Click here to load reader

BIOLOGIA VIRUSURILOR. DIAGNOSTICUL DE · PDF fileGenomul viral este constituit dintr-un singur tip de AN ... simptomelor (ex.: hepatita virală B) CULTIVAREA VIRUSURILOR Virusurile

  • View
    229

  • Download
    2

Embed Size (px)

Text of BIOLOGIA VIRUSURILOR. DIAGNOSTICUL DE · PDF fileGenomul viral este constituit dintr-un singur...

  • 12.11.2010

    1

    BIOLOGIA VIRUSURILOR.

    DIAGNOSTICUL DE

    LABORATOR AL VIROZELOR.

    Particularitile virusurilor

    1. Reprezint structuri acelulare cu potenial

    infecios

    2. Dimensiuni de rangul nm (20-400 nm)

    3. Genomul viral este constituit dintr-un singur tip de

    AN (ADN sau ARN)

    4. Sunt lipsite de metabolism propriu, fiind parazii

    obligai intracelulari

    5. Nu cresc i nu se divid, se reproduc n celule vii

    6. Nu pot fi cultivate pe medii artificiale

    7. Rezisten natural la antibiotice

    CLASIFICAREA VIRUSURILOR

    Dup tipul AN (cu genom ARN/ADN)

    Dup dimensiuni (mici 20-50 nm, medii

    50-150 nm, mari peste 150 nm)

    Dup tipul de simetrie a capsidei

    (helicoidal, cubic, mixt)

    Dup compozitia chimic (simple,

    complexe)

    Dup gazd (om, animal, insect, bacterie)

    Dup sensibilitatea n mediul extern,

    substane chimice, etc

    Ordin (-virales)

    Familie (-viridae)

    Subfamilie (-virinae)

    Gen (-virus)

    Specie (Virusul gripal,

    poliomielitic, al hepatitei B,

    etc)

    http://en.wikipedia.org/wiki/Order_%28biology%29http://en.wikipedia.org/wiki/Family_%28biology%29http://en.wikipedia.org/wiki/Family_%28biology%29http://en.wikipedia.org/wiki/Subfamilyhttp://en.wikipedia.org/wiki/Subfamilyhttp://en.wikipedia.org/wiki/Genushttp://en.wikipedia.org/wiki/Genushttp://en.wikipedia.org/wiki/Specieshttp://en.wikipedia.org/wiki/Species
  • 12.11.2010

    2

    Virion unitate structural infecioas a

    virusului

    Viroid ARNm.c., circular, asociat cu boli

    la plante

    Prion protein termostabil infecioas,

    cauzeaz la om boala Kuru, Creutzfeldt-

    Jacob, sindromul Gerstmann-Straussler,

    scrapie la oi

    COMPOZIIA CHIMIC I STRUCTURA

    VIRIONULUI

    Virusurile simple acid nucleic (AN) i

    nveli proteic capsida (ansamblu numit

    nucleocapsid)

    Virusurile complexe nucleocapsid i un

    nveli extern, lipoglicoproteic

    (supercapsid, peplos)

    Acidul Nucleic ADN sau ARN, mono- sau

    bicatenar, liniar, circular sau

    fragmentat.

    ARN monocatenar : ARN+ (caten cu sens,

    funcie de ARNm) sau ARN- (caten

    fr sens, este necesar prezena

    enzimei polimeraza)

    Funcia AN asigurarea replicrii AN i

    expresia genomului pentru sinteza

    proteinelor virale

    Virusuri ADNd.c.: Hepadnaviridae,

    Adenoviridae, Herpesviridae, Poxviridae

    Virusuri ADNm.c.+: Parvoviridae

    Virusuri ARNm.c.+: Picornaviridae,

    Caliciviridae, Togaviridae, Flaviviridae,

    Coronaviridae, Retroviridae

    Virusuri ARNm.c.- : Rhabdoviridae,

    Paramyxoviridae, Orthomyxoviridae,

    Bunyaviridae, Arenaviridae, Filoviridae

    Virusuri ARNd.c. : Reoviridae

  • 12.11.2010

    3

    I: Double-stranded DNA (e.g. Adenoviruses, Herpesviruses, Poxviruses)

    II: Single-stranded (+) sense DNA (e.g. Parvoviruses)

    III: Double-stranded RNA (e.g. Reoviruses)

    IV: Single-stranded (+) sense RNA (e.g. Picornaviruses, Togaviruses)

    V: Single-stranded (-) sense RNA (e.g. Orthomyxoviruses, Rhabdoviruses)

    VI: Single-stranded (+) sense RNA with DNA intermediate in life-cycle (e.g. Retroviruses)

    VII: Double-stranded DNA with RNA intermediate (e.g. Hepadnaviruses)

    Capsida format din uniti proteice, capsomere,

    aranjate simetric.

    1. Simetrie helicoidal capsomerele se fixeaz

    pe catena de AN, form de bastona

    2. Simetrie cubic (icosaedric) capsomerele se

    aranjeaz n jurul AN, formnd un icosaedru

    (poliedru regulat cu 20 fee triunghiulare i 12

    vrfuri), eikos=20

    3. Simetrie mixt (bacteriofagii, poxvirusurile)

    Funcia capsidei protecia AN, rol antigenic,

    adeziune

    http://en.wikipedia.org/wiki/Adenovirushttp://en.wikipedia.org/wiki/Herpesvirushttp://en.wikipedia.org/wiki/Poxvirushttp://en.wikipedia.org/wiki/Parvovirushttp://en.wikipedia.org/wiki/Reovirushttp://en.wikipedia.org/wiki/Picornavirushttp://en.wikipedia.org/wiki/Togavirushttp://en.wikipedia.org/wiki/Orthomyxovirushttp://en.wikipedia.org/wiki/Rhabdovirushttp://en.wikipedia.org/wiki/Retrovirushttp://en.wikipedia.org/wiki/Hepadnavirushttp://rsb.info.nih.gov/nih-image/java/rotator/hsv.html
  • 12.11.2010

    4

    Supercapsida structur glucido-lipido-proteic,

    derivat din membrana celulei gazd. Lipidele

    provin din membrana celular, iar glicoproteinele

    sunt de origine viral (ex.: hemaglutinina,

    neuraminidaza)

    Funcie protecie, antigene de suprafa, adeziune

    Unele virusuri conin enzime polimeraze,

    transcriptaze, etc.

    Aciunea factorilor fizici, chimici

    Virusurile sunt foarte sensibile la cldur, desicare,

    raze UV. Detergenii i solvenii inactiveaz

    virusurile cu supercapsid.

    Pot fi conservate prin liofilizare sau la -80

    C

    REPRODUCEREA VIRUSURILOR

    I ADSORBIA virusului la celula-gazd prin intermediul

    receptorilor specifici (tropism)

    II PENETRAREA virusului n celul

    a) Pinocitoz (viropexis)

    b) Fuziunea membranelor

    c) Translocare

    d) Injectarea AN n citoplasm (bacteriofagii)

    III DECAPSIDAREA ( cu enzime celulare). Din acest

    moment urmeaz faza de eclips.

  • 12.11.2010

    5

    IV BIOSINTEZA (sinteza proteinelor i replicarea AN)

    Are loc n citoplasm (virusuri cu ARN) sau n nucleul

    celulei (virusuri cu ADN)

    Biosinteza virusurilor ADN

    ADNdc transcrierea ARNm replicarea,

    translaia (precoce, tardiv) sinteza proteic

    Biosinteza virusurilor ARN

    ARN+ replicare, translaie sinteza proteic

    ARN- transcriere ARNm replicare, translaie

    sinteza proteic

    Retrovirusuri (ARN+) transcriere ADN- ADNdc

    transcriere ARNm replicare, translaie,

    sinteza pr. (sau integrare n cromosom)

  • 12.11.2010

    6

    RNA VIRUSES THAT DO NOT HAVE A DNA PHASE

    Genome

    RNA-dependent

    RNA polymerase (=transcriptase)

    in virion

    Infectivity of RNA

    Initial event in cell

    RNA + No Infectious Translation

    RNA - Yes Non-infectious Transcription

    RNAd.c. Yes Non-infectious Transcription

    RETROVIRUSES

    Genome RNA-dependent RNA

    polymerase

    (=transcriptase) in virion

    Infectivity of RNA

    Initial event in cell

    RNA + Yes Non-infectious

    Reverse transcription

    V. MORFOGENEZA (asamblarea) i maturizarea virionilor

    Proteinele capsidale particip la formarea nucleocapsidei (n nucleu sau citoplasm) iar glicoproteinele sunt inserate n MCP, substituind proteinele celulare. n aceast faz apar incluziunile virale sau corpusculii elementari.

    VI. ELIBERAREA virionilor (liza celulei, nmugurire, exocitoz). Nr lor poate atinge 100.000 per/celul

    Ciclul reproductiv viral are durata variabil de la cteva ore pn la cteva zile (ex.: 8h poliovirus, 72h citomegalovirus).

    Interferena viral fenomen n care, consecutiv infeciei unei celule cu 2 virusuri, multiplicarea unuia este inhibat (virus interferat / virus interferent)

    http://upload.wikimedia.org/wikipedia/de/4/46/Virus-Budding-001.gif
  • 12.11.2010

    7

  • 12.11.2010

    8

    RELAII VIRUS-CELULA GAZD

    Infecie viral productiv, citocid

    Virusul este infecios iar celula permisiv (receptiv). La nivelul ma/o corespunde infeciilor acute, aparente sau inaparente (grip, rujeol ...)

    Infecii virale persistente

    Celulele infectate supravieuiesc, cu producerea permanent sau intermitent a virusului.

    1. Infecii abortive (cu virioni defectivi) infecia nu se exprim, are loc transformarea celulelor prin proteine virale. Ele devin int pentru efectorii imunitii (macrofage, T-limfocite) n cursul unor infecii cronice (ex.: Panencefalita Sclerozant Subacut (PESS) post-rujeolic)

    2. Infecii integrate (virusuri ADN sau copii de ADN ale

    Retrovirusurilor). Consecine:

    - Transformarea malign a celulei gazd

    - Infecii lente - manifestarea infeciei dup o

    perioad de incubaie ndelungat cu expresia

    integral a genomului viral (ex.: HIV-SIDA)

    - Infecii latente - reactivri ocazionale, repetate ale

    infeciei cu exprimarea integral a informaiei

    genetice virale (ex.: infecia herpetic)

    - Infecii cronice perioade de remisie i acutizare,

    virusul este prezent permanent, chiar n absena

    simptomelor (ex.: hepatita viral B)

    CULTIVAREA VIRUSURILOR

    Virusurile sunt cultivate pentru:

    - Stabilirea diagnosticului etiologic

    - Testarea infeciozitii virusurilor

    - Testarea preparatelor antivirale

    - Producerea vaccinurilor

    SISTEME DE CULTIVARE

    1. Culturi de celule

    2. Ou embrionat de gin

    3. Animale de laborator

    Animalele de laborator se utilizeaz limitat

    (receptivitate selectiv, preexistena

    infeciilor, cost avansat). Se recurge numai

    cnd nu exist alte posibiliti (VHB, HIV,

    Coxsackie, etc). Constituie modele de

    cercetare sau de control al vaccinurilor.

    Animale utilizate curent oriceii albi nou-

    nscui, dar pot fi utilizai obolani, cobai,

    maimue, etc.

    Regulile de lucru cu animalele de laborator

    (selectare, inoculare, examinare) sunt

    identice cu cele din infeciile bacteriene.

    Oul embrionat de gin (5-13 zile) reprezint un

    mediu de celule nedifere

Search related