BACTERIASREPLICACION

INTRACELULARREPLICACION

EXTRACELULAR

Neumococo Mycobacterium tuberculosis

BACTERIAS

Gram negativasGram positivas

Replicación de los virus

VIRUS

Herpes simplex

Parásitos

Helmintos Protozoos

Taenia Tripanosoma Crusi

Hongos

Histoplasma capsulatum

Trichophyton

Respuesta Inmune

Innata Adaptativa

• Inmediata (horas)

• Menos específica

• Lenta (días)

• Más específica

Redundancia y especialización

Respuesta inmune innata

Adherencia al epitelio Penetración sub- epitelial Infección local de tejidos

Flora Normal

Factores químicos locales (ácidos grasos antibacterianos, lisozima, transferrina, lactoferrina, defensinas, etc)

Factores físicos (descamación, secreciones, oscilaciones ciliares, movimiento peristáltico, etc)

Fagocitos (especialmente a nivel alveolar)

Péptidos y proteínas antibacterianas

Fagocitos

Células T

Células fagocíticas (neutrófilos, macrófagos, dendríticas)

Mastocitos

Células NK

Complemento

Protección contra la infección

Respuesta inflamatoria aguda

1-ACTIVACION DEL

COMPLEMENTOVIA CLASICA VIA LECTINAS VIA ALTERNA

Complejo Ag-ACUnión de la lectina de unión a manosa (MBP) a carbohidratos ricos en manosa de la superficie de microorganismos

SUPERFICIE DEL

MICROORGANISMO

MEDIADORES INFLAMATORIOS

RECLUTAMIENTO FAGOCITOS

Remoción complejos ines.

MBP

C3a,C5a

B,D,PC3

C3b

ComponentesTerminalesC5b, C6, C7,

C8 y C9

OPSONIZACION

REMOCION DE MICROORGANISMOS

COMPLEJO ATAQUE LITICO

C3 CONVERTASA

COMPLEMENTO

INFLAMACION OPSONIZACION

CITOTOXICIDAD POTENCIACION DE LA RESPUESTA B

C3b

C5-C9C3bi y productos degradación

C3aC5a

Flujo sanguíneo

El desplazamiento (rolling) celular sobre la superficie del endotelio vascular, se debe a la débil unión de las selectinas

Adhesion y rolling Unión estable Diapédesis Migración

Quimoquinas (IL-8)

RcIL-8IL-8

(Activación de integrinas) (A favor de gradiente de quimioatractantes)

S-Lex

E-Selectin

ICAM-1

Mac-1

Cascada de extravasación leucocitaria

2-ACTIVACION DE CÉLULAS DE LA INMUNIDAD INNATA

(MACRÓFAGOS, NEUTRÓFILOS)

Los RRP (receptores de reconocimiento de patrones) reconocen PMAP (patrones moleculares asociados a

patógenos)

Características de los PMAPCaracterísticas de los PMAP

son patrimonio de los patógenos pero no de sus huéspedes

son esenciales para la sobrevida o patogenicidad del microorganismo

son estructuras invariantes compartidas por clases enteras de patógenos (conservadas evolutivamente)

Ejemplos de PMAPEjemplos de PMAP LPS

Peptidoglicano

Acido lipoteicoico

manosa de oligosacáridos microbianos

DNA conteniendo motivos CpG no metilados

RNA doble cadena

Los RRP mejor estudiados son los Receptores Tipo Toll (TLR)

El macrófago destruye al microorganismo por mecanismos dependientes e independientes del

oxígeno

1- Reconocimiento del patógeno.

2- Fagocitosis.

3- Destrucción del patógeno por mecanismos microbicidas:

Dependientes del oxígeno (O2-, H2O2, OH-, 1O2, hipohalitos,

cloraminas, etc.)

Independientes del oxígeno (Enzimas lisosomales, péptidos anti-microbianos como defensinas, catelicidinas, BPI, etc.)

Citoquinas Quimioatractantes

IL-1, IL-6, TNF IL-12, IL-18 IL-8 LTB4

• Aumento de expresión de moléculas de adhesión

Extravasación leucocitaria

• Aumento de la permeabilidad vascular

Incrementado ingreso de componentes del

complementos, Igs, proteínas de fase aguda

Drenaje incrementado a los ganglios linfáticos

• Activación de células NK

• Reclutamiento de neutrófilos al foco

inflamatorio

Efectos localesEfectos locales

El macrófago activado por los microorganismos secreta citoquinas y quimioatractantes

IL-1, IL-6, TNF IL-12, IL-18

Activación de células NK

MEDULA OSEA

HIGADO

HIPOTALAMO

Síntesis de Proteínas de Fase Aguda

Movilización de neutrófilos

Aumento de la temperatura corporal

Inducción de la diferenciación de células T CD4 al

fenotipo TH1

Respuesta de Respuesta de fase agudafase aguda

El macrófago activado por los microorganismos secreta citoquinas que también ejercen efectos

sistémicos

Efectos sistémicosEfectos sistémicos

Cinética de la respuesta inmuneCinética de la respuesta inmune

IFN TNFIL-12

Células NK

Células T citotóxicas

Anticuerpos

Carga viral

Días post-infección

3- Activación de células NK durante procesos infecciosos: IFN-, IFN- e IFN-

Macrófago

Células NK

BacteriasProductos bacterianos

IFN-, IFN-

IFN-

IL-18

IL-15

IL-12

Célula infectadacon virus

LPS

Efectivo frente a bacterias intracelulares

Funciones conocidas de las células NK

Actividad anti-tumoral y anti-viral (citotoxicidad mediada por receptores NK y secreción de IFN-)

Inmunidad contra infecciones por bacterias y parásitos intracelulares (activación de macrófagos por secreción de IFN-)

CCDA: citotoxicidad celular dependiente de Ac (receptores para fracción constante de Ac)

Regulación de la respuesta inmune a través de un diálogo recíproco con CDs y secreción de citoquinas

La lógica del sistema inmune y las células NK

“lo microbiano no-propio” RRPs

“lo propio ausente” NKRs“lo propio alterado/inducido”

RECEPTORES DE LAS CÉLULAS NK

(NKRs):

KIRs, NKG2, etc.

UN PATÓGENO PODRÁ TRANSFORMAR UNA

CÉLULA DEL HUÉSPED EN BLANCO

POTENCIAL DE LAS CÉLULAS NK POR DOS

MECANISMOS:

Inmunidad Innata  Inmunidad Adaptativa

Inmediata  

Lenta

No es clonal 

Es clonal

Reconoce motivos conservados: RRP pesentes en

la línea germinal  

Antígeno-específica: TCR y BCR generados por

reordenamientos génicos

No genera memoria Genera memoria

INTERACCION 

Diferencias entre inmunidad innata y adaptativa

Diferenciación de la respuesta adaptativa

PROCESAMIENTO DE ANTÍGENOS Y SU

PRESENTACIÓN A LOS LINFOCITOS T

Células Dendrítica

s

Macrófagos Linfocitos B

Células Presentadoras de

Antígenos

El TCR reconocen tanto el MHC como el peptido

Linfocito T

CPA

¿cómo llega el péptido hasta este sitio?

1. Vía endógena o biosintética

2. Vía endocítica

péptidos presentados por

CMH de clase I a LT CD8+

péptidos presentados por

CMH de clase II a LT CD4+

Vía endógena o biosintética

Vía endocítica

Clase I Clase II

Complejo Mayor de Histocompatibilidad

LT citotoxicos

(CD8+)

LT helpers (CD4+)

En todas las células del organismos

En células pesentador

as de antígeno

Características del MHC

POLIMORFISMO POLIGENISMO

Tipo de patógenos

citoplasmático Intravesicular Extracelular

Sitio de degradación

citosolVesículas

endocíticasVesículas

endocíticas

Unido a Clase I Clase II Clase II

Presentado a LT citotóxico LT helper LT helper

Ejemplos virus MicobacteriasHongos,

bacterias

LINFOCITOS T

ONTOGENIA,

MECANISMOS DE

ACTIVACIÓN Y FUNCIONES

Los timocitos generan su receptor antigénico (TCR) por recombinación

somática

SELECCIÓN NEGATIVA

SELECCIÓN POSITIVA

Ingresa al ganglio por las

HEV

Ingresa al endotelio activado de un tejido

inflamado

Cambios en el patrón de expresión de moléculas de adhesión inducidos a consecuencia de la

activación T

Linfocito T CD8+ naive

Linfocito T CD4+ naive

Linfocito T CD8+ citotóxico

Linfocito Th1Linfocito Th2Linfocito Th17Linfocito Treg

Linfocito B naive

Plasmocito secretor de Ac

ACTIVACION

Weaver y col., 2007, Annu. Rev. Immunol

Perfil Th1 y activación del macrófago

Weaver y col., 2007, Annu. Rev. Immunol

LB

Weaver y col., 2007, Annu. Rev. Immunol

Th17

Paradigma Th1/Th2

• El camino de diferenciación esta determinado por el patrón de citocinas presente en el ganglio linfático durante la activación, el cual depende de las señales que recibió la CD en el tejido infectado a través de sus RRPs.• Los linfocitos Th1 y Th2 secretan diferentes citocinas las cuales marcan el perfil completo de la respuesta inmune que se montara.

Respuesta celular

Th1

Respuesta humoral

Th2

Activación de linfocitos T CD8+

Colaboración de LT CD4 en la activación de LT CD8

LINFOCITOS B

ONTOGENIA,

MECANISMOS DE

ACTIVACIÓN Y FUNCIONES

Recombinación somática de los genes de inmunoglobulinas

(médula ósea)

IgMIgDIgGIgEIgA

INDUCCIÓN DE TOLERANCIA CENTRAL DE LINFOCITOS B (médula

ósea)

ZONA PARACORTICAL

Señal 1

Señal 2

Funciones de los anticuerpos

Activación de complemento

Degranulación de mastocitos

Estimulación de ADCC en neutrófilos

Transporte de IgA a través de mucosas

Homeostasis Homeostasis

del sistema del sistema

inmuneinmuneInducción de tolerancia

Central Periférica

Regulación post-

activación

Inducción de anergia clonal de linfocitos T

Inducción de anergia clonal de linfocitos B

Células T regulatorias

Apoptosis inducida por activación

Resolución del proceso inflamatorio agudo

CTLA-4 en el control de la expansión clonal T

LT CD8+ citotóxico

LT CD4+ Th1

Plasmocitos Secreción de Ac específicos contra el agente patógeno

LT CD4+ Th2

LT CD4+ Treg

LT CD4+ Th17

Apoptosis de células infectadas

Colaboración con macrófagos y LT CD8+

Colaboración con LB

Regulación de la respuesta inmune

Inmunidad antiparasitaria?, autoinmunidad?

FUNCIONES EFECTORAS

Hepatitis Autoinmune Hepatitis Autoinmune Pediátrica (HAIp) o Adulta Pediátrica (HAIp) o Adulta

(HAIa) (HAIa)

Las manifestaciones autoinmunes extrahepáticas son más frecuentes en HAIa.

La HAIp tiene una evolución más severa a pesar de emplearse dosis mayores de inmunosupresores.

La HAIp se asocia con HLA DRB1*1301 y DRB1*03. La HAIa con HLA DRB1*03 y DRB1*04.

Presentan características serológicas e histológicas similares

El infiltrado portal predominante de LT CD4+, junto con la asociación con el HLA de clase II, es indicativo de la participación de estos linfocitos en la

patogénesis de la HAIp y la HAIa

Definir el patrón de citocinas secretadas por las células CD4+ en

el hígado de pacientes con Hepatitis Autoinmune tipo I.

Objetivo: Objetivo:

Expresión de citocinas Th1 y Th2 en el hígado de pacientes HAIp y HAIa: INF-

e IL-4

** p<0.01 y *** p<0.001 en comparación con los controles sanos; # p<0.05 en comparación con los HAIp (test U de Mann-Witney)

***

***

**#

(n=9)

(n=11)

(n=3)

(n=11)

(n=7)(n=3)

RT-PCR-Southern blot

La IL-12 juega un papel central en la diferenciación

hacia LTh1La IL-12 es un heterodímero formado por las subunidades p35 y p40, reguladas independientemente.

El receptor de IL-12 está constituido por 2 subunidades: IL-12R1 e IL-12R2. La IL-12R2 se induce con la diferenciación hacia LTh1.

La IL-18 colabora con la IL-12 en la inducción de las respuestas Th1 y en la secreción de IFN-.

El IFN-es la principal citocina efectora de las respuestas Th1.

Sobreexpresión de otras citocinas Th1 en el hígado de HAIp: IL-12p40, IL-12R2

e IL-18

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11

CSHAIp

40 Kda-

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11

CSHAIp

24 Kda-18 Kda-

** p<0.01 pacientes HAIp vs. controles sanos (test U de Mann-Witney)

**

**

**

(n=5)(n=5)

(n=5)(n=5)

(n=11)

(n=6)

Western blot IL-12p40

Western blot IL-18

RT-PCR-Southern blot

Expresión de otra citocina Th2 en el hígado de HAIp: IL-10

(n=8)

(n=8)

RT-PCR-Southern blot

Estos resultados sugieren que la IL-10 no estaría implicada en la

patogénesis de la HAI

El análisis del polimorfismo de IL-10, tampoco mostró

diferencias entre pacientes y controles

El aumento de la citocina Th2 IL-4 no se acompaña de IL-10.

Sin embargo, se encontró un incremento de la cadena del TCR

V24 en estos pacientes.

La IL-4 podría provenir de linfocitos NKT V24+

Transcriptos Predominantes en Transcriptos Predominantes en

HAIpHAIp Mayor expresión de moléculas asociadas a

respuestas Th1 en HAIp respecto del hígado control:

Estos resultados confirman la

diferenciación Th1 local

• IFN-

• IL-12p40

• IL-12R2

• IL-18