11/9/2014

1

Antiseptik kulit

Tangan dengan sabun

Lengan tanpa perlakuan

Lengan dengan perlakuan pemberian povidon iodine dan

alkohol 70%

Tangan tanpa perlakuan

Morfologi koloni bakteri

Koloni halus E.coli Vibrio sp. Staphylococcus sp. Salmonela sp. Shigella sp.

Koloni kasar : Bacillus subtilis Koloni menyebar : Proteus sp. Koloni webbing : Bacillus mycoides Koloni mukoid : Klebsiella sp.

11/9/2014

2

1. Staphylococcus epidermidis

2. Staphylococcus citreus

3. Staphylococcus aureus

4. Serratia marcescens

5. Chromobacterium violaceum

6. Pseudomonas aeruginosa

1 2 3 4 5 6

Koloni yang berpigmentasi

Pewarnaan gram:Gram positif

streptococci dalam rantai pendek

Streptococcus sp.

11/9/2014

3

5

Alpha-haemolytic Streptococci

Koloni dikelilingi oleh area dimana terjadi hemolisis parsial

dan warna hijau kecoklatan (hemoglobin yang tereduksi)

Sangat umum pada kulit dan sitem integumen, berperan

sebagai flora normal, S.viridans

Tidak dipengaruhi oleh lempeng / tablet optochin

6

Streptococcus pneumoniae (Pneumococcus)

Tes optosin (ethyl hydrocupreine) merupakan tes presumptif

(dugaan) utk mengidentifikasi S.pneumoniae yang tidak

resisten terhadap optosin, sebuah wilayah hambatan akan

terbentuk disekitar lempeng dimana bakteri telah lisis

Koloninya sensitif terhadap 10 g optochin

Zona ini biasanya >14mm

11/9/2014

4

7

Beta-haemolytic Streptococci (1)

Kolonisasi dikelilingi oleh wilayah dimana hemolisis sempurna dengan

dekolorisasi hemoglobin

Grup A adalah - haemolytic Streptococci yang dikenal sebagai S.pyogenes

yang sensitif terhadap lampeng/tablet basitrasin, sehingga area hambtan

akan terbentuk di sekitar lempeng

8

Beta-haemolytic Streptococci (2)

konfirmasi serologik masing2 kelompok diperoleh dengan

menggunakan antiserum spesifik : grup -hemolytic

streptococci lancefield

11/9/2014

5

9

Beta-haemolytic Streptococci (3)

pengelompokkan berdasarkan antigen karbohidrat

permukaan

Streptococcus pyogenesGroup-A

Streptococcus -haemolyticNon Group-A

10

Staphylococcus aureus

Pewarnaan Gram:

Kokus gram positif dengan ukuran seragam, yang secara

khusus dalam kelompok tetapi juga dapat berbentuk

tunggal dan berpasangan

11/9/2014

6

11

Staphylococcus aureus

Menghasilkan warna kuning hingga krim atau

terkadang putih pada agar darah

12

Staphylococcus epidermidis

Koloni biasanya bersifat non-haemolytic

11/9/2014

7

13

Mannitol Salt Agar (MSA) (1)

MSA adalah medium indikator yang selektif, mengandung

1%mannitol, 7,5% NaCl dan 0,0025% fenol merah dalam

agar nutrien

14

Mannitol Salt Agar (MSA) (2)

Sebagian besar strain S.aureus menfermentasikan mannitol

dan terbentuk koloni yang dikelilingi oleh zona kuning

karena produksi asam, sementara staphylococcus lain

gagal menfermentasikan manitol dan terbentuk koloni

dengan zona merah atau ungu

11/9/2014

8

MRSA

u/ mengenali staphylococci yang resisten terhadap metisilin, tes lempeng cefoxitin lebih digunakan dalam mendeteksi resistensi dibandingkan penggunaan lempeng metisilin, oxasilin, atau nafsilin

Lempeng cefoxitin 30 g harus digunakan untuk mengetes resistensi metisilin/oxasilin

Area batasan lempeng cefoxitin terbentuk setelah inkubasi semalaman

Tes katalase

Tes ini digunakan untuk membedakan bakteri-bakteri yang memproduksi enzim katalase, seperti Staphylococci, dari bakteri streptococci yang tidak memproduksi katalase

Prinsip :

katalase berperan sebagai katalisator yang memecah hidrogen peroksida menjadi air dan oksigen

11/9/2014

9

Tes katalase Organisme yg dites untuk menilai produksi katalase dengan

memasukkannya ke dalam hidrogen peroksida (3% H2O2). Gelembung oksigen dihasilkan jika organisme merupakan penghasil katalase.

Kultur tidak boleh lebih dari 24 jam

Staphylococcus sp.Catalase positive

Streptococcus sp.Catalase negative

Tes koagulase untuk Staphylococci (1)

Tes ini digunakan untuk membedakan Staphylococcus aureus yang memproduksi enzim koagulase dari Staphylococcus epidermidis dan Staphylococcus saphrophyticus yang tidak memproduksi koagulase

Prinsip : Strain S.aureus yang memproduksi koagulase membentuk

gumpalan ketika tumbuh di dalam plasma. Koagulase bebas mengubah plasma sitrat menjadi gel yang keras dan ikatan koagulase (faktor penggumpal) yang mengaglutinisasi kokus

Koagulase bebas dideteksi dengan hadirnya gumpalan fibrin dalam tabung tes

11/9/2014

10

19

Coagulase Test for Staphylococci (2)

Staphylococcus aureusCoagulase positive

Staphylococcus epidermidisCoagulase negative

20

Coagulase Test for Staphylococci (3)

11/9/2014

11

Kerentanan terhadap antibiotik

Metode langsung mengukur aktivitas satu atau lebih agen antimikrobial melawan bakteri yang diisolasi

Metode mendeteksi kehadiran mekanisme resistensi spesifik dalam isolasi bakteri

Metode khusus mengukur interaksi antimikroba-organisme yg kompleks

CLSI : komponen yang distandarisasi dan dikontrol :

Ukuran inokulum bakterial Medium pertumbuhan (lebih sering

menggunakan basis Mueller-Hinton) pH, konsentras kation, darah dan serum

supplemen, thymidine content

Lingkungan inkubasi Suhu inkubasi Lama inkubasi Konsentrasi antimikroba yang diuji

11/9/2014

12

Inokulasi dan inkubasi

Inokulasi menggunakan kapas usap yang telah dimasukkan ke dalam suspensi bakterial (0,5 Mc Farland = 1,5 x 108 CFU/ml)

Dalam 15 menit inokulasi, lempeng diletakkan dan wadah dibalikkan utk inkubasi utk menghindarkan jumlah kelembaban

Utk kebanyakan MH, inkubasi pada suhu 35oC dalam udara, CO2 utk bakteri tertentu

Masa inkubasi : 18-24 jam

Dispenser disc

11/9/2014

13

Reading the results NCCLS

Mueller Hinton Agar

Blood Agar

26.Membaca dan menginterpretasikan hasil

piring diperiksa : - untuk mengkonfirmasi bahwa sebuah halaman konfluen (=a confluent lawn?) dari pertumbuhan yang bagus telah diperoleh (kyak ni gak bisa diterjemahin deh.. :p)- untuk kemurnian

gunakan latar belakang gelap dan cahaya yang dipantulkan, piring terletak sedemikian rupa sehingga penggaris (ruler) atau caliper dapat digunakan untuk mengukur diameter zona inhibisi

Swarming(=dipenuhi?) organisms : the swarming haze(=kabut?) diabaikan dan zona diukur pada titik di mana pertumbuhan terhambat jelas

11/9/2014

14

27.Definisi Kategori Interpretasi Kerentanan Pengujian (CLSI)

Susceptible (rentan)Agen antimikroba mungkin merupakan pilihan yang tepat untuk mengobati infeksi yang disebabkan oleh bakteri isolasi yg diuji

28

Intermediate, kemungkinan: Utilitas potensial dari agen antimikroba di situs

tubuh dimana ia mungkin terkonsentrasi (misalnya Infeksi Sluran Kemih) atau jika digunakan obat dgn konsentrasi tinggi.

Agen (antimikroba) mungkin masih efektif terhadap bakteri isolasi yg diuji tapi mungkin kurang dibandingkan bakteri yg sudah rentan.

Sebagai margin keamanan interpretatif untuk mencegah perubahan yang relatif kecil dari hasil tes dari yang mengarah ke perubahan besar dalam kategori interpretatif.

11/9/2014

15

29

Resisten:Antimikroba mungkin bukan pilihan yang tepat untuk mengobati infeksi yang disebabkan oleh bakteri isolasi yang diuji, baik karena organisme tidak dihambat oleh serum-level yg dicapai obat atau karena hasil tes yang sangat berkorelasi dengan mekanisme resistensi yang membuat keberhasilan pengobatan diragukan

30

30. Mycobacterium tuberculosis

Microscopy :

Tidak berspora, tidak-

berkapsul, lurus atau

sedikit melengkung,

batang

Organisme

mempertahankan warna

merah dn merupakan

Acid Fast Bacteria

(AFB)

11/9/2014

16

31

Medium Lowenstein-

Jensen

Digunakan untuk

pertumbuhan

Mycobacterium

tuberculosis di dalam botol

Mc-cartney

32

Mycobacterium tuberculocisDi Lowenstein-Jensen Agar

M. tuberculosismemproduksi koloni

yang terangkat , kering, krim yang

berwarna kuning tua

11/9/2014

17

33

Mycobacterium leprae

Microscopy :

Basil merah padat atau

embun-embun (manik-

manik) , terfragmentasi,

bentuk granular, terjadi

sendiri atau di massa

globi (AFB)

Candida albicans

di Sabourauds agar

Morfologi Koloni:

Koloni bertumbuh cepat, halus, lunak(lembut), berkilau, dan

memiliki warna yang lembut, disertai bau ragi / jamur yang khas

11/9/2014

18

Candida albicans

dengan pewarnaan gram

Karakteristik mikroskopik :

Sel-sel Jamur Gram positif; 4-6 m, berdinding tipis , selnya

oval

Direproduksi oleh tunas

Candida albicansDengan pewarnaan Lactophenol cotton Blue (LPCB

Karakteristik mikroskop :

Sel-sel jamur, Blastospora yang memiliki spora yang tebal

Sel tunas ( sel budding)

Blastospora

11/9/2014

19

Aspergillus sp.

di Sabourauds agar

Morfologi koloni:

Koloni mempunyai penampilan yang kabur atau berbulu yang mana adalah

miselium.

Microsporum gypseum

Macroconidia

Microconidia

Karakteristik/ciri mikroskopik:Macroconidia berlimpah, berbentuk gelendong dengan ujung bulat (tidak runcing

seperti pada M. canis); Dinding cukup tebal, echinulate, terdiri dari 4-6 sel Microconidia yang berkelompok dan biasanya sesil (melekat pada dasar/sebagai

lawan dari menggantung atau bertangkai) di sepanjang hifa

11/9/2014

20

Microsporum canis

Microconidia

Macroconidia dengan ujung melengkung atau bengkok

Karakteristik/ciri mikroskopis:Macroconidia berlimpah, besar, terdiri dari 6-15 sel, berbentuk gelendong/spindel, dengan ujung melengkung atau bengkok dan dinding tebal dan kasar (verrucose)Microconidia yang jarang, berbentuk club, berdinding halus dan biasanya sesil di sepanjang hifa

Trichophyton mentagrophytes

Macroconidia

Microconidia

Hifa spiral yang melingkar

Karakteristik/ciri Mikroskopis :

Macroconidia adalah berbentuk seperti cerutu dan berdinding tipis, memiliki keterikatan yang sempit dengan hifa, dan mengandung 1-6 sel

Microconidia dalam kultur tepung sangat bulat dan berkerumun di cabang, konidiofor atau, dalam strain bulu, lebih kecil, lebih sedikit jumlahnya, dan berbentuk air mata

Hifa spiral yang melingkar sering terlihat

11/9/2014

21

Epidermophyton floccosum

Karakteristik/ciri Mikroskopis :Macroconidia yang halus, tipis-sampai sedikit berdinding tebal, dan berbentuk seperti pemukul/pentungan dengan ujung bundar, berisi 2-6 sel, dan ditemukan sendiri-sendiri atau dalam kelompok.Tidak ada Microconidia yang diproduksiHifa bersepta (memiliki sekat-sekat pemisah)

Macroconidia

Trichophyton rubrum

Karakteristik/ciri Mikroskopis :

Macroconidia sempit dan berdinding tipis, dengan sisi yang paralel dan 4-10 sel. Mereka mungkin berlimpah, langka atau tidak ada

Microconidia yang berbentuk air mata sangat tipis, langka, berkelompok dan biasanya terbentuk sendiri sepanjang sisi hifa

Hifa bersepta

Macroconidia

Microconidia

11/9/2014

22

Malassezia furfur

Pemeriksaan mikroskopis langsung:

kelupasan/kerokan kulit menunjukkan bentuk bulat, tunas sel-sel ragi berdiameter sampai 8 m, bersama dengan fragmen hifa yang kadang-kadang bercabang dengan

panjang bervariasi.Pemeriksaan langsung dengan mengerok kulit yang terinfeksi, kalium hidroksida 10-20%