ml

Paracetamol 1 000 000 Levotyroxin 100 000

Acetylsalicylsyra 1 000 000 Metadon 1 000 000

Amoxicillin 1 000 000 Morfin 1 000 000

Bensoylekgonin 1 000 000 Nifedipin 50 000

Captopril 1 000 000 Fencyklidin 1 000 000

Klordiazepoxid 250 000 Fenobarbital 1 000 000

Cimetidin 500 000 d-propoxyfen 1 000 000

Kodein 1 000 000 Ranitidin 250 000

Diazepam 100 000 Salicylursyra 1 000 000

Digoxin 1 000 000 Sekobarbital 1 000 000

Enalapril 1 000 000 11-nor-∆9-THC-COOH 10 000

Fluoxetin 500 000 Verapamil 1 000 000

Ibuprofen 1 000 000 Tolmetin 500 000

Inga interferenser observerades från följande ämnen, som lagts till de normala endogena koncentrationerna funna i urin, när de testades med CEDIA amfetamin-/ecstasytest:

Ämne Koncentration Ämne Koncentration

Aceton < 1,0 g/dl Hemoglobin < 0,3 g/dl

Askorbinsyra < 1,5 g/dl Humant serumalbumin < 0,5 g/dl

Kreatinin < 0,5 g/dl Oxalsyra < 0,1 g/dl

Etanol < 1,0 g/dl Riboflavin < 7,5 mg/dl

Galaktos < 10 mg/dl Natriumklorid < 0,6 g/dl

-globulin < 0,5 g/dl Urea < 2,0 g/dl

Glukos < 1,5 g/dl

SensitivitetFör den kvalitativa tillämpningen var detektionsgränsen (LOD) 35 ng/ml och 75 ng/ml för brytpunktsprotokoll 500 ng/ml respektive 1 000 ng/ml.

För den semikvantitativa tillämpningen var LOD 41 ng/ml och 99 ng/ml för brytpunktsprotokoll 500 ng/ml respektive 1 000 ng/ml.

Referenser1. Hawks RL. Analytical methodology. In: Hawks, RL, Chiang, C N, eds. Urine Testing for

Drugs of Abuse. NIDA Research Monograph 1986:73:30-412. Physicians’ Desk Reference. 47th ed. Oradell, NJ: Medical Economics Books; 1993.3. Julien RM. A Primer of Drug Action. 6th ed. New York, NY: WH Freeman & Co; 19924. Miller NS, Gold MS. Amphetamine and its derivatives. In: Giannini AJ, Slaby AE, eds.

Drugs of Abuse. Oradell, NJ: Medical Economics Books; 1989.5. Busto U, Bendayan R, Sellers EM. Clinical pharmacokinetics of nonopiate abused drugs.

1989,16: 1-26.6. Baselt RC, Cravey RH. Disposition of Toxic Drugs and Chemicals in Man. 4th ed. Foster

City, Calif.: Chemical Toxicolog Instititute; 19957. Henderson DR, Friedman SB, Harris JD. et al. CEDIA®, a new homogeneous immunoassay

system. Clin Chem. 1986; 32:1637-16418. Notice of Mandatory Guidelines for Federal Workplace Drug Testing Program: Revised

Mandatory Guidelines. Federal Register. 1994;110 (June 9): 11983 (Revised Guidelines expected in 2002.)

9. Data on traceability are on file at Microgenics Corporation, a part of Thermo Fisher Scientific.

10. Data on file at Microgenics, a part of Thermo Fisher Scientific.

10006576-3_SV2012 07